Name: Serebral arterler patlama kaynaklı Neurotrauma etkilerini basınçlı kemirgen orta (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-04-01T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 21 s
Description: Öğrenin patlayıcı beyin travması sonrası serebral arter reaktivitesini basınçlı kemirgen orta serebral arter segmentleri kullanarak değerlendirme yöntemini. Bu protokol vasküler hasar mekanizmalarını anlamaya ve tedavi stratejileri geliştirmeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Çalışmalar translasyonel travmatik beyin hasarı araştırma ve Ödülü W81XWH-08-2-0132 ABD Ordusu tıbbi araştırma ve malzeme komut - savunma için Moody Project tarafından desteklenen bir ekibin parçası olarak tamamlanmıştır.

Tüm deneysel protokoller kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi (IACUC) Texas Tıp Şubesi, ilişki değerlendirmesi için üniversite tarafından kabul edildi ve laboratuvar hayvan bakımı (AAALAC) akreditasyonu tesis akredite.
1. hayvan hazırlık ABS patlama zarar görme
<ol><li>Mekanik kemirgen birim solunum cihazına açın ve nefes hızı 40-45 nefes min başına arasında ayarlayın.</li>
	<li>Anahtarı termostatik kontrollü ısınma battaniye ON ve mavi bir yastık üzerine bant.</li>
	<li>Havalandırma hortumu vantilatöre bağlamak.</li>
	<li>Toplamak endotrakeal entübasyon kızak, laringoskop, uzun pikap cımbız, stylet, endotrakeal tüp ve bir pamuklu çubukla ile 0,05 mL % 1'lik lidokain HCl. Düzenle mavi panelindeki batırılmış.</li>
	<li>Kemirgen anestezik "kabarcık" odası, havalandırma, hava odası ve isoflurane odası hortumlar güvenli bir şekilde bağlı ve onların anılan sıraya göre fiş veya soket bağlı emin olun. Anestezik kabarcık odası kelepçe açık olmalıdır; Havalandırma kelepçesi KAPATILMALIDIR.</li>
	<li>Hava odası, 2 L/dak ve oksijen 1 L/dk için düğmeyi Oda havası için düğmeyi ayarlayın.</li>
	<li>Üzerinde isoflurane açın ve topuzu ses karışımı % 4'ü için ayarlayın.</li>
	<li>Bir sayacı başlatmak ve anestezik kabarcık Odası 4-6 min için bir genç yetişkin (≈3 aylık), erkek Sprague-Dawley rat (350-400 g) yer.</li>
	<li>2 dk işareti olarak tartmak iri fare.</li>
	<li>Fare tam olarak hafifçe arka pençe parmak pinching tarafından anestezi onaylayın. Yok pençe çekilme gözlem yapılırsa, Oda havası azaltmak ve topuzu 1 L/dak, oksijen 0,4 L/dak ve isoflurane birim karışımın % 2 olarak ayarlayın.</li>
	<li>Rektal telethermometer sıcaklık monitörü çevir.</li>
	<li>Solunum için kelepçe açın ve anestezik kabarcık odası için kelepçe kapatın.</li>
	<li>Sıçan anestezik kabarcık odası ve endotrakeal entübasyon kızak konumuna kaldırın.</li>
	<li>Sıçan Tüp takacağım. Laringoskop hayvanın ağzına, dil altından, konumlandırmak için uzun pikap cımbız çubukla lidokain batırılmış pamuk çubukla ipucu boyunca boğaz içinde kullanın ve endotrakeal tüp fare Trakea içeren stylet yavaşça yerleştirin.</li>
	<li>Bir kez tüp, endotrakeal tüp dış sonuna havalandırma hortumu ucunu bağlayın ve gözlemlemek ve fare sürekli ve zorlanmadan nefes onaylayın.</li>
	<li>Endotrakeal tüp yer dikkat çekici dil düğüm ücretsiz içine aşağı bağla.</li>
	<li>Rektal telethermometer sonda için beyaz vazelin uygulamak ve kuyruk altında doğrudan ekleyebilirsiniz.</li>
	<li>Numune odasından ABS numune tepsisini çıkarın ve tepsi üzerinde fare yerleşim önce ısınma için ısı lamba altına yerleştirin.</li>
	<li>Sıçan kafa derisi başlangıç gözleri yukarıda ve aşağı üst tıraş kulaklar arasında.</li>
	<li>Standart boyutlu köpük kulak tıkacı makas ile aynı yarım kesilmiş. Fişi Bankası Merkezi'nde başlatmak ve düz yuvarlak uç kadar kesti. İlgili kişi kulak zarı ile yapılana kadar her kulak ucu kulak kanalı boyunca ilk yarıya bir parça yerleştirin.</li>
	<li>Rektal sıcaklık izlemek. 37 ° C sıcaklık ulaşıldığında, ABS numune tepsisine zengin olmaya hazır bir faredir.</li>
	<li>ABS numune tepsi üzerine fare güvenli. Endotrakeal tüp sizden vantilatör hortum çıkarın ve hızlı bir şekilde ama yumuşak fare tepsiyi hafifçe kafa tutucu açılış ve lastik yaka başından yol gösterici, üst kısmına kaydırın. Havalandırma hortumu endotrakeal tüpün içine geri yeniden takın kontrol güvenli bir şekilde ama değil emin olmak için lastik yaka sıkıca boynuna ve farenin yatay eğilimli konumda (şekil 3) yatıyor doğrulayın.</li>
	<li>İsoflurane ve endotrakeal tüp sizden vantilatör hortum çıkarın.</li>
	<li>Kilit ve imzalat sıçan ABS numune odasına içeren ABS numune tepsi güvenli.</li>
	<li>Yavaşça çimdik hind her 3 uzun cımbız kullanarak ayak parmakları pençe bir çekilme refleks yanıt elde edildi kadar s.</li>
</ol>2. ABS patlama cihazı hazırlama ve patlama-Tby indüksiyon
Not: ABS fare yüklendikten ve numune odasına güvenli sonra patlama yaralanma yönetim hakkı için hazır yani protokol adımlar 2,1-2,10 genellikle adımları 1.1-1,22 aynı anda yerine getirilir.
<ol><li>Hidrolik el pompası (şekil 4A) düğmesi (şekil 4B) sürücü odasından kaçmak için ve onun mührü odasından gevşetmek için herhangi bir kalıntı sıkışmış hava almak için izin vermek için gevşetin.</li>
	<li>Sürücü odası çevreleyen tüm iş parçacığı çubuklar (şekil 4D) (şekil 4C) kap fındık gevşetmek ve odası soldaki ve genişleme Odası (şekil 4E) uzak kaydırın.</li>
	<li>İki tüm iş parçacığı çubuklar ve onların karşılık gelen kap fındık sürücü arasında mylar adet yerleşim için izin vermek için sürücü odası ve genişleme odası üst kısmında bulunan tamamen kaldırın.</li>
	<li>Yığın ve bant üst kenarı dört ön kesim boyunca birlikte ve önceden ölçülmüş (30 cm uzunluk, 20 cm genişlik, 0,004 inç kalın) 2,54 cm biteviye-in maskeleme bandı kullanarak mylar sayfaları (oluşturan bir mylar ' membran'). İkinci bir parça bant kullanarak, güvenli bir şekilde genişleme odası ve açılış sürücü ve genişleme chambers (şekil 4F) arasında merkezi üzerinden mylar membran üst kenarını teyp.</li>
	<li>Mylar membran karşı sürücü odası odası çevreleyen tüm kap fındık odası ve el sıkma üstündeki iki tüm iş parçacığı çubuk değiştirerek güvenli.</li>
	<li>Hidrolik el pompası blok ve sürücü odası kadar karşı Aksesuar çelik blok güvenli bir şekilde uygun yerleştirmek.</li>
	<li>Hidrolik el pompası topuzu sıkın ve sürücü odası hiçbir sızıntı ile basınçlı hidrolik ölçüm üzerinde sabit basınç eşik gözlemleyerek kalır onaylayın.</li>
	<li>ABS patlama aygıt baskı izleri ABS patlama aygıt bilgisayara kaydeder tetikleyici satın alma dosyasını açın.</li>
	<li>Biraz hava yolunu açmak için basınçlı hava tankı (şekil 4G) ana topuzu kadar gevşetin.</li>
	<li>Ölçer göstergesi ≈5, 000 psi istenen odası basınç düzeyini gösteren kırmızı ok ulaşıncaya kadar Hidrolik el pompası çalışır.</li>
	<li>Güvenli ve yanal yüzükoyun sígara (şekil 3) imzalat hayvan ABS numune tepsi (şekil 4H) üzerine getirin ve numune tepsi ABS numune odanın içine (şekil 4ben) kilitleyin.</li>
