Yenidoğan Domuzcuklarda Brakiyal Pleksus Üzerinde In Vivo Biyomekanik Test Yöntemleri

Bu teknik, brakiyal pleksusun bir domuz yavrusunda in vivo biyomekanik streç testini kopyalar ve son derece alakalı klinik büyük yenidoğan hayvan modeli olarak hizmet vermektedir. Bu yöntemler sadece germe yaralanma mekanizmalarının anlaşılmasına yardımcı olmakla kalmıyor, aynı zamanda yenidoğan brakiyal pleksus içinde fonksiyonel ve yapısal açıkları için yaralanma eşik değerleri rapor edebilirsiniz. Prosedürü gösteren Rachel Magee, benim laboratuarımdan bir yüksek lisans öğrencisi olacak.

Palpebral ve çekilme reflekslerinin eksikliğini doğruladıktan sonra, anestezili domuzu ameliyat masasının üzerinde supine pozisyonunda yerleştirin, aksilla bölgeye maruz kalmak için kaçırılmada üst ekstremite ile. Hayvanın üzerine bir perde yerleştirin ve işaretli deri üzerinde kesikler yapmak için 10 numara neşter bıçak kullanın. Orta hat kesi, trakeayı göğüs kafesinin üst üçte biri kadar üstte, omurganın her iki tarafındaki brakiyal pleksus kompleksini ortaya çıkarıyor.

Hayvanın brakiyal pleksusunun bir tarafını ortaya çıkarmak için, c3'e karşılık gelen orta hat kesisinin üst ucundan üst kola üstün bir kesi yapılır ve orta hat kesisinin alt ucundan t3'e karşılık gelen alt kesoz yapılır. Sefalik ve bazilik damarları önleyerek köprücük kemiğinin kenarı boyunca üst kola kadar suprasternal çentik doku ayırmak için kesinin her iki tarafında forceps kullanın. Makas kullanarak, forceps, ve künt diseksiyon, brakiyal pleksus servikal bölgeye erişmek için üstün flep serbest, ve brakiyal pleksus torasik bölgeye erişmek için inferior flep.

Brakiyal pleksus maruz yüzeyel kaslar üzerinde künt diseksiyon gerçekleştirin. Daha sonra bölünmelerin çatallanmalarını bulmak için pleksusu dikkatle inceleyin ve çatallanmaların altındaki brakiyal pleksus bölgelerini tanımlayın, kola daha yakın, kordon ve sinir ve çatallanmaların üzerindeki bölgeler, omurgaya yakın, kök veya gövde olarak. Biyomekanik test cihazını kurmak için, cihazın tabanını bir sepete takın ve elektromekanik aktüatörü tabanına takmak için büyük C-kelepçeleri kullanın.

200 newtonluk bir yük hücresini aktüatöre takın ve kelepçeleme yerinde stres konsantrasyonunu önlemek için yastıklı pleksiglasla bir kelepçe vidalayın. Tripod kullanarak, 658'de 492 piksel çözünürlüğe saniyede 100 kare kayda bilen bir kamera takın ve kurulumun tüm bileşenlerini entegre etmek ve senkronize etmek için kameradan, aktüatörden ve yük hücresinden bilgisayara USB kabloları takın. Daha sonra bilgisayarı, aktüatörü takın ve hücreyi bir güç kaynağına yükleyin.

Uygulanan yükleri kaydetmeden önce yük hücresini kalibre etmek için, aktüatörü dikey olarak hizalanmış şekilde 90 derecelik bir açıyla ayarlamak için ayarlanabilir kolu kullanın ve açıyı bir protractor ile kontrol edin. Yük hücresi yazılımını açın ve voltajın canlı bir okumasını göstermek için Başlat'ı tıklatın. Sonraki 100 gramlık artışlarla kelepçeden sıfırdan 100 grama kadar ağırlıklar asılır ve her yükteki ölçülen gerilimleri kaydeder.

10 ağırlığın tümü için gerilimler kaydedildiğinde, gerilimlerin ve ağırlıkların doğrusal denklemini belirlemek için eğimi hesaplayın ve kesişin. İzole brakiyal pleksus sinir biyomekanik test için, sinir kesmek için ince makas kullanın ve sinirin kesilmiş tarafında kelepçe lemek için özel bir kelepçe kullanın. Kenetlenmiş sinir segmentini siyah akrilik boyayla etiketlayın ve veri analizi için ölçeği ayarlamak için hayvanın içine bir santimetrelik cetvel düz yerleştirin.

Kamera yazılımında, işaretleyicilerin hareketinin ve/veya yer değiştirmesinin izlenmesine izin vermek ve belirli bir zaman noktasında gerçek doku gerginliğini belirlemek için kamera görüş alanını doğrudan test edilmiş segmentlerin üzerine yerleştirin. Sinirin tablodan vücuda girdiği yükseklik, masadan kıskacın yüksekliği, aktüatöraçısı ve dokunun tam uzunluğu gibi temel ölçümleri kaydedin. Programlama yazılımını açın ve Çalıştır'ı tıklatın.

Dosya adını ve yer değiştirmeyi girin ve Initialize ve TARE'yi tıklatın. Brakiyal pleksus segmentini germek için Başlat'ı tıklatın. Doku sinir dokusunun herhangi bir segmentinde tam bir başarısızlık meydana gelene kadar dakikada 500 milimetre atanmış bir oranda çekilir.

Daha sonra bir video dosyasını, uygulanan çekme yükünü, dokunun yer değiştirmesini ve test süresini kaydedin ve başarısızlık bölgesini doku yırtıldığı segment olarak kaydedin. Dört brakiyal pleksus segmentinin yapılan bu temsili testinde elde edilen arıza yükü 8.3 newton, germe maruz kaldığında neonatal sinir dokusu örneklerinde ortalama gerinim hatası %35 idi. Sinirin bazı bölgeleri diğerlerinden daha yüksek bir zorlanma geçirdi, sinir uzunluğu boyunca bir üniforma dışı yaralanma gösteren.

Kamera verileri, bu deneydeki arıza yerinin foramen için proksimal olarak tanımlanmasına olanak sağladı. Bu ilk sağlamak için önemlidir, hayvan derinden anestezi ve ağrı veya rahatsızlık belirtisi gösterir, ikinci, yük hücresi kalibre etmek, ve üçüncü, sıkıca doku kelepçelemek için. Bu in vivo hayvan modeli, brakiyal pleksus dokusundaki fonksiyonel ve histolojik değişiklikleri, çeşitli esneme derecelerinden sonra incelemek ve karmaşık doğum senaryolarını incelemek için kullanılabilir.