Name: Serebral iskemi-reperfüzyon iki damar tıkanıklığı fare modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-03-01T13:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 34 s
Description: Keşfedin, serebral iskemi-reperfüzyon patofizyolojisini fare modeli kullanarak incelemeyi. İki damar tıkanıklığı yöntemiyle kortikal infarkt hacmi ve davranışsal bozuklukları değerlendirin.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu eser Bakanlığı bilim ve teknoloji, Tayvan (en 106-2320-B-038-024, en 105-2221-E-038-007-MY3 ve en 104-2320-B-424-001) ve Taipei Tıp Üniversitesi Hastanesi (107TMUH-SP-01) tarafından desteklenmiştir. Bu el yazması Wallace akademik düzenleyerek düzenlendi.

Kurumsal hayvan bakımı ve kullanımı Komiteler Academia Sinica ve Taipei Tıp Üniversitesi deneysel hayvan kullanımı için bu protokolü onayladı.
1. MCAO/reperfüzyon modeli
<ol><li>Fareler ameliyat kadar su ve yemek için ücretsiz erişim sağlar.</li>
	<li>Otoklav cerrahi araçları ve cerrahi tablo ve % 70 etanol kullanarak ekipman sterilize. Ameliyat maskesi ve steril eldiven giymek. Eğer birden çok fare ameliyatları bir deneyde yapılan cerrahi araçlar resterilize için Kuru boncuk Sterilizatör kullanın.</li>
	<li>Bir 8 - için 12-hafta-yaşlı fare anestezi (kitle: 25 – 30 g) % 0.8 kloral hidrat, mayi bir enjeksiyon yoluyla kullanarak. İmzalat fareyi bir pedal refleks (bir firma ayak çimdik kullanarak test gibi) sonra anesthetization yok emin olun.</li>
	<li>Veteriner merhem anestezi altında iken fare göz kuruluğu önlemek için kullanın.</li>
	<li>Bir noninvaziv kan basıncı sistemi fare kan basıncını izlemek için kullanın.</li>
	<li>Fizyolojik bir izleme sistemi, rektal ısı ve arteriyel kan gazı izlemek için kullanın. 36,5 ±, vücut ısısını korumak 0.5 ° C.</li>
	<li>Subkutan fare profilaktik antibiyotik (25 mg/kg sülfadiyazin)8ile enjekte et.</li>
	<li>Sırtüstü pozisyonda Isıtma Yastığını üzerine fareyi getirin.</li>
	<li>Elektrik makası cilt fare kürk ventral boyun bölgesindeki yanı sıra sağ gözü ve sağ kulak arasındaki bölgede tıraş tarafından ortaya çıkarmak için kullanın.</li>
	<li>Fare vücuttan kürk temizleyin ve scrbus povidione-iyot ve % 70 etanol ile dönüşümlü olarak cerrahi sitesi dezenfekte için epilasyon kremi kullanın.</li>
	<li>Iris makas 1 cm uzunluğundaki Ensizyon ensenden kesmek için kullanın.</li>
	<li>Iris forseps fiziksel yaralanma neden olmadan vagus sinir ücretsiz CCA dikkatle incelemek için kullanın.</li>
	<li>5-0 ipek sütür CCA belirlemek için kullanın.</li>
	<li>0,3 cm kesi kafa derisi, sağ gözü ile sağ kulak arasındaki orta nokta olun.</li>
	<li>Elmacık ve squamosal kemik ortaya çıkarmak için temporalis kas kesmek için microscissors kullanın.</li>
	<li>Stereo diseksiyon mikroskop altında bir microdrill doğrudan sağ distal MCA üzerinde 2 mm çapında delik oluşturmak için kullanın.</li>
	<li>10-0 dikiş kullanarak sağ distal MCA gövdesine ligate.</li>
