Name: Sıçanlarda pulmoner hipertansiyon bir Model olarak Monocrotaline ya da Sügen ile birlikte sol Pneumonectomy (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-03-08T14:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 29 s
Description: Öğrenin, sıçanlarda sol pnömonektomi ile pulmoner arteriyel hipertansiyon modeli oluşturma yöntemini. Bu protokol, insan PAH hastalarındaki pleksiform lezyonları taklit ederek tedavi geliştirme çalışmalarına katkı sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu el yazması NIH tarafından desteklenen 7R01 HL083078-10 verir Amerikan Kalp Derneği AHA-17SDG33370112 ve ulusal kurumları, sağlık NIH K01 HL135474 YS için ve ulusal kurumları, sağlık R01 HL133554 L.H. için vermek

Aşağıda açıklanan işlemler kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi (IACUC) Icahn Tıp Fakültesi Mount Sinai adlı tarafından onaylanmıştır. Bütün fareler uygun olarak Mount Sinai "Kılavuzu Care and Use of Laboratory Animals" insana ilişkin bakım aldı.
1. ameliyat için hazırlık
<ol><li>Otoklav Cooley-Mayo eğri makas (büyük makas), düz Iris makas (küçük makas), McPherson-kenasen Iris makas (arka makas), Wangensteen doku Forsepsi (Atravmatik forseps), Gerald doku forseps, (kendi kendine istinat düz tel spekulum Retraktörü), küçük gemi cauterizer, gazlı bez, Çift uçlu sonda, ince vasküler iğne bağı ve mikro-Jacobson sivrisinek Kan durdurucu sargı forseps (sivrisinek).</li>
</ol>2. hazırlık ve entübasyon sıçan
<ol><li>Buprenorfin analjezi (0.1 mg/kg) 6-8 hafta eski erkek, Sprague-Dawley rats, ameliyat öncesi 30 dk içinde bir Subkutan Enjeksiyon yönetmek.</li>
	<li>Fareyi tek tek isoflurane %4 ve oksijen (1 L/dak) 3-4 dakika kadar fare düzgün anestezi maruz bir odaya yerleştirin (yani, bilinçsiz, yavaş yavaş, nefes ve dokunma veya ses yanıt vermiyor).</li>
	<li>
Entübasyon sıçan
	<ol>
<li>Fareyi odasından kaldırın ve bir tahta fare fareyi düz ağız kenarında kurulu ile sırtında bırakır böylece bant. Boyun düz/düz kalır iki ön diş tarafından sıçan tutmak için dize kullanın.</li>
		<li>Fiber optik kaz ışık kaynağı boyun üstü gırtlak yerleştirin, kaldırın ve parmak dilinle tutun ve ses telleri görselleştirmek için gırtlak kapağını yukarı taşı. Nefes borusu açık renklerle ses telleri yaktı; Trakea parlak olana ışık konumunu ayarlamak.</li>
		<li>Gırtlak 60 içinde içine bir 16 G kateter ekleyerek fareler entübe onlar hızlı bir şekilde uyanmak gibi kaldırılması sıçan odasından s. Fare daha önce başarılı entübasyon uyanır, fare yerine koy ve tekrar.</li>
		<li>Hemen vantilatöre isoflurane ve oksijen teslimat devam etmek için fareyi bağlayın. Dışarı solunan nefes sonda gelen nem yoğunlaşma gözlemlemek için soğuk bir ayna kullanarak entübasyon onaylayın. Hayvan hala nefes alarak göğüs genişlemesi olduğundan emin olun.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Fareyi vantilatöre bağlamak. Set 1 L/dak akmaya oksijen 70 nefes/min 0,35-0.45 gelgit hacmi ile havalandırma oranı ayarla mL. 2 – 4 cm H2O. azaltın isoflurane % 2 – 3 pozitif uç Ekspiratuar basınç (PEEP) ayarlayın.</li>
	<li>Mikroskop altında fare bir Isıtma yastığı 37 ° C'de doğru dekübitus konumuna yerleştirin Ön bacaklar aşağı bant. Ön bacak arkasında sol Göğüs kafesine sonuna kadar makasları ile tıraş. (Üç kere) % 70 etanol tarafından takip gazlı bez ve % 10 povidone-iyot solüsyonu ile cerrahi alanı temizleyin.</li>
	<li>Nabız oksimetre sıçan yaya olarak yerleştirin ve nabız ve oksijen doygunluğu ameliyat boyunca izlemek. Kalp hızı 200-500 arasında bpm ve oksijen doygunluğu olmalıdır olmalıdır > % 95.</li>
</ol>3. steril ortam hazırlanması
<ol><li>Mikroskop altında cerrahi alan görselleştirmek. Çevre steril bir kez mikroskop ayarlanamıyor çünkü bu ilk yapılmalıdır.</li>
	<li>Steril, cerrahi eldiven takmışım. Bir şey steril aletleri, cerrahi perdeleri ve sıçan vücut cerrahi alan yanı sıra dokunmayın.</li>
	<li>Steril örtü sıçan vücut üzerinde ve steril bir ortam oluşturmak için araç tepsiye yerleştirin.</li>
	<li>Steril eldiven ile steril aletlerin steril aleti tepsiye yerleştirin.</li>
</ol>4. sol Pneumonectomy cerrahi müdahale
<ol><li>Cooley-Mayo makas ve Gerald doku Forsepsi cerrahi örtüsü küçük bir delik kesmek için kullanın. Delik yaklaşık 2-3 cm çapında tam belgili tanımlık kesme görselleştirmek için olmalı ama değil çok büyük böylece sadece cilt sterilize yararlanılır.</li>
	<li>2 cm uzun yan kesi cerrahi bir bıçak kullanarak sol göğüs içinde olun. Gazlı bez ve elektrokoter kalemi kanama/korumak hemostaz yönetmek için kullanın. Cooley-Mayo makas kaburga ve interkostal kaslara maruz kadar her katmanı doku kesmek için kullanın.</li>
	<li>
İnterkostal boşluk girerken
	<ol>
<li>Sivrisinek üçüncü interkostal boşluk kas bir delik yapmak için kullanın.</li>
		<li>Çift uçlu sonda yoldan pulmoner arter görselleştirmek için akciğer taşımak için kullanın. Pulmoner arter erişilebilir değilse araştırmacı bir interkostal boşluk girebilirsiniz.</li>
		<li>Kullanım Iris makas ve McPherson-kenasen Iris makas (arka makas) interkostal kasları için yaklaşık 1-2 cm. açmak için herhangi bir kanama durdurmak için elektrokoter kalemi kullanın.</li>
