Name: Farelerde subclavian ven delinme yoluyla kan toplama (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-05-04T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 3 s
Description: Keşfedin, farelerde subclavian ven delinme yoluyla güvenli ve etkili kan toplama yöntemini. Bu teknik yaklaşık 200 mikrolitre kan alınmasını sağlar ve hayvan refahını korur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Çin No. 81670269, No. 81500355 ve No. 81500226 Ulusal Doğal Bilim Vakfı 'ndan hibe tarafından destekleniyordu.

Bu çalışma, Ikinci Xiangya Hastanesi 'nden (Changsha, Çin) Orta Güney Üniversitesi hayvan Araştırmaları Etik Komitesi tarafından onaylanmıştır. El yazması, VARıŞ (Hayvansal araştırmalar: In vivo deneylerinin raporlanması) kuralları12' ye göre hazırlanmıştır.
1. malzeme ve hayvan
<ol><li>Gerekli malzemeleri hazırlayın: 75% etanol, yapışkan bant, epilasyon ajanı, 2 mL Tüp, 1,0 mL şırınga ile bağlı iğne (26G), elektronik ölçek, heparin ve tuzlu (bkz. malzeme tablosu).</li>
	<li>Hayvanlar: hazırlamak 10 Kunming fareler, 6-8 hafta ve tartmak 21.6-28.3 g ( malzeme tablosunabakın). Laboratuvar hayvanlarının bakım ve kullanımı kılavuzu 'Na uygun olarak fareler koruyun13.</li>
</ol>2. anestezi ve hayvan konumlandırma
<ol><li>Anestezik ajanın gerekli dozajı hesaplamak için fareyi tartın.</li>
	<li>Genel anestezi vermek için intraperitoneal enjeksiyon yoluyla sodyum pentobarbital (60 mg/kg) enjekte14 (Şekil 1). Maruz kalan gözleri zarar görmesini önlemek için prosedürün başlangıcında steril bir göz yağlama merhem uygulayın. Not: fareler, pedal çekilme refleks, Kuyruk tutam veya karın cilt tutam test etmek için hiçbir motor yanıtı gösterirken yeterince anestezize olarak kabul edilir.</li>
	<li>Fare, ameliyat masasına bir sırtüstü pozisyonda yerleştirin ve 2-4 cm uzakta damar delinmesi kolaylaştırmak için tablonun kenarından (Şekil 2). Şekil 2' de gösterildiği gibi rahat bir pozisyonda ekstremite düzeltin. Tüm prosedürde herhangi bir entübasyon veya mekanik havalandırma gerekmez.</li>
	<li>Bir pamuklu çubuk ile infraclaviküler boşluk etrafında epilasyon aracı uygulayın.</li>
	<li>Üç dakika sonra, kürk ve görünür kir kaldırmak için bir ıslak pamuk çubuk ile epilasyon Ajan yıkayın.</li>
	<li>İnfraclaviküler alanı 75% etanol ile sterilize edin ve sonra temiz gazlı bez ile kurutun.</li>
</ol>3. subklavian ven delinme ve kan toplama
<ol><li>Köprücük kemik konumunu ve bir parmak ile üstün sternal fossa belirleyin.</li>
	<li>Klavikula kemiğinin ortasına yakın delinme sitesi bulun ve onu kaudal. Deri ve subkutan dokusunu düzeltmek için sol işaret parmağını delinme sitesine lateral koyun (Şekil 3).</li>
	<li>İğneyi yukarı ve kransal olarak üstün sternal fossa doğru taşıyın. İğne subkutan dokusuna girdiğinde, negatif basınç oluşturmak için sağ elin yüzük parmağını geriye doğru hareket ettirin (Şekil 3). Not: Bu adımda, operatörün sağ elinin konumu, iğne yukarı ve yatay düzlemde üstün hareket etmek için operasyon masasına göre biraz daha düşük olmalıdır. Bu yüzden hayvan masanın kenarına yakın yerleştirilir.</li>
	<li>Şırıngayı ileri 3-4 mm 'ye taşıyın ama şırıngaya kan drenajı olmazsa dur. Sonra yavaşça şırınga geri çizin ve içinde negatif basınç tutmak. Çoğu durumda, kan geri çizerken şırınga girer.</li>
	<li>Kan şırıngaya girdiğinde, şırıngayı düzeltin ve şırınga içinde gerekli hacim (200 μL) kan toplanıncaya kadar negatif basıncı koruyun.</li>
	<li>Kan toplama işleminden sonra, delinme iğnesini çekin ve 1-2 dakika boyunca kanamayı durdurmak için bir pamuklu çubukla delinme sitesine basın. Sonra fareler kafese dönün. Not: Bazen, bir ilk girişimi kan elde olamazdı. İğne yönünü yanal olarak ayarlayın ve 3.3-3.5 arasındaki adımları tekrarlayın. Eğer 3 girişim kan örneği elde etmek için başarısız olursa, diğer tarafa geçin.</li>
	<li>Kan örneğini heparinize bir tüpün içine aktarın.</li>
</ol>4. fareler kurtarma
<ol><li>Pentobarbital anestezi yürürlükte iken, fare tekrar hareket edene kadar ısı desteği sağlayarak hız kurtarma.</li>
</ol>

