Name: Büyük ve küçük hayvanlarda kuduz Necropsy teknikleri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-07-30T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 56 s
Description: Öğrenin küçük ve büyük hayvanlarda güvenli kuduz nekropsi tekniklerini. Bu yöntemler aerosol oluşumunu en aza indirerek beyin sapı ve serebellum örneklemesi yapar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz bu projeyi desteklemek için sağlık Wadsworth Center New York Eyalet Bakanlığı minnettar. Biz de Amy Willsey ve Frank Blaisdell bölümü sağlık Wadsworth merkezi ve LL Ranch, Altamont, NY destek kabul etmek istiyorum.

Açıklanan tüm yöntemler Wadsworth Center kurumsal hayvan bakımı ve kullanım Komitesi (ıAYUC) tarafından onaylanmıştır.
1. hazırlık
<ol><li>Don PPE, minimum göz koruması (gözlük veya yüz kalkanı), cerrahi veya N-95 maske ve lateks içermeyen eldivenler.</li>
	<li>Tek kullanımlık çalışma yüzeyi (örn. Kraft kağıt veya emici pedler) ve temiz Otopsi aletleri (Şekil 1) ile, ideal olarak bir bio-güvenlik dolabı (BSc), çalışma alanı hazırlayın.</li>
	<li>Numunenin çalışma yüzeyine yerleştirin ve dekompasyonu, kafatası hasarı, olası tehlikeleri (örneğin, kirpi quills, neşter bıçakları) ve kırılma kalitesi de dahil olmak üzere numunenin durumunu değerlendirmek için araçları kullanın.</li>
</ol>2. ventral Yöntem
Not: örnek düzgün çene hattı, foramen magnum ve oksipital kondyle açık olacak dekolçlama olduğunda. Ventral yöntemi, beyinli ve beyin kökü almak için daha az karmaşıktır.
<ol><li>Örnekten ventral yan yukarı ve burun BSC arka doğru distale yönlendirme ile konumlandırın.</li>
	<li>Bir ortopedik çekiç/Mallet sağ elle (sağ el) ve aynı zamanda bir meclis üyesi sol elinde kesmeli tutun tutun.</li>
	<li>Bir "V" açılış yapma temporal kemik ve oksipital kemik sağ tarafı arasında yönlendirmenin köşe noktası ile 45 ° açı kesikli konumlandırın.</li>
	<li>İki kemik ayrı kadar çekiç ile kesikli üst grev. Basisphenoid kemiğinin bitişiğinde kesim yapın.</li>
	<li>Temporal kemik/oksipital kemiğin sol tarafında tekrar edin (Şekil 2a).</li>
	<li>Kafatasının "V" alanını keskiyle aşağı doğru bend. Beynin tüm rhombencephalon alanını (serebellum ve beyin kökü) açığa çıkarır (Şekil 2B).</li>
	<li>Beyin sapı ve beyinli makas ve forseps ile dışarı Scoop. Beyin kökü ve serebellum tek bir parça içinde çıkmadı Eğer kafatası kalan tüm parçaları çıkarın.</li>
</ol>3. dorsal yöntemi
Not: numune (foramen magnum görünmez) kötü bir debelitasyon varsa ve boyun kolayca otopsi sırasında kaldırılamaz veya beyine zarar şüpheleniyorsanız, dorsal yöntemi kullanılmalıdır.
<ol><li>Numunenin burun ile dorsal, BSC arka doğru distale yönlendirerek konumlandırın.</li>
	<li>Tümör tenacula kullanarak, tenacula dişleri ile sol temporal kas kavramak ve kolu sıkarak kilit.</li>
	<li>Keskin oyma bıçağı ile kemik aşağı temporal kas kes.</li>
	<li>Numune 180 ° ' yi tenacula ve bıçakla döndürün (el değil) ve ters temporal kas üzerinde işlemi tekrarlayın. Kafatasını açığa çıkarın.</li>
	<li>Parietal ve intraparietal kemik kavşakında kafatası ortasına kesenin köşe noktası ile 45 ° açı bir kesikli konumlandırın.</li>
	<li>Parietal kemik kafatası üst yarısında yatay bir açılış yapılıncaya kadar bir çekiç ile kesin üst grev.</li>
	<li>Numuneyi 180 ° döndürün ve işlemi ters tarafta tekrarlayın.</li>
	<li>Kesim 1 ' in sonuna (Şekil 3A) ve 90 ° ' lik yatay açılarak kesin noktasını yerleştirin. Açılış Oksipital kemiğe ulaşana kadar çekiç ile grev (numunenin boyutuna bağlı olarak yaklaşık 10 cm).</li>
	<li>Numuneyi yuvarlayın ve kesme 2 ' nin sonundaki ters tarafta tekrarlayın. Not: BSC 'nin arkasına doğru yerleştirilmiş numune dorsal ve burun Ile kafatasındaki açıklıklar bir baş aşağı "U" benzer.</li>
	<li>"U" altındaki kafatası içine tenacula dişleri takın ve kendini doğru burnumu. Beyin ve serebellum (Şekil 3B) kaudal ucunu açığa çıkarın.</li>
	<li>Bir kepçe olarak makas kullanın ve boşluğun içinden tüm serebellum dışarı burnumu.</li>
	<li>Foramen beyin kök kızdırmak için doku forseps kullanın.</li>
</ol>4. büyük hayvan yöntemi
<ol><li>Numuneyi, kafatasının dorsal kısmının, kafatası ve foramen magnum 'un teknisyene bakan kaudal kısmı ile otopsi yüzeyi ile temas etmesi için konumlandırın.</li>
	<li>Değiştirilmiş Stiletto bıçağı omurilik ve spinal meningler arasında mümkün olduğunca foramen magnum içine yerleştirin.</li>
	<li>Spinal meninges serebellum ve beyin kökü ayırmak için omurilik etrafında puan. Bıçak foramen magnum aracılığıyla yerleştirildikten sonra, yavaşça kafatası boyunca takip etmek için bıçak açı mümkün olduğunca.</li>
	<li>Nöral doku ve spinal meningler arasındaki uzaya bir kimya spatula veya ince, uzun işlenmiş kaşık yerleştirin.</li>
	<li>Spinal menenjlerin bağlantı sağlamak için omurilik ve beyine etrafında prob kesilmiş olmuştur.</li>
	<li>Beyin sapı forseps ile tutun. Öte yandan, kaşık rostrally sonra dorsal serebellum kadar toplamak için ilerlemek. Aynı anda forseps ile beyin kökünü geri çekin ve kaşık kullanarak serebellum dışarı kepçe. Not: kuduz testi için yeterli serebellum kurtarmak için birden fazla girişimde bulunabilir.</li>
</ol>5. Post nekropsy
<ol><li>Tüm tek kullanımlık malzemelerin (eldiven, pedler, çalışma alanı kaplamaları) ve kullanılmayan dokularda biyotehlikeli atıkların atılması.</li>
	<li>Tüm enstrümanları (örn. Endüstriyel Bulaşık makinesi, otoklav, kimyasal dezenfektan, kaynatma) kullanılabilir yöntemle temizleyin ve dezenfekte edin.</li>
	<li>% 20 çamaşır suyu ve/veya% 70 etanol ile tüm çalışma yüzeylerini temizleyin ve dezenfekte edin.</li>
</ol>

