Name: Farelerde Izokalorik 2:1 Aralıklı Orucun Metabolik Etkilerinin Değerlendirilmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-11-27T13:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 6 s
Description: Öğrenin, farelerde izokalorik 2:1 aralıklı oruç protokolünü obezite ve glukoz metabolizması üzerindeki etkilerini incelemek için. Bu yöntem, periyodik açlığın kalori alımından bağımsız yararlarını ortaya koyar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

K.-H.K Kanada Hibe-in-Aid (G-18-0022213), J. P. Bickell Vakfı ve University of Ottawa Heart Institute Start-up fonu kalp ve inme vakfı tarafından desteklendi; H.-K.S. Kanada Sağlık Araştırmaları Enstitüleri (PJT-162083), Reuben ve Helene Dennis Scholar ve Sun Life Financial New Investigator Award for Diabetes Research from Banting & Best Diabetes Centre (BBDC) ve Natural Sciences'ın bağışları ile desteklendi. ve Kanada Mühendislik Araştırma Konseyi (RGPIN-2016-06610). R.Y.K. Ottawa Üniversitesi Kardiyoloji Araştırma Fonu'ndan bir burs la desteklenmiştir. J.H.L. NSERC Doktora Bursu ve Ontario Lisansüstü Bursu ile desteklenmiştir. Y.O., UOHI Lisansüstü Ödülü ve Kraliçe Elizabeth II Bilim ve Teknoloji Yüksek Lisans Bursu ile desteklenmiştir.

