Name: Güvenilir ve tekrarlanabilir kritik ölçekli gelen bir Segmental femur kusur manken özel eksternal fiksatör ile stabilize Sıçanlarda (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-03-24T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 20 s
Description: Öğrenin, sıçanlarda kritik ölçekli femur segmental kusur modeli oluşturmayı ve dış fiksasyonla stabilize etmeyi. Bu yöntem, kemik iyileşme mekanizmalarını ve rejeneratif tedavileri değerlendirmek için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu eser bir NIH ekipman hibe 1S10OD023676-01 tarafından University of Wisconsin'ın ortopedi bölümler ve Rehabilitasyon ve Tıp Fakültesi ve halk sağlığı ile sağlanan ek desteği ile desteklenmiştir. UW'ın Carbone Kanser Merkezi destek hibe P30 CA014520 ve onların küçük hayvan Imaging tesisi yanı sıra NIH eğitim Grant 5T35OD011078-08 kullanım destek H. Martin için kabul etmek istiyorum. Biz de Michael ve Mary Sue Shannon kas-iskelet rejenerasyon ortaklık verdikleri destek için teşekkür ederiz.

Bu çalışmada kullanılan fareler travma yönergelere uygun olarak günlük bakım ötenazi hayvanlar için alınan: 2013 Edition16. Kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi, Wisconsin-Madison Üniversitesi değerlendirildi ve proje başlamadan önce bu deneysel protokol onayladı.
1. hayvanlar
<ol><li>Yaklaşık 350 gr ağırlığında outbred Sprague-Dawley erkek rats kullanın.</li>
</ol>2. hazırlık, kemik morfogenetik Protein-2 (rhBMP-2) batırılmış sünger iskele
Not: İskele hazırlık femur implantasyon hemen önce gerçekleşmesi gereken (bkz. Adım 6,14).
<ol><li>Kollajen sünger, liyofilize rhBMP-2 ve sulandırma17için steril su içeren bir kurulan rhBMP-2 kemik greft kit kullanımı için üreticinin yönergelerini izleyin. Kısırlık Bakımı, rhBMP-2 için bir konsantrasyon 1.5 mg/mL steril su ile yeniden oluşturma.</li>
	<li>Steril makas ve steril bir cetvel, 5 mm x 3 mm x 3 mm kusur sığacak şekilde yeniden şekillendirmek için rhBMP-2 sırılsıklam kollajen sünger gelene dek kırpın.</li>
	<li>Böylece bu emilir kullanarak, rhBMP-2 çözüm kollajen sünger üzerinde eşit olarak dağıtabilmenizi.</li>
</ol>3. özel eksternal fiksasyon aygıt hazırlanması
Not: 1A rakam boyutları daha tam listesi için bkz.
<ol><li>Alüminyum levha stok (türü 6061, 0,088" kalınlığı) 2-kesilmiş parçalar (1.4" x 6") bir Yapboz veya diğer uygun aracı kullanarak.</li>
	<li>Freze makinesi tek parça monte ve bir 1/8" 90 °-nokta karbür matkap değirmen kullanılarak, dört 'V' grooves (0.035" derin) kesme boyuna. Diğer parça keser özgür bırakın.</li>
	<li>Genişliğinin 0.3" iki bireysel plakalar kesilmiş parçalar (şekil 1B). Ölçü ve Matkap üzerindeki vida delikleri 4-40 iş parçacığı için. 4-40 iplik ile 'V' yivli plaka dokunun. #4 vida vücut tatbikat oluklar olmadan plaka matkap.</li>
	<li>Köşeleri yuvarlak ve ağırlığı (şekil 1 c) azaltmak için iki adet kum.</li>
	<li>Oluklar düz plaka (şekil 1 d) karşı aynı hizada olması ile birlikte 4-40, 18-8 paslanmaz çelik düğmesini baş cap vidaları (0,25") adet vida</li>
</ol>4. anestezik yordam ve Analjezi
<ol><li>Anestezi indüksiyon Odası 4 L O2/min ile % 4 isoflurane teslim fareyi yerleştirerek neden. Dikkat: Araştırma personeli anestezik gaz zehirlenmesinden önlemek ve uygun başlık ve havalandırma Laboratuvarı korumak gerekir.</li>
	<li>Fareyi iyileştiren refleks kaybeder sonra fareyi odasından kaldırın, burun konisi eklemek ve idame dozu anestezi (O2 teslim oran için 2-3 L/dak ve % 0,8 isoflurane) burundan yerleştirin.</li>
	<li>Fareyi Isıtma yastığını veya hipotermi önlemek için Isınma ışık altında ekleyin.</li>
	<li>Anestezi yeterli derinliği parmak pinching veya palpebral refleks testi onaylayın.</li>
	<li>Yağlama gözleri kornea dışarı kurutma önlemek için geçerlidir.</li>
	<li>Genişletilmiş sürüm buprenorfin (1 mg/kg) bir subkutan enjeksiyon gövde/patolojisi analjezi sağlamak ilâ 3 gün boyunca ameliyatı takiben cerrahi siteye, uzakta sıçan sunmak.</li>
</ol>5. aseptik hazırlık ve antibiyotik preventatives
<ol><li>13inci kaburga, ayak, dorsal orta hat ve ventral orta hat kenar boşluklarını kullanmak hindleg çevresini tıraş.</li>
	<li>Traş fırçalayın alanı % 10 povidone-iyot % 70 oranında takip ile batırılmış steril 2 x 2 gazlı bez kullanarak alkol (4 kez her biri, alternatif).</li>
	<li>Sülfadiyazin (20 mg/kg) bir kas içi enjeksiyon içine operatif kuadriseps yönetmek.</li>
	<li>Enrofloksasin (0.25 mg/ml) içme suyunda postoperatively sürekli antibiyotik koruma için 7 gün için yönetmek.</li>
	<li>Fareler PIN yolu enfeksiyonları önlemek için çalışma süresi için tıbbi besleme (örneğin, Uniprim) yerleştirin.</li>
	<li>Çift Kişilik antibiyotikli bir krem cilt-pin arabirim için bir kez her gün postoperatively 3 gün boyunca geçerlidir. Not: herhangi bir harici fiksasyon PIN önlemek veya hangi enfeksiyon gelişmesine katkıda bulunabilir gevşeme kelepçe.</li>
</ol>6. cerrahi müdahale
Not: uyumlu bir çaba bir steril alan ve çalışma alanı korumak ve steril tekniği kasanın tamamı boyunca takip edin.
<ol><li>Delikli, açık yapışkan örtüsü ve steril bir alan oluşturmak için steril havlu kapak cerrahi tezgah traş bacak uzatmak.</li>
	<li>Uyluk kemiği muayene et ve proksimal femur, büyük trochanter patella uzanan deri yoluyla anterolateral kesik oluşturmak için #15 bıçak kullanın.</li>
	<li>Dikkatle yanal bacak fasya yanal uyluk maruz kadar vastus okuli kas kuadriseps, anteriorly hamstrings özafagusu ayırmak için intermuscular septum boyunca deşmek. Büyük trochanter tarihinde kaçıran gluteal tendon ekleme korumak.</li>
	<li>Dikkat et, Atravmatik sirkumferansiyel yumuşak doku diseksiyon gerçekleştirmek ve yanal yüzeyde başlayan onun orta diaphysis, femur bulaşmasına neden. Bunu yapmak için #15 bıçak bıçak kemik yüzeyine kontur karşı paralel tutarak temel kemik uzak kas hafifçe kesmek için kullanın. Kas maruz kemik uzak disseke gibi kaldırıp ulaşana kadar 7-10 mm Merkezi diaphysis, yumuşak doku ostectomy için hazırlamak için tüm tarafların temizlenmiş oldu femur şaft devam periosteal asansörü kullanın. Not: medial femoral nörovasküler demet yaralanma kaçının.</li>
	<li>Dört 1.0 mm Kirschner (k) teller takın: 2 proksimal ve 2 lateral femur dikey femur distal medial için düz lateral yönetti. Her iki cortices (bicortical) yeterli istikrar (şekil 2A) için tüm pins meşgul olun.</li>