	<li>Nontraumatic anevrizma klipi kullanarak sağdaki CCA doldurmak.</li>
	<li>İskemi 10 veya 40 dakika sonra anevrizma klipleri ve kan akımı MCA ve CCA getirmek için dikiş kaldırın.</li>
	<li>Bir dikiş klip baş cilt kesi mühürlemek için kullanın.</li>
	<li>Boyun deri dikiş veya zımba9ile kapatarak takip tek dikiş kullanarak servikal cilt kesi kapatın.</li>
	<li>Subkutan buprenorfin (0.1 mg/kg) ağrı Rölyef9için enjekte et.</li>
	<li>Tam anesteziden kurtarıldı kadar fare vücut sıcaklığı 36,5 ± 0,5 ° C Isıtma yastığını korumak. Tamamen iyileşmiş kadar ameliyat için şirketin diğer hayvanların geçirmiştir hayvan döndürmüyor. Yeterli bilincinin tekrar yerine geleceğinden hayvan başıboş bırakmayın.</li>
	<li>Böylece serbestçe su erişmek ve tam olarak kurtarıldı sonra yutar fare autoclaved kafesin içine yerleştirin.</li>
</ol>2. 2,3,5-triphenyltetrazolium klorür ile boyama
<ol><li>Fare ile % 0.8 kloral hidrat mayi iğne ile anestezi.</li>
	<li>İşletim makas hayvan başını kesmek için kullanın.</li>
	<li>Kafatası bir kesik baş cilt içinde yapmak Iris makas kullanarak açarsınız.</li>
	<li>İşletim makas ön frontal kemik kesmek için kullanın.</li>
	<li>Iris makas kafatası sagittal dikiş boyunca kesmek için kullanın.</li>
	<li>Bir kemik rongeur bir kenara alın ve Paryetal kemik itmek ve beyin ortaya çıkarmak için kullanın.</li>
	<li>Iris forseps beyin incelemek için kullanın.</li>
	<li>Fare beyin matris ve jilet 2 mm koronal dilimleri elde etmek için kullanın.</li>
	<li>1 fosfat tamponlu tuz x %2 2,3,5-triphenyltetrazolium klorür (TTC) ile 37 ° C'de 10 dakika için beyin dilimleri leke.</li>
	<li>Beyin 2 durulama x % 10 formalin ile.</li>
	<li>% 10 formalin, oda sıcaklığında 24 h için beyinde düzeltmek.</li>
</ol>3. enfarktüsü boyut ölçümü
<ol><li>Temiz plastik Slayt üzerindeki bölümleri düzenlemek ve rostral bölümlerden Kaudal için yönlendirmek.</li>
	<li>Bir tarayıcı kullanarak slayt tarama. Metrik bir cetvel yerleştirin ve Taranan görüntüde görünür olduğundan emin olun. Slayt ters çevirin ve yan ters inceden inceye gözden geçirmek.</li>
	<li>ImageJ yazılımını kullanarak her bölümün infarktüsü alanını hesaplamak.<ol>
<li>Görüntü dosyasını açın ve görüntü ölçeği ayarlayın.</li>
		<li>Serbest seçim enfarktüsü alanı seçmek için kullanın.</li>
		<li>Faiz (ROI) Yöneticisi bölgelerinde ilgi alanı ölçmek için kullanın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Her bölüm için enfarkt alanları toplamı ve sonucu toplam infarktüsü birim tahmin etmek için bölüm kalınlığı tarafından çarpın.</li>
</ol>4. istatistiksel analiz
<ol><li>GraphPad prizma 6 öğrencinin tile istatistiksel anlamlılık belirlemek için kullanın-test. Not: Standart hataları değerlerin ortalamasının (SEM) bar grafikler üzerindeki hata çubukları temsil ediyor.</li>
	<li>Kullanım G * güç uygun örnek boyutu hesapla ve güç analizi10gerçekleştirmek için 3.1.</li>
</ol>