Buradaki tüm yöntem ve protokoller Ottawa Üniversitesi ve Fenogenomik Merkezi'nin (TCP) Hayvan Bakım ve Veterinerlik Hizmetleri (ACVS) hayvan bakım komiteleri tarafından onaylanmıştır ve Kanada Hayvan Bakımı Konseyi standartlarına uygundur. Burada açıklanan tüm prosedürlerin kurumsal ve resmi onay altında ve teknik olarak yeterli personel tarafından yapılması gerektiği unutulmamalıdır. Tüm fareler, 12 saat/12 h ışık/karanlık döngüye (21-22 °C, normal muhafaza için %30-%60 nem) ve suya ücretsiz erişime sahip standart havalandırmalı kafeslerde yer aldı. Erkek C57BL/6J ve ob/ob fareler Jackson Laboratuvarı'ndan alındı.
1. 02:1 Isocaloric IF Rejimi
<ol><li>Yağsız ve diyete bağlı obezite fare modelleri için normal bir diyet (%17 yağ, ND) veya yüksek yağlı diyet (%45 yağ, HFD) hazırlayın. NOT: %60 HFD şiddetli diyet kaynaklı obeziteye neden olmak için kullanılabilir; ancak, gıda pelet yumuşaklığı nedeniyle, doğru günlük gıda alımını ölçmek için nispeten zordur. Otomatik bir sürekli ölçüm sistemi diyetler birden fazla türiçin çok yönlülük artırabilir.</li>
	<li>Bir ölçek ve EchoMRI kullanarak 7 haftalık bir ölçekte her farenin temel gövde ağırlığı ve vücut kompozisyonu ölçün. NOT: Vücut kompozisyonu ölçümü için bölüm 3'e bakın.</li>
	<li>Vücut ağırlığı ve vücut kompozisyonu sonuçlarına göre, 7 haftalık erkek C57BL/6J fareleri rastgele ve eşit olarak ikiye ayırın: ad libitum (AL) ve aralıklı açlık (IF) grupları.</li>
	<li>Kafes başına 2-3 fare yerleştirin ve içme suyuna ücretsiz erişim sağlayın. NOT: Kafes başına fare sayısı gıda alımı davranışını etkileyebilir. Çalışma sırasında tüm gruplarda kafes başına eşit sayıda fare bulundurulması önerilir.</li>
	<li>IF rejimine başlamadan önce yeni kafes ortamına ve diyete 1 haftalık uyum sağlayın.</li>
	<li>Oruç süresi: 12:00 de taze yatak ile temiz bir kafese fareler taşıyın. AL grubuna tartılı miktarda yiyecek sağlarken IF grubu için yiyecek eklemeyin. NOT: Her oruç döngüsü için, her iki grubun da aynı miktarda kullanım süresine maruz kaldığından emin olmak için hem AL hem de IF grupları için kafesdeğiştirmek önemlidir.</li>
	<li>24 saat sonra, her iki gruptaki farelerin ağırlıklarını ve AL kafeslerinde kalan yiyecekleri ölçün. NOT: Fareler genellikle hazneden küçük peletleri veya yiyecek parçalarını çıkarıp yuva bölgelerinin yakınında tuttuğundan, özellikle HFD kullanırken, gıda kırıntılarının ağırlığını kafesin alt kısmında ve gıda haznesi üzerinde eklediğinizden emin olun. Her 2:1 döngüsünün (3 gün) sonunda fare başına ortalama enerji alımı 35 kcal civarındadır, normal bir diyet için ~10 g 'ye eşdeğerdir (3.3 kcal/g) ve HFD için ~7 g (4.73 kcal/g).</li>
	<li>Beslenme süresi: hem AL hem de IF grupları için saat 12:00'de tartılan bir gıda miktarı sağlar.</li>
	<li>Gıda sağlayan 48 saat sonra, artık gıda ve farelerin ağırlığını ölçmek.</li>
	<li>Çalışma süresince (örn.16 hafta) adımları 1.6-1.10 olarak tekrarlayın.</li>
</ol>2. Çift besleme (PF) Kontrol Grubu
NOT: Bir fare modelinde (örn. ob/ob farelerde hiperfaji) değiştirilmiş beslenme davranışının gözlendiği bir IF deneyi için, IF ile uygun kaloriden bağımsız karşılaştırma için bir çift besleme grubuna sahip olmak gerekir.
<ol><li>PF kontrol grubu için, IF grubu tarafından tüketilen aynı miktarda yiyeceğin PF grubuna sunulması gibi deney takvimini stagger(Şekil 2).</li>
	<li>IF grubu tarafından tüketilen gıda miktarını 2 günlük yeniden besleme süresi boyunca ölçün.</li>
	<li>IF grubundaki bu tüketilen gıda miktarını eşit olarak üç orana bölün ve günlük olarak 12:00'de PF grubuna sağlayın. NOT: Günlük eşit miktarda yiyecek sağlamak çok önemlidir. Hiperfajili farelerde, çift beslenen farelere gönüllü tüketimlerinden daha az yiyecek sağlanırsa, büyük olasılıkla sağlanan tüm yiyecekleri tüketir ve etkili bir şekilde oruç tutarlar. Bu daha sonra IF-tedavi fareler için uygun karşılaştırma önlemek ve sonucu şaşırtmak olabilir.</li>
	<li>Çalışma süresince 2.1-2.3 adımlarını tekrarlayın.</li>
</ol>3. Vücut Kompozisyon analizi
NOT: Uzun süreli IF farelerde vücut ağırlığını etkilediği için, vücut kompozisyonu canlı, anesteziolmayan farelerde yağ ve yağsız kütleyi ölçmek için bir vücut kompozisyonu analizörü kullanılarak uygun döngülerde (örn. her 3 veya 4 döngü) ölçülebilir.
<ol><li>Vücut kompozisyonu analizörlerini açın. NOT: Programa başlamadan önce, ısınmak için makineyi en az 2-3 saat bekletin.</li>
	<li>Ölçüm doğruluğunu test etmek için vücut kompozisyonu analizörü üzerinde bir sistem testi çalıştırın. Gerekirse, kanola yağı ve su örnekleri kullanarak sistemi kalibre edin.</li>
	<li>Her farenin gövde ağırlığını ölçün.</li>
	<li>Fareyi küçük bir hayvan silindirtutucuye yerleştirin.</li>
