Name: İlaç Farmakokinetik ve Toksikolojik Değerlendirme için Bir Bağırsak/Karaciğer Mikrofizyolojik Sistemi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-12-03T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 59 s
Description: Keşfedin bağırsak/karaciğer mikrofizyolojik sisteminde asetaminofenin farmakokinetik ve toksikolojik özelliklerini değerlendirmeyi. Bu yöntem, ilaç metabolizmasını ve toksisitesini in vitro koşullarda insan fizyolojisini taklit ederek araştırmacılara hayvan deneylerine olan bağımlılığı azaltma imkanı sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dr. Christie Guguen-Guillouzo, Unit 522 INSERM'den Dr. Philippe Gripon ve Ünite 271 INSERM'den Dr. Christian Trepo'ya Biyolojik Materyalin (Hepa RG hücreleri) kullanımı ve akademik araştırmayapmak için bize sunulması için teşekkür ederiz.

<ol><li>Zhang, D., Luo, G., Ding, X., Lu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+experimental+models+of+drug+metabolism+and+disposition+in+drug+discovery+and+development%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Pharmaceutica+Sinica+B%22%5BJournal%5D)">Preclinical experimental models of drug metabolism and disposition in drug discovery and development.</a> Acta Pharmaceutica Sinica B. 2 (6), 549-561 (2012).</li>
<li>Hynds, R. E., Giangreco, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relevance+of+human+stem+cell-derived+organoid+models+for+epithelial+translational+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">The relevance of human stem cell-derived organoid models for epithelial translational medicine.</a> Stem Cells. 31 (3), 417-422 (2013).</li>
<li>Sivaraman, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Microscale+In+vitro+Physiological+Model+of+the+Liver%3A+Predictive+Screens+for+Drug+Metabolism+and+Enzyme+Induction%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Drug+Metabolism%22%5BJournal%5D)">A Microscale In vitro Physiological Model of the Liver: Predictive Screens for Drug Metabolism and Enzyme Induction.</a> Current Drug Metabolism. 6 (6), 569-591 (2005).</li>
<li>Dehne, E. M., Hasenberg, T., Marx, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ascendance+of+microphysiological+systems+to+solve+the+drug+testing+dilemma%5BTitle%5D)+AND+%22Future+Science+OA%22%5BJournal%5D)">The ascendance of microphysiological systems to solve the drug testing dilemma.</a> Future Science OA. 3 (2), 185(2017).</li>
<li>Oleaga, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-Organ+toxicity+demonstration+in+a+functional+human+in+vitro+system+composed+of+four+organs%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Multi-Organ toxicity demonstration in a functional human in vitro system composed of four organs.</a> Scientific Reports. 6, 20030(2016).</li>
<li>Maschmeyer, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+four-organ-chip+for+interconnected+long-term+co-culture+of+human+intestine%2C+liver%2C+skin+and+kidney+equivalents%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">A four-organ-chip for interconnected long-term co-culture of human intestine, liver, skin and kidney equivalents.</a> Lab Chip. 15 (12), 2688-2699 (2015).</li>
<li>Esch, M. B., Mahler, G. J., Stokol, T., Shuler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Body-on-a-chip+simulation+with+gastrointestinal+tract+and+liver+tissues+suggests+that+ingested+nanoparticles+have+the+potential+to+cause+liver+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Body-on-a-chip simulation with gastrointestinal tract and liver tissues suggests that ingested nanoparticles have the potential to cause liver injury.</a> Lab Chip. 14 (16), 3081-3092 (2014).</li>
<li>Materne, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Multi-organ+Chip+-+A+Microfluidic+Platform+for+Long-term+Multi-tissue+Coculture%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">The Multi-organ Chip - A Microfluidic Platform for Long-term Multi-tissue Coculture.</a> Journal of Visualized Experiments. , e52526(2015).</li>
<li>Esch, M. B., Ueno, H., Applegate, D. R., Shuler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modular%2C+pumpless+body-on-a-chip+platform+for+the+co-culture+of+GI+tract+epithelium+and+3D+primary+liver+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Modular, pumpless body-on-a-chip platform for the co-culture of GI tract epithelium and 3D primary liver tissue.</a> Lab Chip. 16 (14), 2719-2729 (2016).</li>
<li>Sung, J. H., Kam, C., Shuler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+microfluidic+device+for+a+pharmacokinetic%E2%80%93pharmacodynamic+%28PK-PD%29+model+on+a+chip%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+on+a+Chip%22%5BJournal%5D)">A microfluidic device for a pharmacokinetic–pharmacodynamic (PK-PD) model on a chip.</a> Lab on a Chip. 10 (4), 446-455 (2010).</li>
<li>Viravaidya, K., Sin, A., Shuler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+Microscale+Cell+Culture+Analog+to+Probe+Naphthalene+Toxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+Progress%22%5BJournal%5D)">Development of a Microscale Cell Culture Analog to Probe Naphthalene Toxicity.</a> Biotechnology Progress. 20 (1), 316-323 (2004).</li>
<li>Sin, A., Chin, K. C., Jamil, M. F., Kostov, Y., Rao, G., Shuler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Design+and+Fabrication+of+Three-Chamber+Microscale+Cell+Culture+Analog+Devices+with+Integrated+Dissolved+Oxygen+Sensors%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+Progress%22%5BJournal%5D)">The Design and Fabrication of Three-Chamber Microscale Cell Culture Analog Devices with Integrated Dissolved Oxygen Sensors.</a> Biotechnology Progress. 20 (1), 338-345 (2004).</li>
<li>Tsamandouras, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrated+Gut+and+Liver+Microphysiological+Systems+for+Quantitative+In+vitro+Pharmacokinetic+Studies%5BTitle%5D)+AND+%22The+AAPS+Journal%22%5BJournal%5D)">Integrated Gut and Liver Microphysiological Systems for Quantitative In vitro Pharmacokinetic Studies.</a> The AAPS Journal. 19 (5), 1499-1512 (2017).</li>