		<li>Retraktörü kaburga tutmak için kendi kendine istinat bu küçük yerleştirebilir ve kasları açabilirsiniz.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Sadece sol plevra açın ve sol akciğer alt karın pulmoner arter ve bronş erişmesine izin vermek için aşağı iner. Orta hemoclip ligating klip aplikatör yükleyin.</li>
	<li>
Sol ana bronş ve sol ana pulmoner arter ligasyonu
	<ol>
<li>Sol akciğer üst bölümünü dikkatle Wangensteen Atravmatik Forseps ile pulmoner arter ortaya çıkarmak için kaldırın.</li>
		<li>Pulmoner arter klibi ve Arter etrafında aplikatör kapatarak küçük. Kapatmak ya da sol azygos ven rüptürü değil dikkatli olun. Çok zorla aksi takdirde kelepçe değil, gemi rüptürü.</li>
		<li>Belgili tanımlık kesme daha fazla kas lifleri ayırmak için bademcik kullanarak açın.</li>
		<li>Böylece hazır başka bir orta hemoclip ligating klip aplikatör yükleyin.</li>
		<li>Atravmatik forseps sol ana bronş ve sol pulmoner ven görüntülenir kadar dışarı belgili tanımlık kesme akciğer alt kısmını kaldırmak için kullanın. Atravmatik forseps olmalı çekme yukarı ve dışarı belgili tanımlık kesme akciğer taşımak için kullanılır. Akciğer doku yırtılma olmadan bir çekimde çıkardı için çok büyük olduğundan, sorunu forseps Atravmatik forseps dikkatle daha fazla akciğer çekmeye ise akciğer tutmak gereklidir.</li>
		<li>Sol ana bronş ve sol ana pulmoner ven birlikte çevrelerindeki aplikatör kapatarak ligate. Ven ve bronşlar çok zorla başka türlü kelepçe değil, gemi rüptürü.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Akciğer makasla kaldırın. Kesmek ya da klip gözyaşı değil dikkatli olun. Steril gazlı bez küçük bir parça herhangi bir kan emer ve kanama yok emin olmak için kullanın.</li>
	<li>
Kaburga ve interkostal kaslara kapatılması
	<ol>
<li>İnterkostal kaslara kapatmadan önce 16 G kateter göğüs boşluğuna cerrahi kesi uzak ve yedinci interkostal boşluk içine yerleştirin. Araştırmacı herhangi bir hayati organları ya da gemi delmek değil iğne görselleştirebilirsiniz emin olun.</li>
		<li>Kateter yerinde bırakarak iğne, hemen kaldırın. Bu bir göğüs tüpü kullanılacaktır.</li>
		<li>Kaburga ve interkostal kasları bir 4-0 prolene sütür ile kapatın.</li>
		<li>Deri ve deri altı alanı çalışan 5-0 dikiş (Malzemeler tablo) ile kapatın.</li>
		<li>Yer 5-0 dikiş (Tablo reçetesi) cilt içine ve göğüs çevresi tüp göğüs tüpü çıkardığında delik bağlı bu yüzden kapa çeneni.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Hava plevral boşluğundan negatif normal basınç Toraks içinde yeniden elde etmek için kateter aracılığıyla 3 mL şırınga ile tahliye edin. Hemen kateter göğüs boşluğuna geri dönüş hava önlemek için bir iğne bağı ile kelepçe. Hızlı bir şekilde kateter kaldırmak ve deliği kapatmak için dikiş kravat.</li>
</ol>5. ameliyat sonrası kurtarma
<ol><li>Hayvan sternal bulunduğu yer. Endotrakeal tüp yoluyla sıçan oksijen vererek devam ama isoflurane açmak. Hayvan başıboş herhangi bir noktada ambulate için yeterli kendine geldi ve güvenli bir şekilde onun kafes hayvan kadar bırakmayın.</li>
	<li>2-3 mL steril lactated zil'ın çözeltisi subkutan yönetmek.</li>
	<li>Monitör kalp hızı (≈200-500 bpm), oksijen doygunluğu (≥95%) ve hayvan onaylamak için hayvan renk de nefes alıyor.</li>
	<li>Ne zaman hayvan spontan solunum hareketleri ve boyun hareketleri yapmaya başlar ve (gibi genişletme gözler, burun hareketli ve ses için yanıt kulakları), fiziksel bizi canlı tutan tüpü hayvan kateter çekerek yanıt verir ve solunum bağlantısını kesin.</li>
	<li>Şirketin diğer hayvanların uzak boş bir kafes hayvan dönün. Hayvan en az 3 gün boyunca yalnız kalmalısınız.</li>
	<li>Ağrı kontrolü için 0,1 mg/kg buprenorfin subkutan her 12 h 3 gün boyunca yönetmek.</li>
</ol>6. yönetim "İkinci hit" MCT veya Sügen
<ol><li>Subkutan Enjeksiyon, ameliyattan sonra 1 hafta ile 1 mL MCT (60 mg/kg) veya Sügen (25 mg/kg) 1 mL yönetmek.</li>
</ol>7. terminal hasat
<ol><li>Yedi hafta sonra MCT veya Sügen yönetim, hayvan akan oksijen (1 L/dak) ve % 4 isoflurane ile bir odaya yerleştirin.</li>
	<li>Solunum yolu ile burun konisi için hayvan bağlayın. Oksijen akan tutmak ve % 2.5-3 isoflurane alt. Onun geri ve aşağı tüm uzuvların teyp hayvan yatıyordu.</li>
	<li>Tüm karın boyunca hayvan traş.</li>
	<li>
Göğüs açma
	<ol>
<li>Xyphoid için subklavyen çentik üzerinden bir neşter ile göğüs aşağı bir kesi yapmak.</li>
		<li>Doku Forsepsi xyphoid tutmak için kullanın. Pulmoner arter ve kalbi tamamen erişilebilir olana Göğüs kafesine Cooley-Mayo makasla kesme. Elektrokoter kanamayı durdurmak için kullanın. Kaburga ile Retraktörü açık tutun.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Pulmoner arter tanımlayın. Kalp, yönünü, gazlı bez altında ekleyerek ayarlayın. 20 gr IV kateter pulmoner arter pulmoner kapak ve ana pulmoner arter bifurkasyon arasında ponksiyon için kullanın. Sadece 20 G kateter arter ilerlemek ve iğne kaldırın. Pulmoner arter IV kateter içine 1.2 Fr transonik basınç kateter ilerlemek. PA eğrisi sabit olduğunda, basınç en az 10 s. tekrarlamak için sağ ventrikül basınç kaydetmek için aşağıdaki adımları kaydetmek.</li>
	<li>Kalp ve akciğerler kaldırın. Parafin içinde sabit ve Hematoksilen ve Eozin ile lekeli formalin akciğer parçalarını yerleştirin.</li>
</ol>

