Name: In vivo ve In vitro deneyler için Gushukang (GSK) granül hazırlanması (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-05-09T12:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 16 s
Description: Keşfedin Gushukang granül hazırlama protokolünü farelerde in vivo ve in vitro deneyler için. Bu maliyet-etkin yöntem, bitkisel ilaç farmakolojisi araştırmalarında tekrarlanabilir sonuçlar sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışmada Çin Ulusal Doğal Bilim Vakfı (81804116, 81673991, 81770107, 81603643 ve 81330085), yenilikçi takım, bilim ve Teknoloji Bakanlığı (2015RA4002 WYJ), programı için program hibe tarafından desteklenmektedir Yenilikçi takım, Çin Eğitim Bakanlığı (WYJ için IRT1270), Şangay TCM tıbbi merkezi kronik hastalık (2017ZZ01010 WYJ için), üç yıl eylem geleneksel Çin tıp planının gelişimini hızlandırmak için (ZY (2018-2020)-CCCX-3003 WYJ için), ve Ulusal anahtar araştırma geliştirme projeleri (2018YFC1704302).

Tüm deneysel prosedürler, Shanghai Üniversitesi TCM (SZY201604005) Kurumsal hayvan bakımı ve kullanım Komitesi onayı ile yapılmıştır.
1. GSK çalışma çözümünün hazırlanması ve yönetilmesi
<ol><li>Fare için GSK granül eşdeğer dozlarda hesaplayın.<ol>
<li>Meeh-Rubner denklemine dayalı vücut yüzeyini hesaplayın15: vücut yüzeyi = k x (vücut ağırlığı2/3)/1000, k değerleri, insan için 10,6 ve fare için 9,1. İnsan vücudu ağırlığı 70 kg, sonra insan vücudu yüzeyi (m2) = 10,6 x (702/3)/1000 = 1,8 m2olarak varsayılarak. Fare vücut ağırlığı 20 g (0,02 kg; örn., 1 ay eski, kadın, C57/BL6), sonra fare gövdesi yüzeyi (m2) = 9,1 x (0,022/3)/1000 = 0,0067 m2olarak varsayılarak.</li>
		<li>Hesaplanan gövde yüzeyine göre, insan ve fare için vücut dönüşüm oranını hesaplayın. İnsan: 70 kg/1.8 m2 = 39. Fare: 0,02 kg/0.0067 m2 = 3. GSK granül = 20 g/70 kg x 39/3 = 3,72 g/kg ≈ 4 g/kg.</li>
		<li>Fare başına 20 g vücut ağırlığı dayalı, fare için eşdeğer doz hesaplamak: 4 g/kg x 0,02 kg = 0,08 g.</li>
		<li>Grup başına 20 fareye dayanan üç eşdeğer doz GSK granül hesaplayın ve 3 ay (90 gün) süren bir müdahale: (1) GSKL (OVX + düşük doz GSK granül [2 g/kg/gün]): 0,04 g fare/gün x 20 fareler x 90 gün = 72 g. (2) GSKM (OVX + orta doz GSK granül [4 g/kg/ gün]): 0,08 g fare/gün x 20 fare x 90 gün = 144 g. (3) GSKH (OVX + yüksek doz GSK granül [8 g/kg/gün]): 0,12 g fare/gün x 20 fare x 90 gün = 216 g. Not: kaybı dengelemek için uygulamada GSK granüllerin ek% 20 ' sini hazırlayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Vücut ağırlığına göre fare başına GSK granül hacmini hesaplayın15: örn., hacim (V) = 0,24 ml/fare/gün. Not: fare için intragastrik yönetim hacmi 0,12 mL/10 g 'dir.</li>
	<li>10 gün değerinde üç doz GSK granül tartın. 8 g, 16 g ve 24 g GSK granül ağırlığında ve sırasıyla GSKL, GSKM ve GSKH olarak hizmet vermektedir.</li>
	<li>Vitamin D3 (CAL) ile kalsiyum karbonat eşdeğer dozu hesaplayın adım 1.1.1 ve 1.1.2 gibi Meeh-Rubner denklemi15 dayalı fare IÇIN: Cal dozaj = 2 tablet/70 kg x 39/3 = 0,372 tablet/kg ≈ 0,4 tablet/kg.</li>
	<li>Fare başına 20 g 'lık bir vücut ağırlığına göre (örn. 1 ay eski, kadın, C57/BL6), fare için CAL eşdeğer dozajı hesaplayın: 0,4 tablet/kg x 0,02 kg = 0,008 tablet. Sonra grup başına 20 fare ve 3 ay (90 gün): 0,008 tablet x 20 x 90 = 14,4 tabletler için kalıcı bir müdahale dayalı CAL eşdeğer dozu hesaplayın. 10 günlük CAL (1,6 tabletler) ağırlığında.</li>
	<li>Dağılma
	<ol>
<li>50 mL tüp içine GSK granül 8 g yerleştirin. 48 mL tuz ekleyin ve tamamen çözülür tüp sallayın. Not: tam çözünme için standart sediment yokluğunda. Bir gavaj iğne çalışma çözümünü çizebilir ve daha sonra sorunsuz uzaklaştırabilir Eğer tam çözünme daha da teyit edilebilir.</li>
		<li>Adım 1.5.1, 16 g ve 24 g GSK granül ile tekrarlayın.</li>
		<li>1,6 tabletler (10 gün ' değerinde) CAL 'yi bir 50 mL tüpüne yerleştirin. 48 mL tuz ekleyin ve tamamen çözülür tüp sallayın. Not: çalışma çözümleri-4 °C ' de depolanabilir ve her 10 günde bir hazırlanır.</li>
	</ol></li>
	<li>Intragastrik yönetim
	<ol>
<li>Fareyi ileri doğru bakacak şekilde farenizi (1 ay eski, dişi, C57/BL6) arkasına tutun ve bu pozisyonda sıkıca kalmasını sağlayın. Yönetim öncesinde 2 − 3 dakika boyunca fareyi sakin tutun. Not: araştırmacının farenin önünde açıkça görebildiğinden emin olun. Özellikle yeni araştırmacılar için fare ısırıklarını önlemek için eldiven giyin.</li>
		<li>Gavaj iğne (Boyut: #12, 40 mm) GSK granül çalışma çözeltisi yerleştirin ve çalışma çözeltisi 0,24 mL çizin.</li>
		<li>Gavaj iğne mide ulaştığında kadar ağzına bir tarafı ile fare içine gavaj iğne koyun. Not: gavaj iğne mide ulaştı onaylamak için: (1) gavaj iğne direnç hissi karşılaştığında. Bu arada, fare gavaj iğne özofagus fiziksel daralma geçtikten önce yutma eylem gösterir. (2) yaklaşık 0,5 mL çalışma çözeltisi fare içine enjekte ve 1 dakika bekleyin. Fareden gelen bir çözüm yoksa, bu gavaj iğnesi mide ulaştı anlamına gelir.</li>
		<li>GSK granül çalışma çözeltisi enjekte (0,24 ml/Mouse) mide içine ve sonra gavaj iğne dışarı çizmek. Fareyi kafesine geri dönün.</li>
		<li>Adım 1.6.4 CAL çözümü ile yineleyin ve 0,24 mL CAL çözüm fare başına enjekte. Not: CAL çözüm hacmi adım 1,2 olarak hesaplanır.</li>
	</ol></li>
</ol>2. Micro-CT tarama
<ol><li>
T ıbia hasat ve hazırlama
	<ol>
<li>300 mL/100 g 80 mg/kg ketamin ile intraperitoneally anestezize fare 90 günün müdahale takip gün. Fare tamamen anestezize olup olmadığını onaylamak için ayak parmakları bir iğne tutam kullanın. Hiçbir yanıt başarılı anestezi gösterir. Sonra servikal dislocation ile fareyi öldürmek.</li>
		<li>Tacks ile köpük üzerinde kollar ve bacaklar ile fareyi düzeltin.</li>
		<li>Kesme cilt (Boyut: 8,5 cm) ve cımbız (boyutu: 10 cm) distal ucuna proksimal ve sonra hasat tibias ile cildi kesip.</li>
		<li>Hemen% 70 Etil alkol içine kaval koymak ve 3 kez yıkayın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Sünger köpük ile farenin sol Tibia Wrap ve bir örnek tüp içine koymak (35 mm çapı, 140 mm uzunluğunda). Not: numunenin uzun ekseni, örnek tüpün yanında olmalıdır. Tibia puanların proksimal ucunu yukarı doğru emin olun.</li>
	<li>
Micro-CT 80 tarama makinesini çalıştırma
	<ol>
<li>Micro-CT 80 tarama makinesini oda sıcaklığında başlatın.</li>
