Rat ve Rabbit anevrizma modellerinde anevrizma perfüzyon ve ebeveyn arter patensinin değerlendirilmesi için floresan anjiyografi
24 Temmuz 2019
Foscein bazlı floresan video anjiyografi (FVA) kullanılarak, sıçan ve tavşanlarda yan duvar anevrizmasının anevrizma perfüzyon ve damar patinliğini verimli bir şekilde değerlendirmek için bir protokol sunuyoruz. % 92,6 pozitif tahmini değeri ile, özel bir ekipman gerektirmez basit ama çok etkili ve ekonomik bir yöntemdir.
Bu yöntem anevrizma ve damarlarda gerçek zamanlı kan akışını görselleştirmek için güvenilir ve kolay bir tekniktir ve farklı hayvan modellerinde kullanılabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı, herhangi bir pahalı cihaz veya kapsamlı cerrahi gerektirmeden ameliyat sırasında kan akışının görselleştirilmesini kolaylaştırmasıdır. İşleme başlamadan önce bir el feneri üzerine bir uyarma filtresi olarak hareket etmek için yeşil bir bandpass filtre güvenli siyah bant kullanın.
El fenerinin sadece mavi ışık yakıp yakıp yaksa kontrol et. Bir emisyon ışık filtresi olarak işlev için yeşil bir bandpass filtresi ile kamera donatın. Artık sadece yeşil ışık geçebilmeli.
Daha sonra, çalışma alanını dezenfektan solüsyonu ile dezenfekte edin ve kontaminasyonu önlemek için tabloyu steril perdelerle kapatın. Bir tavşan floresan video anjiyografi veya FVA gerçekleştirmek için anestezi hayvan supine pozisyonda tavşan konumlandırmadan önce ağrı uyaran yanıt vermez onaylayın. Sternokleidoastoik kas etrafında boyun tıraş.
Kamerayı parçalanmış artere odaklayın ve 100 miligram/mililitre floresan sodyum içeren beş mililitrelik şırıngayı kapsayacak şekilde alüminyum folyo kullanın. Işıkları mümkün olduğunca kapatın ve kateterin enjeksiyon noktasına 0,3 mililitre/kilogram floresan sodyum enjekte edin. Daha sonra, tüm boya enjekte edilmiş olduğundan emin olmak için tuzlu çözelti 0,5 mililitre ile şırınga floş.
Ve hemen modifiye el feneri ile cerrahi alanı aydınlatmak. Işık yanmaz modifiye edilmiş kamerayla çekime başlayın. Kan akışı enjeksiyondan birkaç saniye sonra görülebilmeli.
Anjiyografi sonrası damarın makroskopik analizi için takip eden hayvanlarda anevrizmalar ve ana arter kompleksi rezeksiyon, ya da geçici klipsler çıkarıldıktan sonra anevrizma ve / veya bypass dolgu gözlemleyerek akış görsel onay gerçekleştirmek. Bu temsili çalışmada, FVA 10 tavşanın sekizinde gerçekleştirilebildi. Sekiz tavşanda saptanan 16 anevrizmadan iki anevrizma da ana arterde kalıcı perfüzyon gösterirken, FVA'da rezidüel perfüzyonlu beş olgu saptandı.
14 tavşan anevrizması makroskopik olarak kalıntı perfüzyon göstermezken, 11'i daha sonra FVA kullanılarak saptanır. 48 sıçanın 23'ünde makroskopik olarak refüzyon gözlendi ve diğer 25 sıçanda makroskopik perfüzyon belirtisi saptanmadı. Makroskopik perfüzyon içermeyen 23 anevrizmadan 22'si FVA kullanılarak doğrulandı.
Genel olarak, 27 tavşan ve sıçan kombine olgudan 25'i doğrulanabilir, bu da %92,6'lık pozitif bir tahmin değeri %100 duyarlılık oranı ve %94,1 özgüllük le sonuçlanırken bu prosedürü denerken en önemli şey damarları düzgün bir şekilde incelemek ve floresan uygularken karanlık bir odada çalışmaktır. Bu işlem herhangi bir hayvan modelinde herhangi bir görünür damarda kan akışını değerlendirmek için kullanılabilir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Genel Bakış
Bu makale, hayvan modellerinde (sıçanlar ve tavşanlar) floresein bazlı floresan video anjiyografi (FVA) kullanarak anevrizma perfüzyonunun ve damar açıklığının değerlendirilmesi için bir protokol sunmaktadır. Yöntemin %92,6'lık yüksek pozitif öngörü değerine sahip olduğu belirtilmiş; özel bir ekipman gerektirmemesi nedeniyle basitliği ve maliyet etkinliği vurgulanmıştır.
