Floresan Isotiyoyanat-polisucrose 70 ile Farelerde Glomerüler Geçirgenliğin Yüksek Hassas Ölçümü

Bu yöntem böbrek hastalığında glomerüler geçirgenliğin rolü hakkında nefroloji alanındaki anahtar soruların cevaplanabilmeye yardımcı olabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı, glomerüler geçirgenliğin küçük ve geçici artışlarının floresan kurşun etiketli bir tracer kullanılarak tespit edilmesidir. Anesteziden sonra, kadın fare bir idrar kateteri yerleştirin.

Fareyi dorsal recumbency'de konumlandırın. Alt karın sıkın ve üretral ostium bulabilirsiniz. 22 G anjiyokateterkatenin kateterinin plastik kısmını elde edin ve ksikolosain jeli ile yağlatın.

Alt karın üzerinde dikkatli gerginlik yerleştirmek için sol işaret parmağını kullanın ve distal üretral ekseni paralel iken üretral ostium içine kateter üç milimetre tanıtmak. Ucu üretral ostium içinde tutarak ve üretra eksenini koruyarak anjiyokateterin üst kısmını 180 derece çevirin. Daha sonra kateteri farenin içine yedi milimetre daha ileri tanıtım, böylece mesanenin içine yerleştirilir.

İdrar toplamak için anjiyokateterin üstüne 1,5 mililitrelik kahverengi bir tüp yerleştirin. İdrar üretimini artırmak için bir mililitre %0.9 sodyum klorür uygulayın. Farenin boynunu tıraş edin ve baş Cerraha doğru baş ile recumbency yerleştirin.

Hiper bir bant ile farenin başını uzatmak. %70 isopropanol ile boyun dezenfekte. Bir cızırtıcı ve makas kullanarak çene çizgisinin altında beş milimetrelik deri kesisi yapar.

Sternumun ortasına ulaşınakadar deriyi göğüs kafesi yönünde yaklaşık bir santimetre kesin. Bir makas kullan. Dikkatle boynun sağ tarafına deri incelemek.

Boyun yumuşak doku ortaya çıkarmak için sağ deri dikdörtgen bir kesi olun. Şah damarına zarar vermemeye dikkat edin. İki kelepçe ile cilt kapakları düzeltmek için bir makas ve bir cızırtıcı bir çift kullanın.

İnce cızırtının ucunu kullanarak, künt hazırlık la şah damarını dikkatlice ortaya çıkarın. Gerekirse, ince makas ile doku çıkarın. Damar dallarının yaralanmasını önleyebilirsiniz.

Farenin başına doğru görünür juguler ven distal kısmında bir ipek iplik ile bir ligatür yerleştirin ve kapatın. Bağ üzerine gerginlik koymak için bir bant ile ipek iplik düzeltin. Bu juguler ven üzerinde hafif gerginlik sağlar.

Juguler venin proksimal kısmı etrafında bir bağ hazırlayın. Bundan sonra kateteri denge ve füzyon çözeltisi ile doldurun. Kateteri bir bantla düzeltin, böylece kateter şah damarını hizalıyor.

Hava embolisi önlemek için kabarcıklar için kontrol. Ekleme yerinde ince cımbız ile juguler ven kaldırın. Boruyu juguler vene paralel hizala ve lümeni hedefleyen juguler veni delin.

Juguler ven eksenine paralel yaklaşık 2-4 milimetre için ekleyin. Herhangi bir tempolu hareketleri kaçının. Kateteri onarmak için bağı kapatın.

Mikroskop üzerinden dikkatlice inceleyerek bağın sıkılığını kontrol edin. Ameliyat mahallinin üzerine nemli bir bez koy. Fare sırt recumbency yatıyor ise fare kuyruk alt kısmında kuyruk manşet yerleştirin.

Ölçümleri başlatın ve zaman noktası başına on kez tekrarlayın. Kan basıncı ölçümleri doğru görünmüyorsa ve yanlış veri üretiliyorsa, kuyruk manşetinin konumunu ayarlayın. Denge aşamasından önce, idrar toplama tüpünü değiştirin ve buz üzerine yerleştirin.

Kat bir bez ve juguler ven içine tanıtıldı küçük damar kateter etrafında koyun. Retrograd kan akışını veya hava embolizmini ortadan kaldırmak için bezin üzerine bir kelepçe yerleştirin. 27 G'lık bir iğneyi FITC bolus ile dolu bir mililitrelik şırıngaile küçük damar kateterinin sonuna bağlayın.

Kelepçeyi açın ve 100 mikrolitre FITC bolus uygulayın. Kelepçeyi tekrar kapatın ve daha büyük kateteri daha küçük kateterle bağlayın. Kelepçeyi yeniden açın ve şırınga pompasını dakikada 0,008 mililitre akış hızıyla çalıştırın.

İnfüzyona 60 dakika devam edin. Bu aşamada glomerüler perma seçiciliği üzerinde etkili ilaçlar araştırılır. Başka bir 1.5 mililitre kahverengi tüp için idrar tüpü form zaman noktası sıfır dakika değiştirin.

Küçük damar kateterinin etrafına bir bez koyun ve büyük kateteri küçük damar kateterinden ayırın. Şırıngayı deneysel faz çözeltisi ile doldurun. Şırınga pompasıiçine yerleştirin ve büyük kateter deneysel faz çözeltisi ile doldurulur böylece infüzyon pompası çalışmasına izin.

Hava embolisi kaçınırken kateterleri yeniden bağlayın ve kelepçeyi yeniden açın. Dakikada 0,008 mililitre akış hızında şırınga pompabaşlatın. 60 dakika boyunca şırınga pompası çalıştırmaya devam edin ve bundan sonra idrar tüpü içinde idrar toplamak.

İdrar tüpünü buza yerleştirin. Bu çalışmada, yerli fare idrar floresan tarası 395 nanometre bir tepe gösterir. FITC polisökroz 70 fare idrarmililitre başına 40 mikrogram konsantrasyonda 525 nanometre bir floresan maksimum görüntüler.

Fare idrarı FITC polisökrozu 70 floresan ölçümrahatsız etmez. 525 nanometre FITC polisökroz 70 artan konsantrasyonları kabul edince artan floresan yoğunluğu gösterir. Bu yöntem aynı zamanda glomerüler geçirgenlik farklılıkları tespit yeteneğine sahiptir.

Beyaz sütunlar, deneysel fazda anjiyotensin II stimülasyon başlamadan önce FITC polissucrose 70 seviyelerini temsil eder. 60 dakika dozajlar sonra, glomerüler geçirgenlik kontrol grubu ile karşılaştırıldığında arttı. anjiyotensin II azalmış glomerüler geçirgenliği yıkayın.

FITC polisoz 70 düzeyleri ek bir 60 dakika anjiyotensin II stimülasyon veya anjiyotensin II yıkama 60 dakika sonra azaldı. Anjiyotensin II'ye bağlı glomerüler geçirgenlik artışı anjiyotensin II reseptör blokeri ile bloke edilebilir. Kuyruk manşet yöntemi ile izlenen kan basıncı kontrol ve anjiyotensin II tedavi edilen gruplar arasında önemli farklılıklar göstermedi.

Bu prosedürü denerken infüzyon çözeltilerini değiştirirken hava embolisi önlemek önemlidir.