		<li>Örnek tüpü Micro-CT 80 olarak ayarlayın ve aşağıdaki tarama parametreleriyle çapraz kesit taramasını başlatın: piksel boyutu 15,6 μm, tüp voltajı 55 kV, tüp akımı 72 μA, entegrasyon süresi 200 ms, uzamsal çözünürlük 15,6 μm, piksel çözünürlüğü 15,6 μm ve görüntü matrisi 2048 x 2048. Not: ön tarama ile kortikal kemikten iptal edilen kemik ayırt edilir. Tibia tarama alanı distal ucuna tibial Plato altında 5 mm gelen iptal kemik alanı olarak tanımlanır.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Kemik parametresinin ölçülmesini
	<ol>
<li>Kesit taramasını tamamladıktan sonra sol tizarın görüntülerini alın.</li>
		<li>Yoğunluk eşiğini 245 − 1000 olarak ayarlayın. Aşağıdaki kemik parametrelerini ölçmek için mikro-CT değerlendirme programı V 6.6 kullanın: kemik mineral yoğunlukları (BMD), toplam hacim üzerinde kemik hacmi (BV/TV), trabeküler kemik numarası (TB. N), trabeküler kemik kalınlığı (Tb.Th), hem de kemik trabeküler kemik ayrımı ( TB. SP).</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. in vitro deneyler için kan serumu hazırlanması
<ol><li>Hesaplama
	<ol>
<li>0,2 kg (1 ay eski, kadın, Sprague-Dawley) bir sıçan vücut ağırlığı dayanarak, GSK granül dozajı hesaplayın: insan dozu/gün x vücut ağırlığı insan x K/vücut ağırlığı fare = 20 g/70 kg/gün x 70 kg x K (K = 0,018)/0,2 kg = 2 g/kg/gün. Not: K, insan ve fare15 arasındaki farmakolojik dönüşüm katsayısı (k = 0,018).</li>
		<li>3.1.1 adımı yineleyin ve aşağıdaki dozlarda hesaplayın.<ol>
<li>GSKL dozajı hesaplayın: 10 g/70 kg/gün x 70 kg x K/0.2 kg = 1 g/kg/gün.</li>
			<li>GSKM dozajı hesaplayın: 20 g/70 kg/gün x 70 kg x K/0.2 kg = 2 g/kg/gün.</li>
			<li>GSKL dozajı hesaplayın: 40 g/70 kg/gün x 70 kg x K/0.2 kg = 4 g/kg/gün.</li>
			<li>CAL dozajı hesaplayın: 2 tablet/70 kg/gün x 70 kg x K/0.2 kg = 0,2 tablet/kg/gün.</li>
		</ol>
</li>
		<li>GSK granül ve CAL toplam dozajı hesaplayın.<ol>
<li>GSKL için toplam dozajı hesaplayın: 1 g/kg/gün x 0,2 kg x 6 fareler x 3 gün = 3,6 g.</li>
			<li>GSKM için toplam dozajı hesaplayın: 2 g/kg/gün x 0,2 kg x 6 fareler x 3 gün = 7,2 g.</li>
			<li>GSKH için toplam dozajı hesaplayın: 4 g/kg/gün x 0,2 kg x 6 fareler x 3 gün = 14,4 g.</li>
			<li>Hesaplamak CAL doz = 0,2 tablet/kg/gün x 0,2 kg x 6 Rats x 3 gün = 0,72 tablet. Not: 100 mL kültür ortamını (% 20 GSK granül içeren serum) hazırlamak için toplam 10 mL GSK granül içeren serum gereklidir. Her sıçan (6 sıçan/grup) Santrifüjden sonra 1,5 − 2 mL GSK granül içeren serum sağlaması bekleniyor.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Vücut ağırlığına göre sıçan başına uygulanan GSK granül hacmini hesaplayın15: örn., hacim (V) = 2 ml/Rat/gün. Not: sıçan için intragastrik yönetim hacmi 0,1 mL/10 g 'dir.</li>
	</ol></li>
	<li>Üç doz GSK granül 3 gün değerinde ağırlığında. 3,6 g, 7,2 g ve 14,4 g GSK granül tartım ve sırasıyla GSKL, GSKM ve GSKH olarak hizmet vermektedir. CAL grubu için 0,72 tablet tartın.</li>
	<li>Bir 50 mL tüp içine GSK granül 7,2 g yerleştirin. 36 mL tuz ekleyin ve tamamen çözülür tüp sallayın. 3,6 g ve 14,4 g GSK granül ile tekrarlayın.</li>
	<li>2 mL GSK çalışma çözeltisi ile intragastrik yönetim için Bölüm 1,6 tekrarlayın. Not: serum hazırlamak için aynı hacimde (sıçan başına 2 mL) aynı hacmi yönetin ve in vitro asder için boş bir kontrol grubu olarak görev yapar.</li>
	<li>GSK içeren serumun hazırlanması
	<ol>
<li>İntraperitoneally ile fareler anestezize 300 mL/100 g 80 mg/kg ketamin 1 h GSK granül son uygulamadan sonra. Sıçan tamamen anestezize olup olmadığını onaylamak için ayak parmakları bir iğne tutam kullanın. Hiçbir yanıt başarılı anestezi gösterir.</li>
		<li>Cildi ve peritonumu yaktıktan sonra düz çalışma makas kullanarak sıçan toraks alt karın maruz. Not: cerrahi enstrüman, yüksek sıcaklıklarda ve yüksek basınçlarda kullanımından önce sterilize edilmelidir. Cerrahi alan kan toplama sırasında% 70 etanol ile sterilize edilmelidir.</li>
		<li>Damar açık bir şekilde ortaya çıkarmak için doku kağıt ile abdominal aort bağ dokusu çıkarın.</li>
		<li>10 ml, 22 G şırınga kullanarak abdominal aort kan çizin. Sonra iğne çıkarın ve 15 mL steril tüp kan transfer. Genellikle, 6 − 8 mL kan bir sıçan elde edilebilir. Not: her sıçan kan çizerken yaşamaya devam edilmelidir. Bir gösterge, karın aort sıçan hayatta olduğunda titreşimler. Sıçan kan çektikten sonra öldü.</li>
		<li>Tüpün içinde kan pıhtılaşmış olana kadar tüpü 30 − 60 dakika boyunca oda sıcaklığında dik tutun. Daha sonra 20 dakika boyunca 500 − 600 x g 'lik tüpü Santrifüjden (serum) bir gruptan (6 sıçan) 1 50 ml steril tüpe transfer ederek karıştırın.</li>
		<li>56 °C ' lik su banyosundan 30 dakika boyunca serumu inaktive ederek serum bir 0,22-μm-gözenek boyutunda hidrofilik polithersülfon şırınga filtresi kullanarak serumu filtreleyin. Uzun süreli kullanım için-80 °C ' de saklayın (1 yıldan az). Not: süzülmüş serum in vitro osteoclastogenesis ve osteoblastogenesis için kullanılabilir.</li>
	</ol></li>
	<li>Uygulama
	<ol>
<li>
In vitro osteoclastogenesis
		<ol>
<li>L-glutamin, ribonucleosides ve deokribonucleosides içeren asgari kartal Orta (α-MEM) ile 1:4 oranında GSK içeren serum (GSKL, GSKM, GSKH) üç dozajlar seyreltilmeli. Not: in vitro osteoclastogenesis ve osteoblastogenesis için GSK içeren serumun son konsantrasyonunun% 20 olduğundan emin olun.</li>
			<li>Osteoclastogenesis için 4 − 6 hafta eski C57BL/6 fareden kemik iliği makrofajları (BMMs) ve makrophaj koloni uyarıcı faktörü (M-CSF, 10 ng/mL) ve reseptör aktivatörü ile BMMs 'yi teşvik etmek için adım 3.6.1.1 dan seyreltilmiş GSK içeren serum (200 μL/Well) ekleyin Nükleer faktör-κB ligand için (RANKL, 100 ng/mL) daha önce açıklanan2.</li>
		</ol>
</li>
		<li>
In vitro osteoblastogenesis
		<ol>
<li>3.6.1.1 adım yineleyin.</li>
			<li>Daha önce16açıklanan osteoblast oluşturmak için 4 − 6 hafta eski C57BL/6 farelerden kemik mesenkimal kök hücrelere (bmscs) SEYRELTILMIŞ GSK içeren serum (2 ml/Well) ekleyin.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Shu, B., Shi, Q., Wang, Y. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shen+%28Kidney%29-tonifying+principle+for+primary+osteoporosis%3A+to+treat+both+the+disease+and+the+Chinese+medicine+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Integrative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Shen (Kidney)-tonifying principle for primary osteoporosis: to treat both the disease and the Chinese medicine syndrome.</a> Chinese Journal of Integrative Medicine. 21 (9), 656-661 (2015).</li>