	<li>En distal iğne ile ilk, sadece lateral epicondyle düzeyinde başlar. Yer jig yanal distal femur boşaltır ve 1.0 dişli ucu k-dinleme cihazı takın.</li>
	<li>Kemikteki jig konumunu koruyarak, en proksimal PIN jig delikleri alan kemik girmek nerede tanımlayın. Konum belirlendikten sonra dikkatle paralel gluteal tendon lifleri için doku geçmesine, proksimal pin için küçük bir boşluk oluşturmak için gerektiğinde böylece tendon iyatrojenik zarar en aza indirerek deşmek. 1.0 mm evreli olmayan k-tekrar pin her iki cortices (şekil 2B) yürütmektedir sağlanması dinleme cihazı bu boşluğu içinde matkap.</li>
	<li>Kemik ile temas halinde görürse oyun konumunu korumak ve iki 1.0 mm dişli k-telleri, gelecekteki kusuru sitesinde her iki tarafında bir matkap. Her iki cortices (şekil 2C) iğne meşgul olun.</li>
	<li>Düzey 1 cm cilt üzerinde bar eksternal fiksatör yerleştirin ve sıkıca, yer çubuğunda kilitleme canı cehenneme. Aşırı PIN uzunlukları (şekil 2B) küçük.</li>
	<li>Ostectomy (kusur oluşturma) için küçük, eğri Retraktörü anterior ve posteiror uyluk çevresinde yerleştirerek çevreleyen yumuşak dokusu, kas ve nörovasküler demet korumak için hazır olun. ~ 5 mm sagittal salınan kullanan testere, çok dikkatli bir 5 mm segmental kusur orta diaphysis aracılığıyla oluşturun. Bir ışık, gereksiz kırığı (şekil 2E) önlemek için testere ile bile basınç uygulayın.</li>
	<li>Termal Kemik nekrozu önlemek için kusur oluşturulurken sulama (oda sıcaklığında % 0,9 steril normal salin (NS)) gerektiği gibi az miktarda uygulayın.</li>
	<li>Defekt oluşturduktan sonra NS 10 mL kullanarak yara floş.</li>
	<li>0.1 mL % 0.25 bupivacaine epinefrin (1: 200, 000) ile bir analjezik ve vasoconstrictor olarak yara için yönetmek.</li>
	<li>INSERT kollajen sünger veya rhBMP-2 (5 x 3 x 3 mm) İskele defekt içine ( Adım 2) üzerinden sünger batırılmış. Her iskele uzunluğu ve konumda kalın sünger yardım kusur, hacmi yayılmasını uygun boyutta olması. Not: Bu noktada, mRNA kompleksleri hazırlanacak ve bioluminescence görüntüleme gerçekleştirmek eğer 7,1-7,3 aşağıdaki adımlarda açıklandığı şekilde enjekte.</li>
	<li>4-0 absorbe dikiş ile basit kesintiye uğramış desen kullanarak kas uçak kapatın. 4-0 absorbe dikiş ile çalışan bir subcuticular düzeni kullanmak cilt katman kapatın ve çıkıntılı pimleri etrafında boşlukları kapatmak için tutkal cilt.</li>
	<li>Burun konisi, Isıtma yastığını üzerinde kalan fareyi kaldırın ve sürekli fare sürekli dik bir duruş korumak için güçlü olana izlemek. Bu noktada, kurtarmak için temiz bir kafese koyun.</li>
</ol>7. complexed mRNA ve bioluminescence görüntüleme hazırlanması
Not: Transfection mRNA kompleksleri ile ameliyat 1 gün öncesine ışıldama görüntüleme sırasında yapılmalıdır. Steril teknikleri mRNA işlerken kullanın.
<ol><li>Mix 10 µL mRNA lipidik transfecting Aracısı 30 µL ile Gaussia luciferase (hisse senedi konsantrasyon 1 µg/µL) için kodlama.</li>
	<li>Forma mRNA-lipid kompleksleri için oda sıcaklığında en az 5 min için kuluçka tarafından izin. Lipidik transfecting Ajan mRNA molekülleri onları istikrarı ve transfection verimliliği arttırmak yoğunlaşmak. Not: kompleksleri hemen kullanılmazsa, onları buz en fazla 1 saat için saklayın.</li>
	<li>Filtre uygulanmış ipuçları ile donatılmış bir 20 µL pipet kullanarak, mRNA kompleksleri defekt, distal ve proksimal uçları birimin sırasıyla enjekte et.</li>
	<li>Ertesi gün, görüntüleme önce 3 dk inhale isoflurane adım 4.1 daha önce açıklandığı gibi kullanarak fare anestezi.</li>
	<li>Fareyi bir bakım isoflurane (% 0,8 isoflurane, O2 teslim oranı 2-3 L/dak) teslim bir burun konisi ile donatılmış oda Imaging vivo yerleştirin.</li>
	<li>Coelenterazine 4 mg/kg vücut ağırlığı defekt birbirine bir doz, serum resuspended enjekte.</li>
	<li>Bioluminescence görüntüleri görüntüleme sistemi (İVIS) göre üreticinin yönergeleri18 in vivo elde.</li>
</ol>8. görüntüleme Protokolü
<ol><li>Düz Radyografi makine, bir x-ışını sistemi19, ayarlama sonra anestezi inhale isoflurane yukarıda açıklanan (bkz: Adım 4.1) kullanarak fare ve fare ile inhale isoflurane (% 0,8 isoflurane, O2 burun konisi yerleştirin teslimat oranı 2-3 L/dak) için bir hastanın (AP) uyluk grafisi.<ol>
<li>Fareyi sternal recumbency, cerrahi hindlimb ileri, kalçada esneme ilerlemek ve ortak bastırmak. Yaklaşık 90 ° bastırmak ortak esnek. Pençe plantar yan aşağı, vücut duvara yakın teyp. Uyluk kemikleri superimposing olasılığını ortadan kaldırmak için gelen tibia öne getirin. Kalça hafif kaçırma sağlamak için kasık bölgesinde yarı saydam sünger (yaklaşık 15 mm kalınlığında) yerleştirin. Sonra uyluk ön-arka (Kaudal kafatası) görüntüsünü elde etmek.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Bu AP uyluk radyografik görünümü hemen ardından cerrahi, 4 hafta ve 12 hafta tekrarlayın. Gazlı bez ve bant hayvanın ekstremite kalite ve tutarlı görüntüleme için uygun şekilde konumlandırmak için kullanın.</li>
	<li>Burun konisi fareyi kaldırın ve sürekli fare sürekli dik bir duruş korumak için güçlü olana izlemek. Sonra kafesin içine yerleştirin.</li>
</ol>9. histolojik yordamı
<ol><li>Fareler ile inhale CO2 travma etik standartları16göre bir odasında ötenazi.</li>
	<li>Aşağıdaki ötenazi, hindlimb tıraş, Cilt operatif ekstremite kaldırmak ve uyluk, kalça disarticulate. Dikkatli bir şekilde tüm yumuşak doku (tüm kas, tendon ve bağ da dahil olmak üzere) operatif uyluk çıkarın. Şifa bölge diseksiyon sırasında yanlışlıkla zararlardan korumak için kusur sitesi çevreleyen kas sadece ince bir tabaka bırakın.</li>
	<li>Uyluk kemiği % 10'luk yer tarafsız arabelleğe alınmış fiksasyon için izin vermek için Formalin 3-4 gün için oda sıcaklığında. 15:1 formalin doku hacim oranı için tutun. Çözüm fiksasyon işlemi boyunca yarıya kadar bir kez değiştirin.</li>
	<li>Uyluk kemiği bir çözümde % 15 Ethylenediaminetetraacetic asit (EDTA) pH 6,5 3-4 hafta boyunca decalcify. Kalsiyumun bitiş noktası belirlemek için seri halinde ilerlemenin toplamak.</li>
	<li>Uyluk kemiği boyuna bir kesim anterior posterior-sagittal düzlemde ile bisect. Doku standart parafin gömme ve Hematoksilen ve Eozin (H & E) boyama için gönderin.</li>
	<li>H & E slaytlar bir patolog histolojik değerlendirme için gönder.</li>
</ol>

