Name: Jelatin Metacryloyl Hidrojel Bazlı Bioinks 3D Biyobaskı Protokolleri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-12-21T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 25 s
Description: Öğrenin, GelMA hidrojel bazlı bioinklerle 3D biyobaskı stratejilerini. Bu yöntem, doku mühendisliği ve organ hasarı tedavisi için biyomedikal uygulamalara katkı sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma Çin Ulusal Anahtar Araştırma ve Geliştirme Programı (2018YFA0703000), Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (No.U1609207, 81827804), Ulusal Doğa Bilimleri Yaratıcı Araştırma Grupları Bilim Fonu tarafından desteklenmiştir. Çin Vakfı (No. 51821093).

1. Hücre culturing
<ol><li>Hazırlamak Dulbecco değiştirilmiş Eagle orta (DMEM), ile takviye 10% fetal sığır serumu (FBS) ve 1% penisilin / streptomisin, kültür insan meme kanseri hücresi için kullanılan (MDA-MB-231) hatları ve insan umbilical ven endotel hücresi (HUVEC) hatları.</li>
	<li>L-glutamin ile DMEM hazırlayın (DMEM/F-12), ile takviye 10% FBS ve 1% penisilin / streptomisin, kültür kemik iliği mezenkimal kök hücre için kullanılan (BMSC).</li>
	<li>Kültür ortamını 37 °C ve %5 CO2olarak ayarlayın. Kültür MDA-MB-231, HUVEC ve BMSC ve %90 birleştiğinde hücreleri 1:2 oranında geçiş.</li>
</ol>2. GelMA mikrokürelerinin imalatı
<ol><li>Fikstürü, erimiş bir biriktirme modelleme (FDM) yazıcıya polilaktik asit (PLA) içeren Şekil 1A olarak yazdırın. Fikstüre iki metal halka elektrot yerleştirin.</li>
	<li>İki metal halka elektrotlarını sırasıyla zemin ve pozitif kutuplarla bağlayın. Halka elektrotun altına yüksek voltajla bağlanan metal plakayı yerleştirin ve damlacık alıcısı olarak metal plakaya silikon yağı içeren bir Petri kabı yerleştirin.</li>
	<li>Dondurularak kurutulmuş GelMA (%5 w/v) ve lityum fenil-2,4,6-trimethylbenzoilphosphinate (LAP, %0.5 w/v) Dulbecco fosfat tamponlu salin (DPBS) biyoink (10 mL) olarak çözünür. Bioink'i sterilite için 0,22 μm'lik bir filtreden geçirin ve 37 °C'lik bir su banyosunda 15 dakika ısıtın.</li>
	<li>3 dk 3 7 °C'de 3 dk için %0,25 tripsin-0,02% EDTA çözeltisi ile MDA-MB-231 hücrelerini ayırın. Bir hücre pelet elde etmek için 100 x g 15 mL santrifüj tüp içinde santrifüj hücreleri 5 dk.</li>
	<li>Supernatant çıkarın. Kabarcıkların üretimini önlemek için yavaş yavaş borulama tarafından hazırlanan bioink 1 mL ile hücre pelet karıştırın.</li>
	<li>3 mL steril şırınga içine 1 mL bioink (MDA-MB-231) yerleştirin. Biyoink'ü basınçlı hava kuvveti (~0,5 kPa) ile besleyin. Şırıngayı fikstüre koy. NOT: Baskı ortamı 30 °C sıcaklıkta ve nem %50 oranında sıkı bir şekilde kontrol edilmelidir.</li>
	<li>Yüksek gerilim gücünü açın ve voltajı 0−4 kV olarak ayarlayın. Aynı anda, 405 nm dalga boyu ışığını açaşıyın ve GelMA damlacıklarını 5 mL silikon yağıyla birbirine bağlayın.</li>
