Name: Travmatik Beyin Hasarı İndüksiyonu için Kontrollü Kortikal Etki Murine Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-08-16T14:45:00.000+00:00
Duration: 5 min 1 s
Description: Öğrenin, farelerde kontrollü kortikal etki yöntemiyle travmatik beyin hasarı oluşturma protokolünü. Bu model, doku kaybı ve davranışsal analizler için güvenilir sonuçlar sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu çalışma Ulusal Sağlık Enstitüleri Grant GM117341 ve American College of Surgeons C. James Carrico Araştırma Bursu tarafından S.J.S. tarafından desteklenmiştir.

Tüm prosedürler Northwestern Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylandı. C57BL/6 fareler Jackson Laboratuvarı'ndan satın alındı ve grup Northwestern Üniversitesi Karşılaştırmalı Tıp Merkezi'nde bir bariyer tesisinde barındırılanın (Chicago, IL). Tüm hayvanlar 12/12 saat açık/karanlık döngüsünde yiyecek ve suya ücretsiz erişim ile barındırılabildi.
1. Anestezi yi teşvik etmek
<ol><li>Ketamin (125 mg/kg) ve intraperitoneal enjekte xylazine (10 mg/kg) ile fareyi anestezi.</li>
</ol>2. Her 15 dakikada bir izlenen hayati işaretler
<ol><li>Sıcaklığı, solunum hızını ve cilt rengini izleyin. Fare dokunmak için sıcak hissetmeli. Cilt pembe ve iyi perfüzyon görünmelidir. Solunum hızı dakikada 50-70 arasında olmalıdır.</li>
</ol>3. Cerrahi öncesi işlemler
<ol><li>Yaralanma indüksiyonundan bir gün önce tüm fareleri tartın.</li>
	<li>Her deneysel denek için otoklavlayarak bir dizi cerrahi aleti sterilize edin. Kullanmadan önce etkileyen cihazı sterilize edin.</li>
	<li>"Düşük" ayarına ayarlanmış ve fareler bir kez ambulatuar ısı uzak hareket edebilir şekilde konumlandırılmış bir elektrikli ısıtma yastığı üzerine temiz bir kafes yerleştirerek bir kurtarma kafesi hazırlayın.</li>
	<li>Sterilbir laminar akış başlığı içinde ameliyathane kurmak.<ol>
<li>Stereotaksik çalışma çerçevesini konumlandırın.</li>
		<li>Etkileyen aygıtı stereotaksik çerçeveye takın.</li>
		<li>Hız ve çalışma süresi için istenilen biyomekanik parametreleri ile harekete alma cihazı ayarlayın. NOT: Bu protokolde, 2,5 m/s hız ayarı ve 0,1 s'lik bir çalışma süresi ile 5 mm çapında kraniektomi ile 3 mm çapında bir darbe ucu kullanılarak ciddi bir beyin hasarı tanımlanmıştır. Biyomekanik parametrelergeniş bir yelpazede TBI tam spektrum ikna etmek için kullanılabilir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Yeni kişisel koruyucu ekipman ve steril eldivenler giyin.</li>
	<li>Elektrikli makaslar kullanarak operatör yerinden kürk tıraş.</li>
	<li>Kornea yaralanması ve kuruma önlemek için farenin gözlerine koruyucu opthalmik merhem uygulayın.</li>
	<li>Fareyi ameliyathaneye yerleştirin.</li>
	<li>Alkol ile dönüşümlü bir iyot bazlı cerrahi scrub ile üç kez cilt hazırlayın.</li>
</ol>4. Kontrollü kortikal etki uygulaması
<ol><li>Kafa derisini orta hatta 1 cm kalınlığında bir neşterle kafatasını teşhir edin.</li>
	<li>Fareyi, minyatür kulak çubukları arasında ikili zamansal kemikleri güvence altına alarak ve kesici dişleri bir kesici kesici kelepçenin içine kilitleyerek fareyi stereotaksik bir çalışma çerçevesi içinde konumlandırın ve fare nin başına sabit bir üç nokta lı tutun.</li>
