Name: SerbestÇe Hareket Eden Farelerde Çift Alan Yüksek Yoğunluklu Kayıt için Kurtarılabilir Opto-Silikon Prob ve Tetrode ile Hibrid Microdrive Sistemi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-08-10T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 57 s
Description: Öğrenin, serbestçe hareket eden farelerde çok bölgeli sinir kayıtları için opto-silikon prob ve tetrod içeren hibrit mikro-sürücü dizisi nasıl kurulur. Bu yöntem, elektrofizyolojik kayıt ve optogenetik manipülasyonu birleştirerek beyin bölgeleri arasındaki dinamik etkileşimleri araştırmayı sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma kısmen Japonya Bilim intidanSı Araştırma Burslarını Destekleme Derneği (HO), Donatılmış Bilgin Programı (TK), İnsan Sınırı Bilim Programı (TK), Beyin Araştırma Vakfı (TK), Fakülte Bilim ve Teknoloji Edinimi ve Tutma Programı (TK), Beyin ve Davranış Araştırma Vakfı (TK) ve Sumitomo Vakfı Araştırma Hibe (JY), NARSAD Genç Araştırmacı Araştırma Grant (JY) tarafından. Makalenin hazırlanması sırasında değerli yorum ve öneriler için W. Marks teşekkür ederiz.

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Protokol, bağımsız ayarlanabilir tetrodelar ve serbestçe davranan farelerde silikon sonda kullanarak iki beyin alanından nöral aktivitelerin kaydedilmesine olanak tanıyan melez bir mikrosürücü dizisinin nasıl inşa edilip yerleştirilecek olduğunu gösteriyor. Ayrıca optogenetik deneyler ve deneylerden sonra silikon sonda kurtarma gösterir. Ayarlanabilir silikon probu33 veya opto-silikon probu36 implantasyonu daha önce farelerde gösterilmiş olsa da, bu protokol esnek sağlamak ...