	<li>Yavaşça devrik bir hind pençe her 3 uzun cımbız kullanarak para çekme refleks yanıt elde edildi kadar s.</li>
	<li>ABS patlama aygıt bilgisayarda açılan edinme sayfasında Başlat ' ı tıklatın.</li>
	<li>'Acquisitioning' penceresi ekranda göründüğünde, sıkıştırma ve tutmak aşağı belgili tanımlık ABS patlama aygıt patlama kapalı, mylar membran parçalanma ve sıçan için ABS patlama yaralanma (20,9 psi ±1.14, 138 kPa ±7.9) yönetme gidene tetikler. Şu patlama patlatır sonra ne kadar süre (dk ve s) sonrası yaralanma geçtikten izlemek için ikinci bir süreölçer başlatın.</li>
	<li>Fareyi ABS numune tepsiden alın ve mavi yastık ve ısınma battaniye, onu tamamen refleks bastırma keşfetmiş değerlendirmesi için sırtında yerleştirerek geri dönün.</li>
	<li>İyileştiren refleks dönüşü saatlerini kaydetmek. İkinci zaman ayarı, min ve s sonrası yaralanma midesi üç üzerine onun geri dönmek fareyi art arda gelen alır kez süreyi belgede gözlemleyerek. Fareyi anestezik kabarcık odasına dönün.</li>
	<li>Sürücü odası gevşeme ve hareketi için izin vermek için hidrolik el pompası topuzu gevşetin.</li>
	<li>Hava yolunu kapatmak için basınçlı hava tankı ana topuzu sıkın.</li>
</ol><img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58792/58792fig3.jpg"> Şekil 3 : Fare yerleşim ABS numune tepsi ve ABS. içinde Yön ve ABS içinde çalışma hayvan yönünü. ABS yerleştirildiğinde, enine yüzükoyun dorsal yüzeyi ile şok dalga yönü (Kırmızı oklar) dikey kafasının içinde hayvandır. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58792/58792fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58792/58792fig4.jpg"> Şekil 4 : Gelişmiş patlama simülatörü (ABS) şok tüpü cihaz şematik. ABS önemli bileşenleri. A Hidrolik el pompası; = B sürücü odası; = C kap fındık; = D tüm iş parçacığı çubuklar; =  E genişleme odası; = F = konumu mylar membran yerleştirme; G basınçlı hava Silindirler; = H = numune tepsi; Ben numune odası =.  <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58792/58792fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a> 
3. kemirgen MCA PSS çözüm hazırlanması
Not: Adımları 1.1-1.22 PSS çözüm için kullanıma hazır olduğu gibi protokol adımlar 3.1-3.3 genellikle aynı anda yerine getirilir.
<ol><li>Hazırlamak ve bir 1000 mL fizyolojik tuz solüsyonu (PSS) aşağıdaki kompozisyon ve konsantrasyonları mix: 130 mM NaCl; 4.7 mM KCl; 1.17 mM MgSO4∙7H2O; 5 mM glikoz; 1.5 mM CaCl2; 15 mM NaHCO3.</li>
	<li>PSS ! O2 ve %5 CO2 N2bir denge içinde gaz karışımı ile equilibrate. PH 7.4 okuduğunda hazır çözümdür. Not: Tüm gazlar sıkıştırılmış gaz tüpleri yukarıda belirtilen konsantrasyonlarda elde edilir.</li>
	<li>Rezervuar şişeleri ve tüp hazır PSS çözüm ile doldurun ve kalan çözüm chill.</li>
</ol>4. kemirgen MCA kesimleri çıkarımı
<ol><li>İyileştiren refleks süreyi belgeleyen sonra fareyi anestezik kabarcık odasına dönün. Solunum için pensi kapatıp odasına kelepçe açın. İsoflurane üstünde-e doğru ses karışımı % 4'ü açın ve 2-3 kadar derin anestezi min için odasında fareyi tutun.</li>
	<li>Bir kez fareyi anestezi, solunum için kelepçe açın ve anestezik kabarcık odası için kelepçe kapatın. İsoflurane için %2 oranında hacim karışımı azaltmak ve ona kabarcık odasından kaldırın. Onu ısınma battaniye karnına yerleştirin ve endotrakeal tüp dış sonuna havalandırma hortumu ucunu yeniden bağlayın.</li>
	<li>30 veya 60 dakika başına en az 40-45 nefes ve anestezi de %2 birim karışımı arasında bir nefes hızda mekanik havalandırma korumak hemen yazı-bTBI yaralanma.</li>
	<li>Ya 30 ya da 60 dk sağkalım süresi, tamamlanması isoflurane birim karışım % 4'ü için artırmak ve derin anestezi için 5-6 dk. hemen sonra bir kemirgen özgü Giyotin kullanarak işten çıkarma tarafından ötenazi. Not: Bu deneylerde, anestezi ve mekanik olarak düzeltilmesi dönüş takip havalandırılmış hayvanlar kadar işten çıkarma refleks tutuyoruz.  Çalışma daha uzun hayatta kalma timepoints gerektiriyorsa, ağrı kesici ortaya çıkması önce hayvanın anesteziden yönetilmesi.</li>
	<li>İnce beyin kafatasından kaldırın. #10 neşter bıçak oksipital düzgün aşağı traş kafa derisi üst Merkezi, bir 1,5 inç dikey, kemik-derin kesi yapmak için kullanın.</li>
	<li>Küçük kemik rongeurs açmak ve kafa derisi deri kafatası kemiğinden ayırmak için kullanın.</li>
	<li>Büyük kemik rongeurs kesmek ve oksipital, interparietal ve alt yarısında beyin kapatan frontal kemik ayıklamak için kullanın.</li>
	<li>Bir kez beyin kemik çevreleyen ücretsizdir dikkatle beyin kafatası dışarı kazmak için cerrahi bir spatula kullanın. Not: Beyin kafatasından gibi gereksiz yere tug değil, pislik veya hassas MCA çekin ayıran kafatası duvardan kesimleri çok dikkatli alın.</li>
	<li>Hasat beyin küçük cam Petri kabına doğrudan üst kısmında sağlam bir buz blok dinleniyor bulunan soğutulmuş PSS çözüm Emanet.</li>
	<li>Hem Willis daire sol ve sağ MCA başında dikkatli bir şekilde çıkarın. Segment yanal ve dorsally yaklaşık 4 – 5 mm için kaldırmaya devam etmek.</li>
	<li>Yavaşça yaklaşık 4 – 5 mm uzunluğunda microforceps kullanarak herhangi bir bağ dokusunun toplanan MCA parçalarını temizle.</li>
	<li>MCA'ın üzerinde arteriograph bağlayın. Her segmentin ilk cam micropipette (çapı ≈70 µm) ile proksimal sonuna cannulate ve 10-0 naylon dikiş ile güvenli.</li>
	<li>Usulca lumina Lümen kalan kan ve diğer içeriği kaldırmak için PSS ile sıvı.</li>
	<li>MCA segment germe olmadan her kesiminin ikinci micropipette ile distal sonuna cannulate ve 10-0 naylon dikiş ile güvenli.</li>
	<li>Sonra başarılı montaj MCA segmentin odası damarlarının büyütme için bir ters mikroskobu'nın sahne üzerine yerleştirin. Mikroskop bir video kamera, monitör ve video scaler arter çapı ölçümleri için optik bir mikrometre ile kalibre ile donatılmıştır.</li>
	<li>Her kesimi ve çevresindeki arteriograph banyo oda sıcaklığından 37 ° C sıcak ve % 21 O2 ve %5 CO2 N2bir denge içinde gaz karışımı ile equilibrated sürekli olarak dağıtılır PSS ile doldurun.</li>
	<li>MCA kesimleri için 60 dk 50 mmHg basınçta MİKROPİPETLER segmentleri üzerindeki uygun bir yükseklik için bağlı rezervuar şişe yükselterek equilibrate. Basınç güç çeviriciler MİKROPİPETLER ve rezervuar şişeleri arasında yer alan transmural basınç istenen 50 mmHg basınç elde belirten MCA segmentteki değerlendirecek.</li>
	<li>Denge dönemi imzalanmasından sonra 100 mmHg intravasküler basınç rezervuar şişe farklı heights adlı ayarlayarak artırın.</li>
	<li>30 mM K+ (damar kasılması onaylamanız) teslim yolu ile luminal perfusate ve ölçü arter çapı. Yaklaşık 10 dk sonra 10-5 M Ach (için gemi dilatasyon) teslim ve Arter çapı ölçmek.</li>
