Çift iplikçikli RNA ve desen tanıma reseptörleri negatif anlamda RNA virüsü enfeksiyonu confocal görüntüleme

RNA virüsü çoğaltma sırasında üretilen çift iplikçikli RNA desen tanıma reseptörleri tarafından doğuştan gelen bağışıklık yanıtının ikna etmek için kabul edilebilir. Negatif anlamda RNA virüsleri için alt düzey dsRNA ve PRRs arasındaki etkileşimi belirsizdir. Arenavirus dsRNA ve tek tek hücreleri içinde PRR görselleştirmek için confocal mikroskopi yöntemi geliştirdik.

Geleneksel çift iplikli RNA algılama testi genellikle negatif anlamda RNA virüs enfeksiyonunda oluşan çift iplikli RNA'yı algılayacak kadar hassas değildir. Bu nedenle çift iplikli RNA ve konak desen tanıma reseptörleri arasındaki etkileşim bu virüsler için büyük ölçüde zor kalmıştır. Bu protokolü kullanarak viral nükleer protein, çift iplikli RNA arasındaki etkileşimi görselleştirebiliyor ve karakterize edebiliyoruz ve negatif anlamlı RNA virüsü için tek hücredüzeyinde bir PR'yi barındırabiliyoruz. Bu çift iplikçikli RNA ve bireysel hücrelerde iki viral veya konak protein hedefleri eşzamanlı boyama sağlayan bir multipleks tsay olduğunu. RNA-FISH tayininin aksine bu teknik RNA dizisi bağımsızdır ve genellikle protein hedeflerinin antikor tespiti ile uyumludur. Enfeksiyondan 24 saat önce 200,000 insan akciğer epitel A549 hücresini 12 kuyulu tabaklarda Poli-D-Lizin kaplı cam kapak lara koyup 37'de yetiştirerek başlayın