<li>Graham, G. G., Davies, M. J., Day, R. O., Mohamudally, A., Scott, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+modern+pharmacology+of+paracetamol%3A+Therapeutic+actions%2C+mechanism+of+action%2C+metabolism%2C+toxicity+and+recent+pharmacological+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Inflammopharmacology%22%5BJournal%5D)">The modern pharmacology of paracetamol: Therapeutic actions, mechanism of action, metabolism, toxicity and recent pharmacological findings.</a> Inflammopharmacology. 21 (3), 201-232 (2013).</li>
<li>Hodgman, M. J., Garrard, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Review+of+Acetaminophen+Poisoning%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care+Clinics%22%5BJournal%5D)">A Review of Acetaminophen Poisoning.</a> Critical Care Clinics. 28 (4), 499-516 (2012).</li>
<li>Maschmeyer, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chip-based+human+liver-intestine+and+liver-skin+co-cultures+-+A+first+step+toward+systemic+repeated+dose+substance+testing+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutics+and+Biopharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Chip-based human liver-intestine and liver-skin co-cultures - A first step toward systemic repeated dose substance testing in vitro.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 95, 77-87 (2015).</li>
<li>Bessems, J. G. M., Vermeulen, N. P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paracetamol+%28acetaminophen%29-induced+toxicity%3A+Molecular+and+biochemical+mechanisms%2C+analogues+and+protective+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Reviews+in+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Paracetamol (acetaminophen)-induced toxicity: Molecular and biochemical mechanisms, analogues and protective approaches.</a> Critical Reviews in Toxicology. 31 (1), 55-138 (2001).</li>
<li>Hirt, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+afterload+induces+pathological+cardiac+hypertrophy%3A+A+new+in+vitro+model%5BTitle%5D)+AND+%22Basic+Research+in+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Increased afterload induces pathological cardiac hypertrophy: A new in vitro model.</a> Basic Research in Cardiology. 107 (6), 307(2012).</li>
<li>Fink, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+stretch+of+engineered+heart+tissue+induces+hypertrophy+and+functional+improvement%5BTitle%5D)+AND+%22The+FASEB+journal+official+publication+of+the+Federation+of+American+Societies+for+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Chronic stretch of engineered heart tissue induces hypertrophy and functional improvement.</a> The FASEB journal official publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology. 14 (5), 669-679 (2000).</li>
<li>Zhang, B., Peticone, C., Murthy, S. K., Radisic, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+standalone+perfusion+platform+for+drug+testing+and+target+validation+in+micro-vessel+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Biomicrofluidics%22%5BJournal%5D)">A standalone perfusion platform for drug testing and target validation in micro-vessel networks.</a> Biomicrofluidics. 7 (4), 044125(2013).</li>
<li>Araújo, F., Sarmento, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Towards+the+characterization+of+an+in+vitro+triple+co-culture+intestine+cell+model+for+permeability+studies%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Towards the characterization of an in vitro triple co-culture intestine cell model for permeability studies.</a> International Journal of Pharmaceutics. 458 (1), 128-134 (2013).</li>
<li>Cadena-Herrera, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+three+viable-cell+counting+methods%3A+Manual%2C+semi-automated%2C+and+automated%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+Reports%22%5BJournal%5D)">Validation of three viable-cell counting methods: Manual, semi-automated, and automated.</a> Biotechnology Reports. 7, 9-16 (2015).</li>
<li>User Guide Millicell® ERS-2 Electrical Resistance System. Millipore. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.merckmillipore.com/BR/pt/life-sciencee-research/cell-culture-systems/cell-analysis/millicell-ers-2-voltohmmeter/FiSb.qB.LDgAAAFBdMhb3.r5">http://www.merckmillipore.com/BR/pt/life-sciencee-research/cell-culture-systems/cell-analysis/millicell-ers-2-voltohmmeter/FiSb.qB.LDgAAAFBdMhb3.r5</a> 6-10 (2016).</li>
<li>Gripon, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infection+of+a+human+hepatoma+cell+line+by+hepatitis+B+virus%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Infection of a human hepatoma cell line by hepatitis B virus.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 99 (24), 15655-15660 (2002).</li>
<li>Guillouzo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+human+hepatoma+HepaRG+cells%3A+A+highly+differentiated+model+for+studies+of+liver+metabolism+and+toxicity+of+xenobiotics%5BTitle%5D)+AND+%22Chemico-Biological+Interactions%22%5BJournal%5D)">The human hepatoma HepaRG cells: A highly differentiated model for studies of liver metabolism and toxicity of xenobiotics.</a> Chemico-Biological Interactions. 168 (1), 66-73 (2007).</li>
<li>Wagner, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+dynamic+multi-organ-chip+for+long-term+cultivation+and+substance+testing+proven+by+3D+human+liver+and+skin+tissue+co-culture%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+on+a+Chip%22%5BJournal%5D)">A dynamic multi-organ-chip for long-term cultivation and substance testing proven by 3D human liver and skin tissue co-culture.</a> Lab on a Chip. 13 (18), 3538-3547 (2013).</li>
<li>Forrest, J. A. H., Clements, J. A., Prescott, L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+Pharmacokinetics+of+Paracetamol%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Pharmacokinetics%22%5BJournal%5D)">Clinical Pharmacokinetics of Paracetamol.</a> Clinical Pharmacokinetics. 7 (2), 93-107 (1982).</li>
