Name: Bitki etkileşimleri döndürülmüş çekirdeği kullanan ortak mikorizal ağlar üzerinden incelenmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-03-26T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 17 s
Description: Öğrenin, döndürülmüş çekirdek yöntemiyle ortak mikorizal ağların bitki etkileşimlerini nasıl incelediğini. Bu teknik, mikorizal mantarların bitki büyümesi ve ekolojik dinamikler üzerindeki rolünü açıklığa kavuşturur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

İki adsız yorumcular öneriler için teşekkür etmek istiyorum. Biz de kim tencere, microcosms, inşa ile yardımcı oldu ve kapsayıcılar oluklu ve kim korumak ve deneyler hasat ile yardımcı olması çok sayıda lisans teşekkür ederiz. Biz de North Central üniversite Ashley Wojciechowski gibi başlangıç fonlar (için JW) ve mevcut tesisler için bir Kuzey Merkezi üniversite Richter bu yöntemleri kullanarak bir deneme destekleme hibe almak için teşekkür ederiz. Bu eser parçası bir Ulusal Bilim Vakfı Doktora tez gelişme hibe tarafından (DEB-1401677) finanse edildi.

1. inşaat ve montaj dönebilen çekirdek
<ol><li>(Daha sonra 'konteyner'; denir ticari borulu fide kapları değiştirmek Tablo malzeme) 19 mm x 48 cm uzunlukta açıklıklar geniş için.<ol>
<li>Böylece delikleri yaklaşık 1 cm ayrı kullanılarak kalıpçı 19 mm delik olan bir merkez, pilot twist tatbikat gördüm üst üste bir kapsayıcı (12,1 cm uzunluk x 2.5 cm çapında) taraf iki delik kesme. Kapsayıcı bir ördünüz matkap basın karşı tutun ve konteyner içinde sondaj sırasında yerde tutmak yardımcı olmak için uygun bir kısa dübel ile bir adrestir. Bir konteyner ile esnek plastik çatlama engellemek için kullanın.</li>
		<li>(Sert plastik kullanımı için bir kılıç-testere) arasındaki makas, Tel makası veya teneke snips delikli plastik kalan ince parça kesip bir yapmak için açılış 2 cm genişliğinde ve 5 cm uzunluğunda uzamış.</li>
		<li>Adımları yineleyin 1.1.1-1.1.2 kapsayıcı karşı tarafta.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Naylon mesh ve/veya hidrofobik membran (şekil 1A) ile yuva kapağı.<ol>
<li>Naylon mesh ile 40 mikron gözenekleri 9.5 cm x 8,5 cm parçalar halinde kesin. Kapsayıcılar olarak çok sayıda parçalar kesin.</li>
		<li>Yüksek mukavemetli, endüstriyel sıcak tutkal kullanarak kumaş hafif bazı örtüşme ile her iki açıklıklar kapsayacak şekilde konteynırları üzerine naylon mesh dışarıdan tutkal.</li>
		<li>Su hareketi önlenmesi gerekirse böyle gibi suda çözünen besin veya kararlı izotop kullanırken, naylon mesh katmanı sağlayan bir hidrofobik membran31,32 (Malzemeler tablo) ile kapak oldum mantar hif Pass, ama sadece su buharı ve değil sıvı su hareketi.</li>
		<li>Sıcak tutkal açıklıklar çevresinde ambalaj üzerinde ve naylon mesh uzun kenarları boyunca yerleştirin. Konteyner parmak yanan önlemek için kumaş üzerine rulo. Tutkal nerede mesh örtüşme kenarları kumaş kenarı boyunca uzanan bir katman ekleyin. Kenar sıkıca kapatın biraz karton üzerine basın. Rulo her zaman sürekli bir yönde örtüşen kafes kenarına olması olası substrat kazmak için itti değil o tencere veya microcosms bitmiş kapsayıcılara dönüşü aynı yönde olacak.</li>
		<li>Tutkal soğuduktan sonra serbest kenarları ve elektrikçi teyp gibi esnek bir bant kullanarak kopyalama önlemek için kumaş kapsayıcısının üst ve alt ucunun teyp.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Adım 1.2.5 olduğu gibi aynı bant kullanarak, her kapsayıcı kapsayıcı kök büyüme pot/evren geri kalanını içine önlemek için konik sonu (alt ucunda delik) tarafında küçük delikler kapak.</li>
	<li>Drenaj sağlarken toprak kaybını önlemek için bir cam mermer her kapsayıcı dibine yerleştirin.</li>
	<li>Herhangi bir potansiyel bir CMN bitkiler arasında forma için içermeyen bir denetim tedavisi için katı, değiştirilmemiş kaplar (şekil 1A) kullanın.</li>
</ol>2. tencere veya kaplar konik ucunun sığacak şekilde microcosms Meclisi
<ol><li>Kapsayıcılar içinde sabit bir konuma dik duruyorum ve uygun drenaj var, bir pot alt bakacak şekilde çevirin emin olmak için. Sabre-testere kullanarak desteği için küçük bir dudak bırakarak potun alt etrafında kesmek.</li>
	<li>Polistren köpük hazırlanması<ol>
<li>Polistren köpük, 36 mm kalınlığında, bir şerit testere ile bir daire kesme jig kullanarak pota dibinde olarak aynı çapta yara bere.</li>
		<li>Matkap delik delik matkap basın ve 19 mm kullanarak köpük içine (orta twist tatbikat) konteyner yerleştirilir desende gördüm.</li>
		<li>Hedef tesisi deneme için komşu çevresindeki bireyler için eşit aralıklı delik merkezi bir delik. 15,5 cm çapında bir pot için yer altı 12 mm 11 cm çapı Daire (şekil 1B) çevresi ayrı delikler açtım.</li>
		<li>Delik hexagonally veya bir evren deney (şekil 1 c, D) kare bir dizi yatıyordu.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. kapsayıcılar ve tencere toprak ve kum karışımları ile doldurma
<ol><li>İstenen toprak karışımı seçin ve mantar alan-toplanan KULÜPLER veya pot kültürlü inoculum aynı şekilde karıştırma tarafından toprağa kök parçaları (1-2 cm uzunluk) kıyılmış ekleyin toprak ile iyice. İstenen toprak ile kısır bir silis kum veya cam boncuk mineral besin bitkiler için kullanılabilir konsantrasyonu azaltmak için karıştırın.</li>
	<li>Delinmiş köpük veya evren alt dolu kaplar getirin ve kısır bir substrat ile interstisyel boşluğu doldurmak.</li>
	<li>Konteyner küçük alanlarda doldurma yardımcı olmak için bir huni kullanarak besin bakımından fakir silis kum karışımı ile arasında interstisyel boşluğu doldurmak. Yeterli drenaj sağlamak ve toprak dokusuna taklit etmek için orta partikül büyüklüğü kum, 6-20 derece gibi 30-65 sınıfta bir Çimento Mikser gibi küçük partikül büyüklüğü kum ile karıştırın.</li>
</ol>4. CMNs tencere/microcosms boyunca kurulması
<ol><li>Tedavi öncesi 'hemşire' tertibatları istenen türün onlar kapsayıcılar arasında yaymak ve CMNs kurmak böylece AM mantarlar sürdürebilmek için her konteyner içine tesisleri.</li>
	<li>Ne zaman tüm kapsayıcılara fidan kurduk, yalnızca bir tek tek her kap içinde kalır bu yüzden Kaldır kırpma tarafından vuruyor.</li>
	<li>Bitki büyüme ve CMN kuruluş için 2-3 ay izin.</li>
</ol>5. kurulması deneysel bitkiler ve tedaviler
<ol><li>Deneysel bitkiler tohum veya kaplara dikim tarafından ekmek. Onların sürgünler kırpma tarafından ön arıtma hemşire bitkiler kaldırmadan önce tüm kapsayıcılara germinated fide elde edene kadar tohum, bekleyin. Dikim, tüm ön arıtma tesisleri istenmeyen rekabetçi etkileri önlemek için deneysel fidan dikim önce küçük.</li>
	<li>CMN tedaviler ya da değil (sağlam CMNs) deney süresince taşınmış veya döndürülmek kaplar fiziksel olarak değiştirilmiş konteynerler (kesik CMNs; arasında uzanan hif koparmaya haftalık bırakarak kurmak Şekil 1A). Ne zaman CMNs kesilmesinin, istemeden heliotropic bitkiler için özellikle yerüstü etkileşim değiştiren önlemek için bir tam dönüş yoluyla her kapsayıcı döndürün.</li>
	<li>Ağır interstisyel substrat ve kapsayıcılar kenarlarında arasında temas yeniden kurmak için döndürme hemen sonra bütün tencere veya microcosms su.</li>
</ol>6. CMNs genelinde mineral besin hareket izleme
<ol><li>Komşu bitkileri döller KNO3 ve NH4Cl 15N % 0.5 ile zenginleştirilmiş.</li>
	<li>Hedef birey eşit konsantrasyon 14N gübre ile döllemek.</li>
</ol>7. izleme ve bakım deney
<ol><li>Düzenli olarak (en azından aylık adlı) tencere veya microcosms konumlarını yeniden deneme boyunca rastgele.</li>
	<li>Haftalık büyüme, yükseklik gibi ölçmüyor veya en uzun çünkü bitkilerin kök bağlı olmadan önce hasat önemli yavaşlatmak büyüme başladığında izlemek için uzunluğu (için otlar) yaprak.</li>
</ol>8. hasat deneme
<ol><li>Tüm yerüstü doku küçük ve bireysel bitkiler kendi tedavi, pot veya evren ve konumunu tanımlamak etiketli zarf yerleştirin.</li>
	<li>Yerüstü dokuları 60 ° c sabit ağırlık ile kuru. Her bitki doku kuru ağırlığının ölçmek.</li>
	<li>Toprak kaplar ayıklanması ve kökleri hasat önce kurumasını sağlar.</li>
	<li>İnce kadar kök sistemlerden mümkün olduğunca toprak ve su veya su 250 Mikron gözenek boyutu bir elek üzerinde nazik akışı altında bir tavada yıkar gibi fırça.</li>
	<li>Kökleri kurumasına ve kök sisteminin tamamını tartmak izin.</li>
	<li>Kök sistemi gelişigüzel klip ve kök parçaları % 50 etanol içinde saklayın. Onlar33lekeli sonra bu parçaları için kılavuz çizgisi kavşak yöntemi34kullanarak kök kolonizasyon miktar kullanın.</li>
	<li>Kalan kök sistemi yeniden tartmak ve kuru ağırlık değerlendirilmesi için 60 ° C'de kurumaya etiketli kağıt zarf içinde saklayın. Aşağıdaki denklemi tüm kök sistemi ağırlığı hesaplamak için kullanın:</li>
</ol><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/59338/59338eq1v2.jpg" style="opacity: 0.9;">
9. mineral besin ve kararlı izotop analizi
<ol><li>Fidan biyokütle tarafından "desil" veya 10 gruplar, "octiles" veya 8 gruplar, "Dörttebirlikler" ya da dört gruba, vb sırası-onları ağırlığa göre eğer doku miktarı çok düşük mineral besin belirlemek sindirim için minimum gereksinimleri için sipariş sonra grup konsantrasyonları.</li>
	<li>Yaprak örnekleri için mineral besin ve kararlı izotop analizi (Tablo reçetesi) sözleşmeli bir laboratuara gönderin.<ol>
