Name: Falcarindiol tarafından insan mezenkimal kök hücre içeren yeni Lipid kaplı nano tanecikleri alımını (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-02-09T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 34 s
Description: Öğrenin, hızlı enjeksiyon yöntemiyle lipid kaplı nanopartikül üretimini ve insan mezenkimal kök hücrelerde falcarindiol alımını. Bu yöntem, kanser tedavisi için ilaç taşıma sistemleri geliştirmeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar Dr Moustapha Kassem (Odense Üniversite Hastanesi, Danimarka) insan mezenkimal kök hücre için teşekkür ederiz. Yazarlar Danca tıp Bioimaging merkezi erişim onların mikroskoplar için teşekkür ederiz. Yazarlar Carlsberg ve Villum temelleri (E.A.C. için) finansal destek için teşekkür ederiz. Yazarlar tarafından Niels Bohr profesörlük Ödülü Danimarka Ulusal Araştırma Vakfı sağlanan mali destek kabul etmiş oluyorsunuz.

1. nanoparçacık sentezi hızlı çözücü teknik değişen tarafından
<ol></ol>2. partikül boyut analiz DLS tekniği kullanarak
Not: Boyut ölçüleri parçacık boyutu dağıtımları belirleyen bir DLS Çözümleyicisi kullanılarak yapılmıştır. Bu dalga boyu 662.2 çalışır bir 100 mW lazer ile donatılmıştır nm ve olay açı 90 ° açıyla yerleştirilmiş bir çığ fotodiyot detektörlü. Işın nano tanecikleri tarafından dağınık ve photodetector tarafından algılandı.
<ol><li>DLS araç üzerinde açın ve bu stabilize kadar istenilen sıcaklığı 20 ° C'de ayarlayın.</li>
	<li>Aracı parametreleri aşağıdaki gibi ayarlayın: veri alma süresi = 4 s, satın almalar sayısı = 30, otomatik-zayıflama işlevi = On ve auto-zayıflama süre sınırları = 0.</li>
	<li>Nanopartikül süspansiyon ile 1 mL plastik küvet doldurmak ve ölçüm başlar.</li>
	<li>Ölçülen boyutuna bağlı olarak kullanılan çözücü (su veya PBS) rapor. Not: Orta hücrelerin boyutunu yaklaşık bir fikir ne zaman hücreleri tedavi için PBS ölçümü yapılır. Hücre tedavisi suda nano tanecikleri ile yapılacaktır.</li>
	<li>Ölçümler 24 h için parçacık toplama kontrol için sentez sonra tekrar edin.</li>
</ol>3. hücre tedavisi
<ol><li>HMSCs % 10 fetal Sığır serum (FBS) ve % 1 penisilin/streptomisin, % 5 CO237 ° C'de humified odasında ile takıma en az gerekli Orta (MEM) büyümek. Dikkat: steril Laminar akış mahalle 3.1, 3.2 ve 3.3 adımları için çalışır.</li>
	<li>Tohum yaklaşık 50.000 hücreleri daha önce mutlak-alkol-steril #1.5 coverslips yaklaşık % 30 hücre yoğunluğu elde etmek için 6-şey levha yerleştirilir. MEM her kuyuda son hacmi 3 mL için ekleyin. Adım 3.1 olduğu gibi aynı koşullar altında 24 h için kuluçkaya. Tohum hücreleri tedavi öncesi 24 saat. Not: Bu hücreler hücreleri yeterli bir izdiham içinde olduğundan emin olmak için nanopartikül tedavi öncesi en az 24 saat seribaşı önemlidir.</li>
	<li>Orta kaldırmadan, 3 µL nanopartikül çözümün bir son falcarindiol konsantrasyonu 5 µM. için eklemek için adım 3.1 olduğu gibi aynı koşullarda 24 saat Incubate. Not: Nano tanecikleri hazırlık Parçacık toplama önlemek için hücre tedavisi, günü gerçekleştirilmiştir.</li>
	<li>Daha sonra tedavinin 24 saat sonra hücreleri 2 yıkama x PBS ile % 4 formaldehit oda sıcaklığında 10 dakika içinde tamir ve stok onları içinde PBS 4 ° C'de için görüntüsü kadar birkaç ay kadar. Dikkat: Bu bir duman başlık altında yapılmalıdır.<ol>
<li>Alternatif olarak, fiksasyon, 4 ', sonra 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) nükleer boyama gerçekleştirilebilir. Bunun için hücreleri, sabitleme sonra onları %0,1 ile permeabilize Triton X-100 30 dk, onları yıkamak 2 x ile PBS ve onları 300 250 µL ile leke ışıktan korunan nM DAPI 5 dakika.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. mikroskobu
<ol><li>
Floresans mikroskobu
	<ol>
<li>Bir elektron çarpılır CCD kamera ile donatılmış widefield floresan mikroskop görüntüleri elde etmek için kullanmak. 150 x NA 1,45 petrol amaç ve GFP LP kanal kullanın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Confocal mikroskobu
	<ol>
<li>Confocal mikroskobu görüntüleri, 63 x NA 1.4 petrol amaç, bir Argon lazer kullanarak (514 nm) dıı ve iki fotonlu lazer (780 nm) DAPI nano tanecikleri alımını hücrelere doğrulamak için için.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Firestone, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-Density+Lipoprotein+as+a+Vehicle+for+Targeting+Antitumor+Compounds+to+Cancer+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Bioconjugate+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Low-Density Lipoprotein as a Vehicle for Targeting Antitumor Compounds to Cancer Cells.</a> Bioconjugate Chemistry. 5 (2), 105-113 (1994).</li>
<li>Beloribi-Djefaflia, S., Vasseur, S., Guillaumond, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+metabolic+reprogramming+in+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogenesis%22%5BJournal%5D)">Lipid metabolic reprogramming in cancer cells.</a> Oncogenesis. 5 (1), 189(2016).</li>
<li>Xin, Y., Yin, M., Zhao, L., Meng, F., Luo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+progress+on+nanoparticle-based+drug+delivery+systems+for+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Biology+%26+Medicine%22%5BJournal%5D)">Recent progress on nanoparticle-based drug delivery systems for cancer therapy.</a> Cancer Biology & Medicine. 14 (3), 228(2017).</li>
<li>Merriel, S. W. D., Carroll, R., Hamilton, F., Hamilton, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+between+unexplained+hypoalbuminaemia+and+new+cancer+diagnoses+in+UK+primary+care+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Family+Practice%22%5BJournal%5D)">Association between unexplained hypoalbuminaemia and new cancer diagnoses in UK primary care patients.</a> Family Practice. 33 (5), 449-452 (2016).</li>
