Name: Memelilerde Vücut Bileşimi ve Su Tüketimini Değerlendirmek Için Döteryum Oksitin İnvaziv Olmayan, Öldürücü Olmayan Bir Araç Olarak Kullanılması (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-02-20T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 22 s
Description: Keşfedin, memelilerde vücut bileşimi ve su tüketimini değerlendirmek için döteryum oksit kullanımını. Bu invaziv olmayan yöntem, nesli tükenmekte olan türler de dahil olmak üzere çeşitli hayvanlarda uygulanabilir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu araştırma MDC Kooperatif Anlaşması (#416), ABD Orman Hizmetleri Kooperatifi Anlaşması (16-JV-11242311-118), Amerikan Veteriner Beslenme Akademisi ve Waltham/Royal Canin, USA Grant (hibe numarası: 00049049), NIH eğitim bursu (hibe numarası: T32OS011126) ve Missouri Üniversitesi Veterineraraştırma Bursu ile desteklenmiştir. Yazarlar shannon Ehlers'a bu el yazını önceden inceleleri için teşekkür ediyor. Dr. Robert Backus'a D2O standartlarını sağladığı ve laboratuvarının kullanımına izin verdiği için teşekkür ederiz.

Burada açıklanan tüm deneyler Missouri Üniversitesi Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylandı ve Missouri Koruma Bölümü (MDC) Yaban Hayatı Bilimsel Toplama izni (İzin #16409 ve #17649) altında yürütüldü.
1. Steril, İzotonik, tuzlu D2O stok çözeltisinin hazırlanması
<ol><li>9.0 g/L tuzlu D2O 50 mL stok çözeltisi yapın.<ol>
<li>450 mg farmasötik kalite NaCl ağırlığında ve tüm NaCl'i 100 mL,sterilize edilmiş bir kabın içine aktarın. Laboratuvar defterine 4 ondalık basamak için Tam NaCl miktarını kaydedin.</li>
		<li>Steril bir silindir kullanarak, 50 g ≥ 99.8% döteryum oksit ölçün ve NaCl içeren steril kabına aktarın. Döteryum oksitin tam miktarını laboratuvar not defterine veya elektronik tablosuna 4 ondalık basamak olarak kaydedin.</li>
		<li>Filtre 10 mL izosmotik mukavemet NaCl (9.0 g/L) submikron gözenekleri (0.2 m) ile pirojenik olmayan bir steril disk filtresi ile.</li>
		<li>10 mL şırınga namlusu yla donatılmış mikron altı gözeneklere (0,2 m) sahip pirojenik olmayan steril disk filtresine 20 G iğne takın. 100 mL steril boş şişenin septumuna yerleştirin.</li>
		<li>Bir vakum tüpünü 22 G iğneye takın ve iğneyi 100 mL steril boş şişenin septumuna takın.</li>
		<li>Stok çözeltisinin 10 mL'sini şırınga namlunun içine dökün. D2O stok çözeltisi steril şişeye yavaşça filtre uygulamaya başlayana kadar vakumu yavaşça açın. 50 mL'nin tamamı süzülene kadar D2O stok çözeltisini şırınga namlunun içine dökmeye devam edin. NOT: Stok çözeltisinin gerekli doza bağlı olarak seyreltilmesi veya konsantre edilmesi gerekebilir. D2O'nun dozu türe ve analitik yöntemin hassasiyetine göre değişir. Kediler için çalışma solüsyonu 0.7 g/kg D2O dozunun verilmesinde kullanıldı. Yukarıda açıklanan stok çözeltisi, hayvana deri altına getirilen NaCl çözeltisi miktarını en aza indirirken dozun doğru ölçülmesine izin verir. Yarasalar gibi küçük memeliler için bu konsantrasyon 0,1600 g/mL gibi bir çözeltiye seyreltilmelidir. Bu konsantrasyon 0.75 g/kg D2O dozunun doğru bir şekilde ölçülmesine ve yaklaşık 100 μL veya daha az NaCl çözeltisinde uygulanmasına olanak sağlar.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. Yarasalar için steril, İzotonik, tuzlu D2O stok çalışma çözeltisinin hazırlanması
<ol><li>10 mL boş steril şişeyi tartın ve en yakın 4 ondalık basamakiçin rekor ağırlık. Tare ölçeği.</li>
	<li>0,65 mL D2O stok çözeltisinin katranlı, 10 mL boş steril şişeye aktarılması için 1,0 mL şırınga kullanın. D 2 Oile4 ondalık basamakların rekor ağırlığı. Tare ölçeği.</li>
	<li>10 mL boş şişedeki D2O'nun hacmini hesaplayın. Aşağıdaki denklemi kullanın. <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/59442/59442eq1.jpg"> W'nin ağırlık ve D'nin</li><li></li><li><li><li></ol><ol><li><ol><li><li><li></ol></li><li><li><li><li></li><li> <img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/59442/59442eq2.jpg"> <img alt="Equation 3" src="/files/ftp_upload/59442/59442eq3.jpg"></li><li></li><li></li><li><li><li></li><li></li><li><li> </li><li></ol><ol><li></li><li> </li><li><li><li> </li><li></li><li></li><li><li></li><li><li><li> </li><li></li></ol><ol><li> <img alt="Equation 4" src="/files/ftp_upload/59442/59442eq4.jpg"> </li><li> <img alt="Equation 5" src="/files/ftp_upload/59442/59442eq5.jpg"> </li><li> <img alt="Equation 6" src="/files/ftp_upload/59442/59442eq6.jpg"> </li><li> <img alt="Equation 7" src="/files/ftp_upload/59442/59442eq7.jpg"></li><li> <img alt="Equation 8" src="/files/ftp_upload/59442/59442eq8.jpg"></li></ol><ol><li><li></li><li><li></li><li></li><li> </li><li><li> <img alt="Equation 9" src="/files/ftp_upload/59442/59442eq9.jpg"> <img alt="Equation 10" src="/files/ftp_upload/59442/59442eq10.jpg"> <img alt="Equation 11" src="/files/ftp_upload/59442/59442eq11.jpg"> </li></ol>