<ol><li>Leopold, J., Maron, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+Mechanisms+of+Pulmonary+Vascular+Remodeling+in+Pulmonary+Arterial+Hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Molecular Mechanisms of Pulmonary Vascular Remodeling in Pulmonary Arterial Hypertension.</a> International Journal of Molecular Sciences. 17 (5), 761(2016).</li>
<li>Gomez-Arroyo, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+monocrotaline+model+of+pulmonary+hypertension+in+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Lung+Cellular+and+Molecular+Physiology%22%5BJournal%5D)">The monocrotaline model of pulmonary hypertension in perspective.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 302 (4), L363-L369 (2012).</li>
<li>van Albada, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+increased+pulmonary+blood+flow+in+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22European+Respiratory+Journal%22%5BJournal%5D)">The role of increased pulmonary blood flow in pulmonary arterial hypertension.</a> European Respiratory Journal. 26 (3), 487-493 (2005).</li>
<li>Dickinson, M. G., Bartelds, B., Borgdorff, M. A. J., Berger, R. M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+disturbed+blood+flow+in+the+development+of+pulmonary+arterial+hypertension%3A+lessons+from+preclinical+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Lung+Cellular+and+Molecular+Physiology%22%5BJournal%5D)">The role of disturbed blood flow in the development of pulmonary arterial hypertension: lessons from preclinical animal models.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 305 (1), L1-L14 (2013).</li>
<li>Stenmark, K. R., Meyrick, B., Galie, N., Mooi, W. J., McMurtry, I. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+pulmonary+arterial+hypertension%3A+the+hope+for+etiological+discovery+and+pharmacological+cure%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Lung+Cellular+and+Molecular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Animal models of pulmonary arterial hypertension: the hope for etiological discovery and pharmacological cure.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 297 (6), L1013-L1032 (2009).</li>
<li>Cahill, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathophysiological+basis+of+chronic+hypoxic+pulmonary+hypertension+in+the+mouse%3A+vasoconstrictor+and+structural+mechanisms+contribute+equally%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Physiology%22%5BJournal%5D)">The pathophysiological basis of chronic hypoxic pulmonary hypertension in the mouse: vasoconstrictor and structural mechanisms contribute equally.</a> Experimental Physiology. 97 (6), 796-806 (2012).</li>
<li>Okada, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hemodynamics+modify+the+rat+pulmonary+artery+response+to+injury.+A+neointimal+model+of+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hemodynamics modify the rat pulmonary artery response to injury. A neointimal model of pulmonary hypertension.</a> American Journal of Pathology. 151 (4), 1019-1025 (1997).</li>
<li>Happé, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pneumonectomy+combined+with+SU5416+induces+severe+pulmonary+hypertension+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Lung+Cellular+and+Molecular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Pneumonectomy combined with SU5416 induces severe pulmonary hypertension in rats.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 310 (11), L1088-L1097 (2016).</li>
<li>Tanaka, Y., Schuster, D. P., Davis, E. C., Patterson, G. A., Botney, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+vascular+injury+and+hemodynamics+in+rat+pulmonary+artery+remodeling%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">The role of vascular injury and hemodynamics in rat pulmonary artery remodeling.</a> Journal of Clinical Investigation. 98 (2), 434-442 (1996).</li>
<li>Nishimura, T., Faul, J. L., Berry, G. J., Kao, P. N., Pearl, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+a+surgical+aortocaval+fistula+on+monocrotaline-induced+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Effect of a surgical aortocaval fistula on monocrotaline-induced pulmonary hypertension.</a> Critical Care Medicine. 31 (4), 1213-1218 (2003).</li>
<li>Linardi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ventricular+and+pulmonary+vascular+remodeling+induced+by+pulmonary+overflow+in+a+chronic+model+of+pretricuspid+shunt%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Ventricular and pulmonary vascular remodeling induced by pulmonary overflow in a chronic model of pretricuspid shunt.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (6), 2609-2617 (2014).</li>
<li>White, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plexiform-like+lesions+and+increased+tissue+factor+expression+in+a+rat+model+of+severe+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Lung+Cellular+and+Molecular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Plexiform-like lesions and increased tissue factor expression in a rat model of severe pulmonary arterial hypertension.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 293 (3), L583-L590 (2007).</li>
<li>Samson, N., Paulin, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epigenetics%2C+inflammation+and+metabolism+in+right+heart+failure+associated+with+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Pulmonary+Circulation%22%5BJournal%5D)">Epigenetics, inflammation and metabolism in right heart failure associated with pulmonary hypertension.</a> Pulmonary Circulation. 7 (3), 572-587 (2017).</li>
</ol>

Yazarlar hiçbir potansiyel çıkar çatışmaları var.