<ol><li>Filipowska, J., Tomaszewski, K. A., Niedźwiedzki, Ł, Walocha, J. A., Niedźwiedzki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+vasculature+in+bone+development%2C+regeneration+and+proper+systemic+functioning%5BTitle%5D)+AND+%22Angiogenesis%22%5BJournal%5D)">The role of vasculature in bone development, regeneration and proper systemic functioning.</a> Angiogenesis. 20 (3), 291-302 (2017).</li>
<li>Charalambous, C. P., Akimau, P., Wilkes, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hybrid+monolateral-ring+fixator+for+bone+transport+in+post-traumatic+femoral+segmental+defect%3A+A+technical+note%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Orthopaedic+and+Trauma+Surgery%22%5BJournal%5D)">Hybrid monolateral-ring fixator for bone transport in post-traumatic femoral segmental defect: A technical note.</a> Archives of Orthopaedic and Trauma Surgery. 129 (2), 225-226 (2009).</li>
<li>Xing, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+bilateral+femoral+large+segmental+bone+defect+mouse+model+potentially+applicable+to+basic+research+in+bone+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Establishment of a bilateral femoral large segmental bone defect mouse model potentially applicable to basic research in bone tissue engineering.</a> The Journal of Surgical Research. 192 (2), 454-463 (2014).</li>
<li>Chadayammuri, V., Hake, M., Mauffrey, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innovative+strategies+for+the+management+of+long+bone+infection%3A+A+review+of+the+Masquelet+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Patient+Safety+in+Surgery%22%5BJournal%5D)">Innovative strategies for the management of long bone infection: A review of the Masquelet technique.</a> Patient Safety in Surgery. 9 (32), (2015).</li>
<li>Koettstorfer, J., Hofbauer, M., Wozasek, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Successful+limb+salvage+using+the+two-staged+technique+with+internal+fixation+after+osteodistraction+in+an+effort+to+treat+large+segmental+bone+defects+in+the+lower+extremity%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Orthopaedic+and+Trauma+Surgery%22%5BJournal%5D)">Successful limb salvage using the two-staged technique with internal fixation after osteodistraction in an effort to treat large segmental bone defects in the lower extremity.</a> Archives of Orthopaedic and Trauma Surgery. 132 (19), 1399-1405 (2012).</li>
<li>Fragomen, A. T., Rozbruch, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mechanics+of+external+fixation%5BTitle%5D)+AND+%22The+Musculoskeletal+Journal+of+Hospital+for+Special+Surgery%22%5BJournal%5D)">The mechanics of external fixation.</a> The Musculoskeletal Journal of Hospital for Special Surgery. 3 (1), 13-29 (2007).</li>
<li>O’Toole, R. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+prospective+randomized+trial+to+assess+fixation+strategies+for+severe+open+tibia+fractures%3A+Modern+ring+external+fixators+versus+internal+fixation+%28FIXIT+Study%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Trauma%22%5BJournal%5D)">A prospective randomized trial to assess fixation strategies for severe open tibia fractures: Modern ring external fixators versus internal fixation (FIXIT Study).</a> Journal of Orthopaedic Trauma. 31, S10-S17 (2017).</li>
<li>Fürmetz, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+transport+for+limb+reconstruction+following+severe+tibial+fractures%5BTitle%5D)+AND+%22Orthopedic+Reviews%22%5BJournal%5D)">Bone transport for limb reconstruction following severe tibial fractures.</a> Orthopedic Reviews. 8 (1), 6384(2016).</li>
<li>Dohin, B., Kohler, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Masquelet%E2%80%99s+procedure+and+bone+morphogenetic+protein+in+congenital+pseudarthrosis+of+the+tibia+in+children%3A+A+case+series+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Children%27s+Orthopaedics%22%5BJournal%5D)">Masquelet’s procedure and bone morphogenetic protein in congenital pseudarthrosis of the tibia in children: A case series and meta-analysis.</a> Journal of Children's Orthopaedics. 6 (4), 297-306 (2012).</li>
<li>Einhorn, T. A., Gerstenfeld, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fracture+healing%3A+Mechanisms+and+interventions%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Rheumatology%22%5BJournal%5D)">Fracture healing: Mechanisms and interventions.</a> Nature Reviews Rheumatology. 11, 45-54 (2015).</li>
<li>Pascher, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+delivery+to+cartilage+defects+using+coagulated+bone+marrow+aspirate%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Therapy%22%5BJournal%5D)">Gene delivery to cartilage defects using coagulated bone marrow aspirate.</a> Gene Therapy. 11 (2), 133-141 (2004).</li>
<li>Glatt, V., Matthys, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adjustable+stiffness%2C+external+fixator+for+the+rat+femur+osteotomy+and+segmental+bone+defect+models%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Adjustable stiffness, external fixator for the rat femur osteotomy and segmental bone defect models.</a> Journal of Visualized Experiments. (92), (2014).</li>
<li>Betz, O. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+percutaneous+gene+delivery+to+enhance+healing+of+segmental+bone+defects%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Bone+and+Joint+Surgery%22%5BJournal%5D)">Direct percutaneous gene delivery to enhance healing of segmental bone defects.</a> The Journal of Bone and Joint Surgery. 88 (2), 355-365 (2006).</li>
<li>Fang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stimulation+of+new+bone+formation+by+direct+transfer+of+osteogenic+plasmid+genes%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Stimulation of new bone formation by direct transfer of osteogenic plasmid genes.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 93 (12), 5753-5758 (1996).</li>
<li>Kaspar, K., Schell, H., Toben, D., Matziolis, G., Bail, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+easily+reproducible+and+biomechanically+standardized+model+to+investigate+bone+healing+in+rats%2C+using+external+fixation%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedizinische+Technik%22%5BJournal%5D)">An easily reproducible and biomechanically standardized model to investigate bone healing in rats, using external fixation.</a> Biomedizinische Technik. 52 (6), Berlin. 383-390 (2007).</li>
<li>Leary, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AVMA+guidelines+for+the+euthanasia+of+animals%3A+2013+edition%5BTitle%5D)+AND+%22American+Veterinary+Medical+Association%22%5BJournal%5D)">AVMA guidelines for the euthanasia of animals: 2013 edition.</a> American Veterinary Medical Association. , (2013).</li>
<li>McKay, W. F., Peckham, S. M., Badura, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comprehensive+clinical+review+of+recombinant+human+bone+morphogenetic+protein-2+%28INFUSE+Bone+Graft%29%5BTitle%5D)+AND+%22International+Orthopaedics%22%5BJournal%5D)">A comprehensive clinical review of recombinant human bone morphogenetic protein-2 (INFUSE Bone Graft).</a> International Orthopaedics. 31 (6), 729-734 (2007).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Living+lmage+Software%22">Living lmage Software</a>. , Perkin Elmer. (2006).</li>
<li>Bassett, J. H. D., Van Der Spek, A., Gogakos, A., Williams, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+X-ray+imaging+of+rodent+bone+by+faxitron%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Quantitative X-ray imaging of rodent bone by faxitron.</a> Methods in Molecular Biology. , 499-506 (2012).</li>
<li>Histing, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+bone+healing+models%3A+Standards%2C+tips%2C+and+pitfalls+results+of+a+consensus+meeting%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Small animal bone healing models: Standards, tips, and pitfalls results of a consensus meeting.</a> Bone. 49 (4), 591-599 (2011).</li>
<li>Lieberman, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+regional+gene+therapy+with+bone+morphogenetic+protein-2-producing+bone-marrow+cells+on+the+repair+of+segmental+femoral+defects+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Bone+and+Joint+Surgery%22%5BJournal%5D)">The effect of regional gene therapy with bone morphogenetic protein-2-producing bone-marrow cells on the repair of segmental femoral defects in rats.</a> The Journal of Bone and Joint Surgery. 81 (7), 905-917 (1999).</li>
<li>Tsuchida, H., Hashimoto, J., Crawford, E., Manske, P., Lou, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineered+allogeneic+mesenchymal+stem+cells+repair+femoral+segmental+defect+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Engineered allogeneic mesenchymal stem cells repair femoral segmental defect in rats.</a> Journal of Orthopaedic Research. 21 (1), 44-53 (2003).</li>
<li>Jiang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+standardized+massive+bone+defect+model+in+rats+employing+an+internal+eight-hole+stainless+steel+plate+for+bone+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Tissue+Engineering+and+Regenerative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Novel standardized massive bone defect model in rats employing an internal eight-hole stainless steel plate for bone tissue engineering.</a> Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 12 (4), 2162-2171 (2018).</li>
<li>Baltzer, A. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+enhancement+of+fracture+repair%3A+Healing+of+an+experimental+segmental+defect+by+adenoviral+transfer+of+the+BMP-2+gene%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Therapy%22%5BJournal%5D)">Genetic enhancement of fracture repair: Healing of an experimental segmental defect by adenoviral transfer of the BMP-2 gene.</a> Gene Therapy. 7 (9), 734-739 (2000).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+defect+animal+models+for+testing+efficacy+of+bone+substitute+biomaterials%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Translation%22%5BJournal%5D)">Bone defect animal models for testing efficacy of bone substitute biomaterials.</a> Journal of Orthopaedic Translation. 3 (3), 95-104 (2015).</li>
</ol>

Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarlarının veya yararları bildirin. Doğrudan veya dolaylı olarak bu makalede yazarlar tarafından alınan hiçbir faydaları olmuştur.

Küçük hayvan modelleri tam Kemik kırıkları gibi ortopedik yaralanma mekanizmaları osteogenesis ve Biyomalzeme20tedavi potansiyelini değerlendirmek araştırıyor araştırma etkinleştirin. Bu çalışmada bir sıçan tanıttı segmental kusur modeli stabilize bir laboratuar ve Biyomedikal Mühendisliği ekibi kolayca daha fazla taşıma osteosynthetic kemik onarım çalışmaları için yeniden oluşturabilirsiniz özel bir eksternal fiksatör tarafından.
Önceki çalışmalarda kritik ölçekli kusu...

Ortopedik travma cerrahisi karmaşık kırıklar geniş bir tedavi üzerinde duruluyor. Kritik diaphyseal gelen bir segmental kemik kusurları klinik olarak çevreleyen kas ve kapaklarini azalma rejeneratif yeteneği hem de yetersizliği nedeniyle tedavi etmek zor kanıtlamıştır angiogenez1yerelleştirilmiş. Modern tedavi teknikleri, Kemik greftleme ile operatif fiksasyon içerir (Masquelet) Kemik greftleme, kemik taşıma, füzyon veya amputasyon2,3,4gecikmeli. Ambulatuar işlevi ile iyi işleyen distal ekstremitelerde, onların travma sonrası korunmuş olan çoğu hasta uzuv hurda açıkça daha iyi bir tedavi seçeneği5mevcuttur. Bu hurda tedaviler genellikle uzun tedavi boyunca aşamalı cerrahi müdahaleler gerektirir. Bazı yazarlar bu eksternal fiksasyon implante internal fiksasyon azalmış doku hasarı nedeniyle bu uygulamalar için azalmıştır implantasyon sırasında yüzey alanı ve artan Postoperatif olarak ayarlanabilir, ile karşılaştırıldığında üstün olduğunu düşündürmektedir fiksatör6. Ancak, bir prospektif randomize kontrollü bu tartışmalara ciddi açık kırık tibia7eksternal fiksasyon karşı iç gidermek için şu sıralar başlatıldı. Ne yazık ki, seçili her iki tedavi ile önemli komplikasyon ve başarısızlık oranları8,9devam etmektedir. Segmental kemik kaybı ile ilgili olarak her iki tedavi yöntemi ile cerrah önemli sorunlar mevcut gelen bir segmental diaphyseal kusurları ile uğraşmak zorundadır. Düzeltmeler segmental kusurların kemik sabitleme en üst düzeye çıkarmak ve aynı anda Osteojenik işlemi10,11geliştirmek gerekir.
Klinik önemi nedeniyle, henüz kritik ölçekli diaphyseal gelen bir segmental kusurların düşük ses etkili bir tekrarlanabilir bir hayvan modelini tedavi teknikleri geliştirmek ve sonuçta klinik sonuçlar geliştirmek araştırma ekipleri etkinleştirmek gereklidir. Araştırmacılar vivo içinde fizyolojik şifa mekanizmaları bir memeli hayvan modelinde çalışması gerekir. 12,13,14,15eksternal fiksasyon zaten böyle modelleri mevcut iken, tedavi edilmeyen hayvanlarda seçimi ile azalma maliyetleri sendikalar için daha güvenilir bir yöntem sağlamak umut uygun fiyatlı fiksatör malzeme ve anahat gelecek çalışmalar kolay uygulaması basit bir cerrahi protokolü. Bu iletişim kuralı öncelikli hedefi de, fareler bir kritik diaphyseal kusur bir güvenilir ve tekrarlanabilir model kurmaktır. Prosedürü sabitleme ve sıçan uyluk içinde 12 hafta boyunca şifa kemik değerlendirilmesi tarafından incelendi. Dahil ikincil hedefleri: cerrahi yaklaşım ve sabitleme basitleştirmek ve sağlanması uygun bir model olarak bir maliyet etkin olarak olası, hayvan bakımı etik yapma. Yazarlar ve araştırma ekibi ile farklı Biyomalzeme ve segmental bu üründe şifa geliştirmek için potansiyel rejeneratif tedaviler bir dizi ön deneyler yaptı.

<table><tbody><tr><td>% 0.9 Steril Tuzlu</td><td>Baxter</td><td>2F7124</td><td>Yarayı irrigasyon ve rehidrasyon için kullanılır</td></tr><tr><td>% 10 İyot / Povidon</td><td>Carefusion</td><td>1215016</td><td>Cildi hazırlamak için kullanılır</td></tr><tr><td>% 10 Nötr Tamponlu Formalin</td><td>VWR</td><td>89370094</td><td>Sabitleyici olarak kullanılır</td></tr><tr><td>1 mm dişli olmayan kirschner teli</td><td>DePuy Sentezleri</td><td>VW1003.15</td><td>Sterilize, en proksimal pim</td></tr> <tr><td>için kullanılır1 mm dişli kirschner tel</td><td>DePuy Synthes</td><td>VW1005.15</td><td>Sterilize, en uzak 3 pim yuvası için kullanılır</td></tr><tr><td>2x2 gazlı bez</td><td>Covidien</td><td>4006130</td><td>Sterilize, cildi hazırlamak ve kan emmek için kullanılır</td></tr><tr><td>4-0 Vicryl</td><td>Sütür