<li>İzotopik bolluk geleneksel ifadesini kullanarak açıklar: <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/59338/59338eq2v2.jpg"> Burada R 15N gösterir /14N oranına bir örnek veya standart atmosferik N. olan</li>
		<li>Sigara-modified, bir denetim için arka plan 15N oranları aşağıdaki kütle denge denklemi 15N bir hedef bitki tarafından alınan miktarı miktarının kopmuş olarak hizmet için katı konteyner tedavi veya kullanmak sağlam CMN tedaviler: <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/59338/59338eq3v2.jpg" style="opacity: 0.9;"> nerede δ15N izotopik bolluk hedefleri, komşular ve hedef bitkiler yok CMN tedavisinde ve x (ondalık kesir olarak) yüzde azot gösterir etiket eklendiği komşu kapsayıcılar hedef bitkiden elde. Değerlere δ15Nkomşular her hedef bitkinin composited komşuları için elde edilir.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Remy, W., Taylor, T. N., Hass, H., Kerp, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Four+hundred-million-year-old+vesicular+arbuscular+mycorrhizae%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Four hundred-million-year-old vesicular arbuscular mycorrhizae.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 91 (25), 11841-11843 (1994).</li>
<li>Smith, S. E., Read, D. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSmith%2C+SE+%22Mycorrhizal+Symbiosis%22">Mycorrhizal Symbiosis</a>. , 3 edn, Academic Press. (2008).</li>
<li>Giovannetti, M., Avio, L., Sbrana, C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGiovannetti%2C+M+%22Mycorrhizal+Networks%22">Mycorrhizal Networks</a>. , Springer. 41-67 (2015).</li>
<li>Giovannetti, M., Sbrana, C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGiovannetti%2C+M+%22Cell+Biology+of+Plant+and+Fungal+Tip+Growth.+Vol.+328.+Nato+Science+Series%2C+Sub-Series+I%3A+Life+and+Behavioural+Sciences%22">Cell Biology of Plant and Fungal Tip Growth. Vol. 328. Nato Science Series, Sub-Series I: Life and Behavioural Sciences</a>. Cresti, A., Heath, M., Geitmann, I. B. , 221-231 (2001).</li>
<li>Giovannetti, M., Sbrana, C., Avio, L., Strani, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patterns+of+below-ground+plant+interconnections+established+by+means+of+arbuscular+mycorrhizal+networks%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytologist%22%5BJournal%5D)">Patterns of below-ground plant interconnections established by means of arbuscular mycorrhizal networks.</a> New Phytologist. 164 (1), 175-181 (2004).</li>
<li>Avio, L., Pellegrino, E., Bonari, E., Giovannetti, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+diversity+of+arbuscular+mycorrhizal+fungal+isolates+in+relation+to+extraradical+mycelial+networks%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytologist%22%5BJournal%5D)">Functional diversity of arbuscular mycorrhizal fungal isolates in relation to extraradical mycelial networks.</a> New Phytologist. 172 (2), 347-357 (2006).</li>
<li>Giovannetti, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((At+the+root+of+the+wood+wide+web%3A+self+recognition+and+nonself+incompatibility+in+mycorrhizal+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Signaling+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">At the root of the wood wide web: self recognition and nonself incompatibility in mycorrhizal networks.</a> Plant Signaling & Behavior. 1 (1), 1-5 (2006).</li>
<li>Miller, R., Kling, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+integration+and+scale+in+the+arbuscular+mycorrhizal+symbiosis%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+and+Soil%22%5BJournal%5D)">The importance of integration and scale in the arbuscular mycorrhizal symbiosis.</a> Plant and Soil. 226 (2), 295-309 (2000).</li>
<li>Miller, R., Jastrow, J., Reinhardt, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((External+hyphal+production+of+vesicular-arbuscular+mycorrhizal+fungi+in+pasture+and+tallgrass+prairie+communities%5BTitle%5D)+AND+%22Oecologia%22%5BJournal%5D)">External hyphal production of vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi in pasture and tallgrass prairie communities.</a> Oecologia. 103 (1), 17-23 (1995).</li>
<li>Weremijewicz, J., Sternberg, L. dS. L. O., Janos, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Common+mycorrhizal+networks+amplify+competition+by+preferential+mineral+nutrient+allocation+to+large+host+plants%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytologist%22%5BJournal%5D)">Common mycorrhizal networks amplify competition by preferential mineral nutrient allocation to large host plants.</a> New Phytologist. , (2016).</li>
<li>Fellbaum, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fungal+nutrient+allocation+in+common+mycorrhizal+networks+is+regulated+by+the+carbon+source+strength+of+individual+host+plants%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytologist%22%5BJournal%5D)">Fungal nutrient allocation in common mycorrhizal networks is regulated by the carbon source strength of individual host plants.</a> New Phytologist. 203 (2), 646-656 (2014).</li>
<li>Lekberg, Y., Hammer, E. C., Olsson, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plants+as+resource+islands+and+storage+units--adopting+the+mycocentric+view+of+arbuscular+mycorrhizal+networks%5BTitle%5D)+AND+%22FEMS+Microbiol+Ecol%22%5BJournal%5D)">Plants as resource islands and storage units--adopting the mycocentric view of arbuscular mycorrhizal networks.</a> FEMS Microbiol Ecol. 74 (2), 336-345 (2010).</li>
<li>Jakobsen, I., Hammer, E. C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aJakobsen%2C+I+%22Mycorrhizal+Networks%22">Mycorrhizal Networks</a>. , Springer. 91-131 (2015).</li>
<li>Jakobsen, I., Rosendahl, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carbon+flow+into+soil+and+external+hyphae+from+roots+of+mycorrhizal+cucumber+plants%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytologist%22%5BJournal%5D)">Carbon flow into soil and external hyphae from roots of mycorrhizal cucumber plants.</a> New Phytologist. 115 (1), 77-83 (1990).</li>
<li>Kiers, E. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reciprocal+rewards+stabilize+cooperation+in+the+mycorrhizal+symbiosis%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Reciprocal rewards stabilize cooperation in the mycorrhizal symbiosis.</a> Science. 333 (6044), 880-882 (2011).</li>
<li>Hartnett, D. C., Hetrick, B. A. D., Wilson, G. W. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mycorrhizal+influence+on+intra-+and+interspecific+neighbour+interactions+among+co-occuring+prairie+grasses%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ecology%22%5BJournal%5D)">Mycorrhizal influence on intra- and interspecific neighbour interactions among co-occuring prairie grasses.</a> Journal of Ecology. 81 (4), 787-795 (1993).</li>
<li>Hetrick, B. A. D., Wilson, G. W. T., Todd, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+responses+of+C3+and+C4+grasses+to+mycorrhizal+symbiosis%2C+phosphorus+fertilization%2C+and+soil+microorganisms%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Botany%22%5BJournal%5D)">Differential responses of C3 and C4 grasses to mycorrhizal symbiosis, phosphorus fertilization, and soil microorganisms.</a> Canadian Journal of Botany. 68 (3), 461-467 (1990).</li>
<li>Johnson, D., Leake, J. R., Read, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+in-growth+core+system+enables+functional+studies+of+grassland+mycorrhizal+mycelial+networks%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytologist%22%5BJournal%5D)">Novel in-growth core system enables functional studies of grassland mycorrhizal mycelial networks.</a> New Phytologist. 152 (3), 555-562 (2001).</li>
<li>Leake, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Networks+of+power+and+influence%3A+the+role+of+mycorrhizal+mycelium+in+controlling+plant+communities+and+agroecosystem+functioning%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Botany-Revue+Canadienne+De+Botanique%22%5BJournal%5D)">Networks of power and influence: the role of mycorrhizal mycelium in controlling plant communities and agroecosystem functioning.</a> Canadian Journal of Botany-Revue Canadienne De Botanique. 82 (8), 1016-1045 (2004).</li>
<li>Babikova, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Underground+signals+carried+through+common+mycelial+networks+warn+neighbouring+plants+of+aphid+attack%5BTitle%5D)+AND+%22Ecology+Letters%22%5BJournal%5D)">Underground signals carried through common mycelial networks warn neighbouring plants of aphid attack.</a> Ecology Letters. 16 (7), 835-843 (2013).</li>
<li>Schüepp, H., Miller, D. D., Bodmer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+technique+for+monitoring+hyphal+growth+of+vesicular-arbuscular+mycorrhizal+fungi+through+soil%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+British+Mycological+Society%22%5BJournal%5D)">A new technique for monitoring hyphal growth of vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi through soil.</a> Transactions of the British Mycological Society. 89 (4), 429-435 (1987).</li>
