Name: Kuyruk damarlar bir vakum kan toplama sistemi ve gözlük büyüteç ile sigara anestezi farelerin koleksiyonundan değiştirilmiş kan (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-02-02T14:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 42 s
Description: Öğrenin farelerde kuyruk damarından vakum tüp sistemi ve gözlük büyüteç kullanarak tekrarlanabilir kan alma yöntemini. Bu teknik minimal yaralanma sağlar ve başarı oranını artırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu eser desteklenmiştir Doğa Bilim Vakfı Hibe Hubei eyaleti, Çin [Grant No 2018CFB761].

1. yetiştirme
<ol><li>12 hafta yaşlı Kunming fare kullanın. Not: Biz fare kullanılan (n = 40, 20 erkek, 37-46 g, demek 42.38 ± 2,39 g) deneysel hayvan merkezi kent tıp Koleji'nden.</li>
	<li>Fareler yiyecek ve içme suyu ücretsiz erişim standart koşullar altında ev. Ahşap tıraş ile 530 cm2 kafeste iki fare yatak takımları tutmak.</li>
	<li>21 – 23 °c arasında bir oda ısısını korumak</li>
	<li>Fareler bir normal tuz diyet ile besleme (% 0,3 NaCl) çalışma boyunca.</li>
</ol>2. kan örnek koleksiyonu
<ol><li>Aşağıdaki donanımları hazırlamak: Vakum tüplü (1 mL), kelebek iğne, gözlük büyüteç ve plastik yasaklama tutucu. Onları (Şekil 1) steril bir yüzeye yerleştirin.</li>
	<li>Bir fare plastik bir yasaklama tutucuya yerleştirin ve kuyruğunu (20-30 °C) ılık suyla yıkayın. Kuyruk damar genişletmeye % 70 etanol doymuş pamuk topları ile silin. Sağ veya sol kuyruk damar kan örnekleme için seçin. Kuyruk alt kısmını hafifçe kavramak ve düz kanı örnek toplama sırasında kuyruk tutun.</li>
	<li>Kan toplamak. Yöntem karşılaştırma Eğer kan iki grupta toplamak: "deney" grubu geliştirildi, aşağıda, yordamı kullanarak ve "geleneksel" Grup aynı zamanda aşağıda sunulan bir geleneksel yöntemle.<ol>
<li>Deneysel koleksiyonu:<ol>
<li>Görüntüleme için kuyruk damarın ponksiyon geliştirmek için bir gözlük büyüteç'i giymek. 22 G kelebek iğne ucu bir pozisyonda yaklaşık yarım mesafe klemple ucundan kuyruk kuyruk Bankası doğru birden çok örnekleri için hareketli bir melek yaklaşık 10°, yanal kuyruk damarlar birinin içine yerleştirin.</li>
			<li>Kelebek iğne kauçuk sonu kan (Şekil 2) toplamak için vakum kan toplama tüp yerleştirin. Not: iğne açı kan dışarı akan kanı toplama sırasında durursa, hızlı bir şekilde ayarlanmalıdır. 15 sonra dışarı akan kan durursa iğne kan koagülasyon önlemek için başka bir delik pozisyon seçilmelidir s.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Geleneksel Yöntem:<ol>
<li>Bir şırınga için mesafe yanal damarları yaklaşık üçte birine klemple kuyruk ucu bağlı iğne yerleştirin.</li>
			<li>Kan hub'da bulunan göründüğünde, yavaş yavaş kan (Şekil 3)7toplamak için pistonu geri çek. Not: daha fazla kan koleksiyonu ile değişen deneyimi etkileri aydınlatmak için bir acemi ve uzman aynı anda deneysel ve geleneksel yöntemleri kullanarak kan örnekleri toplamak için seçilmiştir.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>Kan toplama sonra iğne kaldırmak ve ponksiyon noktası kanamayı durdurmak için tuşuna basın. Sonra plastik yasaklama sahibinden fare düğmesini bırakın ve onun kafes için fareyi dönün. Not: Bu kadar toplam kan % 10'una birim güvenle olabilir bildirilmiştir 2 hafta aralıklarla8sağlıklı bir hayvandan kaldırıldı, bu yüzden yaklaşık 175 µL kan toplanan etik ilkelere uygun olarak her zaman.</li>
	<li>Tüpler EDTA ile plazma toplamak ve serum toplamak için tüpler antikoagülanlar olmadan kullanmak için kullanın. Yavaşça tüp birkaç kez ters çevir ve buz üzerinde dikey olarak koydu.</li>
	<li>Plazma ve serum ayırmak 10 dk 1000 x g de Soğutmalı Santrifüj kan örnek koleksiyon tüplerde santrifüj kapasitesi. Not: Başarılı kan toplama 175 µL hacmi her zaman elde etme olarak tanımlanır. Üçten fazla delikler denenmesi gerektiğini ve başarısız kan koleksiyonu sonra üçüncü bir delik daha az 175 µL toplam kan hacmi tanımlanmıştır. Örnekleme süresi kuyruk ven ponksiyon vakti iğneyi çıkarıldıktan sonra kan toplama olarak tanımlanır.</li>
	<li>Kan iki kez 2 hafta8aralıklarla toplamak.</li>
</ol>3. istatistiksel analiz
<ol><li>Piyasada bulunan istatistiksel yazılım analizi için kullanın. Ortalama değer ± standart sapma, p < 0,05 kesim için istatistiksel anlamlılık kullanarak olarak veri mevcut.</li>
</ol>

