Name: Serbest Yüzme Balık hareketli Tetrodes tarafından Nöronların Kablosuz Elektrofizyolojik Kayıt (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-11-26T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 14 s
Description: Öğrenin serbest yüzen balıklarda hareketli tetrod kullanarak kablosuz ekstraselüler nöral kayıt yöntemini. Bu su geçirmez cihaz doğal davranışlar sırasında gerçek zamanlı sinir aktivitesi izlemeyi mümkün kılar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz Nachum Ulanovsky ve Ulanovsky laboratuvar üyeleri için tüm yardım için müteşekkiriz. Ayrıca, tal Novoplansky-Tzur'a yardımcı teknik yardım için müteşekkiriz. İsRAİl Bİlİm VAKFI - İlk Program (hibe no. 281/15) ve Necef Ben-Gurion Üniversitesi Tarımsal, Biyolojik ve Bilişsel Robotik İnisiyatifi ile Helmsley HayırseverLik Vakfı'nın mali desteğini takdir ediyoruz.

Tüm cerrahi prosedürler, hayvan refahı ile ilgili yerel etik komiteler tarafından onaylanmalıdır (örn. IACUC).
1. Microdrive Konut İnşaatı
<ol><li>Gövdeyi oluşturmak için, testere kullanarak 19 mm x 29 mm x 1 mm plakaya 1 mm genişliğinde pirinç plaka kesin. Kenarına dik uzun kenarların her birinde iki adet 5,5 mm yarık kesin, böylece her yarık dar kenarlardan 6,5 mm uzaktadır(Şekil 2A).</li>
	<li>Pliers kullanarak, uzun kenarları nda kisitler arasındaki alanı içe doğru katlayın, sonra gövde elde etmek için alt kısmı içe ve üst tarafı dışa doğru katlayın(Şekil 2B,C).</li>
	<li>3 mm'lik matkap ucu kullanarak, mikrosürücü gövdesindeki vidalar için delikler edin. NOT: Bu delikler daha sonra gövdeyi logger kutusuna takmak için kullanılacaktır (Şekil 2D).</li>
	<li>Konutun yanlarında lehim.</li>
	<li>İnce dairesel bir dosya kullanarak, gövdenin alt kısmında küçük, 1,5 mm yarıçap, yarım daire yarık(Şekil 2E)oluşturur. NOT: Bu daha sonra elektrotlar kılavuzu için paslanmaz çelik tüp eklemek için kullanılacaktır.</li>
	<li>Tetrodes(Şekil 2F)için gövde arkasında bir delik yapmak için 1 mm matkap ucu kullanın. NOT: Konut bir 3D modeli Ek konut.stl dosyasındabulunur.</li>
</ol>2. Microdrive İnşaat
<ol><li>Bir kesici kullanarak, tek bir satır erkek pin üstbilgi şeritten üç iğneli bir parça yıkmak(Şekil 1H). Eğeriler kullanarak, orta pimi çekin.</li>
	<li>Bir kesici kullanarak, kalan pimleri 10 mm uzunluğa (vida uzunluğundan 2 mm daha az) kesin. Başka bir olasılık daha uzun bir vida kullanmaktır (bkz. adım 2.4).</li>
	<li>Orta pim deliğinden #65 bir matkap ucu kullanarak bir delik aç. 00−99 musluğu kullanarak bir iplik delin.</li>
	<li>Mikro sürücüyü ve pirinç plakaları (7,5 mm x 2,5 mm x 0,6 mm, bkz. Ek Şekil 4)pirinç plakalar iğnelere dokunuyor. Bir vida (#00-90 yuvarlak kafa, 12 mm, pirinç) ilk pirinç plaka ile, sonra pin başlık iplik ve ikinci pirinç plaka ile takın. Son olarak, vida üzerine bir somun yerleştirin ve yavaşça monte microdrive sıkın.</li>
	<li>Pirinç plakalar ile birlikte pimleri lehim ve vida ucu ile somun.</li>
	<li>Lehim mikrosürücü muhafaza içine microdrive dört noktada microdrive pirinç plakalar tarafında.</li>
	<li>Keskin uçlardan kaçınmak için bir paslanmaz çelik boruyu 6 mm uzunluğunda, iç çapı 1,5 mm olan bir paslanmaz çelik boruyu ve 3 mm uzunluğunda, iç çapı 1,2 mm. Olan tüplerin uçlarını parlat.</li>
	<li>Epoksi kullanarak mikrosürücü gövdesinin altındaki küçük yarım daire yarıkiçin 6 mm uzunluğundaki tüpü yapıştırın. 3 mm uzunluğundaki paslanmaz çeliği pim başlığına yapıştırın, gövdeüzerinde 6 mm uzunluğunda tüple sıralayın.</li>
	<li>0,64 mm çapında iki 5 cm uzunluğunda silikon tüp segmenti ve 0,250 mm çapında bir 5 cm uzunluğunda poliimid tüp kesin.</li>
	<li>İki paslanmaz çelik boruiçine üç tüp takın. Tüpleri, siyanoakrilat tutkal kullanarak pim başlığına bağlı paslanmaz çelik boruya yapıştırın. Mikro sürücüyü tamamen yukarı vidalayın ve iki çelik tüpün üst ve alt kısmından fazla boruyu kesin. NOT: Gövdeli mikrosürücü kullanıma hazırdır (Şekil 1C).</li>
</ol>3. Tetrode Dizisinin Hazırlanması
<ol><li>Her tetrod üzerinde dört elektrot içeren iki tetrode bir implant imal etmek için, her biri 12 cm uzunluğunda, Formvar yalıtımlı, 25 μm çapındaki tungsten telden sekiz tel hazırlayın. NOT: Aynı tasarım dört tetrode barındırabilir.</li>
	<li>Mikroskop altında 16 kanallı elektrot arayüz kartı (EIB-16) PCB (Bkz. Malzeme Tablosu)için bir tutucu yerleştirin.</li>
	<li>Yumuşak uçlu bir cızırtı ve çakmak kullanarak, bir taraftaki sekiz telin her birinin kaplamasını alev kullanarak çıkarın. NOT: Bu, kablonun daha sonra PCB konektörüne düzgün bir şekilde bağlandığından emin olmak içindir.</li>
	<li>EIB-16'daki deliklerden birine bir tel itin ve deliği kapladı. Bir iğne yerleştirin ve pliers kullanarak basın. Pim ile telin kaplamasız tarafı arasındaki direnci ölçerek bağlantıyı kontrol edin. NOT: Direniş onlarca Ohm'un emrinde.</li>
	<li>Adım 3.4'ün tüm sekiz kablosuyla tekrarlayın.</li>
	<li>Her telin ucundaki koli bandı kullanarak dört telden oluşan iki grubu bantlayın. NOT: Her grup daha sonra bir tetrode oluşturmak için birbirine yapıştırılır.</li>
	<li>50 μm çapında 12 cm uzunluğunda tungsten tel bir parça kesin. EIB-16 bağlantılarından birine bağlayın. NOT: Bu tel referans elektrodu olarak hizmet verecek.</li>
	<li>Kayıt kaydedici için zemin olarak hizmet verecek bir 75 μm çapında 12 cm uzunluğunda iki çıplak gümüş teller kesin. EIB-16'daki yer bağlantısına iki kablole.</li>
	<li>EIB-16'yı motorlu bir tornalama cihazının üzerinde tutun ve dört kablodan oluşan bir grubun koli bandı ucunu motorlu alet cihazına yerleştirin. Saat yönünde 130 mermi uygulayın ve ardından 20 saat yönünün tersine dönüşler uygulayın. Tetrode kapsayacak şekilde siyanoakrilat tutkal uygulayın.</li>
	<li>Yapıştırıcının tedavi etmesini bekle. Tetrode'u koli bandına yakın kesin.</li>
	<li>İkinci tetrode 3.9 ve 3.10 adımlarını tekrarlayın. NOT: Bu bitmiş iki-tetrode dizi üretir (Şekil 1D).</li>
</ol>4. İmplantın Montajı
<ol><li>Mikro sürücüyü tamamen aşağı yasla.</li>
	<li>1 x 3M Phillips yuvarlak kafa vidaları kullanarak EIB-16'yı PVC plakaya takın.</li>
	<li>Yumuşak uçlu cımbızları kullanarak, tüm tetrode'ları ve telleri logger kutusunun kapağının önündeki delikten çekin.</li>
	<li>2 x 6M Phillips düz kafa vidalarını kullanarak PVC plakayı logger kutusu kapağına takın. EIB-16 konektörünü doğru yönlendirmede tutun, böylece kaydedici EIB-16'ya monte edilebilir. Kaydedilen sinyaldeki hareket yapıtlarını önlemek için EIB-16'nın yerinde sabit olduğundan emin olun.</li>