<ol><li>Woodruff, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology%2C+treatment%2C+and+animal+and+cellular+models+of+human+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Neurodegeneration%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology, treatment, and animal and cellular models of human ischemic stroke.</a> Molecular Neurodegeneration. 6 (1), 11(2011).</li>
<li>Chamorro, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+immunology+of+acute+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Neurology%22%5BJournal%5D)">The immunology of acute stroke.</a> Nature Reviews. Neurology. 8 (7), 401-410 (2012).</li>
<li>Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+stroke+in+mice+-+Middle+cerebral+artery+occlusion+with+the+filament+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Modeling stroke in mice - Middle cerebral artery occlusion with the filament model.</a> Journal of Visualized Experiments. (47), e2423(2011).</li>
<li>Lee, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interleukin+15+blockade+protects+the+brain+from+cerebral+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%2C+Behavior%2C+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Interleukin 15 blockade protects the brain from cerebral ischemia-reperfusion injury.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 73, 562-570 (2018).</li>
<li>Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+strain+differences+in+susceptibility+to+cerebral+ischemia+are+related+to+cerebral+vascular+anatomy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%3A+Official+Journal+of+the+International+Society+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Mouse strain differences in susceptibility to cerebral ischemia are related to cerebral vascular anatomy.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 13 (4), 683-692 (1993).</li>
<li>Kitagawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+ischemia+after+bilateral+carotid+artery+occlusion+and+intraluminal+suture+occlusion+in+mice%3A+evaluation+of+the+patency+of+the+posterior+communicating+artery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%3A+Official+Journal+of+the+International+Society+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Cerebral ischemia after bilateral carotid artery occlusion and intraluminal suture occlusion in mice: evaluation of the patency of the posterior communicating artery.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 18 (5), 570-579 (1998).</li>
<li>Wellons, J. C. 3rd, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+strain-related+susceptibility+in+two+murine+recovery+models+of+global+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">A comparison of strain-related susceptibility in two murine recovery models of global cerebral ischemia.</a> Brain Research. 868 (1), 14-21 (2000).</li>
<li>Doyle, K. P., Fathali, N., Siddiqui, M. R., Buckwalter, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distal+hypoxic+stroke%3A+a+new+mouse+model+of+stroke+with+high+throughput%2C+low+variability+and+a+quantifiable+functional+deficit%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Distal hypoxic stroke: a new mouse model of stroke with high throughput, low variability and a quantifiable functional deficit.</a> Journal of Neuroscience Methods. 207 (1), 31-40 (2012).</li>
<li>Doyle, K. P., Buckwalter, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+of+permanent+focal+ischemia%3A+Distal+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">A mouse model of permanent focal ischemia: Distal middle cerebral artery occlusion.</a> Methods in Molecular Biology. , 103-110 (2014).</li>
<li>Wayman, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performing+Permanent+Distal+Middle+Cerebral+with+Common+Carotid+Artery+Occlusion+in+Aged+Rats+to+Study+Cortical+Ischemia+with+Sustained+Disability%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+Of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability.</a> Journal Of Visualized Experiments. (108), e53106(2016).</li>
<li>Noor, R., Wang, C. X., Shuaib, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+hyperthermia+on+infarct+volume+in+focal+embolic+model+of+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Effects of hyperthermia on infarct volume in focal embolic model of cerebral ischemia in rats.</a> Neuroscience Letters. 349 (2), 130-132 (2003).</li>
<li>Florian, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+hypothermia+reduces+infarct+volume+in+aged+rats+after+focal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Long-term hypothermia reduces infarct volume in aged rats after focal ischemia.</a> Neuroscience Letters. 438 (2), 180-185 (2008).</li>
<li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+of+focal+stroke%3A+size%2C+mechanism%2C+and+purpose%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroRx%3A+The+Journal+of+the+American+Society+for+Experimental+NeuroTherapeutics%22%5BJournal%5D)">Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRx: The Journal of the American Society for Experimental NeuroTherapeutics. 2 (3), 396-409 (2005).</li>
<li>Lin, T. N., Te, J., Huang, H. C., Chi, S. I., Hsu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolongation+and+enhancement+of+postischemic+c-fos+expression+after+fasting%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Prolongation and enhancement of postischemic c-fos expression after fasting.</a> Stroke. 28 (2), 412-418 (1997).</li>
<li>Glazier, S. S., O'Rourke, D. M., Graham, D. I., Welsh, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+ischemic+tolerance+following+brief+focal+ischemia+in+rat+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%3A+Official+Journal+of+the+International+Society+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Induction of ischemic tolerance following brief focal ischemia in rat brain.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 14 (4), 545-553 (1994).</li>
<li>Tachibana, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+Reperfusion+After+Brain+Ischemia+Has+Beneficial+Effects+Beyond+Rescuing+Neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Early Reperfusion After Brain Ischemia Has Beneficial Effects Beyond Rescuing Neurons.</a> Stroke. 48 (8), 2222-2230 (2017).</li>
<li>Gan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+neurons+recruit+natural+killer+cells+that+accelerate+brain+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Ischemic neurons recruit natural killer cells that accelerate brain infarction.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (7), 2704-2709 (2014).</li>
<li>Li, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astrocyte-derived+interleukin-15+exacerbates+ischemic+brain+injury+via+propagation+of+cellular+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Astrocyte-derived interleukin-15 exacerbates ischemic brain injury via propagation of cellular immunity.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 114 (3), E396-E405 (2017).</li>
<li>Wang, S., Zhang, H., Dai, X., Sealock, R., Faber, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+architecture+underlying+variation+in+extent+and+remodeling+of+the+collateral+circulation%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Genetic architecture underlying variation in extent and remodeling of the collateral circulation.</a> Circulation Research. 107 (4), (2010).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