<ol><li>Grouzmann, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+sampling+methodology+is+crucial+for+precise+measurement+of+plasma+catecholamines+concentrations+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Blood sampling methodology is crucial for precise measurement of plasma catecholamines concentrations in mice.</a> European Journal of Physiology. 447 (2), 254-258 (2003).</li>
<li>Heimann, M., Roth, D. R., Ledieu, D., Pfister, R., Classen, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sublingual+and+submandibular+blood+collection+in+mice%3A+a+comparison+of+effects+on+body+weight%2C+food+consumption+and+tissue+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Sublingual and submandibular blood collection in mice: a comparison of effects on body weight, food consumption and tissue damage.</a> Lab Animal. 44 (4), 352-358 (2010).</li>
<li>Heimann, M., Kasermann, H. P., Pfister, R., Roth, D. R., Burki, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+collection+from+the+sublingual+vein+in+mice+and+hamsters%3A+a+suitable+alternative+to+retrobulbar+technique+that+provides+large+volumes+and+minimizes+tissue+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Blood collection from the sublingual vein in mice and hamsters: a suitable alternative to retrobulbar technique that provides large volumes and minimizes tissue damage.</a> Lab Animal. 43 (3), 255-260 (2009).</li>
<li>Hoff, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+of+blood+collection+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Methods of blood collection in the mouse.</a> Lab Animal. 29 (10), 47-53 (2000).</li>
<li>Zou, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repeated+Blood+Collection+from+Tail+Vein+of+Non-Anesthetized+Rats+with+a+Vacuum+Blood+Collection+System%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System.</a> Journal of Visualized Experiments. (130), (2017).</li>
<li>Kilkenny, C., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+bioscience+research+reporting%3A+ARRIVE-ing+at+a+solution%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Improving bioscience research reporting: ARRIVE-ing at a solution.</a> Lab Animal. 44 (4), 377-378 (2010).</li>
<li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacology+and+Pharmacotherapeutics%22%5BJournal%5D)">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> Journal of Pharmacology and Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).</li>
<li>Diehl, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+good+practice+guide+to+the+administration+of+substances+and+removal+of+blood%2C+including+routes+and+volumes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Toxicology%22%5BJournal%5D)">A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes.</a> Journal of Applied Toxicology. 21 (1), 15-23 (2001).</li>
<li>Wollowitz, A., Bijur, P. E., Esses, D., John Gallagher, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+butterfly+needles+to+draw+blood+is+independently+associated+with+marked+reduction+in+hemolysis+compared+to+intravenous+catheter%5BTitle%5D)+AND+%22Academic+Emergency+Medicine%22%5BJournal%5D)">Use of butterfly needles to draw blood is independently associated with marked reduction in hemolysis compared to intravenous catheter.</a> Academic Emergency Medicine. 20 (11), 1151-1155 (2013).</li>