<ol><li>McCosh, R. B., Kreisman, M. J., Breen, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Frequent+Tail-tip+Blood+Sampling+in+Mice+for+the+Assessment+of+Pulsatile+Luteinizing+Hormone+Secretion%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Frequent Tail-tip Blood Sampling in Mice for the Assessment of Pulsatile Luteinizing Hormone Secretion.</a> Journal of Visualized Experiments. (137), (2018).</li>
<li>Regan, R. D., Fenyk-Melody, J. E., Tran, S. M., Chen, G., Stocking, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+Submental+Blood+Collection+with+the+Retroorbital+and+Submandibular+Methods+in+Mice+%28Mus+musculus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Association+for+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Comparison of Submental Blood Collection with the Retroorbital and Submandibular Methods in Mice (Mus musculus).</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 55 (5), 570-576 (2016).</li>
<li>Park, A. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+collection+in+unstressed%2C+conscious%2C+and+freely+moving+mice+through+implantation+of+catheters+in+the+jugular+vein%3A+a+new+simplified+protocol%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Reports%22%5BJournal%5D)">Blood collection in unstressed, conscious, and freely moving mice through implantation of catheters in the jugular vein: a new simplified protocol.</a> Physiological Reports. 6 (21), e13904(2018).</li>
<li>Heimann, M., Kasermann, H. P., Pfister, R., Roth, D. R., Burki, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+collection+from+the+sublingual+vein+in+mice+and+hamsters%3A+a+suitable+alternative+to+retrobulbar+technique+that+provides+large+volumes+and+minimizes+tissue+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">Blood collection from the sublingual vein in mice and hamsters: a suitable alternative to retrobulbar technique that provides large volumes and minimizes tissue damage.</a> Laboratory Animals. 43 (3), 255-260 (2009).</li>
<li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacology+%26+Pharmacotherapeutics%22%5BJournal%5D)">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> Journal of Pharmacology & Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).</li>
<li>Diehl, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+good+practice+guide+to+the+administration+of+substances+and+removal+of+blood%2C+including+routes+and+volumes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Toxicology%22%5BJournal%5D)">A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes.</a> Journal of Applied Toxicology. 21 (1), 15-23 (2001).</li>
<li>van Herck, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orbital+sinus+blood+sampling+in+rats+as+performed+by+different+animal+technicians%3A+the+influence+of+technique+and+expertise%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">Orbital sinus blood sampling in rats as performed by different animal technicians: the influence of technique and expertise.</a> Laboratory Animals. 32 (4), 377-386 (1998).</li>
<li>Tsai, P. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+different+blood+collection+methods+on+indicators+of+welfare+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim+%28NY%29%22%5BJournal%5D)">Effects of different blood collection methods on indicators of welfare in mice.</a> Lab Anim (NY). 44 (8), 301-310 (2015).</li>
<li>Holmberg, H., Kiersgaard, M. K., Mikkelsen, L. F., Tranholm, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+blood+sampling+technique+on+blood+quality+and+animal+welfare+in+haemophilic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">Impact of blood sampling technique on blood quality and animal welfare in haemophilic mice.</a> Laboratory Animals. 45 (2), 114-120 (2011).</li>
<li>Yang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+and+efficacy+of+a+modified+axillary+vein+technique+for+pacemaker+implantation%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiology+Plus%22%5BJournal%5D)">Safety and efficacy of a modified axillary vein technique for pacemaker implantation.</a> Cardiology Plus. 3, 104-107 (2018).</li>
<li>Yang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subclavian+Vein+Puncture+As+an+Alternative+Method+of+Blood+Sample+Collection+in+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (141), (2018).</li>
<li>Kilkenny, C., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+bioscience+research+reporting%3A+ARRIVE-ing+at+a+solution%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">Improving bioscience research reporting: ARRIVE-ing at a solution.</a> Laboratory Animals. 44 (4), 377-378 (2010).</li>
<li>Research, I. fL. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aResearch%2C+IfLA+%22Guide+for+the+care+and+use+of+laboratory+animals%22">Guide for the care and use of laboratory animals</a>. , National Academies Press. Washington (DC). (1996).</li>
<li>Redel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+ischemia+and+reperfusion+times+on+myocardial+infarct+size+in+mice+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Biology+and+Medicine+%28Maywood%2C+N.J.%29%22%5BJournal%5D)">Impact of ischemia and reperfusion times on myocardial infarct size in mice in vivo.</a> Experimental Biology and Medicine (Maywood, N.J.). 233 (1), 84-93 (2008).</li>
<li>Tsukamoto, A., Serizawa, K., Sato, R., Yamazaki, J., Inomata, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vital+signs+monitoring+during+injectable+and+inhalant+anesthesia+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Animals%22%5BJournal%5D)">Vital signs monitoring during injectable and inhalant anesthesia in mice.</a> Experimental Animals. 64 (1), 57-64 (2015).</li>
<li>Zou, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repeated+Blood+Collection+from+Tail+Vein+of+Non-Anesthetized+Rats+with+a+Vacuum+Blood+Collection+System%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System.</a> Journal of Visualized Experiments. (130), (2017).</li>
</ol>