PAH etkilenen akciğerlerde neointimal oluşumu ve obliterasyon pulmoner arter ile vasküler proliferasyon neden şiddetli hemodinamik değişiklikler, sağ ventrikül yetmezliği ve erken ölüm7,8. Gemi duvarları değişikliklere kan akımı, artan Arteryel ve sağ ventrikül basınç direnci artırmak. PAH erken dönemlerinde, genellikle medial hipertrofisi, adventitial kalınlaşma ve muscularization küçük arterlerin ve arteriyoller gibi nonspesifik histolojik değişiklikler fareler...

Pulmoner arteriyel Hipertansiyon (PAH) pulmoner kan akımı, artmış vasküler direnç, inflamasyon ve küçük pulmoner kan damarlarının1/ remodeling artış ile karakterize ilerici ve ölümcül bir hastalıktır. Bu genellikle remodeling engel ve küçük pulmoner arterlerin vazokonstriksiyona neden olan ve sağ ventrikül afterload2artan, tıkamak vasküler lezyonlar içinde sonuçlanır. PAH birkaç başarılı farmakolojik tedaviler mevcut; bir sonucu, PAH ile ilgili mortalite kalır yüksek. Son zamanlarda, odağı pulmoner hipertansiyon pathobiology araştırma Anjiyo-nükleer silahların yayılmasına karşı hangi rolü artan pulmoner kan akımı pulmoner gelişiminde önemli bir tetikleyici olarak damar olarak kabul edilir bir mekanizma doğru taşındı 3,4remodeling.
Hayvan pulmoner hipertansiyon modellerinin hastalığın patofizyolojisi açıklamak ve uyuşturucu, hücre, gen ve protein teslimat için bir platform olarak hizmet etmiş yardımcı kritik anlayışlar hazırladık. Geleneksel olarak, kronik hipoksi indüklenen pulmoner hipertansiyon modeli ve MCT akciğer yaralanma modeli PAH patofizyolojisi5eğitim için kullanılan ana modelleri olmuştur. Ancak, artan pulmoner kan akışı ve neointimal desen insan hastalarda açıklanan değişikliklere göre yeniden üretmek için yeterli değiller. Gemi duvarları ile Anjiyo-silinme olmadan hipoksik vazokonstriksiyona bir kalinlasma kemirgenler sonuçlarında küçük akciğer damarlarının6kronik hipoksi modelinde. Ayrıca, hipoksi koşulu tersinir olduğunu. Böylece, hipoksi modeli de şiddetli PAH üretmek için yeterli değildir. MCT akciğer yaralanma modeli bazı endotel disfonksiyonu temin etmez ama karmaşık vasküler obliteratif lezyonlar ile şiddetli birincil PAH insanlarda bulunan fareler2' geliştirmek mi. Ayrıca, MCT tedavi fareler MCT kaynaklı akciğer toksisite, veno tıkayıcı karaciğer hastalığı ve miyokardit yerine PAH2ölmek eğilimindedir. Son olarak, tek başına pneumonectomy kısa bir süre içinde küçük akciğer damarlarının lezyonlarının neointimal üretmek için yeterli değil. Pneumonectomy sonra pulmoner arter basıncı7en az ayrıcalık var. İnsanlarda, kontralateral akciğer sağlıklı7olduğunda pneumonectomy iyi tolere edilir.
Ancak, bu artan pulmoner kan akışı taklit eder ve pulmoner vasküler ciddi klinik PAH karşılaştırılabilir remodeling içinde sonuç MCT ya da Sügen ile birlikte sol pneumonectomy yordam avantajlıdır. Pneumonectomy sadece 1 LOB vardır, sol akciğer yerine dört loblar vardır sağ gerçekleştirilir. Sağ akciğer kaldırılmışsa, hayvan için solunum yetersizliği telafi etmek mümkün olacaktır. Pneumonectomy-MCT modelinde yeniden neointimal desen işletilen hayvan tedavi7üzerinde % 90 geliştirir. Benzer şekilde, Anjiyo obliteratif vasküler lezyonlar, nükleer silahların yayılmasına karşı Apoptozis ve RV disfonksiyon8tarafından karakterize şiddetli PAH Sügen ve pneumonectomy sonuçlanır. Sol pneumonectomy yordam Ayrıca PAH ikna etmek için diğer cerrahi için avantajlı karşılaştırılır. Daha önce açıklanan modelleri içinde akciğerlere pulmoner kan akışını arttırmak için rats Sendromlarda caval şant veya subklavyan pulmoner arter anastomoz içerir. Bu son derece karmaşık7,9,10,11modellerdir. Bir Sendromlarda caval şant gerçekleştirmek için hayvanın karın açılması gerekiyor. Şant tüm karın organları yerine sadece akciğerlere kan akışını artırır karın aortu yerleştirilir, böylece, PAH geliştirmek için daha uzun sürer. Ayrıca, pneumonectomy ile kan akımı ise kalan akciğer çiftler şant yoluyla kan akışını belirlemek zordur. Subklavyan pulmoner arter anastomoz da birçok komplikasyonları vardır. Arteryel kan akışına Ven Trombozu anastomoz ve kanama için yol açabilir. Sendromlarda caval şant gibi anastomoz yoluyla kan akışını belirlemek zordur. Ayrıca, vasküler cerrahi becerileri gerektirir bir pahalı ve zor teknik olduğunu. Tek taraflı sol pneumonectomy kan akımı ve yamultma stres kontralateral akciğer iki katına çıkarır ve MCT veya Sügen ile birlikte, endotel hücre hasarı8, olan PAH tipik hemodinamik ve histopatolojik bulguları neden olur. 12.
Bu el yazması yenilik sol pneumonectomy fareler ve bu modellerin teknik ve fizyolojik sorunların tartışılması çok detaylı ve kapsamlı cerrahi protokol sunulmuştur. Bu iletişim kuralı şu anda kullanılabilir olmadığından, birçok müfettişler model çok zor kullanmak olduğuna inanıyoruz. Sol pneumonectomy gerçekleştiren müfettişler yüksek mortalite ve morbidite oranları hayvanlar, bilimsel değerlendirme ödün gereksiz kaybı ile ilişkili karşı karşıya kalmışlardır. Bunun yerine, birçok PAH oluşturmak için MCT enjeksiyon, kronik hipoksi veya sadece pneumonectomy gibi klasik modelleri kullanır. Ancak, bu modeller daha az MCT veya Sügen kombinasyonu ile sol pneumonectomy daha etkilidir. Bu makalenin temel amacı sol tek taraflı pneumonectomy Sıçanlarda için ilk detaylı ve tekrarlanabilir cerrahi protokol sağlar ve PAH en iyi cerrahi modelindeki sağlar eklemektir. Bu iletişim kuralı için sol tek taraflı pneumonectomy MCT veya SU5416 ile birleştirerek müfettişler bu ölümcül hastalığın patogenezi okumaya şiddetli PAH çok daha etkili ve klinik modeli oluşturmak izin verir.