<li>Eder, J. M., Cutter, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+device+for+collecting+cord+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Obstetrics+and+Gynecology%22%5BJournal%5D)">A new device for collecting cord blood.</a> Obstetrics and Gynecology. 86 (5), 850-852 (1995).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Bu da çalışmanın geleneksel teknikleri için üstün bir öğrenmek kolay kan toplama yöntemi farelerde açıklar. İlk olarak, yöntem kolayca yüksek başarı oranı ile hakim olamaz. İkinci olarak, Vakum negatif basınç ilkesine dayanmaktadır ve kan sürekli çizim da kirlenme ve hemoliz9olasılığını azaltır doğrudan kan maruz kalma, daha az risk ile sağlar. Üçüncü olarak, bu yöntem yeterli fareler birimlerden kanla sık örnekleme çeşitli araştırma amacıyla kısa bir süre için mümkün olabilir. Ayrıca, yordamı yalnızca fare üzerine en az yaralanma uğratan ve kan toplama anestezi kullanmadan yapılabilir; Böylece, kan örnekleri üzerinde stres tepkisi ve anestezi etkisi önlenebilir.
Kuyruk damar kan örnekleme onaylı protokol7göre üstün bir konumdur. Ancak, her zaman ince kuyruk damarlar düşük kan akışı ile yeterli kan hacmi elde etmek kolay değil. Bu durumda, cilt genellikle açık kesilir ve damar lanset tarafından nüfuz veya kuyruk sonuna hızlı bir ustura ile kaldırıldı.
Bu iletişim kuralı bir vakum kan örnek toplama Tüp, kelebek iğne ve gözlük büyüteç gerektirir vakum kan toplama sistemi kullanarak fare koleksiyonundan kan metodolojisi geliştirmeyi amaçlamaktadır. Bu vakum kan örnekleme sistemi genellikle günlük klinik pratikte10hastadan kan örnekleri toplamak için kullanılır. Bir gözlük büyüteç yardımı ile bir kuyruk damar mükemmel ponksiyon turistik bulmak kolaydır. Bir iğne ucu kuyruk damar içine eklendiğinde, kan negatif basınç nedeniyle vakum tüp içine otomatik olarak akacaktır. İğne kuyruğu damar geri çekilmesi toplama vakum tüplü vakum nedeniyle içine kateter bloke kan akacak.
Aşağıdaki ipuçları yönteminin başarılı uygulama için önemlidir. İlk olarak, vücut ağırlığı her fare ile 40 g olmalıdır veya delinme ve yeterince kan alma güçlüğü azaltmak için daha yüksek. İkinci olarak, başarısız kan toplama söz konusu olduğunda, kan dışarı akmasını devam kadar iğne yavaş yavaş çekilmeye Denemecileri denemelisiniz. Üçüncü olarak, bu kuyruk kan örnekleme sırasında herhangi bir hareketi önlemek için genişletmek için önemlidir. İğneyi yavaşça tutarak fare kuyruk hamle ven iğne ucu tutmaya yardımcı olabilir. Dördüncü olarak, kan dışarı akan kanı toplama sırasında durursa, iğne açı zamanında ayarlanmalıdır. 15 sonra dışarı akan kan durursa iğne kan koagülasyon önlemek amacıyla, başka bir delik pozisyon seçilmelidir s. Son olarak, iki işleç işbirliği fareler kan toplamak için bu tekniği kullanırken önerilir.
Kısacası, farelerde kullanmak için kabul edilen vakum kan toplama yöntemi güvenli, uygun ve kolay uygulama. Bu yöntem, sigara anestezi fareler birimlerden yeterli kan kanla sık örnekleme sağlar.