<li>Zhao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+naturally+derived+small+compound+Osthole+inhibits+osteoclastogenesis+to+prevent+ovariectomy-induced+bone+loss+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Menopause%22%5BJournal%5D)">The naturally derived small compound Osthole inhibits osteoclastogenesis to prevent ovariectomy-induced bone loss in mice.</a> Menopause. 25 (12), 1459-1469 (2018).</li>
<li>Liu, S. F., Sun, Y. L., Li, J., Dong, J. C., Bian, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+Herbal+Medicine%3A+Er-Xian+Decoction+and+Er-Xian-containing+Serum+for+In+vivo+and+In+vitro+Experiments%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Preparation of Herbal Medicine: Er-Xian Decoction and Er-Xian-containing Serum for In vivo and In vitro Experiments.</a> Journal of Visualized Experiments. (123), e55654(2017).</li>
<li>Wang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+systemic+bone+protective+effects+of+Gushukang+granules+in+ovariectomized+mice+by+inhibiting+osteoclastogenesis+and+stimulating+osteoblastogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacological+Sciences%22%5BJournal%5D)">The systemic bone protective effects of Gushukang granules in ovariectomized mice by inhibiting osteoclastogenesis and stimulating osteoblastogenesis.</a> Journal of Pharmacological Sciences. 136 (3), 155-164 (2018).</li>
<li>Bian, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oleanolic+acid+exerts+an+osteoprotective+effect+in+ovariectomy-induced+osteoporotic+rats+and+stimulates+the+osteoblastic+differentiation+of+bone+mesenchymal+stem+cells+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Menopause%22%5BJournal%5D)">Oleanolic acid exerts an osteoprotective effect in ovariectomy-induced osteoporotic rats and stimulates the osteoblastic differentiation of bone mesenchymal stem cells in vitro.</a> Menopause. 19 (2), 225-233 (2012).</li>
<li>Zhao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oleanolic+acid+exerts+bone+protective+effects+in+ovariectomized+mice+by+inhibiting+osteoclastogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Oleanolic acid exerts bone protective effects in ovariectomized mice by inhibiting osteoclastogenesis.</a> Journal of Pharmacological Sciences. 137 (1), 76-85 (2018).</li>
<li>Tang, D. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osthole+Stimulates+Osteoblast+Differentiation+and+Bone+Formation+by+Activation+of+%CE%B2-Catenin-BMP+Signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+and+Mineral+Research%22%5BJournal%5D)">Osthole Stimulates Osteoblast Differentiation and Bone Formation by Activation of β-Catenin-BMP Signaling.</a> Journal of Bone and Mineral Research. 25 (6), 1234-1245 (2010).</li>
<li>Tashino, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%22Serum+pharmacology%22+and+%22serum+pharmaceutical+chemistry%22%3A+from+pharmacology+of+Chinese+traditional+medicines+to+start+a+new+measurement+of+drug+concentration+in+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Therapeutic+Drug+Monitoring+Research%22%5BJournal%5D)">"Serum pharmacology" and "serum pharmaceutical chemistry": from pharmacology of Chinese traditional medicines to start a new measurement of drug concentration in blood.</a> Therapeutic Drug Monitoring Research. 5, 54-64 (1988).</li>
<li>Fu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ex+vivo+Stromal+Cell-Derived+Factor+1-Mediated+Differentiation+of+Mouse+Bone+Marrow+Mesenchymal+Stem+Cells+into+Hepatocytes+Is+Enhanced+by+Chinese+Medicine+Yiguanjian+Drug-Containing+Serum%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence+Based+Complement+Alternative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Ex vivo Stromal Cell-Derived Factor 1-Mediated Differentiation of Mouse Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells into Hepatocytes Is Enhanced by Chinese Medicine Yiguanjian Drug-Containing Serum.</a> Evidence Based Complement Alternative Medicine. , 7380439(2016).</li>
<li>Cao, Y., Liu, F., Huang, Z., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effects+of+Guanxin+Shutong+capsule+drug-containing+serum+on+tumor+necrosis+factor-alpha+induced+endothelial+dysfunction+through+nicotinamide+adenine+dinucleotide+phosphate+oxidase+and+the+nitric+oxide+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+and+Therapeutic%22%5BJournal%5D)">Protective effects of Guanxin Shutong capsule drug-containing serum on tumor necrosis factor-alpha induced endothelial dysfunction through nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase and the nitric oxide pathway.</a> Experimental and Therapeutic. 8 (3), 998-1004 (2014).</li>
<li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+serum+pharmacology+in+evaluating+the+antitumor+effect+of+Fuzheng+Yiliu+Decoction+from+Chinese+Medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Integrative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Application of serum pharmacology in evaluating the antitumor effect of Fuzheng Yiliu Decoction from Chinese Medicine.</a> Chinese Journal of Integrative Medicine. 20 (6), 450-455 (2014).</li>
<li>Li, X. L., Wang, L., Bi, X. L., Chen, B. B., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gushukang+exerts+osteopreserve+effects+by+regulating+Vitamin+D+and+Calcium+metabolism+in+ovariectomized+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+Mineral+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Gushukang exerts osteopreserve effects by regulating Vitamin D and Calcium metabolism in ovariectomized mice.</a> Journal of Bone Mineral Metabolism. , 1-11 (2018).</li>
<li>Cui, S. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanistic+study+of+Shen+%28Kidney%29tonifying+prescription+Gushukang+in+Preventing+and+Treating+Primary+Osteoporosis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chinese+Medical+University%22%5BJournal%5D)">Mechanistic study of Shen (Kidney)tonifying prescription Gushukang in Preventing and Treating Primary Osteoporosis.</a> Journal of Chinese Medical University. 30 (16), 351-354 (2001).</li>