<li>Miller, D. D., Bodmer, M., Schüepp, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spread+of+endomycorrhizal+colonization+and+effects+on+growth+of+apple+seedlings%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytologist%22%5BJournal%5D)">Spread of endomycorrhizal colonization and effects on growth of apple seedlings.</a> New Phytologist. 111 (1), 51-59 (1989).</li>
<li>Jakobsen, I., Gazey, C., Abbott, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphate+transport+by+communities+of+arbuscular+mycorrhizal+fungi+in+intact+soil+cores%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytologist%22%5BJournal%5D)">Phosphate transport by communities of arbuscular mycorrhizal fungi in intact soil cores.</a> New Phytologist. 149 (1), 95-103 (2001).</li>
<li>Johnson, D., Leake, J., Ostle, N., Ineson, P., Read, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+13CO2+pulse%E2%80%90labelling+of+upland+grassland+demonstrates+a+rapid+pathway+of+carbon+flux+from+arbuscular+mycorrhizal+mycelia+to+the+soil%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytologist%22%5BJournal%5D)">In situ 13CO2 pulse‐labelling of upland grassland demonstrates a rapid pathway of carbon flux from arbuscular mycorrhizal mycelia to the soil.</a> New Phytologist. 153 (2), 327-334 (2002).</li>
<li>Johnson, D., Leake, J., Read, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transfer+of+recent+photosynthate+into+mycorrhizal+mycelium+of+an+upland+grassland%3A+short-term+respiratory+losses+and+accumulation%5BTitle%5D)+AND+%22of+14C.+Soil+Biology+and+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Transfer of recent photosynthate into mycorrhizal mycelium of an upland grassland: short-term respiratory losses and accumulation.</a> of 14C. Soil Biology and Biochemistry. 34 (10), 1521-1524 (2002).</li>
<li>Walder, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mycorrhizal+networks%3A+Common+goods+of+plants+shared+under+unequal+terms+of+trade%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiology%22%5BJournal%5D)">Mycorrhizal networks: Common goods of plants shared under unequal terms of trade.</a> Plant Physiology. 159 (June 2012), 789-797 (2012).</li>
<li>Song, Y. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interplant+communication+of+tomato+tlants+through+underground+common+mycorrhizal+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+One%22%5BJournal%5D)">Interplant communication of tomato tlants through underground common mycorrhizal networks.</a> Plos One. 5 (10), e13324(2010).</li>
<li>Merrild, M. P., Ambus, P., Rosendahl, S., Jakobsen, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Common+arbuscular+mycorrhizal+networks+amplify+competition+for+phosphorus+between+seedlings+and+established+plants%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytologist%22%5BJournal%5D)">Common arbuscular mycorrhizal networks amplify competition for phosphorus between seedlings and established plants.</a> New Phytologist. 200 (1), 229-240 (2013).</li>
<li>Janos, D. P., Scott, J., Aristizábal, C., Bowman, D. M. J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arbuscular-mycorrhizal+networks+inhibit+Eucalyptus+tetrodonta+seedlings+in+rain+forest+soil+microcosms%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+One%22%5BJournal%5D)">Arbuscular-mycorrhizal networks inhibit Eucalyptus tetrodonta seedlings in rain forest soil microcosms.</a> Plos One. 8 (2), e57716(2013).</li>
<li>Wyss Lozano Hoyos, T. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWyss+Lozano+Hoyos%2C+T+%22Pinus+elliottii+var.+densa+Seedling+Performance+Reflects+Ectomycorrhizas%2C+Soil+Nutrient+Availability+and+Root+Competition%22">Pinus elliottii var. densa Seedling Performance Reflects Ectomycorrhizas, Soil Nutrient Availability and Root Competition</a>. , (2010).</li>
<li>Mäder, P., Vierheilig, H., Alt, M., Wiemken, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Boundries+between+soil+compartments+formed+by+microporous+hydrophobic+membranes+%28GORE-TEX%29+can+be+crossed+by+vesicular-arbuscular+mycorrhizal+fungi+but+not+by+ions+in+the+soil+solution%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+and+Soil%22%5BJournal%5D)">Boundries between soil compartments formed by microporous hydrophobic membranes (GORE-TEX) can be crossed by vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi but not by ions in the soil solution.</a> Plant and Soil. 152, 201-206 (1993).</li>
<li>Mäder, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transport+of+15N+from+a+soil+compartment+separated+by+a+polytetrafluoroethylene+membrane+to+plant+roots+via+the+hyphae+of+arbuscular+mycorrhizal+fungi%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytologist%22%5BJournal%5D)">Transport of 15N from a soil compartment separated by a polytetrafluoroethylene membrane to plant roots via the hyphae of arbuscular mycorrhizal fungi.</a> New Phytologist. 146 (1), 155-161 (2000).</li>
<li>Brundrett, M., Bougher, N., Dell, B., Grove, T. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBrundrett%2C+M+%22Working+with+Mycorrhizas+in+Forestry+and+Agriculture%22">Working with Mycorrhizas in Forestry and Agriculture</a>. , (1996).</li>
<li>McGonigle, T. P., Miller, M. H., Evans, D. G., Fairchild, G. L., Swan, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+method+which+gives+an+objective-measure+of+colonization+of+roots+by+vesicular+arbuscular+mycorrhizal+fungi%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytologist%22%5BJournal%5D)">A new method which gives an objective-measure of colonization of roots by vesicular arbuscular mycorrhizal fungi.</a> New Phytologist. 115 (3), 495-501 (1990).</li>
<li>Weremijewicz, J., Janos, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Common+mycorrhizal+networks+amplify+size+inequality+in+Andropogon+gerardii+monocultures%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytologist%22%5BJournal%5D)">Common mycorrhizal networks amplify size inequality in Andropogon gerardii monocultures.</a> New Phytologist. 198 (1), 203-213 (2013).</li>
<li>Weremijewicz, J., O’Reilly, L. dS. L., Janos, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arbuscular+common+mycorrhizal+networks+mediate+intra-and+interspecific+interactions+of+two+prairie+grasses%5BTitle%5D)+AND+%22Mycorrhiza%22%5BJournal%5D)">Arbuscular common mycorrhizal networks mediate intra-and interspecific interactions of two prairie grasses.</a> Mycorrhiza. , 1-13 (2017).</li>
<li>Weiner, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Asymmetric+competition+in+plant+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Tree%22%5BJournal%5D)">Asymmetric competition in plant populations.</a> Tree. 5 (11), 360-364 (1990).</li>
<li>Damgaard, C., Weiner, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Describing+inequality+in+plant+size+or+fecundity%5BTitle%5D)+AND+%22Ecology%22%5BJournal%5D)">Describing inequality in plant size or fecundity.</a> Ecology. 81 (4), 1139-1142 (2000).</li>
<li>Johnson, C. R., Joiner, J. N., Crews, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+N%2C+K%2C+and+Mg+on+growth+and+leaf+nutrient+composition+of+3+container+grown+woody+ornamentals+inoculated+with+mycorrhizae%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+for+Horticultural+Science%22%5BJournal%5D)">Effects of N, K, and Mg on growth and leaf nutrient composition of 3 container grown woody ornamentals inoculated with mycorrhizae.</a> Journal of the American Society for Horticultural Science. 105 (2), 286-288 (1980).</li>
<li>Estrada-Luna, A. A., Davies, F. T., Egilla, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mycorrhizal+fungi+enhancement+of+growth+and+gas+exchange+of+micropropagated+guava+plantlets+%28Psidium+guajava+L.%29+during+ex+vitro+acclimatization+and+plant+establishment%5BTitle%5D)+AND+%22Mycorrhiza%22%5BJournal%5D)">Mycorrhizal fungi enhancement of growth and gas exchange of micropropagated guava plantlets (Psidium guajava L.) during ex vitro acclimatization and plant establishment.</a> Mycorrhiza. 10 (1), 1-8 (2000).</li>
<li>Hurlbert, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pseudoreplication+and+the+design+of+ecological+field+experiments%5BTitle%5D)+AND+%22Ecological+Monographs%22%5BJournal%5D)">Pseudoreplication and the design of ecological field experiments.</a> Ecological Monographs. 54 (2), 187-211 (1984).</li>
<li>Argüello, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Options+of+partners+improve+carbon+for+phosphorus+trade+in+the+arbuscular+mycorrhizal+mutualism%5BTitle%5D)+AND+%22Ecology+Letters%22%5BJournal%5D)">Options of partners improve carbon for phosphorus trade in the arbuscular mycorrhizal mutualism.</a> Ecology Letters. 19 (6), 648-656 (2016).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Bizim sonuçları bizim döndürülmüş çekirdek yöntemi keskin CMNs rol belowground bitki etkileşimleri odaklanabilirsiniz teyit. Değiştirilmiş CMN etkileri algılama yeteneğini etkilemek için potansiyel varsa, birkaç kritik adım protokolünde, ancak, vardır. İnterstisyel alanı çevreleyen kapsayıcılar bir besin bakımından fakir orta ile doldurmak için önemlidir. Guava ağaç fidan ile bizim başarısız, döndürülmüş çekirdekli hedef tesisi deneme içinde olmasına rağmen hedef büyüme komşular, herhangi bir sayıda huzurunda belirgin bi...