Deneylerde yer hayvanlardan kan örnekleme temel araştırma tekniğidir. Kullanılabilir bazı teknikler vardır fareler gelen kan toplama için kuyruk bitirim dahil ve kalp, retro-orbital pleksus, juguler ven, kaudal ven ve vena cava delme. İdeal olarak, kan hayvanın sağlık üzerinde en az etki ile minimal invaziv bir şekilde toplanmalıdır. Ancak, en yaygın olarak kullanılan teknikleri genellikle stres hayvanlar indirebilmek ve araştırma sonuçları1etkileyebilir. Retro-orbital pleksus koleksiyonundan kan yeterince kan hacmi fareler2' den elde etmek için kullanılabilir. Ancak, şiddetli doku hasarı neden olabilir ve kısa zaman aralıkları3tekrar tekrar kan almak için izin vermez.
Kaudal ven fareler üzerine en az yaralanma uğratan kan koleksiyonu için üstün bir konumdur. Ancak, farelerin kuyruk damarlar ince ve bazen yeterince kan geleneksel ponksiyon tekniği ile elde etmek zordur. Bazı durumlarda, tekrarlanan delikler istenen kan hacmi elde etmek için gereklidir. Anestezi de genellikle kan örnekleme farelerin kuyruk damarlar üzerinden kolaylaştırmak için önerilir.  Ayrıca, bir neşter, düz kenarlı jilet veya keskin makas gerekli kan örnekleri4almak için kuyruk uçları kaldırmak için gerekli olabilir. Daha önce kan kontaminasyon riski azaltılmış ve tekrarlanan delikler5ihtiyacını kaçınılması vakum kan örnek toplama sistemi tarafından sigara anaesthetized sıçan kuyruk damarlar koleksiyonundan başarılı kan bildirdin. Bu çalışmada sigara anestezi farelerde benzer bir kan toplama yöntemi bildirir.