	<li>Ölçüm sırasında farenin fiziksel hareketini kısıtlamak için bir sınır çözücü yerleştirin ve tutucuyu gövde kompozisyonu analizörüne yerleştirin.</li>
	<li>Tarama programını çalıştırın. NOT: Analiz etmek yaklaşık 90-120 s alır.</li>
	<li>Ölçümden sonra tutucuyu ekipmandan çıkarın ve fareyi kafese geri getirin. NOT: Daha ayrıntılı bir protokol önceki bir yayında bulunabilir9.</li>
</ol>4. Glikoz ve İnsülin Tolerans Testleri
<ol><li>Glukoz tolerans testi (GTT) için, oruç tutmaktan önce her farenin vücut ağırlığını ve vücut kompozisyonu ölçmek ve kolay ve hızlı indeksleme için kalıcı bir belirteç ile kuyruk işaretleyin.</li>
	<li>Fareleri akşam 7:00'de yiyeceksiz yeni kafeslere yerleştirin. NOT: Gece oruç standart protokol, henüz fare fizyolojisi nedeniyle (örneğin, uzun süre oruç sonra artan glikoz kullanımı10,11), kısa oruç (~ 6 h) ITT için açıklandığı şekilde kullanılabilir.</li>
	<li>Oruç sonra 14-16 h (09:00 ertesi sabah), her farenin vücut ağırlığı ve vücut kompozisyonu ölçmek ve vücut ağırlığına göre glikoz doz miktarını hesaplamak. NOT: Obez farelerde glikoz intoleransının aşırı tahmin intoleransını önlemek için, vücut kompozisyonu analizinden elde edilen yağsız kütle glukoz dozu hesaplamak için kullanılabilir12,13.</li>
	<li>Her fare için, temiz cerrahi makas kullanarak kuyruğun ucunu (0,5-1,0 mm) kesin. Kan ilk damla sildikten sonra, kuyruk kan taze bir damla çekmek ve glucometer ile bazal açlık kan şekeri düzeyini ölçmek. NOT: GTT veya ITT sırasında her kan şekeri ölçümü için ek kuyruk kesimi gerekmez. Yara, bir damla kan çekmek için gazlı bezle ezilerek tazelenebilir.</li>
	<li>Konu fareler intraperitoneal (i.p.) glukoz enjeksiyonuna (vücut ağırlığı nın 1 mg/g). NOT: Bir deneyin amacına göre(örn., inkretin etkilerinin incelenmesi), glikozun oral uygulaması oral gavaj ile yapılabilir. Oral GTT (OGTT) protokolü başka bir çalışmada bulunabilir14.</li>
	<li>0, 5, 15, 30, 60 ve 120 dk glukoz sonrası enjeksiyonda kuyruktaki kan şekerini ölçün.</li>
	<li>GTT'yi bitirdikten sonra, yeterli miktarda yiyecek sağlayın.</li>
	<li>İnsülin tolerans testi (ITT) için, 09:00'da yiyecekleri çıkarın. NOT: Hem GTT hem de ITT, kan şekeri düzeylerini yükseltebilen ve fizyolojiyi değiştirebilen fareler için strese neden olan deneyimler olduğundan, GTT deneyinden sonra en az 2-3 günlük iyileşme sağladıktan sonra ITT'nin kullanılması önerilir.</li>
	<li>6 saat (3:00 PM) oruç sonra, adım 4.4 açıklandığı gibi kuyruk temel kan şekeri ölçün.</li>
	<li>İnsülin i.p. enjeksiyonuna tabi fareler (vücut ağırlığı 0.65 mU/g).</li>
	<li>0, 15, 30, 60, 90 ve 120 dk post-insülin enjeksiyonu kuyruk kan şekeri ölçün.</li>
	<li>ITT'yi bitirdikten sonra, yeterli miktarda yiyecek sağlayın.</li>
</ol>5. Dolaylı Kalorimetre
NOT: IF ile tedavi edilen farelerin enerji metabolizması, tek bir IF döngüsü boyunca dolaylı kalorimetre ile daha da değerlendirilebilir. Bu oksijen tüketimini ölçecektir (VO2),karbondioksit üretimi (VCO2),solunum değişim oranı (RER), ve ısı (kcal/h).
<ol><li>Denemeyi çalıştırmadan önce dolaylı kalorimetre sisteminin gücünü en az 2 saat açın. NOT: Bu sistem ısınma doğru ölçüm için önemlidir.</li>
	<li>Temiz yatak takımları ile kafesler hazırlayın, su şişeleri doldurun ve gıda haznelerine önceden tartılmış miktarda yemek ekleyin.</li>
	<li>Drierite ve limonlu sodanın durumunu kontrol edin. Drierite bir renk göstergesi pembe görünürse, Hangi Drierite nem yüksek miktarda emmiş olduğunu gösterir, bu taze Drierite ile değiştirmek veya üst gereklidir.</li>
	<li>Sistemi belirli bileşimle bir gaz kullanarak kalibre edin (%0,5 CO2,%20,5 O2).</li>
	<li>VO2 ve VCO2 verilerini normalleştirmek için kullanılacak her farenin gövde ağırlığını ve gövde kompozisyonu ölçün.</li>
	<li>Yavaşça kafes başına bir fare yerleştirin.</li>
	<li>Metabolik kafesleri monte edin, ısı kontrollü ortam odasına yerleştirin ve gaz hatlarına ve aktivite sensörü kablosuna bağlayın.</li>
	<li>Yazılımı kullanarak uygun deneysel parametreler ekleyerek deneme profilini ayarladıktan sonra, ölçüm için programı çalıştırın. İlk gün ölçümünün amacı bir alışma dönemi sağlamak ve temel enerji metabolizmasını ölçmektir.</li>
	<li>Ertesi gün saat 12:00'de fareler, kafesin haznesinden ve dibinden yiyecek ve kırıntıları çıkararak 24 saat oruç tutarlar. Gerekirse, temiz yatak ile değiştirin.</li>
	<li>24 saat sonra, yeniden besleme süresi için gıda haznesine önceden tartılmış chow miktarını ekleyin.</li>
	<li>Sonraki 48 saat boyunca sistemin donanım veya yazılım kesintisi olmadan çalışıp çalışmadığını düzenli olarak kontrol edin.</li>
	<li>Ölçümü tamamladıktan sonra, programı sonlandırın ve fareleri orijinal kafeslerine geri getirin. Gıda alımını incelemek için artık gıda miktarını ölçün.</li>
	<li>Dolaylı kaloriyetri için ayrıntılı protokol bir önceki çalışmada bulunabilir9.</li>
</ol>