<li>Yue, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholesteryl+ester+accumulation+induced+by+PTEN+loss+and+PI3K%2FAKT+activation+underlies+human+prostate+cancer+aggressiveness%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Cholesteryl ester accumulation induced by PTEN loss and PI3K/AKT activation underlies human prostate cancer aggressiveness.</a> Cell Metabolism. 19 (3), 393-406 (2014).</li>
<li>dos Santos, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LDL-cholesterol+signaling+induces+breast+cancer+proliferation+and+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22Lipids+in+Health+and+Disease%22%5BJournal%5D)">LDL-cholesterol signaling induces breast cancer proliferation and invasion.</a> Lipids in Health and Disease. 13 (16), (2014).</li>
<li>Gallagher, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elevated+tumor+LDLR+expression+accelerates+LDL+cholesterol-mediated+breast+cancer+growth+in+mouse+models+of+hyperlipidemia+HHS+Public+Access%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">Elevated tumor LDLR expression accelerates LDL cholesterol-mediated breast cancer growth in mouse models of hyperlipidemia HHS Public Access.</a> Oncogene. 36 (46), 6462-6471 (2017).</li>
<li>Needham, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bottom+up+design+of+nanoparticles+for+anti-cancer+diapeutics%3A+%22put+the+drug+in+the+cancer%27s+food%22%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Drug+Targeting%22%5BJournal%5D)">Bottom up design of nanoparticles for anti-cancer diapeutics: "put the drug in the cancer's food".</a> Journal of Drug Targeting. 24 (9), 836-856 (2016).</li>
<li>Lacko, A. G., Mconnathy, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+cancer+chemotherapy+using+synthetic+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22United+States+Patent+Application+Publication%22%5BJournal%5D)">Targeted cancer chemotherapy using synthetic nanoparticles.</a> United States Patent Application Publication. , Pub. No.: US 2009/0110739 A1 (2009).</li>
<li>Nikanjam, M., Gibbs, A. R., Hunt, C. A., Budinger, T. F., Forte, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthetic+nano-LDL+with+paclitaxel+oleate+as+a+targeted+drug+delivery+vehicle+for+glioblastoma+multiforme%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Controlled+Release%22%5BJournal%5D)">Synthetic nano-LDL with paclitaxel oleate as a targeted drug delivery vehicle for glioblastoma multiforme.</a> Journal of Controlled Release. 124 (3), 163-171 (2007).</li>
<li>Teerlink, T., Scheffer, P. G., Bakker, S. J. L., Heine, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combined+data+from+LDL+composition+and+size+measurement+are+compatible+with+a+discoid+particle+shape%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Lipid+Research%22%5BJournal%5D)">Combined data from LDL composition and size measurement are compatible with a discoid particle shape.</a> Journal of Lipid Research. 45 (5), 954-966 (2004).</li>
<li>Schweizer, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+phase+I+study+of+niclosamide+in+combination+with+enzalutamide+in+men+with+castration-resistant+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">A phase I study of niclosamide in combination with enzalutamide in men with castration-resistant prostate cancer.</a> PLoS ONE. 13 (8), 0202709(2018).</li>
<li>Allen, T. M., Hansen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetics+of+stealth+versus+conventional+liposomes%3A+effect+of+dose%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimica+et+Biophysica+Acta+%28BBA%29+-+Biomembranes%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetics of stealth versus conventional liposomes: effect of dose.</a> Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Biomembranes. 1068 (2), 133-141 (1991).</li>
<li>Maeda, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Enhanced+Permeability+and+Retention+%28EPR%29+Effect+in+Tumor+Vasculature%3A+The+Key+Role+of+Tumor-Selective+Macromolecular+Drug+Targeting%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Enzyme+Regulation%22%5BJournal%5D)">The Enhanced Permeability and Retention (EPR) Effect in Tumor Vasculature: The Key Role of Tumor-Selective Macromolecular Drug Targeting.</a> Advances in Enzyme Regulation. 41 (1), 189-207 (2001).</li>
<li>Wong, A. D., Ye, M., Ulmschneider, M. B., Searson, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+Analysis+of+the+Enhanced+Permeation+and+Retention+%28EPR%29+Effect%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Quantitative Analysis of the Enhanced Permeation and Retention (EPR) Effect.</a> PLoS ONE. 10 (5), 0123461(2015).</li>
<li>Khodabandehloo, H., Zahednasab, H., Hafez, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanocarriers+Usage+for+Drug+Delivery+in+Cancer+Therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Iranian+Journal+of+Psychiatry+and+Behavioral+Sciences%22%5BJournal%5D)">Nanocarriers Usage for Drug Delivery in Cancer Therapy.</a> Iranian Journal of Psychiatry and Behavioral Sciences. 9 (2), (2016).</li>
<li>Kobaek-Larsen, M., El-Houri, R. B., Christensen, L. P., Al-Najami, I., Fretté, X., Baatrup, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+polyacetylenes%2C+falcarinol+and+falcarindiol%2C+isolated+from+carrots+prevents+the+formation+of+neoplastic+lesions+in+the+colon+of+azoxymethane-induced+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Food+%26+Function%22%5BJournal%5D)">Dietary polyacetylenes, falcarinol and falcarindiol, isolated from carrots prevents the formation of neoplastic lesions in the colon of azoxymethane-induced rats.</a> Food & Function. 8, 964-974 (2017).</li>
