Name: İnflamasyon duyarlıgeç Preterm Hipoksik-iskemik Beyin Hasarı Bir Gelincik Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-11-19T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 36 s
Description: Keşfedin, gelincik modelinde inflamasyon duyarlılaştırılmış preterm hipoksik-iskemik beyin hasarı oluşturma yöntemini. Bu teknik, geç preterm bebeklerdeki oksidatif hasar mekanizmalarını incelemek için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Modelin geliştirilmesi Bill ve Melinda Gates Vakfı yanı sıra NIH hibe 5R21NS093154-02 (NICHD) tarafından finanse edildi.

Prosedürler, NIH Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Rehberi'ne uygun olarak ve Washington Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanmış bir protokol kapsamında gerçekleştirilmiştir.
1. Hazırlık ve LPS İdaresi
NOT: Yordamların zaman çizelgesi için Şekil 1'e bakın.
<ol><li>İşleme başlamadan önce tüm cerrahi aletleri ve cerrahi perdeleri mühürleyin, sterilize edin ve otoklavlandırın. Steril şişelerde ameliyat öncesi ilaçlar hazırlayın. Hipoksi/hiperoksi haznedeki havayı 8-10 dakika içinde deneysel gazla değiştirmek için gereken akış hızını hesaplayın.</li>
	<li>Lipopolisakkariti (LpS from E. coli 055:B5) steril salin içinde hazırlayın ve 1 mg/mL konsantrasyonu üretin. Onların jills P17 gelincik kitleri çıkarın. Tartın ve numaralayın. Kontrol veya yaralı (veya tedavi) gruplara çöp ve cinsiyet tarafından hayvanları randomize.</li>
	<li>300 μL insülin şırınga kullanarak, yaralanma grubundaki kitlere intraperitoneal olarak 3 mg/kg LPS ve hayvanları kontrol etmek için eşdeğer hacimli steril tuzlu araç (3 μL/g) uygulayın.</li>
	<li>Cerrahi işlemler boyunca 36-37 °C'lik bir rektal sıcaklığı korumak için hayvanları 37-40 °C'de bir su banyosunun içine yerleştirin.</li>
</ol>2. Anestezi
<ol><li>İşlem sırasında, sürekli sıcaklık, solunum hızı ve hayvanın kalp hızı izlemek.</li>
	<li>Buprenorfin (0.05 mg/kg) subkutan olarak cerrahi işlemden 30 dk önce uygulayın. % 3 isofluran% 100 oksijen ile dengeli bir karışım anestezi indüklemek. Kiti indüksiyon odasından çıkarın ve 37 °C'ye ayarlanmış dökümlü cerrahi su battaniyesinin üzerine yerleştirin. Anesteziyi burun konisine aktarın ve isofluran seviyesini %2-3'e düşürün.</li>
</ol>3. Cerrahi Hazırlık
<ol><li>Küçük hayvan makaskullanarak ventral boyun bölgesinde tüm saç kaldırmak. Cilt çentik veya jilet döküntü üreten önlemek için özenle dikdörtgen bir desen tıraş. Intradermal lidokain (4 mg/kg) ve bupivacaine (2,5 mg/kg) kullanarak tıraş bölgesine lokal anestezi uygulayın.</li>
	<li>Povison-iyot ve steril pamuk lu bezlerin %70 etanol fırçalanması uygulaması ile boynu hazırlayın. Povison-iyot ve %70 etanolün alternatif olarak 3kat uygulandığı nı tekrarlayın.</li>
	<li>Ayak-çimdik refleks ilerde anestezi derinliğini onaylayın. Cerrahi anestezi düzlemi için gerekli minimum oranda isofluran seviyesini koruyun. Boyun bölgesini ortaya çıkaran steril tek kullanımlık kesik perdeler kullanarak, hayvan örtün.</li>
</ol>4. Bilateral Karotis Arter Ligasyonu
<ol><li>Tek kullanımlık #11 neşter bıçağı ile boyun merkezinde 1,5 cm'lik orta hat kesiği yapın. İnce hemostatlar ve kavisli forceps kullanarak, açık sözlü karotis arteraşağı inceltmek. Arteri ilişkili nörovasküler paketten uzaklaştırın.</li>
	<li>Kavisli ince forceps bir çift kullanarak, arter altında steril 5-0 ipek dikiş bir döngülü 10 cm uzunluğunda geçmek. Sütürü ikiye böl. Dikişin her iki uzunluğunu da güvenli bir şekilde bağlayarak, düğümler arasında en az 2 mm bırakarak arteri sabit olarak sabit tutun. Dikişler arasında sol karotis arter transect, sinir bozulmadan bırakmak için özen.</li>
	<li>Sağ taraftaki diseksiyonu tekrarlayın. Tek bir steril 1/8 inç göbek bağı ile sağ karotis arteri ters çevirin. Cerrahi deri klipsleri ile yarakapatın.</li>
	<li>Hipoksiden önce hayvanın sıcaklık kontrollü bir su banyosunda en az 30 dakika boyunca toparlanmasına izin verin. NOT: Arterler tamamen nörovasküler paketin geri kalanından izole değilse, artmış mortalite önce veya daha sonra hipoksi sırasında görülebilir.</li>
</ol>5. Sıralı Hipoksi, Hiperoksi ve Hipoksi
<ol><li>Hipoksi ve hiperoksisırasında, sentinel hayvan(lar) 37 °C'de hipoksi sırasında rektal sıcaklığı korumak için gerekli olan su banyosu sıcaklığını değiştirin.</li>
	<li>Hayvanları bir su banyosu içinde hava geçirmez bir odaya yerleştirin. Oda içindeki oksijen konsantrasyonu ve en az bir nöbetçi hayvandaki rektal sıcaklığı sürekli olarak izler. Odayı nemlendirilmiş %9 oksijen (%91 azot) ile yıkayın ve oda büyüklüğüne bağlı olarak 3-5 L/dk akış hızı koruyun. Haznedeki oksijen konsantrasyonu %9'a ulaştığında 30 dakika devam edin.</li>
	<li>30 dakika sonra gaz arzını %80 nemlendirilmiş oksijene (%20 azot) geçirin ve odanın akış hızı ve oda büyüklüğüne göre hedef konsantrasyona ulaşmasını bekleyin. 30 dakika hiperoksiye devam edin. Oda havası ile dengeleyerek normoksiye daha hızlı ulaşmasını sağlamak için odayı açın.</li>
	<li>Hazneyi kapatın ve %9 nemlendirilmiş oksijenle temizleyin. Bradipne gösteren hayvanları dikkate alarak tüm hayvanları sürekli olarak görsel olarak izleyin. Haznedeki oksijen konsantrasyonu %9'a ulaştığında 30 dakika devam edin. Hayvanlardan herhangi birinde intra-hipoksik mortalite (solunum durması) 30 dk.lık sürenin bitiminden önce görülürse, hipoksiyi hemen sonlandırın.</li>
</ol>6. Sağ Karotis Arter Ligasyonuters
<ol><li>Hayvanları cerrahi bölgeye geri döndürün ve %3 isofluran karışımında %100 oksijen ile dengelenmiş anesteziye neden olur. Anesteziyi burun konisine aktarın ve isofluran seviyesini %2-3'e düşürün. Cerrahi yara kliplerini çıkarın ve povison-iyot ile yara bölgesini yeniden hazırlayın. Ayak-çimdik refleks ilerde anestezi derinliğini onaylayın. Anestezi nin cerrahi düzlemi için gerekli minimum yüzdede isofluran seviyesini koruyun. Boyun bölgesini ortaya çıkaran steril tek kullanımlık kesik perdeler kullanarak, hayvan örtün.</li>
	<li>Kavisli forceps kullanarak, tanımlamak ve sağ karotis arterden göbek bandı çözer. Cerrahi deri klipsleri ile yarakapatın.</li>
</ol>7. Geri Kazanım ve Sıcaklık Yönetimi
<ol><li>Hemşirelik ve iyileşme için, 60 dakika boyunca onların jills için tüm kitleri dönün. 60 dk sonra yaralı hayvanları 37-40 °C'de 6 saat su banyosuna geri döndürün ve rektal sıcaklığı 36-37 °C'de tutmak için su sıcaklığını gerektiği gibi ayarlayın. Kitleri jilllerine geri ver.</li>
	<li>Ameliyattan 10-14 gün sonra cerrahi klipleri çıkarın (P27–P31).</li>
</ol>8. Refleks Testi
<ol><li>Tüm refleks testlerini p21-P28'den günlük olarak, P28-P42'den haftada en az 3 x yapın ve maruz kalma (veya tedavi) grubuna karşı kör kalır. Refleks testinden önce kitleri 1 saat boyunca ısı yardımı (37 °C su banyosu, ısı yastığı, vb.) içeren bir odaya yerleştirin. Her test için, bir sonraki kiti test etmeden önce kit başına tüm denemeleri tamamlayın.</li>
	<li>Negatif geotaksis (25°)<ol>
<li>Kurulun tabloyla 25° açı kurabilmesi için emici bir tezgah koruyucusuna sarılmış düz bir tahta (16 1/2 in. x 12 in.) yerleştirin. Tahtaya eğilimli ve yokuş aşağı bakan bir kit yerleştirin, tahta yukarı yol yaklaşık% 75.</li>
		<li>Kitin gövdesinin düz olduğundan ve dört pençesinin de onu bırakmadan önce tahtaya doğru kavradığından emin olun. Kit yerleştirilir yerleştirilmez saat değerlendirmesine başlayın.</li>
		<li>Kitin vücudunu başlangıç konumuna göre 90° döndürmeyi başardığı zamanı kaydedin. Kitin gövdesini 180° döndürdeği zamanı kaydedin ve tahtanın tepesine doğru tam bir adım atın. Bir sonraki teste geçmeden önce 25° eğimde 3 deneme gerçekleştirin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Negatif geotaksis (45°)<ol>
<li>Daha önce açıklanan negatif geotaxis testinin 3 denemesini tekrar gerçekleştirin, bu kez kurulu 45° açıya ayarlayın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Uçurum dankaçınma<ol>
<li>Onlar düşerse kitleri yaralanmayı en aza indirmek için çıkıntı nın yaklaşık 1 ayak etrafında yastıklı bir platform yerleştirin.</li>
		<li>Laboratuvar bankının kenarına bakan ve dik bir kit yerleştirin. Ön pençeleri kenarı ile floş ile kitin gövdesi düz olduğundan emin olun. Kitin yerleştirildiği andan itibaren saat değerlendirmesine başlayın. Bilinçli hareket uzak uçurumdan ve koordine yürüyüş içermeyen diğer spontan hareketleri ayırt etmek için özen.</li>
		<li>Kitin gövdesini kenardan uzaklaştırıp hareket ettirdiği zamanı kaydedin (kitin geri alınması, gövdesinin dönmesi veya ön uzuvlarının kenardan uzaklaştırılması olarak tanımlanır). Kitin ilk adımını kenarın ters yönünde tamamlayişini kaydedin (başlangıç konumundan kenara bakan 90° dönüşü geçmiş herhangi bir yön veya açı olarak tanımlanır).</li>
		<li>Bir sonraki teste geçmeden önce kit başına 3 uçurum kaçınma denemesi gerçekleştirin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Düzeltme refleksi<ol>
<li>Bir kit supine bankta yerleştirin, yavaşça bu pozisyonda tutarak bırakmadan önce ve aynı anda kronometre başlar. Kitin kendini dört pençeyle aynı anda ağırlık taşıyan pozisyonlarda tezgaha karşı düz olarak dinlendirmek için getirdiği zamanı kaydedin. Kitin herhangi bir yönde tam bir adım attığı zamanı kaydedin (vücudun dönmesi veya sürüklenmeden belirli bir yönde ilerleme kaydetmek için dört patinin de yerleştirilmesi olarak tanımlanır).</li>
		<li>Hayvan başına doğru refleks testi 5 denemeler gerçekleştirin.</li>
		<li>Her kit 5 düzeltme refleks denemeleri tamamladıktan sonra, jill için çöp dönmek.</li>
	</ol>
</li>
</ol>9. Podyum Testi
<ol><li>P42'de, jill'den kitleri çıkarın. Kitleri test etmeden önce yaklaşık 10 dk plastik kafeslere yerleştirin, böylece çevreye alışabilirler. Ortam ışığının podyum işlevini etkilemediğinden emin olmak için test odasındaki ışıkları kapatın.</li>
	<li>İlgili yazılımda yeni bir deneme oluşturun. Maksimum çalışma süresi nin 10,00's'yi ve minimum çalışma süresinin 1,50 s'den az olmaması için deneysel ayarları ayarlayın. Her hayvan için en az üç uyumlu çalıştırma gereksinimi ayarlayın.</li>
	<li>Yürüme yolunun genişliğini hayvanın büyüklüğüne göre ayarlayın, böylece duvarlara dokunmadan serbestçe locomote edinebilir ve tornalamayı engelleyecek kadar dar kalır. Otomatik algılamayı kullanarak Algılama ayarları profilleri sekmesine yeni bir algılama ayarı ekleyin. Belirli bir yaştaki tüm çöpler ve hayvanlar için aynı algılama ayarlarını kullanın.</li>
	<li>Her hayvandan önce ve sonra düşük tiftikli kağıt mendil ve %70 etanol ile geçiti iyice temizleyin. Algılama ve sınıflandırma doğruluğunu artırmak için gelincik pençelerini düzenli olarak temizleyin. Bir kez geçit ve hayvan hazırlanır, deneme edinimi başlar.</li>
	<li>Ayak izleri camda birikirse veya hayvanlar idrar veya dışkı geçirirse podyumu temizlemek için kazanımı duraklatın. Podyum yazılımı önceden belirlenmiş deneme ayarlarına dayalı olarak üç uyumlu çalıştırmayı tanıyınca satın almayı durdurun.</li>
</ol>10. Açık Alan Testi (P42)
<ol><li>Gözenekli olmayan akrilik bir kutu (55 cm x 55 cm x 40 cm yüksekliğinde) mat-beyaz boyalı kullanın. Kamerayı doğrudan kutunun üzerine ortalanmış ve dört duvar da yakalanıp olacak şekilde konumlandırın. Test arenasını ilk kullanımdan önce ve hayvanlar arasında %70 etanol ile temizleyin.</li>
	<li>İlgili yazılımda Şablondan Yeni'yi seçin ve Önceden Tanımlanmış Bir Şablon Uygula'yıseçin. Konu türü: Diğer; Arena şablonu: Açık alan, kare; Bölge şablonu: Merkez, kenarlık, köşeler; İzlenen özellikler: Merkez noktası.</li>
	<li>Arena Ayarları'nı açın ve kamera girişlerinden arka plan görüntüsünü alın ve arena duvarlarının üstlerinin görünür olmasını sağlar. Ölçek aracını kullanarak arenanın boyutlarını kalibre edin.</li>
	<li>Anahatları duvar bölgelerine (NW, NE, SW, SE) ve taban bölgelerine (sol üst, orta üst, sağ üst, sol orta, orta, sol alt, orta alt, sağ alt) uyacak şekilde yeniden boyutlandırmak üzere önceden tanımlanmış arena bölgelerini ayarlayın. Hiçbir bölge çakışma dığını doğrulamak için kurulumu doğrulayın.</li>
	<li>Edinme penceresini açın ve Başlat Edinme'yebasın. Gelinciği test alanının merkezine, her denek için tutarlı bir şekilde yerleştirin. Gelinciğin 5 dakika boyunca arena boyunca serbestçe hareket etmesine izin verin. Test döneminin sonunda, Satın Almayı Durdur'abasın. Bir sonraki gelincik ile işlemi tekrarlayın. NOT: Odadaki tüm deneyciler gelincik tarafından gözlemlenememelidir ve test süresi boyunca sessiz kalmalıdır.</li>
</ol>11. Fiksasyon-perfüzyon
<ol><li>P42'de % 5 isofluran eki ile kitleri derinlemesine anestezi. Pentobarbital aşırı doz (120-150 mg/kg i.p.) uygulayın. Parmak sıkışması ve solunum hareketleri kaybına yanıt eksikliği ile derin anestezi sağlamak.</li>
	<li>Hayvanı duman kaputuna aktarın. Toraks açın ve ince hemostatlar kullanarak alçalan aort kelepçe. Sağ atriyumu kes. Perfüzyon pompası kullanarak, sol ventrikülü 60 mL steril salin ile 30 mL/dk. Perfuse ile 60 mL formalin (%10 formaldehit) ile 30 mL/dk oranında perfüzyonlayın.</li>
	<li>Karkas decapitate ve makas, forceps, rongeurs ve bir spatula kullanarak kafatası ndan beyin çıkarın. Her beynin dorsal, ventral ve lateral yönlerini yüksek çözünürlüklü fotoğraflar çekin. En az 48 saat formalin de beyin düzeltmek post-fix.</li>
</ol>12. Ex Vivo Beyin Ölçümü
<ol><li>Formalin (adım 11.3) gelen beyin çıkarın ve aşırı sıvı emmek için bir kağıt havlu üzerine yerleştirin.</li>
	<li>Elektronik kaliper kullanarak, beynin dorsal ve ventral yönlerini kaliper uçlarını yerleştirerek beynin yüksekliğini ölçmek. Koku ampul ve oksipital lob en posterior sınır kaliper uçlarını yerleştirerek beynin uzunluğu ölçün. Temporal lobların en lateral kısımlarında kaliper uçlarını yerleştirerek beynin genişliğini ölçün. Beyni tart.</li>
	<li>Ölçü uzunlamasına çatlak (çapraz sulkus anterior ve posterior), lateral sulci, suprasylvian sulci, koronal sulci, pseudosylvian sulci, ansinat sulci, çapraz sulci, presylvian sulci, lateral gyri, suprasylvian gyri, sigmoid gyri ( anterior ve posterior), koronal gyri, ektosylvian gyri (anterior ve posterior), ve orbital gyri. Karşılık gelen sulkus en belirgin bölümünün başından ve sonundan itibaren tüm sulci ölçün. Her karşılık gelen girus en geniş açıdan tüm gyri ölçün.</li>
	<li>Kaliperin bir ucunu uzunlamasına fissürün en arka noktasına yerleştirerek ve kaliperin diğer ucunu serebellumun en posterior kısmına yerleştirerek maruz kalan serebellum miktarını ölçün. NOT: Gelincik beyin atlası, Biyoloji ve Koncik Hastalıkları bulunan14, ex vivo gelincik beyin ölçümleri geliştirmek için kullanılmıştır.</li>
</ol>13. Brüt Yaralanma Puanlama
<ol><li>11.3.'de çekilen fotoğrafları kullanarak, brüt beyin hasarının (0-9 ölçeği) değerlendirilmesini ve maruz kalma (veya tedavi) gruplarına karşı kör kaldığını değerlendirmek için 13.2-13.4 adımlarında puanlama kriterlerini uygulayın.</li>
	<li>Uzunlamasına çatlakları değerlendirin. Normal görünüyorsa, 0 puan atayın. Hafif çeşni (yaklaşık 2x normal genişlik) genişlenmiş ise, ancak genişlik artışı fissür uzunluğu boyunca eksikse, 1 puan atayın. Orta derecede genişlenmişse (yaklaşık 2-3x normal), 2 puan atayın. Belirgin bir şekilde genişlenirse, görünür bir boşluk >3x normal genişlikte fissür uzunluğunun çoğu boyunca, 3 puan uygulayın.</li>
	<li>Lateral sulci'yi değerlendirin. Onlar normal tanımı gösterirse, lateral gyri ve suprasylvian gyri ayrılması ile, 0 puan atayın. Eğer hafif tek taraflı veya bilateral azaltılmış sulkus tanımı görülürse, özellikle kaudal kısımda, oksipital loblara göre frontal ve temporal loblarda en az daralma ile, 1 puan atayın.<ol>
<li>Sulci orta derecede azaltılmış tanımı görülürse, suprasylvian gyri depresyonu ile, koronal ve ektosylvian gyri daralma, ve oksipital loblara göre frontal ve temporal lobların hafif daralma, 2 puan atamak. Tek taraflı kistik dejenerasyon görülürse, kontralateral hemisferin minimal değişimi ile, 3 puan atayın. Lateral sülcinin kötü tanımı mevcutsa, oksipital ve temporal lobların bilateral kistik veya şiddetli dejenerasyonu ile 4 puan atayın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Beyincik görünür kısmını değerlendirmek. Normal görünüyorsa, haşaratların %75'i ve %66'sı görünür, 0 puan atar. Eğer haşaratların %75-90'ı ve %66'sı görülebiliyorsa, 1 puan atayın. Eğer beyincik lerin çoğu görünürise, hemisferlerin tüm vermisve ≥%66'sını gösterirse, 2 puan atarsınız.</li>
</ol>14. Veri Analizi
<ol><li>Refleks test verileri için, hataları 61 s puan atamak onları zaman sonunda başarıları ile karşılaştırıldığında izin vermek (60 s), ancak istatistiksel analizde daha kötü bir sıralama ile. Refleks testlerinin her birinde zaman içinde her hayvan için eğrinin altında bir alan hesaplayın.</li>
	<li>Hayvanın ağırlığına göre pençe basıncı nı içeren podyum verilerini ayarlayın.</li>
	<li>Verileri parametrik olmayan istatistiksel yöntemler kullanarak analiz ederek, ortanca ve interquartile aralığı (IQR) kullanarak verileri açıkla.</li>
</ol>