Hiç bildirilmedi.

Bu rapor, sıçan11' de subklavian ven delinmesi yoluyla kan örnekleme konusunda önceki araştırmaların bir uzantısını temsil eder. Fare en sık kullanılan araştırma hayvanı olduğu için, bu tekniğin fareler için de uygulanabilir olup olmadığını görmek değerli olacaktır. Zorluk subklavian ven nispeten daha küçük çaplı gelir.
Şu anda araştırmada, farelerde subklavian delinmesi kan toplamak için uygulanabilir ve güvenilir bir yoldur. Kuyruk ven kesme veya orbital kan toplama gibi konvansiyonel yöntemlerle karşılaştırıldığında, mevcut yöntemin etik sorunları yoktur. Bu prosedürün ardından tüm hayvanlar hayatta kalan sıvı takviyeleri yaklaşık 200 μL kan ekstraksiyon ve hayvanlar daha deneysel çalışmalar için kullanılabilir. Teorik olarak, toplam örnek hacim ekstraksiyon toplam dolaşım kan hacmi her zaman% 10 ' dan fazla ulaşamadı ve bir yetişkin hayvanın toplam hacmi 55 olduğunu 70 mL/kg vücut ağırlığı5. Bu araştırmada kullanılan fareler için (21.6-28.3 g), maksimum hacim ekstraksiyon 200 μL civarında olmalıdır. Böylece her fare için 200 μL civarında kan örnekleme miktarını ayarlayacağız. Kan basıncı, kalp hızı ve diğer stres parametreleri ölçmek için yetersizlik bu raporun ana sınırlamalardır.
Yeterli genel anestezi, delinme başarısını garanti etmek için önemli bir konudur. Fareler, iğne tarafından gemi yaralanması riskini önlemek için delinme prosedürü sırasında sessiz kalmalı. Biz 60 yılında pentobarbital sodyum bulundu genel anestezi için mg/kg anestezi ideal derinlemesine tatmin olabilir. Bu ajanın dezavantajı nispeten uzun iyileşme süresi (yaklaşık 30 dakika ortalaması). Bazı enstitülerde, isofluran inhalasyonu kısa iyileşme süresi için kullanılır ve alternatif anestezi seçimi olarak dikkate alınmalıdır15.
Subklavian ven konumu Şekil 4' te gösterilir. İnce duvar ve damardaki düşük basınç nedeniyle, subklavian ven anterior ve posterior duvara iğne ileri hareket ederken bir iğne basıncı altında birbirine iliştirmek (Şekil 5A). Piston yavaşça geriye doğru çekilirken, bağlı duvarlar kendiliğinden ayrılır ve iğne ucu damar ve kanın gerçek boşluğuna girebilir ve sürekli negatif basınç altında şırınga içine drenaj olabilir (Şekil 5B). Bir vakum kan toplama sisteminin kullanımı16 da kan toplama lehine olabilir. Fareler subklavian ven nispeten küçük çapı nedeniyle, deneyimli bir operatör için bile arızalar olabilir. Bir acemi için,11bildirilen gibi fareler subklavian ven delinme öneririz. Fareler birkaç başarılı delinme girişimleri sonra, farelerde subklavian ven delinme başarı oranı önemli ölçüde geliştirilebilir. Tam delinme konumu sadece köprücük kemik ortasına kaudal olduğundan emin olun. Üstün sternal fossa yukarı ve kranial hareket iğne başarılı bir delinme garanti etmek için diğer önemli noktalarıyla.
Sonuç olarak, subklavian ven delinme fareler kan toplama için güvenli ve etkili bir yöntemdir. Kuyruk ven kesme ve Retro orbital plekkana kan toplama yanı sıra, bu yöntem, uygulanabilir, güvenli ve farelerde birkaç zaman noktalarında gözlemsel araştırmalar için uygundur.