<ol><li>Schiffmann, C., Clauss, M., Hoby, S., Hatt, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visual+body+condition+scoring+in+zoo+animals+%E2%80%93+composite%2C+algorithm+and+overview+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Zoo+Aquarium+Research%22%5BJournal%5D)">Visual body condition scoring in zoo animals – composite, algorithm and overview approaches.</a> Journal of Zoo Aquarium Research. 5 (1), (2017).</li>
<li>Peig, J., Green, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+perspectives+for+estimating+body+condition+from+mass%2Flength+data%3A+the+scaled+mass+index+as+an+alternative+method%5BTitle%5D)+AND+%22Oikos%22%5BJournal%5D)">New perspectives for estimating body condition from mass/length data: the scaled mass index as an alternative method.</a> Oikos. 118 (12), 1883-1891 (2009).</li>
<li>Bissell, H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBissell%2C+H+%22Body+Condition+Scoring+Resource+Center%22">Body Condition Scoring Resource Center</a>. , https://nagonline.net/3877/body-condition-scoring/ (2017).</li>
<li>McWilliams, S. R., Whitman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-destructive+techniques+to+assess+body+composition+of+birds%3A+a+review+and+validation+study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ornithology%22%5BJournal%5D)">Non-destructive techniques to assess body composition of birds: a review and validation study.</a> Journal of Ornithology. 154 (3), 597-618 (2013).</li>
<li>Lukaski, H. C., Johnson, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple%2C+inexpensive+method+of+determining+total+body+water+using+a+tracer+dose+of+D2O+and+infrared+absorption+of+biological+fluids%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Clinical+Nutrition%22%5BJournal%5D)">A simple, inexpensive method of determining total body water using a tracer dose of D2O and infrared absorption of biological fluids.</a> American Journal of Clinical Nutrition. 41 (2), 363-370 (1985).</li>
<li>Chusyd, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adiposity+and+Reproductive+Cycling+Status+in+Zoo+African+Elephants%5BTitle%5D)+AND+%22Obesity+%28Silver+Spring%29%22%5BJournal%5D)">Adiposity and Reproductive Cycling Status in Zoo African Elephants.</a> Obesity (Silver Spring). 26 (1), 103-110 (2018).</li>
<li>Kanchuk, M. L., Backus, R. C., Calvert, C. C., Morris, J. G., Rogers, Q. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutering+Induces+Changes+in+Food+Intake+Body+Weight%2C+Plasma+Insulin+and+Leptin+Concentrations+in+Normal+and+Lipoprotein+Lipase%E2%80%93Deficient+Male+Cats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Nutrition%22%5BJournal%5D)">Neutering Induces Changes in Food Intake Body Weight, Plasma Insulin and Leptin Concentrations in Normal and Lipoprotein Lipase–Deficient Male Cats.</a> The Journal of Nutrition. 132 (6), 1730S-1732S (2002).</li>
<li>Eichhorn, G., Visser, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technical+Comment%3A+Evaluation+of+the+Deuterium+Dilution+Method+to+Estimate+Body+Composition+in+the+Barnacle+Goose%3A+Accuracy+and+Minimum+Equilibration+Time%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+and+Biochemical+Zoology%22%5BJournal%5D)">Technical Comment: Evaluation of the Deuterium Dilution Method to Estimate Body Composition in the Barnacle Goose: Accuracy and Minimum Equilibration Time.</a> Physiological and Biochemical Zoology. 81 (4), 508-518 (2008).</li>
<li>Hooper, S. E., Backus, R., Amelon, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+dietary+selenium+and+moisture+on+the+physical+activity+and+thyroid+axis+of+cats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Animal+Physiolgy+and+Animal+Nutrition+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Effects of dietary selenium and moisture on the physical activity and thyroid axis of cats.</a> Journal of Animal Physiolgy and Animal Nutrition (Berl). 102 (2), 495-504 (2018).</li>
<li>Stevenson, K. T., van Tets, I. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dual-Energy+X-Ray+Absorptiometry+%28DXA%29+Can+Accurately+and+Nondestructively+Measure+the+Body+Composition+of+Small%2C+Free-Living+Rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+and+Biochemical+Zoology%22%5BJournal%5D)">Dual-Energy X-Ray Absorptiometry (DXA) Can Accurately and Nondestructively Measure the Body Composition of Small, Free-Living Rodents.</a> Physiological and Biochemical Zoology. 81 (3), 373-382 (2008).</li>
