Name: GC-MS Termal Desorpsiyon Örneklemesi için Headspace Uçucu Toplama Tekniği kullanılarak Çiçek Kokusu Volatiles Hızlı Toplama (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-12-10T12:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 22 s
Description: Keşfedin çiçek kokusu uçucularını hızlı toplama yöntemiyle bitki biyolojisi ve polinasyon araştırmalarında. Bu teknik, örnekleme süresini saatlerden on dakikaya indirerek zararsız analiz sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

USDA-ARS Araştırma Projesi numarası 6036-22000-028-00D. Bu yayında ticaret, firma veya şirket adlarının kullanımı okuyucunun bilgi ve kolaylığı içindir. Bu tür kullanım, Amerika Birleşik Devletleri Tarım Bakanlığı veya Tarım Araştırma Servisi'nin uygun olabilecek diğer ürün veya hizmetin hariç tutulması için resmi bir onay veya onay anlamına gelmez. Ayrıca, Florida Üniversitesi Biyoloji Bölümü-Lewis ve Varina Vaughn Bursu Orkide Biyolojisi (2017) ve Florida Üniversitesi Lisansüstü Araştırma Bursu (2014-2018) de fon sağladı. Biz de bu videonun çekimleri sırasında kullanılan orkide bitki için Stetson Üniversitesi'nden Cindy Bennington teşekkür ederiz.