Arbuscular (AM) mikorizal mantarlar destekli bitkiler toprak kolonizasyon 460 milyon yıl önce1 ve bugün, hayati mineral besin ile büyüme için-mek şartıyla onları çoğu bitkiler2, her yerde simbiont olduklarını. AM mantar ince, iş parçacığı gibi hif yem için mineral besin besin tüketme bölgeleri sık sık karşılaşıyor ve kök bitkiler bir "ortak mikorizal Network" komşu sistemleri kolonileşmesi kökleri, yakınındaki ötesinde (CMN). Ortak mikorizal ağlar da formu mantar germlings birleştirmek kurulan ağlar3veya hif OLDUĞUMDA sigorta (conspecific hif4,5,6,7ile anastomose). Bu extraradical hif toprak ölçüde extraradical hif oluşturan toplam toprak mikrobiyal biyokütle çayır ve Mera toprak8 ve rahatsız edilmeden otlak9 111 m·cm-3 için germe % %20 30 ile çok büyüktür .
Ortak mikorizal ağları birbirine komşu bitkiler10,11,12,13arasında mineral besin bölümü. Bitkiler kadar alabilirsiniz onların fosfor % 80'i ve onların toplam karbon mantar için sabit % 20 kadar sağlarken kendi azot gereksinimlerden AM Mantarlar, % 25'i iade14. Son tüp bebek kök organ kültür çalışmaları CMNs tercihen mantarlar11,12çoğu karbon sağlamak ana kökleri ile mineral besin değişimi buldu. Ayrıca, farklı tür AM mantar onların kalitesinde bazı mantarlar için daha az karbon diğerlerinden daha fazla fosfor alışverişi ile simbiyotik ortak olarak15farklı olabilir. Kök organ kültürler dikkatle kontrollü ortamlarda ve doğrudan hyphal bağlantıları gözlemlemek yeteneği mevcut çünkü AM sembiyoz eğitim için faydalı modeller olmakla birlikte, onlar etkileyen fotosentez sürgünler dahil değildir fotosentez, terleme ve diurnal değişiklikler gibi önemli fizyolojik süreçler, de oluşturan karbon ve mineral besin lavabolar.
Doğada, fidan büyük olasılıkla zaten kurulmuş CMNs dokunun. Yakın zamana kadar ancak, bilim adamları sadece AM mantarlar bitki besleme üzerinde etkisini tarafından büyüyen bitkiler ve olmayan AM Mantarlar, genellikle tek bir tür AM mantar ile inceledik. Bu eser arbuscular mycorrhizas anlayışımızı çok bilgilendirici olmasına rağmen bu yöntem CMNs birbirine bağlı ana bitkiler arasındaki etkileşimler olabilir potansiyel olarak önemli rol gözden kaçırdığı. Özellikle, son derece AM mantar büyüme için bağlı bitkiler en az muhtemelen bizim yorum etkileşimlerin 'denetimi olarak' için bir temel kullanıldığında AM mantar-aracılı semptomlarıdır AM mantarlar16,17, olmadan etkileşim başvuru.
Soruşturma CMNs rolü bitki etkileşimleri ve nüfus yapılanması için döndürülmüş çekirdekli yaklaşım öneriyorum. Bütün bitkiler üyelik CMNs ve tüm bitkiler AM mantarlar ile yetiştirilir kurulan çünkü bizim yaklaşım AM sembiyoz doğada bileşenlerini taklit eder. Kök etkileşimleri kaldırarak, metodolojimiz özellikle AM mantarlar tarafından da CMNs içinde mineral besin hareketleri izleme sırasında aracılı etkileşimleri üzerinde duruluyor. Yaklaşımımız döndürülmüş çekirdek alanında ve sera içinde AM gerçekçi işleyişini anlamak için kullandığı önceki çalışmalarına oluşturur.
Döndürülmüş çekirdek yöntemi literatürde extraradical hif18,19,20,21işlemek için bir yöntem olarak kurulmuştur ve amacına bağlı olarak birkaç kısımdan üzerinde olmuştur son yirmi yılda. Başlangıçta, örgü çanta veya engelleri hif içinde-büyüme sağlayan arbuscular mikorizal hif toprak22,23yılında miktarını ölçmek için bölmeleri kök-ücretsiz sağlamak için kullanılmıştır. O zaman, sert su boruları veya Yuvaları hif ama değil kökleri, naylon mesh edilebilen kaplı boru plastik içine toprak silindirik çekirdek geliştirilmiştir. Bunlar kolayca extraradical mycelia18,24,25bozmaya döndürülmüş. Döndürülmüş çekirdek bitkiler arasında yerleştirildi ve toprak hyphal uzunlukları gram başına toprak18, bitki-Alerjik çekirdek gelen extraradical mycelia24veya fosfor alımı için 13C Cerayanlar quantified18yaşında. Başka bir tür çekirdeği kullanımı AM mantarlar sterilizasyon veya bunların her ikisi de toprak organik dolaylı etkileri var mantar ilaçları, uygulama alternatif olarak sık sık hyphal bozulma ile kökleri kolonizasyon azaltmak için alanındaki içlerinde bitkiler büyümek için yapıldı. Madde ve diğer mikropların18.
Hyphal kafes bariyer yaklaşım besin bölümleme araştırmak ve etkileşimleri arasında CMNs, ama dikdörtgen microcosms yerine döndürülmüş çekirdekli bitki için kullanılmıştır. Walder ve ark.26 AM mantarlar Rhizophagus, birinin CMNs izotoplar kullanarak karbon alışverişi için mineral besin izini sürerek Linum usitatissimum (keten) ve sorgum bicolor (sorgum) arasındaki etkileşimler araştırıldı irregularis veya Funneliformis mosseae26. Onların çalışma oluşan bitki bölmeleri tarafından ayrılmış microcosms engelleri, hyphal bölmeleri için mikorizal hif yalnızca erişilebilir ve radyoaktif ve kararlı izotop yer alan etiketli hyphal bölmeleri kafes. Denetimleri, çalışma tedaviler mikorizal mantarlar olmadan kullanılır. Şarkı ve ark.27 benzer bir yaklaşım bu bitki bir bitki tarafından bir mantar patojen bulaştığında F. mosseae kurulan CMNs arasında sadece sinyalleri taşımış olabilir bulmak için kullanılır. Ayrıca, benzer şekilde Walder ve ark.26, Merrild vd.28 bireysel bölmeleri tarafından ayrılmış bitkilerde büyüdü CMNs tarafından büyük bir Cucumis bağlantılı Solanum lycopersicum (domates) fide tesisi performansını araştırmak için kafes sativus bir bol miktarda karbon kaynağı temsil (salatalık) bitki. Onlar Ayrıca mikorizal mantarlar olmadan tedavileri CMNs28kesilmesinin yerine kullanılır. İkinci, ilgili bir denemede karbon fosfor değişimi için 32s. Microcosms hyphal kafes engelleri ile Etiketlenmiş kafes torbaları kullanılarak incelenmiş ve bir tedavi olarak kesilmesinin CMN kim rekabetçi araştırıldı Janos vd.29tarafından kullanılan Fidan okaliptüs tetrodonta ova ağaç türlerinin ve nakli yağmur ormanı ağacının Litsea glutinosaarasındaki etkileşimler. Bu çalışmada, Janos vd.29 fidan katmanları mesh hyphal bağlantıları29kırmak için birbirlerine karşı sürgülü birkaç santimetre içeren bölmeler kaldırdı.
Döndürülmüş çekirdek yöntemi evrimi son adımında tencere veya microcosms20,30içinde çekirdek içinde bitkiler büyümek için olmuştur. Wyss30 döndürülmüş çekirdek verici veya 'hemşire' AM ana bitki, Tamarindus indicave ectomycorrhizal nasıl extraradical miselyum yayılırken extraradical AM miselyum Pinus elliottii fidan kolonize Eğer tespit etmek için kullanılan Mantarlar fide performansı etkiler. Büyük ticari borulu fide kapları (Tablo reçetesi) microcosms içinde her iki sağlam plastik (CMNs) olduğunu veya oluklu ve hidrofobik bir membran ile kaplı. Oluklu fide kapları ya da değil döndürülmüş (sağlam CMNs) olduğunu veya boyutları Babikova ve ark.20 tarafından CMNs ile arasında Vicia sinyal belowground araştırmak için kullanılan farklı mesh bariyer ile kurulan CMNs. döndürülmüş çekirdek koparmaya döndürülmüş FABA (fasulye) bitkiler. Onların çalışmada, 30 cm Çap mesocosms içinde bir merkez donör bitki kökleri ve hif (hiçbir engel) veya yalnızca bir 40 mikron ağ kurulan CMNs birbirine. Merkez bitkiler kafes içine çekirdek dönüşü ile komşu bitkiler ile etkileşimleri üzerinden kesilmiş veya CMNs çekirdek kapsayan iyi bir 0.5 mikron kafes tarafından engelledi.
Burada, CMNs etkisi doğrudan bitki etkileşimleri kararlı izotop izleme ile birlikte incelemek için önceden döndürülmüş çekirdekli yaklaşımlar yönlerini birleştirir bir yöntem mevcut. Bizim yöntem ilgi merkezi bitki komşu bitkiler tarafından çevrili bir 'hedef bitki' yaklaşım kullanır. Tesisleri oluklu ve naylon serigrafi mesh, hidrofobik membran ile kaplı dönebilen fide kapsayıcılar içinde yetiştirilen ya da sağlam plastik olmayan değişiklik vardır. Ortak mikorizal ağlar haftada bir kez kopmuş veya olduğu gibi devam etti ve 15N kararlı izotop hareket Merkezi hedef bitki için komşularının döndürülmüş çekirdek gelen azot iz. Bitki boyutu mineral besin ve kararlı izotop alımı ile karşılaştırarak, biz hangi bitki parası veya CMNs ana bitkiler arasındaki etkileşimler zarar değerlendirmek.