Farklı beyin bölgelerinin birbirleriyle nasıl dinamik olarak etkileşime girebildiğini araştırarak, nöronal aktivitenin öğrenme ve hafıza gibi bilişsel süreci nasıl desteklediğini anlamak çok önemlidir. Bilişsel görevlerin altında yatan nöral aktivitedinamiklerini açıklamak için, büyük ölçekli hücre dışı elektrofizyoloji mikrosürücüdizileri1 ,2,3yardımı ile serbestçe hareket eden hayvanlarda yapılmıştır, 4 . Son yirmi yılda, mikrosürücü dizi çeşitli fareler için birden fazla beyin bölgelerine elektrotlar implant geliştirilmiştir5,6,7,8 ve fareler9, 10.000 , 11.11.20 , 12. Bununla birlikte, mevcut mikrosürücü tasarımları genellikle birden fazla prob türünün kullanımına izin vermez, araştırmacıları belirli yararları ve sınırlamaları olan tek bir elektrot türünü seçmeye zorlar. Örneğin, tetrode dizileri dorsal hipokampus CA1gibiyoğun nüfuslu beyin bölgeleri için iyi çalışır1 ,13, silikon problar anatomik bağlantıları incelemek için daha iyi bir geometrik profil vermek ise14 , 15. yıl.
Tetrodes ve silikon problar genellikle in vivo kronik kayıt için kullanılır, ve her biri kendi avantajları ve dezavantajları vardır. Tetrodes maliyet etkinliği ve mekanik sertlik ek olarak, tek elektrotlar16,17daha iyi tek birim izolasyon önemli avantajları olduğu kanıtlanmıştır. Ayrıca microdrives8,18,19,20ile kombine edildiğinde tek birim faaliyetlerinin daha yüksek verim sağlar. Nöral devrelerin işlevini anlamak için aynı anda kaydedilen nöronların sayısını artırmak esastır21. Örneğin, zamana bağlı22 veya 23 hücreyi ödüllendirmek gibi işlevsel olarak heterojen hücre türlerinin küçük popülasyonlarını araştırmak için çok sayıda hücre gerekir. Başak dizilerinin kod çözme kalitesini artırmak için çok daha yüksek hücre numaraları gereklidir13,24,25.
Tetrodes, ancak, mekansal olarak dağıtılmış hücreleri kayıt bir dezavantaj var, korteks veya talamus gibi. Tetrodes aksine, silikon problar mekansal dağıtım ve yerel alan potansiyelleri etkileşim sağlayabilir (LPS) ve yerel bir yapı içinde spiking faaliyetleri14,26. Çok saplı silikon problar kayıt sitelerinin sayısını daha da artırır ve tek veya komşu yapılar arasında kayıt sağlar27. Ancak, bu tür diziler tetrodes göre elektrot sitelerinin konumlandırma daha az esnektir. Buna ek olarak, karmaşık başak sıralama algoritmaları tetrodes28,29,30tarafından elde edilen verileri yansıtmak için komşu kanalların eylem potansiyelleri hakkında bilgi ayıklamak için yüksek yoğunluklu problar gereklidir. Bu nedenle, tek birimlerin genel verim genellikle tetrodes daha azdır. Ayrıca, silikon problar kırılganlık ları ve yüksek maliyeti nedeniyle dezavantajlıdır. Bu nedenle, tetrodes vs silikon probların seçimi kayıt amacına bağlıdır, hangi kayıt sitelerinde tek birim veya mekansal profilleme yüksek verim elde edilmesi öncelikli olup olmadığı bir sorudur.
Nöral aktivite kayıt ek olarak, optogenetik manipülasyon belirli hücre tipleri ve / veya yolların nöral devrefonksiyonları 13,31katkıda nasıl incelemek için nörolojidaha güçlü araçlardan biri haline gelmiştir, 32,33. Ancak, optogenetik deneyler uyarım ışık kaynaklarına fiber konektör eklemek için mikrosürücü dizi tasarımı ek dikkate gerektirir34,35,36. Genellikle, fiber optik bağlantı beyinde sonda mekanik bir kayma yol açabilir nispeten büyük bir kuvvet gerektirir. Bu nedenle, geleneksel microdrive dizileri için implante edilebilir bir optik fiber birleştirmek için önemsiz bir görev değildir.
Yukarıdaki nedenlerden dolayı, araştırmacıların elektrot türünü optimize etmesi veya kaydın amacına bağlı olarak optik fiber yerleştirmeleri gerekmektedir. Örneğin tetrodes hipokampus daha yüksek birim verim elde etmek için kullanılır1,13, silikon problar kortikal alanların laminar derinlik profilini araştırmak için kullanılır, medial entorinal korteks gibi (MEC)37. Şu anda, tetrodes ve silikon probların eşzamanlı implantasyonu için mikrosürücüler sıçanlar için bildirilmişti5,11. Ancak, mikrosürücülerin ağırlığı, fare başında sınırlı alan ve farklı problar istihdam etmek için mikrosürücünün tasarımı için mekansal gereksinimler nedeniyle farelere birden fazla tetrode ve silikon prob yerleştirmek son derece zordur. Bir mikrosürücü olmadan silikon problar implant mümkün olmasına rağmen, Bu prosedür prob ayarı için izin vermez ve silikon-prob kurtarma başarı oranını düşürür12,38. Ayrıca, optogenetik deneyler microdrive dizi tasarımı ek hususlar gerektirir. Bu protokol, serbestçe hareket eden farelerde kronik kayıt için bir mikrosürücü dizisinin nasıl inşa edilip yerleştirilebildiğini göstermektedir, bu da dokuz bağımsız olarak ayarlanabilir tetrode ve bir ayarlanabilir opto-silikon probun implantasyonuna olanak sağlar. Bu mikrosürücü dizisi aynı zamanda optogenetik deneyleri ve silikon sondanın kurtarılmasını da kolaylaştırır.

<table><tbody><tr><td># 00-90 vida</td><td>J.I. Morris</td> <td># 00-90-1 / 8</td><td>EIB vidalar</td></tr> <tr><td># 0-80 somun</td><td>Küçük Parçalar</td><td>B00DGB7CT2</td><td>fiber yüksük tutucuyu tutmak için pirinç somun</td></tr> <tr><td># 0-80 vida</td><td>Küçük Parçalar</td><td>B000FMZ57G</td><td>prob konektörü montajı, fiber yüksük tutucu ve koruyucu koni için pirinç makine vidası</td></tr><tr><td>22 Ga polietereterketon tüpler</td><td>Küçük Parçalar</td><td>SLPT-22-24</td><td>mekiğe takmak için, 0.025 inç iç çap</td></tr><tr><td>23 Ga paslanmaz boru</td><td>Tetrode için</td><td>Küçük Parçalar</td><td>HTX-23R</td></tr><tr><td>23 Ga paslanmaz tel</td><td>Küçük Parçalar</td><td>HTX-23R-24-10</td><td>L şekli/destek teli için</td></tr><tr><td>26 Ga paslanmaz tel</td><td>Kılavuz direkler için</td><td>Küçük Parçalar</td><td>GWX-0200</td></tr><tr><td>30 Ga paslanmaz tel</td><td>Tetrode</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>için Küçük Parçalar HTX-30R3 boyutlu CAD yazılım paketi</td><td>Dassault Syst&egrave; mes</td><td>SolidWorks 2003</td><td></td></tr><tr><td>3D yazıcı</td><td>FormLab</td><td>Form2</td><td></td></tr><tr><td>5.5mil poliimid yalıtım tüpleri</td><td>HPC Medical</td><td>72113900001-012</td><td></td></tr><tr><td>alüminyum folyo bant</td><td>Tyco</td><td>Tyco Yapıştırıcılar</td><td>617022 Alternatif koruyucu koni için</td>Alüminyum Folyo Bant</tr><tr><td>iletken macun</td><td>YSHIELD</td><td>HSF54</td><td>koruyucu koni için</td></tr><tr><td>silikon problu mikro sürücü</td><td>AMT</td><td>UNM1.25-HalfMoon</td><td>yarım ay paslanmaz vida, 1,5 mm çap, 300 ve mikro için özelleştirilmiş vidalar; m diş aralığı</td></tr><tr><td>tetrode microdrive</td><td>AMT</td><td>Yamamoto_0000-160_9mm</td><td>için özelleştirilmiş vidalar oluklu paslanmaz vida, 0,5 mm çap, 160 & m iplik aralığı, tasarımımız için sipariş üzerine özel yapım</td></tr><tr><td>dental akrilik</td><td>Stoelting</td><td>51459</td><td></td></tr><tr><td>dental model reçine</td><td>FormLab</td><td>RS-F2-DMBE-02</td><td></td></tr><tr><td>Dremel döner alet</td><td>Dremel</td><td>model 800</td><td>a öğütücü</td></tr><tr><td>matkap ucu</td><td>Güzel Bilim Aracı</td><td>19007-05</td><td></td></tr><tr><td>elektrik arayüz kartı</td><td>Neuralynx</td><td>EIB-36-Dar</td><td></td></tr><tr><td>epoksi</td><td>Devcon</td><td>GLU-735.90</td><td>5 dakika epoksi</td></tr><tr><td>göz merhemi</td><td>Dechra</td><td>Puralube Ameliyat</td><td>sırasında farelerin gözlerinin kurumasını önlemek için</td>Oftalmik Merhem</tr><tr><td>fiber parlatma levhası</td> Optik fiber ince cımbızı <td>parlatmak için</td><td>Thorlabs</td><td>LFG5P</td></tr><tr><td></td><td>Silikon prob altınının yüklenmesi/geri kazanılması için</td><td>Protech International</td><td>15-368</td></tr><tr><td> pimler</td><td>Neuralynx</td><td>EIB Pimleri Küçük</td><td></td></tr><tr><td>topraklama kablosu</td><td>Sistemleri</td><td>781500</td><td>0.010 inç çıplak gümüş tel</td></tr><tr><td>headstage preamp</td><td>Neuralynx</td><td>HS-36</td><td></td></tr><tr><td>empedans ölçer</td><td>BAK elektroniği</td><td>Model IMP-2</td><td>1 kHz test frekansı</td></tr><tr><td>mineral yağ</td><td>ZONA</td><td>36-105</td><td>vidalar ve teller yağlama için</td></tr> fiber <tr><td>optik</td><td>Doric</td><td>MFC_200/260-0.22_50mm_ZF1.25(G)_FLT</td><td></td></tr><tr><td>Kayıt sistemi</td><td>Neuralynx</td><td>Digital Lynx 4SX</td><td></td></tr><tr><td>yakut fiber çizici</td><td>Thorlabs</td><td>S90R</td><td>fiber optik silikon gresi parçalamak için</td></tr><tr><td></td><td>Güzel Bilim Aracı</td><td>29051-45</td><td></td></tr><tr><td>silikon prob</td><td>Neuronexus</td><td>A1x32-Edge-5mm-20-177</td><td>Şekil 3, 4A, 4B, 5</td></tr><tr><td>silikon prob</td><td>Neuronexus</td><td>A1x32-6mm-50-177</td><td>Şek. 4C</td></tr><tr><td>silikon prob yıkama solüsyonu</td><td>Alcon</td><td>AL10078844</td><td>kontakt lens temizleyici</td></tr><tr><td>silikon yağlayıcı</td><td>Smooth-On</td><td>Dragon Skin 10 FAST</td><td>mikrodrive kalıbının hazırlanması için</td></tr><tr><td>gümüş boya</td><td>GC elektronik</td><td>22-023</td><td>gümüş baskı II kaplama, topraklama kabloları için kullanılır</td></tr><tr><td>kafatası vidası</td><td>Otto Frei</td><td>2647-10AC</td><td>0,8 mm çap, 0,200 mm diş aralığı</td></tr><tr><td>standart cerrahi makas</td><td>ROBOZ</td><td>RS-5880</td><td></td></tr><tr><td>stereotaksik aparat</td><td>Kopf</td><td>Model 942</td><td></td></tr><tr><td>süper yapıştırıcı</td><td>Loctite</td><td>LOC230992</td><td>kılavuz direkli</td></tr><tr><td>cerrahi cımbızlara</td> uygulamak için <td>ROBOZ</td><td>RS-5135</td><td></td></tr><tr><td>Tetrode Twister</td><td>Jun Yamamoto</td><td>TT-01</td><td></td></tr><tr><td>tetrode teller</td><td>Sandvik</td><td>PX000004</td><td></td></tr></tbody></table>

serbestÇe hareket eden farelerde Çift alan yüksek yoğunluklu kayıt için kurtarılabilir opto-silikon prob ve tetrode ile hibrid microdrive sistemi

Hybrid Microdrive System with Recoverable Opto-Silicon Probe and Tetrode for Dual-Site High Density Recording in Freely Moving Mice

Çok bölgesel nöral kayıtlar, birden fazla beyin bölgesi arasındaki ince zaman ölçeğietkileşimlerini anlamak için önemli bilgiler sağlayabilir. Ancak, geleneksel mikrosürücü tasarımları genellikle tek veya birden fazla bölgeden kaydetmek için tek bir elektrot türünün kullanılmasına izin vererek tek birimli veya derinlikprofil kayıtlarının verimini sınırlar. Ayrıca genellikle yol ve / veya hücre tipi belirli aktivite hedef optogenetik araçları ile elektrot kayıtları birleştirmek için yeteneği sınırlar. Burada sunulan serbestçe hareket eden fareler için bir hibrid microdrive dizi verim ve üretim ve microdrive dizi yeniden bir açıklama optimize etmektir. Mevcut tasarım dokuz tetrodes ve serbestçe hareket eden fareler de aynı anda iki farklı beyin alanlarına implante bir opto-silikon prob kullanır. Tetrodes ve opto-silikon prob bağımsız birim ve salınım faaliyetlerinin verimi maksimize etmek için beyinde dorsoventral eksen boyunca ayarlanabilir. Bu mikrosürücü dizisi aynı zamanda uzun menzilli nöral devrelerin bölgesel veya hücre tipine özgü tepkilerini ve işlevlerini araştırmak için optogenetik manipülasyona aracılık eden ışık için bir kurulum da içerir. Buna ek olarak, opto-silikon prob güvenli bir şekilde kurtarılabilir ve her deneyden sonra yeniden kullanılabilir. Microdrive dizisi 3D baskılı parçalardan oluştuğundan, mikro sürücülerin tasarımı çeşitli ayarları barındıracak şekilde kolayca değiştirilebilir. İlk açıklanan mikrosürücü dizisinin tasarımı ve optogenetik deneyler için bir silikon prob optik fiber eklemek için nasıl, tetrode demeti ve bir fare beynine dizi implantasyonu imalatı izledi. Optogenetik stimülasyonla birlikte yerel alan potansiyellerinin ve birim spikingin kaydedilmesi, serbestçe hareket eden farelerde mikrosürücü dizi sisteminin fizibilitesini de göstermektedir.

Microdrive dizisi 5 gün içinde inşa edildi. Mikrosürücü hazırlama zaman çizelgesi Tablo2'de açıklanmıştır. Bu mikrosürücü kullanılarak, dokuz tetrodes ve bir silikon sonda hipokampal CA1 ve farenin MEC içine implante edildi [21 hafta eski/ 29 g vücut ağırlığı erkek pOxr1-Cre (C57BL/6 arka plan)], sırasıyla. Bu transgenik fare MEC tabaka III piramidal nöronlarda Cre ifade eder. Fareye elektrot implantından 10 hafta önce MEC'ye 200 nL AAV5-DIO-ChR2-YFP (titre: 7.7 x 1012 gc/mL) enjekte edildi. L...

Bu protokol, serbestçe hareket eden farelerde iki beyin bölgesinde dokuz bağımsız olarak ayarlanabilir tetrode ve bir ayarlanabilir opto-silikon probu implantasyonu sağlayan bir hibrid microdrive dizisinin yapımını açıklar. Ayrıca güvenli bir şekilde kurtarma ve birden fazla amaç için opto-silikon probu yeniden kullanmak için bir yöntemdir gösterilmiştir.

SerbestÇe Hareket Eden Farelerde Çift Alan Yüksek Yoğunluklu Kayıt için Kurtarılabilir Opto-Silikon Prob ve Tetrode ile Hibrid Microdrive Sistemi

Multi-regional neural recordings can provide crucial information to understanding fine-timescale interactions between multiple brain regions. However, ...

Hibrit mikrosürücü tasarımımız, deneycilerin sadece birden fazla beyin bölgesinden kayıt yapmamalarını değil, aynı zamanda verim ve stabiliteyi optimize etmek için farklı türde elektrotlar seçmelerine de olanak tanır. Dokuz tetrode, bir silikon lineer sonda ve serbestçe hareket eden farelerle in vivo deneyleri için mikrosürücü dizisinde ayarlanabilir ve yeniden kullanılabilir fiber optikleri birleştirdik. Bu teknik kolayca sıçan veya marmosets gibi diğer büyük hayvanlara adapte edilebilir.Silikon sondalar son derece kırılgandır. Sondalarla uğraşırken dikkatli olmalıyız, örneğin, optik fiberi adapte ederken ve mekik tertibatını mikrosürücüye dönüştürürken. Mikrosürücü dizisi beş bölümden oluşur.Silikon sonda için microdrive vida hazırlamak için ilk 3D mikrosürücü plastik bir desen baskı ve desen etrafında geçici bir duvar yapmak için desen etrafında bant yerleştirin. Desen içine sıvı silikon jel dökün ve nazik sallayarak hava kabarcıkları kaldırın. Silikon iyileştiğinde, silikon jel kalıbını deseninden dikkatlice çıkarın.Sonraki 23 gauge paslanmaz çelik tel tüp 18 ve 9.5mm uzunlukları kesmek ve tüplerin üst 2 ila 3mm pürüzlü öğütücü kullanmak için bir döner öğütücü kullanın. Özel bir vida silikon yağı küçük bir hacim uygulayın ve tüpleri ayarlayın ve kalıp içine vida. Kalıp içine diş akrilik dökün ve tüpler ve vida etrafında herhangi bir hava kabarcıkları ortadan kaldırmak için bir şırınga kullanın.Diş akrilik tamamen kalıp mikrosürücü vida kaldırmak ve 60 derecelik bir açıya 18mm tel ucu bir ucundan 6mm viraj için pliers kullanın. Bir tornalama aleti kullanarak, kaliteyi kontrol etmek için mikrosürücü vidasını döndürün ve mikrosürücü vidasını microdrive dizi gövdesine türün ve vidanın düzgün bir şekilde yukarı ve aşağı hareket edip edemeyeceğini kontrol etmek için çevirin. Silikon sonda için mekiği hazırlamak için iki 5mm peek uzunluğunda kesmek ve mesiğin her iki tarafındaki tüpleri hizalamak için keskin makas kullanın.Tüpleri epoksi ile mekiğe yapıştırın ve kılavuz direklere küçük bir hacim silikon yağı uygulayın. Epoksi kuruduğunda, kaliteyi kontrol etmek için mekiği microdrive dizi gövdesinin kılavuz direklerinin üzerine yerleştirin. Mekik aşırı sürtünme olmadan sorunsuz hareket etmelidir.Optorode hazırlamak için uzunluğu 21mm optik fiber bir parça cleave ve düz ve parlak olana kadar fiber ucu öğütmek için bir Rubi kesici kullanın. Uç hazır olduğunda, optik fiberi elektrot sitelerinin üst kısmından 200 ila 300 mikrometre yükseksilikon sondanın ön tarafına hafifçe yerleştirin ve şeffaf bantla fiberi geçici olarak sabitleyin sonra optik fiberi küçük bir epoksi hacmiyle silikon probun tabanına yapıştırın ve epoksinin beş saat boyunca tedavi etmesini bekleyin. Mekiği silikon sondaya takmak için silikon sonda tabanının arkasına küçük bir hacim epoksi uygulayın ve mekik ile silikon sonda tabanı arasında bir boşluk oluşmasını önlemek için mekiğin alt kısmını silikon prob tabanına karşı hafifçe 2-3 dakika tutun.Epoksi tamamen iyileştiğinde ince cımbızile mekiğin oluğunu tutun ve servis tüplerini ana gövdenin kılavuz direklerine dikkatlice yerleştirmek için bir mikroskop kullanın. Mikrosürücü vidasını vida deliğine takmak için vidayı çevirin ve l şeklindeki tüpün ucunu, silikon probu ve mikrosürücü vidasını devreye sokmak için mekik kafasının oluğuna yerleştirin. Sonraki 3.5mm iplik uzunluğu na iki numara 0 vida kesti ve çapak kaldırmak için ipuçları eziyet.Prob konektör tutucuyu dizi gövdesine yerleştirin ve silikon probu elektrik konektörünü tutucuya takın. Probu konektör tutucuyu tutmak için 0 vida numarasını takın. Probu mikrosürücü dizi gövdesine yapıştırmamaya dikkat eden tutucudaki silikon prob konektörünü sabitlemek için epoksi kullanın.Ferrule tutucuyu opto-silikon probuna ve mikrosürücü dizi gövdesine takmak için, iki adet 0 numaralı vidayı 6mm iplik uzunluğuna kesin ve uçları öğütün. 2,5 ila 3mm dış çapları ile küçük hex fındık yapmak ve tutucunun bileşen A içine 0 vida eklemek için iki numaralı 0 makine vida sıyrık dışında Grind. Vida başlarını epoksi ile yapıştırın.Vücutla sürtünmeyi azaltmak için A ve B bileşenlerine küçük bir hacimsilikon gres uygulayın. A bileşenini geçici olarak vücuda takmak ve Bileşen B'yi a.Thread'in vidalarına yerleştirmek için ters cımbız kullanın ve ferrule tutucuyu vücuda sabitlemek için somunları sıkmak için pliers kullanın. Lif ferrule'nin tutucudan 4 ila 5mm dışarı yapışmasını gözeterek fiber ferrule'yi lif ferrule tutucunun oluğuna takın.Ferrule ve tutucu oluk arasında az miktarda epoksi uygulayın. Epoksi tedavi edildiğinde, somunları gevşetin ve düzgün hareket için mekik ve ferrule tutucukontrol etmek için mikrosürücü vida açın sonra ferrule tutucu üst konumda ve mekik tüpleri hala kılavuz direkleri ile ilişkili olduğunda prob ucu tamamen vücuda geri çekilir onaylayın. Kalkan konisini takmak için, mikrosürücüyü yerinde tutmak için koninin dışından iki adet 3,5 mm'lik 0 numaralı vidayı sabitle.Mikrosürücü dizisi, yapı tabloda belirtilen zaman çizelgesine göre tamamlanırsa beş gün içinde kurulabilir. Tetrode ayarı ndan sonra davranışsal performans doğrusal bir pistte ve açık bir alanda test edilebilir. Her iki deney türünde de farenin yaklaşık 30 dakika boyunca serbestçe keşfetmesine izin verilirken, elektrofizyolojik sinyaller kayıt oturumu boyunca şiddetli hareketle ilgili gürültü olmadan kaydedilir.Işık stimülasyonu daha sonra medial entorinal kortekste medial entorinal korteks tabakası uyarmak için yapılabilir 3 nöronlar hipokampus CA1 alt alanına proje. Spontan spiking faaliyetleri ve yerel alan potansiyelleri daha sonra fare uyurken tetrodes ve silikon sonda kaydedilir. Bu temsili deneyde, tetrodlarda kaydedilen sol alan potansiyelleri, tüm tetrodların CA1 piramidal hücre tabakasının yakınında konumlandırıldığını düşündüren büyük dalgalanma etkinlikleri göstermiştir.Bu tözde ışık kaynaklı duyarlı aktiviteler ilk olarak medial entorinal kortekste gözlendi ve ardından CA1'de 13 ila 18 milisaniye gecikmeli etkinlik izlendi. Opto-silikon probu elektrostatik serbest bir ortamda mikrosürücü gövdesine yerleştirmeye özen. Kalkan Konisi kağıt ve bant gibi malzemelerle değiştirilebilir.Bu mikrosürücünün oranını %20'ye kadar düşürecek Mikrosürücü tasarımımız, birden fazla beyin bölgesini ölçmek ve işlemek ve farklı beyin yapılarının dinamiklerini ve etkileşimlerini araştırmak için kayıt elektrotlarının etkin kombinasyonu için esnek seçenekler sunar.