<li>Hervella, P., Parra, E., Needham, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Encapsulation+and+retention+of+chelated-copper+inside+hydrophobic+nanoparticles%3A+Liquid+cored+nanoparticles+show+better+retention+than+a+solid+core+formulation%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutics+and+Biopharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Encapsulation and retention of chelated-copper inside hydrophobic nanoparticles: Liquid cored nanoparticles show better retention than a solid core formulation.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 102, 64-76 (2016).</li>
<li>Hervella, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chelation%2C+formulation%2C+encapsulation%2C+retention%2C+and+in+vivo+biodistribution+of+hydrophobic+nanoparticles+labelled+with+57Co-porphyrin%3A+Octyl+Amine+ensures+stable+chelation+of+cobalt+in+Liquid+Nanoparticles+that+accumulate+in+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Controlled+Release%22%5BJournal%5D)">Chelation, formulation, encapsulation, retention, and in vivo biodistribution of hydrophobic nanoparticles labelled with 57Co-porphyrin: Octyl Amine ensures stable chelation of cobalt in Liquid Nanoparticles that accumulate in tumors.</a> Journal of Controlled Release. , (2018).</li>
<li>Zhigaltsev, I. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bottom-up+design+and+synthesis+of+limit+size+lipid+nanoparticle+systems+with+aqueous+and+triglyceride+cores+using+millisecond+microfluidic+mixing%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Bottom-up design and synthesis of limit size lipid nanoparticle systems with aqueous and triglyceride cores using millisecond microfluidic mixing.</a> Langmuir. 28 (7), 3633-3640 (2012).</li>
<li>Aubry, J., Ganachaud, F., Cohen Addad, J. -P., Cabane, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanoprecipitation+of+Polymethylmethacrylate+by+Solvent+Shifting%3A1+Boundaries%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Nanoprecipitation of Polymethylmethacrylate by Solvent Shifting:1 Boundaries.</a> Langmuir. 25 (4), 1970-1979 (2009).</li>
<li>Karnik, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microfluidic+Platform+for+Controlled+Synthesis+of+Polymeric+Nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Letters%22%5BJournal%5D)">Microfluidic Platform for Controlled Synthesis of Polymeric Nanoparticles.</a> Nano Letters. 8 (9), 2906-2912 (2008).</li>
<li>Gaumet, M., Vargas, A., Gurny, R., Delie, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanoparticles+for+drug+delivery%3A+The+need+for+precision+in+reporting+particle+size+parameters%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutics+and+Biopharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Nanoparticles for drug delivery: The need for precision in reporting particle size parameters.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 69 (1), 1-9 (2018).</li>
<li>Christensen, L. P., Brandt, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioactive+polyacetylenes+in+food+plants+of+the+Apiaceae+family%3A+Occurrence%2C+bioactivity+and+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmaceutical+and+Biomedical+Analysis%22%5BJournal%5D)">Bioactive polyacetylenes in food plants of the Apiaceae family: Occurrence, bioactivity and analysis.</a> Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 41 (3), 683-693 (2016).</li>
<li>Kobaek-Larsen, M., Christensen, L. P., Vach, W., Ritskes-Hoitinga, J., Brandt, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibitory+Effects+of+Feeding+with+Carrots+or+%28-%29+-Falcarinol+on+Development+of+Azoxymethane-Induced+Preneoplastic+Lesions+in+the+Rat+Colon%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Agricultural+and+Food+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Inhibitory Effects of Feeding with Carrots or (-) -Falcarinol on Development of Azoxymethane-Induced Preneoplastic Lesions in the Rat Colon.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 53, 1823-1827 (2005).</li>
<li>Jin, H. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+antitumor+natural+compound+falcarindiol+promotes+cancer+cell+death+by+inducing+endoplasmic+reticulum+stress%5BTitle%5D)+AND+%22CellDeath+%26+Disease%22%5BJournal%5D)">The antitumor natural compound falcarindiol promotes cancer cell death by inducing endoplasmic reticulum stress.</a> CellDeath & Disease. 3, 1-9 (2012).</li>
<li>Walke, P. Physico-Chemical Parameters of Nanoparticles that Govern Prodrug Design and Application in Anticancer Nanomedicine in Physics, Chemistry, Pharmacy. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWalke%2C+P+%22University+of+Southern+Denmark+%28SDU%29%22">University of Southern Denmark (SDU)</a>. , (2018).</li>
<li>Walke, P. B., Hervella, P., Needham, D. Lipid-Coated Stealth Nanoparticles of Novel Hydrophobic Prodrug, Niclosamide Stearate, as Cancer Therapeutic: Formulation and Physico-Chemical Characterization of Nanoparticles. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWalke%2C+PB+%226th+International+Pharmaceutical+Federation+Pharmaceutical+Sciences+World+Congress%22">6th International Pharmaceutical Federation Pharmaceutical Sciences World Congress</a>. , Stockholm, Sweden. (2017).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Basit ilaç dağıtım için nano tanecikleri lipid kaplı imalatı için detaylı bir iletişim kuralı, solvent değişen hızlı, tekrarlanabilir ve ölçeklenebilir hızlı enjeksiyon yöntemi takip27,28 yapıldı ve bu yazıda, olarak gösterilmesini sağlar falcarindiol için uygulanan. Sulu faz içine organik faz enjeksiyon hızını kontrol ve kaplama lipidler uygun konsantrasyonlarda falcarindiol çekirdek kat için kullanarak, alt-100 nm aralığında parçacık başarıyla elde. Çalkantılı ...

