Name: Aksonal İnhibisyon ve Rejenerasyon Çalışması için Sıçan Modelinde Yüz Sinir Cerrahisi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-05-05T12:30:00.000+00:00
Duration: 5 s
Description: Öğrenin yüz sinir cerrahisi tekniğini sıçan modelinde kullanarak aksonal inhibisyon ve rejenerasyon süreçlerini incelemeyi. Bu yöntem, sinir hasarı sonrası iyileşme ve tedavi yaklaşımlarını değerlendirmeye olanak tanır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

S.A.A. Amerikan Yüz Plastik ve Rekonstrüktif Cerrahi Akademisi Leslie Bernstein Grants Programı tarafından finanse edilmektedir.

Tüm müdahaleler Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIH) yönergelerine uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Deneysel protokol, uygulamadan önce Michigan Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylandı. On haftalık yetişkin dişi Sprague-Dawley sıçanları kullanıldı.
1. Ameliyat gününden önce
<ol><li>Ameliyat gününden önce uygun bir sterilize cerrahi aletler, analjezik ilaçlar, anestezik ilaçlar ve oksijen stoğu sağlayın. Tam liste için lütfen Malzeme Tablosu'na bakın.</li>
</ol>2. Ameliyat öncesi kurulum
<ol><li>En az iki kişi (cerrah ve bir asistan) için oda da dahil olmak üzere yeterli bir çalışma alanı sağlamak. NOT: Özel bir ameliyat masasına, anestezi makinesi kurulumu için oda ve sterilize edilmiş ve yedek malzemeler için yeterli depolama alanına ihtiyaç vardır.</li>
	<li>İşlemler sırasında kullanılmak üzere bir işletim mikroskobu kalibre edin. Cerrahın, kolların/düğmelerin üzerine sterilbir kapak yerleştirerek mikroskopun tutamaçlarını ve yakınlaştırma/odaklama düğmelerini ayarlama yeteneğine sahip olduğundan emin olun NOT: Kulpların/düğmelerin üzerinde sterilize alüminyum folyo kullandık.</li>
</ol>3. Anestezi ve hazırlık
<ol><li>Anestezi odasına hayvan yerleştirin ve genel anestezi neden 1.8% isofluranve 0.9 L/dk oksijen.<ol>
<li>Spontan solunumun değerlendirilmesi ve bir ayak ucuna hayvanın grimace yanıtını değerlendirerek bilincin değerlendirilmesi yoluyla yeterli bir anestezi düzlemini doğrulayın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Kornea tahrişine veya kuruluğuna karşı korunmak için göz yağlayıcısını iki taraflı olarak uygulayın.</li>
	<li>Operatif site(ler)i jilet veya otomatik makasla tıraş edin.<ol>
<li>Şu anda fare tanımlama için bir kulak etiketi veya kuyruk etiketi/işaretleme yoluyla bir yöntem belirleyin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Postoperatif ağrıya karşı profilaksi için hayvanın sırtı boyunca 0.05 mg/kg buprenorfin deri altı enjeksiyon uyguluyoruz.</li>
</ol>4. Cerrahi yaklaşım ve yaralanma şekilleri
<ol><li>Hayvanı ameliyat masasına aktarın ve gaz akışını nosecone ile devam edin. Vücut ısısını korumak için bir ısınma yastığının hayvanın ve steril alanın altına yerleştirilmesini sağlayın.</li>
	<li>Sıçan için bir boyun rulo olarak kullanmak için sterilize gazlı bez (rulo ve bant ile tutturdu) yerleştirin; bu cerrahi alanın gelişmiş bir maruz kalma sağlayacaktır. Hayvanın uygun konumlandırma verimli sinir tanımlama ve diseksiyon için çok önemli olduğunu unutmayın.</li>
	<li>İşlem için hayvanın yüz derisini hazırlayın. Dezenfeksiyon sağlamak için % 70 etanol ile dönüşümlü olarak cerrahi bölge 3x ovmak için klorheksidin veya iyot bazlı bir solüsyon kullanın.</li>
	<li>İsterseniz cerrahi kesiyi planlayın ve işaretleyin. Postauriküler derinin doğal katlanabilirliğini belirlemek için ipsilateral kulağı ön-posterior yönde manipüle edin.</li>
	<li>Moda bir 4-5 mm kesi postaüri kırışıklık keskin iris makas veya bir numara 15 bıçak kullanarak. Bu, daha sonra yordamda gerektiği gibi genişletilebilir.</li>
	<li>Bluntly ani deri altı fasya ile kesip maruz kalma artırmak için bir mikro-Weitlaner retraktör yerleştirin. Bu alanda küçük kalibreli kan damarları olabileceğini unutmayın; bu en iyi Weitlaner retractor üzerinden üstün veya aşağı geri çekerek kaçınılır.</li>
	<li>Kafatası tabanı boyunca yerleştirilmesi doğru bir alt-üst yönde seyahat olarak ön digastrik kas tanımlayın.<ol>
<li>Ön digastrik karın tendonunu ortaya çıkarmak için kas göbeğine ekleme noktası boyunca hafifçe yayılır. Tendon kafatası tabanına sağlam bir ekleme ile kas yayılan bir filmbeyaz süreç olarak görünür unutmayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Anterior digastrik kas ve tendon belirlenmesinden sonra, daha fazla kas göbek geri çekmek için Weitlaner retractor ayarlayın. Daha sonra maruz kalan bölgenin, fasiyal sinirin ana gövdesinin bulunduğu üç boyutlu alan olduğunu unutmayın. NOT: Bu bölge kafatası tabanı ile üstün ve medial olarak sınırlanır, yanal anterior digastrik kas tarafından, kulak kanalı tarafından posteromedia, ve inferiora boyun yapıları ile, yüzeysel temporal arter de dahil olmak üzere.</li>
