Sıçanlarda pulmoner hipertansiyon bir Model olarak Monocrotaline ya da Sügen ile birlikte sol Pneumonectomy
March 8th, 2019
Kemirgen sol pneumonectomy pulmoner hipertansiyon araştırma değerli bir tekniktir. Burada, fare pneumonectomy yordam ve ameliyat sonrası bakım minimal morbidite ve mortalite sağlamak için açıklamak için bir iletişim kuralı mevcut.
Pulmoner arteriyel hipertansiyon için mümkün olan en iyi modeli ürettiği için bu protokol önemlidir. Başka hiçbir model insan PAH hastalarında bulunan pleksiform lezyonlar üretir. En büyük avantajı, sağ akciğer ve pulmoner arterdeki kan akışını iki katına çıkararak endotel hasarına neden olması ve akciğerleri iki kat daha fazla çalışmaya zorlamamızdır.
Grubumuz terapötik geliştirmek için pulmoner arteriyel hipertansiyon yüksek verimli bir model geliştirmiştir. Pulmoner arter hipertansiyonyanı sıra, Bu yöntem rejeneratif tıpyararlı olabilir ve konjenital kalp defektleri veya post-pnömonektomi hastaları gibi artan pulmoner akım ile diğer hastalıklara fikir verebilir. Bu tekniği hiç yapmamış biri için tavsiyem protokolü tam olarak takip etmek ve cerrahın tam olarak ne yaptığını görebilmesini sağlamaktır.
%4 isofluran eki fareyi anestezi ettikten sonra, hayvan nefes borusunu aydınlatmak için fiber optik kaz ışığı kullanılarak entübe edilir. Gırtlağa 16 kalibrelik bir kateter yerleştirin ve entübasyonu onaylamak için kateterden nefes alan nefesteki nem yoğunluğunu gözlemlemek için soğuk bir ayna kullanın. Fareyi ventilatöre bağlayın ve fareyi mikroskop un altına 37 derece lik bir ısıtma yastığına doğru dekübit pozisyonunda yerleştirin.
Ön ayakları bantla sabitleyin ve sol göğüs kafesini ön bacağın arkasından göğüs kafesinin sonuna kadar tıraş etmek için makaskullanın. Üç sıralı% 10 povidon iyot çözeltisi ve% 70 etanol mendil ile maruz kalan cilt temizleyin ve ameliyat boyunca kalp hızı ve oksijen doygunluğu izlemek için sıçan ayağıüzerine bir nabız-oksimetre yerleştirin. Şimdi, mikroskobu ayarlayın ve cerrahi görünümü odak haline getirin.
Sonra, steril bir ortam yaratmak için farenin vücudunun üzerine steril bir perde ve alet tepsisi yerleştirin. Ve son olarak, steril enstrümanları steril alet tepsisine yerleştirin. Sol pnömonektomi yapmak için, cooley-Mayo makas ve Gerald doku forceps cerrahi perde de 2-3 santimetre delik kesmek için kullanın ve sol toraks iki santimetre uzunluğunda lateral kesi yapmak için bir cerrahi bıçak kullanın.
Kaburga ve interkostal kaslar maruz kalana kadar doku her tabaka kesmek için Cooley-Mayo makas kullanın. Üçüncü interkostal alanın kas yoluyla bir delik yapmak için bir sivrisinek kullanın. Çift uçlu bir sonda kullanarak, akciğeri hareket ettirin ve akciğer arteri görselleştirin ve McPherson-Vannas Iris makasını kullanarak interkostal kasları 1-2 santimetre genişliğe açın.
Kaburga ve kasları açık tutmak için sol plevra içine küçük bir kendini istinat retraktör yerleştirin ve pulmoner arter ve bronş erişim sağlamak için karın sol akciğer aşağı hareket ettirin. Sol ana bronş ve pulmoner arter ligasyonu için, ilk, bir ligating klip aplikatör içine orta hemoclip yük ve dikkatle pulmoner arter ortaya çıkarmak için sol akciğerüst kısmını kaldırmak için Wangensteen atravmatik forseps kullanın. Arter etrafında klips ve aplikatör kapatın, kapatmak veya sol azygos ven yırtılma değil dikkat.