Ethicon</td><td>4015304</td><td>Kas ve cilt katmanlarını kapatmak için kullanılır</td></tr><tr><td>4-40 x 0.25 ", 18-8 paslanmaz çelik düğme başlı vidalar</td><td>Jenerik</td><td></td><td>Eksternal fiksatör montaj</td></tr><tr><td>4200 Akülü Sürücü</td><td>Stryker</td><td>OR-S-4200</td><td>Kirschner tellerini delmek için kullanılır</td></tr><tr><td>4x4 gazlı bez</td><td>Covidien</td><td>1219158</td><td>Sterilize, kanı emmek için kullanılır</td></tr><tr><td>%70 Etanol</td><td></td><td></td><td>Cildi hazırlamak için kullanılır</td></tr><tr><td>Baytril</td><td>Bayer Healthcare LLC, Hayvan sağlığı bölümü</td><td>312.10010.3</td><td>Antibiyotik olarak suya eklendi</td></tr><tr><td>Cefazolin</td><td>Hikma Farmasötikler</td><td>8917156</td><td>Pre-op antibiyotik</td></tr><tr><td>CleanCap Gaussia Luciferase mRNA (5moU)</td><td>TriLink Biotechnologies</td><td>L-7205</td><td>Gaussia Luciferase için modifiye mRNA kodlaması, kullanım sırasında buzda tutun</td></tr><tr><td>Coelenterazine doğal</td><td>NanoLight Teknolojisi</td><td>Guassia Luciferase için 303 Substrat, in vivo lusiferaz aktivitesini değerlendirmek için kullanılır</td><td></td></tr><tr><td>Çift antibiyotik merhem</td><td>Johnson & Johnson tüketici Inc</td><td>8975432</td><td>Ameliyat sonrası yara bakımı olarak iğne bölgelerine uygulanır</td></tr><tr><td>Çift Kesimli Microblade</td><td>Stryker</td><td>5400-003-410</td><td>Femurda 5 mm kusur oluşturmak için kullanılır</td></tr><tr><td>Etilendiamin Tetraasetik Asit (EDTA)</td> <td>Fisher</td><td>BP120-500</td><td>Histolojiye hazırlanmak için kemiği kireçten arındırmak için kullanılır</td></tr><tr><td>Uzatılmış Salımlı Buprenorfin</td><td>ZooPharm</td><td></td><td>3 günlük ağrı kesici olarak kullanılır</td></tr><tr><td>Fenestrated perdeler</td><td>3M</td><td>1204025</td><td>Steril alan oluşturmak için kullanılır</td></tr><tr>TPS <td>Stryker</td><td>OR-S-5100-4N</td><td>için el aleti kablosu</td><td>Femurda 5 mm kusur oluşturmak için kullanılır</td></tr><tr><td>Isıtma yastığı</td><td>K & H Pet Ürünleri</td><td>121239</td><td>Sıçan vücut ısısı bakımı</td></tr><tr><td>Altıgen başlı tornavida</td><td>Wiha</td><td>263/1/16 " X 50</td><td>Eksternal fiksatör sıkma</td></tr><tr><td>İndüksiyon odası</td><td>Sıçanlar için</td><td>Jenerik</td><td></td> Anestezi</tr><tr><td>Kollajen süngeri rekombinant insan Kemik Morfojenik Protein-2 ile infüze</td><td>edin Medtronic</td><td>7510200</td><td>Pozitif kontrol olarak kullanılan klinik olarak ilgili tedavi</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Clipper</td><td>10250</td><td>Sıçanlar için anestezi</td></tr><tr><td>IVIS</td><td>Perkin Elmer</td><td>124262</td><td>Biyolüminesans görüntüleme modalitesi</td></tr><tr><td>Jig</td><td>Custom</td><td></td><td>Bigortikal pimleri yerleştirmek için kullanılır</td></tr><tr><td>Lipofectamine MessengerMAX</td><td>Fisher Scientific</td><td>LMRNA003</td><td>mRNA iletimini sağlayan mRNA kompleks oluşturucu ajan</td></tr><tr><td>Sensorcaine-MPF (Bupivicane (% 0.25) ve Epinefrin (1:200.000))</td><td>APP Pharmaceuticals, LLC</td><td>NDC 63323-468-37</td><td>Ağrı kesici ve vazokonstriksiyon için cerrahi bölgeye uygulanır</td></tr><tr><td>Steril su</td><td>Hospira</td><td>8904653</td><td>Sefazolin tozu için çözücü olarak kullanılır</td></tr><tr><td>Titanyum eksternal fiksatör plakaları</td><td>Özel Hurda</td><td>titanyum ve freze makinesi ile evde hazırlanmıştır</td>Toplam <td></td></tr><tr><td>Performans Sistemi (TPS) Konsolu</td><td>Stryker</td><td>OR-S-5100-1</td><td>Femurda 5 mm kusur oluşturmak için kullanılır</td></tr><tr><td>TPS MicroSaggital Testere</td><td>Stryker</td><td>OR-S-5100-34</td><td>Femurda 5 mm kusur oluşturmak için kullanılır</td></tr><tr>DXA <td>Faxitron</td><td>ile Ultrafocus Faxitron</td><td></td><td>Yüksek çözünürlüklü radyografik görüntüleme modalitesi</td></tr><tr><td>Uniprim sıçan diyeti</td><td>Envigo</td><td>TD.06596</td><td>İlaçlı sıçan diyeti</td></tr><tr>TPS <td>Stryker</td><td>OR-S-5100-9</td><td>için Evrensel El Anahtarı</td><td>5 mm oluşturmak için kullanılır uyluk kemiğinde kusur</td></tr><tr><td>Vetbond Doku Yapıştırıcısı</td><td>3M</td><td>1469</td><td>Cilt kapanması</td></tr></tbody></table>