	<li>Gemi akıl yanıt-e doğru incelemek. Damar içi basıncı 100 mmHg için 80 mmHg azaltmak için rezervuar şişe indirin. MCA kesimleri 10 dk. ölçü Arteryel çapları için equilibrate izin verir.</li>
	<li>İntravasküler basınç 80 mmHg için 60 mmHg azaltmak. MCA kesimleri 10 dk. ölçü Arteryel çapları için equilibrate izin verir.</li>
	<li>İntravasküler basınç 60 mmHg için 40 mmHg azaltmak. MCA kesimleri 10 dk. ölçü Arteryel çapları için equilibrate izin verir.</li>
	<li>İntravasküler basınç 40 mmHg için 20 mmHg azaltmak. MCA kesimleri 10 dk. ölçü Arteryel çapları için equilibrate izin verir.</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Tüm iletişim kuralları ve talimatlar olduğu gibi bu belirli çalışma protokolünde için belirli adımları olabildiğince doğru bir biçimde takip çok önemlidir ve kesin olarak mümkün. Sonra farenin entübasyon ilk bunu sürekli ve zorlanmadan nefes alıyor onaylamak önemlidir. Yemek borusu soluk borusu yerine yanlışlıkla endotrakeal tüp ekleme rasping, zor nefes, kanama ve fareyi akciğerlere eksik anestezik teslimat nedeniyle sonraki hareketlendirici neden olur.
Mylar membran levhalar üzerinde açılış sürücü ve genişleme odası arasında merkezi taping zaman, çarşafları ortalanır ve39,41açma tüm kapak zorunludur. Üzerinde açılış sayfaları misaligning sürücü odası, membran patlama-potansiyel için gerekli basınç ve yönetim patlama yaralanma reddi düşüş hava kaçağı neden olur. Düzgün topografyanın ve güvenli bir şekilde Aksesuar çelik blok montaj Hidrolik el pompası karşı blok ve sürücü odası da Hidrolik el pompası topuzu sıkma, gerekli ve sürücü odası teyit sızıntıları basınçlı kalır. Böylece açılış Mylar membran levhalar ve sürücü ve genişleme odası arasında odası üzerinde gerekli zorunlu mühür oluşturma genişleme odası karşı sıkı bir şekilde kapatmak sürücü odası için uygun çelik blok yerleşimini sağlar.
Sırasında MCA gemi çekimi önce hazırlıklar, PSS %21 O2 ve %5 CO2 N2 bir denge içinde gerekli karışımı ile gaz çözüm Sakinleştiği ve necessitated tarafsız fizyolojik pH için gerekli kolaylaştırır bir PSS çözüm21,33,34çalışma.
60 dk21,32,33,34 için sabit basınçta kesimleri sıcaklığına maksimum genişleme sırasında gösterilen aşağıdaki sıkmak için kesimleri bu adımı izni olmaksızın son derece zorunludur onların ilk birincil basınçlandırma. Bu olay spontan sesi, bir özellik bir sağlıklı arter32,33,34müstehcen oluşumunu gösterir. Diğer çalışmalar33,34,42, bu çalışma ve o Mathew çeşitli basıncı seviyeleri segment denge için kullanılan rağmen vd.21, Golding vd.35 ve Golding vd.43 50 mmHg, kesimleri equilibrated. Sıcaklığına toplanan sürece kesimleri 40 mmHg – 100 mmHg32 arasında herhangi bir yerde sağlar bazı esneklik ve iletişim kuralı, bu adım için değişiklik için bir saat denge süresi içinde bu basınç parametreler sonuçta sağlıklı onaylar arterler deneme devamı için gerekli.
Beyin kafatası ve dan Willis daire sol ve sağ MCA kesimleri bu gemileri olduğu gibi tutmak kaldırırken çok dikkatli alarak belki de tüm Protokolü'nün en önemli adımdır. Kemik rongeurs ile beyin delinme, yırtılma veya şiddetli segmentlerinin kaldırma sırasında germe veya yanlışlıkla damarlara ne zaman kazı Kafatasının dışında beyin cerrahi spatula ile çekerek sonuçta hasat imha içinde neden olur MCA'ın kullanılmayan kesimleri neden ve arterler, o dizi kullanımı sonuçta tüm deneme bu hayvan için geçersiz kılma üretilmiyor.
Akıl veya constrictory uyaranların MCA kesimleri ex vivo serebral vasküler yanıt ölçme darbeden sonra toplanan veya patlama Tby içinde vivo başarı sağladığını, metodoloji onun zorluklar ve/veya sınırlamalar değildir. Belki de daha discernable karmaşıklığı Tby sonuçları üzerinde beyin damarlara dolaşımını incelenmesi ile bağlantılı biri Tby açık etkileri nedeniyle çeşitli malzemeler sonucunda oluşan dolaylı etkilerinden gemiler ayırma ve yaralı beyin44tarafından oluşturulan öğeleri. Bu akla şaşkınlık potansiyel olarak analiz ederek yapmamış ex vivo vasoconstrictory ve vasodilatory reaksiyonlar, hasat, derin ve/veya MCA'ın basınç altında. Serebral arterler içinde vivo yerel olarak taburcu ölüm önce parenkima vazoaktif malzeme maruz kalan süreyi azaltmak için bir çaba olarak, serebral arterler topluluğu Tby hemen sonra böyle uzun süreli pozlama derecesini azaltmak olabilir etkileri. Ex vivo çalışmalar izole MCA'ın üzerinde Ayrıca mekanizmaları aracılığıyla belirli reseptör agonistleri ve antagonistleri travmatik vasküler yaralanma ya da tanınmış araçlar inceleme olarak göze değil vasküler yaralanma olasılığı mevcut verimli veya ayrımcı vivo olarak. Daha sonra bu ex vivo yöntemi ile ex vivo pozlama elde edilen myogenic yanıt (vazokonstriksiyona veya intravasküler veya extravascular uyuşturucu maruz kalma nedeniyle damar parçasının dilatasyon) test etmek için uyuşturucu için kombine edilebilir.
Kabaca veya sabırsızlıkla MCA'ın erken böylece bunların kullanımı geçersiz kılma damarlarının yırtılması içinde sonuçlanabilir hasat beyin kaldırarak diğer sınırlamaları içerir. Buna ek olarak, bir kaç dakikadan hayvan ötenazi arasında geçmesi icar, damarlar ve bunların yerleşimleri hazırlanan PSS çözümde koleksiyonu da canlılığı inkâr. Ne zaman düzgün gerçekleştirilen ve takip, bTBI başından sonuna kadar birkaç saat sürer ve başarı için gerekli süreyi azaltılmasına çalışır sonra myogenic yanıt MCA'ın bir test için bu protokolü içinde açıklanan yöntemleri içinde deneysel neden olabilir hata oluştu. Ancak, bu yöntem yapılır tüp bebek ve önemli ölçüde daha fazla maliyet-etkin araçları ve45,46 veya konvansiyonel Doppler ultrason görüntüleme ekipman içinde vivo yüksek çözünürlüklü manyetik rezonans (MR) daha kullanır / Ayrıca gemi çalışmaları için istihdam velocimetric teknikleri47,48,49 .
Bu bulgular hafif bTBI yaralanma engelli beyin akıl yanıt-e doğru azaltmak intravasküler basınç ile ilişkili potansiyel bir fonksiyonu vasospasm6,7 ve VSMC hyperconstriction50 olabilir Sonuçta tekrarlara gibi önde gelen patlama pozlama göreli serebral perfüzyon azalır sonra daha önce bildirdi. Ayrıca, beyin damarlara normal akıl reaksiyonları engelleyici patlama indüklenen zarar muhtemelen daha fazla zaman Arteryel hipotansiyon, muharebe operasyonları sırasında sık görülme oranı ile birlikte serebral perfüzyon indirimleri desteklemek.
Bu sonuçlar bu bTBI bir değişiklik arteriyel vasküler denetimi kolaylaştırıcı mekanizmaları sonuçları gösterir. Akut Faz serebral vasküler bozukluğu Arteryel myogenic yanıt-e doğru en az bir saat sonrası yaralanma için intravasküler basınç düşüşler gözlendi rağmen Akut Faz bTBI sonra çevreleyen bilgi boşluklar kalır. Serebral damarlara ne fiziksel ve biyokimyasal eksiklikleri yaralanmaları ve bTBI nedenleri oldukça hemen yaralanma sonra tedavi ve/veya rehabilitasyon başarı düzeyini belirlemede yardımcı olabilecek beyin maruz tanımlama önemi.