Ve kas lifleri ayırmak için bademcik kullanarak daha fazla kesi açın. Ligating klipsap aplikatör içine başka bir orta Hemoclip yükledikten sonra, sol ana bronş ve sol pulmoner ven görselleştirilene kadar kesi den akciğerin alt kısmını kaldırmak için atravmatik forseps ve standart doku forseps kullanın. İkinci Hemoklip ile birlikte sol ana bronş ve pulmoner ven dikkatle ligate ve kesme veya klips yırtılma olmadan akciğer kaldırmak için makas kullanın.
Sonra, herhangi bir kan emmek ve herhangi bir kanama yı önlemek için steril gazlı bez küçük bir parça kullanın. Kaburga ve interkostal kasları kapatmak için iğne tutucu ve 4-0 prolene sütür kullanın. Interkostal kasları kapatmadan önce, cerrahi kesiden uzakta ve yedinci interkostal alana torasik kaviteye 16-gauge kateter yerleştirin ve hemen iğneyi çıkarın, kateteri yerinde bırakarak.
Göğüs tüpü çıkarıldığında, delik kapalı bağlı olacak, böylece deri ve göğüs tüpü etrafında 5-0 dikiş yerleştirin ve kaburga kapatmak için dikiş ler kravat. Çalışan bir 5-0 dikiş ile cilt ve deri altı alanı kapatın ve toraks normal negatif basıncı geri yüklemek için kateter aracılığıyla plevral boşluğundan hava tahliye etmek için üç mililitreşli şırınga kullanın. Havanın torasik kaviteye geri dönmesini önlemek için kateteri hemen bağlamak için bir iğne tutucu kullanın.
Kateteri çıkarın ve deliği kapatmak için sütür bağlayın. Pnömonektomi ve monokrotaline grupta, ağır pulmoner hipertansiyon 21 gün içinde gelişir, tedavi edilmeyen sahte hayvanların kontrolüne göre ortalama pulmoner arter basıncında bir artış kanıtlandı. Pnömonektomi artı Sugen grubunda ortalama pulmoner arter basıncı kontrol grubuna göre üç kat daha yüksektir.
Sağ ventrikül sistolik basınç da kontrol grubuna göre, hem monokrotaline ve Sugen tedavi hayvanlarda çok daha yüksektir. Hematoksilin ve eozin lekeli normal sıçan akciğer dokusu bölümlerinde alveoller ve alveoler yapılar arasındaki boşluklar belirgindir ve damarlar açık ve normal kalınlıktadır. Pulmoner arter hipertansiyon akciğer, remodeling kanıt vardır, damar duvarlarının kalınlaşma, damarlarda şiddetli daralma, ve inflamasyon ve fokal pulmoner arterit.
Hayvan akciğerini kaybetmeyi telafi etmek zorundadır, bu yüzden iyileşme döneminde sabırlı olmak önemlidir. Hayati belirtileri izleyin ve gerektiğinde ek oksijen veya akciğer hacmi verin. Sugen pulmoner arteriyel hipertansiyon klinik ilgili işareti olan endotel apoptoz oluşturur.
Kemirgenlerde sol pnömonektomi modeli bilim adamları için akış anormallikleri çalışma ve pulmoner arteriyel hipertansiyon için yeni tedaviler geliştirmek için yol açtı. Bu modelde isoflurane, Sugen ve/veya MCT kullanımı nedeniyle, kişisel koruyucu ekipmanlar her zaman giyilmelidir.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Genel Bakış
Kemirgen sol pnömonektomi, pulmoner hipertansiyon araştırmasında kritik bir tekniktir. Bu protokol, morbidite ve mortaliteyi en aza indirgemek için sıçan pnömonektomi prosedürünü ve ameliyat sonrası bakımını ana hatlarıyla belirtir.
Çalışmanın Önemli Bileşenleri
Bilim Alanı
- Pulmoner hipertansiyon
- Rejeneratif tıp
- Kardiyovasküler hastalıklar
Arka Plan
- Kemirgen sol pnömonektomi modeli, pulmoner arteriyel hipertansiyon (PAH) çalışmaları için önemlidir.
- Bu model, insan PAH hastalarında gözlenen pleksiform lezyonları taklit eder.
- Sağ akciğerde ve pulmoner arterde kan akışını artırarak endotel hasarına yol açar.
- Bu teknik, PAH ve ilgili durumlar için terapötik geliştirmeye faydalıdır.
Çalışmanın Amacı
- Pulmoner arteriyel hipertansiyon çalışmaları için güvenilir bir model oluşturmak.