<ol><li>Martin, J. A., Hamilton, B. E., Osterman, M. J. K., Driscoll, A. K., Drake, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Births%3A+Final+Data+for+2017%5BTitle%5D)+AND+%22National+Vital+Statistics+Report%22%5BJournal%5D)">Births: Final Data for 2017.</a> National Vital Statistics Report. 67 (8), 1-49 (2018).</li>
<li>Vanhaesebrouck, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+EPIBEL+study%3A+outcomes+to+discharge+from+hospital+for+extremely+preterm+infants+in+Belgium%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">The EPIBEL study: outcomes to discharge from hospital for extremely preterm infants in Belgium.</a> Pediatrics. 114 (3), 663-675 (2004).</li>
<li>Raju, T. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-Term+Healthcare+Outcomes+of+Preterm+Birth%3A+An+Executive+Summary+of+a+Conference+Sponsored+by+the+National+Institutes+of+Health%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Long-Term Healthcare Outcomes of Preterm Birth: An Executive Summary of a Conference Sponsored by the National Institutes of Health.</a> Journal of Pediatrics. , (2016).</li>
<li>Raju, T. N. K., Buist, A. S., Blaisdell, C. J., Moxey-Mims, M., Saigal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adults+born+preterm%3A+a+review+of+general+health+and+system-specific+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Paediatrica%22%5BJournal%5D)">Adults born preterm: a review of general health and system-specific outcomes.</a> Acta Paediatrica. 106 (9), 1409-1437 (2017).</li>
<li>Bennet, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+inflammation+and+impaired+development+of+the+preterm+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Reproductive+Immunology%22%5BJournal%5D)">Chronic inflammation and impaired development of the preterm brain.</a> Journal of Reproductive Immunology. 125, 45-55 (2018).</li>
<li>Reich, B., Hoeber, D., Bendix, I., Felderhoff-Mueser, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperoxia+and+the+Immature+Brain%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Hyperoxia and the Immature Brain.</a> Developmental Neuroscience. 38 (5), 311-330 (2016).</li>
<li>Galinsky, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complex+interactions+between+hypoxia-ischemia+and+inflammation+in+preterm+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Medicine+%26+Child+Neurology%22%5BJournal%5D)">Complex interactions between hypoxia-ischemia and inflammation in preterm brain injury.</a> Developmental Medicine & Child Neurology. 60 (2), 126-133 (2018).</li>
<li>Empie, K., Rangarajan, V., Juul, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Is+the+ferret+a+suitable+species+for+studying+perinatal+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Developlemental+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Is the ferret a suitable species for studying perinatal brain injury.</a> International Journal of Developlemental Neuroscience. 45, 2-10 (2015).</li>
<li>Snyder, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ontogeny+of+white+matter%2C+toll-like+receptor+expression%2C+and+motor+skills+in+the+neonatal+ferret%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Developlemental+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Ontogeny of white matter, toll-like receptor expression, and motor skills in the neonatal ferret.</a> International Journal of Developlemental Neuroscience. , (2018).</li>
<li>Schwerin, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progression+of+histopathological+and+behavioral+abnormalities+following+mild+traumatic+brain+injury+in+the+male+ferret%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Research%22%5BJournal%5D)">Progression of histopathological and behavioral abnormalities following mild traumatic brain injury in the male ferret.</a> Journal of Neuroscience Research. 96 (4), 556-572 (2018).</li>
<li>Rafaels, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+injury+risk+from+primary+blast%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Trauma+and+Acute+Care+Surgery%22%5BJournal%5D)">Brain injury risk from primary blast.</a> Journal of Trauma and Acute Care Surgery. 73 (4), 895-901 (2012).</li>
<li>Wood, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Ferret+Model+of+Encephalopathy+of+Prematurity%5BTitle%5D)+AND+%22Developlemental+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">A Ferret Model of Encephalopathy of Prematurity.</a> Developlemental Neuroscience. , (2019).</li>
<li>Barnette, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+Brain+Development+in+the+Ferret+via+Magnetic+Resonance+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatric+Research%22%5BJournal%5D)">Characterization of Brain Development in the Ferret via Magnetic Resonance Imaging.</a> Pediatric Research. 66 (1), 80-84 (2009).</li>
<li>Kroenke, C. D., Mills, B. D., Olavarria, J. F., Neil, J. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKroenke%2C+CD+%22Biology+and+Diseases+of+the+Ferret%22">Biology and Diseases of the Ferret</a>. , WIley. (2014).</li>
<li>Eklind, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacterial+endotoxin+sensitizes+the+immature+brain+to+hypoxic--ischaemic+injury%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Bacterial endotoxin sensitizes the immature brain to hypoxic--ischaemic injury.</a> European Journal of Neuroscience. 13 (6), 1101-1106 (2001).</li>
<li>Falck, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neonatal+Systemic+Inflammation+Induces+Inflammatory+Reactions+and+Brain+Apoptosis+in+a+Pathogen-Specific+Manner%5BTitle%5D)+AND+%22Neonatology%22%5BJournal%5D)">Neonatal Systemic Inflammation Induces Inflammatory Reactions and Brain Apoptosis in a Pathogen-Specific Manner.</a> Neonatology. 113 (3), 212-220 (2018).</li>
<li>Osredkar, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothermia+Does+Not+Reverse+Cellular+Responses+Caused+by+Lipopolysaccharide+in+Neonatal+Hypoxic-Ischaemic+Brain+Injury%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Hypothermia Does Not Reverse Cellular Responses Caused by Lipopolysaccharide in Neonatal Hypoxic-Ischaemic Brain Injury.</a> Developmental Neuroscience. 37 (4-5), 390-397 (2015).</li>
<li>Nakata, M., Itou, T., Sakai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+analysis+of+inflammatory+cytokines+expression+in+peripheral+blood+mononuclear+cells+of+the+ferret+%28Mustela+putorius+furo%29+using+real-time+PCR%5BTitle%5D)+AND+%22Veterinary+Immunology+and+Immunopathology%22%5BJournal%5D)">Quantitative analysis of inflammatory cytokines expression in peripheral blood mononuclear cells of the ferret (Mustela putorius furo) using real-time PCR.</a> Veterinary Immunology and Immunopathology. 130 (1-2), 88-91 (2009).</li>
<li>Christensson, M., Garwicz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+course+of+postnatal+motor+development+in+ferrets%3A+ontogenetic+and+comparative+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Time course of postnatal motor development in ferrets: ontogenetic and comparative perspectives.</a> Behavioral Brain Research. 158 (2), 231-242 (2005).</li>
<li>Li, Y., Dugyala, S. R., Ptacek, T. S., Gilmore, J. H., Frohlich, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+Immune+Activation+Alters+Adult+Behavior%2C+Gut+Microbiome+and+Juvenile+Brain+Oscillations+in+Ferrets%5BTitle%5D)+AND+%22eNeuro%22%5BJournal%5D)">Maternal Immune Activation Alters Adult Behavior, Gut Microbiome and Juvenile Brain Oscillations in Ferrets.</a> eNeuro. 5 (5), (2018).</li>
<li>Rice, J. E., Vannucci, R. C., Brierley, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+immaturity+on+hypoxic-ischemic+brain+damage+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Neurolology%22%5BJournal%5D)">The influence of immaturity on hypoxic-ischemic brain damage in the rat.</a> Annals of Neurolology. 9 (2), 131-141 (1981).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Gelincik beyni ve insan beyni arasında paylaşılan fiziksel ve gelişimsel benzerlikler nedeniyle, gelincik giderek hem yetişkin hem de gelişimsel beyin hasarı modellemek için kullanılmaktadır. 8,9,10,11,12. Ancak, bugüne kadar yapılan araştırmalar gelincik beyninin hem ilk yaralanmaya hem de yüksek plastiklere karşı dirençli olduğunu ve davranış açıklarının gör...

Bebekleriçin terapötik müdahalelerin test edilebildiği prematürite ve perinatal hipoksi-iskemi patofizyolojisini yansıtan büyük hayvan modellerine ihtiyaç vardır. 2017 yılında, ABD'de doğan 382.726 bebeğin %9.93'ü preterm, bu bebeklerin %84'ü ise 32-36 haftalık gebelik1. Prematüre bebeklerde, viral veya bakteriyel patojenlere bağlı maternal immün aktivasyonun erken doğumu başlatabildiği, enfeksiyon veya inflamasyona perinatal maruziyet yaygındır. Postnatal olarak, preterm bebekler erken veya geç başlangıçlı sepsis yüksek risk altındadır2. Preterm bebekler de sık sık hipoksi dönemleri deneyim, hipotansiyon, ve hiperoksi onların olgunlaşmamış kardiyorespiratuar sistem nedeniyle, rahim deneyimli olanlara göre atmosferde yüksek oksijen gerginliği, ve iyatrojenik maruzkalma. Ayrıca, preterm bebeklerde, antioksidan savunma olgunlaşmamış3 ve pro-apoptotic faktörler doğal olarak upregulated4. Oksidatif stres ve hücre ölümü bağışıklık sistemi ve nöroinflamasyon aktivasyonuyol açar. Bu kombine faktörler beynin gelişimsel ve fizyolojik kırılganlık katkıda bulunduğu düşünülmektedir, ve sonuç veya preterm bebeklerde kötü gelişimsel sonuçlar ile ilişkili ensefalopati şiddetlendirmek5,6,7.
Gelincik beyninin insan beyniyle paylaştığı fiziksel ve gelişimsel benzerlikler nedeniyle gelincik, beyin hasarı nın8,9, 10,11,12modelini modellediği çekici bir türdür. Gelincikler aynı zamanda preterm insan beynini modellemek için ideal adaylardır, çünkü lissensefalik olarak doğarlar ve doğum sonrası jirensefalik beyinler geliştirirler, bu da gelişmekte olan beyni erken doğan bebeklerin yaşadıklarını taklit eden hakaretlere maruz bırakmak için bir pencere sağlar. Doğumda, gelincik beyin gelişimi 13 haftalık insan fetusbenzer, doğum sonrası gün ile (P) 17 kitleri gebelik 32-36 hafta bir bebeğe eşdeğer olarak kabul13.
Grubumuz son derece erken bir model yayınladı (<28 hafta' gebelik) P10 gelincik beyin hasarı escherichia coli lipokolokarit ile inflamatuar sensitizasyon birleştirerek (LPS) hipoksi ve hiperoksia sonraki maruz kalma ile12. Aşağıdaki protokolde, LPS sensitizasyonunun bilateral serebral iskemi, hipoksi ve hiperoksia tarafından takip edildiği P17 gelinciğinde geç bir preterm modeli tanımladık. Bu hayvanların bir alt kümesinde daha ciddi yaralanma ile sonuçlanır, ve daha yakından uzun süreli inflamasyon karmaşık etkileşimmodelleri, iskemi, hipoksi, ve oksidatif stres beyin hasarı geliştirmek preterm bebeklerin bir dizi deneyimli.

<table><tbody><tr><td>%80 Oksijen</td><td>Praxair</td><td></td><td></td></tr><tr><td>%9 Oksijen</td><td>Praxair</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Emici tezgah üstü koruyucu</td><td>Kimtech</td><td>7546</td><td></td></tr><tr><td>Otomatik podyum</td><td>Noldus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Betadine cerrahi önlük</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bupivacaine</td><td>Patterson Veteriner</td><td>07-888-9382</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfin</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kaliperleri</td><td>SRA Ölçüm Ürünleri</td><td>ME-CAL-FP-200</td><td>200 mm aralığında, 0,01 mm çözünürlükte</td></tr><tr><td>Pamuk Gazlı Bez Sünger</td><td>Fisher Scientific</td><td>22028556</td><td></td></tr><tr><td>Kavisli ince kanama durdurucu</td><td>Roboz</td><td>RS-7101</td><td></td></tr><tr><td>Kavisli forseps</td><td>World Precision Instruments</td><td>501215</td><td></td></tr><tr><td>Kavisli dikiş atma kanama durdurucu</td><td>Roboz</td><td>RS-7111</td><td></td></tr><tr><td>Ethovision izleme yazılımı</td><td>Noldus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Göz Kayganlaştırıcı</td><td>Rugby</td><td>NDC 0536-1970-72</td><td></td></tr><tr><td>Gelincikler (Mustela putorius furo)</td><td>Marshall Biosciences</td><td></td><td>Outbred (belirli bir suş yok)</td></tr><tr><td>Formalin</td><td>Fisher Scientific</td><td>SF100-4</td><td>%10 (Fosfat Tamponu/Sertifikalı)</td></tr><tr><td>Saç Kesme Makineleri</td><td>Conair</td><td>GMT175N</td><td></td></tr><tr><td>İnsülin Şırıngaları</td><td>BD</td><td>329461</td><td>0.3 cc 3 mm 31 G</td></tr><tr><td>İzofluran</td><td>Piramal</td><td>66794-017-25</td><td></td></tr><tr><td>Lidokain</td><td>Patterson Veteriner</td><td>07-808-8202</td><td></td></tr><tr><td>LPS</td><td>Listesi Biyolojik</td><td>LPS Ultra Saf # 423</td><td></td></tr><tr><td>Oksijen sensörü</td><td>BW Gaz Uyarısı</td><td>GAXT-X-DL-2</td><td></td></tr><tr><td>Pentobarbital</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Plastik hazne</td><td>Tellfresh</td><td>1960</td><td>10 L; 373 x 270 x 135 mm 3</td></tr><tr><td>Tuzlu Çözelti, %0,9</td> <td>Hospira</td><td>RL-4492</td><td></td></tr><tr><td>Neşter bıçağı</td><td>Integra Miltex</td><td>297</td><td></td></tr><tr><td>Neşter sapı</td><td>World Precision Instruments</td><td>500236</td><td>#3, 13 cm</td></tr><tr><td>Steril sütür</td><td>İnce Bilim Araçları</td><td>18020-50</td><td>Örgülü İpek, 5/0</td></tr><tr><td>Cerrahi klips aplikatörü</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>12020-09</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi klips sökücü</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>12023-00</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi örtüler</td><td>Medline Unidrape</td><td>VET3000</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi eldivenler</td><td>Ansell Perry Inc</td><td>5785004</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi klipsler</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>12022-09</td><td></td></tr><tr><td>Termometre (rektal)</td><td>YSI</td><td>Hassas 4000A</td><td></td></tr><tr><td>Termometre (su)</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-648-26</td><td></td></tr><tr><td>Göbek bandı</td><td>Grafco</td><td>3031</td><td>Steril</td></tr><tr><td>Su banyosu</td><td>Thermo Scientific</td><td></td><td>TSCOL19 19 L</td></tr></tbody></table>