	<li>Yeterli maruziyetten sonra, digastrik kas tendonunun altından inferiora hareket ettiği için fasiyal sinirin ana gövdesini tanımlayın, kafatası tabanından stylomastoid foramen çıkar. Sinir inci beyaz bir kordon olarak görünür unutmayın, hayvanın parotis-masseteric fasya kaplı. Aşağıdaki nedenlerden dolayı siniri daha fazla teşhir ederken dikkatli olun.<ol>
<li>Streç aracılı nöropraksi yaralanmasına karşı korumak için agresif diseksiyon veya dik yayılır kaçının.</li>
		<li>Bu cerrahi alana orta kulak florası tanıtmak olabilir gibi kulak kanalı örten ince dokuların ihlal karşı korumak için agresif posteriorly ve medially yönettiği diseksiyon kaçının.</li>
		<li>Geniş medial ve inferiora yönlendirilmiş diseksiyon yoluyla yüzeysel temporal arter zarar kaçının. Bir yaralanmanın canlı, pulsatil kanama ile tespit edilemeyeceğini unutmayın.<ol>
<li>Arter yaralanırsa, bir pamuk uçlu aplikatör veya steril gazlı bez ile forceps ile istemi basınç uygulayın. Hemostatik ajanlar veya sıvı fibrin dolgu yakın yerleştirilebilir. HayvanSıvı stabilizasyonu için% 0.9 steril salin bir deri altı enjeksiyon gerektirebilir unutmayın.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>Stylomastoid foramen çıkışından distal, alt yönde sinir boyunca diseksiyon tarafından distal ana gövde iz.<ol>
<li>Sinir ve dalları tam bir pozlama için izin vermek için orijinal kesi uzatın. Bu postoperatif sialocele neden olabilir gibi parotis bezinin bozulmasını önlemek için özen.</li>
	</ol></li>
	<li>Aşağıdaki gibi istenilen yaralanma desenleri neden.<ol>
<li>Bir ezmek yaralanma için, sıkıca sinir kavramak ve9sıkıştırmak için pürüzsüz yüzeyli kuyumcu forseps kullanın. Uygun bir ezilme yaralanması sağlamak için 30 s'lik bir süre boyunca sinirlere sabit ve tekrarlanabilir basınç uygulayın.</li>
		<li>Basit bir transeksiyon için, ince dişli forseps ile sinir örten fasya kavramak, ya da hemen epineurium, ve temiz tek bir kesim ile istenilen noktada sinir transect keskin mikroskasors kullanın. Forceps ile sinir üzerinde aşırı çekiş önlemek için dikkat edin.</li>
		<li>Bir sinir boşluğu modeli için, basit trasezaryen yaralanma benzer bir yöntem kullanarak istenilen sinir boşluğu oluşturmak. Hayvanlar arasında yaralanma deseninin benzerliklerini sağlamak için, pamuk uçlu aplikatör kesiminin sterilize edilmiş şaftını istenilen sinir boşluğu na kadar intraoperatif olarak kullanın.</li>
	</ol></li>
</ol>5. Yara kapatma
<ol><li>Yarayı steril salin le sulayın ve steril gazlı bezle kurulayın.</li>
	<li>Emilebilir dikişler ile basit, subcuticular bir şekilde cilt kenarları yaklaşık, ya da yara kapanması için kabul edilebilir deri tutkal veya yara klipleri kullanın. Bir cilt kenarının derinden yüzeysel bir ısırık alarak gömülü bir dikiş yerleştirin ve daha sonra karşı deri kenarının bir sonraki yüzeysel-derin ısırık.</li>
</ol>6. Postoperatif iyileşme
<ol><li>Postoperatif ağrı kontrolü için steroid olmayan anti-inflamatuar analjezik (0.05 mg/kg buprenorfin ve 0.5 mg /kg Karprofen gibi) deri altı enjeksiyon uygulayın. Enjeksiyonu hayvanın sırtına yerleştirin.</li>
	<li>Anestezik ajanın yönetimini durdurun ve hayvanın 1 dakika daha oksijen solumasını bekleyin.</li>
	<li>Bir ısıtılmış hayvan yerleştirin (Bir ısı lambası ile), aseptik kafes kazara yutma önlemek için yatak malzemesi yoksun. Hayvan genellikle 1-2 dakika içinde iyileşme belirtileri göstereceğini unutmayın ve şaşırmış görünebilir, arka bacak fonksiyonu gecikmiş bir kurtarma ile.</li>
	<li>Hayvanları uygun barınma ünitesinde kafeslerine geri döndürün ve ağrıya karşı profilaksinin devamını sağlamak için ameliyat sonrası günde #1 ameliyat sonrası analjezikler uygulayın.</li>
	<li>Yetersiz beslenme, kornea tahrişi veya cerrahi bölge enfeksiyonu belirtilerini değerlendirmek için hayvanları günde 2 x izleyin ve uygun cerrahi günlükleri koruyun.<ol>
<li>Önemli bir kilo kaybı varsa deri altı bir şekilde% 0.9 steril salin uygulayın.</li>
		<li>Hayvanın göz kırpma refleksi yeniden kurulana kadar her gün yağlayıcı göz merhemi uygulayın.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Sıçan fasiyal sinir yaralanması modeli cerrahi erişilebilirlik nedeniyle nörotrofik faktörlerin değerlendirilmesi için en çok yönlü sistem olarak ortaya çıkmıştır, dallanma paterni, ve fizyolojik önemi27,29,33,34,35,36. Video gösterimi ve transgenik hayvan verilerinin uygulanmasının birleşimi sinir rejeneratif fenomenlerinin ...