<ol><li>Centers for Disease Control and Prevention (CDC). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((West+Nile+virus+activity+-+United+States%2C+2009%5BTitle%5D)+AND+%22MMWR+Morbidity+and+Mortality+Weekly+Report%22%5BJournal%5D)">West Nile virus activity - United States, 2009.</a> MMWR Morbidity and Mortality Weekly Report. 59 (25), 769-772 (2010).</li>
<li>McDaniel, C. J., Cardwell, D. M., Moeller, R. B. Jr, Gray, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Humans+and+cattle%3A+A+review+of+bovine+zoonoses%5BTitle%5D)+AND+%22Vector+Borne+and+Zoonotic+Diseases%22%5BJournal%5D)">Humans and cattle: A review of bovine zoonoses.</a> Vector Borne and Zoonotic Diseases. 14 (1), 1-19 (2014).</li>
<li>Spickler, A. R. Zoonotic diseases. Merck Veterinary Manual. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://www.merckvetmanual.com/public-health/zoonoses/zoonotic-diseases">https://www.merckvetmanual.com/public-health/zoonoses/zoonotic-diseases</a> (2019).</li>
<li>Wenner, L., Pauli, U., Summermatter, K., Gantenbein, H., Vidondo, B., Posthaus, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aerosol+generation+during+bone-sawing+procedures+in+veterinary+autopsies%5BTitle%5D)+AND+%22Veterinary+Pathology%22%5BJournal%5D)">Aerosol generation during bone-sawing procedures in veterinary autopsies.</a> Veterinary Pathology. 54 (3), 425-436 (2017).</li>
<li>Green, F. H. Y., Yoshida, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characteristics+of+aerosols+generated+during+autopsy+procedures+and+their+potential+role+as+carriers+of+infectious+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Occupational+and+Environmental+Hygiene%22%5BJournal%5D)">Characteristics of aerosols generated during autopsy procedures and their potential role as carriers of infectious agents.</a> Applied Occupational and Environmental Hygiene. 5 (12), 853-858 (1990).</li>
<li>Barrat, J. Simple technique for the collection and shipment of brain specimens for rabies diagnosis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBarrat%2C+J+%22Laboratory+techniques+in+Rabies+4th+Edition%22">Laboratory techniques in Rabies 4th Edition</a>. Meslin, F. X., Kaplan, M. M., Koprowski, H. , World Health Organization. 425-427 (1996).</li>
<li>Ness, S. L., Bain, F. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+to+perform+an+equine+field+necropsy%5BTitle%5D)+AND+%22American+Association+of+Equine+Practitioners%22%5BJournal%5D)">How to perform an equine field necropsy.</a> American Association of Equine Practitioners. 55, 313-316 (2009).</li>
<li>Animal & Plant Health Agency. Sample requirements for TSE testing and confirmation – EURL guidance. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://protect2.fireeye.com/url?k=09f00f8d-55d40ec4-09f2f6b8-0cc47aa8d394-3f805f032cc98df8&u=https://science.vla.gov.uk/tse-lab-net/documents/tse-oie-rl-samp.pdf">https://protect2.fireeye.com/url?k=09f00f8d-55d40ec4-09f2f6b8-0cc47aa8d394-3f805f032cc98df8&u=https://science.vla.gov.uk/tse-lab-net/documents/tse-oie-rl-samp.pdf</a> (2019).</li>
<li>New York State Department of Health, Wadsworth Center. Rabies reports. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://www.wadsworth.org/programs/id/rabies/reports">https://www.wadsworth.org/programs/id/rabies/reports</a> (2019).</li>
<li>CDC. Protocol for postmortem diagnosis of rabies in animals by direct fluorescent antibody testing: A minimum standard for rabies diagnosis in the United States. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://www.cdc.gov/rabies/pdf/rabiesdfaspv2.pdf">https://www.cdc.gov/rabies/pdf/rabiesdfaspv2.pdf</a> (2019).</li>
<li>Miller, L. D., Davis, A. J., Jenny, A. L., Fekadu, M., Whitfield, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surveillance+for+lesions+of+bovine+spongiform+encephalopathy+in+U.S.+cattle%5BTitle%5D)+AND+%22Developments+in+Biological+Standardizations%22%5BJournal%5D)">Surveillance for lesions of bovine spongiform encephalopathy in U.S. cattle.</a> Developments in Biological Standardizations. 80, 119-121 (1993).</li>
<li>Andrews, C., Gerdin, J., Patterson, J., Buckles, E. L., Fitzgerald, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eastern+equine+encephalitis+in+puppies+in+Michigan+and+New+York+states%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Veterinary+Diagnostic+Investigation%22%5BJournal%5D)">Eastern equine encephalitis in puppies in Michigan and New York states.</a> Journal of Veterinary Diagnostic Investigation. 30 (4), 633-636 (2018).</li>
<li>Appler, K., Brunt, S., Jarvis, J. A., Davis, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clarifying+indeterminate+results+on+the+rabies+direct+fluorescent+antibody+test+using+real-time+reverse+transcriptase+polymerase+chain+reaction%5BTitle%5D)+AND+%22Public+Health+Reports%22%5BJournal%5D)">Clarifying indeterminate results on the rabies direct fluorescent antibody test using real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction.</a> Public Health Reports. 134 (1), 57-62 (2019).</li>
<li>Chapter 7. Brain removal. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Laboratory+techniques+in+Rabies+5th+Edition%22">Laboratory techniques in Rabies 5th Edition</a>. Rupprecht, C. E., Fooks, A. R., Abela-Ridder, B. , World Health Organization. 67-72 (2018).</li>
</ol>