Farelerden kan numunesi toplama çoğu araştırma laboratuarında esastır. Farelerde kan toplama için konvansiyonel yaklaşımlar, 100 μL örneğinden az1gerektiğinde kuyruk kesmesi olur. Ancak, terminal dışı bir zaman noktasında 100 μL 'den fazla kan gerekiyorsa, retroorbital, submandibular kanama veya submental kan toplama en yaygın olarak kabul edilen tekniklerdir2. Bazı durumlarda, cerrahi kesi yoluyla juguler ven kateterizasyon alternatif bir yöntem olarak kabul edildi3.
Bununla birlikte, yukarıdaki Yöntemler fareler için zararlı. Bilgimizin en iyisini yapmak için, arkasındaki Yöntem4,5komplikasyonların potansiyel riski nedeniyle yaygın olarak kabul edilmez. Operasyon ile ilgili travma sadece görünür alan6,7, aynı zamanda yörünge6içinde derin olur. Ayrıca, submandibular kan toplama stresli8 ve aşırı kanama ile ilişkili olabilir2,9. Bizim önceki araştırma dayanarak10,11, burada farelerde subklavian ven kan toplama için yeni bir strateji tanıtmak. Bu teknikle güvenlik, fizibilite ve elde edilen kan hacmi sunulmuştur ve tartışılmaktadır.