<li>Wang, Y., Shang, K., Li, Y. K., Tao, X. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+gushukang+on+osteoclast+cultured+from+type+I+diabetic+rat+in+vitro-a+preliminary+study%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Bone+Tumor+and+Bone+Disease%22%5BJournal%5D)">Effect of gushukang on osteoclast cultured from type I diabetic rat in vitro-a preliminary study.</a> Chinese Journal of Bone Tumor and Bone Disease. 3 (12), 22-24 (2004).</li>
<li>Zhang, Y. P. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aZhang%2C+YP+%22Pharmacology+Experiment%22">Pharmacology Experiment</a>. , 2nd edition, People’s medical publishing house. Beijing, China. (1996).</li>
<li>Zhao, D. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclophosphamide+causes+osteoporosis+in+C57BL%2F6+male+mice%3A+suppressive+effects+of+cyclophosphamide+on+osteoblastogenesis+and+osteoclastogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Oncotarget%22%5BJournal%5D)">Cyclophosphamide causes osteoporosis in C57BL/6 male mice: suppressive effects of cyclophosphamide on osteoblastogenesis and osteoclastogenesis.</a> Oncotarget. 8 (58), 98163-98183 (2017).</li>
<li>Zhong, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+randomized%2C+double-blind%2C+controlled+trial+of+a+Chinese+herbal+formula+%28Er-Xian+decoction%29+for+menopausal+symptoms+in+Hong+Kong+perimenopausal+women%5BTitle%5D)+AND+%22Menopause%22%5BJournal%5D)">A randomized, double-blind, controlled trial of a Chinese herbal formula (Er-Xian decoction) for menopausal symptoms in Hong Kong perimenopausal women.</a> Menopause. 20 (7), 767-776 (2013).</li>
<li>Zhang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Issues+and+strategies+for+study+of+serum+pharmcology+in+oncology%5BTitle%5D)+AND+%22Zhong+Yi+Yan+Jiu%22%5BJournal%5D)">Issues and strategies for study of serum pharmcology in oncology.</a> Zhong Yi Yan Jiu. 17 (5), 13-14 (2004).</li>
<li>Nair, A. B., Jacob, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+practice+guide+for+dose+conversion+between+animals+and+human%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Basic+and+Clinical+Pharmacy%22%5BJournal%5D)">A simple practice guide for dose conversion between animals and human).</a> Journal of Basic and Clinical Pharmacy. 7 (2), 27-31 (2016).</li>
<li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+of+the+traditional+Chinese+medicine+xuesaitong+on+intestinal+ischemia-reperfusion+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Clinical+and+Experiments+Medicine%22%5BJournal%5D)">Protective effect of the traditional Chinese medicine xuesaitong on intestinal ischemia-reperfusion injury in rats.</a> International Journal of Clinical and Experiments Medicine. 8 (2), 1768-1779 (2015).</li>
<li>Jiang, Y. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+Chinese+herbal+drug-containing+serum+for+activating-blood+and+dispelling-toxin+on+ox-LDL-induced+inflammatory+factors%27+expression+in+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Integrative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Effect of Chinese herbal drug-containing serum for activating-blood and dispelling-toxin on ox-LDL-induced inflammatory factors' expression in endothelial cells.</a> Chinese Journal of Integrative Medicine. 18 (1), 30-33 (2012).</li>
<li>Li, Y., Xia, J. Y., Chen, W., Deng, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Ling+Qi+Juan+Gan+capsule+drug-containing+serum+on+PDGF-induced+proliferation+and+JAK%2FSTAT+signaling+of+HSC-T6+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Zhonghua+Gan+Zang+Bing+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">Effects of Ling Qi Juan Gan capsule drug-containing serum on PDGF-induced proliferation and JAK/STAT signaling of HSC-T6 cells.</a> Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi. 21 (9), 663-667 (2013).</li>
<li>Guo, C. Y., Ma, X. J., Liu, Q., Yin, H. J., Shi, D. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+Chinese+herbal+drug-containing+serum+for+activating+blood%2C+activating+blood+and+dispelling+toxin+on+TNF-alpha-induced+adherence+between+endothelial+cells+and+neutrophils+and+the+expression+of+MAPK+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Zhongguo+Zhong+Xi+Yi+Jie+He+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">Effect of Chinese herbal drug-containing serum for activating blood, activating blood and dispelling toxin on TNF-alpha-induced adherence between endothelial cells and neutrophils and the expression of MAPK pathway.</a> Zhongguo Zhong Xi Yi Jie He Za Zhi. 35 (2), 204-209 (2015).</li>
<li>Li, Y. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Some+issues+in+methology+of+Chinese+herbs+serum+pharmcology%5BTitle%5D)+AND+%22Zhong+Yao+Xin+Yao+Yu+Lin+Chuang+Yao+Li%22%5BJournal%5D)">Some issues in methology of Chinese herbs serum pharmcology.</a> Zhong Yao Xin Yao Yu Lin Chuang Yao Li. 10 (5), 263(1999).</li>
<li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+Chinese+herbs+serum+pharmcology+methodological+study%5BTitle%5D)+AND+%22Nan+Jing+Zhong+Yi+Yao+Da+Xue+Xue+Bao%22%5BJournal%5D)">A review of Chinese herbs serum pharmcology methodological study.</a> Nan Jing Zhong Yi Yao Da Xue Xue Bao. 18 (4), 254(2002).</li>
<li>Pacifici, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estrogen%2C+cytokines%2C+and+pathogenesis+of+postmenopausal+osteoporosis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal.+Bone+Mineral+Research%22%5BJournal%5D)">Estrogen, cytokines, and pathogenesis of postmenopausal osteoporosis.</a> Journal. Bone Mineral Research. 11, 1043-1051 (1996).</li>
<li>Ammann, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transgenic+mice+expressing+soluble+tumor+necrosis+factor-receptor+are+protected+against+bone+loss+caused+by+estrogen+deficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Transgenic mice expressing soluble tumor necrosis factor-receptor are protected against bone loss caused by estrogen deficiency.</a> Journal Clinical Investigation. 99, 1699-1703 (1997).</li>
<li>Kimble, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+block+of+interleukin-1+and+tumor+necrosis+factor+is+required+to+completely+prevent+bone+loss+in+the+early+postovariectomy+period%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Simultaneous block of interleukin-1 and tumor necrosis factor is required to completely prevent bone loss in the early postovariectomy period.</a> Endocrinology. 136, 3054-3061 (1995).</li>
</ol>