<li>Jennings, G., Bluck, L., Wright, A., Elia, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+infrared+spectrophotometry+for+measuring+body+water+spaces%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">The use of infrared spectrophotometry for measuring body water spaces.</a> Clinical Chemistry. 45 (7), 1077-1081 (1999).</li>
<li>Beuth, J. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Body+Composition%2C+movemement+phenology+and+habitat+use+of+common+eider+along+the+southern+new+england+coast.+Master+of+Science+in+Biological+and+Environmental+Sciences+%28MSBES%29%22">Body Composition, movemement phenology and habitat use of common eider along the southern new england coast. Master of Science in Biological and Environmental Sciences (MSBES) thesis</a>. , University of Rhode Island. (2013).</li>
<li>Coplen, T. B., Hopple, J., Peiser, H., Rieder, S. Compilation of minimum and maximum isotope ratios of selected elements in naturally occurring terrestrial materials and reagents. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCoplen%2C+TB+%22U.S.+Geological+Survey+Water-Resources+Investigations+Report+01-4222%22">U.S. Geological Survey Water-Resources Investigations Report 01-4222</a>. , (2002).</li>
<li>Karasov, W. H., Pinshow, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+lean+mass+and+in+organs+of+nutrient+assimilation+in+a+long-distance+passerine+migrant+at+a+springtime+stopover+site%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Zoology%22%5BJournal%5D)">Changes in lean mass and in organs of nutrient assimilation in a long-distance passerine migrant at a springtime stopover site.</a> Physiological Zoology. 71 (4), 435-448 (1998).</li>
<li>Hood, W. R., Oftedal, O. T., Kunz, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variation+in+body+composition+of+female+big+brown+bats+%28Eptesicus+fuscus.%29+during+lactation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Physiology+B%22%5BJournal%5D)">Variation in body composition of female big brown bats (Eptesicus fuscus.) during lactation.</a> Journal of Comparative Physiology B. 176 (8), 807-819 (2006).</li>
<li>Backus, R. C., Havel, P. J., Gingerich, R. L., Rogers, Q. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relationship+between+serum+leptin+immunoreactivity+and+body+fat+mass+as+estimated+by+use+of+a+novel+gas-phase+Fourier+transform+infrared+spectroscopy+deuterium+dilution+method+in+cats%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Veterinary+Research%22%5BJournal%5D)">Relationship between serum leptin immunoreactivity and body fat mass as estimated by use of a novel gas-phase Fourier transform infrared spectroscopy deuterium dilution method in cats.</a> American Journal of Veterinary Research. 61 (7), 796-801 (2000).</li>
<li>Moore, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+Total+Body+Water+and+Solids+with+Isotopes%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Determination of Total Body Water and Solids with Isotopes.</a> Science. 104 (2694), 157-160 (1946).</li>
<li>Voigt, C., Cruz-Neto, A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aVoigt%2C+C+%22Ecological+and+Behavioral+Methods+in+the+Study+of+Bats%22">Ecological and Behavioral Methods in the Study of Bats</a>. Parsons, S., Kunz, T. H. , John Hopkins University Press. Ch. 30 621-645 (2009).</li>
<li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Assessment+of+Body+Composition+and+Total+Energy+Expenditure+in+Humans+Using+Stable+Isotope+Techniques%22">Assessment of Body Composition and Total Energy Expenditure in Humans Using Stable Isotope Techniques</a>. , (2009).</li>
<li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Introduction+to+Body+Composition+Assessment+Using+the+Deuterium+Dilution+Technique+with+Analysis+of+Saliva+Samples+by+Fourier+Transform+Infrared+Spectrometry%22">Introduction to Body Composition Assessment Using the Deuterium Dilution Technique with Analysis of Saliva Samples by Fourier Transform Infrared Spectrometry</a>. , (2011).</li>
<li>Shimamoto, H., Komiya, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Turnover+of+Body+Water+as+an+Indicator+of+Health%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physiological+Anthropology+and+Applied+Human+Science%22%5BJournal%5D)">The Turnover of Body Water as an Indicator of Health.</a> Journal of Physiological Anthropology and Applied Human Science. 19 (5), 207-212 (2000).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