	<li>Petri kabını dekanting ederek silikon yağının büyük bir kısmını dökün. Kalan silikon yağı ve GelMA mikrokürelerini bir kaşık kullanarak 15 mL'lik santrifüj tüpüne aktarın.</li>
	<li>DPBS 5 mL ekleyin ve eşit karışımı sallayın. Tüpü 100 x g'de 5 dk santrifüj edin ve süpernatant sıvısını çıkarın.</li>
	<li>Adımı tekrarlayın 2.9 3x.</li>
	<li>GelMA mikrosferlerini bir kaşıkla çıkarın ve 37 °C'de petri kabında DMEM'de 3 gün boyunca %5 CO2'de kültürlendirin.</li>
	<li>Ortamı atın ve mikroküreleri DPBS ile yıkayın. Oda sıcaklığında (RT) 30 dakika boyunca %4 paraformaldehit (PFA) 2 mL ile düzeltin.</li>
	<li>PFA atın ve DPBS ile mikroküreler yıkayın. RT'de 5 dakika boyunca %0,5 noniyonik yüzey aktif maddenin (yani Triton X-100) 2 mL ile permeabilize olun.</li>
	<li>Noniyonik yüzey aktif maddeyi atın ve mikroküreleri DPBS ile yıkayın. RT'de karanlıkta 30 dakika boyunca 2 mL tetrametilrhodamine (TRITC) phalloidin ile lekeleyin.</li>
	<li>TRITC atın ve DPBS ile mikroküreler yıkayın. RT karanlıkta 10 dakika boyunca 4-,6-diamidino-2-fenilindole (DAPI) 2 mL ile lekeleyin.</li>
	<li>DAPI'yi atın ve mikroküreleri DPBS ile yıkayın. Bir konfokal floresan mikroskobu ile morfolojiyakalayın.</li>
</ol>3. GelMA lifleri imalatı
<ol><li>Şekil 2A'dagösterildiği gibi koaksiyel bir meme hazırlayın. Bir iç meme (25 G, OD = 510 μm, ID = 250 μm) ve dış meme (18 G, OD = 1200 μm, ID = 900 μm) lehimleme ile düzeltin. Koaksiyel nozulun sonuna cam bir tüp (uzunluk = 50 mm, iç çap = 1,2 mm) bağlayın.</li>
	<li>Ultraviyole (UV) ışığı altında sterilize edilen sodyum aljinat (Na-Alg) tozunu 30 dk deiyonize suda %2 oranında (w/v) çözün.</li>
	<li>Adım 2.3'ün ardından steril bir biyoink çözeltisi hazırlayın. GelMA bioink ve Na-Alg çözeltisini 37 °C'lik su banyosunda 15 dakika ısıtın.</li>
	<li>3 mL%0,25 tripsin-0,02% EDTA çözeltisi ile 3 dk 37 °C'de bmsc hücrelerini ayırın. Bir hücre pelet elde etmek için 100 x g 15 mL santrifüj tüp içinde santrifüj hücreleri 5 dk.</li>
	<li>Süpernatant sıvısını çıkarın. Kabarcıkların üretimini önlemek için yavaş yavaş pipetleme tarafından hazırlanan GelMA bioink 2 mL ile hücre pelet karıştırın.</li>
	<li>10 mL'lik bir şırıngaya 2 mL bioink (BMSC) yerleştirin. 2 mL Na-Alg çözeltisini başka bir şırınganın içine yerleştirin (10 mL). Onları sırasıyla iki şırınga pompasıile besleyin (burada, bioink 50 m/dk ve Na-Alg çözeltisi 350 m/dk). NOT: Baskı ortamı 30 °C sıcaklıkta ve nem %50 oranında sıkı bir şekilde kontrol edilmelidir.</li>
	<li>GelMA liflerini çapraz bağlamak için şeffaf tüpü ışınlamak için 405 nm dalga boyu ışığını açın. Lifleri almak için DPBS ile bir Petri kabı kullanın.</li>
	<li>GELMA liflerini DPBS'den bir kaşıkla çıkarın ve 37 °C'de hazırlanan DMEM/F-12'de 3 gün boyunca ve %5 CO2'dekültürleyin.</li>
	<li>GelMA liflerini konfokal floresan mikroskobu yla morfolojik gözleme hazırlamak için 2.12−2.16 adımlarını izleyin.</li>
</ol>4. Kompleks 3D GelMA yapılarının imalatı
NOT: Şekil 3A karmaşık 3D GelMA yapılarının üretim krokisini gösterir.