hybrid-microdrive-system-with-recoverable-opto-silicon-probe-tetrode

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Bu protokolde sıçanlarda kronik elektrofizyolojik kayıtlar için bir mikro-sürücü dizi nasıl imal göstermektedir.

Micro-sürücü Kronik Array In vivo Kayıt: Sürücü Fabrikasyon

Bu protokolde sıçanlarda kronik elektrofizyolojik kayıtlar için tasarlanmış bir mikro-sürücü dizi ile kullanılmak için imal ve durumu tetrodes nasıl göstermektedir. Buna ek olarak, mikro-sürücü yüklemeden yer teller ve koruyucu bir koni içeren dizi inşaat, son aşamaya göstermektedir.

Micro-sürücü Kronik Array In vivo Kayıt: Tetrode Meclisi

Biz büyük ölçekli birden çok tek birimlerinin kayıt ve silikon sondalar ile kemirgenlerde davranan yerel alanda potansiyel yöntemleri açıklanmaktadır. Sürücü imalat, sürücü ve prob implantasyon süreçleri prob eki kolay çoğaltma için yeterli ayrıntıları gösterilmiştir.

Kemirgenler davranmak yılında Hareketli Silikon Problar tarafından Nöronlar Büyük ölçekli Kaydı

Fare beyin sinyallerinin in vivo elektrofizyolojik kayıtları için mikro sürücünün tasarım ve montaj açıklanmıştır. Sağlam driveable taşıyıcılara mikroelektrot demetleri takılarak, bu tekniklerin uzun vadeli ve istikrarlı bir sinir kayıtları için izin verir. Hafif tasarım hayvan aşağıdaki sürücü implantasyonu ile sınırsız davranış performans sağlar.