	<li>Epoksi kullanarak telleri kutuya kapatın. Birincil sızdırmazlık daha sonra oda sıcaklığında vulkanizasyon (RTV) tarafından yapılacaktır, çünkü mümkün olduğunca az uygulayın.</li>
	<li>2 mm vida kullanarak mikrosürücü gövdesini logger kutusu kapağına takın.</li>
	<li>Tetrode'ları ve tüm telleri mikrosürücü gövdesinin arka yerindeki delikten geçirin. Tetrode'ları mikrosürücüdeki iki silikon tüpten geçirin. Mikrosürücüdeki poliimid tüpten 50 μm tungsten teli geçirin.</li>
	<li>Hareket mikrosürücü ile tutarlı olduğundan emin olmak için, tüplerin üst ucuna siyanoakrilat tutkal uygulayarak tüplere tetrodes ve teller tutkal. Mikro sürücüyü en üste kadar vidala.</li>
	<li>Hareketi önlemek için mikrosürücü gövdesiiçindeki açıkta kalan tetrode ve tellere yumuşak petrol (Bkz. Malzeme Tablosu)uygulayın.</li>
	<li>Isıtmalı jilet kullanarak 12 mm x 14,5 mm Petri kabının alt pencerelerini kesin. Epoksi ile mikrosürücü gövdesinin önüne pencereyi takın. Yer kablolarını pencerenin dışında tut.</li>
	<li>Logger kutusu kapağı ve microdrive muhafaza arasında maruz tetrodes ve tellerE RTV kaplama uygulayın.</li>
	<li>RTV tedavi edildikten sonra, içinde küçük bir ağırlık ile kutuyu kapatın ve kutuya su sızıntısı olmadığından emin olmak için bir gecede suya batırın.</li>
	<li>Keskin makas kullanarak tetrodes ve referans tel istenilen uzunlukta kesin.</li>
	<li>İşaretli ekstrüde polistiren köpüğü kutuya takın (Bkz. Malzemeler Tablosu). Bir su banyosuna batırıldığında yüzdürme sinin dengelenmesi için boyutunu ayarlayın.</li>
	<li>Tetrode uçlarını platin siyah çözeltiye batırın ve elektrotları kaplamak ve elektrotların empedansını istediğiniz gibi ayarlamak için doğru akım (-0,2 μA) kullanın. Kaplama ve empedans ölçümleri için çok elektrotlu empedans test eden (Bkz. Malzeme Tablosu)kullanın. NOT: Japon balığı pallium, 40 kOhm bir değer en iyisidir. Uygulamaya bağlı olarak, elektrot empedansı platin siyah kaplama değiştirilerek ayarlanabilir10,11.</li>
</ol>5. Anestezi Hazırlama — %1 MS-222 Stok Çözeltisi
DİkKAT: Anestezi hazırlığı toz MS-222, bir karsinojen kullanımını içerir. Bu nedenle, adımlar 5.2 ve 5.3 eldiven kullanılarak kimyasal bir başlık yapılmalıdır.
<ol><li>100 mL'den fazla su içerebilen bir tüpe 100 mL su ekleyin.</li>
	<li>Kimyasal bir başlık, bir ölçekte tek kullanımlık bir ağırlık plakası yerleştirin. Bir spatula kullanarak MS-222 toz 1 g ekleyin, sonra tüp için toz ekleyin.</li>
	<li>Tüpü iyice sallayın. NOT: Sıvı formda, MS-222 eldiven giyen kimyasal başlık dışında kullanılabilir ama bir maske gerektirmez.</li>
	<li>Tek kullanımlık bir ağırlık plakası bir ölçekte yerleştirin. Bir spatula kullanarak sodyum bikarbonat 2 g ekleyin, sonra tüp e toz ekleyin. Tüpü iyice sallayın.</li>
</ol>6. Balık Kafatası Hazırlama
NOT: Bu aşamada, balık implant cerrahisi için hazırdır. Ameliyattan önce, tüm bileşenlerin ve malzemelerin uygun prosedürlerle sterilize edildiğinden emin olun. Bu adım için, su u şeklinde balık tutucu bir dışarı gereklidir. Bu protokolde, kuyruk uzun japon balığı kuyruk 15 cm baş uyan bir alüminyum tutucu kullanılır. Bu sistem, solungaçları oksijenli suyla perfüzyonyaparken balığı sudan uzak tutar. Ayrıntılar için Bkz. Vinepinsky ve ark.8.
<ol><li>Balık uyuyana kadar 20 dakika boyunca% 0.02 MS-222 su banyosu balık yerleştirin.</li>
	<li>Steril eldivenler kullanarak, balığı sudan çıkarıp tutucuya yerleştirin. NOT: Balığı perfüzyon oksijenli su% 0.02 konsantrasyonda MS-222 içerir, böylece balık ameliyat sırasında anestezi kalır.</li>
	<li>Steril bir spatula kullanarak, 10 dakika için ameliyat için belirlenen yerin üzerinde deriüzerinde lidokain% 5 macun uygulayın, sonra lidokain kaldırın. NOT: Belirli beyin bölgesini hedeflemek için uygun bir beyin atlasına danışın.</li>
	<li>Steril 15 bıçak neşter kullanarak, implant bölgesinde kafatası üzerinde deri kaldırın.</li>
	<li>0,7 mm matkap uçları ile bir diş matkap kullanarak, kafatasında 4 delik delin. Her deliğe 1 mm'lik bir vida (3 mm uzunluğunda) yerleştirin ve vidayı takmadan önce deliklere siyanoakrilat tutkalını uygulayın.</li>
	<li>Bir diş yanık kullanarak, vidalar ve maruz kafatası nın çevre üzerinde diş çimentosu uygulayın.</li>
	<li>Diş matkabı nı kullanarak, kafatasında beyin bölgesinin üzerinde 5 mm çapında bir delik aç. Kafatası ve beyin arasındaki yağ dokusunu çıkarın ve ince cımbız ve yumuşak doku kağıt kullanarak beyin bölgesi hedef ortaya çıkarmak. Kafatasının altındaki büyük kan damarlarına zarar vermemeye dikkat edin. NOT: Bu aşamanın sonunda, balık sonda implant için hazırlanmıştır. Burada yalnızca bu protokole özgü ana adımlar açıklanmıştır. Çeşitli ameliyat sonrası prosedürler (örneğin, hayvanın sağlığı ve ameliyat araçlarının ve alanının sterilizasyonu hakkında ayrıntılı belgeler) balık veya küçük hayvanlarla yapılan tüm ameliyatlar için geçerli olduğu için sunulmaz ve tartışılır.</li>
</ol>7. Probun İmplantı
NOT: Protokolün son basamanı tamamlamak için, beyne yerleştirilirken implantı yerinde tutabilen bir manipülatöre ihtiyaç vardır.
<ol><li>Balık beynine doğru işaret tetrodes ile logger kutusu kapağı tutmak için manipülatör kullanın.</li>
	<li>Referans elektrodu bükün ki, tetrodelar beyne indirildiğinde, referans beynin dışında kalır.</li>
	<li>Kafatasına sığacak şekilde kes. İsteğe bağlı olarak, bir zemin telini kafatası vidalarından birine bağlayın.</li>
	<li>Mikrosürücü gövdesinin alt kısmı kafatasına yakınken elektrotlar beyne sokulacak şekilde implantı düşürün.</li>
	<li>Gövde ve en yakın kafatası vidası arasında diş çimentosu küçük bir miktar uygulayarak kafatası implant takmaya başlayın.</li>
	<li>Diş çimentosu ilk bölümü tedavi edildikten sonra, diş çimentosu uygulayın ve kafatası ve tüm maruz kafatası üzerinde delik kapatın. NOT: Genellikle diş çimentouygulamaları birkaç tur tüm maruz kafatası kapsayacak şekilde gereklidir.</li>
	<li>Logger'ı ve pili kutuya töşekilde kurun ve kutuyu tüm vidalarla kapatın.</li>
	<li>Deneylerde kullanılan balık türüne göre antibiyotik ve lokal ağrı kesici uygulayın.</li>
	<li>Balık uyanmaya başlayana kadar balığın solungaçlarını tatlı suyla yıkayın. Balığı tutucudan çıkarın ve kendi tankına geri yerleştirin. NOT: Balık ameliyattan 60 dakika sonra tamamen iyileşir.</li>
	<li>Balığın implantla serbestçe yüzep gelebildiğinden emin olun(Şekil 3, Ek Video 1). Gerekirse, balık kolayca dengeleyebilir şekilde logger kutusunun üzerinde ekstrüde polistiren köpük boyutunu yeniden.</li>
</ol>