<table><tbody><tr><td>Çift sivri uçlu iğne</td><td>Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China</td><td>20163151718</td><td>22G (0,7 mm x 25 mm)</td></tr><tr><td>Gözlük büyüteç</td><td>Vergroberung</td><td></td><td>1.5x</td></tr><tr>Fareler <td></td><td></td><td>için normal tuz diyeti</td><td>Farelere çalışma boyunca normal bir tuz diyeti (% 0.3 NaCl) verildi.</td></tr><tr><td>Plastik tutucu</td><td>Shanghai Kang Nong tıbbi alet co., LTD, Çin</td><td></td><td>35-45 g sıçan hoder</td></tr><tr><td>İstatistiksel analiz için SPSS yazılımı</td><td>SPSS Inc, Chicago; ABD</td><td>Sürüm 17.0.</td><td></td></tr><tr><td>Şırınga</td><td>Shandong wego Tıbbi polimer ürünleri co. LTD., Çin</td><td>20160911A</td><td>1 mL (Eşleşen iğne boyutu: 0.45 ve kez; 16RW LB)</td></tr> <tr><td>Vakumlu kan alma sistemi</td><td>Wuhan Zhi Yuan, tıp bilimi ve teknolojisi co., LTD, Çin</td><td>20171222</td><td>1 mL (&Phi; 12.4 kez; L75)</td></tr></tbody></table>

kuyruk damarlar bir vakum kan toplama sistemi ve gözlük büyüteç ile sigara anestezi farelerin koleksiyonundan değiştirilmiş kan

Modified Blood Collection from Tail Veins of Non-anesthetized Mice with a Vacuum Blood Collection System and Eyeglass Magnifier