MCAO/reperfüzyon fare modeli yaygın insanlarda geçici iskemi taklit etmek için istihdam hayvan bir modeldir. Bu hayvan modeli transgenik ve nakavt fareler suşları için kontur Patofizyoloji araştırmak için uygulanabilir. İletişim kuralı birkaç adımda özellikle önemlidir. (1 microdrill dikkatli bir delik ile uygunsuz eylem kolayca MCA kanama neden kafatasında, oluşturulurken kullanılan gerekir. (2) MCA bozuk ve kanama önce ve sonra ligasyonu yordam kaçınılmalıdır. MCA hasar reperfüzyon iskemik beyin7</sup...

Serebral iskemi-reperfüzyon fare modeli beyin iskemi indüklenen yaralanma1Patofizyoloji soruşturma için en çok kullanılan deneysel yaklaşımlar biridir. Serebral iskemi-reperfüzyon periferik bağışıklık sistemi aktive periferik bağışıklık hücreleri iskemik beyin sızmak ve nöronal hasar2çünkü. Böylece, serebral iskemi-reperfüzyon taklit eden bir güvenilir ve tekrarlanabilir fare modeli kontur Patofizyoloji anlamak için gereklidir.
C57BL/6J (B6) fareler en sık kullanılan zorlanma kontur deneylerde olduklarından, genetik olarak kolayca yönetilebilir. Serebral iskemi-reperfüzyon durumunu taklit iki ortak MCAO/reperfüzyon modelleri mevcuttur. Ilk proksimal MCAO, nerede bir silikon kaplı filament intravascularly MCA kan akışında doldurmak için istihdam intraluminal filaman modeldir; occluding filaman kan akışı3geri yüklemek için daha sonra kaldırılır. Daha uzun bir tıkanıklığı süre infarkt kortikal ve subcortical alanlarında neden olur, ancak kısa tıkanıklığı süresi subcortical bölgesinin bir lezyon oluşur. İkinci model MCA ve CCA sonra dikiş ve anevrizma klip4kaldırılması kan akışını geri yüklenir MCA yoluyla kan akışını azaltmak için extravascular ligasyon içerir distal MCAO tüp ligasyonu modeldir. Bu modelde, bir enfarktüsü kortikal bölgelerde neden olur ve ölüm oranı düşüktür. MCAO/reperfüzyon modeli ligasyonu distal MCA sitenin ortaya çıkarmak için Kraniyektomi gerektirdiğinden, site kolayca teyit edilmesi ve distal MCA kan akışında işlem sırasında bozulur olup olmadığını inceleyerek basittir.
B6 fareler anatomisini önemli değişimler Willis onların dairenin sergi; Bu serebral iskemi-reperfüzyon5,6,7takip enfarktüsü birim etkileyebilir. Şu anda, bu sorun distal MCA8ligasyonu ile aşılabilir. Bu çalışmada, MCA kan akımı occluding ve önceden belirlenmiş bir süre iskemi reperfüzyon sağlayan bir yöntem oluşturun. İki damar tıkanıklığı serebral iskemi-reperfüzyon modelinin MCA bölgenin sağ distal MCA ve doğru CCA, tüp ligasyonu ile geçici iskemi kan akımı iskemi belirli bir süre sonra geri ile neden olmaktadır. Bu MCAO/reperfüzyon model bir enfarktüsü istikrarlı boyutu, bir toplu iskemik beyin ve davranış bir açığı beyin infiltre bağışıklık hücreleri ve serebral iskemi-reperfüzyon4' ten sonra neden olmaktadır.