<table><tbody><tr><td>1.0 mL şırınga</td><td>Shandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd (Weihai, Shandong Eyaleti, Çin)</td><td>20163151593</td><td></td></tr><tr><td>% 75 etanol</td><td>Eczacılık Bölümü, Orta Güney Üniversitesi İkinci Xiangya Hastanesi</td><td>Eczacılık Bölümü, Orta Güney Üniversitesi</td><td></td>İkinci Xiangya Hastanesi</tr><tr><td>yapışkan bant</td><td>3M Deutschland GmbH (Kamen, Almanya)</td> <td>1534-1</td><td></td></tr><tr><td>anestezi</td><td></td><td></td><td></td>elektronik terazi için kanvas eldiven</tr><tr><td></td><td>Dongguan Shengheng Electronics Co. Ltd (Dongguan, Guangdong Eyaleti, Çin)</td> <td>KP-3000</td><td></td></tr><tr><td>epilasyon ajanı</td><td>Fransa Yi Sha Cosmetics Co. Ltd (Guangzhou, Guangdong Eyaleti, Çin),</td><td></td> heparin (kullanılan konsantrasyon 10 U / mL, 2 mL, 12500 IU 8281744<td></td></tr><tr><td>)</td> <td>Nanjing Xinbai Pharmaceutical Co. Limited (Nanjing, Jiangsu Eyaleti, Çin)</td><td>H32025851</td><td></td></tr><tr><td>fareler</td><td>Hunan SJA Laboratory Animal Co. Ltd (Changsha, Hunan Eyaleti, Çin)&nbsp;</td><td>Kunming spcies</td><td></td></tr><tr><td>iğnesi, 26G, 0,45 mm x 16 mm</td><td>Shandong Weigao Group Medical Polymer Co. Ltd (Weihai, Shandong Eyaleti, Çin)</td><td>20163151593</td><td></td></tr><tr><td>pentobarbital sodyum (kullanılan çözelti% 1)</td><td>Merck</td><td>P-010-1ML</td><td></td></tr><tr><td>fizyolojik salin, 100 mL</td><td>Hunan Kelun Pharmaceutical Co. Ltd (Yueyang, Hunan Eyaleti, Çin)</td><td>H43020454</td><td></td></tr><tr><td>statik yazılım</td><td>Uluslararası İş Makineleri</td><td>SPSS İstatistikleri 25</td><td></td></tr><tr><td>tüp, 2 mL</td><td>Hubei Jinxing Teknolojisi & Development Co., Ltd (Wuhan Hubei Eyaleti, Çin)</td> <td>MCT-150-C</td><td></td></tr></tbody></table>

farelerde subclavian ven delinme yoluyla kan toplama

Blood Collection Through Subclavian Vein Puncture in Mice

Fare insan hastalığı ve insan sağlığını incelemek için en önde gelen memelilerden modeldir. Ancak, farelerden kan numune toplama araştırma çalışmaları zordur. Kuyruk kanı toplama küçük bir miktar kan örneği gerektiğinde popüler bir yöntemdir. Orbital arter kan büyük miktarda gerekli ancak bu kan toplama yöntemi etik konularda düşünülebilir. Eskiden, biz farelerde subklavian ven delinme yoluyla kan numune toplama fizibilite ve güvenlik göstermiştir, ve burada bu yöntemin fareler kullanılabilir olup olmadığını araştırmak. Bu yöntemin farelerde kan toplama için güvenli ve pratik olduğunu bildiriyoruz. Farelerde subklavian ven delinme yoluyla kan toplama günlük araştırma çalışmaları uygun bir yöntem olabilir.