Kan örnek koleksiyon deneysel hayvan araştırma temeli budur. Çeşitli araştırma amaçlı yeterli kan örnekleri almak için önem taşıyor. Kuyruk damarlar farelerin küçük, ve bazen gerekli kan hacmi geleneksel ponksiyon yöntemlerle elde etmek zordur. Bu çalışmada kan örnek koleksiyonundan kuyruk damarlar yoluyla farelerin konvansiyonel kan örnekleme yöntemleri (geleneksel grup) göre bir vakum kan toplama sistemi ve gözlük büyüteç (deney grubu) üstünlüğünü inceler , sırasıyla yeni başlayanlar ve uzmanlar tarafından yapılacak. Bir gözlük büyüteç yardımı ile bir kelebek iğne ucu deney grubu her fare kuyruğu ven içine eklenir. Ven başarıyla nüfuz, kan örneği vakum koleksiyonu tüpte kelebek iğne kauçuk sonuna ekleme tarafından vakum kan toplama tüp içine toplanır. Pistonu daha sonra geleneksel grubunda gözlük büyüteç yardımı olmadan kan toplamak için kullanılır. Kan örnek toplama yeni başlayanlar ve uzmanlar tarafından başarı oranları %70 %100 (p < 0,01) vs olmak deney grubu ve %35 %85 (p < 0,01) geleneksel grubunda vs gösterildi. Yeni başlayanlar ve uzmanlar için gerekli kan örneği almak için gerekli ponksiyon deneysel grubunda (2.40 ± 0,75 2.90 ± 0.31 vs, p < 0,05; 1.15 ± 0,37 1,55 ± 0,76, p < 0,05 vs) konvansiyonel grubuna göre anlamlı derecede düşük zamanlardı. Sonuç olarak, sunulan kan örnekleme tekniği mümkün ve pratik kolay ve sigara anestezi fareler birimlerden yeterli kan sık örnekleme sağlar.

Vücut kitle, kan toplama birimleri ve örnekleme süreleri iki grup Kan örnekleri 20 fare (10 erkek) 2 hafta aralıklarla iki kez her grupta toplanmıştır. Ortalama beden kitle farelerin sırasıyla deneysel ve geleneksel gruplar için yeni başlayanlar ve uzmanlar arasında benzer (42.40 g ± 1,42 g 42.65 g ± 1,14 g vs, p &gt; 0.05; 42.55 g ± 2,91 g vs 43.20 g ± 2,69 g, p &gt; 0.05). Toplanan kan birimleri ve örnekleme süreleri arasında uzmanlar (184.25 µL ± 11,95 µL 171.75 µL ± 25.61 µL, p &gt; 0.05 vs; 1.85 dk ± 0,68 min vs 2.17 dk ± 0.80 min, p &gt; 0.05) iki grupta benzerdi. Ancak, daha yüksek toplanan kan birimleri ve daha kısa örnekleme süreleri yeni başlayanlar (172.00 µL ± 15.17 µL 148.50 µL ± 30.22 µL, p &lt; 0,01 vs; 3,11 dk ± 0,44 min 4.08 dk ± 0,61 min, p &lt; 0,01 vs) konvansiyonel grubuna göre deney grubu içinde görüldü. Yeni başlayanlar için karşılaştırıldığında, uzmanlar yüksek kan birimleri toplanan ve deneysel ve geleneksel yöntemleri (184.25 µL ± 11,95 µL 172.00 µL ± 15.17 µL, p &lt; 0,01 vs; 171.75 µL ± 25.61 µL 148.50 µL ± 30.22 µL, p &lt; 0,05 vs; 1.85 dk ± 0.68 kullanarak kez alt örnekleme gösterdi Min 3,11 dk ± 0,44 min, p &lt; 0,01 vs; 2.17 dk ± 0.80 min 4.08 dk ± 0,61 min, p &lt; 0,05 vs) (Tablo 1).
Başarı oranları ve ponksiyon kez iki grup % 100 (20/20) (p &lt;&lt;&lt;&lt;&lt;&lt;&lt;<img alt="Tamponlar ve hazne ile elektroforez kurulumu; DNA ayırma yöntemi; laboratuvar aparatı düzenlemesi." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59136/59136fig1.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 1"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59136/59136fig1large.jpg" target="_blank"></a><img alt="Cerrahi işlem kurulumu, hayvan diseksiyon deneyi, neşter ve şırınga kullanan araştırmacı." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59136/59136fig2.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 2"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59136/59136fig2large.jpg" target="_blank"></a><img alt="Doku örneğine şırınga enjeksiyonu, laboratuvar deneyi, yakın çekim, tıbbi araştırma yöntemi." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59136/59136fig3.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 3"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59136/59136fig3large.jpg" target="_blank"></a><table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td></td><td colspan="2"></td><td colspan="2"></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>&lt;&lt;&lt;&lt;

Bu çalışmada kan örnekleme kuyruk ven gözlük büyüteç ile bir vakum ekstraksiyon tüp sistemi kullanan farelerde gelen raporlar. Bizim Yöntem uygulama için kolay ve tekrar kan örnekleme farelerde için kullanılabilir.