<li>Dollery, C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDollery%2C+C+%22Therapeutic+Drugs%22">Therapeutic Drugs</a>. , Churchill Livingstone. London. (1999).</li>
<li>Food and Drug Administration Guidance for Industry: Bioanalytical method validation. U.S. Department of Health and Human Services. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.labcompliance.de/documents/FDA/FDA-Others/Laboratory/f-507-bioanalytical-4252fnl.pdf">http://www.labcompliance.de/documents/FDA/FDA-Others/Laboratory/f-507-bioanalytical-4252fnl.pdf</a> (2013).</li>
<li>Shah, V. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioanalytical+method+validation-a+revisit+with+a+decade+of+progress%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutical+research%22%5BJournal%5D)">Bioanalytical method validation-a revisit with a decade of progress.</a> Pharmaceutical research. 17 (12), 1551-1557 (2000).</li>
<li>Marin, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shp2+negatively+regulates+growth+in+cardiomyocytes+by+controlling+focal+adhesion+kinase%2Fsrc+and+mTOR+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Shp2 negatively regulates growth in cardiomyocytes by controlling focal adhesion kinase/src and mTOR pathways.</a> Circulation Research. 103 (8), 813-824 (2008).</li>
<li>Linkert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metadata+matters%3A+Access+to+image+data+in+the+real+world%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Metadata matters: Access to image data in the real world.</a> Journal of Cell Biology. 189 (5), 777-782 (2010).</li>
<li>OECD. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OECD+TG+491+-+Short+Time+Exposure+In+vitro+Test+Method+for+Identifying+i%29+Chemicals+Inducing+Serious+Eye+Damage+and+ii%29+Chemicals+Not+Requiring+Classification+for+Eye+Irritation+or+Serious+Eye+Damage%5BTitle%5D)+AND+%22OECD%22%5BJournal%5D)">OECD TG 491 - Short Time Exposure In vitro Test Method for Identifying i) Chemicals Inducing Serious Eye Damage and ii) Chemicals Not Requiring Classification for Eye Irritation or Serious Eye Damage.</a> OECD. 14, OECD guidelines for the testing of chemicals (2018).</li>
<li>Fernandes, M. B., Gonçalves, J. E., Tavares, L. C., Storpirtis, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Caco-2+cells+permeability+evaluation+of+nifuroxazide+derivatives+with+potential+activity+against+methicillin-resistant+Staphylococcus+aureus+%28MRSA%29%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Development+and+Industrial+Pharmacy%22%5BJournal%5D)">Caco-2 cells permeability evaluation of nifuroxazide derivatives with potential activity against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA).</a> Drug Development and Industrial Pharmacy. 41 (7), 1066-1072 (2015).</li>
<li>OECD. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OECD+TG+492+-+Reconstructed+human+Cornea-like+Epithelium+%28RhCE%29+test+method+for+identifying+chemicals+not+requiring+classification+and+labelling+for+eye+irritation+or+serious+eye+damage%5BTitle%5D)+AND+%22OECD%22%5BJournal%5D)">OECD TG 492 - Reconstructed human Cornea-like Epithelium (RhCE) test method for identifying chemicals not requiring classification and labelling for eye irritation or serious eye damage.</a> OECD. 35, OECD guidelines for the testing of chemicals (2018).</li>
<li>OECD, O. E. C. D. OECD. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OECD+TG+431+-+In+vitro+skin+corrosion%3A+reconstructed+human+epidermis+%28RHE%29+test+method%5BTitle%5D)+AND+%22OECD%22%5BJournal%5D)">OECD TG 431 - In vitro skin corrosion: reconstructed human epidermis (RHE) test method.</a> OECD. 8, OECD guidelines for the testing of chemicals (2016).</li>
<li>OECD. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OECD+TG+439+-+In+vitro+Skin+Irritation%3A+Reconstructed+Human+Epidermis+Test+Method%5BTitle%5D)+AND+%22OECD%22%5BJournal%5D)">OECD TG 439 - In vitro Skin Irritation: Reconstructed Human Epidermis Test Method.</a> OECD. 21, OECD guidelines for the testing of chemicals (2015).</li>
<li>Marin, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acetaminophen+absorption+and+metabolism+in+an+intestine%2Fliver+microphysiological+system%5BTitle%5D)+AND+%22Chemico-Biological+Interactions%22%5BJournal%5D)">Acetaminophen absorption and metabolism in an intestine/liver microphysiological system.</a> Chemico-Biological Interactions. 299, 59-76 (2019).</li>
<li>Maass, C., Stokes, C. L., Griffith, L. G., Cirit, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-functional+scaling+methodology+for+translational+pharmacokinetic+and+pharmacodynamic+applications+using+integrated+microphysiological+systems+%28MPS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Integrative+Biology+%28United+Kingdom%29%22%5BJournal%5D)">Multi-functional scaling methodology for translational pharmacokinetic and pharmacodynamic applications using integrated microphysiological systems (MPS).</a> Integrative Biology (United Kingdom). 9 (4), 290-302 (2017).</li>
<li>Sung, J. H., Wang, Y., Shuler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strategies+for+using+mathematical+modeling+approaches+to+design+and+interpret+multi-organ+microphysiological+systems+%28MPS%29%5BTitle%5D)+AND+%22APL+Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Strategies for using mathematical modeling approaches to design and interpret multi-organ microphysiological systems (MPS).</a> APL Bioengineering. 3 (2), 021501(2019).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Araştırmacı yeni ilaçların farmakolojik özelliklerinin doğru ve güvenilir bir şekilde değerlendirilmesi, aşağıdaki geliştirme adımlarında riski azaltmak için kritik öneme sahiptir. MPS, tahmin gücünü artırmayı ve klinik öncesi testlerle harcanan maliyetleri ve zamanı azaltmayı amaçlayan nispeten yeni bir teknolojidir. Grubumuz çoğunlukla kurşun optimizasyonu için gerekli olan farmakokinetik ve toksikolojik özelliklerin değerlendirilmesinde ilerlemektedir. İki odası olan ve iki organoidin entegrasyonuna olanak sağlayan 2-...