<ol><li>DLP biyoyazıcıyı(Şekil 3E)%75 alkolle silin ve sterilite için 30 dakika boyunca UV ışınlamaya maruz bırakın.</li>
	<li>DPBS'de dondurulmuş kurutulmuş GelMA (%10 w/v) ve LAP (%0,5 w/v) çözün. Baskı doğruluğunu artırmak için çözeltiye (%3 v/v) macenta yenilebilir pigment ekleyin.</li>
	<li>Çözeltiyi sterilite için 0,22 μm'lik bir filtreden geçirin ve 37 °C'lik bir su banyosunda 15 dakika ısıtın.</li>
	<li>Bilgisayar destekli tasarım (CAD) yazılımı ile 3B modeller oluşturun. Model belgelerini uygulanan DLP biyoyazıcının üst yazılımına (EFL) aktarın.</li>
	<li>DLP biyoyazıcının çukuruna 10 mL hazırlanmış bioink ekleyin.</li>
	<li>Üst yazılımdaki yazdırma parametrelerini aşağıdaki gibi ayarlayın: ışık yoğunluğu = 12 mW/cm2, ışınlama süresi = 30 s ve dilim yüksekliği = 100 μm. Yazdırmaya başlayın.</li>
	<li>Yazdırılan yapıyı biyoyazıcıdan çıkarın ve bir Petri kabına DPBS'ye batırın.</li>
	<li>MDA-MB-231s hücrelerini 3 mL %0,25 tripsin-0,02% EDTA çözeltisi ile 3 dk 37 °C'de ayırın. Bir hücre pelet elde etmek için 15 mL tüp 5 dakika için 100 x g santrifüj hücreleri.</li>
	<li>Supernatant sıvısını çıkarın ve hücre peletini 2 mL DMEM ile karıştırın.</li>
	<li>Yazdırılan yapılara 100 μL hücre süspansiyonu ekleyin. 37 °C ve %5 CO2'dehazırlanan DMEM'de 3 gün boyunca kültür balıkçılları.</li>
	<li>Karmaşık 3B yapıları konfokal floresan mikroskobu yla morfolojik gözleme hazırlamak için 2.12−2.16 adımlarını izleyin.</li>
</ol>5. GelMA bazlı mikroakışkan yongaların imalatı
NOT: Şekil 4A, GelMA tabanlı mikroakışkan çipin üretim krokisini gösterir.
<ol><li>DPBS'de dondurulmuş olarak kurutulmuş GelMA %10 (w/v) ve LAP (%0,5 w/v) çözün. Sterilite için GelMA çözeltisini 0,22 m filtreden filtreleyin.</li>
	<li>Jelatin tozunu UV ışığı altında 30 dakika sterilize edin ve adım 5.1'de hazırlanan GelMA-LAP çözeltisine ilave edin ve %5'lik (w/v) son jelatin konsantrasyonuna ekleyin. Karışımı 37 °C'lik bir su banyosunda 15 dk ısıtın.</li>
	<li>CAD yazılımı ile bir kalıp grubu(Şekil 4B,C)tasarlayın ve bunları Bir DLP yazıcıda fotopolimer reçine ile üretin.</li>
	<li>Kalıpları hazırlanmış bioink ile tamamen doldurun.</li>
	<li>30 dakika boyunca jelatin çapraz bağlamak için 4 ° C buzdolabı içine kalıpları koyun.</li>
	<li>Kalıpları çıkarın ve kalıplardan kısmen (fiziksel) çapraz hidrojel levhalar bir bıçak ile demold çıkarın.</li>
	<li>İki kalıplı hidrojel levhaları birleştirin ve 1 dk için 405 nm'de ışınlayarak GelMA yardımı ile bağlayın.</li>
	<li>3 7 °C'de 3 dk için %0,25 tripsin-0,02% EDTA çözeltisi ile HUVECs hücrelerini ayırın. 15 mL santrifüj tüpteki santrifüj hücreleri 100 x g'de 5 dk hücre peleti elde etmek için.</li>
	<li>Supernatant sıvısını çıkarın ve hücre peletini 2 mL DMEM ile karıştırın.</li>
	<li>Hücre süspansiyonuna bir meme ve şırınga enjekte ederek mikrokanalı tamamen doldurun.</li>
	<li>Üniforma ve tam hücre tohumlama elde etmek için sonraki 3 saat boyunca her 15 dakikada bir çipters çevirin. Kültür 37 °C ve% 5 CO2hazırlanan DMEM 3 gün boyunca Petri çanak cips .</li>
	<li>Mikroakışkan yongaları konfokal floresan mikroskobu ile morfolojik gözleme hazırlamak için 2.12−2.16 adımlarını takip edin.</li>
</ol>

<ol><li>Ahmed, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydrogel%3A+Preparation%2C+characterization%2C+and+applications%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Advanced+Research%22%5BJournal%5D)">Hydrogel: Preparation, characterization, and applications: A review.</a> Journal of Advanced Research. 6 (2), 105-121 (2015).</li>
<li>Ashton, R. S., Banerjee, A., Punyani, S., Schaffer, D. V., Kane, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scaffolds+based+on+degradable+alginate+hydrogels+and+poly%28lactide-co-glycolide%29+microspheres+for+stem+cell+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Scaffolds based on degradable alginate hydrogels and poly(lactide-co-glycolide) microspheres for stem cell culture.</a> Biomaterials. 28 (36), 5518-5525 (2007).</li>
<li>Billiet, T., Vandenhaute, M., Schelfhout, J., Van Vlierberghe, S., Dubruel, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+trends+and+limitations+in+hydrogel-rapid+prototyping+for+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">A review of trends and limitations in hydrogel-rapid prototyping for tissue engineering.</a> Biomaterials. 33 (26), 6020-6041 (2012).</li>
