Fare vizyonu değerlendirmek için görsel stimuli Looming kullanma
13 Haziran 2019
Fare vizyonu incelemek için, biz bir giderek test yaptı. Fareler tavan üzerinde bir monitör ile büyük bir kare arenada yerleştirildi. Giderek yükselen görsel uyarıcı, farelerde sürekli olarak donma veya uçuş reaksiyonlarını uyarmaktadır.
Protokolümüz fareler için bir görme testi. Hem sağlam hem de çoğaltılması kolaydır. Birçok fare görme testleri mevcut olmakla birlikte, başgösteren deney görsel bir refleks yolu değildir görüntü şekillendirme yolu, test etmek için birkaç yöntemden biridir.
Diğer birçok görsel davranış tne hayvan cerrahisi kapsamlı eğitim gerektirir iken, başgösteren tekniği çok az deneysel eğitim gerektirir. Görsel uyaran sunumu sırasında fareyi barındırmak için alüminyum çerçeveleme ve PVC paneller kullanarak dikdörtgen bir açık kapak muhafazası oluşturarak başlayın. Denemeler arasında kolay temizlik sağlamak için kasanın tüm zeminini kapsayacak şekilde bir kağıt yerleştirin.
Daha sonra, kolay giriş ve çıkış için arenanın merkezine bakan bir giriş ile muhafaza bir köşesinde opak bir barınak ekleyin. Farenin davranışını yakalamak için kasaya bitişik bir masaya monte edilmiş bir masaya geniş açılı lensle kamera sabitleyin. Ardından, kasanın üstüne bir bilgisayar monitörü ayarlayın.
Genişleyen siyah daireyi kodlamak için deneysel yazılım kullanarak başgösteren bir desen hazırlayın. Uyarıcıyı iki derecelik görsel açıyla başlayacak ve 250 milisaniye boyunca 50 dereceye kadar genişleyecek şekilde ayarlayın ve kodu uyarıcıyı bir saniye aralıkla 10 kez tekrarlayacak şekilde ayarlayın. Deney için bir fare nin yanı sıra başgösteren uyaranlara yanıt vermek için üç kör fare seçerek başlayın gerçekten görsel güdümlü bir davranıştı.
Sağlıklı fareyi kasaya yerleştirin ve uyarıcı başlamadan önce 7 ila 15 dakika boyunca çevresini serbestçe keşfetmesine izin verin. Uyarıdan 10 saniye önce, kamerada video çekimine başlayın. Fare barınaktan uzak ve açık arenada serbestçe hareket ettikten sonra, başgösteren görsel uyaranları başlatın.
Son olarak, fareyi orijinal kafesine geri aktarın. Duvarları ve sığınağı %70 etanolle püskürterek ve silerek bir sonraki farenin muhafazasını temizleyin ve kirlenmişse kağıt zemin astarını değiştirin. Hayvan transferi ve muhafaza temizliği sırasında taşınırsa sığınağı aynı ilk konuma yeniden yerleştirin.
Bilgisayarda, analiz yazılımına aktarım sırasında veri kaybı olmamasını sağlamak için video klibi nivbiçiminde, dosya sıkıştırma olmadan AVI formatında kaydedin. Daha sonra, hayvanın uyarıcı sunumuöncesinde, sırasında ve sonrasında arenanın etrafındaki hareketini izlemek için analiz yazılımı kullanın. Farenin sığınaktan olan hızını ve mesafesini hesaplayın.
Ekran görüntüsü video açısı nedeniyle bozulursa, hesaplamadan önce x ve y koordinasyonunu düzeltin. Son olarak, farenin uyaranlara nasıl yanıt verolduğunu belirlemek için uyarıcı başlangıcından önce ve sonra parametreleri karşılaştırın. Donarak, kaçarak ya da davranışta bir değişiklik göstererek.
Yakalanan video klipler manuel izleme işlevine sahip ticari bir analiz yazılımı kullanılarak analiz edildi. İzleme özelliği kullanılarak, farenin konumu videonun her karesinde başgösteren uyaranlardan önce, sırasında ve sonrasında tanımlanmıştı. Uçuş gerçekleştiğinde hız aniden artmış ve barınağa olan mesafe buna göre azalmıştır.
Buna karşılık, fareler donduğunda hız saniyede sıfır milimetreye yakındı. Bu dönemde merkezdeki kontrole göre hız azalmış ve kubbeye olan uzaklık değişmemiş. Uyarıcı başlangıcından önce bir hareket taban çizgisi elde etmek için hatırlamak önemlidir veya uyarıcı ya da bir nicel reaksiyon belirlenemez.
Doğru görme değerlendirmesi için birden fazla test yapmak önemlidir. Göz bebeği ışık refleksi, farenin sağlıklı gözlere sahip olmasını sağlayan yaygın olarak kullanılan bir yöntemdir. Başgösteren yanıt mekanizması tam olarak anlaşılamamıştır.