	<li>Kafa derisinin kraniektomi sırasında matkap ucuyla temas etmediğinden emin olmak için kafa derisini bir hemostat veya kilitleme forceps ile ameliyat yerinden uzaklaştırın.</li>
	<li>Maruz kalan kafatasındaki sagital ve koronal dikişleri tanımlayın. NOT: Bu protokol, sagital sütürden 2 mm sol ve koronal sütüre 2 mm rostral kraniektomi yi merkezalır.</li>
	<li>Bir trephine matkap biti ile bir matkap kullanarak bir kraniektomi gerçekleştirin.<ol>
<li>Kraniektomi gerçekleştirmek için, ilk maksimum hızda matkap etkinleştirin ve daha sonra kraniektomi yerinde kafatasına dik trephine matkap ucu uygulayın.</li>
		<li>Kafatası ile temas yapıldıktan sonra matkap için nazik, hatta basınç uygulayın. Matkap kafatasına nüfuz ettikten sonra hafif bir "vermek" hissedilecektir. Altta yatan dura nüfuz etmeyin. NOT: Bu protokol kraniektomi yapmak için 5 mm trephine matkap ucu kullanır.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Kemik flebini çıkarmak için forceps ve küçük bir gösterge hipodermik iğne kullanın, tamamen altta yatan dura mater açığa.</li>
	<li>Darbe ucunu ameliyat alanına döndürün ve maruz kalan dura mater ile temas edene kadar düşürün. Temas yapıldıktan sonra cihazın temas sensörü, cerrahı temasın yapıldığı konusunda uyarmak için duyulabilir bir ton yapacaktır. Bu, deformasyon derinliğinin ayarlandığı sıfır noktasını işaretler. NOT: Bu protokol, ciddi bir yaralanma oluşturmak için 3 mm'lik bir darbe ucu kullanır. Daha fazla lokalize yaralanma uygulamak için 1 mm gibi küçük ipuçları kullanılabilir.</li>
	<li>Etkileyen ucu geri çekin ve stereotaksik çerçeve üzerindeki etki veya konumunu düşürerek istediğiniz etki derinliğini ayarlayın. NOT: Bu protokolde deformasyon derinliği2 mm'ye ayarlayarak ciddi bir yaralanma yı tanımlıyoruz.</li>
	<li>Darbeciyi harekete geçirmek için yaralanmayı uygulayın.</li>
	<li>Darbe cihazını alanın dışına döndürün ve hayvanı stereotaksik çerçeveden çıkarın.</li>
</ol>5. Cerrahi saha kapatma
<ol><li>Steril pamuk uçlu aplikatörden gelen doğrudan basınç la kafatası ve yaralı kortikal yüzeykanamakontrol edin.</li>
	<li>Steril pamuk uçlu aplikatör ile kafatası kuru.</li>
	<li>Ticari olarak kullanılabilen cerrahi yapıştırıcı veya monofilament sütür kullanarak kraniektomi üzerine kafa derisini kapatın. NOT: Bu protokolde kafa derisi kapatmak için veteriner cerrahi yapıştırıcı kullanılır. Kemik flebi değiştirilmez ve atılır.</li>
</ol>6. Ameliyat sonrası bakım ve izleme
<ol><li>Postoperatif analjezi uygulayın (örn. sürekli salınımlı buprenorfin 0.1-0.5 mg/kg subkutan olarak uygulanarak 72 saat sürekli analjezi sağlar).</li>
	<li>Temiz bir önceden ısıtılmış kafesiçinde lateral decubitus kurtarma pozisyonunda hayvan yerleştirin.</li>
	<li>Uyanık ve mobil kadar hayvanları gözlemleyin, sonra kendi kafese her fare dönmek.</li>
	<li>Yiyecek ve suya ücretsiz erişim sağlayın. Normal gıda ve su alımı genellikle yaralanmadan sonra bir ila iki saat içinde devam.</li>
	<li>Deney boyunca her üç günde bir vücut ağırlığını ölçün.</li>
</ol>