<ol><li>Gill, S., Panda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Smartphone+App+Reveals+Erratic+Diurnal+Eating+Patterns+in+Humans+that+Can+Be+Modulated+for+Health+Benefits%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">A Smartphone App Reveals Erratic Diurnal Eating Patterns in Humans that Can Be Modulated for Health Benefits.</a> Cell Metabolism. 22 (5), 789-798 (2015).</li>
<li>Longo, V. D., Panda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fasting%2C+Circadian+Rhythms%2C+and+Time-Restricted+Feeding+in+Healthy+Lifespan%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Fasting, Circadian Rhythms, and Time-Restricted Feeding in Healthy Lifespan.</a> Cell Metabolism. 23 (6), 1048-1059 (2016).</li>
<li>Longo, V. D., Mattson, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fasting%3A+molecular+mechanisms+and+clinical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Fasting: molecular mechanisms and clinical applications.</a> Cell Metabolism. 19 (2), 181-192 (2014).</li>
<li>Patterson, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+Fasting+and+Human+Metabolic+Health%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Academy+of+Nutrition+and+Dietetics%22%5BJournal%5D)">Intermittent Fasting and Human Metabolic Health.</a> Journal of the Academy of Nutrition and Dietetics. 115 (8), 1203-1212 (2015).</li>
<li>Fontana, L., Partridge, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Promoting+health+and+longevity+through+diet%3A+from+model+organisms+to+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Promoting health and longevity through diet: from model organisms to humans.</a> Cell. 161 (1), 106-118 (2015).</li>
<li>Boutant, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SIRT1+Gain+of+Function+Does+Not+Mimic+or+Enhance+the+Adaptations+to+Intermittent+Fasting%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">SIRT1 Gain of Function Does Not Mimic or Enhance the Adaptations to Intermittent Fasting.</a> Cell Reports. 14 (9), 2068-2075 (2016).</li>
<li>Gotthardt, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+Fasting+Promotes+Fat+Loss+With+Lean+Mass+Retention%2C+Increased+Hypothalamic+Norepinephrine+Content%2C+and+Increased+Neuropeptide+Y+Gene+Expression+in+Diet-Induced+Obese+Male+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Intermittent Fasting Promotes Fat Loss With Lean Mass Retention, Increased Hypothalamic Norepinephrine Content, and Increased Neuropeptide Y Gene Expression in Diet-Induced Obese Male Mice.</a> Endocrinology. 157 (2), 679-691 (2016).</li>
<li>Kim, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+fasting+promotes+adipose+thermogenesis+and+metabolic+homeostasis+via+VEGF-mediated+alternative+activation+of+macrophage%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Research%22%5BJournal%5D)">Intermittent fasting promotes adipose thermogenesis and metabolic homeostasis via VEGF-mediated alternative activation of macrophage.</a> Cell Research. 27 (11), 1309-1326 (2017).</li>
<li>Lancaster, G. I., Henstridge, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Body+Composition+and+Metabolic+Caging+Analysis+in+High+Fat+Fed+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Body Composition and Metabolic Caging Analysis in High Fat Fed Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (135), (2018).</li>
<li>Ayala, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standard+operating+procedures+for+describing+and+performing+metabolic+tests+of+glucose+homeostasis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+%26+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">Standard operating procedures for describing and performing metabolic tests of glucose homeostasis in mice.</a> Disease Models & Mechanisms. 3 (9-10), 525-534 (2010).</li>
<li>Heijboer, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sixteen+h+of+fasting+differentially+affects+hepatic+and+muscle+insulin+sensitivity+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Lipid+Research%22%5BJournal%5D)">Sixteen h of fasting differentially affects hepatic and muscle insulin sensitivity in mice.</a> Journal of Lipid Research. 46 (3), 582-588 (2005).</li>
<li>McGuinness, O. P., Ayala, J. E., Laughlin, M. R., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NIH+experiment+in+centralized+mouse+phenotyping%3A+the+Vanderbilt+experience+and+recommendations+for+evaluating+glucose+homeostasis+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%3A+Endocrinology+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">NIH experiment in centralized mouse phenotyping: the Vanderbilt experience and recommendations for evaluating glucose homeostasis in the mouse.</a> American Journal of Physiology: Endocrinology and Metabolism. 297 (4), 849-855 (2009).</li>
<li>Jorgensen, M. S., Tornqvist, K. S., Hvid, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calculation+of+Glucose+Dose+for+Intraperitoneal+Glucose+Tolerance+Tests+in+Lean+and+Obese+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Association+for+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Calculation of Glucose Dose for Intraperitoneal Glucose Tolerance Tests in Lean and Obese Mice.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 56 (1), 95-97 (2017).</li>
<li>Nagy, C., Einwallner, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Study+of+In+Vivo+Glucose+Metabolism+in+High-fat+Diet-fed+Mice+Using+Oral+Glucose+Tolerance+Test+%28OGTT%29+and+Insulin+Tolerance+Test+%28ITT%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Study of In Vivo Glucose Metabolism in High-fat Diet-fed Mice Using Oral Glucose Tolerance Test (OGTT) and Insulin Tolerance Test (ITT).</a> Journal of Visualized Experiments. (131), 56672(2018).</li>
<li>Kim, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thermogenesis-independent+metabolic+benefits+conferred+by+isocaloric+intermittent+fasting+in+ob%2Fob+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Thermogenesis-independent metabolic benefits conferred by isocaloric intermittent fasting in ob/ob mice.</a> Scientific Reports. 9 (1), 2479(2019).</li>
<li>Li, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+Fasting+Promotes+White+Adipose+Browning+and+Decreases+Obesity+by+Shaping+the+Gut+Microbiota%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Intermittent Fasting Promotes White Adipose Browning and Decreases Obesity by Shaping the Gut Microbiota.</a> Cell Metabolism. 26 (4), 672-685 (2017).</li>
<li>Mitchell, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Daily+Fasting+Improves+Health+and+Survival+in+Male+Mice+Independent+of+Diet+Composition+and+Calories%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Daily Fasting Improves Health and Survival in Male Mice Independent of Diet Composition and Calories.</a> Cell Metabolism. 29 (1), 221-228 (2019).</li>
<li>Cignarella, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+Fasting+Confers+Protection+in+CNS+Autoimmunity+by+Altering+the+Gut+Microbiota%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Intermittent Fasting Confers Protection in CNS Autoimmunity by Altering the Gut Microbiota.</a> Cell Metabolism. 27 (6), 1222-1235 (2018).</li>
<li>Martinez-Lopez, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((System-wide+Benefits+of+Intermeal+Fasting+by+Autophagy%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">System-wide Benefits of Intermeal Fasting by Autophagy.</a> Cell Metabolism. 26 (6), 856-871 (2017).</li>
<li>Lo Martire, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+blood+glucose+as+a+function+of+body+temperature+in+laboratory+mice%3A+implications+for+daily+torpor%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%3A+Endocrinology+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Changes in blood glucose as a function of body temperature in laboratory mice: implications for daily torpor.</a> American Journal of Physiology: Endocrinology and Metabolism. 315 (4), 662-670 (2018).</li>
<li>Chaix, A., Zarrinpar, A., Miu, P., Panda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time-restricted+feeding+is+a+preventative+and+therapeutic+intervention+against+diverse+nutritional+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Time-restricted feeding is a preventative and therapeutic intervention against diverse nutritional challenges.</a> Cell Metabolism. 20 (6), 991-1005 (2014).</li>
<li>Chaix, A., Lin, T., Le, H. D., Chang, M. W., Panda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time-Restricted+Feeding+Prevents+Obesity+and+Metabolic+Syndrome+in+Mice+Lacking+a+Circadian+Clock%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Time-Restricted Feeding Prevents Obesity and Metabolic Syndrome in Mice Lacking a Circadian Clock.</a> Cell Metabolism. 29 (2), 303-319 (2019).</li>
<li>Wang, B., Chandrasekera, P. C., Pippin, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptin-+and+leptin+receptor-deficient+rodent+models%3A+relevance+for+human+type+2+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Diabetes+Reviews%22%5BJournal%5D)">Leptin- and leptin receptor-deficient rodent models: relevance for human type 2 diabetes.</a> Current Diabetes Reviews. 10 (2), 131-145 (2014).</li>
<li>Pan, W. W., Myers, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptin+and+the+maintenance+of+elevated+body+weight%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews%3A+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Leptin and the maintenance of elevated body weight.</a> Nature Reviews: Neuroscience. 19 (2), 95-105 (2018).</li>
<li>Jackson, D. S., Ramachandrappa, S., Clark, A. J., Chan, L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Melanocortin+receptor+accessory+proteins+in+adrenal+disease+and+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Melanocortin receptor accessory proteins in adrenal disease and obesity.</a> Frontiers in Neuroscience. 9, 213(2015).</li>
<li>Tolson, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postnatal+Sim1+deficiency+causes+hyperphagic+obesity+and+reduced+Mc4r+and+oxytocin+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Postnatal Sim1 deficiency causes hyperphagic obesity and reduced Mc4r and oxytocin expression.</a> Journal of Neuroscience. 30 (10), 3803-3812 (2010).</li>
<li>Shimada, M., Tritos, N. A., Lowell, B. B., Flier, J. S., Maratos-Flier, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mice+lacking+melanin-concentrating+hormone+are+hypophagic+and+lean%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Mice lacking melanin-concentrating hormone are hypophagic and lean.</a> Nature. 396 (6712), 670-674 (1998).</li>
<li>Reitman, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Of+mice+and+men+-+environmental+temperature%2C+body+temperature%2C+and+treatment+of+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22FEBS+Letters%22%5BJournal%5D)">Of mice and men - environmental temperature, body temperature, and treatment of obesity.</a> FEBS Letters. 592 (12), 2098-2107 (2018).</li>
<li>Chvedoff, M., Clarke, M. R., Irisarri, E., Faccini, J. M., Monro, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+housing+conditions+on+food+intake%2C+body+weight+and+spontaneous+lesions+in+mice.+A+review+of+the+literature+and+results+of+an+18-month+study%5BTitle%5D)+AND+%22Food+and+Cosmetics+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Effects of housing conditions on food intake, body weight and spontaneous lesions in mice. A review of the literature and results of an 18-month study.</a> Food and Cosmetics Toxicology. 18 (5), 517-522 (1980).</li>
<li>Toth, L. A., Trammell, R. A., Ilsley-Woods, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactions+Between+Housing+Density+and+Ambient+Temperature+in+the+Cage+Environment%3A+Effects+on+Mouse+Physiology+and+Behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Association+for+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Interactions Between Housing Density and Ambient Temperature in the Cage Environment: Effects on Mouse Physiology and Behavior.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 54 (6), 708-717 (2015).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Bu iyi belgelenmiştir ki IF insan ve hayvanlarda çeşitli hastalıklar üzerinde yararlı sağlık etkileri sağlar8,15,16,17,18,19. Onun altta yatan mekanizmaları, otofaji ve bağırsak mikrobiyomu gibi, son zamanlarda açıklığa kavuşturulmuş edilmiştir. Sunulan protokol, farelerde diyetkaynaklı obezite ve ilişkili metabolik disfonksi...