Genomik ve proteomik farklılıklar nedeniyle, hayvan modelleri çeşitli insan sonuçları için sınırlı tahmin değerine sahiptir. Ayrıca, onlar zaman alıcı, pahalı ve etik şüpheli1. MPS, tahmin gücünü artırmayı ve klinik öncesi testler ile harcanan maliyetleri ve zamanı azaltmayı amaçlayan nispeten yeni bir teknolojidir. Organoid-organoid iletişimi teşvik eden medya akışı altında organoidler (organların yapay mimetik fonksiyonel birimleri) yetiştiren mikroakışkan cihazlardır. İnsan hücrelerinden yapılan organoidler çeviri alakaartış 2,3,4. MPS'nin hayvan testlerinden daha iyi performans göstermesi beklenmektedir çünkü genetik olarak insandırlar ve dokular arasındaki etkileşimi özetlerler. Tam olarak işlevsel olduğunda, MPS daha anlamlı sonuçlar sağlayacaktır, daha yüksek hızda ve daha düşük maliyetler ve riskler4. Birçok grup çeşitli amaçlar için MPS geliştiriyor, özellikle hastalığın etkinliğini test etmek için hastalık modelleri.
Maruz kalma düzeyi ilaç etkinliği ve toksisite değerlendirmek için en kritik parametrelerden biridir5,6,7,8,9,10,11,12. MPS sistemik maruziyet taklit organoid entegrasyonu sağlar ve geleneksel 2D insan doku kültüründen daha iyi performans bekleniyor. Bu teknoloji önemli ölçüde bileşik bağırsak emilimi ve karaciğer metabolizması tahmin artırabilir4.
Bağırsak ve karaciğer insan eşdeğer modeli entegre bir MPS iyi bir başlangıç noktasıdır, ilaç biyoyararlanım ve sistemik maruz kalma bu iki organın merkezi rolü göz önüne alındığında13,14,15. APAP onun metaboliti karaciğer tarafından ağırlıklı olarak yapılır çünkü bir MPS okumak için cazip bir ilaçtır16,17.
2-OC iki farklı insan eşdeğer doku / organoidler mikrokanallar16ile birbirine kültür için uygun iki odalı mikroakışkan cihazdır. Bir ilacın in vitro insan oral/intravenöz yönetimini taklit etmek ve bağırsak ve karaciğer eşdeğerleri arasındaki çapraz konuşmanın APAP farmakokinetiği üzerine etkilerini değerlendirmek için, organoidlerin işlevselliği ve canlılığının yanı sıra, üç farklı MPS derlemesi gerçekleştirildi: (1) 2-OC cihazına entegre edilmiş Caco-2 + HT-29 hücre koculture içeren bir kültür eklemesine dayalı bir bağırsak eşdeğerinden oluşan bir "Bağırsak 2-OC MPS"; (2) 2-OC cihazına entegre edilmiş HepaRG + HHSteC (İnsan Hepatik Stellat Hücreleri) içeren karaciğer küresellerinden oluşan bir "Karaciğer 2-OC MPS"; ve (3) bir cihaz bölmesinde bağırsak eşdeğeri oluşan bir "Bağırsak / Karaciğer 2-OC MPS" mikroakışkan kanallar aracılığıyla medya akışı ile diğer karaciğer eşdeğeri ile iletişim.
Tüm tahliller statik altında yapıldı (hiçbir akış) ve dinamik (akış ile) mekanik uyaranların etkisi nedeniyle (sıkıştırma, germe, ve kesme) hücre canlılığı ve işlevleri18,19,20. Bu makalede, insan bağırsağı ve karaciğer eşdeğeri modelleri içeren 2-OC MPS'de APAP oral/intravenöz uygulama öykünme protokolü ve ilgili emilim/metabolizma ve toksikolojik analizler açıklanmaktadır.