Tby, patlama kaynaklı travmatik beyin hasarı (bTBI) serebral vasküler yaralanma1 ile ilişkili ve Engelli etkisi (yani, sigara-patlama) kaynaklanan benzer serebral vasküler telafi edici yanıt-e doğru oluşum tarihlerde karbon dioksit (PaCO2)2,3,4 ve oksijen (PaO2)5değişiklikler kısmi basınç içinde. Ayrıca, patlama pozlama hayvanlar6 ve bTBI hastalar7,8' serebral arteriyel vasospasm neden oldu. Klinik Tby9 ve sıvı-perküsyon yaralanma (FPI)10,11,12 arteryel kan basıncı değişiklikleri görme serebral vasküler yanıt ile ilişkilendirilse de (yani, autoregulation basınç)9,10,11,12, belirsizlikler kalır bTBI etkisi serebral vasküler basınç autoregulation kapasitesi ile ilgili.
Serebral dolaşımı sürekli oksijen ve besin kaynağı metabolik olarak aktif beyin13,14,-15teslim sürdürmenin niyetiyle sistemik arteriyel basınç farklılığı tepki verir, 16. Tutar"bir organı sürekli kan akımı tansiyon (perfüzyon) ya da diğer fizyolojik veya patolojik uyaranlara değişikliklere rağmen" bir benzersiz tür Homeostazı, autoregulation17,18,19 oluşur 20. serebral arterler daraltır veya yanıt olarak kan basıncı, nitrik oksit (NO), kan viskozite, PaCO2 ve PaO2, vb4,11,16, dilate 21. Arteryel myogenic yanıt anlamına gelir bu kasılmalar veya dilations. Perfüzyon basıncı düştüğünde ilk Bayliss22 ve CBF, autoregulation için katkıda bulunan önemli bir mekanizma tarafından açıklanan myogenic vasküler yanıt perfüzyon basıncı artarsa vazokonstriksiyona ve kapakların ile karakterizedir 14 , 17. bu vasküler yanıttır doğal yeteneği germek için yanıt vermek ve/veya Lümen ve/veya duvar gerilimi23,24, değişiklikler (örneğin vasküler düz kas hücreleri, VSMC'ın) contractile dokuların 25,26,27,28,29. Ne zaman arterler uzatılır (örneğin, sırasında damar içi basınç artar), VSMC'ın24,25,26,28daraltır.
Direnç damarları incelemek çalışmaları ex vivo genellikle izole direnç damarlarının farmakolojik ve fizyolojik özellikleri test etmek için iki yöntemden birini istihdam: halka monte edilmiş yöntemi ve cannulated, basınçlı yöntemi. Halka monte edilmiş gemi hazırlama yöntemi segment yerinde tutması intraluminally gemi segment aracılığıyla geçirilen iki kablo içerir. VSMC'ın uyarılması ölçü aygıtları isometrically sürekli teller yük miktarını ölçen. Ancak, bu teknik ile bazı rezervasyonları, en önemlisi, teller üzerinden geçerken Lümen endotel tabakası tarafından sürekli kaçınılmaz hasar taşır30 ve germe izole segmentine göre sürekli değişen derecesi hangi sırayla sonuçta geminin duyarlılık farmakolojik31etkileyen damar duvar distansiyonu yol açar. Cannulated, basınçlı kap hazırlık metodoloji her ev bir orta serebral arter (MCA) yerleşimini tek bir hayvan hasat iki ayrı odaları oluşan bir arteriograph kullanır. Bir micropipette her iki ucuna segment eklenir, proksimal kesiminin sonuna micropipette dikiş ile tutturulmuş ve Lümen usulca fizyolojik tuz solüsyonu (PSS) ile kan ve diğer maddelerin ortadan kaldırmak için derin. Distal uç sonra dikiş ile sabitlenir. Her pipet her kesimi yukarıda ama diğer32,33,34,35 ile ilgili olarak farklı yüksekliklerde uygun yüksekliğe bağlı iki rezervuarlar yükselterek Transmural veya luminal basınç ayarlanır ,36. Monitör, video kamera ve dış ölçüm için izin ölçekleyici ile outfitted ters bir mikroskop kullanarak damarları büyütülmüş rezervuar ve MİKROPİPETLER yerleştirilmiş basınç güç çeviriciler perfüzyon basınç ölçümleri sağlarken MCA çapları. Her iki yöntem değerli olmasına rağmen cannulated, basınçlı kap hazırlık metodoloji daha iyi taklit eder ve onların vivo içinde koşullar32,37için daha yakın olmak için izni damarları araştırıldı.
Tby serebral vasküler yanıt olarak daha önce serebral atardamar kesimleri21,35,36,38içinde okudu etkisi (yani, sigara-patlama) farklı türde etkileri. Gemi koleksiyonu, montaj ve geçerli çalışma odasında açıklandığı gibi perfüzyon için benzer bir ex vivo MCA protokolü kullanarak, daha önceki çalışmalar elde başarı ile ilişkili mekanizmaları onların ilgili soruşturmalar serebral damarlara işlev bozukluğu Aşağıdaki Tby. Golding vd.34 yetişkin, erkek uzun-Evans sıçan MCA'ın şiddetli Tby kontrollü kortikal etkisi (CCI) yaralanma üzerinden aşağıdaki dilations endotel aracılı inceledi. İkinci çalışmada, Golding vd.36 hafif CCI sürekli sıçanlarından emir MCA'ın hasat sonrası hipotansiyon veya CO2 serebrovasküler reaktivite araştırıldı. Yu ve ark.38 peroxynitrite leş yiyiciler geliştirilmiş akıl yanıt-e doğru Mathew vd.21 myogenic yanıt-e doğru okudu ederken FPI için tabi yetişkin, erkek Sprague-Dawley rat MCA kesimleri intravasküler basınç azaltılmış olup olmadığını analiz hipotansiyon MCA içinde orta sonra hasat'ın merkezi FPI.
Daha iyi hipotezi araştırmak için sigara-şok Tby, Engelli serebral vasküler reaktivite, sonuçlarında gibi bu bTBI bir mekanizma için tehlikeye autoregulation azaltılmış intravasküler basınç myogenic akıl yanıt ölçerek katkıda test ettik ex vivo bir gelişmiş patlama simülatörü (ABS) şok tüpü modeli (Şekil 2 ve şekil 3) kullanılarak hafif bTBI tabi fareler toplanan olan izole, basınçlı kemirgen MCA kesimleri (şekil 1) içinde (Rodriguez görmek vd.39 Tablo 1) Basınçlı hava dalgaları Freidlander benzeri40 üzerinde ve altında pressure oluşturmak için doğrudan bir sürücü odasına teslim kullanır (Rodriguez görmek vd.39Resim 1A).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58792/58792fig1.jpg"> Resim 1 : Orta serebral arter (MCA) konumunu. MCA'ın posterior serebral arter (PCA), iç Karotid arter (ICA), dış Karotid arter (ECA), baziler arter (BA) ve ortak Karotid arter (CCA) göreli konumunu vurgulayarak sıçan beyin ventral görünümünü. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58792/58792fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58792/58792fig2.jpg"> Resim 2 : Patlama simülatörü (ABS) şok tüpü cihaz gelişmiş. Birincil patlama yaralanma tüm çalışma hayvanlarda üretmek için kullanılan ABS. 1 = sürücü odası; 2 genişleme odası; =  3 = numune odası; 4 = yansıyan dalga bastırıcı; sarı yıldız numune tepsi =. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58792/58792fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>

<table><tbody><tr><td>Gelişmiş Patlama Simülatörü (ABS)</td><td>Dyn-FX Consulting, Ltd. ve ORA, Inc.</td><td>N / A</td><td>Birincil patlama yaralanmalarını indüklemek için kullanılan patlama simüle eden şok tüpü&nbsp;</td></tr><tr><td>Yetişkin, erkek, Sprague-Dawley sıçanları&nbsp;</td><td>Charles River Laboratories</td><td>N/A</td><td>Deney hayvanları</td></tr><tr><td>Arteriyografi</td><td>Yaşam Sistemleri Enstrümantasyonu, Inc.</td><td>Arteriyografi</td>: <td>Alınan arterlerin montajı ve lümen çapının ölçülmesi&nbsp;</td></tr><tr><td>Kemik rongeurları, büyük</td><td>FST Güzel Bilim Araçları</td><td>Friedman Rongeur</td><td>Kafatasından beyin çıkarma</td></tr><tr><td>Kemik rongeurları, küçük</td><td>FST Güzel Bilim Araçları</td><td>Boynton Rongeur</td><td>Kafatasından beyin çıkarma</td></tr><tr><td>CaCl2&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>Kalsiyum klorür</td><td>Kemirgen orta serebral arteriyel fizyolojik tuz çözeltisinin (PSS) hazırlanması</td></tr> <tr><td>Kulak tıkaçları</td><td>3M</td><td>Köpük Kulak Tıkaçları 1100 Sınıfı AL&nbsp;</td><td>Kumlama makinesindeyken kulak kulak zarının yaralanmasını önleyin&nbsp;</td></tr><tr><td>Glukoz</td><td>Sigma</td><td>D-[+]-Glukoz</td><td>Kemirgen orta serebral arteriyel fizyolojik tuz çözeltisinin (PSS) hazırlanması</td></tr> <tr><td>İzofluran&nbsp;</td><td>Piramal İşletmeler Limited Şirketi ve nbsp;</td><td>İzofluran, USP</td><td>Anestezik</td></tr><tr><td>KCl</td><td>Sigma</td><td>Potasyum klorür</td><td>Kemirgen orta serebral arteriyel fizyolojik tuz çözeltisinin (PSS) hazırlanması</td></tr> <tr><td>MgSO4&bull; 7H<alt>2</alt>O&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>Magnezyum sülfat</td><td>Kemirgen orta serebral arteriyel fizyolojik tuz çözeltisinin (PSS) hazırlanması,</td></tr> <tr><td>Microforceps</td><td>, Buxton Biomedical, Inc.</td><td>Mikro Bağlama Fcps, 180mm</td><td>Kafatasından beyin ekstraksiyonu</td></tr><tr><td>Mylar levhalar</td><td>Texas Art Supply</td><td>Mylar</td><td>Membran patlatma sırasında basınçlı hava oluşumu için kullanılır</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Sigma</td><td>Sodyum klorür</td><td>Kemirgen orta serebral arteriyel fizyolojik tuz çözeltisinin (PSS) hazırlanması</td></tr> <tr><td>NaHCO3</td><td>Sigma</td><td>Sodyum bikarbonat</td><td>Kemirgen orta serebral arteriyel fizyolojik tuz çözeltisinin (PSS) hazırlanması</td></tr> <tr><td>Naylon sütür</td><td>Ethicon</td><td>10-0 Ethilon naylon sütür siyah monofilament 5" (13 cm)</td> <td>Alınan arterlerin montajı ve lümen çapının ölçülmesi&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;</td></tr><tr><td>Neşter bıçağı #10</td><td>Bard-Parker</td><td>10 Paslanmaz Çelik Cerrahi Bıçak</td><td>Kafatasından beyin çıkarma</td></tr><tr><td>Cerrahi spatula</td><td>Delmaks Surgico</td><td>Çimento Spatula&nbsp;</td><td>Kafatasından beyin çıkarılması</td></tr><tr><td>Termometre&nbsp;</td><td>Physitemp Instruments, Inc.,&nbsp;</td><td>Thermalert İzleme Termometresi</td><td>Deney hayvanının çekirdek vücut sıcaklığının izlenmesi&nbsp;</td></tr><tr><td>Hacim ventilatörü&nbsp;</td><td>Harvard Aparatı, Inc.</td><td>Küçük Hayvan Vantilatörü</td><td>Entübe edilmiş deney hayvanının sürekli ve sabit nefes alması</td></tr><tr><td>Su battaniyesi</td><td>Gaymar Industries, Inc.&nbsp;</td><td>Mul-T-Pad Sıcaklık Terapi Pedi</td><td>Deney hayvanının vücut sıcaklığının korunması&nbsp;</td></tr></tbody></table>

