Bir Xenogeneic Murine modelinde Graft-versus-Host hastalığının indüksiyon ve skorlama ve dijital PCR kullanarak fare dokularında ınsan T hücrelerinin ölçümü

Bu protokol, ksenogreft-versus-host hastalığı, ya da ksenoGVHD neden nasıl ve nasıl kör ve tutarlı sonuçlar sağlamak için klinik puanlama standart. KksenoGVHD modeli, murine T hücreleri yerine insana karşı immünsupresif tedavileri test etmek için in vivo bir yöntem sağlar, kliniğe bu çalışmaların çevirisini geliştirmek. Prosedürü gösteren Amara Seng, benim laboratuvar bir yüksek lisans öğrencisi olacaktır.

Enjeksiyondan bir gün önce, sekiz ila 12 haftalık, obez olmayan diyabetik scid gama veya NSG, sterilize pasta kafesi fareler yerleştirin ve bir sezyum-137 kaynağında fareler ışınlamak 150 centigrays toplam doz, hatta ışınlama sağlamak için yavaş bir rotasyon ile. Daha sonra, bir gecede steril bir biyogüvenlik kabini temiz kafesler içine fareler yerleştirin. Ertesi sabah, yedi periferik kan mononükleer hücreleri, ya da PBMCs, fare başına 1.1 kez 10 izole etmek için yeterli sağlıklı insan kanı toplamak ve pbs% 2 fetal sığır serumu, ya da FBS eşit hacimde heparinize kan seyreltmek.