<ol><li>Faul, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFaul%2C+M+%22Traumatic+Brain+Injury+in+the+United+States%3A+Emergency+Department+Visits%2C+Hospitalizations+and+Deaths+2002-2006%22">Traumatic Brain Injury in the United States: Emergency Department Visits, Hospitalizations and Deaths 2002-2006</a>. , Centers for Disease Control and Prevention, National Center for Injury Prevention and Control. Atlanta (GA). (2010).</li>
<li>Roozenbeek, B., Maas, A. I., Menon, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changing+patterns+in+the+epidemiology+of+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Neurology%22%5BJournal%5D)">Changing patterns in the epidemiology of traumatic brain injury.</a> Nature Reviews Neurology. 9 (4), 231-236 (2013).</li>
<li>Corso, P., Finkelstein, E., Miller, T., Fiebelkorn, I., Zaloshnja, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+and+lifetime+costs+of+injuries+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Injury+Prevention%22%5BJournal%5D)">Incidence and lifetime costs of injuries in the United States.</a> Injury Prevention. 12 (4), 212-218 (2006).</li>
<li>Pearson, W. S., Sugerman, D. E., McGuire, L. C., Coronado, V. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emergency+department+visits+for+traumatic+brain+injury+in+older+adults+in+the+United+States%3A+2006-08%5BTitle%5D)+AND+%22Western+Journal+of+Emergency+Medicine%22%5BJournal%5D)">Emergency department visits for traumatic brain injury in older adults in the United States: 2006-08.</a> Western Journal of Emergency Medicine. 13 (3), 289-293 (2012).</li>
<li>Whitlock, J. A. Jr, Hamilton, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+outcome+after+rehabilitation+for+severe+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Physical+Medicine+and+Rehabilitation%22%5BJournal%5D)">Functional outcome after rehabilitation for severe traumatic brain injury.</a> Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 76 (12), 1103-1112 (1995).</li>
<li>Schwarzbold, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychiatric+disorders+and+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychiatric+Disease+and+Treatment%22%5BJournal%5D)">Psychiatric disorders and traumatic brain injury.</a> Neuropsychiatric Disease and Treatment. 4 (4), 797-816 (2008).</li>
<li>Whelan-Goodinson, R., Ponsford, J., Johnston, L., Grant, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychiatric+disorders+following+traumatic+brain+injury%3A+their+nature+and+frequency%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Head+Trauma+Rehabilitation%22%5BJournal%5D)">Psychiatric disorders following traumatic brain injury: their nature and frequency.</a> Journal of Head Trauma Rehabilitation. 24 (5), 324-332 (2009).</li>
<li>Peskind, E. R., Brody, D., Cernak, I., McKee, A., Ruff, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Military-+and+sports-related+mild+traumatic+brain+injury%3A+clinical+presentation%2C+management%2C+and+long-term+consequences%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Military- and sports-related mild traumatic brain injury: clinical presentation, management, and long-term consequences.</a> Journal of Clinical Psychiatry. 74 (2), 180-188 (2013).</li>
<li>Martin, L. A., Neighbors, H. W., Griffith, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+experience+of+symptoms+of+depression+in+men+vs+women%3A+analysis+of+the+National+Comorbidity+Survey+Replication%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">The experience of symptoms of depression in men vs women: analysis of the National Comorbidity Survey Replication.</a> JAMA Psychiatry. 70 (10), 1100-1106 (2013).</li>
<li>Makinde, H. M., Just, T. B., Cuda, C. M., Perlman, H., Schwulst, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Role+of+Microglia+in+the+Etiology+and+Evolution+of+Chronic+Traumatic+Encephalopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">The Role of Microglia in the Etiology and Evolution of Chronic Traumatic Encephalopathy.</a> Shock. 48 (3), 276-283 (2017).</li>
<li>Belanger, H. G., Vanderploeg, R. D., McAllister, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subconcussive+Blows+to+the+Head%3A+A+Formative+Review+of+Short-term+Clinical+Outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Head+Trauma+Rehabilitation%22%5BJournal%5D)">Subconcussive Blows to the Head: A Formative Review of Short-term Clinical Outcomes.</a> Journal of Head Trauma Rehabilitation. 31 (3), 159-166 (2016).</li>
<li>Carman, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expert+consensus+document%3A+Mind+the+gaps-advancing+research+into+short-term+and+long-term+neuropsychological+outcomes+of+youth+sports-related+concussions%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Neurology%22%5BJournal%5D)">Expert consensus document: Mind the gaps-advancing research into short-term and long-term neuropsychological outcomes of youth sports-related concussions.</a> Nature Reviews Neurology. 11 (4), 230-244 (2015).</li>