Bu teknik, nörologlar için nesne tanıma ve korku yanıtları hareketli mekanizmaları keşfetmek için fırsatlar sağlayabilir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Genel Bakış
Bu çalışma, gelecek görsel uyaran kullanarak fareler için bir görme testi sunmaktadır. Test, donma veya uçuş tepkilerini tetikleyecek şekilde tasarlanmış olup, fare görmedeki görüntü oluşturma yolu hakkında bilgiler sağlamaktadır.
Çalışmanın Temel Bileşenleri
Bilim Alanı
- Sinirbilim
- Davranışsal Biyoloji
- Görme Testleri
Arka Plan
- Gelecek deneyi, görüntü oluşturma yolunu değerlendirmek için bir yöntemdir.
- Görsel refleks yollarından farklıdır.
- Diğer görsel davranış testleri genellikle kapsamlı eğitim gerektirir.
- Bu teknik daha basittir ve daha az deneysel eğitim gerektirir.
Çalışmanın Amacı
- Fare görmesini sağlam ve tekrarlanabilir bir testle değerlendirmek.
- Görsel uyaranlara verilen davranışsal tepkileri araştırmak.
- Araştırmacılar için basit bir yöntem sağlamak.
Kullanılan Yöntemler
- Fareler için dikdörtgen açık kapaklı bir muhafaza yapın.
- Muhafaza için alüminyum çerçeve ve PVC paneller kullanın.
- Temizlik için zemini kağıtla örtün.
- Tepkilerin gözlemlenmesi için gelecek görsel uyaranları sunun.
Ana Sonuçlar
- Gelecek görsel uyaran tutarlı bir şekilde donma tepkileri uyandırdı.
- Fareler test sırasında uçuş tepkileri sergiledi.
- Yöntem, görsel işlemeyi değerlendirmede etkili olduğunu kanıtladı.
- Sonuçlar, görme çalışmalarında gelecek testinin geçerliliğini destekler.
Sonuçlar
- Gelecek testi, fare görmesini incelemek için güvenilir bir yöntemdir.
- Görüntü oluşturma yolu hakkında bilgiler sağlar.
- Bu teknik araştırmacılar tarafından kolayca benimsenebilir.
Sıkça Sorulan Sorular
Executive Industry Relevance
Looming visual stimulus testing provides a robust, quantitative behavioral assay for evaluating image-forming vision in preclinical mouse models. This method enables high-confidence target validation and mechanistic de-risking for CNS and ophthalmic discovery programs. Its reproducibility and minimal training requirements support scalable, cross-site implementation in early-stage biopharma R&D.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Enables direct interrogation of image-forming visual pathways beyond reflex-based assays.
- Supports functional validation of genetic or pharmacological interventions in vision research.
- Provides mechanistic de-risking for candidate targets affecting central visual processing.
- Facilitates predictive confidence in translational models of visual system disorders.
Screening & Assay Development
- Delivers standardized, quantifiable behavioral endpoints for vision assessment.
- Reduces assay complexity and training burden compared to alternative behavioral tests.
- Enables reproducible, scalable screening of visual function across cohorts.
- Supports reliable evaluation of compound or gene therapy effects on vision.
Translational & Preclinical Research
- Aligns preclinical behavioral outputs with disease-relevant visual endpoints.
- Maintains continuity from molecular mechanism to functional phenotype in CNS pipelines.
- Supports risk-adjusted advancement of vision-targeted therapeutics.
- Provides a platform for exploring translational biomarkers of visual processing.
Pipeline & Workflow Integration
This behavioral assay integrates into the discovery-to-preclinical continuum for CNS and ophthalmic programs, bridging molecular findings with functional outcomes.
- Discovery Biology: Validates hypotheses about central visual pathway function and target engagement.
- Screening: Offers reproducible, quantitative behavioral readouts for vision assessment.
- Analytics: Enables velocity and positional measurements to compare pre- and post-stimulus responses.
- Translational Research: Connects preclinical behavioral data to disease-relevant endpoints.
- Enterprise Reuse: Provides a standardized, low-barrier assay adaptable across visual system models.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence and reduces mechanistic ambiguity in vision research.
- Operational Value: Streamlines assay setup, standardization, and reproducibility across teams.
- Strategic Value: Improves go/no-go decision quality and capital efficiency in early-stage CNS and ophthalmic portfolios.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted prioritization and advancement of vision-targeted assets.
Implementation Considerations
- Requires basic behavioral neuroscience expertise and familiarity with motion tracking analytics.
- Needs standard video capture and analysis infrastructure for quantitative output.
- Demands consistent baseline measurement and cross-team protocol standardization.
- Adaptable to various mouse models but may require calibration for specific genetic backgrounds.
- Limited to image-forming pathway assessment; does not address all visual or neurological functions.