<table><tbody><tr><td>Cerrahi Bıçak</td><td>Bard-Parker</td><td>371215</td><td>İnsizyon</td></tr><tr><td>Foran (İzofluran, USP)</td><td>Baxter</td><td>NDC 10019-360-40</td><td>anestezi</td></tr><tr><td>BD Anjiyokat 16 G</td><td>BD</td><td>381157</td><td>entübasyon tüpü, göğüs tüpü</td></tr><tr><td>BD 1 mL İnsülin Şırıngası</td><td>BD</td><td>329652</td> ameliyat <td>sonrası buprinex'i uygulayın</td></tr><tr><td>Biyojel Cerrahlar Cerrahi Eldivenler Biyojel</td><td></td><td>30460-01</td><td>steril cerrahi eldiven</td></tr><tr><td>Wahl BravMini+ Düzeltici</td><td>Braintree Scientific</td><td>CLP-41590 P</td><td>tıraş cerrahi bölgesi</td></tr><tr><td>SU5416</td><td>Cayman Chemical</td><td>13342</td><td>Sugen&nbsp;</td></tr><tr><td>Fiber Optik Aydınlatıcı</td><td>Cole-Parmer</td><td>EW-41723-02</td><td>entübasyon ışığı</td></tr><tr><td>Surgipro II 4-0 Sütür</td><td>Covidien</td><td>VP831X</td><td>İnterkostal kasların kapatılması</td></tr><tr><td>Polysorb 5-0 Sütür</td><td>Covidien</td><td>GL-885</td><td>Kapanış cildi</td></tr><tr><td>Orta Sürgülü Üst İndüksiyon Odası</td><td>DRE Veteriner</td><td>12570</td><td>oksijen ve izofluran iletimi</td></tr><tr><td>DRE Compact 150 Kemirgen Anestezi Makinesi</td><td>DRE Veteriner</td><td>373</td><td>oksijen ve izofluran dağıtımı</td></tr><tr><td>Küçük Gemi Koterizatör Kiti</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>18000-00</td><td>kanamayı en aza indirmek için koterizatör</td></tr><tr><td>VentElite Küçük Hayvan Vantilatörü</td><td>Harvard Aparatı</td><td>55-7040</td><td>ventilatör</td></tr><tr><td>MouseSTAT Jr</td><td>Kent Scientific</td><td>MSTAT-JR</td><td>nabız oksimetresi ve kalp atış hızı monitörü</td></tr><tr><td>Fare Pençesi Nabız Oksimetresi Sensörü</td><td>Kent Scientific</td><td>SPO2-MSE</td><td>nabız oksimetresi ve kalp atış hızı pençe sensörü</td></tr><tr><td>PhysioSuite RightTemp</td><td>Kent Scientific</td><td>PS-02</td><td>sıcaklık pedi</td></tr><tr><td>PVP Hazırlık Çözümü</td><td>Medline</td><td>MDS093944</td><td>Temizleme cerrahi alan</td></tr><tr><td>Poli-astarlı Örtü</td><td>Medline</td><td>NON21002Z</td><td>kapak hayvanı</td></tr><tr><td>3 mL şırınga</td><td>Medline</td><td>SYR103010</td><td>Ameliyat sonrası sıvıları uygulayın</td></tr><tr><td>Mikrocerrahi Kitleri, Integra&nbsp;</td><td>Miltex</td><td>95042-540</td><td>cerrahi aletler: düz tel spekulum, çift uçlu prob, McPherson-Vannas İris makası düz, düz iris makası</td></tr><tr><td>Hemostatik forseps - Mikro-Jacobson-Sivrisinek</td><td>Miltex</td><td>17-2602</td><td>sivrisinek</td></tr><tr><td>Buprenorfrin HCl 0.3 mg / mL</td><td>Par Farmasötik</td><td>NDC 42023-179-01</td><td>Ağrı kesici</td></tr><tr><td>Cooley-Mayo kavisli makas</td><td>Boncuklanma</td><td>352090</td><td>Büyük makas</td></tr><tr><td>Gerald Doku forseps</td><td>Boncuklanma</td><td>351900</td><td>forseps</td></tr><tr><td>Wangesnsteen Doku Forseps</td><td>Boncuklanma</td><td>342929</td><td>atravmatik forseps</td></tr><tr><td>Boncuklanma İnce Vasküler İğne Tutucu</td><td>Boncuklanma</td><td>354962DG</td><td>iğne tutucu</td></tr><tr><td>Crotaline</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C2401-1G</td><td>MCT</td></tr><tr><td>Surflash 20 G IV</td><td>Kateter Terumo</td><td>SR*FF2051</td><td>Organ hasadı sırasında basınç okuması için</td></tr>, <tr><td>1.2 Fr Kateterli ADVantage PV Sistemi</td>, <td>Transonic Inc</td>, <td>ADV500</td>, <td>Pulmoner arter ve sağ ventrikül basıncını kaydedin</td></tr>, <tr><td>Orta Hemoclip</td><td>Weck</td><td>523700</td>, <td>ligate damarlar,</td></tr><tr><td>Açık Bağlama Klipsi Aplikatörü; Orta, kavisli</td><td>Weck Horizon</td><td>237081</td><td>hemoclip aplikatörü</td></tr><tr><td>Cerrahi Mikroskop</td><td>Zeiss OPMI MD</td><td>1808</td><td>büyütme</td></tr></tbody></table>