güvenilir ve tekrarlanabilir kritik ölçekli gelen bir segmental femur kusur manken özel eksternal fiksatör ile stabilize sıçanlarda

A Reliable and Reproducible Critical-Sized Segmental Femoral Defect Model in Rats Stabilized with a Custom External Fixator

Ortopedik araştırma ağır kemik içinde vivo şifa mekanizmaları çalışma gibi yeni tedavi teknikleri araştırmak için hayvan modellerinde dayanmaktadır. Segmental kusurları kritik ölçekli klinik olarak tedavi etmek için zorlu ve araştırma çabalarının güvenilir, Ambulatuvar küçük bir hayvan model bir segmental femur kusur faydalanabilir. Bu çalışmada, biz bir eksternal fiksatör ile stabilize bir sıçan uyluk bir 5 mm kritik diaphyseal kusur tutarlı ve tekrarlanabilir oluşturulması için en iyi duruma getirilmiş bir cerrahi Protokolü mevcut. Diaphyseal ostectomy 4 Kirschner telleri bicortically, yerleştirmek için özel bir jig kullanarak hangi bir adapte eksternal fiksatör aygıtla stabilize gerçekleştirildi. Salınan bir kemik testeresini kusur oluşturmak için kullanılan. Yalnız bir kollajen sünger veya rhBMP-2'de batırılmış bir kollajen sünger defekt implante ve kemik şifa 12 hafta boyunca ilerlemenin kullanarak izlenir. 12 hafta, sıçan kurban edildi sonra histolojik analiz eksize denetimde gerçekleştirilmiş ve kalça tedavi. RhBMP-2 tedavi bir remodeling periosteal duygusuz ve yeni kemik oluşumu vermiştir iken sadece kollajen sünger içeren kemik defektleri sigara-Birliği'nde, sonuçlandı. Hayvanlar implantasyonu sonrası de kurtarılan ve harici fiksasyon 12 hafta boyunca femoral kusurları sabitleme başarılı oldu. Bu aerodinamik cerrahi model kemik şifa çalışma ve test yeni ortopedik Biyomalzeme ve rejeneratif tedaviler içinde vivokolayca uygulanabilir.

Ameliyat yaklaşık bir saat içinde bir Yardımcısı Yardımı ile bir cerrah tarafından gerçekleştirilmiştir. Cerrahi optimizasyonu sonra içi ve ameliyat sonrası komplikasyonlar Ģunları büyük ölçüde minimize ve tutarlı büyüklüğünü (5 x 3 x 3 mm) ve femur kusurların yerelleştirme jig cihazları kullanın. Fareler ve anestezi Ambulatuar hemen aşağıdaki kurtarma vardı değiştirilen herhangi bir davranış kalıpları için görünmedi; onların yürüyüş antalgic değildi ve eksternal fiksatör tarafından rahat...

Vivo memeli modellerinin kritik ölçekli kemik defektleri ortopedik tedavi ve şifa mekanizmaları eğitim araştırmacılar için gereklidir. Burada, bir protokol tekrarlanabilir, gelen bir segmental, femur kusurları eksternal fiksasyon kullanarak stabilize Sıçanlarda oluşturulması için tanıtmak.

Güvenilir ve tekrarlanabilir kritik ölçekli gelen bir Segmental femur kusur manken özel eksternal fiksatör ile stabilize Sıçanlarda

Orthopedic research relies heavily on animal models to study mechanisms of bone healing in vivo as well as investigate the new treatment techniques. ...