<table><tbody><tr><td>Ticari boru şeklindeki fidan kabı (el yazmasında 'kaplar' olarak adlandırılır)</td><td>Stuewe and Sons, Inc</td><td>Ray Leach Cone-tainer & trade;</td><td>RLC3U</td></tr> Serisi<tr><td>Kurs cam boncuk</td><td>Endüstriyel Tedarik A.Ş.</td><td>12/20 elek</td><td>Boyut # 1</td></tr><tr><td>Kurs silika kumu</td><td>Florida Silika Kumu</td><td>6/20 50 lb torba</td><td>Yok</td></tr><tr><td>İnce cam boncuklar</td><td>Siyah Güzellik</td><td>Siyah Güzellik FINE Kırılmış Cam Aşındırıcı (50 lbs)</td><td>BB-Cam-İnce</td></tr><tr><td>Hidrofobik membran</td><td>Gore-tex</td><td>Yok</td><td></td></tr><tr><td>Büyük ticari boru şeklindeki fide</td><td>kapları Stuewe and Sons, Inc.</td><td>Deepot ve ticaret;</td><td>D16L</td></tr><tr><td>Orta silika kumu</td><td>Florida Silika Kumu</td><td>30/65 50 lb torba</td><td>Yok</td></tr><tr><td>Naylon örgü</td><td>Tüp Lite Company, Inc.</td><td>Serigraf</td><td>LE7-380-34d PW YEL 60/62 SEFAR LE PECAP POLYESTER</td></tr><tr><td>Toprak ve yaprak besin analiz tesisi</td><td>Kansas Eyalet Üniversitesi Toprak Test Laboratuvarı</td><td>Yok</td><td>Yok</td></tr><tr><td>Kararlı izotop çekirdek tesisi</td><td>Miami Üniversitesi</td><td>Yok Yok</td><td></td></tr></tbody></table>