serebral arterler patlama kaynaklı neurotrauma etkilerini basınçlı kemirgen orta

Effects of Blast-induced Neurotrauma on Pressurized Rodent Middle Cerebral Arteries

Patlama pozlama histopatolojik ve davranışsal etkileri üzerinde çalışmalar olmuştur rağmen daha az patlama'nın serebral vasküler etkileri için adanmış. Etkisi (yani, sigara-patlama) travmatik beyin hasarı (TBY) hem insanlar hem de deneysel hayvan serebral damarlara basınç autoregulation azaltmak için bilinir. Azaltılmış damar içi basıncı kemirgen orta serebral arter (MCA) myogenic akıl yanıt ölçerek patlama kaynaklı travmatik beyin hasarı (bTBI) gibi Tby, etkisi, Engelli serebral vasküler reaktivite sonuçlar hipotezi test edildi kesimi üzerinden fareler bir gelişmiş patlama simülatörü (ABS) şok tüpü kullanarak hafif bTBI tabi. Yetişkin, erkek Sprague-Dawley Rat anestezi, tüp, havalandırılmış ve sahte bTBI (aynı manipülasyon ve anestezi patlama yaralanma hariç) veya hafif bTBI için hazırlanmış. Fareler sahte bTBI veya hafif bTBI kurban 30 veya 60 dk sonrası yaralanma tarafından takip almak için rastgele. BTBI, hemen sonra iyileştiren refleks (RR) bastırma kez değerlendirildi, ötenazi zaman puan sonrası yaralanma tamamlandı, beyin hasat ve bireysel MCA kesimleri toplanan, monte ve basınç altında. Arteryel kesimleri ile periosteum intraluminal basınç 20 mmHg artışla 20 mmHg için 100 düşürüldü gibi MCA çapları ölçülen ve kaydedildi. İntraluminal basınç, MCA DİLATÖR yanıt önemli ölçüde azaltıldı giderek önemli ölçüde temel sahte bTBI gruplar halinde yukarıda artarken MCA çapları (p < 0,05) olarak kanıtladığı belgili tanımlık zayıflatmak, her iki bTBI gruplar daha küçük azaltılarak MCA çapları için bTBI grupları kaydedildi. Buna ek olarak, önemli ölçüde RR bastırma bTBI gruplar halinde yapıldı (p < 0,05) sahte bTBI gruplar halinde daha yüksektir. MCA'ın toplanan sergilenen tipik vasodilatory özellikleri için MCA'ın önemli ölçüde sergilenen bTBI toplanan iken intraluminal basınç azalır azaltılmış myogenic vasodilatory yanıt-e doğru Engelli grupları sahte bTBI basınç en az 60 dk sonra bTBI kalıcı.

Tüm çalışma hayvanlar için ortalama bTBI aşırı basınç 20.9 psi ±1.14 (138 kPa ±7.9) yapıldı. Refleks (RR) bastırma için ABS bTBI shockwave maruz (5.37 min ±2.1) tabi rats keşfetmiş, süresi önemli ölçüde uzun değildi (p = 0,36, bTBI sahte vs) daha sham grubunda (5.10 min ±1.6).
İntraluminal basınç 100 20 mmHg azaldı gibi her iki 30 ve 60 dk sham grupları, MCA çapları temel üzerinde arttı. Karşılık gelen sahte gruplarına göre MCA akıl yanıt-e doğru sürekli dayatılan gözlenen 30 dk intravasküler basınç azalma (p = 0,01, bTBI sahte vs) ve 60 dk (p 0,02, bTBI sahte vs =) ABS bTBI gruplar (şekil 5) patlama maruz kaldıktan sonra azaltılacağını. Rodriguez bu sonuçlar daha ayrıntılı bilgi için bkz: vd.39.
Bu hafif bTBI önemli ölçüde azaltılmış intravasküler basınç 30 ve 60 dakika sonra hafif bTBI bu çalışmalarda kullanılan hafif şok dalgası düzeyleri süre içinde sürelerini sonuçlandı MCA kesimleri içinde beyin telafi DİLATÖR yanıt engelliler bu çalışmalar ortaya RR bastırılması (&lt; 30 s) sham yaralı fareler ile benzer.
İstatistiksel analizleri yazılımı ile gerçekleştirilmiştir. İntravasküler basınç değişikliklere myogenic yanıt intraluminal basınç (80, 60, 40 ve 20 mmHg) her düzeyi için temel (100 mmHg) yüzde değişim hesaplayarak değerlendirildi. Unpaired bir öğrenci t-testleri bTBI ve sham Grup temel farklılıkları değerlendirmek için kullanılmıştır. MCA DİLATÖR yanıt-e doğru bTBI ve sham gruplar arasındaki farkları bir tekrarlanan tek yönlü Varyans analizi (ANOVA) Dunnett'ın çoklu karşılaştırma testi ve bir Bartlett'ın test için eşit varyans kullanılarak değerlendirildi.
Tekrar tekrar test sonuçları istatistiksel gücü azalma nedeniyle MCA belirli her baskı noktasında karşılaştırmalar deneyler (örneğin, 100 ve 80 mmHg veya 60 ve 40 mmHg arasında vb) değil yapılmıştır. P ≤ 0,05 kabul edildi önem düzeyi. Metin, başvurulan tablo ve şekil tüm verileri ifade olarak ± standart hataları (SEM) anlamına gelir anlamına gelir.
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58792/58792fig5.jpg"> Şekil 5 : BTBI etkileri azaltılmış intravasküler basınç orta serebral arter (MCA) yanıt. İntravasküler basınç ilerici indirimleri DİLATÖR yanıt Engelli vasodilatory yanıt sergilendi ve 30 dk içinde önemli ölçüde azaltıldı (p = 0,01, bTBI vs. sahte) ve 60 dk (p 0,02, bTBI vs. sham =) bTBI Gruplar (n = 6/grup) her iki sahte gruplarına göre patlama maruz kaldıktan sonra (n = 12). İntraluminal basınç 100 20 mmHg azaldı gibi her iki 30 ve 60 dk sham grupları, MCA çapları temel üzerinde arttı. Değerleri çizilen aracı olarak ± SEM *p &lt; 0,05 sahte vs. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58792/58792fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>

Burada, ex vivo vasküler reaktivite belirlenmesi izole, basınçlı, kemirgen orta serebral arter (MCA) parçaları kullanarak birincil patlama travmatik beyin hasarı (bTBI) takip yöntemleri tanımlamak için bir iletişim kuralı mevcut. bTBI indüksiyon bir şok tüp, bir gelişmiş patlama simülatörü (ABS) aygıtı olarak da bilinen kullanılarak yapılır.