Yazarların ifşa etmesi gereken hiçbir şey yok.

TCM ajanları granüller formülasyonlar veya reçete için ortak seçeneklerden biri haline gelmiştir. GSK granüller klinik deneyimler veya TCM teorisi dayalı çeşitli bitkisel ilaçlar oluşur, ve daha az yan etkileri ile daha iyi küratif efektler uygulamak4. Su kaynatma ile karşılaştırıldığında, granül bu avantajları vardır: iyi tat, teslimat kolaylığı, uzun süreli depolama, standart protokol ve tutarlı iyileştirici etkileri, yanı sıra daha yüksek verimlilik. Şu anda, granüller TCM en sık kullanılan ecz...

Geleneksel Çin tıbbı (TCM), osteoporoz tedavisi için önemli tamamlayıcı ve alternatif yaklaşımlardan biridir1,2. Su kaynatma formül3temel ve en sık kullanılan biçimidir. Ancak, dezavantajları da var: kötü tat, taşıma için rahatsızlık, kısa raf ömrü ve tutarsız protokoller, kullanımı yanı sıra iyileştirici etkileri sınırlandırmak. Yukarıdaki dezavantajları önlemek için yanı sıra daha iyi efektler sürdürmek için, granüller geliştirilmiştir ve yaygın olarak kullanılan4. Birçok çalışmada granül5,6,7, bir veya daha fazla etkili bileşenlerin farmakolojik mekanizmaları araştırılmış olsa da, tam mekanizmalar ve altta yatan farmakolojik süreçler hala tanımlamak zordur. Çünkü bir granül çok fazla etkili bileşenleri aynı anda benzer veya karşı etkileri4olabilir. Bu nedenle, gövdeye teslim etmeden önce granül hazırlamak için tek bir standart protokol gelişimi sadece terapötik sonuçlar üzerinde büyük bir etkiye sahip olmaz, hem in vivo hem de in vitro olarak da gereklidir.
Dahası, poliklinikte granüllerin küratif etkileri, farmakolojik mekanizmalar çok karmaşık olduğu için bir zorluk yaratır, in vitro veya ex vivo etütler kullanarak onaylamak ve tam olarak tanımlamak zordur. Bunu çözmek için, ilaç içeren serumun hazırlanması ilk olarak 1980 ' lerde Tashino tarafından önerilmiştir8. O andan itibaren, sayısız araştırmacılar bitkisel tıp ilaç içeren serum uygulanan, granül dahil9,10,11. Şu anda, in vitro araştırmalar için ilaç içeren serum seçimi, fizyolojik koşulları yakından taklit eden bir strateji olarak kabul edilir.
Gushukang (GSK) granüller, TCM teorisi ışığında klinik uygulamaya dayanan Postmenopozal Osteoporoz (POP) tedavisinde geliştirilmiştir. GSK granül, Ovariektomili (OVX) farelerde kemik kaybını önlemekte, osteoklastik kemik reorpsiyonunu inhibe eder ve osteorotik kemik oluşumu4' ü uyarır. Sonuç olarak, li ve al.12 , GSK granüllerinin kemik oluşumunu uyarmak için kalsiyum reseptörün faaliyetlerini geliştirerek OVX farelerinde kemik koruyucu etkilere sahip olduğunu tespit etmiştir. Kemik koruyucu etkilerinin yanı sıra GSK granüllerinin farmakolojik etkilerini onaylamak için, yazarlar burada çalışma çözümleri ve ilaç (GSK Granül)-içeren serum hazırlanması için ayrıntılı bir prosedür sağlar. Dahası, bu makalede, GSK granül bir OVX kaynaklı osteoporoz fare modeli ve GSK granül içeren serum in vitro osteoclastogenesis/osteoblastogenesis için uygulama açıklanır.
GSK granül çeşitli otlar oluşur13,14 ve tamamen tuzlu olarak kolayca çözünebilir. Bu nedenle, saline araç olarak hizmet vermektedir. Sham tarafından çalışan fareler (Sham) ve OVX fareleri, granül uygulanan fareler gibi aynı miktarda tuz uygulanmıştır. Fare için GSK granül eşdeğer dozlarda Meeh-Rubner denklem15dayalı hesaplanır. Bu denklem sadece güvenli dozlarda elde etmek avantajına sahip değil, aynı zamanda farmakolojik etkileri garanti15. GSK granül üç dozlarda aşağıdaki gibi oluşturuldu: (1) GSKL: OVX + düşük doz GSK granül, 2 g/kg/gün. (2) GSKM: OVX + orta doz GSK granül, 4 g/kg/gün. (3) GSKH: OVX + yüksek doz GSK granül, 8 g/kg/gün. Gskl 'de fareler, gskm ve gskh grupları intragastrik GSK granül uygulandı. Vitamin D3 (125 Uluslararası ünite/tablet) ile kalsiyum karbonat (600 mg/tablet), örneğin, Olgun ve pazarlanan bir ürün (örneğin, Caltrate [CAL]) osteoporoz tedavisinde ve önlenmesi için, olumlu bir kontrol olarak kullanıldı.