Yazarların ifşa etmesi gereken hiçbir şey yok.

Kuduz otopsi için gönderilen numuneler genellikle nörolojik bir hastalıktır ile uyumlu klinik belirtiler öyküsü vardır. Klinik hastalığın varlığı, Zoonotik hastalıklar da dahil olmak üzere çeşitli bozukluklar ile ilişkili olabilir, bir laboratuar personeli için risk artan enfeksiyon elde. Bu riskleri azaltmak için, numunelerin işlenmesi ve manipülasyonunu azaltan teknikler uygulanmaktadır.
Gösterilen Yöntemler sadece tek bir hayvandan istenen dokulardan kaldırmak için bir otopsi olay temsil ed...

Kuduz laboratuarının otopsi katında çalışmak doğal olarak tehlikelidir. Zaman zaman, numuneler gömülü kirpi quills, oklar/mermi/granül veya koruyucu nakliye Wrap nüfuz olabilir maruz kemik parçaları dahil yabancı nesneler ile gelir. Yanlış paketleme, numuneleri açmak isteyen bireyleri tehlikeye atarak sızıntıya neden olabilir. Fiziksel yaralanmalara ek olarak, otopsi teknisyenler CNS ve numunelerin vücut sıvılarından bilinmeyen zoonotik bulaşıcı ajanlar maruz risk. Ayrıca, numune tarafından taşınan Ektoparazitleri diğer zoonotik hastalıkları iletebilir, Pire ve keneler yaygın olarak sunulan hayvanların görülür. Coğrafi konuma ve türlere bağlı olarak maruz kalan hastalıklar farklılık gösterir. Doğu Equine Ensefalit virüsü (eeev) veya Batı Nil virüsü (WNV) gibi arbovirüsler, Lyme hastalığı veya Tularemi de dahil olmak üzere kene kaynaklı hastalıklar, Q ateşi veya tüberküloz neden bakteri, ve bulaşıcı prionlar olası tehlikeleri az sayıda isim1 , 2 , 3' ü yapın.
Bu yöntemlerin amacı, elektrikli aletlerin veya testere4,5' in aksine aerosolizasyon potansiyelini en aza indiren enstrümanları kullanarak güvenli ve verimli nekropsy teknikleri göstermektir. Genellikle, kuduz laboratuarında küçük hayvanların Nekropsi kranial kaslar uzağa kesme ve bir çekiç kullanarak ve kalvarium6kaudal dorsal kısmını açmak için kesmeli gerektirir. Kalvarium bu alanın çıkarılması arka beyin ortaya çıkarır, tüm beyinli ve kranial beyin kökü de dahil olmak üzere. Değiştirilmiş Otopsi teknikleri kafatası ventral kısmında yapılabilir, büyük kranial kaslar ve kafatası kalın bölgelerden kaçınarak. Ancak, bu değiştirilmiş Otopsi teknikleri sadece numune servikal vertebra olmadan mümkündür.
Benzer şekilde, büyük hayvanlarda beyin dokusu kafatası kasları ayırarak ve kafatasının kaudal dorsal kısmını açarak kaldırılabilir7. Büyük hayvanların kafatasları genellikle kalın olarak beyinli ve beyin kökü açığa çıkarmak için önemli çaba gereklidir. Kafatasının nüfuz edilmesini önlemek için, büyük bir hayvanın kafası, kafatasının Ventro-caudal kısmı teknisyene bakacak şekilde konumlandırılır. Modifiye enstrümanları kullanarak, serebellum ve beyin kökü foramen magnum üzerinden kaldırılır. Bu, TSE Avrupa Birliği referans laboratuvarı tarafından önerilen, Trans, Spongiform ensefalopati (TSE) araştırmaları için tavsiye edilen örnek edinme yöntemine benzerdir8. Cranial vertebra önceden foramen magnum erişim sağlamak için kaldırılmalıdır.
Bu tekniklerin uygulanması, kuduz laboratuvarlarında uygun şekilde eğitimli teknisyenler için faydalıdır. Kuduz laboratuvarı çeşitli boyutlarda örnekler aldığında, juvenil yarasalar yetişkin taslak atlar9, teknisyen bireysel koşula göre seçim için çeşitli yöntemler vardır. Büyük bir hayvan için gösterilen yöntem, alanda otopsi gerçekleştiren veterinerler için de uygundur, çünkü kuduz testi için tüm büyük bir hayvan kafası nakliye hantal ve pahalıdır. Bu tekniklerden herhangi birini uygulamak, aerosol üretiminin potansiyelini azaltarak, numunenin işlenmesini azaltarak ve işlem süresini tasarruf ederek güvenliği artıracaktır. Ancak, alanda kuduz testi için özel olarak ayarlanan bir laboratuar ile aynı avantajlara sahip olmadığı için, bu prosedürlerde yapılan değişikliklerin özellikle kişisel koruyucu ekipmanların (PPE) kullanımı güvenlik üzerine odaklanmasını gereklidir.

<table><tbody><tr><td>Kimya kaşığı</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kavisli, keskin künt mayonez makası</td><td>Sklar</td><td>14-2055</td><td>Sklar Ameliyat Makası 5-1 / 2 İnç Premium VEYA Sınıf Paslanmaz Çelik Parmak Yüzük Sapı Kavisli Keskin/Küt</td></tr><tr><td>Büyük keskin restoran kalitesinde oyma bıçağı</td><td>Dexter</td><td>P94848</td><td>8" Taraklı Maket Bıçağı, beyaz saplı</td></tr><tr><td>Kilitleme tümör-tenacula</td><td>Diamond Scientific ve Cerrahi N</td><td>/A</td><td>Czerny Tenaculum Forcep</td></tr><tr><td>Modifiye stiletto bıçağı (6,5 inç uzunluğunda bıçak oyma bıçağı, 0,5 inç genişliğinde taşlanmış)</td><td>Dexter</td><td>P94848</td><td>Modifiye 8" Taraklı Maket Bıçağı, beyaz saplı</td></tr><tr><td>Ortopedik tokmak-çekiç</td><td>Mortech</td><td>N/A</td><td>Kancalı Ölüm sonrası çekiç</td></tr><tr><td>Keskin konsey üyesi ortopedik kemik keski</td><td>Shandon</td><td>60-5</td><td>Meclis Üyesinin Keski Bıçağı: 2 inç x 2,25 inç standart 7 inç</td></tr><tr><td>Keskinleştirilmiş yemek kaşığı veya başka bir uzun saplı kaşık</td><td>Herhangi Bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dişsiz düz uçlu doku pansuman forsepsleri</td><td>Shandon</td><td>63-03</td><td>Shandon Geniş Nokta Pansuman Başparmak Forseps</td></tr><tr><td>Pudrasız lateks olmayan eldivenler</td><td>Herhangi Bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Güvenlik gözlüğü, gözlük veya yüz siperi</td><td>Herhangi</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ameliyat veya N-95 maskesi</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kraft kağıdı, kasap kağıdı, emici ped vb</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>. Herhangi

büyük ve küçük hayvanlarda kuduz necropsy teknikleri

Rabies Necropsy Techniques in Large and Small Animals

New York Devlet Sağlık Bakanlığı (NYSDOH) kuduz Laboratuvarı her yıl 9.000 numuneleri 6.000 arasında alır ve New York dışında tüm devlet için kuduz testi gerçekleştirir. Kuduz Laboratuvarı, yarasalardan boporn 'a kadar olan çeşitli hayvanları otopsi. Bu numunelerin çoğu hayvan nörolojik işaretler sergileme, ancak, az 10% aslında kuduz için test pozitif; Bu semptomların nedeni olarak travma, lezyonlar veya diğer bulaşıcı ajanlar ima. Tanısı konulmamış bulaşıcı ajanlar aerosolizasyon riski nedeniyle, kuduz Laboratuvarı elektrik aleti veya testereleri kullanmaz. Kafatasları makas ile girilmez hayvanlar için üç Otopsi teknikleri sunulacak. Laboratuar, enfeksiyöz ajanlar için potansiyel maruz kalma azaltmak, numunenin gereksiz manipülasyon ortadan kaldırmak ve işlem süresini azaltmak için bu teknikleri uyguladı. Tercih edilen bir tekniğin diğerine karşı avantajları, numunenin eğitilmiş bireyin işlenmesine tabidir.