bitki etkileşimleri döndürülmüş çekirdeği kullanan ortak mikorizal ağlar üzerinden incelenmesi

Investigation of Plant Interactions Across Common Mycorrhizal Networks Using Rotated Cores

Arbuscular (AM) mikorizal mantarlar bitki mineral besin alımını ve büyüme etkiler, bu nedenle, onlar bitki etkileşimleri etkileme potansiyeline sahip. Onların etkisi gücünü sonuçta ortak mikorizal ağ (CMN) içinde bireyler arasında bağlantı kurmak için kökleri yakın besin tüketme bölgeleri yaymak extraradical mycelia bulunur. Çoğu deneyler, ancak, AM mantarlar bitki etkileşimleri rol mikorizal Mantarlar, CMNs rolü açıkça adrese başarısız bir yöntem olmadan karşı ile bitkiler büyüyen tarafından araştırdı. Burada, CMNs bitki etkileşimleri rolünü araştırmak için yöneten bir yöntem öneriyorum. Bizim yöntem bir naylon mesh ve/veya kat oluklu açıklıklar, 15N gübre ve besin bakımından fakir interstisyel kum hidrofobik malzeme ile konik dipleri ile değiştirilmiş konteynerler kullanır. CMNs ya yaptı tarafından kapları döndürme kopmuş veya tarafından katı bir bariyer oluşturan engelledi etkileşen bireyler arasındaki sağlam. Cihazla ilgili izlenimlerimizi kapsayıcılar dönen CMNs bozabilir ve CMNs arasında bitki etkileşimleri üzerindeki etkileri önlemek için yeterli olduğunu göstermektedir. Yaklaşımımız avantajlı çünkü doğanın, önceden kurulmuş CMNs ve a maiyet-in çeşitli faydalar sağlayabilir AM mantar kullanımı dokunarak fidan gibi yönlerini taklit eder. Deneyimiz bitkiler fide aşamasında soruşturma için sınırlı olmasına rağmen bitki etkileşimleri CMNs arasında bu nedenle işleyişi hakkında biyolojik soruluk CMNs ekosistemleri içinde araştırmak için uygulanabilen bizim yaklaşım kullanarak tespit edilebilir.

Nasıl CMNs besin bölümleme yoluyla bitki performans etkisi belirlemek için Andropogon gerardii Vitman, bir hedef bitki denemede 6 eşit aralıklı komşularıyla ve bozulmamış, kesik, bir baskın çayır çimen ya da yok CMNs büyüdü. Biz kesilmesinin veya CMNs engelleyerek hedefleri yerüstü Kuru Ağırlık (Resim 2), azalmış olduğu gibi CMNs bitki büyüme terfi düşündüren bulundu. Kesik CMNs ve önlemek CMNs bitkilerle yanıt özellikle benzer şekilde kendi tedavile...

Toplumları büyük olasılıkla içinde birçok bitki arbuscular mikorizal (AM) mantarlar tarafından birbirine bağlanır, ancak onlar tarafından bitki etkileşimlerin arabuluculuk öncelikle mycorrhizas olmadan karşı ile bitkiler büyüyen tarafından araştırıldı. Biz onların sonuçları bitki etkileşimleri için araştırmaya mikorizal bitkiler arasında ortak mikorizal ağları yönetmek için bir yöntem mevcut.

Bitki etkileşimleri döndürülmüş çekirdeği kullanan ortak mikorizal ağlar üzerinden incelenmesi

Arbuscular mycorrhizal (AM) fungi influence plant mineral nutrient uptake and growth, hence, they have the potential to influence plant interactions. The ...