<table><tbody><tr><td>&alpha;-MEM</td><td>Hyclone laboratuvarları</td><td>SH30265.018</td><td>Hücre kültürü için</td></tr><tr><td>&beta;-Gliserofosfat</td><td>Sigma</td><td>G5422</td><td>Osteoblastogenez</td></tr><tr><td>Kalrat (CAL)</td><td>Wyeth</td><td>L96625</td><td>Hayvan müdahalesi</td></tr><tr><td>C57BL/6 fareler</td><td>SLAC Laboratuvarı Animal Co., Ltd.</td><td>Rastgele</td><td>Ainimal hazırlama</td></tr><tr><td>Deksametom</td><td>Sigma</td><td>D4902</td><td></td></tr><tr><td>Dimetil sülfoksit</td><td>Sigma</td><td>D2438</td><td>Hücre dondurulmuş</td></tr><tr><td>Etilen Diamin Tetraasetik Asit (EDTA)</td> <td>Sangon Biotech</td><td>60-00-4</td><td>Örnekler treatmnet</td></tr><tr><td>Fetal sığır serumu</td><td>Gibco</td><td>FL-24562</td><td>Hücre kültürü için</td></tr><tr><td>Gushukang granülleri</td><td>kangcheng şirketin çin</td><td>Z20003255</td><td>Bitkisel reçeteli</td></tr><tr><td>Işık mikroskobu</td><td>Olympus BX50</td><td>Olympus BX50</td><td>Osteoklastogenez</td></tr><tr><td>L-Askorbik asit 2-fosfat sekinagneyum çıta hidrat</td><td>için görüntüler Sigma</td><td>A8960-5G</td><td>Osteoblastogenez</td></tr><tr><td>Mikroskobu</td><td>Leica</td><td>DMI300B</td><td>Osteocast ve osteoblast</td></tr><tr><td>M-CSF</td><td>Peprotech'i</td> <td>hayal edinAF-300-25-10</td><td>Osteoklastogenez</td></tr> <tr><td>& Mu; icro-CT</td><td>Scanco Medikal AG</td> <td>& mu; CT80 radyografi mikrotomografi</td><td>Kemik Yapısal analsysis</td></tr><tr><td>RANKL</td><td>Peprotech</td><td>11682-HNCHF</td><td>Osteoklastogenez</td></tr><tr><td>Sprague Dawley</td><td>SLAC Laboratuvarı Animal Co., Ltd.</td><td>Rastgele</td><td>Kan serumu toplama</td></tr><tr><td>Tartarat Dirençli Asit Fosfat (TRAP) Kiti</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>387A-1KT</td><td>TRAP boyama</td></tr></tbody></table>