Lipid kaplı nano tanecikleri artan bir ilgi ile ilgili işlevlerine uyuşturucu dağıtım sistemleri için kanser tedavisi1olarak görüyoruz. Kanser bir değişmiş lipid metabolizma programlama2 ve3çoğalırlar kolesterol için artan bir ihtiyaç var. Onlar kolesterolü1 overexpress ve daha fazla kolesterolü normal hücreleri, daha bir kanser hastanın LDL sayısı-ebilmek düz gitmek aşağı4ölçüde bu almak. LDL alımını yayılması ve meme kanseri6' ı işgal sonuçlanan agresif fenotipleri5 teşvik etmektedir. LDL reseptörleri (LDLRs) bir bolluk metastatik potansiyel7prognostik göstergedir. LDL ve onun alımını kanser hücreleri tarafından esinlenerek, yeni bir strateji adı olmuştur: kanserin gıda gibi bak uyuşturucu8. 8,9,10 ilham doğal kolesterolü11 çekirdek ve lipid stabilize tasarım tarafından antikanser ilaçlar teslim yöntemi olarak böylece, bu yeni nanopartikül ilaç teslim tasarımları kanser hücrelerinin. Bu pasif dağıtım sistemi hedefleme, özellikle Kapsüllenen, genellikle oral doz formunda verilen ama az miktarda kan dolaşımına kadar onların beklenen etkinliği12sınırlama, ilaçlara sağlamak hidrofobik ilaçlar destekler. Gelişmiş stealth lipozomlar13, Polietilen glikol (PEG) kaplama immünolojik yanıt azaltmaya yardımcı olur ve optimum tümör alımı için kan dolaşımını sözde tarafından uzanır gibi nüfuz ve saklama (EPR) etkisi 14 , 15. ancak, ek olarak, bazı örnekler, dolaşımda istikrarsızlık ve istenmeyen dağıtım sistemi16, bazı engeller, ne kadar ve ne ölçüde böyle nano tanecikleri hücreleri tarafından alınır ve ne gibi çözülmemiş kalır hücre içi kaderlerini. Burada bu kağıt bir özel hidrofobik antikanser ilaç falcarindiol, confocal ve kullanma teknikleri Imaging epifluorescence nanopartikül alımını giderir.
Çalışmanın amacı lipid kaplı nano tanecikleri falcarindiol, imal etmek ve hMSCs onların hücre içi Anlamazdın çalışmaya var. Böylece, potansiyel olarak, yönetim istikrarı, teslimatla ilişkili zorlukların üstesinden ve bioavailability geliştirmek. Böylece bu antikanser ilaç için yeni bir teslimat sistemi değerlendirilmesi. Daha önce falcarindiol sözlü olarak yüksek konsantrasyonlu saf falcarindiol bir gıda takviyesi17olarak idare. Ancak, bu umut verici ilaç teslim etmek daha yapılandırılmış bir yaklaşım vardır. Bu nedenle, falcarindiol nano tanecikleri, fosfolipid ve monolayer parçacık özünü oluşturan saf uyuşturucu ile Kapsüllenen kolesterol ile dizayn edilmiştir. Değişen, solvent hızlı enjeksiyon yöntemi olarak son zamanlarda geliştirilen tarafından Needham vd. 8, polyacetylene falcarindiol kapsüllemek için bu çalışmada kullanılır.
Yöntemi daha önce lipid nano tanecikleri imalatı için tanı görüntüleme ajanlar18,19saklanması gibi moleküller (triolein)27 ve ilaçlar (orlistat, niclosamide stearat) test için kullanılmıştır8 ,27,28. Doğru molekülleri ile yürütülen nispeten basit bir tekniktir. Polar bir çözücü içinde çözünmüş son derece çözünmez hidrofobik solutes, mikro parçacıklar, onların kritik çekirdekleşme (~ 20 nm çapında), sınırı oluşturur. Solvent Satım antisolvent aşırı içine organik çözüm hızlı bir enjeksiyonla gerçekleştirilir (1:9 organik genellikle, sulu bir aşamasında: sulu hacim oranı)20,21.
Nano tanecikleri kompozisyon tasarımını yükselişi için birden fazla avantajı ver. DSPC:Chol bileşenler çok sıkı, neredeyse geçirimsiz, biyouyumlu ve biyolojik olarak parçalanabilen monolayer sağlar. PEG retiküloendotelyal sistem (karaciğer ve dalak) ve mononükleer Fagosit sistemi karşı koruyarak, önleme tarafından herhangi bir alım yavaşlama bağışıklık sistemi tarafından opsonizasyonla bir kalkan olarak davranan bir sterically teskin arabirimi sağlar onların saklama ve bağışıklık sistemi tarafından bozulması ve bu nedenle, onların dolaşım yarı-kan22yılında artan. Bu hastalıklı siteler, extravasate kadar dolaşmaya parçacıklar sağlar damar sistemi nerede sızan, tümör gibi izin vererek parçacıkları pasif birikimi çıkmasına EPR-etkisi. Ayrıca, lipid kat bir kinetically onun kritik çekirdeği boyut27,28özünde yakalama tarafından nano tanecikleri boyutu üzerinde daha iyi kontrol izin verir. Lipidler (henüz bu proje için mevcut değildi hedefleme, peptid dahil) çeşitli yüzey özellikleri, bir saf uyuşturucu çekirdek ve düşük polydispersity22,27,28neden. Partikül boyut analiz için kullanılmış DLS, araştırmacılar aynı anda çok sayıda parçacıkların boyutunu ölçmek için sağlar bir teknik yöntemidir. Ancak, bu Yöntem nano tanecikleri monodispersed23değilseniz ölçümleri için daha büyük boyutlarda, önyargı. Bu sorun lipid ceket ile de değerlendirilmektedir. Daha fazla bu temel tasarım detaylarını ve tüm özellikleri miktar diğer yayınlar27,28yılında verilmiştir.
Nano tanecikleri kapsüllü falcarindiol, Maydanozgiller aileden bitkilerde bulunan bir diyet polyacetylene ilaçtır. Bu ikincil bir metaboliti antienflamatuar aktivitesi, antibakteriyel etkileri ve sitotoksisite kanser hücre hatları geniş bir karşı da dahil olmak üzere, sağlık teşvik efektleri görüntülemek için bulundu alifatik C17polyacetylenes türü var. Onun yüksek reaktivite farklı biomolecules, mercapto ve amino grupları24karşı çok reaktif bir bölücü olarak hareket ile etkileşim yeteneği ile ilgilidir. Biyolojik mekanizmaları hala bilinmeyen olmakla birlikte Falcarindiol daha önce iki nokta üst üste17,25, neoplastik lezyonlar sayısını azaltmak için gösterilmiştir. NF-κB, COX1, COX-2 gibi biomolecules ile etkileşim kurar ve sitokinler, hücre döngüsü, endoplazmik retikulum (ER) tutuklamak için önde gelen tümör ilerleme ve hücre proliferasyonu süreçlerinin, inhibe stres düşünce ve apoptosis be 17,26 kanser hücrelerinin içinde. Falcarindiol Bu çalışmada kullanılan bir örnek antikanser ilaç antikanser potansiyeli ve mekanizması nedeniyle okudu gibi şu anda ve umut verici Antikanser etkisi gösterir çünkü. Nano tanecikleri hücresel alımını hMSCs içinde test edilmiş ve epifluorescence ve confocal mikroskobu kullanarak yansıma. Bu hücre tipi büyük onun büyüklüğü nedeniyle, onları Mikroskopi için ideal hale seçildi.