TBW belirlemek için döteryum oksit kullanımı 1940'lardan beri17 ve insanlar ve çeşitli yerli ve yaban hayatı türleri4,6,7kullanılır. Biyoelektrik empedans analizi (BIA), DXA ve kantitatif manyetik rezonans (QMR) gibi diğer tahribatsız teknikler geliştirilmiştir. Her yöntemin, vücut kompozisyonu değerlendirmek için belirli bir metodoloji seçmeden önce göz önünde bulundurulması gereken avantajları ve dezava...

Vücut durumu puanlama sistemleri ve vücut durumu endeksleri bir türün sağlık durumunu veya uygunluğunu değerlendirmek için kullanılan yaygın tekniklerdir1,2. Birçok yerli ve zoolojik türler bir hayvanın kas ve yüzeysel yağ dokusu değerlendirmek için kullanılan benzersiz vücut durumu puanlama (BCS) sistemleri var3. Ancak, BCS değerlendirmesi, bcs'nin eğitimli bir değerlendirici tarafından değerlendirildiğinde nesnel veya yarı nicel bir ölçüm olduğu anlamına gelen değerlendiriciye dayanır. Yaban hayatı türlerinde, vücut durumu endeksleri yaygın olarak BCS yerine kullanılır ve vücut kütlesinin vücut büyüklüğüne veya vücut kütlesine oranının 2'yiönkolagöre temel alınabıdır. Vücut durumu indicis genellikle yem etkileri ile şaşkın ve vücut büyüklüğü yanı sıra istatistiksel ve inferential sorunlar4tarafından şaşkın olabilir.
Vücut durumu puanlama sistemleri ve vücut durumu endeksleri için bir alternatif vücut kompozisyonu belirlemek için istikrarlı bir izotop kullanıyor. Yaygın olarak kullanılan kararlı izotoplardan biri, hidrojen atomlarının döteryum izotopları olduğu radyoaktif olmayan bir su formu olan döteryum oksittir (D2O). Bu çalışmada açıklanan döteryum oksit seyreltme yöntemi insanlarda vücut kompozisyonu tahmin etmek için kullanılan öznel olmayan, nicel ve tekrarlanabilir bir teknik olabilir5 ve türlerin geniş bir yelpazede4,6,7. Bu teknik yaban hayatı vücut kompozisyonu çalışma için avantajlı olabilir. Örneğin, bir yönetim eyleminden önce ve sonra olduğu gibi gövde kompozisyonundaki uzunlamasına değişiklikleri değerlendirmek için kullanılabilir. Ancak, bazı yaban hayatı türlerinde döteryum oksit gerçek su içeriği8abartabilir. Bu nedenle, bir tür için tekniği adapte ederken, nesli tükenmekte olmayan türler için karkas analizi döteryum oksit yöntemi karşılaştırarak yöntemi doğrulamak önemlidir. Tehdit altındaki ve nesli tükenmekte olan türler için, çift x-ışını emilimi (DXA) gibi tahribatsız bir yöntem, tam karkas analizinin altın standart yıkıcı yöntemine alternatif bir karşılaştırma yöntemi olarak düşünülmelidir.
Vücut kompozisyonuna ek olarak, D2O seyreltme tekniği tek bir hayvanın su tüketimini belirlemek için kullanılabilir9. D2O'nun bu benzersiz uygulaması sadece araştırma sorularını yanıtlamak için değil, aynı zamanda büyük sosyal ortamlarda barındırılan hayvan(lar)ın su tüketimini değerlendirmek için de kullanılabilir.
Burada, bir böcekçil, büyük kahverengi yarasalar(Eptesicus fuscus)vücut kompozisyonu değerlendirmek için D2O seyreltme tekniğinin adaptasyon tarif ve bir etobur su tüketimini değerlendirmek için, kediler(Felis catis).