Serebral arterler patlama kaynaklı Neurotrauma etkilerini basınçlı kemirgen orta

Though there have been studies on the histopathological and behavioral effects of blast exposure, fewer have been dedicated to blast&#39;s cerebral ...

Bu yöntem, patlama travmatik beyin hasarının serebral vasküler yaralanmaya yol açıp açmadığını ve etkilerin kapsamının miyojenik vasküler yanıtın bozulmasına kadar uzanıp genişlemediğinin cevaplanamadığının cevaplandırılmaya yardımcı olur. İzole basınçlı arteriyel hazırlık bize beyne patlama maruz kalma neden dolaylı etkileri serebral arterler üzerinde patlama maruziyeti doğrudan etkilerini ayırmak için izin verir. İzole ve basınçlı arteriyel preparatlar inme, hipertansiyon ve daha sonra diyabet de dahil olmak üzere çeşitli hastalıklar veya koşullar, vasküler fonksiyon çalışması için kullanılabilir.Çalışmalarımızın amacı, beyin dolaşımının beyni kanamanın zararlı etkilerinden koruma yeteneğini koruyan tedavileri belirlemektir. Bugün prosedürleri gösteren Maggie Parsley, laboratuvarımızın müdür yardımcısı ve baş araştırma teknisyenimiz Yaping Zeng olacak. Gelişmiş patlama simülatörü veya ABS hazırlamak için, dört yığılmış önceden kesilmiş Mylar yaprak üst kenarı boyunca bant maskeleme bandı 2,54 santimetrelik bir parça kullanın.İkinci bir bant parçasını kullanarak, Mylar membranın üst kenarını sürücü ve genleşme odaları arasındaki açıklığın merkezi nin üzerindeki genleşme odasının üst kısmından emniyete alayın. Odanın üst kısmındaki iki tüm iplik çubuklarını değiştirin ve sürücü odasını Mylar membrana karşı sabitlemek için odayı çevreleyen tüm kapak somunlarını elle sıkın. Hidrolik el pompası bileğini sıkın ve sürücü odasının hiçbir sızıntı olmadan basınçlı kaldığını doğrulamak için hidrolik göstergeüzerinde sabit bir basınç eşiğini gözlemleyin.Ardından ABS blast cihazının bilgisayarındaki ABS patlama cihazı basınç izlerini kaydeden tetikleme alma dosyasını açın. Yaralanma için anestezili sıçan hazırlamak için, yan dil konumlandırmak için uzun pick-up cımbız kullanın ve hafifçe trakea içine bir endotrakeal tüp içeren bir stylette eklemeden önce bir lidokain batırılmış pamuk lu bez ucu ile boğazın iç boyunca silin. Entübe edildikten sonra ventilatör hortumunun ucunu endotrakeal tüpün dış ucuna yerleştirin ve farenin sürekli ve zorlanmadan nefes alıp verdiğini gözlemleyin ve doğrulayın.Daha sonra ABS numune tepsisini numune odasından çıkarın ve tepsiyi bir ısı lambasının altında ısıtın. Tepsi ısınırken, kafa derisinin üst kısmını gözlerin üstünden kulakların arasına kadar tıraş edin ve tabandan yuvarlak ucuna kadar standart boyutta bir köpük kulak fişini aynı dikey yarıya indirmek için makas kullanın. Daha sonra her kulak ucuna yarıya kadar bir parça yerleştirin, ilk kulak kanalı boyunca, temas timpanik membran ile yapılana kadar.Endotrakeal tüpten ventilatör hortumu çıkararak, fareyi numune tepsisinin üst ucuna doğru hızlı bir şekilde kaydırın, baş tutucu nun açılması ve kauçuk yakaile dikkatlice yönlendirin. Sıçan yerinde olduğunda, ventilatör hortumunu endotrakeal tüpe geri yerleştirin ve kauçuk tasmanın sıkıca sabitlendiğinden, ancak boyun anına sıkıca bağlı olmadığını ve farenin lateral eğilimli bir pozisyonda yattığını doğrulayın. Daha sonra, anestezi altındaki fareyi içeren ABS numune tepsisini ABS numune odasına kilitleyin ve sabitleyin ve geri çekilme refleksi verilene kadar arka pati ayak parmaklarını her üç saniyede bir uzun cımbızla hafifçe çimdikleyin.ABS blast cihazı bilgisayarında açılan satın alma sayfasında Başlat'ı tıklatın ve patlama patlayana kadar satın alma penceresinde ABS patlama aygıtı tetiğine basın ve basılı tutun, Mylar membranı yırtılma ve ABS patlama yaralanmasını uygulayın. Patlama nın patlamasından hemen sonra, farenin kendisi, yaralanma sonrası, dakikalar ve saniyeler içinde ne kadar zaman geçtisintakip etmek için ikinci bir zamanlayıcı başlatın ve sıçanı mavi ped üzerindeki supine pozisyonuna yerleştirin ve derecelendirme refleks baskısını değerlendirmek için ısınmayı bekleyin. Orta serebral arter ayıklamak için, merkezi bir buçuk inç dikey kemik derin kesi oksipital condyle için tıraş kafa derisi üstünden yapmak ve kafatası kemik kafa derisi açmak ve ayırmak için küçük kemik rongeurs kullanmak için bir sayı 10 neşter bıçak kullanın.Büyük kemik rongeurs kullanarak, kesmek ve oksipital ayıklamak, interparietal, ve frontal kemiklerin alt yarısı beyni çevreleyen kemik serbest bırakıldıktan sonra dikkatle kafatasından beyin kazmak için cerrahi bir spatula kullanın. Soğutulmuş fizyolojik tuz çözeltisi veya PSS içeren küçük bir cam Petri çanak içine hasat beyin mevduat, bir diseksiyon mikroskop altında katı bir buz bloğu, ve dikkatle hem sol ve sağ orta serebral arterler kaldırmak, ya da MCAs, Willis daire başlayan ve yanal ve yaklaşık dört ila beş milimetre için dorsally devam. Toplanan MCA segmentlerini nazikçe temizlemek ve arterleri bir arteriyografüzerine monte etmek için mikro çömetler kullanın.Her segmentin proksimal ucunu bir cam, 70 mikrometre çapında mikropipet ile kanüle edin ve pipetleri 10-O naylon dikişlerle sabitlayın. Yavaşça herhangi bir kalıntı kan kaldırmak ve arteriyel doku germe olmadan ikinci bir mikropipet ile her segmentin distal ucunu kanüle pss ile lumina perfuse. Mikropipetleri ikinci bir 10-O naylon dikiş seti ile sabitle ve arteriyografı kamera ve monitörle donatılmış ters bir mikroskopun sahnesine yerleştirin.Mikropipetlere bağlı rezervuar şişelerini, MCA segmentlerini 50 milimetrelik cıva basıncında 60 dakika boyunca dengelemek için segmentlerin üzerinde uygun bir yüksekliğe yükseltin. Denge süresinin sonunda, damar dilatasyon yanıtlarını incelemek için şişeleri birbirine farklı yüksekliklerde ayarlayın, damar içi basıncı 80 milimetrecicıya düşürmek için rezervuar şişelerini düşürün ve segmentlerin 10 dakika boyunca dengede durmasını bekleyin. Daha sonra, 60, 40 ve cıva 20 milimetre intravasküler basıncı azaltmak, segmentleri her basınç değişikliği nden sonra dengelemek için izin.Bu temsili grafikte, arteriyel çap 100 milimetrecı cıva bir temel basınç çapı yüzde değişimi olarak Y-ekseni üzerinde gösterilmiştir. X ekseninde arteriyel dilaterasyon yanıtlarının test edildiği farklı intravasküler basınçlar gösterilmiştir. Sham yaralanma grubu için, MCA çapları taban çizgisinin üzerinde arttı ve intraluminal basınç cıva 100 ila 20 milimetre düşürüldü olarak normal olarak dilate devam etti.Buna karşılık, gözlemlenen 30 ve 60 dakikalık patlamaya bağlı travmatik beyin hasarı gruplarında intravasküler basınçta sürekli olarak uygulanan azalmaya karşı MCA dilator tepkileri, patlamaya maruz kaldıktan sonra genişleme kabiliyetlerinde önemli ölçüde azalmış, bu da serebral vazodilatör yanıtların azalmaya karşı önemli bir bozukluğu nu göstermektedir. Damar çıkarma, kurtarma, montaj ve profüzyon teknikleri son derece karmaşık, ve hassas bakım her türlü çaba bu prosedürleri gerçekleştirirken alınmalıdır.