<ol><li>Jacobson, M., Gaze, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Types+of+visual+response+from+single+units+in+the+optic+tectum+and+optic+nerve+of+the+goldfish%5BTitle%5D)+AND+%22Quarterly+Journal+of+Experimental+Physiology+and+Cognate+Medical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Types of visual response from single units in the optic tectum and optic nerve of the goldfish.</a> Quarterly Journal of Experimental Physiology and Cognate Medical Sciences. 49 (2), 199-209 (1964).</li>
<li>Ben-Tov, M., Donchin, O., Ben-Shahar, O., Segev, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pop-out+in+visual+search+of+moving+targets+in+the+archer+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Pop-out in visual search of moving targets in the archer fish.</a> Nature Communications. 6, 6476(2015).</li>
<li>Zottoli, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlation+of+the+startle+reflex+and+Mauthner+cell+auditory+responses+in+unrestrained+goldfish%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Correlation of the startle reflex and Mauthner cell auditory responses in unrestrained goldfish.</a> Journal of Experimental Biology. 66 (1), 243-254 (1977).</li>
<li>Canfield, J. G., Rose, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+Mauthner+neurons+during+prey+capture%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Physiology+A%22%5BJournal%5D)">Activation of Mauthner neurons during prey capture.</a> Journal of Comparative Physiology A. 172 (5), 611-618 (1993).</li>
<li>Canfield, J. G., Mizumori, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+chronic+neural+recording+in+the+telencephalon+of+freely+behaving+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Methods for chronic neural recording in the telencephalon of freely behaving fish.</a> Journal of Neuroscience Methods. 133 (1-2), 127-134 (2004).</li>
<li>Orger, M. B., de Polavieja, G. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+behavior%3A+opportunities+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Zebrafish behavior: opportunities and challenges.</a> Annual Review of Neuroscience. 40, 125-147 (2017).</li>
<li>Vanwalleghem, G. C., Ahrens, M. B., Scott, E. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrative+whole-brain+neuroscience+in+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Integrative whole-brain neuroscience in larval zebrafish.</a> Current Opinion in Neurobiology. 50, 136-145 (2018).</li>
<li>Vinepinsky, E., Donchin, O., Segev, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wireless+electrophysiology+of+the+brain+of+freely+swimming+goldfish%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Wireless electrophysiology of the brain of freely swimming goldfish.</a> Journal of Neuroscience Methods. 278, 76-86 (2017).</li>
<li>Vandecasteele, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large-scale+recording+of+neurons+by+movable+silicon+probes+in+behaving+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22JoVE+%28Journal+of+Visualized+Experiments%29%22%5BJournal%5D)">Large-scale recording of neurons by movable silicon probes in behaving rodents.</a> JoVE (Journal of Visualized Experiments). (61), e3568(2012).</li>
<li>Ferguson, J. E., Boldt, C., Redish, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Creating+low-impedance+tetrodes+by+electroplating+with+additives%5BTitle%5D)+AND+%22Sensors+and+Actuators+A%3A+Physical%22%5BJournal%5D)">Creating low-impedance tetrodes by electroplating with additives.</a> Sensors and Actuators A: Physical. 156 (2), 388-393 (2009).</li>
<li>Arcot Desai, S., Rolston, J. D., Guo, L., Potter, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+impedance+of+implantable+microwire+multi-electrode+arrays+by+ultrasonic+electroplating+of+durable+platinum+black%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neuroengineering%22%5BJournal%5D)">Improving impedance of implantable microwire multi-electrode arrays by ultrasonic electroplating of durable platinum black.</a> Frontiers in Neuroengineering. 3, 5(2010).</li>
<li>Lewicki, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+methods+for+spike+sorting%3A+the+detection+and+classification+of+neural+action+potentials%5BTitle%5D)+AND+%22Network%3A+Computation+in+Neural+Systems%22%5BJournal%5D)">A review of methods for spike sorting: the detection and classification of neural action potentials.</a> Network: Computation in Neural Systems. 9 (4), R53-R78 (1998).</li>
<li>Teixeira, F. B., Freitas, P., Pessoa, L. M., Campos, R. L., Ricardo, M. Evaluation of IEEE 802.11 underwater networks operating at 700 MHz, 2.4 GHz and 5 GHz. Proceedings of the 10th International Conference on Underwater Networks & Systems. , Arlington, VA. (2015).</li>
<li>Sendra, S., Lloret, J., Rodrigues, J. J., Aguiar, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Underwater+wireless+communications+in+freshwater+at+2.4+GHz%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Communications+Letters%22%5BJournal%5D)">Underwater wireless communications in freshwater at 2.4 GHz.</a> IEEE Communications Letters. 17 (9), 1794-1797 (2013).</li>
<li>Lloret, J., Sendra, S., Ardid, M., Rodrigues, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Underwater+wireless+sensor+communications+in+the+2.4+GHz+ISM+frequency+band%5BTitle%5D)+AND+%22Sensors%22%5BJournal%5D)">Underwater wireless sensor communications in the 2.4 GHz ISM frequency band.</a> Sensors. 12 (4), 4237-4264 (2012).</li>
<li>Hoogerwerf, A. C., Wise, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+three-dimensional+microelectrode+array+for+chronic+neural+recording%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Transactions+on+Biomedical+Engineering%22%5BJournal%5D)">A three-dimensional microelectrode array for chronic neural recording.</a> IEEE Transactions on Biomedical Engineering. 41 (12), 1136-1146 (1994).</li>
<li>Harris, K. D., Quiroga, R. Q., Freeman, J., Smith, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+data+quality+in+neuronal+population+recordings%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Improving data quality in neuronal population recordings.</a> Nature Neuroscience. 19 (9), 1165(2016).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Bu protokol, serbestçe yüzen japon balığının telensefalonuna bir tetrode dizisi nin yer leştirilmesindeki adımları ayrıntılarıyla anlatır. Bu teknik, beyindeki tetrode pozisyonunu ayarlayabilen bir mikrosürücü ile birlikte 16 kanaldan elde edilen sinyalleri yükselten ve kaydeden bir sinir kaydedici uygular. Mikrosürücü, kaydı optimize etmek için beyindeki pozisyonu ayarlamayı mümkün kılar.
Bu protokol kolayca diğer beyin bölgelerinden kayıt için değiştirilebilir (benzer bir teknik kullanarak o...