Kuyruk damarlar bir vakum kan toplama sistemi ve gözlük büyüteç ile sigara anestezi farelerin koleksiyonundan değiştirilmiş kan

Blood sample collection is the basis of experimental animal research. It is of importance to obtain adequate blood samples for various research purposes. ...

Bu çalışmada, gözlük büyüteçli bir vakum ekstraksiyon tüp sistemi kullanan farelerde kuyruk damarından kan örneklemesi raporedilmektedir. Yöntemimiz pratik kolaydır ve farelerde tekrar kan örneklemesi için kullanılabilir. Bir fare ilk başta plastik yasaklama tutucu içine yerleştirilir.Kuyruk temizlenir ve% 70 etanol ile silinir. Daha sonra operatör fare kuyruğunun görüntülenmesini iyileştirmek için gözlük büyüteçini tadar. Bir kelebek iğne ucu sonra genişlemiş lateral kuyruk damarlarıiçine yerleştirilir, ve kan kelebek iğne kauçuk ucundan vakum toplama tüpü içine toplanır.Son olarak iğne çıkarılır ve kan alma işlemi tamamlanır. Kuyruk damarı kan örneklemesi için tercih edilen bir yerdir. Bu kan örnekleme yöntemi fareleriçin minimal yaralanma ile ilgilidir, ancak farelerin kuyruk damarı bazen delinmesi zor bu yüzden çok ince, burada bir vakum ekstraksiyon tüp sistemi kullanarak laboratuvar test fareler basit bir kuyruk ven kan örnekleme yöntemi açıklar.Bu yöntem basit ve verimlidir ve farelerde gerekli kanın elde edilmesi için kullanılabilir. Prosedür bizim laboratuvar, Xiaoyan Liu ve Wusong Zou iki üyesi tarafından başlamak için gösterilecek, biz plastik bir yasaklama tutucu, kauçuk durdurucu vakum tüpleri yerleştirin, ve bir çift sivri iğne, ve gözlük büyüteç steril bir yüzeye. Sonra, plastik kısıtlama tutucu içine bir fare yerleştirin.Farenin ön ve arka pençeleri rahat bir konumda olmalıdır. Kan örneği elde etmek için, 20 ila 30 santigrat derece ılık su ile kuyruk yıkayın, damar genişletmek için% 70 etanol doymuş pamuk topları ile kuyruk silin. Kan örneklemesi için sağ veya sol kuyruk damarını seçin.Kuyruğun alt kısmını hafifçe kavrayın ve kan örneği toplama sırasında kuyruğu düz tutun. Kuyruk damarının delinmesini kolaylaştırmak için görüntülemeyi geliştirmek için gözlük büyüteçini takın. 22 gauge kelebek iğne ucunu, kuyruk ucundan yaklaşık 10 derecelik açıyla yarım distal etrafındaki yanal kuyruk damarlarından birine yerleştirin ve birden fazla örnek için kuyruğun tabanına doğru ilerleyin.Vakum kan toplama tüpü içine kelebek iğne kauçuk ucu ekleyerek vakum toplama tüpü içine kan toplamak. Onaylanan protokole göre, farelerin kuyruğu gerektiğinde birkaç kan toplama için kullanılabilir. Geleneksel yöntemle farelerin ince ve düşük kan akımı kuyruk damarından yeterli kan hacmi elde etmek her zaman kolay değildir.Yöntemimiz basit ve verimlidir ve farelerde tekrar tekrar yeterli kan hacmi elde etmek için kullanılabilir. Toplam kan hacminin %10'a kadarının iki haftalık aralıklarla sağlıklı bir hayvandan güvenli bir şekilde alınabileceği, bu nedenle her seferinde etik ilkelere uygun olarak yaklaşık 175 mikrolitre fare kan örneği alındığı bildirilmiştir. İki, kan örnekleme sürecinde hareket önlemek için kuyruk uzatmak için hayati önem taşımaktadır.İğnede kan pıhtılaşmasını önlemek için, kanın 15 saniyeden fazla akması durursa başka bir delinme pozisyonu seçilmelidir. Başarılı kan toplama her seferinde 175 mikrolitre kan elde etmek olarak tanımlandı. Maksimal delinme süreleri üç denemeolarak ayarlandı.Üçüncü delinmeden sonra toplam kan hacmi 175 mikrolitreden daha düşükse, başarısız kan toplanması olarak tanımlanmıştır. Yeterli numune hacmi toplandığında, iğneyi damardan çekin ve kanamayı durdurmak için ekleme bölgesine kısa bir süre basınç uygulayın. Plazma toplamak için, edta içeren tüpler kullanın, bir antikoagülan, yavaşça kan ile antikoagülan karıştırmak ve dikey buz üzerinde örnekleri yerleştirmek için tüp birkaç kez ters.10 dakika boyunca buzdolabında santrifüj içinde tam kan örneği toplama tüpleri spin. Kırmızı ve beyaz kan hücresi tabakalarını rahatsız etmemeye özen terek plazmayı ayıklayın. Serin toplamak için, antikoagülan olmadan tüpler kullanın.Her iki numune türü de hemen kullanılabilir veya bir yıla kadar 80 santigrat derecenin altında saklanabilir. Bu çalışmada, vakum kan toplama sistemi ve gözlük büyüteç ile farelerin kuyruk ven tekrarlanan kan örneği toplama üstünlüğünü araştırmak amaçlanmaktadır. Geleneksel kan örnekleme yöntemi ile karşılaştırıldığında deneysel grup.Konvansiyonel grup, yeni başlayanlar ve uzmanlar tarafından sırasıyla toplanan kan hacmi ve örnekleme süresi uzmanlar için iki grup arasında benzer, ancak artan toplanan kan hacmi ve daha kısa örnekleme süresi yeni başlayanlar için konvansiyonel gruba göre deneysel grupta görüldü. Deneysel grupta yeni başlayanlar için konvansiyonel gruba göre daha yüksek başarı oranı da görüldü. Bu kan örnekleme yöntemi ana kolaydır ve yüksek bir başarı oranına sahiptir.Başarısız delinme sayısı geleneksel yöntem kullanarak karşılaştırıldığında azaltılabilir. Ayrıca bu işlem sadece fareler için minimal yaralanmaya neden olur, bu anestezikler gerek kalmadan farelerin sadece kuyruk bandı, kan örneği üzerinde anesteziklerde stres yanıtı etkisi önlenebilir.