Temel Çalışma Bileşenleri
Bilim Alanı
- Nörobilim
- Vasküler biyoloji
- Floresan görüntüleme
Arka Plan
- Anevrizmalar, perfüzyon değerlendirmesi açısından önemli klinik zorluklar teşkil eder.
- Mevcut yöntemler, pahalı ekipmanlar ve kapsamlı cerrahi prosedürler gerektirebilir.
- Floresein video anjiyografi, gerçek zamanlı görselleştirme için bir çözüm sunar.
- Tekniğin farklı hayvan modellerindeki çok yönlülüğü dikkat çekicidir.
Çalışmanın Amacı
- Anevrizmalarda kan akışını görselleştirmek için güvenilir bir yöntem geliştirmek.
- Maliyetli ekipmanlara ihtiyaç duymadan damar açıklığını değerlendirmek.
- Araştırmalarda yaygın olarak uygulanabilecek basit bir protokol sağlamak.
Kullanılan Yöntemler
- Ana platform olarak floresan video anjiyografi (FVA) kullanılmıştır.
- Kullanılan hayvanlar arasında, özellikle cerrahi sırasında ve sonrasındaki kan akışının değerlendirildiği sıçanlar ve tavşanlar yer almıştır.
- Herhangi bir multiomik iş akışından bahsedilmemiştir.
- Prosedür; hayvanların anestezi altına alınmasını, cerrahi bölgenin hazırlanmasını, sodyum fluresein enjeksiyonunu ve modifiye edilmiş bir kamera düzeneğinin kullanılmasını içermiştir.
- Temel adımlar arasında, görüntüleme sırasında minimum ışık sağlanması ve enjeksiyon sonrası görüntü yakalamada hassas zamanlama yer almıştır.
Ana Sonuçlar
- Yöntem, 10 tavşandan 8'inde kan akışını başarıyla görselleştirmiş ve anlamlı rezidüel perfüzyon vakalarını tanımlamıştır.
- Değerlendirilen 16 anevrizmanın 11'i, makroskobik olarak gözlemlenmemiş olmasına rağmen FVA ile tespit edilebilmiştir.
- Sıçanlarda, görünür makroskobik belirtilerin olmadığı 23 anevrizmanın 22'sinde rezidüel perfüzyon doğrulanmıştır.
- Genel olarak, toplam 27 vakanın 25'inde FVA kullanılarak perfüzyon onayı sağlanmıştır.
Sonuçlar
- Bu prosedür, anevrizma kan akışını etkili bir şekilde değerlendirme konusunda güçlü bir kapasite sergilemektedir.
- FVA uygulaması, gerçek zamanlı cerrahi görselleştirmeyi ve perfüzyon durumunun değerlendirilmesini kolaylaştırır.
- Bu etkiler, araştırma ortamlarındaki vasküler durumlar için geliştirilmiş anlama ve değerlendirme tekniklerine kadar uzanmaktadır.
Sıkça Sorulan Sorular
Sektörel Uygulanabilirlik Özeti
Floresan video anjiyografi (FVA), preklinik modellerde anevrizma perfüzyonunun ve ana arter açıklığının gerçek zamanlı değerlendirmesi için düşük maliyetli ve ek ekipman gerektirmeyen bir yöntem sunar. Yüksek hassasiyeti ve özgünlüğü, rezidüel perfüzyonun güvenilir şekilde tespit edilmesini destekleyerek anevrizma modellerinde eksik oklüzyonun erken teşhisine olanak tanır. Bu yetenek, cihaz etkinliğinin ve cerrahi tekniğin preklinik değerlendirmesi için kantitatif ve tekrarlanabilir bir veri sağlayarak vasküler girişimlerin mekanistik risk azaltma sürecine yardımcı olur.