<li>Kramer, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Contribution+to+the+Theory+of+Cerebral+Concussion%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">A Contribution to the Theory of Cerebral Concussion.</a> Annals of Surgery. 23 (2), 163-173 (1896).</li>
<li>Lighthall, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlled+cortical+impact%3A+a+new+experimental+brain+injury+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Controlled cortical impact: a new experimental brain injury model.</a> Journal of Neurotrauma. 5 (1), 1-15 (1988).</li>
<li>Dixon, C. E., Clifton, G. L., Lighthall, J. W., Yaghmai, A. A., Hayes, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+controlled+cortical+impact+model+of+traumatic+brain+injury+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">A controlled cortical impact model of traumatic brain injury in the rat.</a> Journal of Neuroscience Methods. 39 (3), 253-262 (1991).</li>
<li>Schwulst, S. J., Trahanas, D. M., Saber, R., Perlman, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traumatic+brain+injury-induced+alterations+in+peripheral+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Trauma+and+Acute+Care+Surgery%22%5BJournal%5D)">Traumatic brain injury-induced alterations in peripheral immunity.</a> Journal of Trauma and Acute Care Surgery. 75 (5), 780-788 (2013).</li>
<li>Trahanas, D. M., Cuda, C. M., Perlman, H., Schwulst, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+Activation+of+Infiltrating+Monocyte-Derived+Cells+After+Mild+and+Severe+Traumatic+Brain+Injury%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">Differential Activation of Infiltrating Monocyte-Derived Cells After Mild and Severe Traumatic Brain Injury.</a> Shock. 43 (3), 255-260 (2015).</li>
<li>Makinde, H. M., Cuda, C. M., Just, T. B., Perlman, H. R., Schwulst, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonclassical+Monocytes+Mediate+Secondary+Injury%2C+Neurocognitive+Outcome%2C+and+Neutrophil+Infiltration+after+Traumatic+Brain+Injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Nonclassical Monocytes Mediate Secondary Injury, Neurocognitive Outcome, and Neutrophil Infiltration after Traumatic Brain Injury.</a> Journal of Immunology. 199 (10), 3583-3591 (2017).</li>
<li>Thompson, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lateral+fluid+percussion+brain+injury%3A+a+15-year+review+and+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Lateral fluid percussion brain injury: a 15-year review and evaluation.</a> Journal of Neurotrauma. 22 (1), 42-75 (2005).</li>
<li>Marmarou, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+model+of+diffuse+brain+injury+in+rats.+Part+I%3A+Pathophysiology+and+biomechanics%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">A new model of diffuse brain injury in rats. Part I: Pathophysiology and biomechanics.</a> Journal of Neurosurgery. 80 (2), 291-300 (1994).</li>
<li>Reneer, D. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+multi-mode+shock+tube+for+investigation+of+blast-induced+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">A multi-mode shock tube for investigation of blast-induced traumatic brain injury.</a> Journal of Neurotrauma. 28 (1), 95-104 (2011).</li>
<li>Ma, X., Aravind, A., Pfister, B. J., Chandra, N., Haorah, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+Models+of+Traumatic+Brain+Injury+and+Assessment+of+Injury+Severity%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Animal Models of Traumatic Brain Injury and Assessment of Injury Severity.</a> Molecular Neurobiology. , (2019).</li>
<li>Makinde, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monocyte+depletion+attenuates+the+development+of+posttraumatic+hydrocephalus+and+preserves+white+matter+integrity+after+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Monocyte depletion attenuates the development of posttraumatic hydrocephalus and preserves white matter integrity after traumatic brain injury.</a> PLoS One. 13 (11), e0202722(2018).</li>
<li>Osier, N. D., Dixon, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Controlled+Cortical+Impact+Model%3A+Applications%2C+Considerations+for+Researchers%2C+and+Future+Directions%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neurology%22%5BJournal%5D)">The Controlled Cortical Impact Model: Applications, Considerations for Researchers, and Future Directions.</a> Frontiers in Neurology. 7, 134(2016).</li>
<li>Iaccarino, C., Carretta, A., Nicolosi, F., Morselli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+severe+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of severe traumatic brain injury.</a> Journal of Neurosurgical Sciences. 62 (5), 535-541 (2018).</li>
</ol>

