GC-MS Termal Desorpsiyon Örneklemesi için Headspace Uçucu Toplama Tekniği kullanılarak Çiçek Kokusu Volatiles Hızlı Toplama

Burada, çiçek açan çiçeklerden çiçek kokusu uçucuları toplamak için, tahribatsız bir örnekleme prosedürü kullanarak bir protokol salıyoruz.

Çiçek kokusu tozlaştırıcıları çekmek için çok önemli olduğundan, bu yöntem yerli çiçek türlerinin tozlaşmasını daha iyi anlamak veya geliştirmek için kullanılabilir. Bu yöntemle koku uçucuları, kolayca taşınan bir makine ile tahribatsız bir yöntem kullanılarak örneklenir. Bu metodoloji hızlı örnekleme, iki ila üç saat 10 dakika örnekleme süresini kesme kullanır.

Bu yöntemler, çiçekler tarafından üretilen uçucuları hızlı bir şekilde örneklemenin bir yolunu sağlar ve böcek feromonları gibi diğer örneklerden de uçucu madde örneklemek için kullanılabilir. Başlamak için, başlangıçta açılmamış bir çiçek seçin ve aynı çiçeğin tekrarlanan örneklemesini sağlamak için çiçeği işaretleme bandıyla işaretleyin. Kalan plastik bileşikleri temizlemek için 30 dakika boyunca suda fırın torbaları kaynatın.

Kurutmak için, 60 dakika boyunca 175 derece santigrat bir fırında pişirin. Torbalar kuruduktan sonra, fırın poşetlerinin kapalı ucunun her köşesine polipropilen böyük birleşim ekleyin. Tüm torbaları ve tüpleri %75 etanolile durulayın ve havanın kurumasına izin verin.

Daha sonra, 30 dakika boyunca 74 ila 85 derece santigrat arasında, kısık ateşte bir fırında torba ve tüpler pişirin. Çiçeklenme süresine bağlı olarak, mümkünse en az 24 saat çiçeklenme sonra örnek toplamak için bekleyin. Seçilen çiçeği fırın poşeti ile kaplayın.

Çantaiçine istenmeyen hava akışını önlemek için çiçeğin altında plastik bir zip kravat ile birlikte sıkıca çanta cinch. Steril neopren eldiven ler giyin, toplama ekipmanının hava çıkışından bir tüp takın ve fırın torbasındaki bölme birliklerinden birine bağlayın. Diğer bölme birliğinde, gözenekli polimer adsorbent içeren bir cam filtre kartuşu takın.

Vakum girişindeki toplama ekipmanına ikinci bir tüp takın. İkinci tüpün ucunu cam uçucu toplama filtresi kartuşu üzerine bağlayın. Aynı anda hem hava pompasını hem de vakumu açın ve dakikada 0,05 litre olarak ayarlayın.

Çiçeğin etrafındaki baş boşluğu havayla dolu ama aşırı şişirilmiş değil. Sistem, torbadan filtreden hava çekerek çiçek uçucularını hapseder. Makinenin 10 dakika çalışmasına izin verin.

Sonra hem hava pompasını hem de vakumu kapatın. Tüpleri ve cam filtre kartuşu sökün. Filtreyi cam bir şişeye yerleştirin ve bir kapağı vidalayın.

Şişeyi PTFE boru ipliği bandı ile kapatın. Örneği GCMS analizine kadar dondurucuda saklayın. Kontrol olarak boş bir hava numunesi toplamak için bu işlemi boş bir fırın poşeti ile tekrarlayın.

Aynı uçucu ların tutarlı çoğaltmaları için, bazı çiçekler gün boyunca değişen koku seviyeleri ürettiğinden, numune koleksiyonunu her gün aynı anda tekrarlayın. İlk olarak, cam filtre kartuşu dondurucudan çıkarın ve enjektör bağlantı noktasında bir GCMS içine yerleştirin. Adsorbentten gözenekli polimer adsorbent üzerinde toplanan kafa boşluğu uçucuları serbest bırakmak için, termal toplama kapanını dakikada 1,2 mililitre helyum gazı akışı içinde sekiz dakika boyunca 220 santigrat dereceye ısıtın.

Ortak tekrarlayan zirveleri belirlemek için toplanan uçucu kromatogramları karşılaştırın. Tepe uçucu tespit ettikten sonra, daha önce çiçek kokuları tarif edilmiş olup olmadığını belirlemek için Febasbase kullanın. Bu çalışmada GCMS'den elde edilen temsili veriler kromatogram olarak gösterilmiştir.

10 ila 15 dakika arasındaki zirveler çiçek uçucu vardır. Toplanan uçucu lar daha önce bir çiçek kokusu tarif edilmiş olup olmadığını belirlemek için Pherobase başvurulan edildi. Örneğin, 10.311 bekletme süresi ile bileşik sayısı 21 benzaldehit olarak tanımlanmıştir.

Benzaldehit, bitki ailesi tarafından düzenlenen ve koku bileşiğinin tespit edildiği tüm çiçek türlerinin bir listesi ile Feobasüste aranabilir. Orkide türleri burada gösterilmiştir, hangi benzaldehit çiçek kokusu mevcut olduğu tespit edilmiştir. Önceki yöntemler örnek başına 2-4 saat sürdü.

Numuneyi filtreden çıkarmak için bir çözücü kullanılması GCMS'de bir çözücü tepesine neden olur. Bu bileşikleri sıfırdan 3.5 dakikaya kadar saklar. Bu yöntem tüm bileşiklerin görülmesini sağlar.