<li>Saroia, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+on+biocompatibility+nature+of+hydrogels+with+3D+printing+techniques%2C+tissue+engineering+application+and+its+future+prospective%5BTitle%5D)+AND+%22Bio-Design+and+Manufacturing%22%5BJournal%5D)">A review on biocompatibility nature of hydrogels with 3D printing techniques, tissue engineering application and its future prospective.</a> Bio-Design and Manufacturing. 1 (4), 265-279 (2018).</li>
<li>Van Den Bulcke, A. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+and+Rheological+Properties+of+Methacrylamide+Modified+Gelatin+Hydrogels%5BTitle%5D)+AND+%22Biomacromolecules%22%5BJournal%5D)">Structural and Rheological Properties of Methacrylamide Modified Gelatin Hydrogels.</a> Biomacromolecules. 1 (1), 31-38 (2000).</li>
<li>Sun, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis+and+Properties+of+Gelatin+Methacryloyl+%28GelMA%29+Hydrogels+and+Their+Recent+Applications+in+Load-Bearing+Tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Polymers%22%5BJournal%5D)">Synthesis and Properties of Gelatin Methacryloyl (GelMA) Hydrogels and Their Recent Applications in Load-Bearing Tissue.</a> Polymers. 10 (11), 1290(2018).</li>
<li>Gao, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+printing+of+complex+GelMA-based+scaffolds+with+nanoclay%5BTitle%5D)+AND+%22Biofabrication%22%5BJournal%5D)">3D printing of complex GelMA-based scaffolds with nanoclay.</a> Biofabrication. 11 (3), 035006(2019).</li>
<li>Hassanzadeh, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastrong+and+flexible+hybrid+hydrogels+based+on+solution+self-assembly+of+chitin+nanofibers+in+gelatin+methacryloyl+%28GelMA%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Materials+Chemistry+B%22%5BJournal%5D)">Ultrastrong and flexible hybrid hydrogels based on solution self-assembly of chitin nanofibers in gelatin methacryloyl (GelMA).</a> Journal of Materials Chemistry B. 4 (15), 2539-2543 (2016).</li>
<li>McBeth, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+bioprinting+of+GelMA+scaffolds+triggers+mineral+deposition+by+primary+human+osteoblasts%5BTitle%5D)+AND+%22Biofabrication%22%5BJournal%5D)">3D bioprinting of GelMA scaffolds triggers mineral deposition by primary human osteoblasts.</a> Biofabrication. 9 (1), 015009(2017).</li>
<li>Nie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vessel-on-a-chip+with+Hydrogel-based+Microfluidics%5BTitle%5D)+AND+%22Small%22%5BJournal%5D)">Vessel-on-a-chip with Hydrogel-based Microfluidics.</a> Small. 14 (45), 1802368(2018).</li>
<li>Shao, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioprinting+of+Cell-Laden+Microfiber%3A+Can+It+Become+a+Standard+Product%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Healthcare+Materials%22%5BJournal%5D)">Bioprinting of Cell-Laden Microfiber: Can It Become a Standard Product.</a> Advanced Healthcare Materials. 8 (9), 1900014(2019).</li>
<li>Shao, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fiber-Based+Mini+Tissue+with+Morphology-Controllable+GelMA+Microfibers%5BTitle%5D)+AND+%22Small%22%5BJournal%5D)">Fiber-Based Mini Tissue with Morphology-Controllable GelMA Microfibers.</a> Small. 14 (44), 1802187(2018).</li>
<li>Xie, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electro-Assisted+Bioprinting+of+Low-Concentration+GelMA+Microdroplets%5BTitle%5D)+AND+%22Small%22%5BJournal%5D)">Electro-Assisted Bioprinting of Low-Concentration GelMA Microdroplets.</a> Small. 15 (4), 1804216(2019).</li>
<li>Yue, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis%2C+properties%2C+and+biomedical+applications+of+gelatin+methacryloyl+%28GelMA%29+hydrogels%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Synthesis, properties, and biomedical applications of gelatin methacryloyl (GelMA) hydrogels.</a> Biomaterials. 73, 254-271 (2015).</li>
<li>Schuurman, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gelatin-Methacrylamide+Hydrogels+as+Potential+Biomaterials+for+Fabrication+of+Tissue-Engineered+Cartilage+Constructs%5BTitle%5D)+AND+%22Macromolecular+Bioscience%22%5BJournal%5D)">Gelatin-Methacrylamide Hydrogels as Potential Biomaterials for Fabrication of Tissue-Engineered Cartilage Constructs.</a> Macromolecular Bioscience. 13 (5), 551-561 (2013).</li>
<li>Barbot, A., Decanini, D., Hwang, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On-chip+Microfluidic+Multimodal+Swimmer+toward+3D+Navigation%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">On-chip Microfluidic Multimodal Swimmer toward 3D Navigation.</a> Scientific Reports. 6, 19041(2016).</li>
<li>Esmaeilsabzali, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+integrated+microfluidic+chip+for+immunomagnetic+detection+and+isolation+of+rare+prostate+cancer+cells+from+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedical+Microdevices%22%5BJournal%5D)">An integrated microfluidic chip for immunomagnetic detection and isolation of rare prostate cancer cells from blood.</a> Biomedical Microdevices. 18 (1), 22(2016).</li>
<li>Lee, J. M., Zhang, M., Yeong, W. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+and+evaluation+of+3D+printed+microfluidic+chip+for+cell+processing%5BTitle%5D)+AND+%22Microfluidics+and+Nanofluidics%22%5BJournal%5D)">Characterization and evaluation of 3D printed microfluidic chip for cell processing.</a> Microfluidics and Nanofluidics. 20 (1), 5(2016).</li>
<li>Picot, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+biomimetic+microfluidic+chip+to+study+the+circulation+and+mechanical+retention+of+red+blood+cells+in+the+spleen%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Hematology%22%5BJournal%5D)">A biomimetic microfluidic chip to study the circulation and mechanical retention of red blood cells in the spleen.</a> American Journal of Hematology. 90 (4), 339-345 (2015).</li>
<li>Ren, K., Zhou, J., Wu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Materials+for+Microfluidic+Chip+Fabrication%5BTitle%5D)+AND+%22Accounts+of+Chemical+Research%22%5BJournal%5D)">Materials for Microfluidic Chip Fabrication.</a> Accounts of Chemical Research. 46 (11), 2396-2406 (2013).</li>
<li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Covalently+antibacterial+alginate-chitosan+hydrogel+dressing+integrated+gelatin+microspheres+containing+tetracycline+hydrochloride+for+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Materials+Science+and+Engineering%3A+C%22%5BJournal%5D)">Covalently antibacterial alginate-chitosan hydrogel dressing integrated gelatin microspheres containing tetracycline hydrochloride for wound healing.</a> Materials Science and Engineering: C. 70, 287-295 (2017).</li>
<li>Fan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Covalent+and+injectable+chitosan-chondroitin+sulfate+hydrogels+embedded+with+chitosan+microspheres+for+drug+delivery+and+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Materials+Science+and+Engineering%3A+C%22%5BJournal%5D)">Covalent and injectable chitosan-chondroitin sulfate hydrogels embedded with chitosan microspheres for drug delivery and tissue engineering.</a> Materials Science and Engineering: C. 71, 67-74 (2017).</li>
<li>Feng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+black-pearl+reduced+graphene+oxide-sodium+alginate+hydrogel+microspheres+for+adsorbing+organic+pollutants%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Colloid+and+Interface+Science%22%5BJournal%5D)">Preparation of black-pearl reduced graphene oxide-sodium alginate hydrogel microspheres for adsorbing organic pollutants.</a> Journal of Colloid and Interface Science. 508, 387-395 (2017).</li>
<li>Park, K. S., Kim, C., Nam, J. O., Kang, S. M., Lee, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis+and+characterization+of+thermosensitive+gelatin+hydrogel+microspheres+in+a+microfluidic+system%5BTitle%5D)+AND+%22Macromolecular+Research%22%5BJournal%5D)">Synthesis and characterization of thermosensitive gelatin hydrogel microspheres in a microfluidic system.</a> Macromolecular Research. 24 (6), 529-536 (2016).</li>
<li>Zheng, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Injectable+Hydrogel-Microsphere+Construct+with+Sequential+Degradation+for+Locally+Synergistic+Chemotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Applied+Materials%2C+Interfaces%22%5BJournal%5D)">Injectable Hydrogel-Microsphere Construct with Sequential Degradation for Locally Synergistic Chemotherapy.</a> ACS Applied Materials, Interfaces. 9 (4), 3487-3496 (2017).</li>
<li>Fernández de la Mora, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Fluid+Dynamics+of+Taylor+Cones%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Fluid+Mechanics%22%5BJournal%5D)">The Fluid Dynamics of Taylor Cones.</a> Annual Review of Fluid Mechanics. 39 (1), 217-243 (2006).</li>