İnflamasyon duyarlıgeç preterm hipoksik-iskemik beyin hasarı bir gelincik modeli

A Ferret Model of Inflammation-sensitized Late Preterm Hypoxic-ischemic Brain Injury

Prematüritenin nörolojik sekeli olan bebeklerde terapötik müdahalelerin test edilebilen perinatal enfeksiyon ve hipoksi-iskemi (HI) klinik olarak ilgili modellere ihtiyaç vardır. Gelincikler erken insan beynini modellemek için ideal adaylardır, çünkü lissensefalik olarak doğarlar ve doğum sonrası jirensefalik beyinler geliştirirler. Doğumda gelincik beyin gelişimi 13 haftalık insan fetüsine benzer, doğum sonrası gün (P) 17 kitleri 32-36 haftalık gebelikte bir bebeğe eşdeğer olduğu kabul edilir. Biz P17 gelincik bir yaralanma modeli tarif, lipopolisakkarit uygulaması ikili serebral iskemi takip nerede, hipoksi, ve hiperoksi. Bu uzun süreli inflamasyon karmaşık etkileşimi simüle, iskemi, hipoksi, ve oksidatif stres beyin hasarı geliştirmek neonates bir dizi deneyimli. Yaralı hayvanlar, birden fazla kortikal jirik ve ilişkili sulci daralma da dahil olmak üzere beyinde morfolojik değişiklikler ile, brüt yaralanma şiddeti bir dizi görüntüler. Yaralı hayvanlar da otomatik bir podyumda yavaş refleks gelişimi, yavaş ve daha değişken hareket hızı göstermek ve açık bir alanda keşif azalmış. Bu model, inflamasyon ve HI ile ilişkili neonatal ensefalopatisi olan bebekler için putatif tedavileri test etmek, kortikal gelişimi etkileyen yaralanma mekanizmaları çalışma ve esneklik sağlayan yolları araştırmak için bir platform sağlar etkilenmemiş hayvanlar.

34 (n = 18 erkek, n = 16 dişi) hayvan altı çöpten hakarete maruz kalan, sekiz hayvan ($; n = 4 erkek, n = 4 kadın) yaralı grupta ikinci hipoksi döneminde (n = 5), sıcaklık yönetimi sırasında (n = 2) veya bir gece boyunca hakaretten sonra (n = 1). Yaralı grupta, 26 kurtulandan dokuzu (5) görünür brüt yaralanma vardı. Beş hayvan (n = 5 erkek) orta derecede yaralanmış, dört hayvan (n = 2 erkek, n = 2 dişi) sırasıyla brüt patoloji skorları olarak tanımlanan ağır yaralanmalara sahipti (Şekil 2<st...

Yöntem, p17 gelincik iltihabı duyarlı hipoksik-iskemik ve hiperoksik beyin hasarı uzun süreli inflamasyon ve oksidatif beyin hasarı geç preterm bebeklerin bir dizi deneyimli arasındaki karmaşık etkileşimi modellemek için açıklar.