in vivo ve in vitro deneyler için gushukang (gsk) granül hazırlanması

Preparation Of Gushukang (GSK) Granules for In Vivo and In Vitro Experiments

Geleneksel Çinli bitkisel tıp, Postmenopozal Osteoporoz (POP) gibi birçok hastalığın tedavisinde alternatif bir yöntem olarak rol oynar. Gushukang (GSK) granüller, Çin 'de pazarlanmış bir reçete, POP tedavisinde kemik koruyucu etkileri var. Vücuda yönetim önce, bir standart hazırlama prosedürü yaygın olarak gereklidir, hangi ham otlar aktif bileşenlerin serbest bırakma teşvik etmek ve farmakolojik etkileri yanı sıra terapötik sonuçları geliştirmek amaçlamaktadır. Bu çalışmada in vivo ve in vitro deneysel olarak GSK granül kullanımı için ayrıntılı bir protokol öneriliyor. Yazarlar ilk in vivo soruşturma için granül hayvan uygun dozajlar hesaplamak için ayrıntılı bir protokol sağlamak: tartım, çözünme, depolama, ve yönetim. Ikinci olarak, bu makalede mikro-CT tarama ve kemik parametrelerinin ölçümü için protokoller açıklanır. Numune hazırlama, mikro-CT makinesini çalıştırmak için protokoller ve kemik parametrelerinin ölçülmesini değerlendirilmiştir. Üçüncü olarak, serum içeren GSK granül hazırlanır ve ilaç içeren serum in vitro osteoclastogenesis ve osteoblastogenesis için ayıklanır. GSK granül üç gün boyunca fareler için günde iki kez intragastrik uygulandı. Daha sonra kan toplanan, santrifübe, inaktive ve filtrelenmiş. Son olarak, serum seyreltilmiş ve osteoclastogenesis ve osteoblastogenesis gerçekleştirmek için kullanılır. Burada açıklanan protokol bitkisel reçete ilaçların farmakolojik araştırmalar için bir referans olarak kabul edilebilir, granül gibi.

Micro-CT tarama sonuçları, OVX farelerinin tuzlu kontrol farelerine göre önemli kemik kaybına neden olduğunu göstermiştir (Şekil 1a). GSK granüllerinin müdahalesi (90 gün) özellikle GSKM grubunda (Şekil 1B) BMD 'yi büyük ölçüde artırmıştır. BMD, BV/TV, TB. N ve Tb.Th gibi kemik yapısı parametreleri niceleyilmiş. GSK granül tedavileri BMD, BV/TV, TB. N ve Tb.Th artmış ama TB. SP (Şekil 1C) azaldı....

Bu makalede, hayvan çalışmaları için Gushukang granül ve in vitro deneyler için serum içeren GSK granül bir çalışma çözümü hazırlamak için ayrıntılı bir protokol sağlar. Bu protokol, bitkisel ilaçların farmakolojik araştırmalarına ve hem in vivo hem de in vitro deneyler için reçete olarak uygulanabilir.

In vivo ve In vitro deneyler için Gushukang (GSK) granül hazırlanması

Traditional Chinese herbal medicine plays a role as an alternative method in treating many diseases, such as postmenopausal osteoporosis (POP). Gushukang ...

Bu protokol, in vivo çalışmalar için granüllerin çalışma çözeltisinin hazırlanmasını ve in vitro deneyler için granül içeren serumun hazırlanmasını sağlar. Bu tekniğin bir avantajı, deneyler için oluşturduğunuz malzemelerin ve hayvanların düşük maliyeti nedeniyle yöntemin kolayca tekrarlanabiliyor olmasıdır. Arta sekiz, 16 ve 24 gram Gushukang veya GSK, granülleri tek tek 50 mililitrelik tüpler ekleyerek başlayın.Her tüpe 48 mililitre su ekleyin ve granülleri tamamen eritmek için tüpleri sallayın. Daha sonra, başka bir 50 mililitrelik tüp içine D3 vitamini ile desteklenen kalsiyum karbonat 1.6 tablet yerleştirin ve sallayarak tuzlu 48 mililitre tablet eritin. Çözümlerin intragastrik yönetimi için, ilk olarak hafifçe ama sıkıca elle bir aylık, kadın, C57 Siyah 6 fare iki ila üç dakika boyunca dizginlemek.Fare sakinleştiğinde, GSK granüllerinin bir çözeltisinin 0,24 mililitrelik 12 numaralı gavaj iğnesini yükleyin ve iğne direnci hissedilene kadar gavaj iğnesini ağzının bir tarafından fareye yerleştirin ve iğnenin mideye ulaştığını gösterin. Çalışma çözeltisinin tüm hacmini hayvana enjekte edin. Daha sonra, gavaj iğnesini geri alın ve diğer fareler e-posta ile 0,24 mililitre kalsiyum

preparation-gushukang-gsk-granules-for-vivo-vitro

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu protokolün amacı, bir kök hücre hedef arama faktörü olan SDF-1α'yı dekstran sülfat-kitosan nanopartiküllerine dahil etmektir.  Elde edilen parçacıklar, boyutları ve zeta potansiyellerinin yanı sıra nanoparçacıklardan SDF-1α'nın içeriği, aktivitesi ve in vitro salım hızı için ölçülür.