Yazarların hiçbir mali çıkar çatışması yok.

Güvenilir ve tutarlı bir yaralanma uygulamak için kritik olan birkaç adım vardır. İlk olarak, fare kraniektomi performansı sırasında hiçbir hareket sağlayan cerrahi anestezi derin bir düzleme ulaşmak gerekir. Kemirgenlerde genel anesteziyi tetiklemek için çok sayıda anestezik rejim kullanılabilirken, inhalasyonanestezisi gibi solunum depresyonuna neden olan anesteziler ciddi bir TBI ile kombine edildiğinde solunum durmasına neden olabilir. Bu protokolde intraperitoneal enjekte edilen ketamin (125 mg/kg) ve ksilazin (10 m...

Hastalık Kontrol ve Yaralanma Önleme Merkezleri yaklaşık 2 milyon Amerikalı travmatik bir beyin hasarı (TBI) her yıl1,2sürdürmek tahmin . Aslında, TBI sağlık maliyetleri yılda 80 milyar dolara yakın ve yaklaşık 4.000.000 $ kişi başına yılda ciddi bir TBI 3,4,5hayatta ile Amerika Birleşik Devletleri'nde tüm yaralanma ile ilgili ölümlerin%30üzerinde katkıda bulunur. TBI etkisi önemli uzun vadeli nörokognitif ve nöropsikiyatrik komplikasyonlar davranışsal sinsi başlangıcı ile hayatta kalanlar tarafından uğradığı vurgulanır, bilişsel, ve motor bozukluklar Kronik Travmatik Ensefalopati olarak adlandırdığı (CTE) 6.000 , 7.000 , 8.000 , 9.000 , 10- Hatta subklinik sarsıntılı olaylar-klinik belirtilere neden olmayan bu etkiler-uzun vadeli nörolojik disfonksiyon yol açabilir11,12.
TBI çalışma için hayvan modelleri geç 1800's13beri istihdam edilmiştir. 1980'lerde TBI modelleme amacıyla pnömatik bir etkileyici geliştirilmiştir. Bu yöntem artık kontrollü kortikal etki (CCI)14olarak adlandırılır. CCI kontrolü ve tekrarlanabilirliği, araştırmacıların modeli kemirgenlerde kullanılmak üzere uyarlamalarına yol açtı15. Laboratuvarımız ticari olarak kullanılabilir bir etki leyici ve elektronik aktive cihazı16,17ile TBI ikna etmek için bu modeli kullanır. Bu model, kullanılan biyomekanik parametrelere bağlı olarak klinik olarak uygulanabilir TBI durumları geniş bir yelpazede üretme yeteneğine sahiptir. Laboratuarımızda ciddi bir yaralanma sonrası TBI beyinlerinin histolojik değerlendirilmesi, önemli ipsilateral kortikal ve hipokampal kaybın yanı sıra kontralateral ödem ve distorsiyon olduğunu göstermektedir. Ayrıca, CCI davranışsal tahliller 18 ile ölçülenolarak motor ve bilişsel fonksiyon tutarlı bir bozulma üretir. CCI sınırlamaları kraniyotomi ihtiyacı ve darbeci ve aktive cihazı edinme gideri içerir.
TBI birkaç ek modelleri var ve iyi lateral sıvı perküsyon modeli de dahil olmak üzere literatürde kurulmuştur, ağırlık damla modeli, ve patlama yaralanma modeli19,20,21. Bu modellerin her biri kendi farklı avantajları olsa da ana dezavantajları karışık yaralanma, yüksek mortalite ve standardizasyon eksikliği, sırasıyla22. Ayrıca, bu modellerin hiçbiri CCI'ın doğruluğunu, hassasiyetini ve tekrarlanabilirliğini sunmaz. Kameralı cihaza biyomekanik parametreleri girerek, CCI modeli araştırmacının yaralanmanın büyüklüğü, yaralanmanın derinliği ve beyne uygulanan kinetik enerji üzerinde hassas bir kontrol sağlamasına olanak tanır. Bu araştırmacılar beynin belirli bölgelerine TBI tüm spektrum u uygulamak için yeteneği verir. Ayrıca deneyden deneye kadar en büyük tekrarlanabilirliği sağlar.