<table><tbody><tr><td>12 mL Vidalı Boyunlu Flakon (Şeffaf cam, 15-425 diş, 66 X 18,5 mm)</td><td>Microlab Aarhus A/S</td><td>ML 33154LP</td><td></td></tr><tr><td>6 kuyulu plakalar</td><td>Greiner Bio One International GmbH</td><td>657160</td><td></td></tr><tr><td>Mutlak Etanol</td><td>EMD Millipore (VWR)</td><td>EM8.18760.1000</td><td></td></tr><tr><td>Kloroform</td><td>Rathburn Chemicals Ltd.</td><td>RH1009</td><td></td></tr><tr><td>Kolesterol</td><td>Avanti Polar Lipidler, Inc.</td><td>700000P</td><td></td></tr><tr><td>Konfokal Mikroskop</td><td>Zeiss LSM510</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kapak Kaymaları kalınlığı #1.5</td><td>Paul Marienfeld GmbH & Co</td><td>117650</td><td></td></tr><tr><td>Kurutucu</td><td>Kendi Kendine Yapı</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DiI</td><td>Invitrogen</td><td>D282</td><td></td></tr><tr><td>DLS</td><td>Beckman Coulter</td><td>DelsaMAXpro 3167-DMP</td><td></td></tr><tr><td>DSPC (Kloroform stoğu)</td><td>Avanti Polar Lipids, Inc.</td><td>850365C&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>DSPE PEG 2000 (Kloroform stoğu)</td><td>Avanti Polar Lipids, Inc.</td><td>880120C</td><td></td></tr><tr><td>eVol XR</td><td>SGE analitik bilimi, Trajan Scientific Australia Pty Ltd.</td><td>2910200</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Sığır serumu</td><td>Gibco</td><td>10270-106</td><td></td></tr><tr><td>Floresan Mikroskoskop</td><td>Olymous IX81</td><td></td>, <td>Manuel TIRF ve Andor iXon EMCCD</td></tr><tr><td>İnkübatörü</td> ile <td>Panasonic&nbsp;</td><td>MCO-18AC</td><td></td></tr><tr><td>Manyetik pire</td><td>VWR Kimyasalları</td><td>15 x 4,5 mm</td><td>PTFE kaplamalı</td></tr> silindirik şekil <tr><td>Manyetik karıştırıcı</td><td>IKA</td><td>RT-10</td><td></td></tr><tr><td>Minimum Temel Medya</td><td>Gibco</td><td>32561-029</td><td></td></tr><tr><td>Hücre kültürü için PBS tabletleri</td><td>VWR Kimyasalları</td><td>97062-732</td><td></td></tr><tr><td>Kalem / strep</td><td>VWR Kimyasalları</td><td>97063-708</td><td></td></tr><tr><td>Fosfat Tampon Tuzlu Su (PBS, pH 7.4)</td><td>Thermo Fisher</td><td>10010031</td><td></td></tr><tr><td>Döner Evaporatör</td><td>Rotavapor, B&uuml; chi Labortechnik AG</td><td>R-210</td><td></td></tr><tr><td>Numune yoğunlaştırıcı&nbsp;</td><td>Stuart, Cole-Parmer Enstrüman Şirketi, LLC</td><td>SBHCONC/1</td><td></td></tr></tbody></table>