NOT: Parfüm veya kokulu losyonlar ve ürünler bu işlemlerin herhangi birinde giyilmemelidir.
1. Çiçek seçimi
NOT: Kullanılan çiçekler ya çevrede doğal olarak yetişebilir ya da yapay çevre koşullarında tutulabilir. Toplama sırasında sıcaklık, nem ve ışık seviyesi kullanılan özel çiçek türlerine ve ne tür verilerin toplandığına bağlı olarak değişebilir. Örneğin, kokunun günün saatine göre değişip değişmediğini belirlemek için aynı çiçek için gündüz ve gece veri toplanmış ve hem yerinde hem de sera çiçeklerinden toplanmıştır.
<ol><li>Örnek toplama süresini standartlaştırmak için başlangıçta açılmamış bir çiçek seçin. Bu zaman içinde koku değişen bir çiçek için kontrol eder.</li>
	<li>Çiçeklenme süresine bağlı olarak, mümkünse, tüm numuneler için standart bir zaman belirleyerek, numuneyi toplamak için çiçeklenmeden sonra en az 24 saat bekleyin.</li>
	<li>Bir bitki üzerinde birden fazla çiçek çiçek varsa, aynı çiçek tekrarlanan örnekleme sağlamak için bant veya benzer bir şey işaretleme ile kullanılacak bir işaretleyin.</li>
</ol>2. Malzeme hazırlama
<ol><li>Fırın poşetleri (yaklaşık 40,5 cm × 44,5 cm) ve oluklu PTFE tüp kullanın.</li>
	<li>Başlangıçta, ~ 30 dk için suda kalan plastik bileşikleri kaldırmak için fırın torbaları kaynatın. Kurutmak için 175 °C'de fırında pişirin.</li>
	<li>Torbalar kuruduktan sonra, fırın poşetlerinin kapalı ucunun her köşesine polipropilen böyük birleşim ekleyin. Bu ekler, tüplerin bağlantısının kömür filtrelenmiş havayı içeri itmesine ve kokuyu headspace'ten çıkarmasına olanak sağlar.</li>
	<li>Tüm torbaları ve tüpleri %75 etanolile durulayın. Durulama dan sonra her iki hava kurualım.</li>
	<li>Fırın poşetleri kuruduktan sonra, kısık ateşte fırında poşet ler ve tüpler, yaklaşık 74-85 °C 30 dk.</li>
</ol>3. Uçucu toplama
NOT: Steril neopren eldivenler bu işlem boyunca giyilmelidir, çünkü torba veya filtre kartuşlarıile temas etmek numuneleri kirletebilir.
<ol><li>Seçilen çiçeği fırın poşeti ile kaplayın. Çantaiçine istenmeyen hava akışını önlemek için çiçeğin altında plastik bir zip kravat ile birlikte sıkıca çanta cinch.</li>
	<li>Toplama ekipmanının hava çıkışından bir tüp takın ve fırın torbasındaki bölme birliklerinden birine bağlayın.</li>
	<li>Diğer bölme birliğinde, gözenekli polimer adsorbent içeren bir cam filtre kartuşu takın.</li>
	<li>Vakum girişindeki toplama ekipmanına ikinci bir tüp takın. İkinci tüpün ucunu cam uçucu toplama filtresi kartuşu üzerine bağlayın.</li>
	<li>~0,05 L/dk olarak belirlenen aynı anda hem hava pompasını hem de vakumu açın. Çiçeğin etrafındaki boşluk havayla dolacak, ama aşırı şişirilmeyecek. Sistem, torbadan filtreden hava çekerek çiçek uçucularını hapseder.</li>
	<li>Makinenin 10 dakika çalışmasına izin verin ve sonra hem hava pompasını hem de vakumu kapatın. NOT: Daha az miktarda koku üreten/yakan çiçek türlerinin daha uzun bir süre için örnekalınması gerekebilir.</li>
	<li>Tüpleri ve cam filtre kartuşu sökün. Filtreyi vidalı kapaklı cam bir şişeye yerleştirin. Kapak başladıktan sonra şişeyi PTFE boru ipliği bandıyla kapatın.</li>
	<li>Örnekleri GC-MS kullanılarak analiz edilene kadar dondurucuda saklayın.</li>
	<li>Temiz bir fırın torbası ve cam filtre ile bu işlemi tekrarlayın, boş bir fırın torbası ile bu kez, bir kontrol olarak boş bir hava örneği toplamak için. Bu, toplanan arka plan uçucularının tanımlanmasını sağlar. NOT: Bazı çiçekler gün boyunca değişen koku seviyeleri ürettiğinden, her gün yaklaşık aynı saatte numune toplamanın tekrarlanması gerekir.</li>
</ol>4. GC-MS
<ol><li>Cam filtre kartuşu dondurucudan çıkarın ve enjektör bağlantı noktasına gc-MS yerleştirin.</li>
	<li>Termal toplama kapanında (TCT) helyum gazı akışı içinde 8 dk için 220 °C'ye kadar ısıtılarak adsorbentten gözenekli polimer adsorbentüzerinde toplanan kafa boşluğu uçucuları serbest bırakın (hız: 1,2 mL/dk).</li>
	<li>-130 °C'deki TCT soğuk kapan ünitesinde desorbed bileşikleri toplayın. Soğuk kapan sıcaklığı GC-MS programı tarafından düzenlenir.</li>
	<li>TCT soğuk kapan ünitesinin bağlı olduğu gaz kromatografının kılcal sütununa bileşikleri enjekte etmek için TCT soğuk tuzak ünitesini flaş ısıtın. TCT yöntemi -20 °C'de başlar ve 150 °C'de biter.</li>
	<li>GC-MS'i 40 °C'den 280 °C'ye 15 °C/dk,40 °C'de 5 dk bekletecek şekilde programlayın.</li>
</ol>5. Veri analizi
<ol><li>Tanımlama için, örneğin kütle spektrumları kütüphanelerinden (NIST ve Kimyasal Ekoloji Bölümü, Goteborg Üniversitesi, İsveç11),yanı sıra uçucu maddelerin tutma sürelerini otantik bileşik standartların12kez tutma sürelerini karşılaştırın.</li>
	<li>Ortak tekrarlayan zirveleri belirlemek için toplanan uçucu kromatogramları karşılaştırın.</li>
	<li>Tepe uçucu tespit ettikten sonra, daha önce çiçek kokuları10açıklanan olup olmadığını belirlemek için Feobaz (semiyochemicals ve feromonlar online veritabanı) kullanın.</li>
</ol>

