Asansör Dikey Hareketi ve Dönme Dolap Rotasyonu Kullanarak Sıçanlarda Pasif Hareketin Otonom ve Davranışsal Etkilerinin Değerlendirilmesi
7 Şubat 2020
Protokoller asansör dikey hareket ve dönme dolap rotasyonu kullanarak kemirgenlerde pasif hareketin otonom ve davranışsal etkilerini değerlendirmek için sunulmaktadır.
Bu protokoller otonom sinir sistemi işlevselliğini değerlendirmek ve vestibüler sistem bozukluklarını ortaya çıkarmak için otonom sistemin bütünlüğünü ve normal işleyişini oluşturmak için önemlidir. Vestibüler bir fonksiyon veya motor koordinasyon açığı otonom sisteme zarar sinyali verebilir. Bu teknikler otonom işleyişin bütünlüğünü ortaya çıkarabilir.
Davranış teknikleri deneyci tarafından tanıtılan variabilities duyarlı olabilir. Aynı araştırmacının deney boyunca teknikleri yürütmesini ve her kemirgeni aynı şekilde tedavi etmesini öneriyoruz. Asansör dikey hareket analizi için, 22,5'e 26'ya 20 santimetrelik pleksiglas kutuya dört iki aylık 200 ila 250 gramlık sıçan yerleştirin ve kutuyu güvenli bir şekilde şekillendirin.
Kutuyu asansör dikey hareket cihazının asansör yastığına yerleştirin ve cihazı en düşük ayarda açın. Ardından, genliği nötrden 22 santimetre yukarı ve 22 santimetre aşağı ayarlayın ve cihazı beş dakika için 2, 500 milisaniye, beş dakika için 2,000 milisaniye ve beş dakika için 1,500 milisaniye ile başlatın. Ardından aygıtı, beş dakika için 1, 500 milisaniye, beş dakika için 2,000 milisaniye ve beş dakika için 2,500 milisaniye kullanarak ters yönde yavaşlatmadan önce iki saat boyunca 1,000 milisaniyeolarak ayarlayın.
Dönme dolap döndürme işlemi için pleksiglas kabı tahta bir banka yerleştirin ve sıçanları gövdelerinin uzun eksenine sahip konteynerin içine yerleştirin. Kutuyu güvenli bir şekilde kapattıktan sonra, benzer kütleye sahip ikinci bir sıçan kümesini, dönme dolap döndürme cihazının ikinci kolundaki yatay dönüş çubuğuna dik gövdenin uzun eksenine sahip ikinci bir pleksiglas konteyneriçine yerleştirin. Kutuyu güvenli bir şekilde kapattıktan sonra, dönme dolap dönüşünü saniyede 120 derece açısal bir hıza ulaşmak için saniyede 16 derece kare olarak saat yönünde başlatın.
Dönme dolap en yüksek hıza ulaştığında, saniyede 48 derece yavaşlayıp saniyede sıfır dereceye ulaşmaya başlar. Bir saniyelik bir duraklamadan sonra, konteynerin saat yönünün tersine yönde, saniyede 16 derece kare olarak dönmeye devam etmesini ve saniyede sıfır dereceye ulaşmak için saniyede 48 derece hızla yavaşlamadan önce saniyede 120 derecelik açısal bir hıza ulaşmasını sağlar. Ardından, yaklaşık 720 dönüş için seans başına iki saat boyunca saat yönünün tersine döndürmeye devam edin.
Denge ışını eğitimi için, ilk olarak yaklaşık 110 santimetre arayla deneysel alana iki ahşap 0,75 metre yüksekliğinde dışkı yerleştirin. Plastik siyah 15'e 15'e sekiz santimetrelik bir kutuyu bitiş aletine yerleştirin ve iki tabure arasına 2,5 ile 130 santimetrelik dar bir tahta kiriş yerleştirin ve dışkı nın başlangıç taburesinden bitiş taburesine kadar 100 santimetrelik bir mesafe bırakarak. Baş tabureye bir lamba yerleştirin ve lambayı açın.
Daha sonra odanın mümkün olduğunca karanlık olması için odanın ışığını kapatın ve ışıklı köşedeki ışına ilk fareyi tanıtın. Eğer fare kendi iradesini geçmezse, yavaşça kirişi geçmeye hayvan ister. Eğitim üç gün üst üste sonra, ışık yakın başlangıç dışkı üzerine eğitimli sıçan yerleştirin ve hemen bir kronometre başlatın.
Sıçan hızla denge ışını çapraz ve bitiş dışkı üzerinde kara kutu girin. Hayvanın burnu bitiş taburesi üzerindeki karanlık kutuya girer girmez kronometreyi durdurun. Hareket tedavisinden sonra dışkılama sayımı için, pleksiglas konteyner içine sıçantransfer 40 tarafından 40 tarafından 45 santimetre açık alan kutuları ve pleksiglas kutusunda dışkı pelet sayısını her kemirgen atfedilen saymak.
