Paw ve digit yörüngeleri 3 boyutlu yeniden yapılanma ile ulaşan otomatik Rat tek Pellet

Bu yöntem, büyük veri kümelerini nispeten hızlı bir şekilde elde etmek için verimli bir araç sağlayarak eğitim ve testleri otomatikleştirmek için kurulan fare vasıflı erişim protokolleri üzerine kuruludur. Ön limb kinematiği üç boyutlu rekonstrüksiyonsağlarken deneyci çabalarını en aza indirir. Kinematik, tam zamanlı müdahalelerin etkilerini değerlendirmek veya fizyolojik kayıtlarla ilişkili olarak kullanılabilir.

Bazı ayarlamalarla bu teknik farelerde de uygulanabilir. Işıkları açarak başlayın ve yetenekli bir ulaşan odasına sıçan yerleştirin. Kutunun önündeki erişim yuvasında bir pelet tutmak için forceps kullanın.

Sıçan ın forcep'lerden üç pelet yemesine izin ver. Sıçan forseps pelet yemeye çalışır bir dahaki sefere pelet geri çekin ve sıçan pençe en iyi 11 ile pelet için ulaşana kadar tekrarlayın pençe tercihini gösteren ulaşır. Daha sonra, farenin tercih edilen pençe ulaşan yuvası kontralateral tarafı ile pelet dağıtım çubuğu hizalamak.

Teslimat çubuğuna bir pelet yerleştirin. Sonra pelet ile sıçan yem için terpler kullanın ama pençe çubuk üzerinde pelet vurur, böylece dağıtım çubuğu doğru sıçan doğrudan. Sıçan yem olmadan teslimat çubuğuna 10 ulaşır çalıştıktan sonra, bir sonraki aşamaya sıçan ilerlemek.

Daha sonra, farenin pençe tercihine göre pelet dağıtım çubuğunu yerleştirin ve iki pozisyona ayarlayın. Aktüatör uzaktan kumandasını kullanarak pelet dağıtım çubuğunun yükseklik konumunu ayarlayın. Teslimat çubuğu doğru yükseklikte olduğunda, ışık ayarlanırkırmızı yanıp sönene kadar istenilen sayıda basılı tutun.

Sonra sıçanı odaya yerleştirin ve fareyi bir peletle arkaya yemle. Sıçan, otomatik sürüm çalışıyorsa kızılötesi ışını kıracak kadar odanın arkasına doğru hareket ettiğinde, pelet dağıtım çubuğunu üçüncü konuma getirin. Son olarak, sıçan pelet ulaşmak için bekleyin ve sonra geri pozisyon iki pelet dağıtım çubuğu taşımak.

Eğer kapalı çaldı teslimat çubuğuna yeni bir pelet yerleştirin. Fare bir başlayana kadar yavaş yavaş sıçan yemleme bu adımları tekrarlayın, yem olmadan bir pelet istemek için geri hareket, ve iki, hemen arka bir pelet istedikten sonra öne taşımak. Sıçan bunu 10 kez yaptıktan sonra, otomatik görev üzerinde eğitime başlayın.

Otomatik sistemi kurmak için, odadaki ışıkları açın ve pelet haznesini yeniden doldurun. Farenin pençe tercihine göre pelet dağıtım çubuğu nu yerleştirin. Aktüatör konumlarının doğru ayarlı olduğundan kontrol edin.

Ardından, bilgisayarı açın ve yetenekli erişim programını açın. Konunun altındaki fare kimlik numarasını girin ve el açılır menüsünden pençe tercihini seçin. Videolar için kaydet yolunu belirtin.

Ardından oturum saatini ve maksimum video sayısını ayarlayın. Pelet kaldırma süresini de ayarlayın ve erken erişim cezasını etkinleştirin. Daha sonra, kalibrasyon görüntüleri almak için, yardım elini ulaşan odanın içine yerleştirin ve timsah klibini erişim yuvasından geçirin.