Biz 10 Kunming fareler (erkek n = 5, kadın n = 5, ağırlık 25,4 ± 2,0 g) bu prosedürü tekrarladık. Sağ tarafta dokuz prosedür başarılı oldu. Bir vaka, sağ tarafta 3 deneme içinde başarısız oldu ve kan toplama sol tarafta başarılı oldu. Zaman kursu (delinme gelen gerekli kan hacmi almak için) arasında değişmektedir 35-126 saniye (ortalama 68,4 ± 26,4 s). Kan toplama hacmi 200 μL (ortalama 203 ± 11,6 μL) civarında ayarlandı. Kan toplama 1 ila 4 denemeler içinde başarılı oldu. Kan örnekleme iki farede ilk girişimi başarılı ve bir fare 4 girişimleri sonra; örnekleme diğer fareler 2-3 girişimleri aldı. Tüm veriler Tablo 1' de gösterilmiştir. Tüm hayvanlar kan örnekleme sonra 30 dakika içinde hayatta ve kurtarıldı. Gözlenen tüm parametreler için cinsiyeler arasında önemli bir fark yoktu (Tablo 1).
<img alt="Laboratuvar faresi enjeksiyon işlemi, şırınga iğnesi, eldiven saplı, deney düzeneği." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59556/59556fig1.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 1"> Şekil 1 : İntraperitoneal enjeksiyon Ile genel anestezi <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59556/59556fig1large.jpg" target="_blank">Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.</a>
<img alt="Fare çalışma kurulumu; Mavi yüzeye inceleme için yapıştırılmış bir fare üzerinde cerrahi prosedürlerin test edilmesi." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59556/59556fig2.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 2"> Şekil 2 : Mouse 'un sırtüstü pozisyonu. Kenar boşluğu ve fare arasındaki uzaklığı 2-4 cm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59556/59556fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir sürümünü görüntülemek Için lütfen buraya tıklayın</a> .
<img alt="Fare anestezi kurulumu, enjeksiyon yöntemi, biyomedikal deney, cerrahi öncesi hazırlık, laboratuvar araştırması." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59556/59556fig3.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 3"> Şekil 3 : Delinme sitesi ve operatörün elleriyle duruş. Sağ elin yüzük parmağının negatif basınç oluşturmak için geriye doğru hareket ettiğini unutmayın. Sol el deri ve subkutan dokularda düzeltmek için delinme sitesine lateral yerleştirilir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59556/59556fig3large.jpg" target="_blank">Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.</a>
<img alt="Suprasternal fossa, klavikula kemiği, subklavyen ven yolunu gösteren fare anatomi diyagramı." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59556/59556fig4.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 4"> Şekil 4 : Subklavian ven yeri, klavikula kemik ve üstün sternal fossa. Köprücük kemiğinin altındaki subklavian ven kursları ve üstün sternal fossa altında Üstün Vena Cava içine akar. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59556/59556fig4large.jpg" target="_blank">Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.</a>
<img alt="Kan çıkarma işlemi için kateter yerleştirilmesini gösteren arteriyel kan örnekleme diyagramı." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59556/59556fig5.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 5"> Şekil 5 : Prosedür sırasında damar duvarı ile iğne arasındaki ilişki. (A) subklavian ven duvarları birbirine iğne ileri hareket olarak eklemek, böylece hiçbir kan çizilmiş olabilir. (B) iğne geri çekilirken, duvarlar birbirlerinden ayrı ve kan çekilmiş olabilir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59556/59556fig5large.jpg" target="_blank">Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>Değişken</td>
			<td>Toplam (n = 10)</td>
			<td>Erkek (n = 5)</td>
			<td>Kadın (n = 5)</td>
			<td>P değeri</td>
		</tr>
<tr>
<td>Vücut ağırlığı (g)</td>
			<td>25,3 ± 2,2</td>
			<td>25,3 ± 3,0</td>
			<td>25,4 ± 1,3</td>
			<td>0,926</td>
		</tr>
<tr>
<td>Kan hacmi (μL)</td>
			<td>203,0 ± 11,6</td>
			<td>208 ± 13,0</td>
			<td>198 ± 8,4</td>
			<td>0,187</td>
		</tr>
<tr>
<td>Zaman kursu (lar)</td>
			<td>68,4 ± 26,4</td>
			<td>70,6 ± 35,1</td>
			<td>66,2 ± 18,0</td>
			<td>0,809</td>
		</tr>
<tr>
<td>Para çekme</td>
			<td>2,3 ± 0,9</td>
			<td>2,4 ± 1,1</td>
			<td>2,2 ± 0,8</td>
			<td>0,760</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="4">Gözlenen tüm parametreler için önemli bir cinsiyet farkı yoktu, tüm P değeri &gt; 0.05.</td>
			<td></td>
		</tr>
</tbody></table>Tablo 1: cinsiyeler arasında gözlenen parametreler

Burada, fare subklavian ven kan örnekleri almak için bir protokol sunuyoruz.

Farelerde subclavian ven delinme yoluyla kan toplama

The mouse is the foremost mammalian model for studying human disease and human health. However, blood sample collection from mice is challenging in ...