Açık alan davranışı testi için, hayvanları üç dakika boyunca kaydetmek için kızılötesi bir video kamera kullanın ve her hayvan için kat edilen toplam mesafeyi belirlemek için ortaya çıkan video görüntülerini kullanın. Burada, üç gün üst üste eğitimden sonra denge ışınının geçişi için geçen sürenin temsili denge ışını sonuçları gösterilir. Asansör dikey hareketi, Hertz dikey hareket değişiklikleri, ve dönme dolap rotasyonönemli ölçüde dışkılama arttı.
Buna ek olarak, asansör dikey hareket, Hertz dikey hareket değişiklikleri, ve dönme dolap rotasyonu önemli ölçüde açık alan mesafe sayılsa azaldı. Denge ışını eğitimi, farelerin ışından geçerken motive ve kendinden emin olması gerektiğinden çok önemlidir. Aksi takdirde, değerlendirme süresi içinde bakiyeleri ölçülmez.
Davranışsal prosedürlerin ardından, farklı ilgi çekici ilaçların otonom fonksiyon ve hücre sinyalizasyonu üzerindeki etkileri bu vestibüler stimülasyon tahlilleri kullanılarak değerlendirilebilir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Genel Bakış
Bu makale, kemirgenlerde pasif hareketin otonom ve davranışsal etkilerini değerlendirmek için protokoller sunmaktadır. Otonom sinir sisteminin bütünlüğünü değerlendirmek için asansör dikey hareketi ve dönme dolap rotasyonu gibi teknikler kullanılmaktadır.
Temel Çalışma Bileşenleri
Bilim Alanı
- Nörobilim
- Davranışsal Analiz
- Otonom Sinir Sistemi
Arka Plan
- Otonom sinir sistemi fonksiyonelliğinin değerlendirilmesi için protokoller gereklidir.
- Vestibüler sistem bozuklukları, motor koordinasyon eksiklikleri ile kendini gösterebilir.
- Davranışsal teknikler, deney yapan kişiden kaynaklanan değişkenliklerden etkilenebilir.
- Güvenilir sonuçlar elde etmek için kemirgenlerin tutarlılıkla ele alınması kritik öneme sahiptir.
Çalışmanın Amacı
- Otonom sistemin bütünlüğünü belirlemek.
- Otonom sinir sisteminin işlevselliğini değerlendirmek.
- Potansiyel vestibüler sistem bozukluklarını tanımlamak.
Kullanılan Yöntemler
- Kemirgenlerle yapılan asansör dikey hareket analizi.
- Dönme dolap rotasyon protokolleri.
- Test için kontrollü bir ortamın kullanımı.
- Deney boyunca deneklerin standartlaştırılmış şekilde tutulması.
Ana Sonuçlar
- Protokoller, otonom işlevlerin bütünlüğünü etkili bir şekilde ortaya koyar.
- Tutarlı uygulama, davranışsal değerlendirmelerdeki değişkenliği azaltır.
- Belirlenen teknikler, otonom sistem hasarına işaret edebilir.
- Davranışsal sonuçlar, vestibüler sistem sağlığı ile korelasyon gösterir.
Sonuçlar
- Protokoller, otonom ve davranışsal etkileri değerlendirmek için güvenilirdir.
- Araştırmacı tutarlılığı, deneysel bütünlük için hayati önem taşır.
- Teknikler, vestibüler ve otonom bozuklukların teşhisine yardımcı olabilir.
Sıkça Sorulan Sorular
Sektörel Uygulama ve Önemi
Pasif harekete karşı verilen otonom ve davranışsal yanıtların değerlendirilmesi, preklinik araştırmalarda vestibüler ve otonom sinir sistemi bütünlüğünü değerlendirmek için translasyonel bir model sağlar. Bu analizler; defekasyon, açık alan aktivitesi ve motor koordinasyon yoluyla otonom çıktıyı nicelendirerek, hareket hastalığı, anksiyete veya nörodejeneratif bozuklukları hedefleyen bileşiklerin mekanistik risk analizinin yapılmasını sağlar. Asansör dikey hareket ve dönme dolap rotasyon protokollerinin standardize ve tekrarlanabilir doğası, ilaç keşif süreçlerinde erken aşama hedef doğrulamayı ve fenotipik taramayı destekler.
Biyofarma Ar-Ge'sinde Stratejik Uygulamalar
Erken Keşif ve Hedef Doğrulama
- Bilimsel Değer: Vestibüler ve stres yanıt yollarıyla ilgili terapötik hipotezleri doğrulamak için otonom sinir sistemi fonksiyonlarını sorgular.
- Operasyonel Değer: Objektif hedef etkileşimi değerlendirmesi için kantitatif davranışsal okumalar (defekasyon sayısı, açık alan mesafesi, denge çubuğu latansı) sağlar.