Bu cerrahi protokol, kemiğin iyileşme mekanizmalarını ve potansiyel rejeneratif tedavilerin kullanımını değerlendirmek için tutarlı ve tekrarlanabilir dıştan sabit segmental defekt modeli kullanır. Uzunlamasına iyileşme çalışmaları için uygun kalırken erişilebilir ve uygun maliyetli bir segmental kemik defekti modelinin oluşturulması ve stabilizasyonu için zorlu bir ameliyatı kolaylaştırdık. Bu teknik özellikle eksternal fiksasyon ile stabilizasyondan fayda sağlanabilir travmatik kritik boyutlu diaphysial kemik defektlerinin tedavisinde niçin translabl, model daha fazla çalışma gerektirir rağmen.Pimleri delerken bir kırığı önlemek için, lateral korteksi delmek için dakikada yüksek dönüşler ve düşük basınç kullanın, sonra ilerlemek için dakikada dönüşleri azaltın. Bir kemik morfogenetik protein tüp kemik greft kiti gelen iskele hazırlandıktan sonra, üreticinin talimatlarına göre, steril makas ve steril bir cetvel kollajen sünger beş üç üç milimetrelik defekt uygun kırpmak için kullanın. Daha sonra kemik morfogenetik protein-2 çözeltisini süngeryüzeyine eşit olarak dağıtmak için bir şırınga kullanın, ta ki çözeltinin tüm hacmi emilene kadar.Daha sonra, 13 kaburga, arka pençe ve dorsal ve ventral orta kenar boşlukları olarak kullanarak bir anestezi kalım sıçan ın arka bacak çevresindeki alanı tıraş, steril gazlı bez ile maruz kalan cildin dört ardışık alternatif scrubs takip 10%povidone-iyot ve% 70 etanol batırılmış. Femoral kusur neden olmak için, bir fenestrated net yapışkan perde ile tıraş bacak uzatmak, ve steril bir alan oluşturmak için steril havlu cerrahi tezgah kapağı. Femur palpate ve proksimal femur büyük trochanter patella uzanan deri yoluyla anterolateral bir kesi oluşturmak için bir sayı 15 bıçak kullanın.Dikkatle lateral femur maruz kalana kadar arka arkaya hamstrings anteriora quadriceps vastus lateralis kas ayırmak için intermüsküler septum boyunca lateral bacak fasya eğim. Kemik yüzeyinin kontur karşı bir sayı 15 neşter bıçak paralel tutmak, hafifçe dikkatli bir yapmak için altta yatan kemik uzak kas kesti, atravmatik çevresel yumuşak doku diseksiyonu, ve lateral yüzeyde başlamak, orta diafirinde uyluk ortaya çıkarmak. Kesitli olarak maruz kemik uzak kas kaldırmak için bir periosteal asansör kullanın, ve merkezi diaphyz yedi ila 10 mililitre her tarafta yumuşak doku temizlendi kadar femoral şaft etrafında devam edin.Sonra, lateral epikondil düzeyinde sadece bir pin yerleştirin, lateral distal femur bir jig floş yerleştirilmesi takip, ve bir milimetrelik dişli ucu Kirschner tel takın. Daha sonra, kemik üzerinde jig konumunu koruyarak, jig delikleri dayalı en proksimal pin kemik girecek nerede belirlemek. Proksimal pimin geçmesi için dokuda küçük bir boşluk oluşturmak için gerekli olduğu gibi gluteal tendon liflerine dikkatlice paralel olarak, tendondaki iyatrojenik hasarı en aza indirir.Bir milimetrelik ipliksiz k-teli boşluğa delin ve pimin her iki kortikası da devreye sokturmasını doğrulamak için delinmiş pimin yüksekliğini gevşek pimle karşılaştırın. Kemikle temas halinde jig konumunu koruyun ve pimleri her iki korteks meşgul sağlanması, gelecekteki kusur sitenin her iki tarafında iki bir milimetre dişli k-teller matkap ve dış fiksatör çubuğu seviyesi cilt üzerinde bir santimetre yerleştirin. Çubuğu yerinde kilitleyerek sıkıca vidalayarak fazla pim uzunluklarını kırpın.Çevreleyen yumuşak doku, kas ve nörovasküler demet korumak için ön ve posterior uyluk etrafında küçük bir kavisli retraktör yerleştirin ve yaklaşık beş milimetre sagittal salınımlı testere bıçak kullanın, ve ışık, hatta basınç, çok dikkatli orta diafirile beş milimetre segmental defekt oluşturmak için. Defekti oluşturduktan sonra yarayı %0.9 normal salinin 10 mililitresi ile temizle ve 0.1 mililitre bupivacaine epinefrin ile epinefrin ile bir analjezik ve vazokonstriktör olarak yaraya uygulayın. Kemik morfogenetik protein-2 defekt içine ıslatılmış sünger iskele sokulve kas düzlemi kapatmak için basit kesilen desen 4-0 emilebilir dikiş kullanın.Sonra çalışan subcuticular desen bir 4-0 emilebilir dikiş kullanarak cilt tabakası kapatın, sonra deri tutkal çıkıntılı pimleri etrafında herhangi bir boşlukları kapatmak için, ve hemen femur bir ön-posterior radyografik görüntü elde, ve ameliyattan sonra dört ve 12 hafta. Sadece kollajen sünger içeren negatif kontrol defektleri proksimal ve distal kemik kenarları arasında köprü osteogenezisi hiçbir kanıt göstermektedir. Yeni kemik remodeling küçük bir miktar doğrudan kesim femur kenarına bitişik görülebilir, defekt kendisi kemik malzeme eksikliği gösterirken, kıkırdak varlığı, ve bazı artık hematom.Kemik morfogenetik protein-2 ıslatılmış sünger içeren kusurlar, defekt arasında radyoopak duygusuz köprüleme ile kanıtlanan ameliyattan dört hafta sonra önemli kemik iyileşmesini göstermektedir. 12 hafta içinde, önemli yeni mineral birikimi defekt boyunca oluşmuştur. Kesme femur kenarından gelen duyarsız uzaması nda önemli yeni periosteal kemik gözlenebilir ve defekt boyunca dokuma ve lamellar kemiğinspileri gelişmiştir.Ayrıca kıkırdak birikimi görülmez. Dış fiksatör çıkarıldıktan sonra In Vivo Görüntüleme Sistemi ile görüntüleme defekt içinde biyolüminesans transfected hücrelerin görselleştirilmesisağlar. Örneğin, Gaussia luciferase için karmaşık mRNA kodlama ile transfeksiyon sonra medüller kavite luminesce hücreler, ve iyileşme sürecinde ilgi bir gen veya protein ifadesinde biyolojik değişiklikleri ölçmek için kullanılabilir.Pin yerleşimi, istikrarlı ve kalıcı bir dış fiksasyon sağlamak için önemlidir. Pimleri doğrudan femur dik olmalıdır, ve birbirine paralel, kırılma ve enfeksiyon en aza indirmek için. Bu model kullanılarak, belirli protein ifadeleri gibi biyolojik mekanizmalar, iyileşmeyi daha iyi anlamak için izlenebilir ve farklı iskele biyomateryalleri veya tedavileri de terapötik etkinlik için test edilebilir.Bu tekniğin gelecekteki araştırmacıların ortopedik iyileşmeyi dış fiksasyonla daha verimli ve etkili bir şekilde incelemelerine olanak sağlayacağını umuyoruz, böylece bulguları gelişmiş klinik başarılara çevrilebilir. Anestezik gazları teneffüs etmekten kaçının, formalin ve EDTA'yı kullanırken uygun kişisel koruyucu ekipman giyin ve cerrahi aletleri, özellikle matkap ve salınımlı kemik testeresini kullanırken dikkatli olun.