Baş ve boyun bölgesindeki kranial sinir hasarı konjenital, enfeksiyöz, idiyopatik, iyatrojenik, travmatik, nörolojik, onkolojik veya sistemik etiyolojilere sekonder olabilir1. Kranial sinir VII, ya da fasiyal sinir, yaygın olarak etkilenir. Her yıl 100.000 kişi başına 20-30 etkiler gibi yüz sinir disfonksiyonu insidansı önemli olabilir2. Fasiyal sinirin ana motor dalları temporal, zigomatik, bukkal, marjinal mandibular ve servikal dalları; ilgili dala bağlı olarak, sonuçları oral yetersizlik veya salya, kornea kuruluğu, ptozis, dysarthria veya yüzasimetrisi ikinciderecede görme alanı tıkanıklığı içerebilir 2,3. Uzun süreli morbidite sinkinezis fenomeni içerir, ya da bir yüz kas grubunun istemsiz hareketi, ayrı bir yüz kas grubunun gönüllü kasılması girişimi ile. Oküler-oral sinkinez, fasiyal sinir hasarının bir sekeli olarak anormal rejenerasyonenin en sık görülenidir ve fonksiyonel bozulmaya, utanca, özsaygının azalmasına ve yaşam kalitesinin düşük olmasınedeniyle3. Tek tek dalların yaralanması, seçici olarak tehlikeye atılabilen işlevleri belirler.
Fasiyal sinir hasarının klinik tedavisi iyi standart değildir ve sonuçları iyileştirmek için daha fazla araştırmaya ihtiyaç duymaktadır. Steroidler akut fasiyal sinir şişmesi hafifletmek, Botox sinkinetik hareketleri temporizing için yararlı ise; ama, uygulayıcının armamentarium birincil rekonstrüktif seçenekleri sinir onarımı, ikame veya reanimasyon3,4,,5,6yoluyla cerrahi müdahale içerir. Sürdürülen yüz sinir hasarının türüne bağlı olarak, fasiyal sinir cerrahı bir dizi seçenek kullanabilir. Basit traneksiyon için, sinir reanastomoz yararlı ise kablo-greft onarım ı daha iyi bir sinir defekti için uygundur; fonksiyonun restorasyonu için, cerrah statik veya dinamik yüz reanimasyon prosedürleri ni seçebilir. Fasiyal sinir yaralanması ve sonraki onarım birçok durumda, deneyimli fasiyal sinir cerrahlarının elinde bile, en iyi sonuç hala kalıcı fasiyal asimetri ve fonksiyonel uzlaşma sonuçları7.
Bu suboptimal sonuçlar fasiyal sinir rejenerasyonu üzerinde kapsamlı bir araştırma teşvik var. İlgi geniş konular mükemmelleştirme ve sinir onarım teknikleri yenilik, çeşitli sinir rejenerasyon faktörlerinin etkisini belirleme ve synkinezin uzun vadeli sonucu mücadeleye yardımcı olmak için özel sinir inhibitörleri potansiyelini değerlendirmek8,9,10,11. In vitro modeller pro-büyüme veya inhibitör faktörlerin bazı özelliklerini değerlendirmek için kullanılabilir iken, bu konuda gerçek çeviri araştırma en iyi translatable hayvan modelleri ile gerçekleştirilir.
Araştırmacılar, koyun ve küçük hayvan modelleri gibi fareler12,13gibi hem büyük hayvanlar, kullandık gibi hangi hayvan modeli kullanmak için karar zor olabilir. Büyük hayvan modelleri ideal anatomik görselleştirme sunarken, kullanımları özel ekipman ve personel için hazır veya kolay bir şekilde bulunamaz. Ayrıca, bir çalışmayı etki göstermek için güç vermek son derece maliyetli olabilir ve potansiyel olarak birçok bilimsel merkezin uygulanabilir kapsamı içinde olmayabilir. Böylece, küçük hayvan modeli en sık kullanılmaktadır. Fare modeli yüz sinir cerrahisi ile ilgili sonuçların bir dizi değerlendirmek için kullanılabilir; ancak, sinirin sınırlı uzunluğu bilim adamı yeteneğini belirli desenleri modellemek için kısıtlayabilir, büyük boşlukyaralanma gibi14.
Böylece, sıçan minör prototip ilerlemiş hangi bilim adamı yenilikçi cerrahi prosedürleri gerçekleştirmek veya inhibitör veya pro-büyüme faktörleri kullanmak ve sonuç parametreleri geniş bir yelpazede etkisini değerlendirmek için beygir modeli olarak ortaya çıkmıştır. Sıçan yüz sinir anatomisi tahmin edilebilir ve kolayca tekrarlanabilir bir şekilde yaklaştı. Onun büyük ölçekli, fare modeli ile karşılaştırıldığında, cerrahi kusurları geniş bir yelpazede modelleme sağlar, basit trazeve için 5 mm boşluklar arasında değişen15,16. Bu ayrıca faktör topikal yerleşimi de dahil olmak üzere kusur yerinde karmaşık müdahalelerin uygulanması için izin verir, faktör intranöral enjeksiyonlar, ve izogreftveya köprülerin yerleşimi17,18,,19,20,21,22,23.
Sıçan uysal doğası, güvenilir anatomisi, ve etkili sinir rejenerasyon için eğilimi yaralanma söz konusu cerrahi desenlere yanıt olarak birçok sonuç önlemlerin toplanması için izin verir24. Sıçan modeli ile, fasiyal sinir bilim adamı immünohistokimya yoluyla yaralanma, sinir ve kas histolojik sonuçları elektrofizyolojik yanıtları değerlendirmek mümkün, vibrizal ped in izleme hareketi ile fonksiyonel sonuçlar ve göz kapanması değerlendirme, ve mikro- ve makroskopik değişiklikler floresan veya konfokal mikroskopi yoluyla, diğerleri arasında11,22,23,25,26,27,28,29. Böylece, aşağıdaki protokol sıçan fasiyal sinir ve indüklenebilir yaralanma desenleri için cerrahi bir yaklaşım ana hatlarıyla olacaktır.