- Öngörücü Değer: Vestibüler stimülasyonu otonom çıktı ile ilişkilendirerek biyolojik risk azaltmaya olanak tanır ve erken keşif aşamasındaki devam/durdur kararlarını destekler.
Tarama ve Analiz Geliştirme
- Analiz Hazırlığı: Dışkılama sayımı ve açık alan takibi, yüksek kapasiteli tarama adaptasyonuna uygun, ölçeklenebilir ve nicelleştirilebilir son noktalar sağlar.
- Tekrarlanabilirlik: Standartlaştırılmış kemirgen tutma ve hareket parametreleri, deney yapan kişiler arasındaki değişkenliği azaltarak analiz güvenilirliğini farklı merkezler arasında artırır.
- Platform Kullanışlılığı: Pleksiglas konteyner tabanlı tasarım, verimli kaynak tahsisi için birden fazla hareket paradigmasında (dikey, rotasyonel) yeniden kullanıma olanak tanır.
Translasyonel ve Preklinik Araştırmalar
- Hastalıkla İlişkisi: Taşıtlarda ortaya çıkan hareket hastalığı ve anksiyete bozuklukları gibi durumlarda otonom disregülasyonu modelleyerek, fenotip tabanlı bileşik taramasına olanak tanır.
- Translasyonel Süreklilik: Vestibüler stimülasyonu otonom çıktıya bağlayarak, biyobelirteçlerle uyumlu preklinik doğrulamayı destekler.
- Risk Ayarlı İlerleme: Hareket stresine karşı otonom yanıtları normalize eden bileşikleri belirleyerek, ileri aşama çalışmalara geçişteki riskleri azaltır.
Boru Hattı ve İş Akışı Entegrasyonu
Bu analiz, hedef hipotez testinden öncü bileşik optimizasyonuna kadar uzanan keşif sürekliliğine uygundur; özellikle otonom yan etkilerin sorun teşkil ettiği CNS-aktif bileşiklar için geçerlidir.
- Keşif Biyolojisi: Vestibüler stimülasyon ile otonom çıktı arasındaki mekanistik bağlantıları test ederek stres ve anksiyete modellerinde yolak katılımını netleştirir.
- Tarama: Bileşik etkilerinin karşılaştırılması için kantitatif ve tekrarlanabilir davranışsal veriler (defekasyon, lokomosyon, motor koordinasyon) üretir.
- Analitik: Sayım ve mesafe tabanlı metrikler kullanarak dozlar ve tedavi grupları arasında otonom yanıtların istatistiksel karşılaştırmasına olanak tanır.
- Translasyonel Araştırma: Otonom okumaları fonksiyonel göstergeler olarak doğrulayarak vestibüler bozuklukların preklinik modelleriyle sürekliliği destekler.
- Kurumsal Yeniden Kullanım: Standartlaştırılmış hareket cihazları ve davranışsal analizler, MSS modülatörlerini veya antiemetik ajanları inceleyen birden fazla projede uygulanabilir.
Operasyonel ve Kurumsal Etki
- Bilimsel Değer: Doğrudan fonksiyonel okumalar sağlayarak otonom yol modülasyonundaki mekanistik belirsizliği azaltır.
- Operasyonel Değer: Standartlaştırılmış hareket profilleri, kemirgenle çalışma yöntemleri ve çevresel kontroller aracılığıyla tekrarlanabilirliği sağlar.
- Stratejik Değer: Keşif sürecinin erken aşamalarında hedef dışı otonom etkileri belirleyerek devam/dur kararı güvenini artırır.
- Portföy Etkisi: Uygun otonom profillere sahip bileşiklerin riskle uyumlu önceliklendirilmesini sağlayarak geç aşama kayıplarını azaltır.
Uygulama Hususları
- Kemirgen davranışı, vestibüler fizyoloji ve otonom analiz yorumlama konularında uzmanlık gerektirir.
- Kalibre edilmiş asansör dikey hareket ve hassas genlik ve döngü kontrolüne sahip dönme dolap rotasyon cihazlarına bağlıdır.
- Değişkenliği en aza indirmek için denge kirişi ve açık alan testlerinde standartlaştırılmış eğitim gereklidir.
- Diğer kemirgen suşlarına veya yaşlarına adaptasyon, hareket hassasiyetinin ve bazal otonom tonusun doğrulanmasını gerektirebilir.
- Sadece vestibüler fonksiyonu sağlam olan modellerle sınırlıdır; otonom tonusla ilişkisi olmayan motor bozuklukları olan hayvanlarda yanıltıcı sonuçlar ortaya çıkabilir.
Biyofarma SSS
Chapters in this video
0:05
Introduction
0:56
Elevator Vertical Motion (EVM) Procedure
2:03
Ferris-wheel Rotation (FWR) Device Procedure
3:22
EVM and FWR Evaluation: Balance Beam Analysis
4:30
EVM and FWR Evaluation: Defecation Counting and Open-field Examination
5:03
Results: Representative Defecation Counts and Total Distance Traveled
5:35
Conclusion