modified-blood-collection-from-tail-veins-non-anesthetized-mice-with

Research

JoVE Journal

Behavior

Davranış

Bu videoda, periferik kanı toplamak için bir fare modelinde kuyruk kesme prosedürünü gösteriyoruz. Toplanan kan daha sonra daha ileri deneyler için kullanılabilecek ayrı plazma için santrifüjlemeye tabi tutulur.

Periferik Kan Alma ve Plazma İzolasyonu için Bir Fare Kuyruğu Snip Prosedürü

Kan örnekleri, in vivo fizyolojik durumların veya hastalıkların biyobelirteçlerini değerlendirmek için yararlıdır. Burada, sıçandaki lateral kuyruk damarından kan örneği almak için metodolojiyi açıklıyoruz. Bu yöntem, minimum ağrı ve invazivlik ile hızlı numuneler sağlar.

Rat Yanal Kuyruk Ven gelen Kan Örnekleme

Burada, bir vakum ekstraksiyon tüp sistemi kullanarak olmayan anestezi Sıçanlarda basit kuyruk damar kan örnekleme yöntemi açıklanmaktadır. Bu yöntem kan doğrudan maruz kalma riskini azaltır ve tek bir iz birden çok örnekleri alarak basitleştirir.

Kuyruk damar anestezi sıçan bir vakum kan toplama sistemi ile kan koleksiyonundan tekrarlanan

Burada kontrolsüz farelerde sık örnek koleksiyon için bir kuyruk ucu kan örnekleme iletişim kuralı mevcut. Bu yöntem, pulsatil luteinizan hormon salgısı değerlendirilmesi desenleri yararlıdır ve dolaşımdaki diğer faktörleri analiz için adapte.

Pulsatil luteinizan hormon salgısı değerlendirilmesi için kuyruk ucu kan örnekleme farelerde sık

Burada, fare subklavian ven kan örnekleri almak için bir protokol sunuyoruz.

Farelerde subclavian ven delinme yoluyla kan toplama

Burada, sıçan modeli için hızlı, kolay ve güvenilir kan alma alternatifleri sunmak için bir protokol sunuyoruz. Bağlama göre üç farklı kan örnekleme yöntemini tanımlıyoruz: anestezi altında veya bilinçli bir hayvanda kuyruk damarı delinmesi ve anestezi altında dorsal penil ven delinmesi.

Sıçan Modelinde Kan Örneklemesi için Modifiye Kuyruk Veni ve Penil Ven Delinmesi

Protokol, sürekli video-elektroensefalogram (EEG) monitörizasyonuna paralel olarak gerçekleştirilen epileptik sıçanlardan tekrarlanan beyin omurilik sıvısı ve kan alımlarını gösterir. Bunlar, çeşitli vücut sıvısı moleküllerindeki değişiklikler ile nöbet aktivitesi arasındaki olası bağlantıları araştırmak için etkilidir.

EEG Kayıtları Sırasında Sıçanlarda Lateral Kuyruk Veninden Beyin Omurilik Sıvısı ve Kan Örneği Alınması

Protokol, bağırsak mikrobiyal metabolitlerinin üretimini ve emilimini değerlendirmek için portal venlerden ve farelerden inferior vena kava'dan sırayla kan toplamak için bir yöntem göstermektedir.

Farelerde Bağırsak Mikrobiyal Metabolitlerini Değerlendirmek için İnferior Vena Cava'dan Ardışık Kan Alımı ve Ardından Portal Ven

Burada, bir neşter kullanarak yüz ven damar delinmesi yoluyla murin deneklerinde optimize edilmiş bir kan alma tekniği için bir protokol sunuyoruz. Bu tekniği, transgenik, konjenik ve raportör suşların hücresel fenotiplerini karakterize etmek için akış sitometrik değerlendirmenin yanında kullanıyoruz. Ayrıca serum sitokin analizi ve diyabet çalışmaları için de uygundur.

Murin Kan Alımı için Yüz Ven Damar Delme

EEG/fMRI verilerinin eşzamanlı toplanması ve senkronize MR saat sinyali kaydı için bir protokol sunuyoruz. Bu yöntemi, deneklerin tarama sırasında 'soğuk eldiven' talimatları aldığı ve EEG/fMRI verilerinin hipnotik indüksiyondan önce ve sonra el sıcaklığı ölçümleriyle birlikte kaydedildiği benzersiz bir paradigma kullanarak gösteriyoruz.

Diferansiyel Termal His için Odaklanmış Dikkat Önerisi Sırasında Eşzamanlı fMRI/EEG Veri Toplama Yöntemi

Öğrenin farelerde kuyruk damarından vakum tüp sistemi ve gözlük büyüteç kullanarak tekrarlanabilir kan alma yöntemini. Bu teknik minimal yaralanma sağlar ve başarı oranını artırır.

Kuyruk damarlar bir vakum kan toplama sistemi ve gözlük büyüteç ile sigara anestezi farelerin koleksiyonundan değiştirilmiş kan

Daha fazla video keşfet