falcarindiol tarafından insan mezenkimal kök hücre içeren yeni lipid kaplı nano tanecikleri alımını

Uptake of New Lipid-coated Nanoparticles Containing Falcarindiol by Human Mesenchymal Stem Cells

Nano tanecikleri uyuşturucu dağıtım sistemlerinin kanser tedavisi için artan bir ilgi odağı vardır. Lipid kaplı nano tanecikleri yapısı ve boyut olarak düşük yoğunluklu lipoproteinler (kolesterolü) tarafından kanser hücrelerin prolifere kolesterol için artan bir ihtiyaç, ve bu antikanser ilaçlar kanser için teslim yöntemi olarak istismar çünkü ilham vardır hücreleri. Ayrıca, bağlı olarak ilaç kimya, ilaç Kapsüllenen dolaşım içinde vivo sırasında ilacın yıkımı önlemek için avantajlı olabilir. Bu nedenle, bu çalışmada, lipid kaplı nano tanecikleri falcarindiol düşmesine karşı kimyasal yapısını stabilize etmek ve geliştirmek için potansiyel yeni teslimat sistemi sağlayan antikanser ilaç falcarindiol, imal etmek bu tasarım kullanılır, tümör tarafından alımı. Falcarindiol nano tanecikleri, kolesterol ve fosfolipid monolayer parçacık arıtılmış uyuşturucu özünü Kapsüllenen bir dizayn edilmiştir. Lipid monolayer kaplama 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DSPC), kolesterol (CHOI) ve 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-2000 oluşur] (DSPE PEG 2000) ile birlikte floresan etiket dıı (43:50:5:2 molar oranları). Nano tanecikleri tarafından iyi-solvent Anti-solvent değişimi için nano tanecikleri çökelti bir hızlı ve basit bir tekniktir hızlı enjeksiyon yöntemi kullanılarak imal edilmiştir. Sulu bir aşamaya nanopartikül bileşenleri içeren bir etanol çözüm hızlı bir enjeksiyon oluşur. Floresan nano tanecikleri boyutunu 74.1 ± 6,7 nm'de dinamik ışık saçılma (DL) ölçülür. Nano tanecikleri alımını insan mezenkimal kök hücre (hMSCs) test ve floresan ve confocal mikroskobu kullanarak yansıma. Nano tanecikleri alımını hMSCs, böyle bir istikrarlı uyuşturucu dağıtım sistemi falcarindiol için potansiyeli düşündüren görülmektedir.

Nano tanecikleri iki farklı türde fabrikasyon, Yani saf falcarindiol nano tanecikleri ve lipid kaplı falcarindiol nano tanecikleri vardı. Yağlar ve kolesterol çeşitli konsantrasyonları test edildi. Tablo 1' de gösterildiği gibi suda oluşan ve PBS içinde ölçülen kaplamasız nano tanecikleri 0.571 bir polydispersity dizin (PDI) ile 71 ± 20,3 nm çapında vardı. Bu parametreler bir DLS Çözümleyicisi üzerinde ölçüldü. Deneylerde kullanılan ve çok floresan boyalar, dıı, dahil olm...

Bu makalede falcarindiol lipid kaplı 74 nm nano tanecikleri encapsulation. Nano tanecikleri lipid damlacıkları içine insan kök hücreleri tarafından hücresel alımını floresan ve confocal görüntüleme tarafından izlenir. Nano tanecikleri değişen solvent hızlı enjeksiyon yöntemiyle cihazlarında ve büyüklükleri dinamik ışık saçılma tekniği ile ölçülür.

Falcarindiol tarafından insan mezenkimal kök hücre içeren yeni Lipid kaplı nano tanecikleri alımını

Nanoparticles are the focus of an increased interest in drug delivery systems for cancer therapy. Lipid-coated nanoparticles are inspired in structure and ...