<table><tbody><tr><td>% 1.8 izofluran</td><td>VetOne</td><td>13985-030-40</td><td></td></tr><tr><td>11-0 naylon mikrosütürler</td><td>AROSuture</td><td>TK-117038</td><td></td></tr><tr><td>4-0 monokril sütür</td><td>VWR</td><td>75982-084</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfin SR</td><td>ZooPharm</td><td>MIF 900-006</td><td></td></tr><tr><td>Carprofen</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>MFCD00079028</td><td></td></tr><tr><td>Klorheksidin</td><td>VWR</td><td></td><td></td>IC19135805</tr><tr><td>Kuyumcu forseps</td><td>VWR</td><td>21909-458</td><td></td></tr><tr><td>Mikro Weitlaner ekartör</td><td>VWR</td><td>82030-146</td><td></td></tr><tr><td>Mikro makas</td><td>VWR</td><td>100492-348</td><td></td></tr><tr><td>Mini tenotomi makası</td><td>VWR</td><td>89023-522</td><td></td></tr><tr><td>15 numara neşter bıçağı</td><td>VWR</td><td>102097-834</td><td></td></tr><tr><td>Ameliyat mikroskobu</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Petrolatum göz jeli</td><td>Pharmaderm</td><td>B002LUWBEK</td><td></td></tr><tr><td>Steril su</td><td>VWR</td><td>89125-834</td><td></td></tr><tr><td>Doku yapıştırıcısı</td><td>Vetbond, 3M</td><td>NC9259532</td><td></td></tr><tr><td>Bupivakain</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td> ARS2000B su iletken ped Aqua Rölyef Sistemi <td>Lokal analjezik olarak kullanın</td></tr></tbody></table>