sıçanlarda pulmoner hipertansiyon bir model olarak monocrotaline ya da sügen ile birlikte sol pneumonectomy

The Left Pneumonectomy Combined with Monocrotaline or Sugen as a Model of Pulmonary Hypertension in Rats

Bu protokol için biz doğru yordam adımları ve başarılı bir şekilde sol pneumonectomy gerçekleştirmek ve PAH monocrotaline (MCT) ek yönetimi ile Sıçanlarda ikna etmek için gerekli önlemleri ayrıntı veya SU5416 (Sügen). Biz de bu iki model araştırmalarda yaygın olarak kullanılan diğer PAH modelleri karşılaştırın. Son birkaç yıl içinde angioproliferation hangi rolü artan pulmoner kan akımı şiddetli gelişiminde önemli bir tetikleyici olarak pulmoner kabul edilir Pleksiform lezyonların mekanizmasının eğitim doğru odağı hayvan PAH modellerin taşındı Vasküler remodeling. Artan pulmoner akışının en umut verici kemirgen modellerinden biri bir "İkinci doz" MCT veya Sügen ile birlikte tek taraflı sol pneumonectomy. Sol akciğer kaldırılması artan ve çalkantılı pulmoner kan akımı ve vasküler remodeling yol açar. Şu anda, bu Sıçanlarda pneumonectomy cerrahinin detaylı bir işlemdir. Bu makalede adım adım bir protokol pneumonectomy ameliyat ve ameliyat sonrası bakım erkek Sprague-Dawley Sıçanlarda ayrıntıları. Kısaca, hayvan anestezi ve göğüs açılır. Bir kez sol pulmoner arter, pulmoner ven ve bronş görselleştirildiği, olmadıklarına ve sol akciğer kaldırılır. O zaman göğüs kapalı ve hayvan kurtarıldı. Kan sadece sağ akciğer üzerinde dolaşmaya zorlanır. Bu vasküler basınç artışı bir ilerici remodeling ve pulmoner arterlerin oklüzyon yol açar. MCT veya Sügen ikinci doz disfonksiyon endotel ikna etmek için kullanılan bir hafta sonrası cerrahidir. Artmış kan akımı akciğer ve endotel disfonksiyonu ile birlikte şiddetli PAH üretir. Bu yordam birincil sınırlandırılması genel cerrahi becerileri gerektirmesidir.

Kabul edilen sınıflandırma sistemine göre normal pulmoner arter basıncı (yani, 25 mm Hg) üst sınırlarını aşan bir ortalama pulmoner arter basıncı (mPAP) pulmoner hipertansiyon ile karakterizedir. Pneumonectomy + MCT grup şiddetli PAH gün 21 ile artan bir mPAP (şekil 1) tarafından geliştirilmiştir. MPAP formülle hesaplanır:
<img alt="Equation" src="/files/ftp_upload/59050/59050eq1.jpg">
<p class=...

Kemirgen sol pneumonectomy pulmoner hipertansiyon araştırma değerli bir tekniktir. Burada, fare pneumonectomy yordam ve ameliyat sonrası bakım minimal morbidite ve mortalite sağlamak için açıklamak için bir iletişim kuralı mevcut.

Sıçanlarda pulmoner hipertansiyon bir Model olarak Monocrotaline ya da Sügen ile birlikte sol Pneumonectomy

In this protocol, we detail the correct procedural steps and necessary precautions to successfully perform a left pneumonectomy and induce PAH in rats ...