Timsah klipsi ile gelen yuvanın önünde küpü tutun. Daha sonra küpü üst aynada, yeşil tarafı sol aynada ve mavi tarafı sağ aynada görünecek şekilde yerleştirin. Davranış programında, YG eşiğinin çok büyük bir değere ayarlandığından emin olun.

Çalıştır düğmesini tıklatın ve kameranın başlattığı düğme yeşile döndüğünde video edinmeye başlamak için başlat'a basın. Cal Modu'nu tıklatın ve Cal Image'ı al'ı tıklatarak bir resim alın. Küpü hafifçe hareket ettirin ve başka bir görüntü alın.

Toplam üç görüntü için tekrarlayın. Son olarak, dur tuşuna basarak programı durdurun ve ardından işaretle düğmesini tıklatın. Yardım elini ve küpü kutudan çıkarın.

Kalibrasyon görüntüleri o gün alındıktan sonra davranış odasında bir şey çarpmamaya dikkat edin. İlk olarak, yetenekli ulaşma odasına sıçan yerleştirin. Programı çalıştırmak için beyaz ok tıklayın.

Ardından x ofset, y ofset, ROI genişliği ve YG yüksekliğini ayarlayarak pençe algılama için YG konumunu ayarlayın. YG'yi, pençenin dorsumunu doğrudan ulaşan yuvanın önünde gösteren yan aynaya yerleştirin ve programı başlatmak için başlat'ı tıklatın. Fare ulaşamazken, canlı Yatırım Getirisi tetikleme değeri sıfır ile bir arasında salınım olana kadar düşük YG eşik değerini ayarlayın.

Daha sonra YG eşiğini, burun dürtmeleri sırasında canlı Yatırım Getirisi tetikleme değerinden önemli ölçüde daha büyük ve fare ulaştığında canlı Yatırım Getirisi tetik leme değerinden daha düşük olacak şekilde ayarlayın. Fare ulaştığında videolar sürekli olarak tetiklenene kadar ayarlayın, ancak burnunu yuvaya doğru ittiğinde değil. Her şeyin doğru çalıştığından emin olmak için ilk birkaç denemeyi izleyin.

Bir sıçan bir pelet istemeden önce ulaştığında, erken ulaşır sayısı artış gözlemlemek. Bir fare pelet istedikten sonra ulaştığında, videonun bir kopyası çöp kutusu dosyası olarak kaydedilirken video sayısının arttığını gözlemleyin. Son olarak, oturum süresine veya maksimum video sayısına ulaşıldıktan sonra, dur işareti düğmesine basın.

Sonuçlar, 20 gün sonra farelerin yetenekli bir görev edindiğini gösteriyor. Burada, tek bir oturumdan erişim yörüngeleri gösterilir. Bu sunum kolaylığı için sadece ilk pençe ilerleme temsil eder.

Ayrıca, pençe algılama tetikleyicisi doğru ayarlanmazise, pençenin erişim hareketlerinin tetiklendiği durumlarda değişkenliğe yol açabilecek erişim yuvasını ihlal ettiği çerçevede önemli bir değişkenlik vardır. Hayvanların dikkatli kullanımı dışında, bu protokolde herhangi bir önlem alınmayacaktır. YG eşiğini doğru ayarlamak, böylece videolar veya diğer müdahaleler uygun anlarda tetiklenir.

Bu yöntem, temel motor kontrolden hareket bozukluğu patofizyolojisine kadar çeşitli soruları ele alabilecek optogenetik, kalsiyum görüntüleme ve genetik modeller gibi birçok teknikle eşleşebilir. Bu teknik, ayrıntılı erişim ve kavrama kinematiği ile fizyolojik kayıtlar veya müdahaleler inanışına izin vererek, nöral devre değişiklikleriyle hareketlerin nasıl değiştiğini değil, aynı zamanda nasıl cevap lamalarına olanak sağlar.