Balık omurgalıların en büyük ve en çeşitli grubudur ve diğer omurgalılar gibi gezinme, sosyalleşme, uyku, avcılık gibi karmaşık bilişsel yetenekler sergilerler. Bununla birlikte, balık davranışlarını yöneten sinirsel mekanizmalar çoğunlukla bilinmemektedir.
Son birkaç on yıl içinde, hareketsiz balıkların hücre dışı kayıtları öncelikle davranış1,2sinirsel temelfarklı yönlerini araştırmak için uygulanmıştır. Bu teknik bazı duyu sistemleri için uygun olsa da, hareketsiz hayvanlarda imkansız olmasa da, davranışın nöral temelinin tüm spektrumunun araştırılması zordur. İlk gelişmeler bağlı yüzme balıkMauthnerhücrelerinden kayıt dahil 3,4. Ancak, Mauthner hücreleri orantısız büyük ve kaydedilen eylem potansiyeli genlikleri, hangi birkaç mV kadar yüksek gidebilirsiniz, kayıt kolaylaştırmak. Daha sonra, Canfield ve ark. balık telencephalon kaydetmek için bir tethered hayvan kullanırken kavram bir kanıtı açıklanan5. Balıkn nöral aktiviteyi kaydetmek için bir diğer yeni teknik kalsiyum görüntülemedir (Orger ve de Polavieja6ve Vanwalleghem ve ark.7tarafından yapılan yorumlara bakınız). Bu teknik zebra balığı larvaları ile kullanılmak üzere geliştirilmiştir çünkü larva evresinde deri ve kafatası saydamdır. Ancak, bu teknik geliştirmenin sonraki aşamalarında karmaşık davranışları incelemek için kullanılamaz.
Burada, serbestçe yüzen balıkların beyinlerinden hücre dışı nöral aktiviteyi kaydetmek için yeni bir teknik sıyoruz. Bu, Vinepinsky ve ark.8'deaçıklanan protokolün değiştirilmiş bir sürümüdür. Ana yenilik mümkün ameliyat sonrası elektrotların konumunu kontrol etmek için kılan bir mikrosürücü eklenmesidir. Bu teknik, bir mikrosürücü aracılığıyla nöral veri kaydedicisine bağlanan bir dizi tetrode kullanarak japon balıklarının telensefalonundan kayıt için tasarlanmıştır. Tüm kurulum kablosuz ve balığın kafatasına bağlı. Sistemin özgül ağırlığı, balığın serbestçe yüzmesini sağlayan küçük bir şamandıra ekleyerek suya özgü ağırlığa eşitlenir.
Teknik, sinyali bir dahili bellek aygıtında yükselten, sayısallaştıran ve depolayan bir nöral veri kaydedicisinin kullanımına dayanır. Logger telemetri sistemi başlatmak ve kayıtları durdurmak için kullanılır ve video kamera ile senkronizasyon için. Bu protokolde, mikrosürücü ile birlikte su geçirmez bir kutuya gömülü 16 kanallı nöral logger kullanılır.
Mikrosürücü montajı iki ana bileşenden imal edilmiştir: mikrosürücünün kendisi ve mikrosürücü gövdesi(Şekil 1A,B). Gövde mikrosürücü ve tetrodes tutar ve aynı zamanda kafatası ve logger kutusu arasında çapa olarak hareket eder (Şekil 1C). PVC logger kutusu bir makine işlemi kullanılarak imal edilir ve bir O-halkası kullanılarak mühürlenir(Şekil 1E-G, ayrıca bkz. Ek Şekil 1, Ek Şekil 2, ve Üç boyutlu [3D] diyagramı için Ek Şekil 3). Bir ucunda, implantın ağırlığını dengelemek ve balıklara yüzdürme-nötr bir implant sağlamak için bir parça polistiren köpük logger kutusuna eklenir. Protokolde tanımlanan mikrosürücünün yapımı, Vandecasteele ve ark.9 tarafından sunulan prosedürü, mikrosürücüyü gövdeye takmak için yapılan bir değişiklikle takip eder(Şekil 1A). Tüm önemli adımlar sunulur.
Balık kafatasının hazırlanması için protokolde tanımlanan prosedür Vinepinsky ve ark.8'de sunulana benzer ve protokolde kısaca anlatılmaktadır. Ameliyattan bir gün sonra, balıklar normalde anestezinin etkilerinden tamamen kurtulur lar ve davranışsal deneylere hazırdırlar. Tetrode yerinin microdrive vidasının çevirilerek ayarlanabildiği unutulmamalıdır. Vida tam dönüş başına 300 μm'lik bir aralıktadır ve hedef beyin konumuna ulaşıncaya kadar 75 μm ilerleme önerilir. İlgi çekici belirli beyin bölgesini hedeflemek için uygun bir beyin atlasına danışılmalıdır. Bu balık pil veya bellek kartı değişimi için anestezi her zaman elektrot empedansı test etmek için tavsiye edilir.