<ol><li>Knudsen, J. T., Tollsten, L., Bergstrom, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Floral+scents-+A+checklist+of+volatile+compounds+isolated+by+head-space+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Phytochemistry%22%5BJournal%5D)">Floral scents- A checklist of volatile compounds isolated by head-space techniques.</a> Phytochemistry. 33, 253-280 (1993).</li>
<li>Dudareva, N. A., Pichersky, E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDudareva%2C+NA+%22Biology+of+floral+scent%22">Biology of floral scent</a>. , CRC Taylor and Francis. Boca Raton, FL. (2006).</li>
<li>Altenburger, R., Matile, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rhythms+of+fragrance+emission+in+flowers%5BTitle%5D)+AND+%22Planta%22%5BJournal%5D)">Rhythms of fragrance emission in flowers.</a> Planta. 174, 242-247 (1988).</li>
<li>Dodson, C. H., Dressler, R. L., Hills, H. G., Adams, R. M., Williams, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biologically+active+compounds+in+orchid+fragrances%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Biologically active compounds in orchid fragrances.</a> Science. 164, 1243-1249 (1969).</li>
<li>Theis, N., Raguso, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+pollination+on+floral+fragrance+in+thistles%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chemical+Ecology%22%5BJournal%5D)">The effect of pollination on floral fragrance in thistles.</a> Journal of Chemical Ecology. 31 (11), 2581-2600 (2005).</li>
<li>Heath, R. R., Manukian, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+evaluation+of+systems+to+collect+volatile+semiochemicals+from+insects+and+plants+using+a+charcoal-infused+medium+for+air+purification%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chemical+Ecology%22%5BJournal%5D)">Development and evaluation of systems to collect volatile semiochemicals from insects and plants using a charcoal-infused medium for air purification.</a> Journal of Chemical Ecology. 18, 1209-1226 (1992).</li>
<li>Cancino, A., Damon, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+floral+fragrance+components+of+species+of+Encyclia+and+Prosthechea+%28Orchidaceae%29+from+Soconusco%2C+southeast+Mexico%5BTitle%5D)+AND+%22Lankesteriana%22%5BJournal%5D)">Comparison of floral fragrance components of species of Encyclia and Prosthechea (Orchidaceae) from Soconusco, southeast Mexico.</a> Lankesteriana. 6, 83-139 (2006).</li>
<li>Cancino, A., Damon, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fragrance+analysis+of+euglossine+bee+pollinated+orchids+from+Soconusco%2C+south-east+Mexico%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Species+Biology%22%5BJournal%5D)">Fragrance analysis of euglossine bee pollinated orchids from Soconusco, south-east Mexico.</a> Plant Species Biology. 22, 129-134 (2007).</li>
<li>Sadler, J. J., Smith, J. M., Zettler, L. W., Alborn, H. T., Richardson, L. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fragrance+composition+of+Dendrophylax+lindenii+%28Orchidaceae%29+using+a+novel+technique+applied+in+situ%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Environmental+Science%22%5BJournal%5D)">Fragrance composition of Dendrophylax lindenii (Orchidaceae) using a novel technique applied in situ.</a> European Journal of Environmental Science. 1, 137-141 (2011).</li>
<li>Ray, H. A., Stuhl, C. J., Gillett-Kaufman, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Floral+fragrance+analysis+of+Prosthechea+cochleata+%28Orchidaceae%29%2C+an+endangered+native%2C+epiphytic+orchid%2C+in+Florida%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Signaling+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Floral fragrance analysis of Prosthechea cochleata (Orchidaceae), an endangered native, epiphytic orchid, in Florida.</a> Plant Signaling and Behavior. , (2018).</li>
<li>National Institute of Standards and Technology. U.S. Department of Commerce. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.nist.gov/">https://www.nist.gov/</a> (2019).</li>
<li>The Pherobase: Databse of Pheromones and Semiochemicals. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.pherobase.com/">http://www.pherobase.com/</a> (2019).</li>
</ol>

Yazarlar çıkar çatışması beyan etmezler.