<table><tbody><tr><td>AnaSed Enjeksiyon Ksilazin Steril Çözelti</td><td>LLOYD, Inc.</td><td></td><td></td>5939911020</tr><tr><td>Buprenorfin SR Lab 0.5mg / mL</td><td>Zoopharm-Yaban Hayatı İlaçları ABD</td><td>BSRLAB0.5-182012</td><td></td></tr><tr><td>Yüksek Hızlı Döner Mikromotor KiT0</td><td>Foredom Elektrik Şirketi</td><td>K.1070</td><td></td></tr><tr><td>Stereotaxix CCI</td><td>Leica Biosystems Nussloch GmbH</td> için Imapact one <td></td> 39463920 <td></td></tr><tr><td>Ketathesia Ketamin HCl Enjeksiyonu USP</td><td>Henry Schein, Inc</td><td>56344</td><td></td></tr><tr><td>Fareye Özel Stereotaksik Taban</td><td>Leica Biosystems Nussloch GmbH</td><td>39462980</td><td></td></tr><tr><td>Mikro Matkap için Trephines</td><td>Fine Science Tools, Inc</td><td>18004-50</td><td></td></tr></tbody></table>

travmatik beyin hasarı İndüksiyonu için kontrollü kortikal etki murine modeli

Murine Model of Controlled Cortical Impact for the Induction of Traumatic Brain Injury

Hastalık Kontrol ve Yaralanma Önleme Merkezleri yaklaşık 2 milyon kişi travmatik bir beyin hasarı (TBI) Amerika Birleşik Devletleri'nde her yıl sürdürmek tahmin. Aslında, TBI tüm yaralanmaya bağlı mortalite üçte birden fazla katkıda bulunan bir faktördür. Bununla birlikte, TBI patofizyolojisinin altında yatan hücresel ve moleküler mekanizmalar tam olarak anlaşılamamıştır. Bu nedenle, insan hastalarda TBI ile ilgili yaralanma mekanizmalarını kopyalayabilen TBI'nin preklinik modelleri kritik bir araştırma ihtiyacıdır. TBI kontrollü kortikal etki (CCI) modeli doğrudan maruz korteks etkilemek için mekanik bir cihaz kullanır. Hiçbir model insan hastalarda farklı yaralanma kalıplarını ve TBI heterojen doğasını tam olarak özetleyebilir iken, CCI klinik olarak uygulanabilir TBI geniş bir yelpazede indükleme yeteneğine sahiptir. Ayrıca, CCI kolayca araştırmacılar deneyler arasında yanı sıra araştırmacı gruplar arasında sonuçları karşılaştırmak için izin standartlaştırılır. Aşağıdaki protokol, TBI'nin bir murine modelinde ticari olarak kullanılabilen bir cihazla ciddi bir CCI uygulanmasının ayrıntılı bir açıklamasıdır.

Darbeci doğrudan stereotaksik çerçeveye monte edilerek darbe noktasının, derinliğin ve penetrasyonun kontrolü için 10 m'ye kadar çözünürlük sağlar. Kullanılan elektromanyetik kuvvetler 1,5-6 m/s arasında değişen darbe hızlarını verebilir. Bu, klinik olarak ilgili Tüm TBI yelpazesinde benzersiz hassasiyet ve tekrarlanabilirlik sağlar. Araştırmacılar, istenen yaralanma derecesini en iyi şekilde üreten parametreleri belirlemek için darbe uç boyutu, darbe hızı ve darbe derinliği gibi yaralanma parametrelerini değiştiren pilo...