<li>Hsiao, A. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Smooth+muscle-like+tissue+constructs+with+circumferentially+oriented+cells+formed+by+the+cell+fiber+technology%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Smooth muscle-like tissue constructs with circumferentially oriented cells formed by the cell fiber technology.</a> PLoS ONE. 10, 0119010(2015).</li>
<li>Meng, Z. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microfluidic+generation+of+hollow+Ca-alginate+microfibers%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+on+a+Chip%22%5BJournal%5D)">Microfluidic generation of hollow Ca-alginate microfibers.</a> Lab on a Chip. 16 (14), 2673-2681 (2016).</li>
<li>Peng, L., Liu, Y., Gong, J., Zhang, K., Ma, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous+fabrication+of+multi-stimuli+responsive+graphene+oxide+composite+hydrogel+fibres+by+microfluidics%5BTitle%5D)+AND+%22RSC+Advances%22%5BJournal%5D)">Continuous fabrication of multi-stimuli responsive graphene oxide composite hydrogel fibres by microfluidics.</a> RSC Advances. 7 (31), 19243-19249 (2017).</li>
<li>Sugimoto, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micropassage-embedding+composite+hydrogel+fibers+enable+quantitative+evaluation+of+cancer+cell+invasion+under+3D+coculture+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+on+a+Chip%22%5BJournal%5D)">Micropassage-embedding composite hydrogel fibers enable quantitative evaluation of cancer cell invasion under 3D coculture conditions.</a> Lab on a Chip. 18 (9), 1378-1387 (2018).</li>
<li>Yamada, M., Sugaya, S., Naganuma, Y., Seki, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microfluidic+synthesis+of+chemically+and+physically+anisotropic+hydrogel+microfibers+for+guided+cell+growth+and+networking%5BTitle%5D)+AND+%22Soft+Matter%22%5BJournal%5D)">Microfluidic synthesis of chemically and physically anisotropic hydrogel microfibers for guided cell growth and networking.</a> Soft Matter. 8 (11), 3122-3130 (2012).</li>
<li>Gao, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+engineered+bio-blood-vessels+constructed+using+a+tissue-specific+bioink+and+3D+coaxial+cell+printing+technique%3A+a+novel+therapy+for+ischemic+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Functional+Materials%22%5BJournal%5D)">Tissue engineered bio-blood-vessels constructed using a tissue-specific bioink and 3D coaxial cell printing technique: a novel therapy for ischemic disease.</a> Advanced Functional Materials. 27 (33), 1700798(2017).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Bu makalede, GelMA 3D yapıları, yani GelMA mikroküreler, GelMA lifleri, GelMA karmaşık yapıları ve GelMA tabanlı mikroakışkan yongaları imal etmek için çeşitli stratejiler açıklanmaktadır. GelMA umut verici biyouyumluluk ve oluşum yeteneğine sahiptir ve biyofabrikasyon alanında yaygın olarak kullanılmaktadır. Mikrosfer yapıları kontrollü ilaç salınımı için uygundur, doku culturing, ve daha fazla tedavi için organizmalar içine enjeksiyon21,22,<sup class...

Hidrojellerin biyofabrikasyon alanında uygun bir malzeme olduğu düşünülmektedir1,2,3,4. Bunlar arasında, jelatin metakrilopil (GelMA) en çok yönlü biyomalzemelerden biri haline gelmiştir, başlangıçta Van Den Bulcke ve ark.5tarafından 2000 yılında önerilen . GelMA metakrilik anhidrit (MA) ile jelatin doğrudan reaksiyon uğrama ile sentezlenir. Memeli kollajen tarafından hidrolize edilen jelatin, matris metalloproteinaz (MMP) hedef motiflerinden oluşur. Böylece, In vitro üç boyutlu (3D) doku modelleri GelMA tarafından kurulan ideal olarak hücre ve ekstrasellüler matriks arasındaki etkileşimleri taklit edebilir (ECM) in vivo. Ayrıca aljinat gibi diğer bazı hidrojellerde bulunmayan arginin-glisin-aspartik asit (RGD) dizileri GelMA'nın moleküler zincirlerinde kalır. Bu mümkün hidrojel ağları içinde kapsüllü hücrelerin eki gerçekleştirmek için yapar6. Ayrıca, GelMA oluşumu yeteneği umut vericidir. GelMA moleküler zincirlerindeki methacrylamid grupları hafif reaksiyon koşullarında fotobaşlatıcı ile reaksiyona girer ve ışık ışınlanmasına maruz kalındığında kovalent bağlar oluştururlar. Bu nedenle, yazdırılan yapılar, tasarlanan şekilleri basit bir şekilde korumak için hızla çapraz bağlanabilir.