<table><tbody><tr><td>0,7 mm yuvarlak matkap uçları</td><td></td><td></td><td>Matkapla uyumludur.</td></tr><tr><td>15 bıçaklı Neşter</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>16 kanallı PCB kartı</td><td>Neurlynx</td><td>EIB-16</td><td></td></tr><tr><td>1x3M yıldız düz başlı vidalar</td><td></td><td></td><td>Paslanmaz çelik. Herhangi bir tür.</td></tr><tr><td>1x3M yıldız yuvarlak başlı vidalar</td><td></td><td></td><td>Paslanmaz çelik. Herhangi bir tür.</td></tr><tr><td>27 cm x 19 cm x 1 mm pirinç plaka</td><td></td><td></td><td>Bkz. Şekil 2</td></tr><tr><td>2x6M yıldız düz başlı vidalar</td><td></td><td></td><td>Paslanmaz çelik. Herhangi bir tür.</td></tr><tr><td>3140 RTV kaplama</td><td>Dow Taçlandırma</td><td>2767996</td><td></td></tr><tr><td>75 & m Gümüş tel</td><td>A-M Sistemleri</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pirinç makine vidaları #00-90</td><td></td><td>947-1006</td><td></td></tr><tr><td>Pirinç plakalar 7,5 mm x 2,5 mm x 0,6 mm</td><td></td><td></td><td>Bir 3D çizim sağlanmıştır. Ek 1</td></tr><tr><td>Kaplamalı Tungsten tel 25 ve mikroya bakın; m</td><td>California İnce Tel Şirketi</td><td>5000160</td><td>Uygulamaya bağlı olarak, tetrodlar her türlü telden imal edilebilir. Popüler teller, daha düşük çaplarda bulunabilen nicrome telleridir (örn. A-M sistemleri, 762000)</td></tr> <tr><td>Kaplamalı Tungsten tel 50 ve mikro; m</td><td>Sistemleri</td><td>795500</td><td>Düşük empedanslı başka herhangi bir tel ile değiştirilebilir</td></tr><tr><td>Siyanoakrilik yapıştırıcı</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dental Burnisher</td><td>ComDent UK</td><td></td><td>Herhangi bir küçük steril paslanmaz hareketsiz alet yapacaktır.</td></tr><tr><td>Diş çimentosu - GCFujiPLUS</td><td>GC</td><td>431011</td><td>Diğer diş çimentoları da muhtemelen işe yarayacaktır, ancak başka hiç denemedik.</td></tr><tr><td>Diş matkabı veya oje matkabı</td><td></td><td></td><td>Diş matkapları pahalıdır, oje matkabı ucuz bir yedek olabilir.</td></tr><tr><td>Matkap ucu # 65</td><td></td><td>947-65</td><td></td></tr><tr><td>Hızlı kürlenen epoksi</td><td></td><td></td><td>Burada herhangi bir 5 dakikalık kürleme epoksisi kullanılabilir.</td></tr><tr><td>O-ring sızdırmazlıklı</td><td></td><td></td> logger kutusu <td>Bir 3D çizim sağlanır. Ek 1-3'e bakın. Kutu makine imalatı olmalıdır (3D yazıcı kullanmayın). Kaydedici üzerindeki gösterge LED'lerini görebilmek için şeffaf malzeme kullanın.</td></tr><tr><td>Motorlu tornalama cihazı</td><td></td><td></td><td>"Açık ephys" web sitesinde açıklandığı gibi özel olarak üretilmiştir. Ayrıca neurolynx'ten ("Tetrode Spinner 2.0") veya bulitten başka yollarla da satın alınabilir.</td></tr><tr><td>Mouselog-16 Nöral kaydedici</td><td>Deuteron Technologies Ltd</td><td></td><td>Piyasada aşağıdakiler de dahil olmak üzere birkaç nöral kaydedici bulunmaktadır: SpikeGadget (UH32 32 kanal) ve Alexei Vyssotski'nin Neurologger 2/2A/2B. Yüzer Strafor</td></tr><tr><td>MS-222</td><td>Sigma Aldrich</td><td>E10521</td><td>Ethtl 3-aminobenzoat metansülfonat %98</td></tr> <tr><td>Nano-Z kaplama</td><td>White Matter LLC</td><td></td> ile dengelenebildiğinden, ağırlığın önemli bir kontraint olmadığına dikkat edilmelidir<td>. Herhangi bir empedans ölçer kullanılabilir, örneğin IMP-1 / 6662 / 2788, BAK Elektronik.</td></tr><tr><td>PCB pinleri</td><td>Neurlynx</td><td>Neuralynx EIB Pimleri</td><td></td></tr><tr><td>Polimid boru 250 ve mikro; m</td><td>A-M Sistemleri</td><td>822000</td><td></td></tr><tr><td>Şarj edilebilir pil</td><td></td><td></td><td>3.7 Lipo pil, 370 mAh. Yaklaşık 6 saatlik kayıt tutar. Ağırlığı azaltmak veya kayıt süresini uzatmak için daha küçük veya daha büyük piller kullanılabilir.</td></tr><tr><td>Silikon boru 0,64 mm</td><td>A-M Sistemleri</td><td>806100</td><td></td></tr><tr><td>Paslanmaz çelik 1,5 mm</td><td>A-M Sistemleri</td><td>846000</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum Bikarbonat</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S9625</td><td></td></tr><tr><td>Musluk #00-90</td><td></td><td>947-1301</td><td></td></tr><tr><td>Vazelin</td><td></td><td></td><td>Burada her türlü yumuşak petrol cilt koruyucu kullanılabilir.</td></tr></tbody></table>

