Evaluation of a Universal Nested Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction for the Detection of Lyssaviruses

Yuyang Wang; Weidi Xu; Huancheng Guo; Wenjie Gong; Biao He; Zhongzhong Tu; Changchun Tu; Ye Feng

doi:10.3791/59428

Lyssaviruses tespiti için evrensel Iç Içe Ters transkripsiyon polimeraz zincir reaksiyonu değerle...

JoVE Journal
Genetics

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Genetics

Evaluation of a Universal Nested Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction for the Detection of Lyssaviruses

Lyssaviruses tespiti için evrensel Iç Içe Ters transkripsiyon polimeraz zincir reaksiyonu değerlendirilmesi

Full Text

8,866 Views

08:10 min

May 2, 2019

DOI: 10.3791/59428-v

Yuyang Wang*¹, Weidi Xu*^1,2, Huancheng Guo¹, Wenjie Gong¹, Biao He¹, Zhongzhong Tu¹, Changchun Tu^1,3, Ye Feng¹

¹Key Laboratory of Jilin Province for Zoonosis Prevention and Control, Institute of Military Veterinary Medicine,Academy of Military Medical Sciences, ²Jilin Agricultural University, ³Jiangsu Co-innovation Centre for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Bir Pan-Lyssavirus iç içe Ters transkripsiyon polimeraz zincir reaksiyonu özellikle tüm bilinen lyssaviruses algılamak için geliştirilmiştir. Farklı hayvan türlerinin kuduz beyin örneklerini kullanarak doğrulama Bu yöntemin altın standart floresan antikor testi için bir duyarlılık ve özgüllük eşdeğer olduğunu gösterdi ve rutin kuduz tanısı için kullanılabilir.

İç içe rt-PCR tüm Lyssaviruses tespit etmek için geliştirilmiştir, tüm dahil olmak üzere 16 ICTV onaylı ve iki roman Lyssavirus türleri. Bu yöntemin doğrulanması Çin'de klinik kuduz tanı ve gözetim 10 yıl içinde 9000'den fazla hayvan beyin örnekleri kullanılarak kanıtlanmıştır. İç içe olan RT-PCR sadece taze beyin dokusu örneklerinde değil, aynı zamanda bozulmuş numuneler üzerinde de inandırıcı sonuçlar üretebilir.

Bu yöntemin su baskını, beyin omurilik sıvısı, tükürük ve idrar gibi biyolojik sıvı örneklerini tahsin etmek için kullanılabilir, böylece bu yöntem ültimatom tanılarına uygulanabilir. PCR taşıma kontaminasyonunu en aza indirmek için, negatif ve pozitif kontroller hazırlamak önemlidir Adımlar atmak gerçekten önemlidir. Örneğin, her RNA ekstraksiyon için hazırlanması gereken, PCR kurmak ve jel elektroforez fiziksel olarak ayrı alanlarda çalıştırılmalıdır.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos