Name: Farelerde Kalp Yetmezliğine Neden Olmak Için İzoproterenol Mini PompasıNın İmplantasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-10-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 8 s
Description: Öğrenin, farelerde kalp yetmezliği modeli oluşturmak için izoproterenol veren osmotik pompa implantasyonunu. Bu yöntem, diğer modellere göre daha az cerrahi uzmanlık gerektirir ve ekokardiyografi ile değerlendirilir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Yazarlar nih K08 HL133491 finansman desteği için kabul.

Bu protokol Kaliforniya Üniversitesi, Los Angeles hayvan bakım kurallarına bağlıdır (ARC protokolü #2010-075). Peri-prosedür fare bakımı ve analjezi yönetimi kuruma özgü olabileceğiiçin okuyucuların kendi IACUC onaylı protokollerine uymaları tavsiye edilir.
1. Isoproterenol ozmotik pompa hazırlanması
NOT: Bu işlem, 100'den fazla inbred fare suşlarından 18+ g ağırlığındaki 9+ haftalık dişi farelerde ve suşların bir alt kümesindeki erkek farelerde başarıyla uygulanmıştır. Bu işlem için maksimum vücut ağırlığı sınırı yoktur. Tedavi yaşının kalp yetmezliği gelişimine karşı isoproterenol kaynaklı duyarlılığı etkileyip etkilemediği bilinmediği için her zaman yaşla uyumlu kontrolleri ekleyin.
<ol><li>Her fare için vücut ağırlığını tartın ve kaydedin.</li>
	<li>Her fare için uygun miktarda ve izoproterenol konsantrasyonunu hesaplayın (Bkz. Tablo 1 ; Ek Dosya). NOT: Bu deneyde kullanılan ozmotik pompalar(Malzeme Tablosu)100 μL'lik bir rezervuar hacmine sahiptir ve 28 güne kadar sürekli akış hızlarında ilaç teslim etmek üzere tasarlanmıştır. Pompa yüklemesi sırasında dolum tüpündeki hacim kaybını hesaba katmak için pompa başına fazladan 20 μL'lik bir isoproterenol çözeltisi hazırlayın.</li>
	<li>Analitik bir denge kullanarak uygun miktarda isoproterenol(Tablo 1)tartın ve 120 μL steril %0,9 NaCl çözeltisi içinde eritin. Pipet şiddetle veya girdap için 1 dakika tamamen izoproterenol solubilize etmek. NOT: Ozmotik pompaları bir laboratuvar biyogüvenlik kabininde hazırlayın. Pompalar cerrahi eldivenlerle kullanılmalıdır. Steril teknik ozmotik pompaların hazırlanması sırasında ve cerrahi implantasyon işlemi sırasında tavsiye edilir.</li>
	<li>Tartmak ve akış moderatör ile birlikte boş ozmotik pompa kaydetmek ve daha sonra akış moderatör kaldırın.</li>
	<li>1.0 mL şırınga içine 120 μL isoproterenol çözeltisi aspire ve ozmotik pompalar ile sağlanan 27-gauge künt uçlu dolum tüpü takın. NOT: Şırınga ve dolum tüpünün hava kabarcıklarından arındırılmış olduğundan emin olun.</li>
	<li>Pompayı dik konumda tutarken, dolum tüpünün ucu pompa haznesinin altına yakın olana kadar dolgu tüpünü üstteki açılan pompadan takın.</li>
	<li>Izoproterenol çözeltisi pompa nın açılmasına kadar dolana kadar şırınga pistonlarını yavaşça iterek ozmotik pompayı yükleyin.</li>
	<li>Dolgu tüpünü dikkatlice çıkarın ve fazla çözeltiyi silin.</li>
	<li>Pompayı kapatmak için akış moderatörüne geri takın ve fazla çözümü silin.</li>
	<li>Rezervuar hacminin %90'Dan fazlasının ozmotik pompanın yeniden tartılarak doldurulduğundan onaylayın. NOT: Kontrol pompaları, pompa haznesini steril %0,9 NaCl çözeltisi ile doldurarak aynı şekilde hazırlanır.</li>
</ol>2. Cerrahi aletlerin hazırlanması
<ol><li>Fiber optik O-ring ışık mikroskobu aydınlatıcı, 2 adet forceps, iğne tutucu, sıcak boncuk sterilizatörler, cam boncuklar ve makas(Malzeme Tablosu)dahil olmak üzere tüm cerrahi aletleri temizleyin.</li>
	<li>Otoklav cerrahi aletleri 121 ° C 30 dakika için ameliyat öncesi aletleri sterilize etmek.</li>
</ol>3. Isoproterenol ozmotik pompa cerrahi implantasyon
<ol><li>Fareyi %95 O2 ve %5 CO2'de %3 izofluran ile indüksiyon odasına yerleştirerek anesteziyi teşvik edin. Anesteziyi nosekon ile %2 isofluran ile koruyun.</li>
	<li>Analjezi için kürek kemikleri arasında boynun ensesine 5 mg/kg karprofen s.c. uygulayın.</li>
	<li>Kornea dehidratasyon önlemek için gözlere oftalmik merhem yerleştirin.</li>
	<li>Solunum hızı, ayak ucutu refleksve mukoza rengi izleyerek anestezi derinliğini kontrol edin.</li>
	<li>Fareyi ısıtılmış bir ped üzerinde supine pozisyonunda yerleştirin. Alt karın saç çıkarın ve betadin veya klorheksidin ile cilt dezenfekte. NOT: Ameliyat sonrası enfeksiyonu en aza indirmek için, cerrahi alanın olay kıllarından arındırılmış olduğundan emin olun.</li>
	<li>1 cm uzunluğunda orta hat deri kesi kesmek için cerrahi makas bir çift kullanın. Altta yatan periton duvarlarından deriyi dikkatlice incelemek için bir çift künt uçlu makas kullanın. NOT: Pompanın büyüklüğünü karşılamak için intraperitoneal teslimat tercih edilir.</li>
	<li>Periton duvarlarını forceps ile altta yatan bağırsaktan uzaklaştırın ve ince cerrahi makas kullanarak periton duvarlarında 0,8 cm'lik bir delik kesin.</li>
	<li>Önce akış moderatörü ile periton boşluğuna ozmotik pompa yerleştirin.</li>
	<li>Periton duvarlarındaki tutunucuyu 5.0 emilebilir dikişleri kesintiye uğramış bir şekilde kullanarak kapatın. Cilt kesisini kesintiye uğramış bir şekilde kapatmak için 6.0 emilemez dikişler kullanın.</li>
	<li>Kurtarma sırasında fareyi sıcak ve kuru tutmak için özel bir kuluçka makinesine yerleştirin. Normal solunum ve hareket dönüşü için ilk iki saat içinde her 30 dakikada bir fareyi izleyerek anesteziden iyileşmeyi değerlendirin.</li>
	<li>Fare anesteziden tamamen iyileştikten sonra, rutin gövdeye geri döndürün. Deney sonuna kadar her gün 3 güne kadar ve daha sonra her 2-3 gün sonra komplikasyonlar için hayvan izlemeye devam edin. NOT: Hayvanlar ameliyat sonrası ağrı veya enfeksiyon, kilo kaybı belirtileri, hareket kabiliyeti eksikliği, anormal duruş, damat yetersizliği ve kesi bölgesinin aşırı yalama veya ısırma belirtileri için izlenmelidir.</li>
	<li>Carprofen 5mg/kg s.c. her 24 saat kadar 48 saat ve daha sonra gerektiği gibi uygulayın.</li>
	<li>Cerrahi alan enfeksiyonlarını önlemek için içme suyunda 5 gün boyunca 0.25 mg/mL amoksisilin uygulayın.</li>
	<li>7 ila 10 gün sonra emilmeyen dikişleri çıkarın.</li>
</ol>4. Anestezi altında ekokardiyografik değerlendirme
NOT: Birkaç hafta boyunca seri kardiyak remodelasyonu izlemek için ekokardiyografik değerlendirme tekrar tekrar yapılabilir. 3 hafta boyunca haftalık aralıklarla ekokardiyografik ölçümler yaptık.
<ol><li>Isofluran%1.25 ila %1.5 oranında indüksiyon odasında anestezi edin. Uygun şekilde sakinleştirildikten sonra, farenin bir burun konisi aracılığıyla anestezi almaya devam etmesini sağlayan bantla ekokardiyografi platformuna sabitleyin.</li>
	<li>Aşırı sedasyonun negatif kronotropik ve inotropik etkilerini en aza indirmek için %1'lik bir bakım dozajına indirgen. Çalışma boyunca solunum ve kalp hızlarını dikkate alın ve gerektiğinde isofluran dozunu ayarlayın.</li>
	<li>Bir depilatif losyon ile göğüs saç çıkarın ve saç ücretsiz göğüs silin.</li>
	<li>Ultrason jelini göğüse yerleştirin ve ultrason sondasını kalbi görüntülemek için konumlandırın.</li>
	<li>B modunda, parasternal uzun eksenli görünümde sol ventrikül (LV) görüntü. Ultrason ışınının düzlemindeki aort kapağını ve LV apeksini hizalamak için ekokardiyografi platformını ayarlayın.</li>
	<li>Lv uzun eksenini ultrason ışınına ve LV maksimum çapını görüntünün merkezine yerleştirmek için ekokardiyografi platformını yatırın.</li>
	<li>Ultrason sondasını 90 derece çevirerek LV kısa eksenini görüntüleyin.</li>
	<li>M modunda LV duvar kalınlığı ve iç boyutları ölçün.</li>
	<li>Fareyi kafese geri yerleştirin. Normal solunum ve spontan vücut hareketlerinin geri dönüşü için monitör.</li>
</ol>

<ol><li>Hartupee, J., Mann, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurohormonal+activation+in+heart+failure+with+reduced+ejection+fraction%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Review+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Neurohormonal activation in heart failure with reduced ejection fraction.</a> Nature Review Cardiology. 14 (1), 30-38 (2017).</li>
<li>Wang, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+Dissection+of+Cardiac+Remodeling+in+an+Isoproterenol-Induced+Heart+Failure+Mouse+Model%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Genetics%22%5BJournal%5D)">Genetic Dissection of Cardiac Remodeling in an Isoproterenol-Induced Heart Failure Mouse Model.</a> PLoS Genetics. 12 (7), 1006038(2016).</li>
<li>Balakumar, P., Singh, A. P., Singh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+of+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacological+and+Toxicological+Methods%22%5BJournal%5D)">Rodent models of heart failure.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 56 (1), 1-10 (2007).</li>
<li>Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+models+of+heart+failure%3A+development+of+novel+therapies%2C+past+and+present%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Small animal models of heart failure: development of novel therapies, past and present.</a> Circulation: Heart Failure. 2 (2), 138-144 (2009).</li>
<li>Huang, W. Y., Aramburu, J., Douglas, P. S., Izumo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transgenic+expression+of+green+fluorescence+protein+can+cause+dilated+cardiomyopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Transgenic expression of green fluorescence protein can cause dilated cardiomyopathy.</a> Nature Medicine. 6 (5), 482-483 (2000).</li>
<li>Breckenridge, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+failure+and+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Model+and+Mechanism%22%5BJournal%5D)">Heart failure and mouse models.</a> Disease Model and Mechanism. 3 (3-4), 138-143 (2010).</li>
<li>Wittstein, I. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurohumoral+features+of+myocardial+stunning+due+to+sudden+emotional+stress%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Neurohumoral features of myocardial stunning due to sudden emotional stress.</a> New England Journal of Medicine. 352 (6), 539-548 (2005).</li>
<li>Templin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+Features+and+Outcomes+of+Takotsubo+%28Stress%29+Cardiomyopathy%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Clinical Features and Outcomes of Takotsubo (Stress) Cardiomyopathy.</a> New England Journal of Medicine. 373 (10), 929-938 (2015).</li>
<li>Shao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+reveals+an+important+role+for+catecholamine-induced+lipotoxicity+in+the+pathogenesis+of+stress-induced+cardiomyopathy%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">A mouse model reveals an important role for catecholamine-induced lipotoxicity in the pathogenesis of stress-induced cardiomyopathy.</a> European Journal of Heart Failure. 15 (1), 9-22 (2013).</li>
<li>Kudej, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+chronic+beta-adrenergic+receptor+stimulation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Molecular+Cell+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Effects of chronic beta-adrenergic receptor stimulation in mice.</a> Journal of Molecular Cell Cardiology. 29 (10), 2735-2746 (1997).</li>
<li>Zhuo, X. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isoproterenol+instigates+cardiomyocyte+apoptosis+and+heart+failure+via+AMPK+inactivation-mediated+endoplasmic+reticulum+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Apoptosis%22%5BJournal%5D)">Isoproterenol instigates cardiomyocyte apoptosis and heart failure via AMPK inactivation-mediated endoplasmic reticulum stress.</a> Apoptosis. 18 (7), 800-810 (2013).</li>
<li>El-Demerdash, E., Awad, A. S., Taha, R. M., El-Hady, A. M., Sayed-Ahmed, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Probucol+attenuates+oxidative+stress+and+energy+decline+in+isoproterenol-induced+heart+failure+in+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+Research%22%5BJournal%5D)">Probucol attenuates oxidative stress and energy decline in isoproterenol-induced heart failure in rat.</a> Pharmacology Research. 51 (4), 311-318 (2005).</li>
<li>Rau, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+genetic+contributions+to+cardiac+pathology+induced+by+Beta-adrenergic+stimulation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Cardiovascular+Genetics%22%5BJournal%5D)">Mapping genetic contributions to cardiac pathology induced by Beta-adrenergic stimulation in mice.</a> Circulation Cardiovascular Genetics. 8 (1), 40-49 (2015).</li>
<li>Berthonneche, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+response+to+beta-adrenergic+blockade+or+activation+in+23+inbred+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular response to beta-adrenergic blockade or activation in 23 inbred mouse strains.</a> PLoS One. 4 (8), 6610(2009).</li>
<li>Chang, S. C., Ren, S., Rau, C. D., Wang, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isoproterenol-Induced+Heart+Failure+Mouse+Model+Using+Osmotic+Pump+Implantation%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Isoproterenol-Induced Heart Failure Mouse Model Using Osmotic Pump Implantation.</a> Methods Molecular Biology. 1816, 207-220 (2018).</li>
<li>Shusterman, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strain-specific+patterns+of+autonomic+nervous+system+activity+and+heart+failure+susceptibility+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+Circulation+Physiology%22%5BJournal%5D)">Strain-specific patterns of autonomic nervous system activity and heart failure susceptibility in mice.</a> American Journal of Physiology-Heart Circulation Physiology. 282 (6), 2076-2083 (2002).</li>
<li>Faulx, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strain-dependent+beta-adrenergic+receptor+function+influences+myocardial+responses+to+isoproterenol+stimulation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+Circulation+Physiology%22%5BJournal%5D)">Strain-dependent beta-adrenergic receptor function influences myocardial responses to isoproterenol stimulation in mice.</a> American Journal of Physiology-Heart Circulation Physiology. 289 (1), 30-36 (2005).</li>
<li>Zhang, G. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+oxidative+stress+in+acute+and+chronic+isoproterenol-infused+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">Cardiac oxidative stress in acute and chronic isoproterenol-infused rats.</a> Cardiovascular Research. 65 (1), 230-238 (2005).</li>
<li>Boluyt, M. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isoproterenol+infusion+induces+alterations+in+expression+of+hypertrophy-associated+genes+in+rat+heart%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Isoproterenol infusion induces alterations in expression of hypertrophy-associated genes in rat heart.</a> American Journal of Physiology. 269 (2), Pt 2 638-647 (1995).</li>
<li>Hohimer, A. R., Davis, L. E., Hatton, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repeated+daily+injections+and+osmotic+pump+infusion+of+isoproterenol+cause+similar+increases+in+cardiac+mass+but+have+different+effects+on+blood+pressure%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Physiology+and+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Repeated daily injections and osmotic pump infusion of isoproterenol cause similar increases in cardiac mass but have different effects on blood pressure.</a> Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. 83 (2), 191-197 (2005).</li>
<li>Cross, H. R., Murphy, E., Koch, W. J., Steenbergen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Male+and+female+mice+overexpressing+the+beta%282%29-adrenergic+receptor+exhibit+differences+in+ischemia%2Freperfusion+injury%3A+role+of+nitric+oxide%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">Male and female mice overexpressing the beta(2)-adrenergic receptor exhibit differences in ischemia/reperfusion injury: role of nitric oxide.</a> Cardiovascular Research. 53 (2), 662-671 (2002).</li>
<li>Klingman, G. I., McKay, G., Ward, A., Morse, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+isoproterenol+treatment+of+mice%3A+effects+on+catecholamines+and+rectal+temperature%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmaceutical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Chronic isoproterenol treatment of mice: effects on catecholamines and rectal temperature.</a> Journal of Pharmaceutical Sciences. 62 (5), 798-801 (1973).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Bu yöntemi kronik beta-adrenerjik stimülasyona2,13nedeniyle kardiyak sonuçları değerlendirmek için 100' den fazla inbred fare suşlarına uyguladık. Izoproterenol duyarlılık önemli farklılıklar fare suşları arasında var olduğu bilinmektedir ve gerektiğinde ilgi zorlanma özelleştirilebilir16. Bu fare suşları arasında beta-adrenerjik reseptör fonksiyonu varyasyon u olabilir17, otonom sinir sistemi aktivitesinde zorlanma...

Azaltılmış ejeksiyon fraksiyonu ile kalp yetmezliği (HFrEF) kardiyovasküler homeostazı korumak için sempatik sinir sisteminin iyi tanınan telafi edici yanıt eşlik ediyor1. Kronik aktivasyon ile kalp ve dolaşım üzerine hemodinamik stres ve zararlı etkiler gözlendi. Bunlar kalp yetmezliği için çağdaş farmakoterapinin temel taşı haline gelmiştir ve nörohormonal sistemlerin kalp yetmezliği ve terapötik antagonizmasının ilerlemesinde önemli mekanizmalardır1.
Birkaç fare modelleri kalp yetmezliği temel araştırmalar için kullanılabilir. Genetik modeller moleküler tedavileri keşfetmek ve sinyal yollarını araştırmak için çekicidir. Ancak, bu modeller kalp yetmezliği ortak formları ile ilgili olmayabilir. Diğer yaygın modeller sol anterior inen (LAD) arter ligasyonu, transaortik daralma (TAC), ve izoproterenol (ISO), her biri farklı bir patolojiketiyoloji2 hedefleyen,3,4,5 ,6. LAD arter ligasyonu böylece iskemik kardiyomiyopati için özel bir model oluşturarak bir anterior duvar miyokard infarktüsü indükler. TAC kalp yetmezliği hipertansif bir model oluşturmak için akut basınç aşırı neden olur. Basınç gradyanı ölçülebilmesine rağmen, hipertrofi tabakalaşmasıiçin izin, hipertansiyon akut başlangıçlı doğrudan klinik alaka yoksun4. Hem LAD hem de TAC modelleri yürütmek için yüksek düzeyde cerrahi uzmanlık gerektirir. Kalp yetmezliği Akut ISO modeli strese bağlı kardiyomiyopati taklit, Ayrıca Takotsubo hastalığı olarak bilinen, akut miyokard infarktüsü taklit sol ventrikül katekolaminler ve aktivite belirgin bir artış ile karakterizedir7, 8 . Buna karşılık, kalp yetmezliği kronik ISO modelleri katekolaminler kronik yüksek düzeyde ile, ileri kalp yetmezliği belirtileri özellikleri mevcut1. Kronik ISO modelinin avantajları, ileri kalp yetmezliğini taklit eden kronik adrenerjik stimülasyon sağlaması ve oluşturmasının nispeten kolay olmasıdır. Araştırmacı, patolojilerini en iyi şekilde özetleyen bir model seçmeli.
Bu yöntemin genel amacı, kalp yetmezliği hastalarında bulunan kronik sempatik aktivasyonu taklit etmek için sürekli ISO bültenleri implante mini pompa kullanarak farelerde kalp yetmezliği indüklemek için1. Yöntem basit ve tekrarlanabilir. Fare suşları arasında belirgin bir varyasyon olmasına rağmen, 30 mg/kg/gün'de 3 ila 4 hafta arasında uygulanan ISO, çoğu farede kardiyak remodeling yapmak için yeterlidir. Özellikle, ISO hafta boyunca pro-hipertrofik kompansatör faz yol açar 1 duvar inceltme, ventrikül dilatasyonu ve hafta sistolik fonksiyon azalma takip 2 ve 32. ISO modelinin oluşturulmasında başarı hipertrofi, dilatasyon ve ventriküler disfonksiyonu gösteren seri ekokardiyografi ile in vivo olarak değerlendirilebilir, ayrıca miyokardiyal için hasat edilen kardiyak dokunun histolojik ve moleküler değerlendirilmesi yoluyla eksinyolen lipid birikimi, fibrozis, ER stres, apoptoz, ve gen ekspresyonu9,10,11,12.

<table><tbody><tr><td>Akış Moderatörlü Mikro-Ozmotik Pompa Sistemi Yerinde</td><td>Alzet</td><td>Model 1004</td><td>Doldurma borusu, akış moderatörü ve pompa gövdesi</td></tr> <tr><td>(-) içerir - İzoproterenol hidroklorür</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>16504-1G</td> <td>(-) - İzoproterenol hidroklorür, -20 ° C'de depolanması gereken bir tozdur.</td></tr><tr><td>1 ml steril şırınga</td><td>VWR</td><td>BD309602</td><td></td></tr><tr><td>30 W LED Fiber optik O-ring ışık mikroskobu aydınlatıcı</td><td>AmScope</td><td>SKU: LED-30WR</td><td></td></tr><tr><td>5-0 KAPLAMALI VICRYL (poliglaktin 910) Sütür</td><td>Ethicon</td><td>J303H</td><td>5-0, emilebilir</td></tr><tr><td>İnce Makas - Sharp</td><td>FST</td><td>14060-09</td><td></td></tr><tr><td>Cam boncuklar</td><td>FST</td><td>18000-46</td><td></td></tr><tr><td>Sıcak boncuk sterilizatörler</td><td>FST</td><td>18000-50</td><td></td></tr><tr><td>İris forseps</td><td>WPI</td><td>15915</td><td></td></tr><tr><td>Look Sharpoint 6-0, 18" Siyah Naylon Monofilament Sütür</td><td>LOOK</td><td>AA-2176</td><td>6-0, emilmez</td></tr><tr><td>İğne tutucu</td><td>WPI</td><td>15926</td><td></td></tr><tr><td>Normal Salin, %0,9 NaCl</td><td>Fisher</td><td>89167-772</td><td></td></tr></tbody></table>