Pulmoner arteriyel hipertansiyon için mümkün olan en iyi modeli ürettiği için bu protokol önemlidir. Başka hiçbir model insan PAH hastalarında bulunan pleksiform lezyonlar üretir. En büyük avantajı, sağ akciğer ve pulmoner arterdeki kan akışını iki katına çıkararak endotel hasarına neden olması ve akciğerleri iki kat daha fazla çalışmaya zorlamamızdır.Grubumuz terapötik geliştirmek için pulmoner arteriyel hipertansiyon yüksek verimli bir model geliştirmiştir. Pulmoner arter hipertansiyonyanı sıra, Bu yöntem rejeneratif tıpyararlı olabilir ve konjenital kalp defektleri veya post-pnömonektomi hastaları gibi artan pulmoner akım ile diğer hastalıklara fikir verebilir. Bu tekniği hiç yapmamış biri için tavsiyem protokolü tam olarak takip etmek ve cerrahın tam olarak ne yaptığını görebilmesini sağlamaktır.%4 isofluran eki fareyi anestezi ettikten sonra, hayvan nefes borusunu aydınlatmak için fiber optik kaz ışığı kullanılarak entübe edilir. Gırtlağa 16 kalibrelik bir kateter yerleştirin ve entübasyonu onaylamak için kateterden nefes alan nefesteki nem yoğunluğunu gözlemlemek için soğuk bir ayna kullanın. Fareyi ventilatöre bağlayın ve fareyi mikroskop un altına 37 derece lik bir ısıtma yastığına doğru dekübit pozisyonunda yerleştirin.Ön ayakları bantla sabitleyin ve sol göğüs kafesini ön bacağın arkasından göğüs kafesinin sonuna kadar tıraş etmek için makaskullanın. Üç sıralı% 10 povidon iyot çözeltisi ve% 70 etanol mendil ile maruz kalan cilt temizleyin ve ameliyat boyunca kalp hızı ve oksijen doygunluğu izlemek için sıçan ayağıüzerine bir nabız-oksimetre yerleştirin. Şimdi, mikroskobu ayarlayın ve cerrahi görünümü odak haline getirin.Sonra, steril bir ortam yaratmak için farenin vücudunun üzerine steril bir perde ve alet tepsisi yerleştirin. Ve son olarak, steril enstrümanları steril alet tepsisine yerleştirin. Sol pnömonektomi yapmak için, cooley-Mayo makas ve Gerald doku forceps cerrahi perde de 2-3 santimetre delik kesmek için kullanın ve sol toraks iki santimetre uzunluğunda lateral kesi yapmak için bir cerrahi bıçak kullanın.Kaburga ve interkostal kaslar maruz kalana kadar doku her tabaka kesmek için Cooley-Mayo makas kullanın. Üçüncü interkostal alanın kas yoluyla bir delik yapmak için bir sivrisinek kullanın. Çift uçlu bir sonda kullanarak, akciğeri hareket ettirin ve akciğer arteri görselleştirin ve McPherson-Vannas Iris makasını kullanarak interkostal kasları 1-2 santimetre genişliğe açın.Kaburga ve kasları açık tutmak için sol plevra içine küçük bir kendini istinat retraktör yerleştirin ve pulmoner arter ve bronş erişim sağlamak için karın sol akciğer aşağı hareket ettirin. Sol ana bronş ve pulmoner arter ligasyonu için, ilk, bir ligating klip aplikatör içine orta hemoclip yük ve dikkatle pulmoner arter ortaya çıkarmak için sol akciğerüst kısmını kaldırmak için Wangensteen atravmatik forseps kullanın. Arter etrafında klips ve aplikatör kapatın, kapatmak veya sol azygos ven yırtılma değil dikkat.Ve kas lifleri ayırmak için bademcik kullanarak daha fazla kesi açın. Ligating klipsap aplikatör içine başka bir orta Hemoclip yükledikten sonra, sol ana bronş ve sol pulmoner ven görselleştirilene kadar kesi den akciğerin alt kısmını kaldırmak için atravmatik forseps ve standart doku forseps kullanın. İkinci Hemoklip ile birlikte sol ana bronş ve pulmoner ven dikkatle ligate ve kesme veya klips yırtılma olmadan akciğer kaldırmak için makas kullanın.Sonra, herhangi bir kan emmek ve herhangi bir kanama yı önlemek için steril gazlı bez küçük bir parça kullanın. Kaburga ve interkostal kasları kapatmak için iğne tutucu ve 4-0 prolene sütür kullanın. Interkostal kasları kapatmadan önce, cerrahi kesiden uzakta ve yedinci interkostal alana torasik kaviteye 16-gauge kateter yerleştirin ve hemen iğneyi çıkarın, kateteri yerinde bırakarak.Göğüs tüpü çıkarıldığında, delik kapalı bağlı olacak, böylece deri ve göğüs tüpü etrafında 5-0 dikiş yerleştirin ve kaburga kapatmak için dikiş ler kravat. Çalışan bir 5-0 dikiş ile cilt ve deri altı alanı kapatın ve toraks normal negatif basıncı geri yüklemek için kateter aracılığıyla plevral boşluğundan hava tahliye etmek için üç mililitreşli şırınga kullanın. Havanın torasik kaviteye geri dönmesini önlemek için kateteri hemen bağlamak için bir iğne tutucu kullanın.Kateteri çıkarın ve deliği kapatmak için sütür bağlayın. Pnömonektomi ve monokrotaline grupta, ağır pulmoner hipertansiyon 21 gün içinde gelişir, tedavi edilmeyen sahte hayvanların kontrolüne göre ortalama pulmoner arter basıncında bir artış kanıtlandı. Pnömonektomi artı Sugen grubunda ortalama pulmoner arter basıncı kontrol grubuna göre üç kat daha yüksektir.Sağ ventrikül sistolik basınç da kontrol grubuna göre, hem monokrotaline ve Sugen tedavi hayvanlarda çok daha yüksektir. Hematoksilin ve eozin lekeli normal sıçan akciğer dokusu bölümlerinde alveoller ve alveoler yapılar arasındaki boşluklar belirgindir ve damarlar açık ve normal kalınlıktadır. Pulmoner arter hipertansiyon akciğer, remodeling kanıt vardır, damar duvarlarının kalınlaşma, damarlarda şiddetli daralma, ve inflamasyon ve fokal pulmoner arterit.Hayvan akciğerini kaybetmeyi telafi etmek zorundadır, bu yüzden iyileşme döneminde sabırlı olmak önemlidir. Hayati belirtileri izleyin ve gerektiğinde ek oksijen veya akciğer hacmi verin. Sugen pulmoner arteriyel hipertansiyon klinik ilgili işareti olan endotel apoptoz oluşturur.Kemirgenlerde sol pnömonektomi modeli bilim adamları için akış anormallikleri çalışma ve pulmoner arteriyel hipertansiyon için yeni tedaviler geliştirmek için yol açtı. Bu modelde isoflurane, Sugen ve/veya MCT kullanımı nedeniyle, kişisel koruyucu ekipmanlar her zaman giyilmelidir.

