Zebrafish içinde doğuştan stres eğitimi için davranışsal yaklaşımlar

Yeni tank tsay Zebrafish güçlü genetik araçları ile birleştirecek beynin stres modüle nasıl ve nasıl sinir devreleri disregulated olabilir incelemek için bir yöntem sunuyor. Genetik ve nöronal sinyal yolları zebra balığı ve memeliler arasında son derece korunmuştur ve bu teknik stres tepkisinin altında yatan mekanizmaları daha iyi anlamamıza yardımcı olabilir. Yöntem Zebrafish özgü değildir ve Meksika kör mağara balığı ile kullanılan ve bu nedenle potansiyel olarak diğer balık türlerine genişletilebilir.

Deneme çalışması, başarılı bir izleme elde etmek için hayvanın arka plana karşı uygun aydınlatma ve karşıtlığını belirlemek için yararlı olabilir. Tsay nadiren kullanılır, ancak ilgili bir süreç olabilir. Adımları görselleştirmek, diğer araştırmacıların yordamı başarıyla yürütmelerine yardımcı olur.

Laboratuvarda doktora sonrası doktora yapan Jacqueline Chin ve lisans öğrencisi Lydia Albert bu prosedürü sergileyecekler. 250 mililitrelik bir kabı ve en az iki tutarak tankı balık sistemi suyuyla doldurarak başlayın. Testsabahı, en az bir saat boyunca alışmak üzere davranış odasına tüm balık transfer etmeden önce bireysel tutma tankları içine her deneysel durum için en az 10 yetişkin Zebrafish aktarın.

Tankları, hayvanların durumu veya genotipinin deneyciye göre kör olduğunu etiketlayın ve tek bir yetişkini önceden doldurulmuş kabın içine nazikçe yerleştirmek için bir ağ kullanın. Yetişkin balık yavaşça deneysel roman tankı içine beher gelen su ve balık dökme den önce 10 dakika boyunca kabın içinde alışmak için izin verin. Balık tanka girer girer gelmez, kamera kaydına başlayın ve balıklara ek bir sıkıntı oluşmasını önlemek için kurulumdan uzaklaşın.

Kayıt bittiğinde, bireyi yeni tanktan çıkarın ve balığı yeni bir tanka yerleştirin. Ilgi belirli ilaçların etkilerini değerlendirmek için, sistem su 250 mililitre beaers bir çalışma konsantrasyonu için ilaç seyreltmek. Sadece kontrol olarak sistem suyu olan bir kabı kullanmak.

Test edenin post-analize kadar tedavi koşullarına kör olduğundan emin olmak için ilacın ve kontrol behemlerinin kimliklerini maskeleyin ve temel davranışsal stres yanıtı elde etmek için gösterildiği gibi yeni bir tank testi yapın. Temel kaydın sonunda, balığı sadece tatlı sistem suyu içeren bir yıkama kabına aktarmadan önce balığı 10 dakika lığına test beherlerinden birine aktarmak için bir ağ kullanın. Özellikle çeşitli ilaç tedavileri söz konusu olduğunda, kontrol balıklarının kazara dozlanmasını önlemek için her bir tedavi kabı için belirlenen ayrı ağlar kullanmak önemlidir.

10 dakika sonra, ikinci bir roman tank testi için yeni bir roman tankı içine balık yerleştirin. Testin sonunda yetişkin Zebrafish'i yeni bir tutma tankına aktarın ve deneysel ilacın çapraz kontaminasyonunu önlemek için bir sonraki adım için ikinci yeni tanktaki sistem suyunu taze sistem suyuyla değiştirin. Tüm denemelerin sonunda, balık tesisine bireyleri geri dönün.

Burada 10 dakikalık yeni tank testinin ilk ve son dakikasında tek bir Zebrabalığının lokomotor aktivitesi gösterilmiştir. Tanka ilk girdiğinde, balıklar genellikle zamanın çoğunu yeni tankın dibinde geçirirler. Ancak zamanla, yetişkin balıktankın üst harcanan zaman miktarında kademeli bir artış göstermektedir.

Gerçekten de, ilk dakika boyunca tankın üst kısmında harcanan toplam süre, yeni tank testinin son dakikasına göre çok daha kısadır. Buna karşılık, ilk ve son dakika arasında kat edilen toplam mesafe önemli bir fark ortaya koymaktadır. Bu temsili deneyde, yetişkin Zebrafish lokomotor yollarının analizi, tek başına araca maruz kalan yetişkin grupları için tedavi öncesi ve sonrası Zebrabalığı yüzme aktivitesi arasında çok az fark ortaya koymuştur.

Buna karşılık, anksiyolitik bir ilaca maruz kalan yetişkinler, ilaca maruz kalmadan önce aynı balığın lokomotor yollarına kıyasla tankın üst kısmında büyük miktarda zaman harcamış. Bu farklılıklar genel olarak daha az hareket ten kaynaklanmadı, çünkü herhangi bir grup için seyahat mesafesi önemli bir fark ölçülmedi. Davranışsal ritimler sirkadiyen süreçlerden etkilendiği için, her deney için günün aynı saatinde farklı günlerde gerçekleştirilen deneysel kopyaları gerçekleştirdiğinden emin olun.

Açık alan testi veya diğer fizyolojik stres ölçümleri gibi ek davranışsal tahliller, yeni tank dalış testinden elde edilen sonuçları daha da doğrulamak için yapılabilir. Bu yöntem stres, korku ve anksiyete ile ilgili soruları ele almak için yüksek bir iş tamtarı kullanılabilir.