Modern yaşam tarzı uzun günlük gıda alım süresi ve daha kısa açlık süreleri ile ilişkilidir1. Bu mevcut küresel obezite salgını katkıda, metabolik dezavantajları insanlarda görülen ile. Oruç insanlık tarihi boyunca uygulanmıştır, ve çeşitli sağlık yararları uzun ömürlü dahil, azaltılmış oksidatif hasar, ve optimize enerji homeostaz2,3. Oruç uygulamanın çeşitli yolları arasında, periyodik enerji yoksunluğu, aralıklı oruç olarak adlandırılır (IF), yaygın olarak genel nüfus tarafından kolay ve basit rejimi nedeniyle uygulanan popüler bir diyet yöntemidir. Preklinik ve klinik modellerde yapılan son çalışmalar, IF'nin uzun süreli açlık ve kalori kısıtlamasına benzer sağlık yararları sağlayabileceğini göstererek, IF'nin obezite ve metabolik hastalıklar için potansiyel bir tedavi stratejisi olabileceğini düşündürmektedir2,3,4,5.
IF rejimleri oruç süresi ve sıklığı açısından değişir. Alternatif gün oruç (yani, 1 gün beslenme / 1 gün oruç; 1:1 IF) obezite, kardiyovasküler hastalıklar, nörodejeneratif hastalıklar, vb 2,3üzerindeki yararlı sağlık etkilerini incelemek için kemirgenler en sık kullanılan IF rejimi olmuştur . Ancak, önceki çalışmalarda gösterildiği gibi6,7, ve daha fazla mekanistik bizim enerji alım analizi nde doğruladı8, 1:1 underfeeding sonuçları (~ 80%) enerji kaybını telafi etmek için yeterli besleme süresi nin olmaması nedeniyle. Bu, 1:1 IF'in sağladığı sağlık yararlarının kalori kısıtlaması veya yeme alışkanlıklarının değiştirilmesi yle aracılık edilip edilmediği belirsizliğini sağlar. Bu nedenle, yeni bir IF rejimi geliştirilmiştir ve burada gösterilmiştir, 2 günlük beslenme/1 günlük oruç (2:1 IF) deseninden oluşan, farelere gıda alımını telafi etmek için yeterli zaman sağlayan (~99%) ve vücut ağırlığı. Bu fareler daha sonra bir reklam libitum (AL) grubu ile karşılaştırılır. Bu rejim, yabani tip farelerde kalori azalması yokluğunda izokalorik IF etkilerinin incelenmesini sağlar.
Buna karşılık, değiştirilmiş besleme davranışı sergileyen bir fare modelinde, AL besleme karşılaştırmak ve 2:1 IF etkilerini incelemek için uygun bir kontrol koşulu olmayabilir. Örneğin, ob/ob fareler (obezite için yaygın olarak kullanılan bir genetik model) iştah ve tokluğu düzenleyen leptin eksikliği nedeniyle hiperfaji sergilediğinden, 2:1 IF sergileyenler AL beslemeli ob/ob farelere göre kalori alımını ~%20 azaltırlar. Bu nedenle, ob/ob farelerde IF'nin etkilerini doğru bir şekilde incelemek ve karşılaştırmak için uygun bir kontrol olarak çift besleme grubunun istihdam edilmesi gerekmektedir.
Genel olarak, bir çift besleme kontrolü kullanımı da dahil olmak üzere izocaloric 2:1 IF gerçekleştirmek için kapsamlı bir protokol sağlanır. Ayrıca, ozokalorik 2:1 IF'in fareleri yüksek yağlı diyetkaynaklı obeziteden ve/veya hem yabani tip hem de ob/ob farelerde metabolik disfonksiyondan koruduğu gösterilmiştir. Bu protokol, nörolojik bozukluklar, kardiyovasküler hastalıklar ve kanser gibi çeşitli patolojik durumlar üzerinde 2:1 IF yararlı sağlık etkilerini incelemek için kullanılabilir.