İnflamasyon duyarlıgeç Preterm Hipoksik-iskemik Beyin Hasarı Bir Gelincik Modeli

There is an ongoing need for clinically relevant models of perinatal infection and hypoxia-ischemia (HI) in which to test therapeutic interventions for ...

Bu protokol önemli ve sürekli yaralanma ile sonuçlanan gelinciklerde inflamasyon duyarlı erken beyin hasarı ilk modelini sunuyor çünkü önemlidir. Bu teknik, prematüre insan bebeklerde görülen beyin yaralanmaları nın türlerine katkıda olduğu düşünülen tetikleyiciler ve biyokimyasal mekanizmaların çoğunu içeren uzun süreli hakaretler içerir. Beyin ölçüm prosedürünü gösteren Kylie Corry, laboratuarımızda bir araştırma bilim adamı ve Olivia White, bir lisans öğrencisi olacaktır.Ameliyata başlamadan otuz dakika önce, yaralanma grubundaki kitlere kilogram başına üç miligram LPS IP ve hayvanları kontrol etmek için gram başına üç mikrolitre lik eşdeğer bir steril tuzluluk hacmi uygulayın. İşleme başlamadan önce, küçük hayvan makası kullanarak gelinciğin ventral boyun bölgesindeki tüm tüyleri dikdörtgen bir desenle temizleyerek, cildin çentiklenmesini veya ısı döküntüsü oluşturmasını önlemeye özen göstermektedir. Tıraş bölgesine lokal anestezi uygulayın ve üç alternatif povison iyot ve yüzde yetmiş etanol ile cildi dezenfekte edin.Ayak çimdik tarafından sedasyon uygun bir düzeyde doğruladıktan sonra, boyun bölgesi ortaya steril, tek kullanımlık kesilmiş perdeler ile hayvan kapağı. Bilateral karotis arter ligasyonu için, boyun merkezinde 1,5 santimetrelik orta hat kesiyapmak için tek bir kullanım numarası on neşter bıçak kullanın ve sol karotid artere kadar ince hemostatlar ve kavisli forseps kullanın. Açığa çıkan arteri ilişkili nörovasküler paketten uzaklaştırın.Ve arter altında steril 5 / 0 ipek dikiş döngülü on santimetre uzunluğunda geçmek için kavisli ince çifenerler bir çift kullanın. Dikişleri ikiye bölün ve atardamarı inkâr etmek için her iki dikiş uzunluğunu güvenli bir şekilde bağlayın ve düğümler arasında en az iki milimetre bırakın. Dikişler arasında sol karotis arter transect, sinir bozulmadan bırakmak ve sağda diseksiyon tekrar dikkat.Tek bir steril 1/8 inç göbek bağı ile sağ karotis arteri ters çevirin. Ve yarayı cerrahi deri klipleriyle kapatın. Daha sonra, hipoksi önce izleme ile en az otuz dakika boyunca bir sıcaklık kontrollü su banyosunda kurtarmak için hayvan sağlar.Sıralı hipoksi, hiperoksi ve hipoksi tedavisi için, bir su banyosu içinde hava geçirmez bir odada yaralanma grubunda hayvanları yerleştirin. En az bir nöbetçi hayvandaki rektal sıcaklığın yanı sıra oda içindeki oksijen konsantrasyonu sürekli olarak izleyin. Odayı nemlendirilmiş yüzde dokuz oksijen ve yüzde 91 azot ile temizleyin ve oda büyüklüğüne bağlı olarak dakikada 3-5 litre lik bir akış hızı koruyun.Odadaki oksijen konsantrasyonu %9'a ulaştığında, otuz dakika boyunca teslimata devam edin. Hipoksi tedavisinin sonunda, gaz arzını yüzde 80 nemlendirilmiş oksijene ve yüzde 20 nitrojene çevirin. Hiperoksia otuz dakika sonra, daha hızlı normoksia ulaşmak için oda havası ile dengelemek için, oda mühürleme ve tekrar yüzde dokuz nemlendirilmiş oksijen ile yıkama önce oda açmak için oda açın.Hipoksinin bu ikinci turunda tüm hayvanları sürekli olarak takip edin, bradikipne gösteren tüm hayvanları not alın. Odadaki oksijen konsantrasyonu %9'a ulaştığında hipoksi tedavisine otuz dakika devam edin. Tedavinin sonunda, sağ karotid arterden göbek bandı tanımlamak ve açmak için kavisli forceps kullanılır.Yarayı cerrahi deri klipsleriyle tekrar kapatın. Sonra hemşirelik ve kurtarma için 60 dakika jills için tüm kitleri geri dönün. İyileşme süresinin sonunda, yaralı hayvanları 36 ila 37 santigrat derecerek rektal sıcaklıkları korumak için, gerektiği gibi su sıcaklığını ayarlayarak, altı saat boyunca 37 ila 40 santigrat derecedesu su banyolarına geri getirin.Sonra, tekrar onların jills kitleri dönün. Uygun deneysel bitiş noktasında beyin hasat ve fiksasyon sonra, her yaralı ve yaralanmamış beynin yüksekliğini ölçmek için her beynin dorsal ve ventral yönlerini bir elektronik kaliper ipuçları yerleştirin. Her beynin genişliğini ölçmek ve her beyin tartmak için temporal lobların en lateral bölümlerinde kaliper ipuçlarıyerleştirin.Uzunlamasına fissür ölçmek için kaliper kullanın, ilgili sulkus en belirgin bölümünün başından ve sonundan itibaren sulci tüm, ve her karşılık gelen girus en geniş açıdan gyri tüm. Daha sonra kaliperin bir ucunu uzunlamasına fissürün en arka noktasına, diğer ucunu ise serebellumun en arka kısmına yerleştirin. Bu çalışmada hakarete maruz kalan altı çöpten 34 hayvandan beşi orta derecede yaralanmış, dört hayvan ağır yaralanmış.Artan yaralanma ile, temporal ve / veya oksipital loblarda gyri daralma gözlenir, ilişkili bir sulkül kısalma ve uzunlamasına çatlak ve en ağır yaralı hayvanlarda kistik doku kaybı daha büyük alanlarda genişleyen. Refleks test süresi boyunca, yaralı hayvanlar olumsuz geotaksis görev döndürmek için daha yavaş bir zaman görüntüler. Cliff Kaçınma görevinde kenardan uzaklaşmak için daha yavaş bir zaman ve sağa doğru daha yavaş bir zaman.Podyumda, yaralı hayvanlar kontrollere benzer bir ortalama hız gösterirler ancak her koşu sırasında önemli ölçüde daha fazla hız değişimi gösterirler. Pençeleri ve arka pençeleri arasındaki ağırlık ayarlanmış mesafe, dört pençeleri aracılığıyla, birim pençe alanı başına uygulanan daha az basınç ile, yaralı hayvanlarda önemli ölçüde daha fazladır. Açık alanda, yaralı hayvanlar daha az toplam mesafe yi kaplar, daha sık durur ve alanın merkezinde önemli ölçüde daha fazla, köşelerde daha az zaman geçirirler.Burada kontrol ve yaralı hayvanların temsili ısı haritaları görülebilir. Eşlik eden sinir arter uzak incelemek ve mümkün olan maksimum hipoksi süresi izin dikkat edin. Bu adımlar hayvanların çoğunun hayatta kalmasını sağlarken, aynı zamanda bir yaralanmaya da devam edecektir.Bu prosedürü takiben, herhangi bir biyokimyasal, patolojik veya davranışsal sonuçlar değerlendirilebilir, normalde beyin hasarı kemirgen modelleri ile sınırlı değerlendirmeler de dahil olmak üzere.