Doğadaki bitkilerin çoğu muhtemelen mikordehizal mantarlar denilen simbiyotik kök yaşayan mantarlar ile birbirine bağlıdır. Bu yöntem, ortak mikordes ağlarının bitki etkileşimlerini ve sonraki ekolojik sonuçları nasıl etkilediğini açıkça inceler. Bu yöntemle, mantarların dışlanmasının aksine, tüm bitkilerin mantarlar tarafından kolonize edilmesine izin verirken, yaygın micorrhizal ağların rolünü açıkça inceleyebiliriz, bu da kötü büyüyen bitkilerle sonuçlanır.Esnek plastik ile ticari borulu fide kapları değiştirmeye başlamak için, bir matkap basın kullanın ve matkap pres üzerinde bir çit karşı konteyner tutun, ve sondaj sırasında yerinde tutmaya yardımcı olmak için konteyner içine sığar kısa bir dübel ile durdurmak var. Daha sonra, biri diğerinin üzerinde, kabın kenarlarında iki delik açın, böylece delikler birbirinden yaklaşık bir santimetre uzakta dır. Yaklaşık iki santimetre genişliğinde ve beş santimetre uzunluğunda bir uzun açıklık yapmak için delikler arasında kalan ince plastik parçası kesin.Kabın karşı tarafındaki bu uzatılmış açıklıkları kesmeyi tekrarlayın. Naylon örgü ile yuvaları kapsayacak şekilde, konteyner ler gibi 8,5 santimetre adet olarak çok 9,5 santimetre içine 40 mikrometre gözenek örgü kesti. Daha sonra, yüksek mukavemetli endüstriyel sıcak tutkal kullanarak, naylon örgü harici her iki açıklıkları kapsayacak şekilde kaplar üzerine, kumaş bazı hafif örtüşme ile bağlayın.Konteyner üzerinde açıklıklar etrafında sıcak tutkal uygulayın ve naylon örgü üzerinde uzun kenarları boyunca, ve naylon örgü üzerine konteyner rulo, ve hidrofobik membran, kullanıldığında, parmaklarınızı yanan önlemek için. Örgü kenarlarının çakıştığı kumaş kenarı boyunca bir tutkal tabakası ekleyin ve sıkıca mühürlemek için kenarı bazı kartonüzerine bastırın. Tutkal soğuduktan sonra, gevşek kenarları ve yırtılmayı önlemek için kumaşın üst ve alt uçlarını konteynere takmak için esnek bant kullanın.Aynı bandı kullanarak, tencerenin geri kalanına kabın kök büyümesini önlemek için her kabın konik ucunun kenarlarındaki küçük delikleri kapatın. Drenaj sağlarken toprak kaybını önlemek için her kabın altına bir cam mermer yerleştirin ve daha sonra el yazması açıklandığı gibi tencere monte. Bitkiler arasında cmn oluşturma potansiyeli içermeyen bir kontrol tedavisi için katı, değiştirilmemiş kaplar kullanın.1,2 santimetre uzunluğundaki doğranmış kök parçalarını toprakla iyice karıştırarak toprağa mantar inoculum ekleyin. Bitkileriçin mevcut mineral besin konsantrasyonunu azaltmak için bir kısır silika kum veya cam boncuk ile karışık istenilen bir toprak seçin. Doldurulmuş kapları önceden yapılmış delinmiş köpük kaplara yerleştirin.Yeterli drenaj besin-zayıf silika kum karışımı yapmak için, bir çimento karıştırıcı küçük parçacık boyutu kum ile orta parçacık boyutu kum karıştırın. Küçük boşlukları doldurmaya yardımcı olmak için bir huni kullanarak bu karışım ile interstisyel alanı doldurun. Sonra, nakil ön arıtma, ya da sözde hemşire bitkiler, her konteyner içine istenilen türlerin mantarları sürdürmek için, hangi konteynerler arasında yayılır ve ortak micorrhizal ağları kurmak.CMN kurulması için izin vermek için bir sera yaklaşık 24 derece santigrat iki ila üç ay için bitkiler büyümek. Kaplara tohum atarak deneysel bitkileri dikin. Tüm konteynerler onların sürgünler kırpma tarafından, ön işlem hemşire bitkileri çıkarmadan önce fide çimlenmiş olana kadar bekleyin.CMN tedavileri kurmak için, deney süresince bazı kapların hareket ettirmemelerini sağlayın. Modifiye kaplar arasında uzanan hyphae fiziksel olarak kesmek için, bazı konteynerler haftalık döndürmek, bir tam rotasyon yoluyla bunu emin olun, istemeden yer üstü etkileşimleri değiştirmesini önlemek için. Rotasyondan hemen sonra, interstisyel substrat ile konteynerlerin kenarları arasındaki teması yeniden kurmak için tüm kapları ağır sulayın.Ortak micorrhizal ağları kestikten sonra tüm kapları suyla ıslatmak, konteyner ile interstisyel substrat arasındaki teması yeniden kurmak için önemlidir, bu nedenle konteynerlerin istenmeyen aerasyonlarını önler. % 0.5 azot 15 zenginleştirilmiş potasyum nitrat ve amonyum klorür ile komşu bitkilerdöllemek. Eşit konsantrasyonda bir azot 14 gübre ile hedef birey döllemek.Deney boyunca tencerelerin konumlarını en az aylık olarak yeniden rastgele belirleyin. Büyümenin yavaşlamaya başladığını izlemek için en uzun yaprak uzunluğunu ölçerek haftalık büyümeyi ölçün ve bitkiler kök ebağlı hale gelmeden önce hasat yapmayı unutmayın. Hasat için, tüm yerüstü doku klip ve onların tedavi, pot ve pozisyon ile etiketli zarflar içine bireysel bitkiler yerleştirin.Daha sonra 60 santigrat derecede, sürekli ağırlıkta, yer üstü dokuları kurutun ve sonra her bitki dokusunun kuru ağırlığını ölçün. Kapları çıkarmadan ve kökleri hasat etmeden önce toprağın 2-3 gün kurumasını bekleyin. Hasattan sonra, kök sistemlerinden mümkün olduğunca çok toprağı hafifçe fırçalayın.Kök kaybını önlemek için kökleri 250 mikron gözenek boyutunda bir elek üzerinde yıkayın. Köklerin kurumasını sağladıktan sonra, tüm kök sistemini tartın. Kök sistemini rastgele kırpın ve parçaları %50 etanol etanol'e yerleştirin.Kalan kök sistemini yeniden tartın ve kuru ağırlık değerlendirmesi için 60 santigrat derecede kuruması için etiketli bir kağıt zarfta saklayın. Andropogon gerardii Vitman'ı hedef bir bitki deneyinde büyüterken, CMN'lerin kesilmesi veya engellenmesi hedefin yerüstü kuru ağırlığını azaltarak, sağlam CMN'lerin bitki büyümesini teşvik ettiğini düşündürmektedir. Kopmuş CMN'li ve hiçbir CMN'si olmayan bitkiler tedavilerine benzer şekilde yanıt verdi.Bir bireyin büyümesinin yakındaki başka bir bireyin büyümesini baskıladığı rekabet, sağlam CMN tedavisinde tespit edildi, ancak kopmuş veya hiç CMN tedavilerinde değil. Farklı mineral besin yaprağı doku konsantrasyonları ayrıntılı karşılaştırmalar, manganez bitki boyutu sadece konsantrasyonları karşı, olumlu hedef bitki yerüstü kuru ağırlıkları ile ilişkili, tüm tedaviler üzerinde. Hedef bitki dokusu, yaprak dokularında bitki büyüklüğüne karşılık 15 azot olarak değerlendirildi ve sadece komşuların konteynerlerine azot 15 etiketi eklendi.Sağlam CMN'li hedef bitkiler, diğer her iki tedaviye kıyasla daha yüksek azot 15 konsantrasyonuna sahipti. Bozulmamış CMN'ler, kopmuş CMN'lerin tedavisinden azot miktarının güçlü bir şekilde pozitif, önemli ölçüde farklı bir eğimine sahipti, bu da büyük bitkilerin, küçük hedef bireylere göre komşu konteynerlere ulaşan CMN'lerden daha fazla azot elde ettiğini düşündürmektedir. PVC borudan yapılmış döndürülmüş çekirdekler kullanılarak yapılan bir saha deneyinde, boruların ötesindeki radikal dışı miselyumun 13 aylık deney sırasında soapberry'nin büyümesi üzerinde çok az etkisi oldu.Ancak, boruların rotasyonu ile kesilmesi, klorotik bitkiler tarafından önemli ölçüde gösterilen foliar azot, fosfor ve bakır konsantrasyonlarını azalttı. Kumaşın yırtılmalarını önlemek için kabın her bir kabın üzerine yapıştırıldığı yönde ki kapları döndürün ve bitkilerdeki yer üstü değişikliklerini azaltmak için 360 derece döndürün. Bu prosedür, kök kolonizasyonunda radikal dışı miselyumun rolünü ve besin alımı üzerindeki etkisini incelemek için steril toprakla doldurulmuş modifiye PVC borularla sahada kullanılabilir.Bu teknik, yaygın mikordehizal ağları ile bitkilerin karşılaştırılması için izin verir, ağları ile bağlı olmayan mikordehizal bitkiler, yerine mikordeler olmadan küçük bitkiler için, en sık yapılır.