<table><tbody><tr><td>Kapsamlı Laboratuvar Hayvan İzleme Sistemi (CLAMS)</td><td>Columbus Instruments</td><td></td><td>Dolaylı kalorimetre</td></tr><tr><td>D-(+)-Glikoz çözeltisi</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G8769</td><td>GTT EchoMRI için</td></tr><tr><td>3'ü 1</td><td>arada EchoMRI</td><td>EchoMRI 3'ü 1 arada</td><td>Vücut kompozisyonu analizi</td></tr><tr><td>Glükometre ve şeritler</td><td>Bayer</td><td>Contour NEXT</td><td>Bunlar GTT ve ITT deneyleri içindir</td></tr><tr><td>Yüksek Yağlı Diyet (% 45 Kcal% yağ)</td><td>Research Diets Inc.</td><td>#D12451</td><td>3.3 Kcal/g</td></tr><tr><td>Yüksek Yağlı Diyet (%60 Kcal% yağ)</td><td>Research Diets Inc.</td><td>#D12452</td> ITT Fare Suşu için <td>4.73 Kcal / g</td></tr><tr><td>İnsülin</td><td>El Lilly</td><td>Humulin R</td><td></td></tr><tr><td>: B6. Cg-Lepob/J</td><td>Jackson Laboratuvarı</td><td>#000632</td><td>Ob/Ob fare</td></tr><tr><td>Fare Suşu: C57BL/6J</td><td>Jackson Laboratuvarı</td><td>#000664</td><td></td></tr><tr><td>Normal yemek (%17 Kcal% yağ)</td><td>Harlan</td><td>#2918</td><td></td></tr><tr><td>Tartı</td><td>Mettler Toledo</td><td></td><td>Vücut ağırlığı ve gıda alımı ölçümü</td></tr></tbody></table>