aksonal İnhibisyon ve rejenerasyon Çalışması için sıçan modelinde yüz sinir cerrahisi

Facial Nerve Surgery in the Rat Model to Study Axonal Inhibition and Regeneration

Bu protokol, sıçan fasiyal sinir yaralanması modelinde aksonal rejenerasyon ve inhibisyonu incelemek için tutarlı ve tekrarlanabilir yöntemleri açıklamaktadır. Fasiyal sinir, intrakranial segmentinden ekstratemporal seyrine kadar tüm uzunluğu boyunca manipüle edilebilir. Rejeneratif özelliklerin deneysel çalışması için kullanılan sinir yaralanması üç birincil türü vardır: sinir ezmek, traproksiyon, ve sinir boşluğu. Olası müdahaleler in aralığı geniştir, sinir cerrahi manipülasyon dahil, nöroaktif reaktifler veya hücrelerin teslim, ve ya merkezi veya son organ manipülasyonları. Sinir rejenerasyonu için bu modelin avantajları basitlik, tekrarlanabilirlik, türler arası tutarlılık, sıçan güvenilir sağkalım oranları ve murine modellerine göre artan anatomik boyutu içerir. Onun sınırlamaları fare modeli ve sıçan üstün rejeneratif yeteneği karşı daha sınırlı bir genetik manipülasyon içerir, fasiyal sinir bilim adamı dikkatle iyileşme için zaman noktaları değerlendirmek gerekir ve yüksek hayvanlar ve insan çalışmaları sonuçları çevirmek için olup olmadığını. Fasiyal sinir hasarı için sıçan modeli sinir rejenerasyonu yorumlanması ve karşılaştırılması için fonksiyonel, elektrofizyolojik ve histomorfometrik parametrelersağlar. Bu nedenle insan hastalarda yüz sinir hasarı yıkıcı sonuçları nın anlaşılması ve tedavisi doğru büyük bir potansiyele sahiptir.