Biyofarma Ar-Ge'sinde Stratejik Uygulamalar
Erken Keşif ve Hedef Validasyonu
- Bilimsel Değer: Anevrizma modellerinde kan akış dinamiklerini görselleştirerek terapötik hipotezlerin sorgulanmasına olanak tanır.
- Operasyonel Değer: Pahalı görüntüleme ekipmanlarına ihtiyaç duymadan, doğrudan ve gerçek zamanlı perfüzyon değerlendirmesi yoluyla fonksiyonel hedef doğrulamasını destekler.
Tarama ve Assay Geliştirme
- Bilimsel Değer: Çalışmalar arasında standartlaştırılabilecek kantitatif, binary perfüzyon sonuçları (mevcut/yok) sağlar.
- Operasyonel Değer: Basit bir floresein enjeksiyonu ve modifiye edilmiş el feneri/kamera düzeneği ile analiz hazırlığını kolaylaştırarak tekrarlanabilirliği artırır.
Translasyonel ve Preklinik Araştırmalar
- Bilimsel Değer: Sıçanlarda ve tavşanlarda anevrizma oklüzyonunu ve ana arter bütünlüğünü doğrulayarak, keşif aşamasını preklinik validasyonla birbirine bağlar.
- Operasyonel Değer: Anevrizma tedavi değerlendirmesi için klinik son noktalarla uyumlu, translasyonel bir perfüzyon metriği sağlar.
Boru Hattı ve İş Akışı Entegrasyonu
FVA, erken model doğrulamasından preklinik değerlendirmeye kadar uzanan keşif sürekliliğine uyum sağlayarak, aday optimizasyonu öncesindeki git/gitme kararlarına temel oluşturan perfüzyon tabanlı bir okuma sunar.
- Keşif Biyolojisi: Anevrizma modellerinde tedavi başarısızlığına işaret edebilecek rezidüel perfüzyonu ortaya çıkararak hipotez testlerini destekler.
- Tarama: Birden fazla hayvan ve zaman noktasında damar açıklığının standartlaştırılmış ve tekrarlanabilir değerlendirmesine olanak tanır.
- Analitikler: Kontrol ve müdahale grupları arasında karşılaştırma yapılmasına izin veren net perfüzyon çıktıları (makroskobik ve FVA ile doğrulanmış) üretir.
- Translasyonel Araştırma: Anatomik olarak ilgili anevrizma modellerinde oklüzyonu doğrulayarak, preklinik perfüzyon verilerini klinik uygunlukla ilişkilendirir.
- Kurumsal Yeniden Kullanım: Vasküler araştırma programları genelinde uygulanabilen, platformdan bağımsız ve düşük giriş bariyerli bir tekniği temsil eder.
Operasyonel ve Kurumsal Etki
- Bilimsel Değer: Makroskobik inceleme ile gözden kaçan perfüzyonları tespit ederek anevrizma modellerindeki öngörü güvenilirliğini artırır.
- Operasyonel Değer: Sadece sodyum flüoresein, bir el feneri ve kamera filtreleri gerektirerek düşük maliyetli ve yüksek kapasiteli kullanımı mümkün kılar.
- Stratejik Değer: Oklüzyon değerlendirmesinin doğruluğunu artırarak preklinik programlardaki biyolojik riskleri azaltır.
- Portföy Etkisi: Doğrulanmış perfüzyon sonuçlarına dayanarak, anevrizma müdahalelerinin riske göre ayarlanmış önceliklendirmesini destekler.
Uygulama Hususları
- Mikrocerrahi damar diseksiyonu ve anevrizma modeli yönetimi konusunda uzmanlık gerektirir.
- Karanlık bir ortam ve mavi eksitasyon ile yeşil emisyon filtrelerine sahip modifiye edilmiş bir el feneri gereklidir.
- Tutarlı bir sinyal için floresein dozajının (0,3 mL/kg) ve salin yıkamasının standartlaştırılması gerekir.
- Farklı damar boyutları ve türe özgü anatomi için adaptasyon değerlendirmeleri içerir.
- Harici ışık penetrasyonuna olan bağımlılık nedeniyle yüzeysel veya erişilebilir damarlarla sınırlıdır.