Burada açık kafa kontrollü kortikal darbe ile murine travmatik beyin hasarı indüksiyon için bir protokol açıklar.

Travmatik Beyin Hasarı İndüksiyonu için Kontrollü Kortikal Etki Murine Modeli

The Centers for Disease Control and Injury Prevention estimate that almost 2 million people sustain a traumatic brain injury (TBI) every year in the ...

Kontrollü kortikal etki denekler ve deneyler arasında standartlaştırmak kolaydır ve beynin tam olarak tanımlanmış bölgelerine travmatik beyin hasarı tüm spektrumun uygulanması için izin verir. Bu prosedürü gösteren Mekke İslam, benim laboratuvarda bir araştırma teknisyeni. Bu teknik kemirgenlerde travmatik beyin hasarı indükleyen en tutarlı ve tekrarlanabilir formu olmaya devam etmektedir.Yordamı başlamadan önce, etkileyen aygıtı stereotaksik çalışma çerçevesine takın. Uygun deneysel hız ve iyi zaman için istenilen biyomekanik parametrelerile harekete geçirmek cihazı. Yeni kişisel koruyucu ekipman ve steril eldiven don ve anestezi deneysel fare parmak çimdik yanıt eksikliği onaylamak.Cerrahi bölge için kürk tıraş ve hayvanın gözlerine merhem uygulamak için makas kullanın. Daha sonra fareyi ameliyathaneye yerleştirin ve tıraşlı deriyi üç sıralı iyot bazlı ve alkol cerrahi önlüklerle hazırlayın. Kontrollü kortikal travmatik beyin hasarı na neden olmak için, ilk kafatası ortaya çıkarmak için kafa derisi orta hattı boyunca bir santimetre lik kesi yapmak için bir neşter kullanın.Ameliyat alanından kafa derisi geri ve maruz kafatası üzerinde sagittal ve koronal dikişleri belirlemek. Bir

murine-model-controlled-cortical-impact-for-induction-traumatic-brain

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Bu video, orta hat kafatası kesisi yaparak, kafatasını delerek ve beyin korteksini ortaya çıkarmak için kemik flecini çıkararak ve travmayı indüklemek için yüksek basınç uygulayarak bir farede açık kafatası travmatik beyin hasarına neden olma prosedürünü göstermektedir. Yara daha sonra fare modelini sonraki deneylere hazırlamak için dikilir.

Bir Çarpma Probu Kullanarak Travmatik Beyin Hasarı Fare Modeli Oluşturma

Bu video, bir fare modelinde travmatik beyin hasarını (TBI) indükleme prosedürünü göstermektedir. Kafatasında bir açıklık oluşturmak için açıkta kalan bir kafatasına sahip anestezi uygulanmış bir fare alınır ve daha sonra bir darbe cihazı kullanılarak kontrollü bir kortikal yaralanma indüklenir. Yaralanma beyin dokusuna zarar vererek bilişsel işlev ve motor koordinasyonun bozulmasına neden olur.

Bir çarpma cihazı kullanarak travmatik beyin hasarının bir fare modelini oluşturma

Kaynak: Macheda, T., et. al. Farelerde Hafif Travmatik Beyin Hasarının Elektromanyetik Kontrollü Kapalı Kafa Modeli. J. Vis. Uzm. (2022)Bu video, stereotaksik çerçeve kullanan bir fare modelinde kapalı kafa yaralanmasına neden olma prosedürünü göstermektedir. Kontrollü etki, hafif travmatik beyin hasarını taklit ederek, araştırmacıların yaralanma sonrası refleksleri ve davranışları ölçerek nörolojik etkileri ve iyileşmeyi incelemelerine olanak tanır.