serbest yüzme balık hareketli tetrodes tarafından nöronların kablosuz elektrofizyolojik kayıt

Wireless Electrophysiological Recording of Neurons by Movable Tetrodes in Freely Swimming Fish

Balıkların davranışlarını yöneten sinirsel mekanizmalar çoğunlukla bilinmemekle birlikte, balıklar tüm omurgalıların çoğunluğunu oluşturur. Serbestçe hareket eden balıklardan beyin aktivitesini kaydetme yeteneği, balık davranışlarının sinirsel temelinde araştırmayı oldukça ilerletecektir. Ayrıca, beyindeki kayıt yerinin kesin kontrolü balık beynindeki bölgeler arasında eşgüdümlü nöral aktiviteyi incelemek için çok önemlidir. Burada, kayıt yerinin derinliğini kontrol ederken serbestçe yüzen balıkların beyninden kablosuz olarak kaydeden bir teknik salıyoruz. Sistem mikrosürücü kontrollü tetrodes tarafından kayıt konumunu ayarlayabilirsiniz yeni bir su uyumlu implant ile ilişkili bir nöral logger dayanmaktadır. Sistemin yetenekleri japon balığı nın telensefalon kayıtları ile gösterilmiştir.

Bir kayıt oturumu sırasında japon balığı, telensefalonundaki sinirsel aktivite kaydedilirken, kare su tankında serbestçe yüzdü. Bu deneylerin amacı, tek hücrelerin nöral aktivitesinin balığın davranışını nasıl belirlediğini incelemekti. Bunu yapmak için, spiking etkinliği kaydedilen verilerde tanımlanması gerekiyordu. Beyin aktivitesi kaydedilirken 31.250 Hz'de sayısallaştırıldı ve yüksek geçiş 300 Hz'de veri kaydedici tarafından filtrelendi. Daha sonra, çevrimdışı, sinyallere bant geçiş ...

Serbestçe yüzen japon balığının beyninden hücre dışı sinir selülasyon sinyallerini kaydetmek için yeni bir kablosuz teknik sunulmuştur. Kayıt cihazı iki tetrode, bir mikrosürücü, bir sinirsel veri kaydedici ve su geçirmez bir kasaoluşur. Veri kaydedicisi ve bağlayıcısı dışında tüm parçalar özel olarak üretilir.

Serbest Yüzme Balık hareketli Tetrodes tarafından Nöronların Kablosuz Elektrofizyolojik Kayıt

The neural mechanisms governing fish behavior remain mostly unknown, although fish constitute the majority of all vertebrates. The ability to record brain ...

Serbestçe yüzen balıkların beyninden hücre dışı sinirsel sinyali kaydetmek için yeni bir yöntem geliştirdik. Bu gün balığı davranışı sonunda nöron mekanizmaları çalışma için kapıyı açar. Bu yöntem geçerli ve su geçirmez ve bu nedenle balık su tankı serbestçe yüzerken kayıt sağlar.Buna ek olarak, kayıt konumu yerleşik mikro sürücü tarafından kontrol edilebilir. Laboratuvar teknisyenimiz Tal Zoor-Novoplansky bu prosedürü göstermeme yardım edecek. Konut inşa etmek için, bir milimetre tarafından 29 milimetre tarafından 19 milimetre boyutlarında bir pirinç plaka kullanın.Uzun kenarlarında iki 5.5 milimetrelik, kenarına dik. Klisler dar taraftan 6.5 milimetre uzakta olmalı. Pliers kullanarak, içe doğru uzun kenarlarında kisitler arasındaki alanı katlayın.Sonra gövde elde etmek için alt kısmı içe ve üst tarafı dışa doğru katlayın. Daha sonra, vidalar için mikro sürücü muhafaza delik yapmak ve gövde yanlarında lehim üç milimetre dereotu bit kullanın. 1,5 milimetre yarıçapı olan gövdenin alt kısmında küçük bir yarı dairesel yarık oluşturmak için ince bir dairesel dosya kullanın.Bir milimetre matkap bitkullanarak tetrodes için gövde arkasında bir delik yapmak. İlk olarak, tek bir satır erkek pin başlık şeritten üç iğneli parça kırmak için bir kesici kullanın. Eğerler kullanarak orta pimi çekin.Daha sonra, kalan pimleri 10 milimetre uzunluğunda kesmek için bir kesici kullanın. Orta iğne deliğinde bir delik açmak için 65 numaralı matkap ucu kullanın ve bir ipliği delmek için çift sıfır 99 musluğu kullanın. Mikro sürücüyü ve pirinç plakaları birleştirin.İlk pirinç plakadan, iğne başlığıip ikinci pirinç plakadan bir vida yerleştirin. Son olarak, vida üzerine bir somun yerleştirin ve yavaşça monte mikro sürücü sıkın. Pimleri pirinç plakalarla birlikte lehimle ve somunu vidaucuyla birlikte lehimle.Bundan sonra, lehim mikro sürücü muhafaza içine mikro sürücü muhafaza içine mikro sürücü pirinç plakalar tarafında dört noktada. Epoksi tutkal kullanarak mikro sürücü muhafaza altındaki küçük yarı dairesel yarık altı milimetre uzunluğunda paslanmaz çelik tüp. Üç milimetre uzunluğundaki paslanmaz çelik boruyu iğne başına yapıştırın, böylece gövdedeki altı milimetre uzunluğundaki tüple hizalanır.Hazırlanan silikon ve poliimid tüpleri iki paslanmaz çelik boruya yerleştirin ve pim başlığına bağlı paslanmaz çalma tüpüne yapıştırmak için siyanoakrilat tutkal kullanın. Daha sonra, mikro sürücüyü tamamen yukarı vidalayın ve iki çelik tüpün üst ve alt kısmından fazla boruyu kesin. Daha sonra, çapı 75 mikrometre olan iki çıplak gümüş teli 12 santimetre uzunluğa kadar kesin ve hem elektrot arayüz panosundaki zemin bağlantısına hem de kullanılmayan tüm kanallara lehimleyin.Hazırlanan tungsten kablolarından birini 16 kanallı elektrot arayüz panosunun deliklerinden birine itin. Deliğe bir iğne yerleştirin ve bir çift iğne ile bastırın. Bağlantı olup deyanağını kontrol etmek için pim ile kablonun kodsuz tarafı arasındaki direnci ölçün.Referans elektrot için bir 50 mikrometre tel de dahil olmak üzere hazırlanan tüm teller için bu işlemi tekrarlayın. Daha sonra elektrot kablolarını her biri dört telden oluşan iki gruba ayırın ve referans teli yalnız bırakarak her telin sonundaki koli bandı kullanarak bantlayın. Elektrot arayüz tahtasını motorlu bir tornalama cihazının üzerinde tutun ve koli bandı ucunu dört kablodan oluşan bir gruptan cihaza yerleştirin.Saat yönünde 130 mermi uygulayın ve ardından saat yönünün tersine 20 dönüş uygulayın. Sonra, tetrode kapsayacak şekilde siyanoakrilat tutkal uygulayın. Tutkal iyileştikten sonra, tetrode koli bandına yakın kesin.Bu döndürme, yapıştırma ve kesme işlemini diğer tetrode tekrarlayın. İlk olarak, iki milimetre vida ile logger kutusuna mikro sürücü muhafaza takın. Tetrode'ları ve referans elektrotları mikro tahrik gövdesinin arka sideki delikten geçirin.İplik iki silikon tüpler aracılığıyla tetrodes ve iplik 50 mikrometre tungsten tel poliimid tüp ile. Vida mikro dalış tüm yol aşağı ve tüpler için tetrodes ve teller yapıştırmak ve hareket mikro sürücü ile tutarlı olduğundan emin olmak için tüplerin üstüne siyanoakrilat tutkal uygulayın. Mikro sürücüyü en üste kadar vidala.Hareketi önlemek için mikro sürücü gövdesinin içindeki maruz kalan tetrode ve tellere yumuşak petrol uygulayın. Zemin kablolarını pencerenin dışında tutmayı yaparken mikro sürücü gövdesinin önüne epoksi bir ön kesme petri kabı alt penceresi takın. Daha sonra, oda sıcaklığında vulkanize kaplamayı, logger kutusu kapağı ile mikrosürücü gövdesi arasındaki açıkta kalan tetrodelara ve kablolara uygulayın.İstenilen uzunlukta tetrodes ve referans tel kesmek için keskin makas kullanın. Bu kutuya işaretli, exuded polistiren köpük eklemek sonra. Su banyosuna batırıldığında yüzdürme kuvvetinin dengelenmesi için boyutunu ayarlayın.Balığı anestezi ettikten sonra balığı sudan çıkarıp tutucuya yerleştirin. 10 dakika boyunca belirlenen cerrahi sitenin üzerinde deriüzerinde yüzde beş lidokain macun uygulamak için steril bir spatula kullanın. Sonra lidokain çıkarın.İmplant için belirlenen bölgede kafatası üzerinde deri kaldırmak için steril bir sayı 15 bıçak neşter kullanın. Sonra kafatasında dört delik açmak için 0,7 milimetre matkap uçları ile bir diş matkap kullanın. Deliklerden birine siyanoakrilat tutkal uygulayın ve hemen bir milimetre vida takın.Kalan matkap delikleri için bu işlemi tekrarlayın. Bundan sonra, vidalar ve maruz kafatası nın çevre üzerinde diş çimentosu uygulamak için bir diş burnisher kullanın. Diş matkap kullanarak ilgi beyin bölgesi üzerinde çapı beş milimetre olan bir delik yapmak.Kafatası ve beyin arasındaki yağ dokusunu kaldırmak ve kafatasının altındaki büyük kan damarlarına zarar vermemeye dikkat eden beyin bölgesi hedefini ortaya çıkarmak için ince cımbız ve yumuşak mendil kağıdı kullanın. İlk olarak, mikro sürücü gövdesinin alt kısmı kafatasına yakınken elektrotlar beyne sokulacak şekilde implantı indirin. Gövde ve en yakın kafatası vidası arasında diş çimentosu küçük bir miktar uygulayarak kafatası implant takmaya başlayın.Diş çimento ilk bölümü tedavi edildikten sonra ek diş çimentosu uygulayın ve kafatası ve tüm maruz kafatası üzerinde delik kapatın. Balığın solungaçlarını uyandırmak için tatlı suyla yıkdıktan sonra balığı tutucudan çıkarın ve kendi tankına geri yerleştirin. Balığın implantla serbestçe yüzediğinden emin olun.Bu deneylerin amacı, tek hücrelerin nöral aktivitesinin balığın davranışını nasıl kodlar olduğunu incelemektir. Bunu başarmak için bir tetrode dizisi nöral aktivitekaydedilmesine olanak sağlayan serbestçe yüzen japon balığının telensefalon içine yerleştirilir. Kaydedilirken beyin aktivitesi 31, 250 Hertz ve yüksek geçiş 300 Hertz'de veri kaydedici tarafından dijitalleştirilmiştir.Daha sonra çevrimdışı bir yasaklama geçiş filtresi sinyalleri uygulanır ve presorted ham veri her tetrode kanalı ve referans kanalına ayrılır. Sonraki ortak başak sıralama algoritmaları tek hücreli etkinliği karakterize etmek için kullanılır. Öncelikle her kanal en az başak genliği eşiği tarafından el ile süzülür.Birden fazla tetrode veya referans kanalında görünen çiviler de filtrelenir. Algılanan ani artışlar daha sonra el ile kümelenir ve şekil, uzunluk, inter spike aralığı ve ilke bileşen analizi ile filtrelenir. Ameliyattan önce implantın bütünlüğünün kontrol edilebisolması önemlidir.Tetrode standart bir empedans ölçer kullanılarak kontrol edilebilir ve kutu su altında sızıntı için kontrol edilmelidir. Bu yöntem, sistemi tutacak kadar büyük olduğu sürece birçok su hayvanı ile çalışacak şekilde değiştirilebilir. Bu, davranışlarının altında yatan sinirsel mekanizmayı incelemeyi sağlar.