Bu özelliklere dayanarak, doku mühendisliği, temel sitoloji analizi, ilaç taraması ve biyosensing gibi çeşitli uygulamaları yürütmek için bir dizi alan GelMA kullanır. Buna göre, çeşitli üretim stratejileri de7,8,9,10,11,12,13,14gösterilmiştir . Ancak, hala gelma dayalı 3D biyobaskı yürütmek için zor, hangi temel özellikleri nedeniyle. GelMA ısıya duyarlı bir malzemedir. Baskı işlemi sırasında, biyoink fiziksel durumunu korumak için baskı atmosferinin sıcaklığı sıkı bir şekilde kontrol edilmelidir. Ayrıca, GelMA viskozitesi genellikle diğer ortak hidrojellere göre daha düşüktür (yani, aljinat, kitosan, hyaluronik asit, vb.). Ancak, bu malzeme15ile 3D mimarileri inşa ederken diğer engellerle karşı karşıyayız.
Bu makalede, laboratuarımız tarafından önerilen GelMA'nın 3Boyutlu biyobaskısı için çeşitli yaklaşımlar özetlenir ve basılı numuneler (örneğin, GelMA mikrokürelerinin sentezi, GelMA lifleri, GelMA karmaşık yapıları ve GelMA tabanlı mikroakışkan yongalar) açıklanmaktadır. Her yöntem özel işlevleri vardır ve farklı gereksinimleri ile farklı durumlarda kabul edilebilir. GelMA mikroküreler damlacık boyutunu küçültmek için ekstra dış elektrik kuvveti oluşturan bir elektrodestekli modül tarafından oluşturulur. GelMA lifleri açısından, viskoz sodyum aljinat yardımı ile koaksiyel biyobaskı meme tarafından ekstrüzyon vardır. Buna ek olarak, karmaşık 3D yapıların kurulması bir dijital ışık işleme (DLP) biyoyazıcı ile elde edilir. Son olarak, gelma hidrojel ve geleneksel mikroakışkan yongaları birleştirerek, GelMA tabanlı mikroakışkan yongaları oluşturmak için iki kez crosslinking stratejisi önerilmektedir. Bu protokolün laboratuarımızda kullanılan GelMA biyobaskı stratejilerinin önemli bir özeti olduğuna ve göreceli alanlardaki diğer araştırmacılara ilham kaynağı olabileceğine inanılmaktadır.

<table><tbody><tr><td>0.22 &mu; m filtre membranı</td><td>Millipore</td><td></td><td></td></tr><tr><td>2- (4-amidinofenil) -6-indolekarbamidin dihidroklorür (DAPI)</td> <td>Yeasen Biological Technology Co., Ltd., Şangay, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>3D biyoyazıcı</td><td>SuZhou Akıllı Üretim Araştırma Enstitüsü, SuZhou, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>405nm dalga boyunda ışık</td><td>SuZhou Akıllı Üretim Araştırma Enstitüsü, SuZhou, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>koaksiyel nozul</td><td>SuZhou Akıllı Üretim Araştırma Enstitüsü, SuZhou, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>konfokal floresan mikroskobu</td><td>OLYMPUS FV3000</td><td></td><td></td></tr><tr><td>dijital ışık işleme (DLP) biyoyazıcı</td><td>SuZhou Akıllı Üretim Araştırma Enstitüsü, SuZhou, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DLP yazıcı</td><td>SuZhou Akıllı Üretim Araştırma Enstitüsü, SuZhou, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco'nun Fosfat Tamponlu Tuzlu Suyu (DPBS)</td><td>Tangpu Biological Technology Co., Ltd., Hangzhou, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco'nun Modifiye Kartal Ortamı (DMEM)</td><td>Tangpu Biological Technology Co., Ltd., Hangzhou, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco'nun L-glutamin (DMEM/F-12) ile Modifiye Kartal Ortamı</td> <td>Tangpu Biological Technology Co., Ltd., Hangzhou, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>EFL Yazılımı</td><td>SuZhou Akıllı Üretim Araştırma Enstitüsü, SuZhou, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>fetal sığır serumu (FBS)</td><td>Tangpu Biological Technology Co., Ltd., Hangzhou, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>jelatin</td><td>Sigma-Aldrich, Şangay, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>jelatin metakriloyl (GelMA)</td><td>SuZhou