<table><tbody><tr><td>1x DPBS</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>14190235</td><td>Kalsiyum yok, magnezyum yok</td></tr><tr><td>2-OC</td><td>TissUse GmbH</td><td></td><td>İki organlı çip</td></tr><tr><td>384 kuyulu Küresel Mikroplaka</td><td>Corning</td><td>3830</td><td>Siyah/Şeffaf, Yuvarlak Altlı, Ultra Düşük Ataşman</td></tr><tr><td>%4 Paraformaldehit</td><td></td><td></td><td>Asetaminofen hücresini sabitlemek için kullanın</td></tr><tr><td></td><td>Sigma Aldrich</td><td>A7085</td><td>MPS tahlilleri için kullanın</td></tr><tr><td>Asetonitril</td><td>Tedia</td><td></td><td>HPLC</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 phalloidin</td><td>Thermo Fisher Bilimsel</td><td></td><td>konfokal deney</td></tr><tr>gerçekleştirmek için kullanılır<td>Amonyum asetat</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td><td>HPLC gerçekleştirmek için kullanılır</td></tr><tr><td>Caco-2 hücreleri</td><td>Sigma Aldrich</td><td>86010202</td><td></td></tr><tr><td>Kakodilat tamponu</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hücre kültürü şişeleri</td><td>Sarstedt</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Konfokal Floresan mikroskobu</td><td>Leica</td><td>DMI6000</td><td></td></tr><tr><td>Kriyostat</td><td>Leica</td><td>CM1950</td><td></td></tr><tr><td>DMEM yüksek glikoz</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>12800017</td><td>Takviyeleri ekleyin:% 10 fetal sığır serumu, mL penisilin başına 100 birim, 100 ve mikro; g/mL streptomisin ve %1 esansiyel olmayan amino asitler</td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D4540</td><td>HepaRG ortamına %2 ekleyin</td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Sentezi Fetal</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sığır Serumu</td><td>Thermo Fisher Bilimsel</td><td>12657029</td><td></td></tr><tr><td>Donma ortamı OCT</td><td>Tissue-Tek</td><td></td><td>Doku-Tek&reg; O.C.T. &ticaret; Bileşik, suda çözünür glikoller ve reçinelerin bir formülasyonudur ve -10 ° C sıcaklıklarda kriyostat kesitleme için uygun bir numune matrisi sağlar; C ve altı.</td></tr><tr><td>Hematoksilen & Eosin</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>HepaRG hücreleri</td><td>Biopredic International</td><td>HPR101</td><td>Farklılaşmamış hücreler</td></tr><tr><td>HHSTeC</td><td>ScienCell Araştırma Laboratuvarları</td><td>5300</td><td>Hücreler ve tüm kültür takviyeleri</td></tr><tr><td>Hoechst 33342</td><td></td><td></td><td>HCA deneyleri</td></tr><tr><td>HT-29 hücreleri</td><td>Sigma Aldrich</td><td>85061109</td><td></td></tr><tr><td>İnsan İnsülini</td><td>İnvitrojeni - Thermo Fisher Scientific</td><td>12585014</td><td></td></tr><tr><td>Hidrokortizon</td><td>Sigma Aldrich</td><td>H0888</td><td></td></tr><tr><td>İzopropanol</td><td>Merck</td><td>278475</td><td></td></tr><tr><td>Karnovsky' s fiksatif</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>L-glutamin</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A2916801</td><td></td></tr><tr><td>Luna C18 koruma sütunu SS</td><td>Phenomenex</td><td></td><td>HPLC</td></tr><tr><td>Mikroskobu</td> gerçekleştirmek için kullanılır <td>Leica</td><td>DMi4000</td><td></td></tr><tr><td>Mikrotom</td><td>Leica</td><td>RM2245</td><td></td></tr><tr><td>Millicell 0.4 & mikro; m gözenek boyutu ekler</td><td>Merck</td><td>PIHP01250</td><td></td></tr><tr><td>Millicell ERS-2 metre</td><td>Merck</td><td>MERS00002</td><td>TEER ölçümü için kullanılır</td></tr><tr><td>MitoTracker Deep Red</td><td></td><td></td><td>HCA deneyleri</td></tr><tr><td>MTT</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>M6494</td><td></td></tr><tr><td>MX3000P sistemi</td><td>Agilent Technologies</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Neubauer odası</td><td></td><td></td><td>Hücre sayma</td></tr><tr><td>Operetta Yüksek İçerikli Görüntüleme Sistemi</td><td>Perkin Elmer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Luciferin-IPA Promega Cat ile HCA P450-Glo CYP3A4 Testi</td><td></td> yapmak için kullanılır<td>.# V9001</td><td></td></tr><tr><td>Penisilin / Streptomisin</td><td>Thermo Fisher Bilimsel</td><td>15070063</td><td>Hücre kültürü</td></tr><tr><td>Permount</td><td>Thermo Fisher Bilimsel</td><td></td><td>Histoloji</td></tr><tr><td>Primerleri</td><td></td><td></td><td>RT-qPCR</td></tr><tr><td>PVDF membran</td><td>BioRad</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PVDF Şırınga filtresi</td><td></td><td></td><td>0.22 &mu; m gözenek boyutu</td></tr><tr><td>Ters fazlı Luna C18 sütunu</td><td>Phenomenex</td><td></td><td>HPLC</td></tr><tr><td>Çalkalayıcı (IKA VXR Basic Vibrax)</td> gerçekleştirmek için <td>kullanılırIKA Works GmbH & Co</td><td>2819000</td><td>MTT testini iyileştirmek için sferoidler için kullanılır</td></tr><tr><td>Yıldız Hücre Ortamı (STeC CM)</td><td>ScienCell</td><td>5301</td><td>STeC CM takviyeleri ekleyin</td></tr><tr><td>SuperScriptIITM Ters Transkriptaz</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SYBR Yeşil PCR Master Karışımı</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TRizol TM reaktifi</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td></td><td>Trizol, fenol ve guanidin izotiyosiyanatın monofazik bir çözeltisidir.</td></tr><tr><td>Tripsin / EDTA çözeltisi</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>R001100</td><td></td></tr><tr><td>Ultra düşük bağlantılı plakalar</td><td>Corning</td><td>CLS3471-24EA</td><td>6 kuyulu</td></tr><tr><td>Vectashield plus DAPI montaj ortamı</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Beyaz Opak 96 kuyulu Mikroplaka</td><td>PerkinHelmer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Geniş delikli uçlar</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Williams E</td><td>Pan Biotech</td><td>P04-29510</td><td>Takviye ekleyin:% 10 fetal sığır serumu, 2 mM L-glutamin, ml penisilin başına 100 birim, 100 ve mikro; g / mL streptomisin ve 5 &mikro; g/mL insan insülini</td></tr></tbody></table>