investigation-plant-interactions-across-common-mycorrhizal-networks

Research

JoVE Journal

Environment

Çevre

Tarif edilen hidrofobik kokültivasyon sistemi, metal örgülü elekler ile bozulmamış bitkileri destekler ve bunları bakteriler ile birlikte yetiştirir. Bitki dokuları, bakteriler ve salgılanan moleküller daha sonra aşağı akış analizleri için ayrıca hasat edilebilmekte, aynı anda her iki bitki barınağının ve etkileşen mikropların veya mikrobiyolojilerin moleküler tepkileri araştırılabilmektedir.

Bitki / Mikrop Moleküler Etkileşimlerinin ve Sinyalizasyonunun Eşzamanlı ve Sistematik Analizi için Hidroponik Birlikte Yetiştirme Sistemi

Burada, toprak, rizosferde ve kök endosphere microbiomes amplicon sıra verileri elde etmek için bir protokol açıklayın. Bu bilgiler kompozisyon ve çeşitlilik bitki ilişkili mikrobiyal toplulukların araştırmak için kullanılan ve bitki türlerinin geniş bir kullanım için uygundur.

Kök Microbiome keşfetmek: toprak, rizosferde ve kök Endosphere bakteriyel topluluk verileri ayıklama

Kazı alanından bitki köklerinin yanı sıra endosphere, rizosferde ve toprak içine örnekleri işleme DNA ekstraksiyon ve veri analiz yöntemleri de dahil olmak üzere ayrıntılı olarak açıklanmıştır. Bu kağıt bu teknikleri toprak, endosphere ve rizosferde microbiomes çalışma için kullanmak diğer laboratuvarlar sağlamak için tasarlanmıştır.

Yalıtım ve mikrobiyal topluluklarda toprak, rizosferde ve kökleri çok yıllık çim deneylerde Analizi

Toprak, su ve rizosfer gibi çeşitli ekolojik mikrobiyal toplulukların birlikteliğini değerlendirmek için ağ analizi uygulandı. Burada sunulan, farklı ekolojik ortamlar nedeniyle mikrobiyal topluluklarda oluşabilecek farklı birlikte oluşum ağlarını analiz etmek için WGCNA algoritmasının nasıl kullanılacağına ilişkin bir protokoldür.

Ağırlıklı Korelasyon Ağlarına Dayalı Farklı Habitatlarda Kök Mikrobiyotasının Ayrışması

Bu protokol, bitki köklerini toprak kaynaklı mikroplarla aşılamak için stratejilerin ayrıntılı bir özetini sunar. Verticillium longisporum ve Verticillium dahliae mantarları için örneklendirilen üç farklı kök enfeksiyon sistemi tanımlanmıştır. Potansiyel uygulamalar ve olası aşağı akış analizleri vurgulanır ve her sistem için avantajlar veya dezavantajlar tartışılır.

Bitki Köklerini Toprak Kaynaklı Mikroorganizmalarla Enfekte Etmek için Aşılama Stratejileri

Buradaki protokol, arbusküler mikorizal kolonizasyon paternlerinin değerlendirilmesi için yöntemleri ve iki türün köklerindeki stratejiyi açıklamaktadır: Zea mays ve Festuca rubra. MycoPatt yönteminin kullanılması, parametrelerin hesaplanmasına, mikorizal yapıların dijital verilere dönüştürülmesine ve köklerdeki gerçek konumlarının haritalandırılmasına izin verir.

Festuca rubra ve Zea mays'ın Köklerinde Kolonizasyon Kalıplarını ve Mantar Stratejilerini Keşfetmek İçin Bir Araç Olarak Mikorizal Haritalar

Bu protokol, mikoheterotrofik bitki örneklerinin toplanması, sabitlenmesi ve sürdürülmesi için ayrıntılı prosedürler sağlamayı, mikorizal mantarlarla çimlenmiş bitki dokularında ve tohumlarda mantar kolonizasyonunu incelemek için tarama ve iletim elektron mikroskobu, ışık, konfokal ve floresan mikroskobu gibi farklı mikroskopi tekniklerini uygulamayı amaçlamaktadır.

Mikoheterotrofik Bitki Dokularında Mantar Kolonizasyonunu Yorumlamak ve Tohumların Simbiyotik Çimlenmesi için Mikroskopi Teknikleri

Bu makale, bitki ilişkili endofitik mantarların izolasyonu, izolatların uzun süreli korunması, morfolojik karakterizasyon ve sonraki moleküler tanımlama ve metagenomik analizler için toplam DNA ekstraksiyonu için ayrıntılı ve yeterli protokoller sağlamayı amaçlamaktadır.

Mikoheterotrofik Bitkilerde Endofitik Mantarları Tanımlamak için İzolasyon, Karakterizasyon ve Toplam DNA Ekstraksiyonu

Burada, süper emici polimer bazlı ototrofik sistemlerde arbusküler mikorizal mantarları aşılamak ve gözlemlemek için basit ve ucuz bir tekniği açıklıyoruz.

Süper Emici Polimer Bazlı Ototrofik Sistemlerde Arbusküler Mikorizal Kültürlerin Aşılanması ve Gözlemlenmesi

Bitki patojenleri yerinde, özellikle toprak kaynaklı patojenler, hızlı ve doğru tespiti daha fazla inoculum üretim ve alanında bitki hastalıklarının yayılması önlemek için çok önemli olduğunu. Burada bir taşınabilir gerçek zamanlı PCR algılama sistemi kullanılarak geliştirilen yöntem yerinde tanı alan koşullarında sağlar.

Toprak kaynaklı Phytopathogens bir taşınabilir gerçek zamanlı PCR sistemi kullanarak yerinde moleküler tespiti

Öğrenin, döndürülmüş çekirdek yöntemiyle ortak mikorizal ağların bitki etkileşimlerini nasıl incelediğini. Bu teknik, mikorizal mantarların bitki büyümesi ve ekolojik dinamikler üzerindeki rolünü açıklığa kavuşturur.

Bitki etkileşimleri döndürülmüş çekirdeği kullanan ortak mikorizal ağlar üzerinden incelenmesi

Daha fazla video keşfet