31 Ocak 2019 ve 28 Şubat 2019 tarihleri arasında kafatası ile gönderilen tüm karasal numuneler, bir boyun varlığı ve toplanan otopsi yöntemi ile ilgili bilgiler vardı. Bu süre zarfında 170 kafaları temsil edilen 18 tür ile necropsied edildi. 52% (89/170) düzgün bir şekilde çökmemiş. Kalan üç tüm vücut örnekleri dahil olmak üzere en az bir vertebra bağlı vardı. % 75 (128/170) kullanılan ventral Yöntem, o zaman, bu boynları, 49 tarihinde mevcuttu. Bir boyun ile gönderilen numuneler mümkün o...

Bu protokolün amacı, kuduz testi için tatmin edici doku örnekleri elde etmek için küçük ve büyük hayvanlarda güvenli Otopsi teknikleri göstermektir.

Büyük ve küçük hayvanlarda kuduz Necropsy teknikleri

The New York State Department of Health (NYSDOH) Rabies Laboratory receives between 6,000 to 9,000 specimens annually and performs rabies testing for the ...

Kuduz testi için doku toplama hem bariz hem de belirgin tehlikeleri vardır. Teknisyen mevcut en güvenli yöntemleri kullanmalı ve uygun kişisel koruyucu ekipman giymelidir. Bu protokoller, elektrikli aletler veya testereler kullanmadan güvenli nekropsi teknikleri sağlar ve aerosol üretimini en aza indirir.Büyük hayvan protokolü de alanında yapılabilir. Sahada büyük hayvan numune salma yönteminin kullanılması, 45 kilogram ağırlığındaki bir hayvan kafasının laboratuvara taşınması zorluğunu ortadan kaldırır. Büyük hayvan yöntemi, transmissible süngerimsi ensefalopati örnek alımı için Avrupa protokolüne benzer ve beyin sapı ve beyincik kullanılarak herhangi bir araştırma için kullanılabilir.Ventral yöntemle beyincik ve beyin sapını almak için, numune ventral tarafını biyogüvenlik kabininin arkasına doğru distal olarak yönlendirilen burunla yukarı doğru yerleştirin. Baskın elinde bir ortopedik tokmak ve diğer taraftan bir meclis üyesi keski tutarak, temporal ve oksipital kemiklerin sağ tarafı arasında V şeklinde açıklık keski köşe noktası ile 45 derecelik bir açıyla keski yerleştirin. İki kemik ayrılana kadar keski tokmak ile üst vurun.Ve bazfenoid kemiğe bitişik bir kesik yapın. Az önce gösterildiği gibi, numunenin sol tarafındaki zamansal ve oksipital kemikleri ayırın. Ve beynin tüm rhombencephalon alanını ortaya çıkarmak için kafatasının V bölgesini aşağı doğru bükmek için keski kullanın.Daha sonra, beyin sapı ve beyincik dışarı kepçe makas ve forceps kullanın, gerektiğinde kafatasından kalan doku parçaları kaldırarak. Numune ventral alma pozisyonuna izin vermiyorsa, burun biyogüvenlik kabininin arkasına distal olarak yönlendirilmiş numune yiyişdirilir. Ve tenacula dişleri ile sol temporal kas kavramak için bir tümör tenacula kullanın.Doku etrafında dişleri kilitlemek için kolu sıkmak ve kemiğe temporal kas kesmek için keskin bir oyma bıçak kullanın. Tenakula ve bıçakla numuneyi 180 derece döndürün ve kafatasını ortaya çıkarmak için karşı temporal kastaki kesiği tekrarlayın. Başın orijinal yönünü döndürün ve keskiyi köşe noktası yla birlikte