Travmatik Beyin Hasarı İndüksiyonu için Kontrollü Kortikal Etki Murine Modeli

Burada açık kafa kontrollü kortikal darbe ile murine travmatik beyin hasarı indüksiyon için bir protokol açıklar.

Kontrollü kortikal etki denekler ve deneyler arasında standartlaştırmak kolaydır ve beynin tam olarak tanımlanmış bölgelerine travmatik beyin hasarı tüm spektrumun uygulanması için izin verir. Bu prosedürü gösteren Mekke İslam, benim laboratuvarda bir araştırma teknisyeni. Bu teknik kemirgenlerde travmatik beyin hasarı indükleyen en tutarlı ve tekrarlanabilir formu olmaya devam etmektedir.

Yordamı başlamadan önce, etkileyen aygıtı stereotaksik çalışma çerçevesine takın. Uygun deneysel hız ve iyi zaman için istenilen biyomekanik parametrelerile harekete geçirmek cihazı. Yeni kişisel koruyucu ekipman ve steril eldiven don ve anestezi deneysel fare parmak çimdik yanıt eksikliği onaylamak.

Cerrahi bölge için kürk tıraş ve hayvanın gözlerine merhem uygulamak için makas kullanın. Daha sonra fareyi ameliyathaneye yerleştirin ve tıraşlı deriyi üç sıralı iyot bazlı ve alkol cerrahi önlüklerle hazırlayın. Kontrollü kortikal travmatik beyin hasarı na neden olmak için, ilk kafatası ortaya çıkarmak için kafa derisi orta hattı boyunca bir santimetre lik kesi yapmak için bir neşter kullanın.

Ameliyat alanından kafa derisi geri ve maruz kafatası üzerinde sagittal ve koronal dikişleri belirlemek. Bir kraniektomi gerçekleştirmek için, maksimum hızda matkap etkinleştirmek için beş milimetre trephine matkap biti ile bir mikromatkap donatmak ve sagittal sütür iki milimetre sol kafatası ve iki milimetre rostral kafatasına dik bit uygulamak nazik hatta basınç ile koronal sütür. Matkap kafatasına girdiğinde hafif bir verme hissedilecektir.

Kemik flebini çıkarmak için forceps ve küçük bir gösterge hipodermik iğne kullanın, altta yatan dura mater tamamen açığa ve operatif alana darbeucu ucu döndürmek. Stereotaksik çerçevenin minyatür kulak çubukları arasındaki ikili zamansal kemikleri sabitleyin ve kesici diş etkenin içindeki kesici dişleri kilitleyin ve fare kafası üzerinde kararlı bir üç noktalı tutun. Açıkta kalan dura mater ile temas edene kadar ucu düşürün.

Cihazın temas sensörü, temasın yapıldığı konusunda uyarmak için duyulabilir bir ton yapacaktır. Etkilenen ucu sıfır noktasından geri çekin ve istenen etki derinliğini ayarlamak için stereotaksik çerçeve üzerindeki darbeci konumunu düşürün. Daha sonra, hayvanı çerçeveden çıkarmak için cihazı sahanın dışına döndürmeden önce etki leyiciyi harekete geçirmek için harekete geçirmek.

Yaralanmadan hemen sonra, herhangi bir kanamayı kontrol etmek ve kafatasını kurutmak için taze bir aplikatör kullanmak için kafatası ve yaralı kortikal yüzeye steril pamuk uçlu aplikatördoğrudan basınç uygulayın. Standart tekniklere göre kraniektomi üzerinde kafa derisi kapatın ve postoperatif analjezi uygulayın. Daha sonra hayvanı lateral dekübitus iyileşme pozisyonuna, tam recumbency kadar izleme ile temiz bir önceden ısıtılmış kafese yerleştirin ve deney boyunca her üç günde bir vücut ağırlığını ölçmek.

Subdural intraparenkimal ve subaraknoid kanama sonucu ortaya çıktı. Ağır yaralanma sonrası travmatik beyin hasarı beyin dokusu bölümlerinin histolojik değerlendirilmesi önemli bir ipsilateral kortikal ve hipokampal kaybın yanı sıra kontralateral ödem ve bozulmaortaya koymaktadır. Ağır yaralı beyinlerin MR görüntüleme de ilerleyici doku kaybı ve beyin-spinal sıvı ile replasmanı gösterir.

Kontrollü kortikal etkisi klinik olarak uygulanabilir beyin yaralanmaları geniş bir yelpazede üretme yeteneğine sahip güvenilir ve tutarlı bir yaralanma neden olur. Kontrollü kortikal etki yöntemimiz, davranışsal ve görüntüleme analizi için ciddi travmatik beyin hasarının bir murine modelini oluşturur ve moleküler ve hücresel analiz için doku üretir.