Farelerde subklavian ven delinme yoluyla kan toplama. Farelerden kan örneği toplanması çoğu araştırma laboratuvarında gereklidir. Farelerde kan toplama için geleneksel yaklaşımlar, 100 mikrolitreden az numune gerektiğinde kuyruk kesmektir.Ancak, terminal olmayan bir zaman noktasında 100 mikrolitreden fazla kan gerekiyorsa, retro-orbital, submandibular kanama veya submental kan toplanması en sık düşünülen tekniklerdir. Bazı yerlerde juguler ven kesi veya kateterizasyon alternatif yöntemler olarak benimsenmiştir. Yine de, yukarıdaki yöntemler fareler için incitici vardır.Bizim resmi araştırmalar temelinde, burada farelerde subklavian ven kan toplama için yeni bir ekonomik ve nazik strateji tanıtmak. Bu teknikle elde edilen kan hacmi ile emniyet ve fizibilite sunulmuş ve tartışılmaktadır. Genel anesteziden sonra fareyi supine pozisyonunda yat.İnfraklaviküler alanı %75 etanol ile temizleyin. Delinmeden önce köprücük kemiği ve suprasternal fossae'yi doğrulayın. Köprücük kemiğinin ortasındaki delik alanını belirleyin.İğneleri üstün ve yukarı suprasternal fossae doğru hareket ettirin, köprücük kemiğinin sadece arka. 3-4 milimetre ileri hareket ettikten sonra, şırıngada negatif basıncı tutun ve iğneyi yavaşça geri çekin. Geri çekilme sırasında kan şırıngaya akacak.Kan topladıktan sonra kanamayı durdurmak için delinme bölgesine 1-2 dakika hafifçe basın. %75 etanol, yapışkan bant, epilasyon maddesi, tüpler, iğne, elektronik terazi, heparin ve tuzlu ile bağlanmış 1.0 mililitreşuzon dahil olmak üzere gerekli malzemeleri hazırlayın. Tatmin edici genel anesteziden sonra fareyi ameliyat masasına supine pozisyonunda ve ven delinmesini kolaylaştırmak için masanın kenarından 2-4 santimetre uzağa yerleştirin.Şekil 2'de gösterildiği gibi uzuvları rahat bir pozisyonda düzeltin. Tüm işlemde entübasyon veya mekanik ventilasyona gerek yoktu. Pamuklu bez ile infraclaviküler alanın etrafına epilasyon uygulayın.Üç dakika sonra, kürk ve görünür kir kaldırmak için, ıslak pamuklu bez ile epilasyon ajan yıkayın. % 75 etanol ile infraclaviküler alanı sterilize, ve sonra temiz gazlı bez ile kuru. Tek parmağınızla köprücük kemiği ve suprasternal fossae yerini belirleyin.Köprücük kemiğinin ortasına yakın bir yerde, delik alanını bulun ve ona yapışın. Deri ve deri altı dokuyu onarmak için sol işaret parmağını delinme bölgesine lateral koyun. Bir kranial suprasternal fossae doğru yatıyordu iğne yukarı doğru hareket ettirin.İğne deri altı dokuya girdikten sonra, sağ elin yüzük parmağı negatif basınç oluşturmak için geriye doğru hareket etmelidir. Şırıngayı 3-4 milimetre ileri doğru hareket ettirin, ama şırınganın içine kan göçü yoksa durun. Sonra yavaşça şırıngayı geri çekin ve negatif basıncı içinde tutun.Çoğu durumda kan geri çekme sırasında şırınga girecek. Kan şırıngaya girdikten sonra şırıngayı düzeltin ve şırıngada toplanan gerekli kan hacmine kadar negatif basıncı koruyun. Kan topladıktan sonra, delinme iğnesini geri çekin ve kanamayı durdurmak için bir ila iki dakika pamuklu bezle delinme bölgesine basın, sonra fareleri kafeslere geri gönderin.Kan örneğini heparin tüpümüze aktarın. Bu işlemi 10 Quimi faresinde tekrarladık. Sağ tarafta dokuz işlem başarılı oldu.Bir olgu sağ tarafta üç denemede başarısız oldu ve kan toplama sol tarafta başarılı oldu. Zaman kursu 35 ile 126 saniye arasında değişmektedir. Kan toplama hacmi yaklaşık 200 mikrolitre olarak belirlenmiştir.Kan toplama bir ila dört deneme ile başarılı oldu. Kan örneklemesi iki farenin ilk denemesinde ve bir farede dört denemede, diğer farelerde 2-3 denemede başarılı oldu. Tüm veriler Tablo 1'de gösterilmiştir.Tüm hayvanlar hayatta kaldı ve kan örneği alındıktan sonra 30 dakika içinde iyileşti. Gözlenen tüm parametreler için cinsiyet arasında anlamlı bir fark yoktu. Sonuç olarak, subklavian ven delinmesi farelerde kan toplama için güvenli ve etkili bir yöntemdir.Kuyruk damar kesme ve retro-orbital pleksus kan toplama yanı sıra, bu yöntem uygulanabilir ve farelerde çeşitli zaman noktalarında gözlemsel araştırmalar için uygundur.

blood-collection-through-subclavian-vein-puncture-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Burada, sıçan subklaviyan ven kan örnekleri toplamak için bir protokol mevcut.