- PAH için potansiyel tedavi edici müdahaleleri keşfetmek.
- Artan pulmoner akış ile diğer hastalıklar hakkında bilgiler sağlamak.
Kullanılan Yöntemler
- Sıçanlarda sol pnömonektomi prosedürü.
- Komplikasyonları azaltmak için ameliyat sonrası bakım.
- Pulmoner fonksiyon ve vasküler değişikliklerin izlenmesi.
- Geliştirilen modelde terapötik etkinin değerlendirilmesi.
Ana Sonuçlar
- Model, etkili bir şekilde pulmoner arteriyel hipertansiyonu indükler.
- İnsan hastalarda görülenlere benzer pleksiform lezyonlar gözlenir.
- Endotel hasarı mekanizmalarına dair daha iyi anlayış sağlar.
- Rejeneratif tıp ve konjenital kalp defektlerinde potansiyel uygulamalar.
Sonuçlar
- Sol pnömonektomi modeli, PAH araştırması için değerli bir araçtır.
- Protokole sıkı bir şekilde bağlı kalmak başarı için gereklidir.
- Bu yöntem, çeşitli pulmoner durumlara ilişkin bilgiler sağlayabilir.
Sıkça Sorulan Sorular
Executive Industry Relevance
This model addresses the critical need for physiologically relevant preclinical systems that replicate human pulmonary arterial hypertension pathology, including plexiform lesions. By combining hemodynamic stress with endothelial injury, it enables mechanistic de-risking of therapeutic candidates targeting vascular remodeling. The model supports target validation and lead identification efforts in cardiovascular discovery programs.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Scientific Value: Enables interrogation of therapeutic hypotheses related to angioproliferation and vascular remodeling pathways.
- Operational Value: Provides a disease-relevant system for assessing target engagement and functional validation in vivo.
- Scientific Value: Supports predictive confidence by modeling human-like plexiform lesion formation absent in other rodent PAH models.
Screening & Assay Development
- Scientific Value: Generates quantifiable hemodynamic and histological endpoints for compound screening and dose-response analysis.
- Operational Value: Standardized surgical procedure supports assay reproducibility across discovery and preclinical teams.
- Scientific Value: Facilitates preparation of validated biological systems for downstream evaluation of regenerative or anti-remodeling therapeutics.
Translational & Preclinical Research
- Scientific Value: Models disease continuity from initiation to severe pulmonary vascular remodeling, supporting translational biomarker alignment.
- Operational Value: Enables risk-adjusted advancement decisions through measurable outcomes like mean pulmonary artery pressure and right ventricular systolic pressure.
- Scientific Value: Offers mechanistic insight into endothelial dysfunction and apoptosis, relevant to clinical PAH phenotypes.
Pipeline & Workflow Integration
The model fits within the discovery continuum from target validation through lead optimization to preclinical efficacy testing, particularly for pulmonary vascular disorders.
- Discovery Biology: Supports hypothesis testing of flow-mediated injury and endothelial damage mechanisms in PAH pathogenesis.
- Screening: Delivers reproducible quantitative outputs including pressure measurements and vascular histology for compound evaluation.
- Analytics: Enables statistical comparison of hemodynamic and structural changes across treatment groups to inform go/no-go decisions.
- Translational Research: Connects to preclinical validation through replication of human-like lesion morphology and vascular thickening.
- Enterprise Reuse: Establishes a reusable preclinical platform for studying pulmonary flow abnormalities beyond PAH, including congenital heart defects.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Provides predictive confidence through replication of human PAH histopathological features, reducing mechanistic ambiguity.
- Operational Value: Delivers a standardized, scalable surgical model with defined postoperative care to ensure consistency across sites.
- Strategic Value: Improves capital efficiency by enabling early de-risking of candidates likely to fail due to lack of vascular efficacy.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted prioritization of compounds demonstrating reversal of vascular remodeling and pressure normalization.
Implementation Considerations
- Requires expertise in rodent microsurgery and vascular ligation techniques.
- Dependent on sterile surgical instrumentation, ventilator support, and hemodynamic monitoring equipment.
- Necessitates cross-team standardization of surgical timing, second-hit dosing, and endpoint assessment.
- Adaptation considerations include sex-specific responses and strain variability in pulmonary vascular reactivity.
- Practical limitation: survival rates and model fidelity depend on surgeon skill and postoperative monitoring rigor.