farelerde kalp yetmezliğine neden olmak için İzoproterenol mini pompasının İmplantasyonu

Implantation of an Isoproterenol Mini-Pump to Induce Heart Failure in Mice

Izoproterenol (ISO), seçici olmayan bir beta-adrenerjik agonisttir, farelerde kardiyak yaralanmaya neden olmak için yaygın olarak kullanılır. Akut model strese bağlı kardiyomiyopatiyi taklit ederken, ozmotik pompa ile yönetilen kronik model, insanlarda ileri kalp yetmezliğini taklit eder. Açıklanan protokolün amacı, implante edilmiş bir mini pompa kullanarak farelerde kronik ISO kaynaklı kalp yetmezliği modeli oluşturmaktır. Bu protokol, 100+ suşinda kalp yetmezliğine neden olmak için kullanılmıştır. Cerrahi pompa implantasyonu teknikleri ayrıntılı olarak açıklanmıştır ve farelerde bir kalp yetmezliği modeli oluşturmak isteyen herkes için ilgili olabilir. Buna ek olarak, her gerginlik için ekokardiyografik parametrelere dayalı haftalık kardiyak remodeling değişiklikleri ve model gelişimi için beklenen zaman sunulmaktadır. Özetle, yöntem basit ve tekrarlanabilir. İmplante edilen mini pompa ile 3-4 hafta boyunca uygulanan sürekli ISO, kardiyak remodeling yapmak için yeterlidir. Son olarak, ISO modeli oluşturma başarısı hipertrofi, ventrikül dilasyonu ve disfonksiyon gösteren seri ekokardiyografi ile in vivo olarak değerlendirilebilir.

Daha önce yayınlanan çalışmamızda, 105 Hibrid Fare Çeşitliliği Paneli (HMDP) suşları 2,13arasında ozmotik pompa ile 21 gün boyunca 30 mg /kg/d iso dozu uygulandı. ISO tedavisinin 1, 2 ve3. Yazarlar arasında izoproterenol etkisini okudu önceki bir çalışmada benzer 23 fare suşları14, biz ekokardiyografik parametreler arasında çarpıcı inter-zorlanma varyasyon gözlendi. Ekokardiyografik parametrelere dayalı haftal...