<table><tbody><tr><td>0,2 mikron pirojenik olmayan disk filtre</td><td>Argos Technologies</td><td>FN32S</td><td>naylon, 30mm çap, 0,22um, steril</td></tr><tr><td>1,5 mL konik mikrosantrifüj tüpleri</td><td>USA Scientific</td><td>1415-9701</td><td>1,5 ml bağımsız mikrosantrifüj tüpü, mavi kapaklı</td></tr><tr><td>doğal Enjeksiyon için 10 mL steril cam şişe</td><td>Mountainside Tıbbi Ekipman</td><td>MS-SEV10</td><td>şeffaf, steril cam enjeksiyon ünitesi</td></tr><tr><td>10 mL şırınga</td><td>Becton Dickinson</td><td>305219</td><td>steril 10 mL şırınga ayrı ayrı sarılmış</td></tr><tr><td>100 mL steril cam</td> şişe enjeksiyon için <td>Mountainside Medical Equipment</td><td>AL-SV10020</td><td>şeffaf, steril cam enjeksiyon ünitesi</td></tr><tr><td>20 gauge iğne</td><td>Exel</td><td>26417</td><td>iğneler hipodermik 20g x 1" plastik göbek (sarı) / normal konik</td></tr><tr><td>22 gauge iğne</td><td>Exel</td><td>26411</td><td>iğneler hipodermik 22g x 1 "plastik göbek (siyah) / düzenli konik</td></tr><tr><td>döteryum oksit</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>151882-25G</td><td>99.9 atom % D</td></tr><tr><td>izofloran</td><td>Vetone</td><td>3060</td><td>fluriso izofluran, USP</td></tr><tr><td>OMNIC Spectra Yazılımı</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>833-036200</td><td>FT-IR standart yazılım</td></tr><tr><td>vazelin</td><td>vazelin</td><td>305212311006</td><td>Vazelin, %100 saf vazelin, orijinal, cilt koruyucu</td></tr><tr><td>plastik kılcal tüpler</td><td>Yenilikçi Med Tech</td><td>100050</td><td>sodyum heparin antikoagülan, 50 & mu; L kapasite, 30 mm uzunluk</td></tr><tr><td>Mühürlü sıvı spektrofotometresi SL-3 FTIR CAF2 Hücresi</td><td>Uluslararası Kristal Laboratuvarı</td><td>0005D-875</td><td>0,05 mm Yol uzunluğu</td></tr><tr><td>sodyum klorür</td><td>EMD Millipore</td><td>1.37017</td><td>biyofarmasötik üretime uygun</td></tr><tr><td>Termo Elektron Nicolet 380 FT-IR Spektrometresi</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>269-169400</td><td>üretimi durdurulan model, daha yeni modeller mevcuttur</td></tr></tbody></table>

memelilerde vücut bileşimi ve su tüketimini değerlendirmek için döteryum oksitin İnvaziv olmayan, Öldürücü olmayan bir araç olarak kullanılması

Using Deuterium Oxide as a Non-Invasive, Non-Lethal Tool for Assessing Body Composition and Water Consumption in Mammals

Vücut durumu puanlama sistemleri ve vücut durumu endeksleri bir türün sağlık durumunu veya uygunluğunu değerlendirmek için kullanılan yaygın tekniklerdir. Vücut durumu puanlama sistemleri değerlendirici bağımlı ve son derece öznel olma potansiyeline sahip. Vücut durumu endeksleri yem leme ile şaşırttı olabilir, vücut ağırlığının etkileri, yanı sıra istatistiksel ve inferential sorunlar. Vücut durumu puanlama sistemleri ve vücut durumu endeksleri için bir alternatif vücut kompozisyonunu belirlemek için döteryum oksit gibi istikrarlı bir izotop kullanıyor. Döteryum oksit seyreltme yöntemi, insanlarda, yaban hayatı ve evcil türlerde vücut kompozisyonu tahmin etmek için kullanılan tekrarlanabilir, nicel bir tekniktir. Ayrıca, döteryum oksit seyreltme tekniği bireysel bir hayvanın su tüketimini belirlemek için kullanılabilir. Burada, büyük kahverengi yarasalarda(Eptesicus fuscus)vücut kompozisyonunun döteryum oksit seyreltme tekniğinin uyarlanması ve kedilerdeki su tüketiminin(Felis catis)değerlendirilmesinde açıklanmıştır.

Döteryum oksit seyreltme tekniği çeşitli türlerin vücut kompozisyonu değerlendirmek için kullanılabilir. Adaptasyon göstermek için, bir Kuzey Amerika böcekçil yarasa türlerinde döteryum oksit seyreltme tekniğinin ilk kullanımını bildiriyoruz, Eptesicus fuscus, temsili sonuçlar için büyük kahverengi yarasa. Bir zamanlama platosu, denge süresinin bilinmemesi halinde herhangi bir türde yapılması gerektiği gibi D öncesi ve sonrası2O enjeksiyon kan örnekleri alınarak tamaml...

Bu makalede, toplam vücut suyu, yağsız vücut kütlesi, vücut yağ kütlesi ve su tüketimini belirlemek için iki memeli, bir böcekçil ve etobur döteryum oksit seyreltme tekniği açıklanmaktadır.

Memelilerde Vücut Bileşimi ve Su Tüketimini Değerlendirmek Için Döteryum Oksitin İnvaziv Olmayan, Öldürücü Olmayan Bir Araç Olarak Kullanılması

Body condition scoring systems and body condition indices are common techniques used for assessing the health status or fitness of a species. Body ...