İlk cerrahi işlemden sonra iki ana sonuç ölçümü vardır: canlı hayvanda seri ölçümler ve hayvanın kurban edilmesini gerektiren ölçümler. Seri ölçümlere örnek olarak elektrofizyolojik tahliller, bileşik kas eylem potansiyeli ölçümü gibi30, lazer destekli veya videografi yoluyla yüz kas hareketinindeğerlendirmeleri 9anlamına gelir , hatta floresan transgenik hayvanlarda yüz sinirinin yeniden büyüme tekrarlayan canlı görüntüleme<sup class="xref"...

Bu protokol, sıçan modelinde yüz sinir cerrahisi için tekrarlanabilir bir yaklaşım açıklar, yaralanma çeşitli indükleyici desenlerin açıklamaları da dahil olmak üzere.

Aksonal İnhibisyon ve Rejenerasyon Çalışması için Sıçan Modelinde Yüz Sinir Cerrahisi

This protocol describes consistent and reproducible methods to study axonal regeneration and inhibition in a rat facial nerve injury model. The facial ...

Bu protokol bilim adamları yüz sinir yaralanması ve yöntemleri birçok farklı parametreler arasında rejenerasyon geliştirmek için sonuçları çalışma yardımcı olabilir. Bu tekniğin ana avantajı sıçan anatomisi yüz sinir kolay erişim sağlar, ve büyük ölçekli bize ilgili yaralanma desenleri tüm çalışma sağlar. Bu tekniğin uygulamaları yüz sinir yaralanması sonrası hastaların rehabilitasyonuna doğru uzanır.Rejeneratif potansiyel olarak sıçan tekrarlanabilir ve özlü deneysel bir model sağlar. Ve bu yöntem yüz sinir pazesisi veya felç için cerrahi ve tıbbi tedaviler içine fikir sağlayabilir. Ve diğer baş ve boyun modellerine ya da diğer çevresel sinirlere aktarılabilir.Her iki el kullanarak mikroskop altında çalışma zor olabilir. Ben bir yüz sinir diseksiyonu denemeden önce mikroskop altında dürbün sürümünü kullanarak pratik öneririz. Parmak sıkışmasına yanıt eksikliğini doğruladıktan sonra, farenin gözlerine merhem uygulayın ve cerrahi bölgeyi tıraş edin.Fare tanımlama için bir yöntem belirleyin ve boynun altına gazlı bez yerleştirin. Üç alternatif klorheksidin ve% 70 etanol scrubs ile maruz kalan cilt dezenfekte ve bir stereo mikroskop altında sıçan yerleştirin. Postauriküler derinin doğal katlanabilirliğini belirlemek için ipsilateral kulağı ön-posterior yönde manipüle edin.Postauriküler kırışıklıkta 2-3 milimetrelik bir kesi yapmak için 15 numaralı bıçağı kullanın. Kesilerin planlanması ve yerleştirilmesi, yara boyutunu en aza indirirken yüz sinirinin güvenilir bir şekilde tanımlanmasını sağlamak için en kritik adımlardır. Bluntly ani deri altı fasya ile diseksiyon ve doku maruziyetini artırmak için bir mikro-Weitlaner retraktör yerleştirin.Kafatası tabanı boyunca yerleştirilmesi doğru bir alt-üst yönde seyahat olarak ön digastrik kas tanımlayın. Anterior digastrik karın tendonunu ortaya çıkarmak için kas ekleme noktası boyunca kas göbeği boyunca hafifçe yayılır. Tendon kafatası tabanına sağlam bir ekleme ile kas yayılan bir filmbeyaz süreç olarak görünecektir.Anterior digastrik kas ve tendon belirlenmesinden sonra, daha fazla kas göbek geri çekmek için Weitlaner retractor ayarlayın. Maruz kalan bölge, fasiyal sinirin ana gövdesinin yattığı üç boyutlu uzaydır. Stylomastoid foramen çıkışından distal bir alt yönde sinir boyunca diseksiyon.Bir ezilme yaralanması paterni ikna etmek için, uygun bir ezilme yaralanması sağlamak için 30 saniye boyunca sabit ve tekrarlanabilir basınç uygulayarak sinirsıkıca kavramak ve sıkıştırmak için düzgün yüzeyli kuyumcu forseps kullanın. Basit bir transeksiyon için, ince dişli forseps ile sinir örten hemen epineurium kavramak ve temiz tek bir kesim ile istenilen noktada sinir transect için keskin mikroskasorskullanın. Bir sinir boşluğu modeli için, hayvanlar arasında benzer yaralanma desenleri sağlamak ve az önce gösterildiği gibi sinir transect sağlamak için istenilen sinir boşluğu uzunluğu ayarlamak için ayarlanabilir kaliperler kullanın.Deneysel yaralanma teslim edildikten sonra, steril salin ile yara sulama ve steril gazlı bez ile doku kuru. kurumsal kurallara göre deri kesisini kapatmadan önce. Burada, bir ezilme yaralanması ile fasiyal sinirin ana gövdesinin canlı görüntülenmesi ile erişkin transgenik THY1-GFP sıçanDa ilk PES'in dal noktasına kadar yaklaşık 2-3 milimetre distal gösterilmektedir.Bir, iki, üç ve dört haftalık floresan dönüşlerinin değerlendirilmesi bu transgenik hayvanlarda sinir rejenerasyonunun izlenmesi için bir belirteç olarak kullanılabilir. Histomorfometrik analiz, aksonal çapın nicelleştirilmesine, enkaz miktarına, sinir lifine, sinir yüzdesinin ve yoğunluk ölçümlerinin ölçülmesine olanak tanıyan marjinal mandibular bölünmenin kesitsel görüntülerini elde etmek için kullanılabilir. Fasiyal siniri tanımlarken ilgili anatomik sinirlerin görünür olmasını sağlamak için retraktörün yerleşimini sıklıkla ayarlamak önemlidir.Bu prosedürü takiben ilgili sinirler ve kaslar diğer deney gruplarına göre rejenerasyon derecesini değerlendirmek için immünohistokimyasal analiz için hasat edilebilir. Gelişiminitaki bu teknik, yüz sinir hasarı sonrası fonksiyonel sonuçları inceleyen araştırmacıların önünü açmıştır. Özellikle, nasıl sinkinezis fenomeni etkisi.

facial-nerve-surgery-rat-model-to-study-axonal-inhibition

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Bu video, anestezi hazırlığından fasiyal sinir yaralanması indüksiyonuna kadar adımları detaylandıran bir sıçan modelinde cerrahi protokolü göstermektedir. Bu protokol, tıbbi araştırmalarda sinir rejenerasyonu ve cerrahi teknikleri incelemek için yararlıdır.

Bir sıçan modelinde fasiyal sinir yaralanmasına neden olmak

Bu video, infraorbital siniri bağlayarak bir sıçan modelinde orofasiyal nöropatik ağrının indüksiyonunu göstermektedir. Bu, sinir hasarı ve iltihaplanma ile sonuçlanır, anormal ağrı sinyaline neden olur ve orofasiyal ağrı testini incelemek için kullanılabilecek kronik ağrı durumlarını taklit eder.

İnfraorbital Sinir Ligasyonları Yoluyla Bir Sıçan Modelinde Orofasiyal Nöropatik Ağrının İndüklenmesi

Kaynak: Deseure, K., et al. Trigeminal Nöropatik Ağrıyı İncelemek İçin Sıçanın İnfraorbital Sinirinin (IoN-CCI) Kronik Daralma Yaralanması. J. Vis. Uzm.  (2015). Bu video, infraorbital siniri daraltarak bir sıçan modelinde nöropatik ağrıyı indüklemek için bir yöntemi göstermektedir. İnfraorbital siniri açığa çıkardıktan ve onu daraltmak için ligatürleri bağladıktan sonra, yaralanma bölgesindeki bağışıklık tepkisi, ağrı sinyallerini beyne ileten komşu nöronların uyarılabilirliğini arttırır.

İnfraorbital Sinirin Daralması ile Bir Sıçan Modelinde Nöropatik Ağrının İndüksiyonu

Kaynak: Olmstead, D. N., et al., Farelerde Fasiyal Sinir Aksotomi: Yaralanmaya Motonöron Tepkisini İncelemek İçin Bir Model. J. Vis. Uzm. (2015). Bu video, bir farede fasiyal sinir ezilme prosedürünü göstermektedir, burada önemli yer işaretlerinden künt diseksiyon, stilomastoid foramende fasiyal sinir gövdesini ortaya çıkarır. Forseps daha sonra sinir gövdesini sıkıştırmak, aksonal hasara neden olmak ve nöronal sinyal iletimini bozmak için kullanılır.