a-reliable-reproducible-critical-sized-segmental-femoral-defect-model

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biyomühendislik

Kemik onarımı alanındaki klinik öncesi araştırmaların bir kısıtlaması, iyileşen bir kemik lezyonundaki lokal mekanik ortam üzerinde deneysel kontrol eksikliğidir. Fiksatör sertliğini in vivo olarak değiştirme yeteneğine sahip kemik onarımı için eksternal bir fiksatörün tasarımını ve kullanımını rapor ediyoruz.

Ayarlanabilir Sertlik, Sıçan Femur Osteotomi ve Segmental Kemik Hata Modelleri için Eksternal Fiksatör

Biyomedikal araştırmalarda ciddi kemik yaralanmalarını taklit etmek için hayvan modelleri sıklıkla kullanılır. Küçük boyutları nedeniyle, farelerde stabilize kemik lezyonlarının kurulması çoğu araştırma grubunun yeteneklerinin ötesindedir. Burada, farelerde deneysel femur kusurlarını belirlemek ve analiz etmek için basit bir yöntem açıklıyoruz.

Farelerde Basit Kritik ölçekli Femoral Hata Modeli

Fare modelleri kemik dokusu mühendisliği için paha biçilmez araçlar olmasına rağmen, uzun kemik defektlerinin modelleri seyrektir. Bu ihtiyaç, düşük morbiditeye sahip tekrarlanabilir, femoral, kritik boyutlu bir defekti gerçekleştirmek ve stabilize etmek için dört vidalı bir kilitleme plakası ve özel bir aparat kullanan mevcut protokolün geliştirilmesini motive etti.

Farelerde bir Segmental Femoral Kritik boyutlu Defekt Modelinde kurulması Plaka Osteosentez tarafından Stabilize

Bu çalışmada yeni geliştirilen eksternal fiksatör oyalama osteogenesis için femoral köstebeğiyle model hangi izni eksternal fiksatör çıkarıldıktan sonra hayvan tarafından ağırlık taşıyan fizyolojik bir tekrarlanabilir ve detaylı iletişim kuralını kullanarak açıklar.

Oyalama Osteogenesis fonksiyonel rejenere uyluk için önde gelen bir fare modeli için verimli ve tekrarlanabilir bir protokol

Burada, sıçan femoral diyafiz dokusunda kutu boşluğu defekti oluşturmak için bir protokol sunuyoruz. Bu model, biyomekanik stres altında biyomalzeme performansını değerlendirebilir ve intramembranöz osteogenez ile ilgili kemik rejenerasyon mekanizmalarını keşfedebilir.

Sıçan Femora'nın Kortikal Kemiğinde Bir Kutu Boşluğu Defekti Modeli Oluşturma

Bu çalışma, kemik ikame malzemelerinin mekanik ve osteojenik performansını dahili veya dış fiksasyon kullanmadan, yük taşıyıcı koşullarda değerlendirmek için sıçan femur yarı-segmental defekt modeli oluşturmuştur.

Yük taşıyan bölgelerde kemik ikamesi performansını değerlendirmek için sıçanlarda yarı-segmental diyafizal kemik defekti modeli

Çalışma, sıçan radyal kırık modelinde stabil iç fiksasyon için dikişler ve titanyum iğnelerini yenilikçi bir şekilde birleştiriyor. Kırık iyileşmesi mikro-bilgisayarlı tomografi (mikro-BT) ile değerlendirildi ve birincil dorsal kök ganglion (DRG) nöronları izole edilip daha ileri inceleme için kültürlendi.

Fare Radyal Kırıkları İçin Yeni Bir Dahili Fiksasyon Modelinin Geliştirilmesi: Kırık İyileşme Değerlendirmesi ve Dorsal Kök Ganglion İzolasyonu

Uzun zincirli altın Alkan tiyoller oluşan Kendinden monte mono tabakaları (SAMs), protein desen ve hücre hapsi oluşumu için iyi tanımlanmış substratları sağlar. Microcontact baskı ile dolgu takip polidimetilsiloksan (PDMS) damga kullanarak hexadecanethiol glikol-sonlandırılır Alkan tiyol monomer damgalı hexadecanethiol bölgede sadece protein ve hücreler adsorbe bir desen üretir.

Protein ve hücre Etrafının İki Boyutlu Desenli Yüzeyler Oluşturma

Yivli bir mikroakışkan kanaldan geçen iki bitişik sıvı, bir prepolimer çekirdeğinin etrafında bir kılıf oluşturmaya yönlendirilebilir; böylece hem şekil hem de kesit belirlenir. Tiyol tıklama kimyası gibi fotoinitiated polimerizasyon, çekirdek sıvısını önceden belirlenmiş boyut ve şekle sahip bir mikrofiber haline hızlı bir şekilde katılaştırmak için çok uygundur.

Önceden Tasarlanmış Boyut ve Şekle Sahip Polimerik ve Biyohidred Elyafların Mikroakışkan İmalatı

Vaskülarizasyon başarılı doku mühendisliği yaklaşımları anahtarıdır. Bu nedenle, güvenilir teknolojileri doku yapıları vasküler ağların gelişimini değerlendirmek için gereklidir. Burada görselleştirmek ve in vivo damarlanmayı ölçmek için basit ve maliyet-etkin bir yöntem mevcut.

A Tam Cilt Hata Modeli Biyomateryallerin vaskülarizasyonunu değerlendirin<em&gt; In Vivo</em

Öğrenin, sıçanlarda kritik ölçekli femur segmental kusur modeli oluşturmayı ve dış fiksasyonla stabilize etmeyi. Bu yöntem, kemik iyileşme mekanizmalarını ve rejeneratif tedavileri değerlendirmek için kullanılır.

Güvenilir ve tekrarlanabilir kritik ölçekli gelen bir Segmental femur kusur manken özel eksternal fiksatör ile stabilize Sıçanlarda (Video) | JoVE Journal

Güvenilir ve tekrarlanabilir kritik ölçekli gelen bir Segmental femur kusur manken özel eksternal fiksatör ile stabilize Sıçanlarda

Daha fazla video keşfet