<table><tbody><tr><td>Kemik rongeur</td><td>Diener</td><td></td><td>Friedman</td></tr><tr><td>Buprenorfin</td><td>Sigma</td><td>B-044</td><td></td></tr><tr><td>Sefazolin</td><td>Sigma</td><td>1097603</td><td></td></tr><tr><td>Kloral hidrat</td><td>Sigma</td><td>C8383</td><td></td></tr><tr><td>Diseksiyon mikroskobu</td><td>Nikon</td><td>SMZ-745</td><td></td></tr><tr><td>Elektrikli kesme makineleri</td><td>Petpro</td><td></td><td></td></tr><tr><td>%10 formalin</td><td>Sigma</td><td>F5304</td><td></td></tr><tr><td>Çimlendirici kuru boncuk sterilizatörü</td><td>Braintree Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>İris Forseps</td><td>Karl Klappenecker</td><td></td><td>10 cm</td></tr><tr><td>İris Makas</td><td>Diener</td><td></td><td>9 cm</td></tr><tr><td>İris Makas STR</td><td>Karl Klappenecker</td><td></td><td>11 cm</td></tr><tr><td>Mikro Matkap</td><td>Çalma</td><td>FOREEDOM K.1070</td><td></td></tr><tr><td>Mikro makas-Vannas</td><td>HEISS</td><td>H-4240</td><td>bıçak 7mm, 8 cm</td></tr><tr><td>Fare beyin matrisi</td><td>Dünya Hassas Aletler</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Non-invaziv kan basıncı sistemi</td><td>Muromachi</td><td>MK-2000ST</td><td></td></tr><tr><td>Ameliyat Makası STR</td><td>Karl Klappenecker</td><td></td><td>14 cm</td></tr><tr><td>Fizyolojik İzleme Sistemi</td><td>Harvard Aparatı</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tıraş Bıçağı bıçaklar</td><td>Her Zaman Hazır</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Çalmak Kemirgen Isıtıcıları</td><td>Çalmak</td><td>53810</td><td>Isıtma yastığı Sütür</td></tr><tr><td>klipsi</td><td></td><td></td><td>Çalmak</td></tr><tr><td>Cımbız</td><td>IDEALTEK</td><td></td><td>No.3</td></tr><tr><td>Vetbond</td><td>3M</td><td>15672</td><td>Cerrahi yapıştırıcı</td></tr><tr><td>10-0 sütür</td><td>UNIK</td><td>NT0410</td><td></td></tr><tr><td>2,3,5-Trifeniltetrazolyum klorür</td><td>Sigma</td><td>T8877</td><td></td></tr></tbody></table>

serebral iskemi-reperfüzyon iki damar tıkanıklığı fare modeli

Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion

Bu çalışmada, bir orta serebral arter (MCA) tıkanıklığı fare modeli serebral iskemi-reperfüzyon çalışmaya istihdam edilmektedir. Bir tekrarlanabilir ve güvenilir fare modeli serebral iskemi-reperfüzyon Patofizyoloji araştıran ve kontur olan hastalar için potansiyel tedavi stratejileri belirlemek için yararlıdır. Anatomi varyasyonları Willis C57BL/6 fareler çemberi serebral iskemi indüklenen yaralanma sonra onların enfarktüsü birimi etkiler. Çalışmalar bu distal MCA tıkanıklığı (MCAO) bu sorunun üstesinden gelmek ve istikrarlı enfarktüsü boyutunda neden belirttiler. Bu çalışmada, serebral iskemi-reperfüzyon doğru MCA için kan akımı kesintiye aracılığıyla bir iki-damar tıkanıklığı fare modeli kurmak. Klemple doğru MCA ve şu ortak Karotid arter (CCA) ligate ve kan akımı iskemi belirli bir süre sonra geri yükleme. Bu iskemi-reperfüzyon hasarı bir enfarktüsü ve istikrarlı boyutu ve davranışsal bir açığı neden olmaktadır. Periferik bağışıklık hücreleri iskemik beyin 24 h infiltrasyon süresi içinde sızmak. Ayrıca, kortikal alanı nöronal kaybına daha uzun bir reperfüzyon süre için azdır. Bu nedenle, bu iki-damar tıkanıklığı model sonra serebral iskemi reperfüzyon döneminde bağışıklık yanıtı ve nöronal kurtarma soruşturma için uygundur.