SDF-1α-Kitosan-Dekstran Sülfat nano partiküllerin hazırlanması ve Karakterizasyonu

Burada, yüksek verimde saf, tamamen glikosile edilmiş ve enzimatik olarak aktif proteaz üreten HEK293T hücreleri kullanan uygun maliyetli bir granzim ekspresyon sistemini açıklıyoruz.

Memeli hücrelerinde İnsan Granzymes bir Yüksek Verimli ve Maliyet-etkin İfade Sistemi

Bu protokol, nörobilim ve nörofarmakoloji araştırmalarında in vitro bir model olarak kullanılan birincil nöronal kültür olan kültürlenmiş serebellar granül nöronlarında Fluorescein diasetat (FDA) ve Propidyum İyodür (PI) çift boyasını kullanarak nöronal canlılığı nasıl doğru bir şekilde ölçtüğümü açıklamaktadır.

Serebellar Granül Nöron Kültüründe Floresan Diasetat-Propidyum İyodür Çift Boyama Kullanarak Nöronal Canlılığın Değerlendirilmesi

Burada, erüe, ekstraksiyon, filtrasyon ve konsantrasyon olmak üzere dört basamakta bir er-xian ekstraksiyonunun (EXD) hazırlanması ve hazırlanmış bir EXD içeren serumun sıçanlara uygulanmasını gösteriyoruz. Bu yöntemler, geleneksel Çin ilaçları gibi bitkisel dekompozisyonların in vivo ve in vitro çalışması için geçerlidir.

Bitkisel Tıbbın Hazırlanması: Er-Xian Kaynatma ve Er-Xian içeren Serum<emIn vivo</emVe<em&gt; In vitro</em&gt; Deneyler

Burada, fare granulocyte-macrophage-colony-stimulating-factor-producing T yardımcı (THGM) hücreleri yalıtım saf CD4 + T hücreleri, THGM, farklılaşma da dahil olmak üzere saf CD4 + T hücrelerden ayırt etmek için bir iletişim kuralı mevcut ve farklılaştırılmış THGM hücre analizi. Bu yöntem çalışmaları Yönetmeliğin ve THGM hücre işlevi uygulanır.

Vitro Farklılaşma fare granülosit-makrofaj-koloni uyarıcı faktör (GM-CSF)-T yardımcı (THGM) hücreleri üreten

Daha önce bir sentetik peptid, akut akciğer iskemi reperfüzyon bağlı yaralanma azaltılmış protein kinaz C-delta inhibitörü intravenöz sunmak için bir altın nanopartikül peptid melez kullandık. İşte detaylı iletişim kuralı uyuşturucu formülasyon göstermektedir. Hücre içi diğer peptidler benzer şekilde formüle edilebilir.

Protein kinaz C-delta inhibitör peptid formülasyonu altın nano tanecikleri kullanarak

Geliştirilen ve jelatin tabanlı Biyomalzeme doku Mühendisliği uygulama için kullanılacak inşası için ıslak eğirme kavramı dayalı bir iletişim kuralı tanımlayın.

Islak eğirme esaslı kalıplama işlemi doku rejenerasyonu için jelatin

Mevcut protokol, kitosan-genipin mikrojellerinin üretimi için emülsiyon bazlı olmayan bir yöntemi tanımlamaktadır. Bu mikrojellerin boyutu hassas bir şekilde kontrol edilebilir ve pH'a bağlı şişlik gösterebilir, in vivo olarak bozulabilir ve zamanla sürekli bir şekilde salınan terapötik moleküllerle yüklenebilir, bu da onları doku mühendisliği uygulamaları için oldukça alakalı hale getirir.

Doku Mühendisliği Uygulamaları için Boyut Kontrollü ve Emülsiyonsuz Kitosan-Genipin Mikrojellerinin İmalatı

Bu makalede, mikroakışkan cihazlar kullanılarak yüksek verimli jelatin metakriloil mikrojel üretimi, mikrojellerin yeniden askıya alınabilir toza (mikro-aerojeller) dönüştürülmesi, granüler hidrojel iskeleleri oluşturmak için mikrojellerin kimyasal montajı ve 3D biyobaskı için korunmuş mikroporoziteye sahip granüler hidrojel biyomürekkeplerinin geliştirilmesi için protokoller açıklanmaktadır.

Jelatin Metakriloil Granül Hidrojel İskeleleri: Yüksek Verimli Mikrojel İmalatı, Liyofilizasyon, Kimyasal Montaj ve 3D Biyobaskı

Burada, ABE kaplı kitosanı kemik içi enjeksiyon ile doğrudan kemik iliğine ileten bir gen tedavisi yaklaşımı sunuyoruz.

Kitosan Nanopartiküllerin İntraosseöz Enjeksiyonu Kullanılarak Gelişmiş Gen İletimi ve Ekspresyonu Kapsüllenmiş Adenin Baz Düzenleyici Plazmitler

Bu makale, fazla ayrılmış dev veziküller içindeki hücre iskeleti ağlarının basit bir tek kap sulandırmasını tanıtmaktadır. Yöntem genelleştirilebilir ve çok çeşitli biyomoleküllerin kapsüllenmesi veya hapsedilmesi için uygulanabilir.

Laboratuvar ortamında Fazla Ayrılmış Dev Unilamellar Veziküller (GUV'ler) İçindeki Hücre İskeleti Ağlarının Sulandırılması

Keşfedin Gushukang granül hazırlama protokolünü farelerde in vivo ve in vitro deneyler için. Bu maliyet-etkin yöntem, bitkisel ilaç farmakolojisi araştırmalarında tekrarlanabilir sonuçlar sağlar.

In vivo ve In vitro deneyler için Gushukang (GSK) granül hazırlanması

Daha fazla video keşfet