İmplante ozmotik pompa ile izoproterenol kronik uygulama farelerde ileri kalp yetmezliği taklit etmek için yaygın olarak kullanılmıştır. Burada, 3 hafta boyunca sürekli izoproterenol uygulaması için cerrahi mini pompa implantasyonunda ayrıntılı yöntemlerin yanı sıra başarılı model oluşturma için ekokardiyografik değerlendirme yi açıklıyoruz.

Farelerde Kalp Yetmezliğine Neden Olmak Için İzoproterenol Mini PompasıNın İmplantasyonu

Isoproterenol (ISO), is a non-selective beta-adrenergic agonist, that is used widely to induce cardiac injury in mice. While the acute model mimics ...

Bir ozmotik pompa ile izoproterenol kronik uygulama yaygın farelerde ileri kalp yetmezliği değişiklikleri özetlemek için kullanılmıştır. Bu yöntem basittir ve LAD ve TAC gibi diğer modellere göre daha az cerrahi uzmanlık gerektirir. Prosedürü gösteren Dr. Vincent Ren, Dr. Yibin Wang'ın laboratuvarından bir araştırma bilim cisi olacak.Tartma ve her farenin vücut ağırlığı kaydedildikten sonra, her hayvan için uygun miktarı ve izoproterenol konsantrasyonunu hesaplamak ve steril% 0.9 sodyum klorür 120 mikrolitre izoproterenol eritin. Tamamen izoproterenol solubilize etmek için bir dakika boyunca iyice karıştırın, ve tartmak ve bir boş ozmotik pompa ağırlığı kaydetmek, birlikte ve akış moderatör olmadan, fare başına. Ozmotik pompalarla sağlanan 27 kalibrelik, künt uçlu dolum tüpünü takın ve fare başına 120 mikrolitre izoproterenol çözeltisi içeren bir mililitrelik şırınga yükleyin.Dik pozisyonda bir pompa tutarak, dolum tüpü ucu pompa rezervuar altına yakın oturur kadar üst açılan pompa ile dolum tüpü yerleştirin ve yavaş yavaş izoproterenol çözeltisi pompa açılışı doldurur kadar şırınga piston bastırmak. Pompa yüklendiğinde, dolum tüpünü dikkatlice çıkarın ve fazla çözeltiyi silin. Pom

implantation-an-isoproterenol-mini-pump-to-induce-heart-failure

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu iletişim kuralının amacı adım adım tarif etmektir minimal invaziv transvers aort daralma (TAC) farelerde tekniği. Entübasyon ve yaygın olarak kullanılan standart prosedür için zorunlu olan havalandırma ortadan kaldırılması, minimal invaziv TAC operatif prosedür basitleştirir ve hayvan koymak zorlanma azaltır.

Minimal invaziv transvers aort daralma farelerde sol ventrikül hipertrofisi indüksiyon için tekniği

Burada, sağ ventrikül yetmezliği mekanizmasını incelemek için yararlı bir yaklaşım sağlıyoruz. Pulmoner arter daralması için daha uygun ve verimli bir yaklaşım, inhouse yapılan cerrahi aletler kullanılarak kurulmuştur. Buna ek olarak, ekokardiyografi ve kateterizasyon ile bu yaklaşımın kalitesini değerlendirmek için yöntemler sağlanmaktadır.

Pulmoner arter daralması ve farelerde sağ ventrikül fonksiyonunun değerlendirilmesi ile sağ ventrikül yetmezliği indüksiyonu

Bu protokol, kalp yetmezliği ni modelleyen enfarktan farelerin epikardiyumuna 3Boyutlu biyobaskılı bir yama naklini amaçlamaktadır. Anestezi, cerrahi göğüs açıklığı, sol anterior inen kalıcı ligasyon (LAD) koroner arter ve kalbin enfarktüs bölgesine biyobbaskılı bir yama uygulaması ile ilgili ayrıntıları içerir.

Miyokard Enfarktüsü'nün Murine Modelinde 3Boyutlu Biyobaskılı Yama Transplantasyonu

Rafine bir doku temizleme yöntemi geliştirildi ve yetişkin fare kalbine uygulandı. Bu yöntem, genetik bir muhabir stratejisine atfedilen etiketli fibroblast floresan korurken yoğun, otoflüoresan kalp dokusunu temizlemek için tasarlanmıştır.