Bu protokol kullanılarak, döteryum oksit veya D2O, radyoaktif olmayan, istikrarlı bir su izotopu, vücut bileşimi ve su tüketimini tahmin etmek için kullanılabilir. Bu teknik noninvaziv ve bu nedenle nesli tükenmekte olan türlerin vücut kompozisyonu değerlendirmek için kullanılabilir, yanı sıra insanlar ve evcil türler. Döteryum oksit seyreltme tekniğinin benzersiz bir uygulaması, yüksek yeniden yakalama oranları veya sosyal olarak barındırılan hayvanların serbest yaşam su tüketimini ölçmek için yeteneğidir.Anestezi gerekli olmasa da, döteryum oksit teslim etmeden önce hayvanları yatıştırmak için deri altı enjeksiyonları veren yabancı olanlar için daha kolay olabilir. Sarah Hooper ve benimle prosedürü gösteren Amanda Eshelman ve Ashley Cowan, veterinerlik öğrencileri ve Alicia Roistacher, benim laboratuvar bir yüksek lisans öğrencisi olacaktır. Litre tuzlanmış döteryum oksit başına dokuz gram 50 mililitrelik stok çözeltisi yapmak için, ilk ilaç dereceli sodyum klorür 450 miligram ağırlığında, ve dört ondalık yerlere tam miktarı kaydetmek.Tüm tuzu sterilize edilmiş 100 mililitrelik bir kabın içine aktarın ve steril, mezun silindirdeki %99,8'den daha büyük veya %99,8 döteryum oksitten 50 gram daha fazla veya eşit ölçün. Döteryum oksitin tam miktarını dört ondalık basamaklara kaydedin ve döteryum oksitini sodyum klorür kabına aktarın. Daha sonra, 10 mililitrelik şırınga fıçısı ile donatılmış submikron gözeneklerine sahip pirojenik olmayan steril disk filtresine 20 kalibrelik bir iğne takın ve iğneyi steril, boş, 100 mililitrelik bir şişenin septumuna takın.22 kalibrelik bir iğneye vakum tüpü takın ve iğneyi 100 mililitrelik şişenin septumuna takın. Sonra şırınga varil içine izosmotik mukavemeti sodyum klorür 10 mililitre yük ve döteryum oksit çözeltisi yavaş yavaş şişe içine filtre başlayana kadar yavaşça vakum açın. 50 mililitrelik hacmin tamamı filtrelenene kadar döteryum oksit stok çözeltisini şırınga namlunun içine dökmeye devam edin.Anestezili bir yarasada parmak kıskacına yanıt eksikliğini doğruladıktan sonra, interfemoral ven üzerinde üropatagium temizlemek için bir alkol hazırlık pedi kullanın ve dezenfekte kuyruk zarının kurumasını bekleyin. Interfemoral ven üzerine petrol jöle ince bir tabaka uygulayın ve interfemoral ven dorsal kısmını delmek için 29-gauge iğne kullanın. Sonra kan 100 mikrolitre toplamak için plastik sodyum heparin kılcal tüpler kullanın.Sodyum heparin ile tüm kanın yeterli bir karıştırma sağlamak için, yavaşça etiketleme önce kan toplama sonra her tüp rulo. Enjekte etmek için gram döteryum oksit kütlesini belirledikten sonra, döteryum oksit uygun hacmi ile 29-gauge iğne ile donatılmış bir insülin şırınga yükleyin. Döteryum yüklü insülin şırıngasını ve iğnesini tartın, ağırlığı dört ondalık basamaklara kaydedin ve döteryum oksit hacminin tamamını anestezili yarasanın dorsal kalça bölgesine subkutan olarak enjekte edin.Antistatik taslak kalkanlı hassas bir ölçek kullanmanızı ve enjekte edilmeden önce negatif basınç sağlamak için pistonu geri çektiğinden emin olmamızı öneririz. Enjeksiyondan hemen sonra, şimdi boş olan insülin şırıngasını ve iğnesini tarayın ve ağırlığı dört ondalık basamakta kaydedin. 30 dakika sonra kan toplama, beş dakika boyunca 10, 000 kez g her kılcal tüp aşağı spin için bir hematokrit santrifüj kullanın.Keskin makas kullanarak, tüm kan ve plazma arasındaki plastik kılcal tüpü kesin ve plazmayı doğrudan etiketli, 500 mikrolitrelik bir depolama tüpüne atmak için 200 mikrolitrelik bir pipet kullanın. Equilibr döneminden sonra, toplamak ve sadece gösterildiği gibi interfemoral ven kan başka bir 100 mikrolitre saklamak. FTIR spektrofotometri analizi için, damıtmayı kolaylaştırmak için kum banyosunun sıcaklığını 60 dereceye ayarlayın ve her plazma numunesinin ve standardın 50 mikrolitresini ayrı 1,5 mililitrelik konik mikrosantrifüj kapaklarına ekleyin.Mikrosantrifüj kapağını baş aşağı tutarak, 1,5 mililitrelik konik mikrosantrifüj tüpünü kapağın üzerine vidalayın ve ters dönmüş tüpü en az 12 saat boyunca kum banyosundaki kumbanyosuyla temas halinde yerleştirin. Ertesi sabah, her tüp üzerine yeni, temiz bir kapak yerleştirin ve mikrosantrifüj tüpleri 10 saniye boyunca mikrosantrifüj bir mikrosanjıfuge darbe. FTIR spektrometresine sıvı iletim hücresi tonuyla bir sıvı iletim hücresi tonuyla doldurun ve hücreyi metanolle doldurun.Enjeksiyon bağlantı noktasını bağlayın ve hava kabarcıkları riskini azaltmak için metanol şırıngasını dikkatlice çıkarırken hücreyi yavaşça arka plan suyuyla doldurun. Analiz sonrası numunelerin kaldırılmasına izin vermek için çıkış portuna boru takın ve FTIR spektrometre yazılımını açın. Parametreleri tabloya göre ayarlayın ve 0,22 mikrometre filtrelenmiş, distile su ile bir arka plan örneği toplayın.Milyon döteryum oksit standardı başına sıfır parçadan 40 mikrolitre enjekte edin ve hayaletten ayrılmış değerler dosyası olarak spektrumları kaydedin ve kaydedin. Standart bir eğri oluşturmak için tüm standartların spektrumlarını enjekte edip kurtardıktan sonra, her distile numunenin 40 mikrolitresini sıvı iletim hücresine enjekte edin ve spektrumdan tasarruf edin. Bilinen bir denge süresi ile, toplam vücut suyu, yağsız vücut kütlesi, ve vahşi yakalanmış büyük kahverengi yarasalar ve esir büyük kahverengi yarasalar için vücut yağ kütlesi belirlenebilir.Negatif bir vücut yağ kütlesi aşağıdaki nedenlerden biri veya daha fazlası nedeniyle hesaplanabilir:döteryum oksit tüm doz alma, denge aşamasında torpid olma, anormal büyük yağ kitleleri ve minimal yağsız kitleler ekibe sahip, ya da altında sahip 3-5% çift x-ışını emilimi tarafından belirlenen vücut yağ. Burada çift x-ışını emilimine göre döteryum oksit seyreltme tekniği ile belirlenen vücut yağlarının temsili bir yüzdesi gösterilmiştir. Bu iki teknik iyi korelasyon, vücut yağ kütlesi vücut yağ ve vücut ağırlığı arasında güçlü korelasyon gösteren ve döteryum oksit seyreltme tekniği ile sürekli üzerinde veya vücut yağ kütlesi hafife değildir.Döteryum oksit seyreltme yöntemi daha önce kedilerde doğrulanmış ve bu teknik, deneyin her diyet bloğu nda sosyal olarak barındırılan kedilerin günlük su tüketiminin ölçülmesine olanak sağlayacak şekilde uyarlanmıştır. Bu tekniğin sadece sağlıklı hayvanlar üzerinde yapılması gerektiğini ve her hayvana tam doz döteryum oksit vermeniz, kaydetmeniz ve doğru bir şekilde tartmanız gerektiğini unutmayın. Döteryum oksit tekniğini doğrulamak için tam karkas analizi veya DEXA gibi gövde kompozisyonunu belirlemek için ikincil bir yöntem tamamlanabilir.Bu teknik, her kediyi su tüketimini ölçmek için ayırmadan anormal derecede yüksek miktarda su tüketen, sosyal olarak barındırılabilen bir kediyi tanımlamamızı sağladı.