kafatasının ortasına, parietal ve intraparietal kemiklerin tam ortasındaki keskiye yerleştirin.Ve parietal kemik kafatasının üst yarısında yatay bir açıklık yapılana kadar tokmak ile keski üst grev. Örneği 180 derece döndürün ve kafatasının karşı tarafında az önce gösterildiği gibi bir açıklık yapın. Keski noktasını yatay açıklığa 90 derecelik bir açıyla ilk kesiğin ucuna yerleştirmek için gerekli olan başlığı yerleştirin ve açıklık oksipital kemiğe ulaşana kadar keskiye vurun.Aynı şekilde karşı oksipital kemik üzerinde bir açıklık yapmak için örnek rulo. Kafatasındaki açıklıklar, tenaculanın dişlerini alttaki kafatasına ters bir U.Insert'e benzemelidir ve serebrumun ve beyincik leilgili kaudal ucunu ortaya çıkarmak için kemiği geriye doğru çekmelidir. Sonra kavite içinde tüm beyincik dışarı gözetlemek için bir kepçe olarak makas kullanın.Ve foramenin beyin sapını çıkarmak için doku forsepsi kullan. Büyük hayvan serebellum ve beyin sapı alımı için, kafatasının dorsal kısmı nekropsi yüzeyi ile temas halinde olacak şekilde örnek konumlandırın. Kafatasının kaudal kısmı ve foramen magnum biyogüvenlik kabinesinin ön kısmına bakacak şekilde.Beyin sapını forceps ile kavrayın. Omurilik ve omurilik meninges arasında foramen magnum içine değiştirilmiş bir stiletto bıçak yerleştirin ve beyincik ve beyin sapı omurilik meninges ayırmak için omurilik etrafında ovmak. Sonra foramenin sapını forsepsle çıkar.Bıçak foramen magnum aracılığıyla takıldığında, yavaşça mümkün olduğunca kafatası boyunca takip etmek için bıçak açı ve nöral doku ve spinal meninges arasındaki boşluğa beyin altında ulaşmak için yeterince uzun bir sapı ile metal bir spatula veya bıçak takın. Omurilik menenjitlerinin koptuğundan emin olmak için beyincik çevresinde sonda. Menenjler tamamen kesildiğinde spatula rostrally ve dorsally beyincik kadar kepçe için ilerlemek.Sonra spatula ile beyincik dışarı kepçe. 31 Ocak 2019 ile 28 Şubat 2019 tarihleri arasında kafatasları ile gönderilen tüm karasal örneklerde boyun varlığı ve toplanan nekropsi yöntemi hakkında bilgiler vardı. Bu süre zarfında 170 baş nekropsied edildi ve 18 tür temsil edildi.%52'si düzgün bir şekilde kafası kesildi. Geri kalan üç bütün vücut örneği de dahil olmak üzere bağlı en az bir omur vardı. Ventral yöntem %75 oranında kullanıldı.Bunlardan 49'unda boyunlar vardı. Üç büyük hayvan teslim edildi ve iki durumda, büyük hayvan protokolü kullanıldı. Bir sincap ezilmiş bir kafatası ile sunuldu ve sadece deri kesip beyin dokusu maruz böylece gösterilen yöntemlerin hiçbiri kullanılmadı.Birden fazla hayvanı işlerken mikroskobik slaytlar yapmak için kullanılan veya moleküler yöntemlerden çıkarılan dokular, yeni eldiven aletleri ve temiz bir çalışma alanı kullanarak çapraz kontaminasyonu önler. Örnekler kuduz virüsü veya diğer zoonotik hastalıklar ile enfekte olabilir gibi bu protokolleri yaparken dikkatli olun. Keskin nesnelerin numunelerin içinde de bulunabileceğini unutmayın.