Sağlıklı ve Yaralı Fare Kalplerinde Üç Boyutlu Fibroblast Organizasyonu için Rafine CLARITY Tabanlı Doku Temizleme

Mevcut protokol, inen aort daralması kullanılarak korunmuş ejeksiyon fraksiyonu ile kalp yetmezliğinin minipig modelini oluşturmak için adım adım bir prosedürü açıklamaktadır. Bu hastalık modelinin kardiyak morfolojisini, histolojisini ve fonksiyonunu değerlendirme yöntemleri de sunulmaktadır.

Tibet Minipiglerinde Korunmuş Ejeksiyon Fraksiyonlu Kalp Yetmezliğinin Cerrahi Modeli

Farelerde miyokard enfarktüsü bölgesi etrafında ultrason rehberliğinde hücre dağıtımı, hücre nakli için güvenli, etkili ve uygun bir yoldur.

Miyokard Enfarktüslü Farelerde Ultrason Rehberliğinde İndüklenen Pluripotent Kök Hücre Kaynaklı Kardiyomiyosit İmplantasyonu

Bu protokol, ekokardiyografi rehberliğinde virüsün doğrudan intramiyokard enjeksiyonu ile sıçan ve fare kalplerinde transgen ekspresyonu yöntemlerini açıklamaktadır. İzole, Langendorff perfüze edilmiş kalplerin programlanmış elektriksel stimülasyonu ile kalplerin ventriküler aritmilere duyarlılığının değerlendirilmesi için yöntemler de burada açıklanmaktadır.

Kemirgen Kalplerde Viral Transgen Ekspresyonu ve Kardiyak Aritmi Riskinin Değerlendirilmesi

Bu protokol, bir domuz modelinde kardiyoaktif terapötik ajanların uygulanmasının üç yöntemini açıklamaktadır. Dişi kara ırkı domuzları, (1) torakotomi ve transepikardiyal enjeksiyon, (2) kateter bazlı transendokardiyal enjeksiyon veya (3) juguler ven ozmotik mini pompa yoluyla intravenöz infüzyon yoluyla tedavi gördü.

Domuz Miyokard Enfarktüsü Modelinde Kardiyoaktif Terapötiklerin Verilmesi

Bu protokol, kendi kendine yapılan bir retraktör kullanılarak minimal invaziv transvers aort daralması (TAC) prosedürü ile modifiye edilmiş ve basitleştirilmiş bir tekniği tanımlamaktadır. Bu prosedür ventilatör veya mikroskop olmadan yapılabilir ve sonunda kardiyak hipertrofi veya kalp yetmezliğine yol açan aşırı basınç yüküne neden olur.

Farelerde Transvers Aort Daralması için Modifiye Bir Teknik

Mevcut protokol, kalp yetmezliğinin fare modellerinde diyastolik fonksiyonun değerlendirilmesinde değerli bir araç olarak hizmet eden transözofageal pacing yoluyla basınç-hacim ilişkisinin elde edilmesini açıklamaktadır.

Murin Kalp Yetmezliği Modellerinde Kalp Hızına Bağlı Diyastolik Fonksiyonların Değerlendirilmesi için Pacing Kontrollü Bir Prosedür

Bu protokol, korunmuş ejeksiyon fraksiyonu (HFpEF) ile hiperlipidemiye bağlı kalp yetmezliğinin bir murin modelini çoğaltmak için ayrıntılı bir yaklaşım sunar. Tasarım, adeno ile ilişkili virüs 9-kardiyak troponin T-düşük yoğunluklu lipoprotein reseptörü (AAV9-cTnT-LDLR) ve poloksamer-407'nin (P-407) uygulanmasını birleştirir.

Korunmuş Ejeksiyon Fraksiyonu ile Hiperlipidemiye Bağlı Kalp Yetmezliğinin Murin Modeli

Öğrenin, farelerde kalp yetmezliği modeli oluşturmak için izoproterenol veren osmotik pompa implantasyonunu. Bu yöntem, diğer modellere göre daha az cerrahi uzmanlık gerektirir ve ekokardiyografi ile değerlendirilir.

Farelerde Kalp Yetmezliğine Neden Olmak Için İzoproterenol Mini PompasıNın İmplantasyonu

Daha fazla video keşfet