a-ferret-model-inflammation-sensitized-late-preterm-hypoxic-ischemic

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Hipoksik-iskemik beyin hasarı için postnatal sıçan modelinde, insan yenidoğan hipoksik iskemik ensefalopati (HIE) köklü bir model. Bu makalede, doğum sonrası sıçan Yavrularda HIE modeli açıklanmaktadır.

Perinatal İskemi Hipoksik İskemik Ensefalopati Modeli

Biz periventriküler lökomalazi (PVL), prematüre bebeklerde periventriküler beyaz cevher lezyonları ile karakterize baskın beyin hasarı fare modelleri kurdu. Hipoksi / iskemi / sistemik enfeksiyon olmadan PVL birincil nedenleri. Tek taraflı karotis ligasyonu ve / lipopolisakkarid enjeksiyon olmadan hipoksi maruz P6 fareler PVL benzeri lezyonlar oluşturur.

Periventriküler lökomalazi Fare Modelleri

Video, yenidoğan hipoksik-iskemik beyin hasarını incelemek için bir fare modeli oluşturma prosedürünü göstermektedir. Cerrahi olarak iskemiyi indükleme ve beyin hasarını şiddetlendirmek için hayvanı hipoksiye maruz bırakma adımlarını ana hatlarıyla belirtir. Son olarak, ortaya çıkan beyin lezyonlarının nasıl değerlendirileceğini gösterir ve fare modelinin daha fazla bilimsel araştırma için hazırlanmasını sağlar.

Yenidoğan Hipoksik-İskemik Beyin Hasarının Fare Modelinin Oluşturulması

Kaynak: Jantzie, L. L., et. al. Sıçanlarda Prenatal Hipoksi-iskemi ile İntramniyotik Lipopolisakkarit Kullanılarak Prematüre Ensefalopatisinin Modellenmesi. J. Vis. Uzm. (2015)Bu video, uterus kan akışını kısıtlayarak ve LPS enjekte ederek, erken doğum çalışmalarıyla ilgili nöroinflamasyonu ve bozulmuş beyin gelişimini modelleyerek fetal sıçanlarda hipoksik-iskemik ve inflamatuar durumları indüklemek için bir protokol göstermektedir.

Prenatal Sıçanlarda Ensefalopatiyi Modellemek için Hipoksik-İskemik ve İnflamatuar Durumların İndüklenmesi

Perinatal asfiksiyi takiben hipoksik-iskemik ensefalopati hayvan modelleri kullanılarak incelenebilir. Yenidoğan hipoksik-iskemik ensefalopatisinin bir domuz yavrusu modeli oluşturmak için gerekli prosedürleri gösteriyoruz.

Yenidoğan Hipoksik-İskemik Ensefalopati A Piglet Modeli

Prematüre ensefalopatisi, erken doğumdan kaynaklanan yaralanma ile ilişkili merkezi sinir sistemi anormalliklerini kapsar. Bu rapor, koryoamniyoniti taklit eden in utero geçici sistemik hipoksi-iskemi ve intra-amniyotik lipopolisakkarit uygulamasının (LPS) klinik olarak anlamlı bir sıçan modelini ve enfeksiyöz uyaranların ve plasental underperfüzyonun CNS gelişimi üzerindeki ilişkili etkisini açıklamaktadır.

Prematüre Modelleme Ensefalopati Sıçanlarda İçi amniyotik Lipopolisakkarid ile Prenatal Hipoksi-iskemi kullanma

Tek taraflı Karotis arter tıkanıklığı postnatal gününde gerçekleştirilen 7-10 CD-1 fare pups yenidoğan hipoksik-iskemik (hı) model oluşturmak ve HI beyin hasarı etkileri araştırıldı. Neurobehavioral işlevleri olmayan çalışan normal farelere göre bu farelerde görmüştük.

Yenidoğan hipoksik-iskemik beyin hasarı, fare modeli neurobehavioral değerlendirmesi

Posthemorajik prematüre hidrosefali (PHHP), koryoamniyonit ve intraventriküler kanama kombine edilerek neonatal sıçanlarda modellenebilir. Bu doğum öncesi ve doğum sonrası olayların kombinasyonu, yaşam boyu makrosefali, ventrikülomegali ve yüksek kafa içi basınç dahil olmak üzere PHHP'nin klinik özelliklerini doğru bir şekilde özetler.

Sıçanlarda Prematüre Posthemorajik Hidrosefalisinin Modellenmesi

Yanal sıvı perküsyon (LFP), farelerde travmatik beyin hasarı oluşturulmuş bir model olduğunu göstermiştir. LFP hayvan modellerinde üç ana kriterleri yerine getirir: geçerliliği, güvenilirliği ve klinik önemi. Cerrahi kraniotomi oluşan prosedür, hub tespit, fokal ve diffüz yaralanma ile sonuçlanan yaralanma indüksiyonu ile takip açıklanmıştır.

Yanal Akışkan Perküsyon: Travmatik Beyin Hasarı Farelerde Modeli

Bu video neonatal EEG aktivitesi arka kuramı ve yenidoğan yoğun bakım ünitesinde kendi kayıt canlı bir gösteri izledi duyusal tepkileri, açıklıyor.

Erken EEG: A Multimodal Nörofizyolojik Protokolü

Keşfedin, gelincik modelinde inflamasyon duyarlılaştırılmış preterm hipoksik-iskemik beyin hasarı oluşturma yöntemini. Bu teknik, geç preterm bebeklerdeki oksidatif hasar mekanizmalarını incelemek için kullanılır.

İnflamasyon duyarlıgeç Preterm Hipoksik-iskemik Beyin Hasarı Bir Gelincik Modeli

Daha fazla video keşfet