Bu teknik örnekleme hızı ve taşınabilirliği açısından inanılmaz derecede değerli olmasına rağmen, bir sınırlama onu epifitik türler için ya da ağaçlarda yetişenler için kullanıyor, yerden değil. Orijinal çalışmada10, örneklenmiş çiçeklerden biri epifitik oldu. Makine serbestçe asılamayacak kadar ağır olduğundan, örnekleme için kararlı, yüksek bir taban yapılmalıdır. Ayrıca, makine ya bir elektrik prizine takılabilir ya da pille çalışan, bu nedenle uzun alan örneklemesi varsa, makine kullanılmadığı...

Çiçekler genellikle tozlaştırıcılar çekmek için kullanılan bir koku üretmek. Bu kokular birçok kimyasal bileşikler tüm bir çiçek karışımı1,2,3olarak birlikte hareket oluşur. Bu kokular olmadan, çiçekler tozlaştırıcılar kullanarak genetik bilgi aktarmak için daha az olası olacaktır. Çiçek kokusu birçok çiçekli bitki ailelerde belgelenmiştir, Orchidaceae daha yaygın ailelerden biri olan4okudu . Tozlaşma çiçek kokusu rolünü anlamak için, zararsız toplamak ve günün farklı saatlerinde çiçek yayılan kimyasal bileşikleri analiz etmek önemlidir ve hafta çiçek açık birkaç gün boyunca, koku zaman içinde değişebilir gibi5.
Örnekleme bu tür için erken bir protokol Heath ve Manukian6tarafından geliştirilmiştir. Örnekleme yöntemlerinin amacı, incelenmekte olan numune (örneğin, bitkiler, böcekler) üzerindeki stresi azaltmaktı. Daha önceki kağıtlar bitki için yıkıcı prosedürler gerekli olduğunu belgelenmiş, bu koku toplamak için çiçek açan çiçekleri kaldırma gibi. Cancino ve Damon7tarafından daha yeni çiçek koku yayınları,8 benzer yöntemler kullanılır. Bu çalışma cam odaları na çiçekler koymak ve üzerlerine saflaştırılmış hava geçti; sonra haznedeki koku bileşikleri açık Pasteur pipetlerinde gözenekli polimer adsorbentlere emilir. Kokular bu çalışma sırasında en az iki saat boyunca toplanmıştır. Sadler ve ark.9 güney Florida'da bir epifitik orkide üzerinde çiçek koku çalışmaları yürütülen, çok orijinal çalışma10gibi . Yine, bu çalışma da gözenekli polimer adsorbent üzerine toplanan koku ile, koku uçucu toplamak için iki saatten fazla örneklenmiş çiçekler gerekli. Kağıt burada çok daha hızlı örnekleme için izin veren bir tahribatsız yöntem sunuyor, sadece 10 dakika süren. Ayrıca, yerine bir cam odası fırın pişirme torbaları kullanarak kullanılır, hangi odanın daha esnek hareket sağlar ve çiçeklere zarar olasılığını azaltmak. Bu çantalar, numuneye veya çevredeki malzemeye zarar vermeden tek tek numunelere kolayca uyacak çanta boyutunu seçme seçeneğinin çeşitli boyutlarda olması yla birlikte gelir. Bu çalışmada kullanılan adsorbent Tenax Gözenekli Polimer Adsorbent oldu. Bu Porapak'tan farklıdır, çünkü numune analiz için GC-MS sütununa termal olarak desorbe edilebilir ve kimyasal bir çözücünün kullanımını ortadan kaldırır.
Bu çalışmadaki yöntemler, çiçekler tarafından üretilen koku uçucularını hızlı bir şekilde örneklemenin bir yolunu sağlar ve böcek feromonları veya mantar uçucuları gibi diğer örneklerden de uçucu ları örneklemek için kullanılabilir. Örnekleme için daha az süre, numune üzerinde daha az stres olduğu ve kısa bir süre içinde birçok numune toplama yeteneği anlamına gelir. Örneğin, Sadler ve ark.9,çiçek sadece geceleri kokulu, bu yüzden sadece iki veya üç örnek her gece toplanabilir. Buradaki yöntemle, numuneler tüm gece aynı çiçekten 15-20 dakikalık aralıklarla alınabilir. Ayrıca, cam odaları yerine çanta lar kullanılarak, kafa boşluğu, nesli tükenmekte olan veya tehdit edilen bitki türleri üzerinde yerinde toplama için sahada örnekleme için daha kolay askıya alınabilir. Burada sunulan yöntemi kullanarak yerden 1,5-2 metre yükseklikteki çiçekleri örnekleyebildik. Bu yöntemler laboratuvarda ve alanda koku toplama için son derece yararlıdır ve araştırmacılara numuneye hızlı ve tahribatsız bir örnekleme tekniği sağlar.

