Farede Miyokard Enfarktüsü Çalışması İçin Kriyoyaralanma Modeli

Bu yöntem miyokard enfarktüsü neslini incelemek için güvenilirdir ve örneğin kök hücre naklinden sonra kardiyak iyileşmeyi araştırmak için mükemmel bir platform durmaktadır. Bu yordamın en büyük avantajı, hızlı, kolay ve tekrarlanabilir bir şekilde tek tip enfarktüs boyutları oluşturmak için kullanılabilir olmasıdır. Farmakolojik veya doku mühendisliği tabanlı stratejiler gibi yeni deneysel müdahaleler bu modelde test edilebilir.

Ve başarıyla seçenekleri daha büyük hayvan modellerinde teyit edilebilir test edin. Anestezi 27 gram, 14 haftalık fareağrı refleks yanıt eksikliği doğruladıktan sonra, hayvanın göğüs ve boyun kürk kaldırmak ve ısıtılmış bir ped üzerinde bir supine pozisyonda fare yerleştirmek için bir saç düzeltici kullanın. Bant arka ve forelimbs yayılmış kartal pozisyonda ve maruz kalan cildi dezenfekte etmek için sıralı povison-iyot ve% 80 etanol scrubs kullanın.

Göğüs kafesinin alt üçte birinden çeneye kadar orta hatlı bir deri kesisi yapın ve nefes borusunu ortaya çıkarmak için boyun çevresindeki kasları dikkatlice ayırmak için kavisli forceps kullanın. İkinci ve üçüncü kıkırdak halkaları arasında bir trakeotomi gerçekleştirmek için mikro makas kullanın. Ve ventilatör, 0.5 mililitrelik gelgit hacmiyle dakikada 110'luk bir havalandırma frekansına ayarlayın.

Sonra, bir plastik takın, 20 gauge kanül trakea içine ventilatör bağlı. Daha sonra, üçüncü ve yedinci kaburga arasında sternal kökenli sağ pektoralis kas ayırmak için cautery kullanın. Ve göğüs kafesine mümkün olduğunca yakın olarak altı kaburga dördüncü kesmek için yan açılı bahar makası kullanın.

Göğüs boşluğuna net bir görünüm elde etmek için altta yatan bağ dokusunu inceleyin, gerektiğinde kanamayı durdurmak için meme arterini katerize edin. Kaburgaları yaymak ve göğüs boşluğuaçık tutmak için bir mini altın leke retraktör takın. Ve kalbi ortaya çıkarmak için perikard açmak için künt çözgü kullanın.

Göğüs boşluğundan kalbi kaldırmak ve göğüs açıklığını azaltmak ve kalbin karın boşluğuna geri düşmesini engellemek için retraktörün gerginliğini azaltmak için künt bir çubuk kullanın. Önceden 10 saniye boyunca üç milimetre çapında kriyoprob soğutun ve sol ventrikül oluşturmak için 10 saniye boyunca iç sol ventrikül duvarına kriyoprob uygulayın, kriyoyaralanma infarkt. Oda sıcaklığında tuzlu sulama ile sol ventrikül duvarından kriyoprob ayırın ve retractor ile göğüs açıklığı yeniden büyütmek.

Yavaşça torasik kavite kalp dönmek ve retractor kaldırmak için çubuk kullanın. Sternotomiyi tek bir düğümle bağlamak için 6-0'lık bir dikiş kullanın. Ve göğüs boşluğunu kapatmak için 6-0'lık bir dikiş kullanın.

Düğüm bağlamadan önce göğüsten kalan havayı boşaltmak için 10 mililitrelik bir şırınga kullanın ve trakeal açıklık noktasına kadar dokuyu kapatmak için 5-0 dikiş kullanmadan önce kaudal kenardaki deriyi adapte edin. Isofluranve hayvan spontan solunum kazanımları azaltarak sonra trakeal kateter kaldırmak ve bir 8-0 ile trakeal kesi kapatın Dikiş. Ventral boyun kaslarını trakea üzerindeki anatomik konumlarına geri döndürün ve deri sütürlerini tamamlayın.

Daha sonra, sekiz hafta boyunca günlük hayvan izleme ile üç gün boyunca ağrı analjezi için içme suyuna metamizole ekleyin. Kriyoyaralı kalplerde ekokardiyografide önemli ölçüde azalmış ejeksiyon fraksiyonu ve fraksiyonel alan değişimi ortaya çıkar, ameliyat sonrası yedinci günden 56 gün deneysel bitiş noktasına kadar fonksiyonel bozukluk gözlenir. Basınç-hacim döngü analizi ile değerlendirildiği gibi, kriyoinfraksiyon inme hacmi, inme çalışması, kardiyak çıkış ve ön yük ayarlı maksimal güç bir azalma olarak yansıyan bir bozulmuş sol ventrikül fonksiyonu yol açar.

Floresan gerilime duyarlı boyalı kalplerin ex-vivo optik haritalaması yaralanma sınırında elektrik iletimi tıkanıklığı gösterir, yerel bir elektrik ayırma gösteren. Masson'un trikromu ile histolojik boyama yaralanma yerinde transmural fibrotik doku oluşumunu ortaya çıkarır. Enfarktüs boyutu enfarktüs skar alanı veya orta hat yara uzunluğu ölçülerek hesaplanabilir.

Buna ek olarak, bir kardiyomiyosit belirteci ve Kollajen-I karşı immünükopist boyama fibrotik remodeling varlığını ve yaralanma yerinde kardiyomiyosit kaybı nı teyit. Farklı süre uyumsuz enfarkt boyutlarına yol açabilir gibi kriyoproblem her hayvan aynı temas süresi korumak önemlidir. Bu teknik ustalaştıktan sonra doğru bir şekilde yapılırsa 20 dakikada yapılabilir.

Bu videoyu izledikten sonra kriyoinjury modeli gerçekleştirmek için iyi bir anlayışa sahip olmalıdır. Deneylerinizde iyi şanslar.