rabies-necropsy-techniques-in-large-and-small-animals

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Bu makale, bir fare veya sıçan bir temel postmortem muayene yapılması için usul ve toplama temel organlarının yanı sıra, histolojik, mikrobiyolojik ve PCR değerlendirilmesi için daha zorlu örnek türleri açıklanmaktadır.

Tanı Otopsi ve Sıçanlar ve Fareler Seçilmiş Doku ve Örnek Toplama

Bu video, enfekte fare beyin dokusunda kuduz virüsü antijeni tespiti için immünohistokimya boyamayı göstermektedir. Süreç, deparafinizasyon ve alkol tedavisini, ardından antijen erişilebilirliğini artırmak için proteolitik tedaviyi içerir. İmmünohistokimya boyama, doku bölümünde kuduz antijenlerinin varlığını doğrulayan kırmızı çökeltileri ortaya çıkarır.

Kuduz Virüsü Antijenlerinin Saptanmasına Yönelik Bir İmmünohistokimya Boyaması

Bu iletişim kuralı kimliği ve lenf düğümlerinden hayvancılık ve yaban hayatının yaklaşımlar örnekleme, eksizyon adımlar dahil olmak üzere büyük hayvanlar dokulardan lenf nodu transcriptomic profilleme için RNA izolasyonu için yordamlar genel bakış sağlar sonrası koleksiyonu saklama ve işleme için RNA analizi için birden fazla hayvan ve dikkat edilmesi gereken noktalar artı temsilcisi sonuçları arasında tutarlılığı sağlamak için.