<table><tbody><tr><td>Bölme Birliği</td><td>Cole-Palmer</td><td>UX-06390-10</td><td></td></tr><tr><td>FEP boru</td><td>Cole-Palmer</td><td>UX-06407-60</td><td></td></tr><tr><td>Gaz Kromatografisi</td><td>Hewlett Packard</td><td>6890</td><td></td></tr><tr><td>Cam Yünü, Silanize</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>20411</td><td></td></tr><tr><td>Giriş astarı</td><td>Agilent</td><td>5062-3587</td><td></td></tr><tr><td>Kütle Spektrometresi</td><td>Hewlett Packard</td><td>5973</td><td></td></tr><tr><td>Reynolds fırın çantası</td><td>Reynolds Tüketici Ürünleri</td><td>Türkiye boyutu</td><td></td></tr><tr><td>Tenax Gözenekli Polimer Adsorban</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>11982</td><td></td></tr></tbody></table>

gc-ms termal desorpsiyon Örneklemesi için headspace uçucu toplama tekniği kullanılarak Çiçek kokusu volatiles hızlı toplama

Rapid Collection of Floral Fragrance Volatiles using a Headspace Volatile Collection Technique for GC-MS Thermal Desorption Sampling

Birçok çiçek ailelerinin kokuları örneklenmiş ve uçucu analiz edilmiştir. Kokuları oluşturan bileşikleri bilmek tehdit altında veya nesli tükenmekte olan çiçeklerin korunması için önemli bir adım olabilir. Çiçek kokusu tozlaştırıcıları çekmek için çok önemli olduğundan, bu yöntem tozlaşmayı daha iyi anlamak ve hatta geliştirmek için kullanılabilir. Biz daha sonra bir GC-MS tarafından analiz edilir çiçek koku uçucu toplamak için taşınabilir kömür hava filtresi ve vakum kullanarak bir protokol salar. Bu yöntem kullanılarak, koku uçucu kolayca taşınan bir makine ile tahribatsız bir yöntem kullanılarak örneklenebilir. Bu metodoloji hızlı örnekleme prosedürü kullanır ve örnekleme süresini 2-3 saatten yaklaşık 10 dakikaya indirer. GC-MS kullanılarak, koku bileşikleri otantik standartlara göre ayrı ayrı tanımlanabilir. Koku ve kontrol verilerini toplamak için kullanılan adımlar, malzeme kurulumundan veri çıktısını toplamaya kadar sunulur.

GC-MS'den elde edilen temsili veriler Şekil 1'dekromatogram olarak gösterilmiştir. Kromatograma ek olarak, sonuçların bir veri dosyası da sağlanır (Ek Dosya 1). Bu veri dosyası, her tepe (RT) için bekletme süresini ve bu tepenin hangi bileşik olduğunun (Kitaplık/Kimlik) tanımlanmasını sağlar. 10:00 ve 15:00 dakika arasındaki zirveler10bileşiklerin moleküler ağırlığı nedeniyle, çiçek uçucu vardır. Zirvelerin üzerindeki sayılar, sonuçların veri dosyasın...

Burada, çiçek açan çiçeklerden çiçek kokusu uçucuları toplamak için, tahribatsız bir örnekleme prosedürü kullanarak bir protokol salıyoruz.