the-left-pneumonectomy-combined-with-monocrotaline-or-sugen-as-model

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Pulmoner arteriyel hipertansiyon (PAH), pulmoner arteriyollerin obliterasyonuna ve sağ ventrikül yetmezliği gelişmesine yol açan bir hastalıktır. PAH'ın kemirgen modelleri, PAH'ın patofizyolojisini anlamada kritik öneme sahiptir. Burada fare ve sıçanlarda sağ kalp kateterizasyonu ve ekokardiyografi ile hemodinamik karakterizasyonu gösterildi.

Pulmoner Hipertansiyon Kemirgen Modeller Hemodinamik Karakterizasyonu

Bu protokol, sıçanlarda akışa bağlı pulmoner arteriyel hipertansiyon (PAH) için bir model oluşturmak için cerrahi bir prosedürü ve bu modeldeki temel hemodinamik ve histolojik uç noktaları analiz etme prosedürlerini açıklar.

Akış kaynaklı pulmoner hipertansiyon için bir Sıçan Modelinde Şant Cerrahisi, Sağ Kalp kateterizasyonu ve Damar Morfometri

Biz sağ ventrikül hipertrofisi ve başarısızlık sıçanlarda ikna etmek için cerrahi bir yöntem mevcut.

Sağ ventrikül hipertrofisi ve başarısızlık bir pulmoner gövde basınç yükünün modeli bantlama indüklenen

Burada, tümör hücreleri ve metastatik lezyonlar dolaşan bir protokol tümör progresyon adımları taklit eder ve birincil tümörün izole etmek için yardımcı olan bir ex vivo akciğer kanseri modeli için mevcut.

Tümör metastazı çalışmaya acellular ve hücresel akciğer modeli

Sol atriyal stenoz (LAS), Grup 2 pulmoner hipertansiyon (PH) ve pulmoner venöz arterialization altında yatan mekanizmaları eğitim için kullanılan yeni bir cerrahi tekniktir. Burada, bir titanyum klibi kullanarak pulmoner venöz arterialization neden ve PH kutusundaki bir fare orta sol atriyum sıkmak için bir protokol mevcut.

Sol atriyal stenoz indüklenen pulmoner venöz Arterialization ve Grup 2 sıçan pulmoner hipertansiyon

Bu protokol, hipoksiye maruz kalma ve VEGF reseptör antagonistinin enjeksiyonuna bağlı olarak farelerde pulmoner hipertansiyonun (PH) indüksiyonunu tanımlar. Hayvanlarda protokolün başlamasından 3 hafta sonra PH ve sağ ventrikül (RV) hipertrofisi gelişir. Modelin fonksiyonel ve morfometrik karakterizasyonu da sunulmuştur.

Hipoksi/SU5416 Modeli kullanılarak Farelerde Pulmoner Hipertansiyonun İndüksiyonu ve Karakterizasyonu

Burada, sonuçları iyileştirmeye hizmet eden bir sıçan akciğer nakli modeline optimizasyonlar sunuyoruz. Vücut ağırlığına göre manşetler için bir boyut kılavuzu, 4. interkostal boşluğu belirlemek için bir ölçüm stratejisi ve yara kapatma ve BAL (bronkoalveoler lavaj) sıvı ve doku toplama yöntemleri sunuyoruz.

Sıcak iskemi / reperfüzyon hasarının bir sıçan akciğer transplantasyon modeli: sonuçları iyileştirmek için optimizasyonlar

Sağ kalp yetmezliği (RHF), ventriküler ve atriyal fonksiyon bozukluğuna yol açan sağ taraflı kardiyak dilatasyon ve hipertrofi ile karakterizedir. RHF ile ilişkili kardiyopulmoner durumlara kardiyak aritmi riskinde artış eşlik eder. Bu makale, gelişmiş ventriküler ve atriyal aritmogenez ile ilişkili pulmoner arter bantlamasına bağlı RHF'nin standart bir modelini açıklamaktadır.

Pulmoner Arter Bantlaması Kullanılarak Sağ Taraflı Kardiyak Yeniden Şekillenme ve Aritminin Sıçan Modeli

Burada, pulmoner fibrozis (PF-PH) sıçan modeli ile ilişkili pulmoner arteriyel hipertansiyonun hava yoluna bleomisin enjeksiyonu ile indüklenmesi yöntemi tanıtılmıştır. Ayrıca bu hayvan modelini doğrulamak için adım adım bir yaklaşım sunuyoruz.

Pulmoner Fibrozis ile İlişkili Pulmoner Arteriyel Hipertansiyonun Bir Sıçan Modelinin Oluşturulması ve Doğrulanması

Bu protokol, sıçanlarda ortotopik sol akciğer nakli için operasyonel zorluğu azaltmaya ve sağkalım oranlarını iyileştirmeye odaklanan gelişmiş bir tekniği tanımlar.

Sıçanlarda Ortotopik Sol Akciğer Nakli

Öğrenin, sıçanlarda sol pnömonektomi ile pulmoner arteriyel hipertansiyon modeli oluşturma yöntemini. Bu protokol, insan PAH hastalarındaki pleksiform lezyonları taklit ederek tedavi geliştirme çalışmalarına katkı sağlar.

Sıçanlarda pulmoner hipertansiyon bir Model olarak Monocrotaline ya da Sügen ile birlikte sol Pneumonectomy

Daha fazla video keşfet