Histolojik Muayene ve İmmünohistokimya için İntegral Göz Yüzey Dokusu Elde Etmek Için Bozulmamış Göz Küresinin İzolasyon

Laboratuvarımız göz gelişimi ve hastalıklar ağını ele alıyor. Bu protokol, kafatasını ve orbital kemikleri parçalanmış fare kafasından sırayla çıkarmak için bir yöntem tanımlar. Göz kapakları, göz yüzeyi, lens ve retinayı tek parça halinde bir arada bırakmak. Protokol, oküler yüzey didaktikleri ile ilgilenen göz doktorları için faydalı olacak. Ben Dianlel Guo, yüz kemikleri incelerken, göz küresinin zarar önlemek için çalışırken olası bir mücadele ile tekniği anlatmak için. Bu diseksiyon maddesinin en büyük avantajı, oküler yüzey epitel tabakasının bütünlüğünün iyi korunmuş olması ve oküler yüzeyin farklı kısımlarının histoloji veya immünboyama ile tek bir bölümde incelenebilmiş olmasıdır. Yumuşak dokuların tüm küçük kemikleri ve enkaz kesmek için emin olun. Sebep, aksi takdirde doku bölümünde yara izi neden olacaktır. Fare ötenazi sonra, baş kesmek için düz makas bir çift kullanın ve burun için intraparietal kemik rostrally başlayan sagittal orta hat boyunca ikiye bölün. Temiz bir petri kabına ikiye bölünmüş baş her yarısı yerleştirin ve çene ve dil kesmek için keskin makas kullanın. Optik kiazma yerinden önce beyni keserek optik siniri serbest bırak. Ve kafatası duvarına bağlı koku ampulü de dahil olmak üzere tüm beyin dokularını çıkarın. Şimdi kalan tüm dokular tüm kafatası ve orbital kemikler göz küresi ile ilişkili olacaktır. Herhangi bir kan ve saç enkaz temizlemek için PBS ile kalan parçaları yıkayın. %4 paraformaldehit içeren 50 mililitrelik bir tüpe yerleştirerek ve oda sıcaklığında döndürerek dokuları önceden düzeltin. Önekasyon tamamlandıktan sonra, kırık kılları ve fiksatifleri ortadan kaldırmak için pbs'de parçalanmış başı üç kez hızlı bir şekilde yıkayın. 10 santimetre petri kabına doku yerleştirin ve metin protokolü şekil bir belirtilen düzlemler boyunca üç parçaya kafatası kesti. Göz küresi ve soket etmoid altında kafatasının orta kısmında gizlidir, frontal, ve maksiller kemikler. Etmoid kemik soymak ve tamamen frontal ve maksiller kemikleri ortaya çıkarmak için dört numaralı düz forceps iki çift kullanın. Sonra, coğrafi olarak kafatası yüzeyini dört alana bölün. Maksiller ve frontal kemikleri sırayla çıkarmak için her alana yatay olarak kavisli forceps ucu ekleyin. Bundan sonra altta yatan gözyaşı ve şah damarı açığa çıkacaktır. Göz küresi çevreleyen iki kemik ve ilişkili deri altı kasları ve yağları çıkarın. Doku hacmini azaltmak ve katıştırma yaparken doku yönlendirmekolaylaştırmak için küçük, kare şeklinde blok içine bağlı göz kapakları ve deri ile göz küresi kırpın. Göz küresini ve ilişkili dokuları %4 paraformaldehite geri yerleştirin ve gece boyunca 4'te düzeltmeye devam edin