Uyanık davranmak Fare Kronik Sinir Kayıtlar için Microdrive Diziler İnşaatı

Davranışın nöral substratlarını anlamak, beyin devresi topluluğu kaydını gerektirir. Genetik izlenebilirliği nedeniyle, fare devre diseksiyonu ve hastalık taklidi için bir model sunar. Burada, farede derin beyin yapısını hedeflemek için uygun olan minyatür probların tasarlanması ve üretilmesi için bir yöntem açıklanmaktadır.

Farelerde Elektrofizyolojik Recordings Tasarım ve Ultralight Ağırlık Fabrikasyon, Ayarlanabilir Çoklu elektrot Probları

Biz on sekiz bağımsız olarak ayarlanabilir tetrodes ile 3D yazdırılabilir bir hipersürücü inşaatı mevcut. Hiper-sürücüyü özgürce bir birkaç hafta boyunca fareler davranışlar içinde beyin etkinliklerini kaydetmek için tasarlanmıştır.

Bir geliştirilmiş çoklu tetrot hiper motor yapımı fareler davranışlar içinde büyük ölçekli sinirsel kayıt için

Burada, doğum sonrası gün 20'den (p20) doğum sonrası gün 60'a (p60) ve ötesine kadar kritik bir gelişimsel pencerede aynı anda birden fazla beyin bölgesinden kronik alan ve tek üniteli kayıtlara izin veren bir mikro sürücü tasarımı, cerrahi implantasyon prosedürü ve ameliyat sonrası iyileşme stratejisini açıklıyoruz.

Genç farelerde kronik tetrod kayıtları için hafif tahrikli bir implant

Protokol, serbestçe hareket eden bilinçli farelerde hücre dışı elektrofizyolojik özellikleri ortaya çıkarmak için motor kortekste (MC) hücre dışı kayıt metodolojisini ve ayrıca yerel alan potansiyellerinin (LFP'ler) ve sivri uçların veri analizini açıklar.

Serbestçe hareket eden farelerde çok kanallı hücre dışı kayıt

Burada, kemirgenlerde kronik elektrofizyoloji için kullanım kolaylığı, prob geri kazanımı, deneysel çok yönlülük ve davranışla uyumluluk için optimize edilmiş hafif, uygun maliyetli bir prob implant sistemi sunuyoruz.

DREAM implant: Başa sabitlenmiş ve serbest hareket eden farelerde kronik elektrofizyoloji için hafif, modüler ve uygun maliyetli bir implant sistemi

Bu makalede, cerrahi prosedürü tarif ve ultra-ince bir fare modelinde yüksek yoğunluklu Ensefalografi (EEG) elde etmek için fare kafatası poliimid tabanlı mikroelektrot dizi (PBM dizi) implantasyonu için ipuçları ele.

Poliimid-temelli Mikroelektrod kullanarak Serbestçe Hareketli Fare Yüksek yoğunluklu EEG Kayıtlar

Öğrenin, serbestçe hareket eden farelerde çok bölgeli sinir kayıtları için opto-silikon prob ve tetrod içeren hibrit mikro-sürücü dizisi nasıl kurulur. Bu yöntem, elektrofizyolojik kayıt ve optogenetik manipülasyonu birleştirerek beyin bölgeleri arasındaki dinamik etkileşimleri araştırmayı sağlar.

SerbestÇe Hareket Eden Farelerde Çift Alan Yüksek Yoğunluklu Kayıt için Kurtarılabilir Opto-Silikon Prob ve Tetrode ile Hibrid Microdrive Sistemi (Video) | JoVE Journal

SerbestÇe Hareket Eden Farelerde Çift Alan Yüksek Yoğunluklu Kayıt için Kurtarılabilir Opto-Silikon Prob ve Tetrode ile Hibrid Microdrive Sistemi

Daha fazla video keşfet