Toplanması ve işlenmesi büyük hayvanlar lenf düğümlerinden RNA analizi için: büyük hayvan türlerinin lenf nodu Transcriptomic çalışmalar için hazırlanıyor

Yeni, immünostasyon uyumlu doku Temizleme teknikleri gibi solvent temizlenmiş organların nihai 3D görüntüleme kuduz virüsü beyin enfeksiyonu ve karmaşık hücresel çevre 3D görselleştirme sağlar. Kalın, antikor etiketli beyin dokusu dilimleri, görüntüleme derinliğini artırmak ve konfetik lazer tarama mikroskobu ile 3D analizini sağlamak için optik olarak şeffaf hale gelmiştir.

Solvent-temizlenmiş beyin dokusu kuduz virüs enfeksiyonu yüksek çözünürlüklü 3D görüntüleme

Doğrudan hızlı immünhistokimyasal test (DRIT), kuduz tanısı için doğrudan floresan antikor (DFA) testine alternatif olarak tanınan hayvan sağlığı ve Dünya Sağlık Örgütü (OIS/WHO) için bir dünya organizasyonu sunmaktadır. Bu test, ışık mikroskobu kullanarak beyin gösterimleri üzerine yaklaşık 1 saat içinde gerçekleştirilebilecek alan tabanlı uygulamalar için izin verir.

Doğrudan hızlı Immünhistokimyasal testi kullanarak gelişmiş kuduz gözetimi

Bu protokol Tayvan yarasalar lyssavirus antijenlerin tanısal test için standart bir laboratuvar işletim prosedürü tanıttı.

Tayvan'da Yarasa Popülasyonunun Lyssavirus Gözetimi için Standart Çalışma Prosedürü

Bir Pan-Lyssavirus iç içe Ters transkripsiyon polimeraz zincir reaksiyonu özellikle tüm bilinen lyssaviruses algılamak için geliştirilmiştir. Farklı hayvan türlerinin kuduz beyin örneklerini kullanarak doğrulama Bu yöntemin altın standart floresan antikor testi için bir duyarlılık ve özgüllük eşdeğer olduğunu gösterdi ve rutin kuduz tanısı için kullanılabilir.

Lyssaviruses tespiti için evrensel Iç Içe Ters transkripsiyon polimeraz zincir reaksiyonu değerlendirilmesi

Beyin biyopsisi örneklemesinden son yoruma kadar hızlı immünokromattografik tanı testi (RIDT) ile alan koşullarında hayvan kuduzlarının postmortem tanısı için tam bir protokol salıyoruz. Ayrıca moleküler analiz ve viral genotipleme için cihazı kullanarak daha fazla uygulama açıklar.

Field Postmortem Kuduz Hızlı İmmünromatografik Tanı Testi Kaynak Sınırlı Ayarlar için Diğer Moleküler Uygulamalar ile

Bu protokol, in vitro transkripsiyon kullanarak çeşitli sığır beyin anatomik yapıları içindeki kuduz virüsü nükleoprotein (N) gen kopya numarasını belirlemek için qRT-PCR tabanlı bir yaklaşım sunar.

Çeşitli Sığır Beyin Yapılarında Kuduz Virüsünün Nicelliği

Bu protokol, bazı kuduz olmayan lizavirüsler ve lagomorflar için test performansını iyileştirmek için primer dizileri ve formülasyonlardaki güncellemeler de dahil olmak üzere, doku toplamadan sonuç yorumlamaya kadar pan-lizavirüs LN34 gerçek zamanlı ters transkripsiyon-polimeraz zincir reaksiyonu (RT-PCR) testini gösterir. Ayrıca, tek kuyulu LN34 çoğullanmış (LN34M) formatı için tahlil kurulumunu da gösteriyoruz.

Güncellenmiş, Çoğullanmış LN34 Gerçek Zamanlı Ters Transkripsiyon-Polimeraz Zincir Reaksiyonu Testi ile Hayvanlarda Kuduz Postmortem Tanısı

Öğrenin küçük ve büyük hayvanlarda güvenli kuduz nekropsi tekniklerini. Bu yöntemler aerosol oluşumunu en aza indirerek beyin sapı ve serebellum örneklemesi yapar.

Büyük ve küçük hayvanlarda kuduz Necropsy teknikleri

Daha fazla video keşfet