Bu MCAO/reperfüzyon yordamı bir kortikal enfarktüsü doğru MCA çevresinde üretilen ve davranışsal bir açığı neden oldu. İskemi indüklenen enfarktüsü birim (şekil 1AB) ve nöronal kaybı (şekil 1 cD) farklı derecelerde bir artışı ligasyonu süresi ile doğru MCA çevrenin beyin korteksi oluşturulmuş. Bu MCAO/reperfüzyon hasarı hayvanın Lokomotor aktivite, 48 h MCAO/reperfüzyon (Şeki...

Serebral iskemi-reperfüzyon bir fare modeli kontur Patofizyoloji araştırmak için kuruldu. Klemple sağ orta serebral arter ve şu ortak Karotid arter ligate ve kan akımı iskemi 10-40 dakika sonra geri yükleme.

Serebral iskemi-reperfüzyon iki damar tıkanıklığı fare modeli

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse ...

Serebral iskemi-reperfüzyonun bu iki damarlı oklüzyon fare modeli inmenin patofizyolojisini araştırabilir. Bu model iskemik beyin ve serebral iskemi-reperfüzyon sonrası davranış açığı bağışıklık hücrelerinin sızan beynin toplu istikrarlı bir enfarkt hacmi neden olacaktır. Bu modelde kortikal bölgelerde enfarktüs etüt ve mortalite oranı düşüktür.Ligasyon MCAO reperfüzyon modeli distal MCA boyutunu ortaya çıkarmak için kraniyotomi gerektirdiğinden, boyutu kolayca teyit edilebilir, ve muayene distal MCAO kan akımı işlem sırasında bozuldu olup olmadığını basittir. Farelere ameliyata kadar su ve yiyeceklere ücretsiz erişim sağlayın. Cerrahi aletleri otoklav ve cerrahi tablo ve ekipman dezenfekte etmek için% 70 etanol kullanın.Sekiz ila 12 haftalık bir fareyi anestezi ettikten sonra, sağlam bir ayak tutamını kullanarak test edildiğinde pedal refleksi olmadığından emin olun. Fare anestezi altında yken göz kuruluğu önlemek için veteriner merhem kullanın. Kan basıncını izlemek için, ilk saç kaldırmak ve daha sonra rektal sıcaklık ve arteriyel kan gazları izlemek için non-invaziv kan basıncı sistemi ve fizyolojik bir izleme sistemi kullanın.Fareye subkutan bir profilaktik antibiyotik enjekte

two-vessel-occlusion-mouse-model-of-cerebral-ischemia-reperfusion

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Sıçan iskemik beyin hasarı Cerrahi indüksiyon inme araştırma için yaygın olarak kullanılan bir model. Burada orta serebral arter oklüzyonu ile fokal serebral iskemi indüksiyon göstermektedir. Histolojik boyama ve manyetik rezonans görüntüleme ile enfarkt Görselleştirme de gösterilir.

Endovasküler Dikiş Rat Orta Serebral Arter Tıkanıklığı Fokal Serebral İskemi Model

İpliksi Orta serebral arter oklüzyonu farelerde iskemik inme eğitimi için ortak bir model.

Fare Modelleme İnme - Filament Model Orta Serebral Arter Tıkanıklığı

inme patofizyolojisini anlamak için, güvenilir modeller kullanmak önemlidir. Farelerde en sık kullanılan inme modellerinden birini anlatacağız Bu yazıda, orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) modeli olarak adlandırılan reperfüzyon ile (ayrıca lümen içi filament veya sütür modeli olarak adlandırılır).