Bir fare modelinde fasiyal sinir üzerinde ezilme aksotomisi yapılması

Kaynak: Cheah, M.,  et al. Duyusal akson rejenerasyonu için bir model olarak dorsal kök ganglion enjeksiyonu ve dorsal kök ezilme yaralanması. J. Vis. Uzm. (2017). Bu video, dorsal kök gangliyonlarına (DRG'ler) viral bir süspansiyon enjekte etmek ve anestezi uygulanmış bir sıçanda dorsal kök ezmesi yoluyla kontrollü bir aksonal yaralanmayı indüklemek için adım adım bir prosedürü göstermektedir. Protokol, DRG'lerin açığa çıkarılmasını, aksonal rejenerasyonu kolaylaştırmak için büyümeyi teşvik...

Dorsal Kök Ganglion Enjeksiyonu ve Dorsal Kök Ezilme Yaralanması Kullanılarak Bir Sıçanda Duyusal Akson Rejenerasyonunun Modellenmesi

Koku ensheathing hücreleri (OECS), birincil koku nöronların büyümesine izin vermek nöral tepe hücreleri bulunmaktadır. Bu özel özellik, hücresel nakli için de kullanılabilir. Burada bir gırtlak sinir yaralanması modelinde OECS kullanımına göre hücre transplantasyonu bir model mevcut.

Periferik Sinir Hasarı Sonrası Fonksiyonel Kurtarma Değerlendirmesinde Koku Ensheathing Hücre Nakli

Farede fasiyal sinir üzerinde bir kesi veya ezme aksotomisinin nasıl yapılacağını detaylandıran bir cerrahi protokol sunuyoruz. Fasiyal sinir aksotomisi, sinir yaralanmasına fizyolojik yanıtı incelemek ve terapötik teknikleri test etmek için kullanılabilir.

Farelerde Yüz Sinir Aksotomi: Sakatlık Motonöron Yanıtı Eğitim için Bir Model

Bu protokol, duyusal akson rejenerasyonunu incelemek için bir model olarak yetişkin bir sıçanda viral vektör ile bir dorsal kök ganglion (DRG) enjeksiyonunun ve eşzamanlı bir dorsal kök ezilme yaralanmasının kullanımını sunar. Bu model, duyusal akson rejenerasyonunu teşvik etmek için gen terapisinin kullanımını araştırmak için uygundur.

Sırt kök ganglion Enjeksiyon ve Dorsal Kök Duyusal Axon Rejenerasyon Modeli Olarak Ezilme Yaralanması

Burada, kraniyal levator auris longus (LAL) kasının in vivo elektroporasyonu ve denervasyonunu birleştiren bir protokol sunuyoruz. Bu prosedür, kas kaynaklı proteinlerin nöromüsküler sinapsın rejenerasyonundaki potansiyel rolünün incelenmesini sağlar.

Kranial Levator Auris Longus İskelet Kasının Kombine İn Vivo Elektroporasyonu ve Kısa Süreli Reinnervasyonu

Bu protokol, retrograd retina ganglion hücreleri ve sonradan retina ganglion hücre hayatta kalma ve apoptosis analiz etmek için bir optik sinir ezilme yaralanması yapmak nasıl etiket gösterir. Bu glokom da dahil olmak üzere optik nöropati farklı türleri için deneysel bir hastalık modeli.

Retina Ganglion Hücre Survival Eğitim Bir Optik Sinir Crush Yaralanma murin Modeli

Öğrenin yüz sinir cerrahisi tekniğini sıçan modelinde kullanarak aksonal inhibisyon ve rejenerasyon süreçlerini incelemeyi. Bu yöntem, sinir hasarı sonrası iyileşme ve tedavi yaklaşımlarını değerlendirmeye olanak tanır.

Aksonal İnhibisyon ve Rejenerasyon Çalışması için Sıçan Modelinde Yüz Sinir Cerrahisi

Daha fazla video keşfet