Bir Fare Modelinde Hafif Travmatik Beyin Hasarının İndüksiyonu

Travmatik beyin yaralanmaları (TBH'ler) ciddi bir sağlık sorunu olmaya devam etmektedir. Kontrollü kortikal darbe cerrahisi modeli kullanılarak, TBH'nin etkileri ve olası tedavi yöntemleri üzerine araştırmalar yapılabilir.

Travmatik Beyin Hasarı için Kontrollü Kortikal Etki Modeli

Sporcular, her yıl birkaç yüz hafif travmatik beyin yaralanması (mTBI) / sarsıntıyı emerler; Bununla birlikte, bunların beynin üzerindeki sonuçları tam olarak anlaşılamamıştır. Bu nedenle, klinik olarak ilgili semptomları sürekli olarak çoğaltan tek ve tekrarlayan bir mTBI'nin bir hayvan modeli mTBI ve sarsıntı çalışmalarını ilerletmenin yollarını sağlar.

Tek ve Tekrarlayan Hafif Travmatik Beyin Hasarı İçin Bir Fare Modeli

Bu protokol, Açık kafatası travmatik beyin hasarı ve kültür insan kaynaklı pluripotent kök hücre türeyen hücrelerin transplantasyonu için bir fare modeli için metodolojileri yaralanma sitesine gösterir. Bu prosedürlerden gelen sonuçların davranışsal ve histolojik testleri de kısaca açıklanmıştır.

Insan kaynaklı pluripotent kök hücre türetilen nöral hücrelerin terapötik transplantasyonu ile fare beyin yaralanması kontrollü Kortiik darbe modeli

Serebral kontüzyonun eşlik ettiği intraparankimal kanama ve nöroinflamasyon ciddi ikincil beyin hasarını tetikleyebilir. Bu protokol, araştırmacıların kanama, kontüzyon ve travma sonrası bağışıklık tepkilerini incelemelerine ve potansiyel terapötikleri keşfetmelerine olanak tanıyan fare kontrollü bir kortikal etki (CCI) modelini detaylandırır.

Travmatik Kanama, Konkontüzyon ve Nöroinflamasyon için Preklinik Kontrollü Kortikal Etki Modeli

Protokol, bir fare modelinde hafif travmatik beyin hasarını tanımlar. Özellikle, hafif bir orta hat kapalı kafa travmasını indüklemek için adım adım bir protokol ve hayvan modelinin karakterizasyonu tam olarak açıklanmaktadır.

Farelerde Hafif Travmatik Beyin Hasarının Elektromanyetik Kontrollü Kapalı Kafa Modeli

Burada, akut fazda korunmuş beyin yapısı ve uzun süreli beyin atrofisi ile komplike olmayan hafif travmatik beyin hasarının nörogörüntü sonucunu kopyalayan bir kapalı kafa travması hayvan modeli oluşturmak için bir protokol sunuyoruz. Boylamsal manyetik rezonans görüntüleme, kanıt için kullanılan birincil yöntemdir.

Kilo Düşürme Yöntemi ile Modifiye Edilmiş ve Manyetik Rezonans Görüntüleme ile Kanıtlanmış Komplike Olmayan Hafif Travmatik Beyin Hasarı Modelinin Geliştirilmesi

Yanal sıvı perküsyon (LFP), farelerde travmatik beyin hasarı oluşturulmuş bir model olduğunu göstermiştir. LFP hayvan modellerinde üç ana kriterleri yerine getirir: geçerliliği, güvenilirliği ve klinik önemi. Cerrahi kraniotomi oluşan prosedür, hub tespit, fokal ve diffüz yaralanma ile sonuçlanan yaralanma indüksiyonu ile takip açıklanmıştır.

Yanal Akışkan Perküsyon: Travmatik Beyin Hasarı Farelerde Modeli

Öğrenin, farelerde kontrollü kortikal etki yöntemiyle travmatik beyin hasarı oluşturma protokolünü. Bu model, doku kaybı ve davranışsal analizler için güvenilir sonuçlar sağlar.

Travmatik Beyin Hasarı İndüksiyonu için Kontrollü Kortikal Etki Murine Modeli

Daha fazla video keşfet