using-deuterium-oxide-as-non-invasive-non-lethal-tool-for-assessing

Research

JoVE Journal

Environment

Çevre

Yağ içerik analizi rutin fare obezite modellerinde kullanan çalışmalar yapılır. Küçük hayvan CT görüntüleme ve analiz Gelişen yöntemleri boyuna ayrıntılı zengin yağ içeriği analiz için sağlanmaktadır. Küçük hayvan BT görüntüleme, analiz ve görselleştirme gerçekleştirmek için adım prosedürleri Burada detaylı bir adım.

Segmentasyon ve Mürin Obezite Modelleri Yağ Hacimleri ölçümü X-ray Bilgisayarlı Tomografi Kullanımı

Kaynak: Tokunou, Y., ve diğerleri, Shewanella oneidensis MR-1'de Hücre Dışı Elektron Taşınması Üzerindeki Döteryum Kinetik İzotop Etkisinin Elektrokimyasal Tespiti. J. Vis. Uzm. (2018)Bu video, proton transferinin elektroaktif bakterilerde hücre dışı elektron taşınmasını (EET) nasıl etkilediğini değerlendirmek için tam hücre elektrokimyasal yöntemini göstermektedir. Yöntem, döteryum oksit kullanarak protonları döteronlarla değiştirerek, kinetik bir izotop etkisini ortaya çıkarmak için akımdaki...