GC-MS Termal Desorpsiyon Örneklemesi için Headspace Uçucu Toplama Tekniği kullanılarak Çiçek Kokusu Volatiles Hızlı Toplama

Fragrances of many flower families have been sampled and the volatiles analyzed. Knowing the compounds that make up the fragrances can be an important ...

Çiçek kokusu tozlaştırıcıları çekmek için çok önemli olduğundan, bu yöntem yerli çiçek türlerinin tozlaşmasını daha iyi anlamak veya geliştirmek için kullanılabilir. Bu yöntemle koku uçucuları, kolayca taşınan bir makine ile tahribatsız bir yöntem kullanılarak örneklenir. Bu metodoloji hızlı örnekleme, iki ila üç saat 10 dakika örnekleme süresini kesme kullanır.Bu yöntemler, çiçekler tarafından üretilen uçucuları hızlı bir şekilde örneklemenin bir yolunu sağlar ve böcek feromonları gibi diğer örneklerden de uçucu madde örneklemek için kullanılabilir. Başlamak için, başlangıçta açılmamış bir çiçek seçin ve aynı çiçeğin tekrarlanan örneklemesini sağlamak için çiçeği işaretleme bandıyla işaretleyin. Kalan plastik bileşikleri temizlemek için 30 dakika boyunca suda fırın torbaları kaynatın.Kurutmak için, 60 dakika boyunca 175 derece santigrat bir fırında pişirin. Torbalar kuruduktan sonra, fırın poşetlerinin kapalı ucunun her köşesine polipropilen böyük birleşim ekleyin. Tüm torbaları ve tüpleri %75 etanolile durulayın ve havanın kurumasına izin verin.Daha sonra, 30 dakika boyunca 74 ila 85 derece santigrat arasında, kısık ateşte bir fırında torba ve tüpler pişirin. Çiçeklenme süresine bağlı olarak, mümkünse en az 24 saat çiçeklenme sonra örnek toplamak için bekleyin. Seçilen çiçeği fırın poşeti ile kaplayın.Çantaiçine istenmeyen hava akışını önlemek için çiçeğin altında plastik bir zip kravat ile birlikte sıkıca çanta cinch. Steril neopren eldiven ler giyin, toplama ekipmanının hava çıkışından bir tüp takın ve fırın torbasındaki bölme birliklerinden birine bağlayın. Diğer bölme birliğinde, gözenekli polimer adsorbent içeren bir cam filtre kartuşu takın.Vakum girişindeki toplama ekipmanına ikinci bir tüp takın. İkinci tüpün ucunu cam uçucu toplama filtresi kartuşu üzerine bağlayın. Aynı anda hem hava pompasını hem de vakumu açın ve dakikada 0,05 litre olarak ayarlayın.Çiçeğin etrafındaki baş boşluğu havayla dolu ama aşırı şişirilmiş değil. Sistem, torbadan filtreden hava çekerek çiçek uçucularını hapseder. Makinenin 10 dakika çalışmasına izin verin.Sonra hem hava pompasını hem de vakumu kapatın. Tüpleri ve cam filtre kartuşu sökün. Filtreyi cam bir şişeye yerleştirin ve bir kapağı vidalayın.Şişeyi PTFE boru ipliği bandı ile kapatın. Örneği GCMS analizine kadar dondurucuda saklayın. Kontrol olarak boş bir hava numunesi toplamak için bu işlemi boş bir fırın poşeti ile tekrarlayın.Aynı uçucu ların tutarlı çoğaltmaları için, bazı çiçekler gün boyunca değişen koku seviyeleri ürettiğinden, numune koleksiyonunu her gün aynı anda tekrarlayın. İlk olarak, cam filtre kartuşu dondurucudan çıkarın ve enjektör bağlantı noktasında bir GCMS içine yerleştirin. Adsorbentten gözenekli polimer adsorbent üzerinde toplanan kafa boşluğu uçucuları serbest bırakmak için, termal toplama kapanını dakikada 1,2 mililitre helyum gazı akışı içinde sekiz dakika boyunca 220 santigrat dereceye ısıtın.Ortak tekrarlayan zirveleri belirlemek için toplanan uçucu kromatogramları karşılaştırın. Tepe uçucu tespit ettikten sonra, daha önce çiçek kokuları tarif edilmiş olup olmadığını belirlemek için Febasbase kullanın. Bu çalışmada GCMS'den elde edilen temsili veriler kromatogram olarak gösterilmiştir.10 ila 15 dakika arasındaki zirveler çiçek uçucu vardır. Toplanan uçucu lar daha önce bir çiçek kokusu tarif edilmiş olup olmadığını belirlemek için Pherobase başvurulan edildi. Örneğin, 10.311 bekletme süresi ile bileşik sayısı 21 benzaldehit olarak tanımlanmıştir.Benzaldehit, bitki ailesi tarafından düzenlenen ve koku bileşiğinin tespit edildiği tüm çiçek türlerinin bir listesi ile Feobasüste aranabilir. Orkide türleri burada gösterilmiştir, hangi benzaldehit çiçek kokusu mevcut olduğu tespit edilmiştir. Önceki yöntemler örnek başına 2-4 saat sürdü.Numuneyi filtreden çıkarmak için bir çözücü kullanılması GCMS'de bir çözücü tepesine neden olur. Bu bileşikleri sıfırdan 3.5 dakikaya kadar saklar. Bu yöntem tüm bileşiklerin görülmesini sağlar.

rapid-collection-floral-fragrance-volatiles-using-headspace-volatile

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Biyokimya

Küçük doku örneklerinde birden fazla bitki hormonların hızlı çıkarma ve analiz için izin veren basit bir yöntem sağlanır. Bu prosedür, buhar faz ekstraksiyon ağırbaşlı arıtma adımı olarak kullanır. Örnekleri, GC / MS ile ağırlıklı olarak üretir kimyasal iyonizasyon (M 1) + iyonları tarafından analiz edilir.

Stres Cevaplarının sırasında Bitki Hormonları İzlenmesi

İkincil elektrosprey iyonizasyon kütle spektrometresi (Sesi-MS), uçucu organik bileşikler (VOC) tespiti gerek kalmadan herhangi bir numune ön işlemesi için olanak sağlar. Bu protokol Sesi-MS kullanılarak bakteriyel VOC (dakikalar içinde) hızlı karakterizasyonu için yönergeler sağlar.

İkincil Elektrosprey İyonizasyon Kütle Spektrometresi (Sesi-MS) ile karakterize Bakteriyel uçucu

Meyve uçucu bileşik analizi için hızlı bir yöntem tarif edilmiştir. Numunenin bir Homojenizasyondan tepe boşluğu içinde mevcut uçucu bileşikler hızla ayrılmış ve bir yüzey akustik dalga (SAW) sensörü ile birlikte son derece hızlı gaz kromatografisi (GC) ile tespit edilir. Veri işleme ve analiz için bir prosedür de tartışılmıştır.

Elektronik Burun kullanarak Meyve Uçucu Analizi

Olfaktör ipuçları böcekler birçok farklı davranışlar arabuluculuk, bileşikler ve uçucu yüzlerce onlarca oluşan genellikle kompleks karışımlarıdır. Böcek anten lob çok kanallı bir kayıt ile gaz kromatografisi kullanarak, biyolojik olarak aktif bileşiklerin belirlenmesi için bir yöntem açıklanmaktadır.

Böcek antennal Lob Gaz Kromatografisi-Multi-ünite Recordings (GCMR) kullanarak Olfaktör Uçuculuk tanımlanması

Sorbent doldurulmuş termal desorpsiyon borular üzerinde toplandı ve TNT RDX patlayıcı buharlar Iz bir elektron yakalama detektörü ile GC bağlanmış programlanmış bir sıcaklık desorpsiyon sistemi kullanılarak analiz edildi. Enstrümantal analiz enstrümantasyon ve sürüklenme kayıpları için örnek değişkenliği ve hesabı azaltmak için doğrudan sıvı birikimi yöntemi ile birleştirilir.