effects-blast-induced-neurotrauma-on-pressurized-rodent-middle

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Kaynak: Logsdon, A. F.,  et al. Kemirgenlerde Kapalı Kafa Hafif Travmatik Beyin Hasarının Klinik Öncesi Değerlendirmesi için Düşük Yoğunluklu Patlama Dalgası Modeli. J. Vis. Uzm. (2020)Bu video, basınçlı gaz şoku tüpü kurulumu kullanan bir fare modelinde kapalı kafa hafif travmatik beyin hasarının indüksiyonunu göstermektedir. Üretilen basınç dalgası polyester zarı yırtarak farenin kafasına bir şok dalgası gönderir ve bu da kafatası içinde hızlı beyin hareketine neden olarak hafif bir travmatik...

Bir Murin Modelinde Kapalı Kafa Hafif Travmatik Beyin Hasarı Oluşturma

Serebral perfüzyon izleme iskemik inme modelleri doğruluğunu geliştirmek için gösterilmiştir. Teknik zorluklar sıklıkla serebrovasküler araştırma için bu önemli aracının kullanımını sınırlamak. Bu videoda, optimize edilmiş bir sistem sıçanlarda intraluminal orta serebral arter oklüzyonu sırasında tek veya çoklu-site hemodinamik izleme elde etmek gösterilmiştir.

Intraluminar Orta Serebral Arter Tıkanıklığı ve Sıçan Strok Model Serebral Perfüzyon İzleme için Optimize Sistemi

Biz bir kemirgen büyük bir beyin damar daimi tıkanıklığı için son derece tekrarlanabilir yöntem açıklanmaktadır. Bu teknik çok az çevresel zarar, en az kan kaybı, uzun süreli sağkalım oranının yüksek ve insan klinik nüfusu ile orantılı tutarlı infarkt hacmi ile gerçekleştirilebilir.

Kalıcı Serebral Gemi Tıkanıklığı<em&gt; Ile</em&gt; Çift Ligature ve transeksiyonu

Burada büyük kortikal infarkt ve sürekli açıklarını oluşturmak için karotis arter eşzamanlı tıkanıklığı olan yaşlı dişi farelerde kalıcı distal orta serebral arter oklüzyonu üretmek için bir protokol mevcut. Biz 24 saat ve inme sonrası 8 hafta yapısal MRI kullanarak lezyon büyüklüğü teyidini göstermektedir.

Yaşlı Sıçanlarda Ortak Karotis Arter Tıkanıklığı ile Kalıcı Distal Orta Serebral Sahne Kortikal İskemi Sürekli Engelli Eğitim için

Burada, hafif ila orta dereceli travmatik beyin hasarının nörobiyolojik ve patofizyolojik etkilerini araştırmak için kemirgenler için bir patlama dalgası modeli protokolü sunuyoruz. Patlamaya bağlı hafif ila orta dereceli travmatik beyin hasarının güvenilir ve tekrarlanabilir bir şekilde üretilmesini sağlayan basınç sensörleriyle donatılmış, gazla çalışan, tezgah üstü bir kurulum kurduk.

Kemirgenlerde Kapalı Başlı Hafif Travmatik Beyin Hasarının Preklinik Değerlendirmesi için Düşük Yoğunluklu Patlama Dalgası Modeli

Bu protokol, aynı kemirgen beyin örnekleri kümesinde iskemik beyin hasarının en önemli üç parametresini ölçmenin yeni bir tekniğini açıklar. Sadece bir beyin örneği kullanmak etik ve ekonomik maliyetler açısından oldukça avantajlıdır.

Tek Bir Kemirgen Beyin Örneklerinde İnme Sonrası Serebral Ödem, Enfarktüs Bölgesi ve Kan-Beyin Bariyeri Kırılımının Ölçülmesi

Burada, fareler kullanılarak tekrarlanan düşük yoğunluklu patlama maruziyetleri üretmek için yöntemler sunulmaktadır.

Farelerde Yüksek Derecede Tekrarlayan Düşük Seviyeli Patlama Maruziyetinin Modellenmesi

Mevcut protokol, serebral damarların anatomik yapısını hasara neden olmadan koruyan bir orta serebral arter oklüzyonu/reperfüzyonu sıçan modelini tanımlar.

Serebral damarların anatomik yapısına zarar vermeden orta serebral arter tıkanıklığı/reperfüzyonunun bir sıçan modeli

Bu protokol, farelerde oküler, beyin ve omurilik travmaları dahil olmak üzere kapalı sistem merkezi sinir sistemi (CNS) yaralanmalarını indüklemek için tasarlanmış özel bir aşırı basınçlı hava sistemini açıklar. Bu protokolün amacı, araştırmacıların benzersiz CNS travma çalışmaları için sistemi kolayca uyarlamaları ve genişletmeleri için bir çerçeve sağlamaktır.

Odak, Kapalı Sistem Merkezi Sinir Sistemi Yaralanması Sistemi

Bu çalışmanın amacı, motor ve mekansal hafıza eksikliklerinin deneysel çalışmalarında uygulanmak üzere sıçanlarda kalıcı, seçici orta beyin arter tıkanması uygulanan kraniektomi uygulanacak tekrarlanabilir bir yöntem oluşturmaktır.

Sıçanlarda Orta Beyin Arterinin Seçici ve Kalıcı Tıkanması: Motor ve Mekansal Hafıza Eksikliklerini İnceleme Deneysel Yaklaşımı

Öğrenin patlayıcı beyin travması sonrası serebral arter reaktivitesini basınçlı kemirgen orta serebral arter segmentleri kullanarak değerlendirme yöntemini. Bu protokol vasküler hasar mekanizmalarını anlamaya ve tedavi stratejileri geliştirmeye yardımcı olur.

Serebral arterler patlama kaynaklı Neurotrauma etkilerini basınçlı kemirgen orta

Daha fazla video keşfet