İlaç farmakokinetik ve toksikolojik değerlendirme için bir bağırsak/karaciğer mikrofizyolojik sistemi

An Intestine/Liver Microphysiological System for Drug Pharmacokinetic and Toxicological Assessment

Yakın zamanda tanıtılan mikrofizyolojik sistemlerin (MPS) insan organoidlerini yetiştiren, genetik olarak insan oldukları ve dokular arasındaki etkileşimi yeniden özetledikleri için ilaç geliştirme sürecinin klinik öncesi test aşamasında hayvanlardan daha iyi performans göstermesi beklenmektedir. Bu çalışmada, insan bağırsak bariyeri (Caco-2 ve HT-29 hücrelerinin ortak kültürü ile taklit) ve karaciğer eşdeğeri (farklılaştırılmış HepaRG hücreleri ve insan hepatik stellat hücrelerinden oluşan küresel ler tarafından taklit edilmiştir) bazı asetaminofen (APAP) farmakinetik (PK) ve toksik özellikleri değerlendirmek için iki organlı çip (2-OC) mikroakışkan cihaza entegre edilmiştir. MPS üç derlemeleri vardı: Bağırsak sadece 2-OC, Karaciğer sadece 2-OC, ve Bağırsak / Karaciğer 2-OC aynı ortam her iki organoidperile. PK değerlendirmeleri için, apap'ı bağırsak bariyerinin üzerinden (sözlü rotayı taklit) veya medyada (intravenöz rotayı taklit ederek) uyguladıktan sonra, amedia'ya sırasıyla 12 μM ve 2 μM dozladık. Ortam örnekleri ters fazlı yüksek basınçlı sıvı kromatografi (HPLC) ile analiz edildi. Organoidler gen ekspresyonu, TEER değerleri, protein ekspresyonu ve aktivitesi için analiz edildi ve daha sonra toplandı, düzeltildi ve bir dizi morfolojik değerlendirmeye sunuldu. MTT tekniği organoid canlılığı değerlendirmede iyi performans gösterdi, ancak yüksek içerik analizleri (HCA) APAP tedavisine yanıt olarak çok erken toksik olayları tespit edebildi. Medya akışının APAP emilimini önemli ölçüde etkilemediğini, ancak karaciğereşdeğerinin işlevselliğini önemli ölçüde iyileştirdiğini doğruladık. APAP insan bağırsak emilimi ve hepatik metabolizma MPS taklit edilebilir. MPS verileri ile silico modelleme arasındaki ilişki, in vitro yöntemlerin öngörülebilirliğini artırmak ve farmakokinetik ve toksikolojik çalışmalarda hayvan modellerinden daha iyi doğruluk sağlamak için büyük bir potansiyele sahiptir.

2-OC MPS PK APAP testleri gerçekleştirmek için, ilk adım insan bağırsağı ve karaciğer eşdeğerleri (organoidler) üretmektir. PK APAP tkalasına başlamadan önce 2-OC mikroakışkan cihaza(Şekil 1A) 24 saat entegre edilmiştir. Ertesi gün ortam değiştirilir ve model APAP'a maruz kalır. Şekil 1, 2-OC cihazının içine yerleştirilen bağırsak ve karaciğer eşdeğerlerini(Şekil 1B)ve APAP PK deney zaman dilimini(Şekil 1C)</str...

Biz asetaminofen (APAP) bağırsak ve karaciğer organoidleri ile bir mikrofizyolojik sistem (MPS) maruz. Bu makalede, MPS'de organoid üretim yöntemleri ve APAP farmakokinetik ve toksikolojik özellik değerlendirmeleri açıklanmaktadır. Ayrıca sonuçları doğrulamak için gerekli doku işlevselliği analizleri açıklar.

İlaç Farmakokinetik ve Toksikolojik Değerlendirme için Bir Bağırsak/Karaciğer Mikrofizyolojik Sistemi

The recently introduced microphysiological systems (MPS) cultivating human organoids are expected to perform better than animals in the preclinical tests ...

Mikrofizyolojik sistemler, farmakokinetik ve insan vücudunun toksikolojik tepkisini ilgi alanlarına özgü tedavilere taklit etme yeteneğine sahiptir. Mikrofizyolojik sistemler, in vitro yöntemlerin öngörülebilir gücünü artırabileceği ve farmakokinetik ve toksikolojik çalışmaların maliyetini ve süresini azaltabileceğinden hayvan testlerinin yerini alma potansiyeline sahiptir. Test maddesi uygulamasından 24 saat önce, William ES ortamının 800 mikrolitrelik aliquot'unu iki organ yongasının daha büyük ve küçük bölmeleri arasında bölüştürün ve hazırlanan 24 kuyu plakasındaki her bağırsak bariyerinden bazolateral ve apikal ortamı aspire edin.Steril forsepskullanarak, her iki organ yonga devresi başına bir kesici ucu daha büyük bölmeye entegre edin ve apikal tarafa 200 mikrolitre DMEMS ekleyin. Geniş delik ipuçları kullanarak, devre başına 20 karaciğer eşdeğerini iki organ çipinin daha küçük bölmesine entegre edin ve sistemi kontrol ünitesine bağlayın. Daha sonra kontrol ünitesini basınçlı hava beslemesine bağlayın ve basıncı yaklaşık olarak artı veya eksi 300 bara ve 0,3 Hertz pompalama frekansına ayarlayın.Ertesi gün 12 mikromolar konsantrasyonstok asetaminofen çözeltisi seyreltmek. Sistemdeki ortamı değiştirmek için, iki organ çipindeki bağırsak bariyerinden bazolateral ve apikal ortam aspire edin ve organoid bazolateral taraftaki büyük bölmeye 500 mikrolitre taze uygun kültür ortamı ve küçük bölmeye 300 mikrolitre ekleyin. Kabarcıklar kontrol ettikten sonra, bağırsak kültürünün apical tarafında 12 mikromolar asetaminofen çözeltisi 200 mikrolitre eklenmesi ile oral uygulama öykünmek ekler ve kontrol ünitesine mikrofizyolojik sistem bağlayın.Hem intestinal apikal hem de bazolateral kenarlardan ve belirtilen zaman noktalarında triplicate küçük bölmeden toplam hacmi toplamak. Tüm numuneler toplandığında, HPLC analizi için ilgili tüm parametreleri tabloda belirtildiği şekilde ayarlayın ve mobil fazı vakum altında 0,4 mikron membran filtresinden filtreleyin. Daha sonra numuneleri 0,22 mikron gözenek boyutunda PVDF şırınga filtresinden filtreleyin ve HPLC UV ölçümüne başlamadan önce numuneleri bir şişede saklayın.Organoid canlılığını değerlendirmek için, her çoğaltma dan tüm 20 küresel oidleri 96 kuyu plaka bireysel kuyulara aktarın ve hücre kültürü 24 kuyu plaka bireysel kuyular ekler aktarın. Doku eşdeğerlerini yıkama başına taze DPBS ile üç kez yıkayın ve her deneysel kuyuya mililitre Başına bir miligram lık MTT çözeltisine 300 mikrolitre ekleyin. Hücre kültürü kuluçka üç saat kuluçka sonra, bağırsak ve karaciğer eşdeğerleri MTT formazan ayıklamak için dört santigrat derecede bir gecede kuluçka için iyi başına 200 mikrolitre izopropanol ile MTT çözeltisi değiştirin.Ertesi sabah, 96 kuyu plaka uygun kuyuya her supernatant 200 mikrolitre aktarın ve negatif kontrol ile karşılaştırıldığında her zaman noktasının ortalama optik yoğunluğunu kullanarak MTT azaltmak için hücrelerin göreceli yeteneğini hesaplama sağlamak için 570 nanometre bir plaka okuyucu formazan okuyun. Örneklerin sitokimyasal ve histolojik analizi için, önce oda sıcaklığında 25 dakika boyunca 0,1 molar PBS'de %4 paraformaldehitte bağırsak ve karaciğer eşdeğerlerini düzeltin. Kuluçka sonunda, tetrameethylrhodamine izothiocyanate phalloidin Alexa Flor 647 phalloidin oda sıcaklığında bir saat boyunca bağırsak ve karaciğer eşdeğerleri boyama önce, yıkama başına 10 dakika PBS beş kez organoidler yıkayın.Kuluçka sonunda, sıvı nitrojen dokuları dondurma önce birkaç dakika için dondurucu ortama örnekleri aktarın. Daha sonra, 10 ila 12 mikron kalınlığında karaciğer küresel kriyo-kesitleri elde etmek ve konfokal floresan mikroskopi ile görüntüleme için DAPI ile montaj orta doku bölümleri monte etmek için bir kriyostat kullanın. Mitokondriyal ve nükleer boyama için, %5 karbondioksit içeren nemli bir atmosferde 37 derecede 15 ila 45 dakikalık bir kuluçka için numuneleri mitokondriyal boyama çözeltisi ile tamamen kapatın.Kuluçka sonunda, oda sıcaklığında 15 dakika boyunca PBS'de %2-4 paraformaldehit ile boyama çözeltisini dikkatlice değiştirin. Sabitlemeden sonra, numuneleri oda sıcaklığında 10 dakika boyunca nükleik asit boyama çözeltisi ile etiketlemeden önce hücreleri yıkama başına beş dakika boyunca taze PBS ile iki kez hafifçe durulayın. Kuluçka sonunda, numuneleri ışıktan korunan PBS'de üç, beş dakikalık yıkamalarla yıkayın ve uygun filtre setleri ile floresan mikroskoptaki mitokondriyal leke ifade eden hücrelerin sayısının ölçülmesini kolaylaştırmak için nükleik asit lekesini kullanın.İnsan bağırsak bariyerini ve karaciğer eşdeğerinin iki organ çipi mikroakışkan cihazına entegre edilmesi, ilgi çekici tedavilerin farmakokinetik ve toksikolojik özelliklerinin değerlendirilmesine olanak sağlar. Tedaviden sonra, medya örnekleri HPLC ile analiz edilebilir. Organoidler gen ekspresyonu, trans-epitel elektriksel direnç değerleri, protein ekspresyonu ve aktivitesi ve morfolojik özellikleri açısından analiz edilebilir.MTT analizi organoid canlılığı değerlendirmek için yapılabilir, yanı sıra asetaminofen tedavisine yanıt olarak çok erken toksik olayları tespit etmek için. Medya akışı önemli ölçüde asetaminofen emilimini etkilemez, önemli ölçüde karaciğer eşdeğer işlevselliğini artırır ise, insan bağırsak asetaminofen emilimi ve hepatik metabolizma bu mikrofizyolojik sistemde taklit edilebilir gösteren. Mikrofizyolojik sistemler, insan fizyolojisini daha iyi taklit ettikleri için ilaç geliştirme ve keşifteki hayvan modellerinin yerini alabilen ve daha yüksek hızda ilaç gelişimini teşvik etmek ve risk ve karmaşıklığa daha düşük maliyetle teşvik etmek için kullanılabilir.

an-intestineliver-microphysiological-system-for-drug-pharmacokinetic

Research

JoVE Journal

Chemistry

Kimya

Burada, sıçanlarda mezenterik lenf kanalını kanüle etmek için bir tekniği tarif ediyoruz, bu da bağırsak doğumunu takiben lenfatik sistem yoluyla lipid ve ilaç taşınmasının nicelikini sağlar. Teknik, mezenterik lenf konsantrasyonlarını ve/veya sıvının, bağışıklık hücrelerinin, peptitlerin, proteinlerin ve lipofilik moleküllerin taşınmasını değerlendirmek için uyarlanabilir.

Mezenterik Lenf Kanal Kanüllü Rat Modeli: Bağırsak Lenfatik İlaç Ulaştırma Değerlendirilmesine Uygulaması

Burada, birincil hücreleri, doku modellerini ve punch biyopsilerini 28 güne kadar mikroakışkan çok organlı bir çipte kokültür yapmak için bir protokol sunuyoruz. İnsan dermal mikrovasküler endotel hücreleri, karaciğer agregatları ve deri biyopsileri ortak bir besiyeri dolaşımında başarılı bir şekilde birleştirildi.

Çok organ Chip - Uzun vadeli Çok doku kokültürü için mikroakışkan Platformu

In vitro sistemlerin Metabolik yetkinlik ilaç ve toksik maddelerin biyotransformasyonu ve dışa atılması için önemli bir gereksinimdir. Bu protokol, biz Hücre kültürlerinde metabolizma faz değerlendirmek için referans metabolik sondaları uygulanmasını açıklar.

Kütle Spektrometre ve lüminojenik tabanlı Yaklaşımlar Faz I Metabolik Yetkinlik ait Characterize<em&gt; İn Vitro</em&gt; Hücre Kültürleri

Erişimi besinler, microbiota metabolitleri ve dolaşım için ilaçlar, gut-kan bariyerini (GBB) tarafından denetlenir. Biz hangi sık kullanılan dolaylı yöntemler aksine, karaciğer ve böbrek işlevleri tarafından etkilenmez neredeyse GBB geçirgenliği vivo içindeölçmek için doğrudan bir yöntem açıklanmaktadır.

Gut-kan bariyerini ve karaciğer metabolizması Microbiota ürünlerin değerlendirilmesi için In Vivo yöntemi

Bu prosedür, hem akut hem de uzun süreli, tekrarlanan doz rejimleri üzerinde nanomalzeme maruziyetleri ile ilişkili genotoksik tehlikelerin fizyolojik olarak daha ilgili bir değerlendirmesini sağlayabilen ileri 3D hepatik kültürlerin in vitro geliştirilmesi için kullanılmak üzere kurulmuştur.

Uzun Süreli Nanomalzeme Maruziyetini Takiben İn vitro Genotoksisite Testi için Gelişmiş 3D Karaciğer Modelleri

İlaca bağlı karaciğer hasarı (DILI) ilaç yetmezliğinin önemli bir nedenidir. Bir karaciğer mikrofizyolojik sistemi (MPS) kullanarak bir bileşiğin DILI sorumluluğunu doğru bir şekilde tahmin etmek için bir protokol geliştirilmiştir. Karaciğer modeli, tedaviye hücresel yanıtları değerlendirmek için primer hepatik hücrelerin kokültürüne ve translasyonel olarak ilgili son noktalara sahiptir.

İlaca Bağlı Karaciğer Toksisitesini In Vitro Olarak Değerlendirmek için İnsan Karaciğer Mikrofizyolojik Sistemi

Biyopsi kaynaklı intestinal organoidler ve çip üzerinde organ teknolojileri, bölgeye özgü bağırsak işlevselliğini özetlemek için mikrofizyolojik bir platformda birleştirilir.

Bağırsak Bölgesine Özgü İşlevselliği Modellemek için İnsan Organoidlerini ve Çip Üzerinde Organ Teknolojisini Birleştirme

Son teknik gelişmeler, ilaç metabolizması ve toksisite uygulamaları için bir in vitro platformun ölçekli üretimini mümkün kılmıştır. Tamamen insanlardan oluşan bir 2D+ hepatik sistem (TV2D+), geleneksel iki boyutlu kültür yöntemlerini kullanarak fizyolojik olarak ilgili sonuçlar sağlar. Bu protokol, sistemin kurulumu, bakımı ve uygulanmasında son kullanıcıları destekleyecektir.

İlaç Geliştirme Uygulamaları için Tüm İnsanlardan Oluşan Bir Hepatik Kültür Sistemi

Bu deneysel protokol, karaciğer lenfatik ve damar drenajının doğrudan ve nicel olarak değerlendirilmesini sağlayan karaciğer lenf kanalı kanülasyonlu bir fare modelini tanımlar. Model, karaciğer taşıması, metabolizması ve bağışıklık sinyalini incelemek için karaciğer lenf ve sistemik kanın eşzamanlı örneklenmesine olanak tanır ve ilaç farmakokinetiği ile karaciğer-spesifik biyolojinin çalışmalarını destekler.

Hemefir Taşıma Yollarının Eşzamanlı Lenfatik ve Kan Damarları Örneklemesi Yoluyla Değerlendirilmesi İçin Kapsamlı Fare Modeli

Bu protokolün amacı, bir kök hücre hedef arama faktörü olan SDF-1α'yı dekstran sülfat-kitosan nanopartiküllerine dahil etmektir.  Elde edilen parçacıklar, boyutları ve zeta potansiyellerinin yanı sıra nanoparçacıklardan SDF-1α'nın içeriği, aktivitesi ve in vitro salım hızı için ölçülür.

SDF-1α-Kitosan-Dekstran Sülfat nano partiküllerin hazırlanması ve Karakterizasyonu

Keşfedin bağırsak/karaciğer mikrofizyolojik sisteminde asetaminofenin farmakokinetik ve toksikolojik özelliklerini değerlendirmeyi. Bu yöntem, ilaç metabolizmasını ve toksisitesini in vitro koşullarda insan fizyolojisini taklit ederek araştırmacılara hayvan deneylerine olan bağımlılığı azaltma imkanı sunar.

İlaç Farmakokinetik ve Toksikolojik Değerlendirme için Bir Bağırsak/Karaciğer Mikrofizyolojik Sistemi

Daha fazla video keşfet