Subklaviyan ven ponksiyon kan örnek fareleri koleksiyonunda alternatif bir yöntem olarak

Bu çalışmada kan örnekleme kuyruk ven gözlük büyüteç ile bir vakum ekstraksiyon tüp sistemi kullanan farelerde gelen raporlar. Bizim Yöntem uygulama için kolay ve tekrar kan örnekleme farelerde için kullanılabilir.

Kuyruk damarlar bir vakum kan toplama sistemi ve gözlük büyüteç ile sigara anestezi farelerin koleksiyonundan değiştirilmiş kan

Mevcut protokol, sıçanlarda subklaviyen damardan kan toplamak için basit ve etkili bir yöntemi açıklamaktadır. Anestezi olmadan hızlı, zamanında ve kolayca tanımlanabilir örnekleme sağlar ve tekrarlayan numune toplama yoluyla yüksek kaliteli kan elde eder.

Bilinçli Sıçan Subklaviyen Veninden Tekrarlayan Kan Örneklemesi

Burada, sıçanlarda anestezi olmadan hızlı, güvenli ve tekrarlanan kan alımını sağlayan etkili sıçan kısıtlaması ve subklavyen ven ponksiyon yöntemlerinin bir kombinasyonunu sunuyoruz.

Bilinçli Sıçanlarda Subklavyen Ven Kan Örneklemesi

Burada, bir neşter kullanarak yüz ven damar delinmesi yoluyla murin deneklerinde optimize edilmiş bir kan alma tekniği için bir protokol sunuyoruz. Bu tekniği, transgenik, konjenik ve raportör suşların hücresel fenotiplerini karakterize etmek için akış sitometrik değerlendirmenin yanında kullanıyoruz. Ayrıca serum sitokin analizi ve diyabet çalışmaları için de uygundur.

Murin Kan Alımı için Yüz Ven Damar Delme

Subklavian kardiyak ponksiyon, farelerde terminal kan toplamak için basit ve güvenilir bir yöntemdir. Kullanımı kolaydır ve yüksek saflıkta örnekler sağlar.

Farelerde Subklavian Ponksiyon Yoluyla Kalp Kan Toplama

Çekal ligasyon ve ponksiyon insan sepsis çalışma için değerli bir araç olarak fare modeli.

Çekal ligasyon Delinme Prosedürü

Merkezi sinir sistemi içine yenidoğan farelerin beyin (intraserebroventriküler) ve (intravenöz) 2) sistemik tedavi ajanları tanıtmak içine 1): Bu makale, enjeksiyon iki çok farklı yöntemler göstermektedir.

Fare intraserebroventriküler sayesinde Terapötik Ajanlar teslimi (ICV) ve intravenöz (IV) Enjeksiyon

Biyomarkerler hastalık veya sağlık direkt ölçülen biyolojik göstergelerdir. Nüfus ve sosyal bilimlerde, biyolojik belirteçler, taşıma elde etmek kolay, ve analiz etmek gerekir. Kurutulmuş Kan Noktası (DBS) koleksiyonu bu ihtiyacını karşılayan, yüksek yanıt oranları ile alanda toplanan ve biyomarkerler çeşitli analiz edilebilir.

Sağlık Biyomarkörler Kan Toplama Noktası Nüfus Etütleri Katılımını özdeyiş Kurutulmuş

İntravital mikroskopi, hayvanlarda retina vasküler çaplarını, kan dolaşım hızlarını ve toplam retinal kan akışını görselleştirmek ve ölçmek için kullanılabilir.

Farelerde Retinal Kan Akışının İntravital Video Mikroskobu Ölçümleri

Keşfedin, farelerde subclavian ven delinme yoluyla güvenli ve etkili kan toplama yöntemini. Bu teknik yaklaşık 200 mikrolitre kan alınmasını sağlar ve hayvan refahını korur.

Farelerde subclavian ven delinme yoluyla kan toplama

Daha fazla video keşfet