Hızlı enjeksiyon yöntemi ile lipid kaplı nano tanecikleri imalatı kanser tedavisi için istikrarlı bir ilaç dağıtım sistemi sağlar. Bu teknik hidrofobik ilaçları kapsülleyen nanopartikül üretimi için basit, hızlı, ölçeklenebilir ve tekrarlanabilir bir tekniktir. Bu teknik etkili çeşitli hastalık koşullarında kullanılabilir hydrphobic malzemelerden tanı ve tedavi nano tanecikleri imal etmek için geçerlidir.Bu üretim tekniği, DLS ile birlikte, lipidler, proteinler ve polimerler gibi hidrofobik maddelerin çekirdekleşme ve büyümesini incelemek için kullanılabilir. Nano tanecikleri imal etmeden önce ilaç maddenizin fiziksel kimyasal özelliklerini bilmek çok önemlidir. Ayrıca, kaplama lipidlerin doğru konsantrasyonlarını kullandığınızdan emin olun.Bu yöntemin görsel gösteri ve üretim tekniğinin basitliğini göstermek için hücrelere nano tanecikleri olarak ilacın başarılı teslim göstermek için önemlidir. Kloroform ve formaldehit ile çalışırken önlem alınması ve duman başlığı altında çalışma yapılması gerekmektedir. Başlamak için, 250 mikromolar falkarindiol stok çözeltisi 2.4 mililitre dağıtmak bir Scintillation vial% 70 etanol içinde çözünmüş.Bir örnek konsantratörü kullanarak, kuru falkarindiol elde etmek için yaklaşık dört saat boyunca sıvı fraksiyonu buharlaşır. Numune konsantratörü kullanarak, numuneyi yoğunlaştırmak için oda sıcaklığında numunenin üzerine gaz verin. Kuruduktan sonra, burada gösterilen bileşenleri duman kaputundaki ışıltılı şişeye ekleyin ve çapraz kontaminasyonu önlemek için her bileşeni ekledikten sonra şırınganın kloroformla temizlediğinden emin olun.Daha sonra, çözücünün buharlaşmaması ve böylece konsantrasyonu değiştirmesi için lipitleri içeren şişeleri hemen kapatın. Işıktan DiI korumak için alüminyum folyo ile şişe sarın ve kloroform buharlaştırmak için kurutucu bir gecede örnek bırakın. Ertesi gün, 1.2 mililitre son bir hacim yapmak için mutlak etanol kurutulmuş örnek eritin.Bu çözelti organik fazı temsil eder. 12 mililitrelik bir cam şişe alın ve dokuz mililitre saf su yla doldurun. Sonra su dokuz mililitre içeren şişe içine bir manyetik pire ekleyin.Bir manyetik karıştırıcı üzerine şişe yerleştirin ve 500 rpm karıştırın. Sonra dağıtım sistemine bir mililitrelik cam şırınga takın ve kloroform'u cam şırınganın içine ve dışına en az 10 kez girip çıkar. Kloroformu her seferinde atık toplayıcısına dağıtın.Şırıngayı kloroformla temizlemek herhangi bir kontaminasyonu önlemeye yardımcı olur. Şimdi şırıngayı etanolle aç. Astar eski çözücü nün yerini alır ve hava kabarcıklarını temizler.Şırıngayı kullanarak, organik fazın bir mililitreaspire, ve dokuz mililitre su işareti nin ortasına kadar cam şişe içine şırınga yerleştirin. Şişenin ortasında sabit olarak saklayın ve dağıtım sistemindeki dağıtım düğmesine basarak çözeltiyi saniyede 833 mikrolitreye enjekte edin. Bu% 10 etanol falkarindiol 50 mikromolar lipid kaplı nano tanecikleri 10 mikrolitre üretir.Bu enjeksiyon hızı dar parçacık boyutu dağılımı ile en iyi nano tanecikleri elde etmek için bulunmuştur. Enjeksiyon sırasında, iğnenin merkeze sabit ve düz olarak yerleştirildiğinden emin olmak önemlidir. Enjeksiyondan hemen sonra, şişeyi karıştırıcıdan çıkarın ve numuneyi 50 mililitrelik yuvarlak alt şişeye aktarın.Şişeye döner evaporatöre saldırın ve oda sıcaklığında bir mililitre organik çözücü buharlaşın. Aşırı kabarcık oluşumunu önlemek için dikkatli olun. Nanopartikül süspansiyonu şişeden 12 mililitrelik cam şişeye aktarın.Hacmin dokuz mililitre olduğundan emin olun ve ardından numuneyi iki 12 mililitrelik cam şişeye bölün. Daha sonra şişelerden birine 0,5 mililitre ultra saf su ve diğer şişede 10 X fosfat tamponlu 0,5 mililitre saf su ekleyin. Dijital ışık saçılma aletini açın ve istenilen sıcaklığı stabilize olana kadar 20 dereceye ayarlayın.Daha sonra burada gösterildiği gibi enstrüman parametrelerini ayarlayın. Plastik cuvette'yi bir mililitre nanopartikül süspansiyonla doldurun ve ölçüme başlayın. Kullanılan çözücüye bağlı olarak ölçülen boyutu bildirin.Yaklaşık %30'luk bir hücre yoğunluğu elde etmek için altı kuyulu tabağa yerleştirilen steril 1,5 kapak lı yaklaşık 50.000 hücre tohumu daha sonra her kuyuda üç mililitrelik son bir hacim için kültür ortamı ekleyin. Standart kültür koşullarında hücreleri 24 saat kuluçkaya yatırın. Ertesi gün, beş mikromolar son bir falkarindiol konsantrasyonu için nanopartikül çözeltisi üç mikrolitre ekleyin.Sonra hücreleri 24 saat boyunca kuvöze geri ver. Tedaviden sonra, pbs ile iki kez hücreleri yıkayın ve daha sonra oda sıcaklığında 10 dakika boyunca% 4 formaldehit onları düzeltmek. Fiksasyondan sonra, hücreleri 30 dakika boyunca %0.1 Triton X-100 ile geçirin.Daha sonra pbs ile iki kez yıkayın ve ışıktan korunan, beş dakika boyunca 300 nanomolar DAPI 250 mikrolitre ile leke. Bir damla PBS kullanarak kapak fişini slayta yerleştirin. 150x öznel bir ortama dönün ve slaytı elektron la çarpılmış ccd kamera ile donatılmış geniş alan floresan mikroskobu aşamasına aktarın.GFP-LP kanalını kullanarak görüntü hücreleri. Ayrıca, 1.4 sayısal diyafram ile 63x yağ hedefi kullanarak konfokal mikroskopi görüntüleri alarak hücrelere nano tanecikleri alımını doğrulayın. Görüntü DiI 514 nanometre ve DAPI 780 nanometre de iki foton lazer kullanarak bir argon lazer kullanarak.Suda oluşan ve PBS cinsinden ölçülen falkarindiolun kaplamasız nano partikülleri, 0,571 PD indeksi ile yüksek polidispersitlik gösterdi. Bu değer, parçacık boyutlarının geniş ve tek düze olmayan dağılımını gösterir. Buna karşılık, bu videoda üretilen falkarindiol lipid kaplı nano tanecikleri 0.182 polidispersity indeksi ile 74.1 nanometre, parçacık boyutları nispeten monodisperse ve tektip dağılımı gösterdi.Hücrelerin içindeki nano partiküllerin ilk gözlemi olarak epifloresan mikroskopi görüntüleri 24 saatlik tedaviden sonra elde edildi. Nano tanecikler beyaz, parlak nokta olarak görselleştirildi ve nano partiküllerin çekirdeği çevreleyen hücrelerin içinde olduğu varsayımına varılabilirdi. Falkarindiol nano partiküllerinin hücrelere girdiğini doğrulamak için hücrelere konfokal mikroskopi de yapıldı.Nano tanecikleri çok sayıda burada, her hücrede sitoplazma da dağınık gösterilir. Bu sonuçlar nano tanecikleri falkarindiol için istikrarlı bir ilaç dağıtım sistemi olarak hareket göstermektedir. Bu prosedürü çalışırken, doğru karıştırma sağlamak için, merkezinde, tohumlama sabit tutarak, doğru enjeksiyon hızında çözüm enjekte etmek önemlidir.Bu prosedür terapötik nano tanecikleri formüle etmek için herhangi bir hidrofobik ilaç için veya kanser gibi çeşitli hastalık koşullarında kullanılabilecek tanısal nano tanecikleri formüle görüntüleme ajanları için kullanılabilir. Bu teknik, nano partiküllerin hücreler tarafından ele geçirilme mekanizması, canlı hücre görüntülemesi ve ilacın antikanser etkisini inceleme konusunda daha fazla araştırma yapılmasını sağladı.

uptake-new-lipid-coated-nanoparticles-containing-falcarindiol-human

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biyomühendislik

Sunumun Amaç, kıkırdak defektleri, MR görüntüleme ile görüntülendi olabilir matris ilişkili kök hücre implantları üretmek için son derece tekrarlanabilir bir yöntem göstermektir. Kök hücreler, agaroz ile karışık FDA onaylı Ferumoxides, kıkırdak hasarlarının içine implante edilerek 7T MR tarayıcı ile görüntülü olarak etiketlenir.