wireless-electrophysiological-recording-neurons-movable-tetrodes

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Bu protokolde sıçanlarda kronik elektrofizyolojik kayıtlar için tasarlanmış bir mikro-sürücü dizi ile kullanılmak için imal ve durumu tetrodes nasıl göstermektedir. Buna ek olarak, mikro-sürücü yüklemeden yer teller ve koruyucu bir koni içeren dizi inşaat, son aşamaya göstermektedir.

Micro-sürücü Kronik Array In vivo Kayıt: Tetrode Meclisi

Silikon sondalar anestezi sıçan kullanarak nöronal aktivitenin Ekstrasellüler kayıtları açıklanacaktır. Bu teknik, aynı anda 100 den fazla nöron birden çok beyin bölgelerinin daha fazla bilgi almak sağlar. Bu tek hücre çözünürlük ile, birden fazla yerel devrelerin nöronal toplulukları dinamikleri hakkında bilgi sağlar.

Anestezi Rat Silikon Probları Büyük ölçekli Nöronal Toplulukları Kaydı

Larva zebrafish önbeyin ekstrasellüler alanın potansiyellerini kaydetmek için basit bir yöntem tarif edilmiştir. Yöntem, bir sağlam...

Larva Zebra balığı olarak önbeyin Elektrofizyolojik Kaydı

Bu video, karmaşık nöral devreleri koruyan bir bütün beyin hazırlık, belirlenen tek nöronlardan elektriksel aktivite kayıt nasıl gösterecektir. Biz gonadotropin salgılatıcı hormon (GnRH) nöronlar genetik sağlam beyin hazırlanmasında tanımlama için bir floresan protein ile etiketlenmiş edildiği transgenik balık kullanabilirsiniz.

Transgenik Balık Sağlam Beyin Tespit Edilen nöronlar Elektrik Aktivitesi Kayıt

Bu serbest zaman uyumlu bir duyusal içinde özel olarak tasarlanmış bir akvaryum tank içinde hem doğru ve güvenilir bir hayvanın elektrik organı deşarj zamanlaması, vücut konumu ve duruşu ölçülerek, uzun bir süre boyunca zayıf elektrik balık yüzme spontan davranışını incelemek için teknikler bir dizi tanımlamak izolasyon odası.

Serbestçe Yüzme Zayıf Elektrik Balık Uzun vadeli Davranış Takip

Bu çalışma, bir yetişkin zebra balığı, hareketsiz entübe ve kayıtları ve bozulmamış bir hayvanda nöral faaliyet işleme izin vermek için in vivo elektrofizyolojik deneyler için nasıl kullanılabileceğini açıklar.

Sağlam Yetişkin Zebra balığı Beyin Elektrofizyolojik Kayıt

Yeni uyaran-tepki dernekler Öğrenme sonuçta bireysel nöronların başak çıkışını değişiyor yansıyan sinirsel süreçlerin geniş bir yelpazede yürütmektedir. Burada, hayvanlar, elde söndürmek ve tek bir deneysel oturumda içinde bir şartlı yanıt yeniden almak ise tek nöron aktivitesinin sürekli kaydı için izin veren bir davranış protokol açıklar.

Serbestçe Öğrenmenin üç aşamalı karşısında Güvercinler Hareketli gelen tek nöronların &#39;Aksiyon Potansiyelleri kayıt

Biz daha önce bize gergin hamamböceği bireysel birimlerin etkinliğini izlemek için izin verir hamamböceği beyinlerinin merkezi kompleksi içine tetrode telleri implante için bir teknik geliştirdi. Burada bize de özgürce böcekler hareket beyin aktivitesini kaydetmenize olanak sağlayan tekniğin değiştirilmiş bir sürümü mevcut.

Serbestçe Böcekler Yürüyüş Beyin Ektraselüler Tel Tetrode Kaydı

Bir kablosuz fareler serbestçe davranışlar içinde stimülasyon ve çok kanallı sinirsel kayıtları için çift yönlü sistemi tanıttı. Hafif ve küçük, böylece animal´s davranış repertuar üzerinde en az etkiye sistemidir. Ayrıca, bu çift yönlü sistem beyin harekete geçirmek desen ve davranışı arasındaki nedensel ilişkileri değerlendirmek için gelişmiş bir araç sağlar.

Kablosuz, Vivo içinde kayıt ve fareler serbestçe davranışlar içinde sinirsel aktivite uyarılması için çift yönlü arayüzü

Bu protokol, serbestçe hareket eden farelerde iki beyin bölgesinde dokuz bağımsız olarak ayarlanabilir tetrode ve bir ayarlanabilir opto-silikon probu implantasyonu sağlayan bir hibrid microdrive dizisinin yapımını açıklar. Ayrıca güvenli bir şekilde kurtarma ve birden fazla amaç için opto-silikon probu yeniden kullanmak için bir yöntemdir gösterilmiştir.

SerbestÇe Hareket Eden Farelerde Çift Alan Yüksek Yoğunluklu Kayıt için Kurtarılabilir Opto-Silikon Prob ve Tetrode ile Hibrid Microdrive Sistemi

Burada, kemirgenlerde kronik elektrofizyoloji için kullanım kolaylığı, prob geri kazanımı, deneysel çok yönlülük ve davranışla uyumluluk için optimize edilmiş hafif, uygun maliyetli bir prob implant sistemi sunuyoruz.

DREAM implant: Başa sabitlenmiş ve serbest hareket eden farelerde kronik elektrofizyoloji için hafif, modüler ve uygun maliyetli bir implant sistemi

Öğrenin serbest yüzen balıklarda hareketli tetrod kullanarak kablosuz ekstraselüler nöral kayıt yöntemini. Bu su geçirmez cihaz doğal davranışlar sırasında gerçek zamanlı sinir aktivitesi izlemeyi mümkün kılar.

Serbest Yüzme Balık hareketli Tetrodes tarafından Nöronların Kablosuz Elektrofizyolojik Kayıt

Daha fazla video keşfet