farelerde izokalorik 2:1 aralıklı orucun metabolik etkilerinin değerlendirilmesi

Assessment of the Metabolic Effects of Isocaloric 2:1 Intermittent Fasting in Mice

Aralıklı açlık (IF), periyodik enerji kısıtlaması içeren bir diyet müdahalesi, çok sayıda fayda sağlamak ve metabolik anormallikleri karşı koymak için kabul edilmiştir. Bugüne kadar, açlık ve beslenme süreleri değişen sürelere sahip farklı TIPIF modelleri belgelenmiştir. Ancak, bu modellerin çoğu hem zaman hem de kalori kısıtlama stratejilerinin çok faktörlü katkılarını içerdiğinden, sonuçların yorumlanması zordur. Örneğin, genellikle kemirgen IF rejimi olarak kullanılan alternatif gün oruç modeli, yetersiz beslenmeye neden olabilir ve bu müdahalenin sağlığa yararlarının hem kalori kısıtlaması hem de oruç-yeniden besleme döngüleri yoluyla aracılık ettiğini düşündürmektedir. Son zamanlarda, 2 gün oruç ve ardından 2 günlük beslenmeden oluşan 2:1 IF'nin, genel kalori alımında azalma olmadan diyete bağlı obezite ve metabolik iyileşmelere karşı koruma sağlayabileceği başarıyla gösterilmiştir. Burada sunulan bu isocaloric bir protokoldür 2:1 farelerde IF müdahale. Ayrıca hiperfaji gibi değiştirilmiş yeme davranışları olan bir fare modelini incelemek için gereken çift besleme (PF) protokolü de tanımlanmıştır. 2:1 IF rejimi kullanılarak, bu isocaloric IF azaltılmış vücut kilo alımına yol açtığı gösterilmiştir, geliştirilmiş glikoz homeostazı, ve yüksek enerji harcaması. Bu nedenle, bu rejim çeşitli hastalık koşulları üzerinde IF sağlık etkilerini araştırmak için yararlı olabilir.

Şekil 1, 24 saat oruç tan sonra beslenme analizlerini ve 1:1 ile 2:1 aralıklı oruç arasındaki karşılaştırmayı göstermektedir. 24 saat açlık dönemi vücut ağırlığında ~ azalma ile sonuçlandı ve 2 günlük yeniden beslenmeden sonra tamamen iyileşti (Şekil 1A). 24 h açlık dönemi, sonraki 2 günlük yeniden besleme sırasında hiperfajiye neden olur (Şekil 1B). Bununla birlikte, 1:1 alternatif gün oruç ve 2:1 ...

Bu makalede, yabani tip ve ob/ob farelerde obezite ve bozulmuş glikoz metabolizmasına karşı korumak ve tedavi etmek için izokalorik 2:1 aralıklı oruç için ayrıntılı bir protokol açıklanmaktadır.

Farelerde Izokalorik 2:1 Aralıklı Orucun Metabolik Etkilerinin Değerlendirilmesi

Intermittent fasting (IF), a dietary intervention involving periodic energy restriction, has been considered to provide numerous benefits and counteract ...

İki ila bir aralıklı oruç rejimi bir günlük oruç ve ardından iki günlük beslenme, kalori alımının etkileri yerine periyodik enerji kısıtlaması içeren diyet müdahalelerinin etkilerini incelemeyi mümkün kılar. Alternatif gün oruç aksine, hangi iki-bir aralıklı oruç altında beslenme sonuçları fareler tam olarak enerji kaybı ve vücut ağırlığı azaltma telafi etmek için yeterli zaman sağlar, hangi oruç sırasında olur. Bu bilim adamları kalori alımı bağımsız periyodik açlık etkilerini incelemek için izin verir.İki-bir aralıklı oruç obezite ve bozulmuş glikoz homeostazı ve yağlı karaciğer hastalığı da dahil olmak üzere ilişkili metabolik disfonksiyon kullanılan diyet karşı yararları bir dizi teşvik. Bu protokol, beş günlük beslenme ve iki günlük oruç veya gıda erişiminin günde sekiz saatle sınırlı olduğu sınırlı beslenmeden oluşan beş ila iki diyet rejimine kolayca ayarlanabilir. Hiperfaji gibi alternatif besleme davranışı gösteren bir fare modeli kullanırsa, reklam libitum besleme uygun bir kontrol koşulu olmayabilir.Bu durumda, aralıklı oruç etkilerini incelemek ve karşılaştırmak için bir çift besleme kuralı gerekecektir. Yalın ve diyet kaynaklı obezite fare modelleri için normal bir diy

assessment-metabolic-effects-isocaloric-21-intermittent-fasting

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Geçerli makalenin üretimi ve yüksek yağlı diyet beslenen farelerin metabolik karakterizasyonu diyet kaynaklı insülin direnci ve obezite bir model olarak açıklar. Daha fazla oral glukoz tolerans testi ve glukoz metabolizma vivo içindetüm vücut değişikliklere izleme insülin tolerans testi gerçekleştirmek için detaylı iletişim kuralları bulunmaktadır.