Farelerde Orta Serebral Arter Tıkanıklığı ve Reperfüzyon Kaynaklı İnme Cerrahi Yaklaşım

Silikon kaplı bir sütür kullanılarak orta serebral arterin tıkanmasıyla inen bir fare inme modelini tarif ediyoruz. Protokol, kalıcı oklüzyon veya geçici bir iskemiyi indüklemek için uygulanabilir ve ardından reperfüzyon uygulanabilir.

Enfarktüs Bölgesi Orta Arter Tıkanıklığı Tekniği ve Görselleştirme kullanma Fare İskemik İnme ve İskemi-reperfüzyon indüksiyon

Intraluminal filaman tıkanıklığı orta serebral arter deneysel kontur rodents en sık kullanılan vivo içinde modeldir. Ortak karotid arter onarım izin vermek için başka bir cerrahi yaklaşım burada, reperfüzyon ortak karotid arter ve orta serebral arter bölge tam bir reperfüzyon veren gerçekleştirilir.

Orta serebral arter tıkanıklığı ortak karotid arter onarım ile reperfüzyon farelerde izin

Bu protokol, orta büyüklükte bir enfarktüse ve mükemmel bir hayatta kalma oranına sahip benzersiz bir fare vuruşu modeli gösterir. Bu model, klinik öncesi inme araştırmacılarının iskemi süresini uzatmasına, yaşlı fareleri kullanmasına ve uzun vadeli fonksiyonel sonuçları değerlendirmesine olanak tanır.

Yaşlı Farelerde İnme Sonuçlarını İncelemek için Modifiye Transkraniyal Orta Serebral Arter Oklüzyon Modeli

Bu protokol, orta serebral arterin intraluminal oklüzyonu yoluyla farelerde geçici fokal serebral iskemi modelini açıklar. Ek olarak, manyetik rezonans görüntüleme ve davranış testleri kullanılarak sonuç değerlendirme örnekleri gösterilmiştir.

İnmenin Geçici Orta Serebral Arter Oklüzyon Modeli

Burada, C57BL/6J farelerde transkraniyal elektrokoagülasyon yoluyla distal orta serebral arter tıkanıklığı (dMCAO) modeli oluşturmak ve sonraki nörolojik davranışları ve histopatolojik özellikleri değerlendirmek için bir protokol sunuyoruz.

Distal Orta Arter Oklüzyonu Tekniği Kullanılarak Farelerde Akut İskemik İnme İndüksiyonu

Mevcut protokol, serebral damarların anatomik yapısını hasara neden olmadan koruyan bir orta serebral arter oklüzyonu/reperfüzyonu sıçan modelini tanımlar.

Serebral damarların anatomik yapısına zarar vermeden orta serebral arter tıkanıklığı/reperfüzyonunun bir sıçan modeli

Bu protokol, araştırmacıların modifiye Longa eksternal karotis arter yöntemini kullanarak fareler üzerinde orta serebral arter oklüzyon prosedürünü gerçekleştirmeleri için adım adım bir kılavuz sunar. Bu makalede sunulan modifikasyonlar orta serebral arter oklüzyonunun doğruluğunu arttırmayı ve tam reperfüzyonu sağlamayı amaçlamaktadır.

Longa Orta Serebral Arter Oklüzyon Yönteminin Tam Reperfüzyon için Optimizasyonu

Bu protokol, ortak karotis arter yoluyla orta serebral arter oklüzyonu reperfüzyonu için hazırlık sürecini tanımlar.

Orta Serebral Arter Oklüzyonu Reperfüzyonu için Modifiye Bir Model Hazırlığı

Keşfedin, serebral iskemi-reperfüzyon patofizyolojisini fare modeli kullanarak incelemeyi. İki damar tıkanıklığı yöntemiyle kortikal infarkt hacmi ve davranışsal bozuklukları değerlendirin.

Serebral iskemi-reperfüzyon iki damar tıkanıklığı fare modeli

Daha fazla video keşfet