Ferumoxides implantasyonu Kıkırdak Kusur İnsan Mezenkimal Kök Hücreler Etiketli

Biz, FDA onaylı, süperparamanyetik demir oksit (SPIO), ferumoxytol (Feraheme) ile kök hücre etiketleme ve izleme için kullanılan bir tekniktir açıklar. Hücresel görüntüleme tekniği, manyetik rezonans görüntüleme (MR) görüntüleme için kullanır Bu, başarılı ya da başarısız hastalarda kök hücre engraftments uzun vadeli izleme ve teşhis için kolay erişilebilir.

Kök Hücreler Ferumoxytol, FDA Onaylı Demir Oksit Nanopartikül Etiketleme

İnsan mezenkimal kök hücrelerin (MSC) immünomodülatör özellikleri, klinik uygulama için giderek daha önemli görünmektedir. Floresan boya carboxyfluorescein süksinimidil ester (CFSE) ile ön-lekeli MSC ve periferal kan lökositlerinin bir ko-kültür sistemi kullanılarak, efektör lökosit çoğalmasının ve spesifik alt popülasyonları MSC immünomodülasyon in vitro değerlendirme tarif eder.

İnsan Mezenkimal Kök Hücre İmmünomodüler Properties (MKH) değerlendirilmesi

Bu iletişim kuralı tarafından far-red floresan intra artiküler (IA) enjeksiyon yoluyla bir sıçan diz osteoartrit (KOA) modelinde etiketleme hücre sebat ve biodistribution insan yağ elde edilen Mezenkimal kök hücrelerin (haMSCs) izlemek için etkili bir yöntem açıklanır.

Vivo İnsan yağ elde edilen Mezenkimal kök hücrelerin sıçan diz osteoartrit modelinde floresan lipofilik membran boya ile izleme

Bu iletişim kuralı insan diş kökü çıkarılan diş kök hücrelerin geçici genetik mühendisliği açıklar. Uygulanan non-viral değişiklik strateji tedavi kök hücre ürünlerin geliştirilmesi için bir temel olabilir.

Yalıtım, karakterizasyonu ve insan diş kökü kök hücrelerin genetik değişiklik mikroRNA tabanlı

Bu protokol, insan göbek kordonu kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin küçük hücre dışı veziküllerinin (hUC-MSC-sEV'ler) basit bir laboratuvar ölçeğinde tezgah üstü ayar ile nasıl izole edileceğini göstermektedir. İzole hUC-MSC-sEV'lerin boyut dağılımı, protein konsantrasyonu, sEVs belirteçleri ve morfolojisi, sırasıyla nanopartikül izleme analizi, BCA protein testi, batı lekesi ve iletim elektron mikroskobu ile karakterize edilir.

Küçük Hücre Dışı Vezikülleri İnsan Mezenkimal Kök Hücrelerinden İzole Etmek için Basit Bir Tezgah Üstü Filtrasyon Yöntemi

Bu protokol, tek hücreli sıralama yöntemi kullanılarak insan mezenkimal kök hücrelerinin floresanla aktive edilen hücre sınıflandırmasının kullanımını açıklar. Spesifik olarak, tek hücreli ayıklamanın kullanımı, multiparametrik akış sitometrisi tabanlı bir yaklaşımla birleştirildiğinde, heterojen bir popülasyondan immünofenotiplenmiş hücrelerin %99 saflığını sağlayabilir.

İnsan Eksfoliye Edilmiş Yaprak Döken Dişlerden İmmünfenotipli Mezenkimal Kök Hücrelerin Tek Hücreli Sınıflandırılması

Bu protokol, insan yağ kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin (ADSC'ler) kültürlenmesinden ve süpernatantın toplanmasından ultrasantrifüjleme kullanılarak hücre dışı veziküllerin (EV'ler) çıkarılmasına kadar tüm prosedürleri açıklar.

İnsan Adipoz Kaynaklı Mezenkimal Kök Hücrelerden Hücre Dışı Veziküllerin Saflaştırılması ve Karakterizasyonu

Heterojen insan UC-MSC'lerini oluşturan üç ana alt gruptan biri olan BAMBIyüksekMFGE8yüksek MSC'lerin izolasyonu, belirli hastalıklarda klinik etkinliği artırmak için gelecekteki uygulaması için bu alt tipin özelliklerinin ve işlevlerinin tam olarak anlaşılmasına yardımcı olur. Burada, BAMBIyüksekMFGE8yüksek UC-MSC'leri sıralamak için bir yöntem sunuyoruz.

İnsan BAMBIyüksekMFGE8yüksek Göbek Kordonu Kaynaklı Mezenkimal Stromal Hücrelerin İzolasyonu

Bu protokol, gen tedavisi için mezenkimal kök hücre (MSC) türevli ekstraselülük vezikül biyomimetiklerinin üretilmesi ve saflaştırılması için bir yöntem tanıtmayı amaçlamaktadır. Nanovezikül, MSC'den türetilen lipid çift katmanlarla sınırlıdır ve lümende ilgi çekici geni taşıyan rekombinant AAV'leri kapsüller. Bu nanovezikül, in vivo gen taşıması için gelişmiş bir vektör sunar.

Gen Taşımayı Artırmak İçin Mezenkimal Kök Hücre Zarı Zarflı Nanoveziküllerin Geliştirilmesi

Öğrenin, hızlı enjeksiyon yöntemiyle lipid kaplı nanopartikül üretimini ve insan mezenkimal kök hücrelerde falcarindiol alımını. Bu yöntem, kanser tedavisi için ilaç taşıma sistemleri geliştirmeye yardımcı olur.

Falcarindiol tarafından insan mezenkimal kök hücre içeren yeni Lipid kaplı nano tanecikleri alımını

Daha fazla video keşfet