Programlı Sıcaklık Sızdırma Gaz Kromatografi-Elektron Yakalama Dedektörü tarafından Trace Patlayıcı Buharlar Nicel Saptanması

Küçük işçi karınca türlerin Colobopsis explodens kendi çene kemiğinde bezi hipertrofik rezervuarlar sonraki solvent ekstraksiyon ve çözümleme gaz kromatografi-kütle spektrometresi tarafından depolanan balmumu benzeri içerik yalıtmak için kesmiştim. Ek açıklama ve kimlik uçucu bileşenlerin açık kaynak yazılım MetaboliteDetector kullanarak da açıklanmıştır.

Yalıtım Borneo dan çene kemiğinde bezi rezervuar İçindekiler ' GC-MS ve MetaboliteDetector göre Volatilome analiz için karıncalar (karınca) patlayan

Koku sinyallerinin hayvan iletişiminde nasıl kullanılabileceğini anlamak için örnekleme ve analiz için etkili bir metodoloji geliştirdik. Özellikle, hayvan kokularının ve koku işaretlerinin uçucu bileşenlerini analiz etmek için gaz kromatografisi-kütle spektrometresi ile birleştiğinde kafa boşluğu katı faz mikrokstrasyonu kullanıyoruz.

Hayvan Kokusu Sinyallerinin Örneklemesi ve Analizi

Toplam Buharlaşma Katı Faz Mikroextraction (TV-SPME), bir SPME fiber üzerine analiz edilirken sıvı bir numuneyi tamamen buharlaştırır. Bu, analitenin sadece çözücü buharı ve SPME fiber kaplama arasında bölünmesine izin verir.

Gaz Kromatografisi-Kütle Spektrometresi, Adli Bir Araç Olarak Toplam Buharlaşma Katı Fazlı Mikroextraction ile Eşleştirilmiştir

Olgun frenk üzümü meyvelerinde hızlı, güvenilir ve yarı otomatik uçucu tanımlama ve niceleme için burada bir headspace katı faz mikroextraction-gaz kromatografi platformu açıklanmıştır. Bu teknik, meyve aroması hakkındaki bilgileri artırmak ve üreme amacıyla gelişmiş lezzete sahip kültivarları seçmek için kullanılabilir.

Gaz Kromatografisi-Kütle Spektrometresi ile Birleştirilmiş Headspace Katı Faz Mikroextraction Kullanarak Frenk Üzümü Meyvesinde Uçucu Bileşiklerin Profillemesi

Bu protokol, biyolojik bir numuneden uçucu organik bileşiklerin vakum destekli sorbent ekstraksiyon yöntemi, Entech Numune Hazırlama Rayı kullanılarak kütle spektrometresi ile birleştirilmiş gaz kromatografisi ve veri analizi ile ekstraksiyonunu açıklar. Ayrıca biyolojik örneklerin kültürünü ve kararlı izotop sondalamasını da açıklar.

Vakum Yardımlı Sorbent Ekstraksiyonu ile İnsanla İlişkili Numunelerden Aktif Olarak Üretilen Mikrobiyal Uçucu Organik Bileşiklerin Yakalanması

Burada, solvent destekli aroma buharlaştırma ve solvent ekstraksiyonu ve ardından her tür çay örneğine uygulanabilen gaz kromatografisi-kütle spektrometrisi kullanılarak çay ekstraktlarının uçucu bileşenlerini zenginleştirmek ve analiz etmek için bir yöntem sunulmaktadır.

Solvent Destekli Aroma Buharlaştırma Zenginleştirmesine Dayalı Çay Aroması Analizi

Keşfedin çiçek kokusu uçucularını hızlı toplama yöntemiyle bitki biyolojisi ve polinasyon araştırmalarında. Bu teknik, örnekleme süresini saatlerden on dakikaya indirerek zararsız analiz sağlar.

GC-MS Termal Desorpsiyon Örneklemesi için Headspace Uçucu Toplama Tekniği kullanılarak Çiçek Kokusu Volatiles Hızlı Toplama

Daha fazla video keşfet