Vivo glikoz metabolizması farelerde Oral glukoz tolerans testi (OGTT) ve insülin tolerans testi (ITT) kullanarak yüksek yağlı diyet beslenen incelenmesi

Obezite sıklığı artıyor ve kronik akciğer hastalıkları riskini artırır. Temel mekanizmaları ve Önleme stratejileri, iyi tanımlanmış hayvan kurmak için modelleri ihtiyaç vardır. Burada, üç yöntem (glikoz tolerans testi, vücut pletismografisi ve akciğer fiksasyon) obezite etkisi farelerde akciğer sonuçlar üzerine eğitim sağlamak.

Mayi glikoz tolerans testi, akciğer işlev ölçümü ve akciğer fiksasyonu obezite ve pulmoner sonuçlar üzerine Engelli metabolizma etkisini incelemek için

Bu iletişim kuralı bir vücut kompozisyon analiz ve metabolik hayvan izleme sistemi vücut kompozisyonu ve farelerde metabolik parametreleri tanımlamak için kullanımını açıklar. Yüksek yağlı beslenme tarafından indüklenen bir obezite modeli örnek olarak bu tekniklerin uygulanması için kullanılır.

Vücut kompozisyonu ve metabolik Caging Analizi yüksek yağ Fed farelerde

Kısa oturum (≤10 min) yüksek yoğunluk ara egzersiz (HIIT) daha uzun egzersiz yöntemleri için bir alternatif olarak ortaya çıkıyor, henüz daha kısa türevleri nadiren hayvan çalışmalarında modellenmiştir. Burada, biz 10 dk tarif, 3 gün bir hafta, yokuş yukarı koşu bandı HIIT protokolü bu erkek fiziksel performansını yükseltir ve dişi fareler yaşlı.

Kısa oturum yüksek yoğunluklu ara egzersiz ve koşu bandı değerlendirme yaşlı farelerde

Bu makale, farelerde lipid metabolizmasını değerlendirmek için üç kolay ve erişilebilir test sağlar.

Farelerde Tüm Vücut Lipid Taşıma Kapasitesinin Değerlendirilmesi

Yağ asidi β-oksidasyonu, hepatositler de dahil olmak üzere birçok farklı hücre tipinde enerji üretmekten sorumlu önemli bir metabolik yoldur. Burada, 14C etiketli palmitik asit kullanarak taze izole edilmiş primer hepatositlerde yağ asidi β-oksidasyonunu ölçmek için bir yöntem açıklıyoruz.

Yeni İzole Edilmiş Fare Hepatositlerinin Süspansiyonunda Yağ Asidi β-Oksidasyonunun Ölçülmesi

Bu makalede, obez farelerde termojenik adipositlerin bazal metabolizma hızını ve oksidatif kapasitesini ölçmek için bir protokol açıklanmaktadır.

Bazal Enerji Harcamasının Ve Termojenik Adipositlerin Obez Farelerde Enerji Harcama Kapasitesinin Belirlenmesi

Gıda alımının zamanlamasını kısıtlamak, diyete bağlı metabolik hastalıkları hafifletmek için umut verici bir müdahale olarak ortaya çıkmıştır. Bu makale, farelerde ritmik gıda alımını ölçmek ve manipüle etmek için şirket içinde inşa edilmiş verimli bir sistemin inşasını ve kullanımını detaylandırmaktadır.

Özel Yapım Bir Besleme Sistemi Kullanılarak Farelerde Ritmik Gıda Alımının Manipülasyonu

Farelerde, M&amp;M'lere (yağ ve şekerden yapılan oldukça lezzetli bir gıda) aralıklı erişim kullanılarak bir tıkınırcasına yeme modeli kuruldu. Bu yüksek yağlı, yüksek şekerli yiyeceğe aralıklı erişimi olan fareler, yiyeceğe sürekli erişimi olan veya hiç erişimi olmayan farelere kıyasla stres benzeri davranışlar, artan kalori alımı ve bu yiyeceği standart yemek yerine tercih etme gösterdi.

Farelerde Aralıklı Tıkınırcasına Alım Modeli

Kararlı izotop profil aracı metabolik akı gaz kromatografisi kütle spektrometrik analizi, nematod...

Kararlı İzotopik Profil geliştirilmesi ve Yetişkin Sahne Aracı Metabolik Akı Caenorhabditis elegans</em

Öğrenin, farelerde izokalorik 2:1 aralıklı oruç protokolünü obezite ve glukoz metabolizması üzerindeki etkilerini incelemek için. Bu yöntem, periyodik açlığın kalori alımından bağımsız yararlarını ortaya koyar.

Farelerde Izokalorik 2:1 Aralıklı Orucun Metabolik Etkilerinin Değerlendirilmesi

Daha fazla video keşfet