Döteryum Oksit Kullanılarak Mikrobiyal Elektron Taşınması Üzerindeki Kinetik İzotop Etkisinin Ölçülmesi

Bu iletişim kuralı bir vücut kompozisyon analiz ve metabolik hayvan izleme sistemi vücut kompozisyonu ve farelerde metabolik parametreleri tanımlamak için kullanımını açıklar. Yüksek yağlı beslenme tarafından indüklenen bir obezite modeli örnek olarak bu tekniklerin uygulanması için kullanılır.

Vücut kompozisyonu ve metabolik Caging Analizi yüksek yağ Fed farelerde

Burada bir protokol proton taşıma dış membran cytochromes Shewanella Corynebacterium Bay-1'karmaşık yoluyla ekstraselüler elektron taşıma oranı katkısını çalışmaya bütün hücreli elektrokimyasal deneyler mevcut.

Elektrokimyasal algılama döteryum Kinetik izotop etkisi üzerinde ekstraselüler elektron taşıma Shewanella Corynebacterium Bay-1

Burada, mitokondrial oksijen tüketimi, beslenme enerji bilimi ve proton sızıntı, verimsizlik birincil nedeni mitokondriyal ATP nesil belirleyici bir kavram ölçme yöntemleri paylaşmak. Bu sonuçlar besin kullanımı mitokondriyal işlev değerlendirmek yardımcı olmak için kayıp enerjinin % 30 için hesap.

Karaciğer mitokondrial oksijen tüketimi ve Proton sızıntı kinetik Holstein süt sığır mitokondrial solunum tahmin etmek için ölçme

Burada, in vivo kahverengi yağ dokusunda toplam yağ asidi de novo lipogenezinin analizi için döteryum oksit ve gaz kromatografisi kütle spektrometrisi (GCMS) kullanan ucuz bir kantitatif yöntem sunuyoruz.

Kahverengi Yağ Dokusunda De Novo Yağ Asidi Sentezinin Döteryum Oksit Kullanılarak Kantitatif Tayini

İki foton uyarma floresan mikroskobu (2PEF) ile entegre olan döteryum-oksit (ağır suD2O) problu uyarılmış Raman saçılımı (DO-SRS) mikroskobu kullanılarak amino asitler tarafından düzenlenen hücrelerdeki metabolik aktiviteleri doğrudan görselleştirmek için bir protokol sunuyoruz.

Aromatik Amino Asitler Tarafından Düzenlenen Hücre Metabolizmasının Biyoortogonal Kimyasal Görüntülenmesi

Burada, memeli hücrelerinde moleküler oksijen tüketme yeteneklerinden bağımsız olarak mitokondriyal fonksiyonu doğrudan ölçmek için bir tahlil derlemesi sunuyoruz.

Memelilerde Mitokondriyal Fonksiyonu Ölçmek için Oksijenden Bağımsız Tahliller

Burada, çift yönlü eksenel transmisyon (BDAT) ultrasonik cihazının ölçüm protokolünü detaylı bir şekilde sunuyor ve 14 sağlıklı katılımcı ve 3 operatör göz önünde bulundurularak tekrarlanabilirlik çalışmasında test ediyoruz. Sınıf içi korelasyon katsayıları (ICC) ile ölçülen güvenilirlik, ilgilenilen dört parametre için iyiden mükemmele kadar idi.

Ultrasonik Kılavuzlu Dalgalar Kullanılarak Kortikal Kemik Değerlendirmesi: Sağlıklı Bir Popülasyonda Tekrarlanabilirlik Çalışması

Bu prosedür, 2H2O veya U13C Glukoz ile stabil izotop etiketleme ve ardından metabolomik analiz kullanılarak döllenme sırasında spermden oositlere aktarılan metabolitleri tanımlamayı amaçlar. Döteryum etiketli sirler, etiketlenmemiş barajlarla eşleştirilir. Toplanan implantasyon öncesi embriyolar, maternal (döteratlanmamış) metabolitlerden paternal (döteratlanmış) metabolitleri ayırmak için kütle spektrometresi ile analiz edilir.

Döllenme Sırasında Spermden Oosit'e Aktarılan Baba Metabolitlerinin Kütle Spektrometresi Tanımlaması için Kararlı İzotop In-Vivo Etiketleme

Keşfedin, memelilerde vücut bileşimi ve su tüketimini değerlendirmek için döteryum oksit kullanımını. Bu invaziv olmayan yöntem, nesli tükenmekte olan türler de dahil olmak üzere çeşitli hayvanlarda uygulanabilir.

Memelilerde Vücut Bileşimi ve Su Tüketimini Değerlendirmek Için Döteryum Oksitin İnvaziv Olmayan, Öldürücü Olmayan Bir Araç Olarak Kullanılması (Video) | JoVE Journal

Memelilerde Vücut Bileşimi ve Su Tüketimini Değerlendirmek Için Döteryum Oksitin İnvaziv Olmayan, Öldürücü Olmayan Bir Araç Olarak Kullanılması

Daha fazla video keşfet