Akıllı Üretim Araştırma Enstitüsü, SuZhou, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>yüksek gerilim gücü</td><td>SuZhou Akıllı Üretim Araştırma Enstitüsü, SuZhou, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>lityum fenil-2, 4, 6-trimetilbenzoilfosfinat (LAP)</td><td>SuZhou Akıllı Üretim Araştırma Enstitüsü, SuZhou, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>paraformaldehit</td><td>Tangpu Biological Technology Co., Ltd., Hangzhou, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>penisilin/streptomisin</td><td>Tangpu Biological Technology Co., Ltd., Hangzhou, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>sodyum aljinat (Na-Alg)</td><td>Sigma-Aldrich, Şangay, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TRITC phalloidin</td><td>Yeasen Biological Technology Co., Ltd., Şangay, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Solarbio Co., Ltd., Şangay, Çin</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

jelatin metacryloyl hidrojel bazlı bioinks 3d biyobaskı protokolleri

Protocols of 3D Bioprinting of Gelatin Methacryloyl Hydrogel Based Bioinks

Jelatin metakrilopil (GelMA) biyobaskı alanında popüler bir biyomalzeme haline gelmiştir. Bu malzemenin türevi jelatin, hangi memeli kollajen hidrolize edilir. Böylece, arginin-glisin-aspartik asit (RGD) dizileri ve matris metalloproteinaz hedef motifleri (MMP) hücre eki ve bozulma elde yardımcı moleküler zincirleri üzerinde kalır. Ayrıca GelMA'nın oluşum özellikleri çok yönlüdür. Methacrylamid grupları bir materyalin bir fotobaşlatıcının varlığında ışık Radyasyonu altında hızla çapraz bağlanmasına izin verir. Bu nedenle, bu umut verici malzeme ile üç boyutlu (3D) yapıların sentezlemek için uygun yöntemler kurmak için büyük mantıklı. Ancak, düşük viskozitesi GelMA'nın yazdırılabilirliğini kısıtlar. Burada Sunulan yöntemler GelMA hidrojellerin 3D biyobaskı yürütmek için, yani GelMA mikroküreler, GelMA lifleri, GelMA karmaşık yapılar ve GelMA tabanlı mikroakışkan yongaları imalatı. Ortaya çıkan yapılar ve malzemelerin biyouyumluluğu ve baskı yöntemleri tartışılmıştır. Bu protokolün daha önce uygulanan biyomalzemeler ve GelMA arasında bir köprü görevi görebileceğine ve biyomedikal uygulamalar için GelMA tabanlı 3D mimarilerin kurulmasına katkıda bulunabileceğine inanılmaktadır.

GelMA mikrokürelerinin imalatı sırasında, GelMA damlacıkları dış elektrik alan kuvveti ile ayrıldı. Damlacıklar alıcı silikon yağı içine düştüğünde, onlar kuyrukları olmadan standart küresel şekil kaldı. JelMA damlacıkları sulu fazda iken, silikon yağı bir yağ fazı idi olmasıdır. İki evre arasında oluşan yüzey gerilimi GelMA damlacıklarının standart bir küresel şekil tutmasına neden oldu. Hücre yüklü mikrosferler açısından, hücreler bu süreçte yüksek voltajlı elektrik alan kuvveti yaşadı. Lekeli MDA-MB-231s<strong class=...

Burada sunulan jelatin metakril 3D biyobaskı için bir yöntemdir.

Jelatin Metacryloyl Hidrojel Bazlı Bioinks 3D Biyobaskı Protokolleri

Gelatin methacryloyl (GelMA) has become a popular biomaterial in the field of bioprinting. The derivation of this material is gelatin, which is hydrolyzed ...

GelMA hidrojel bazlı biyonik 3D biyobaskı çok popüler hale gelir. Ancak düşük viskozite yazdırılabilirliğini kısıtlar. Burada diğer araştırmacılar ile laboratuarımızda GelMA yazdırmak için stratejiler paylaşıyoruz.Bu videoda biz tam olarak bu biyomalzeme nin özel özelliklerini kullanmak ve daha fazla biyomedikal uygulamalara katkıda bulunabilecek farklı 3D yapılar için çeşitli baskı yöntemleri öneriyoruz. Örneğin organ hasarı almak için etkileri katıştırma veya basılı GelMA yapıları izleyerek ilgili tedavi ye kullanılmak üzere potansiyeldir. Tamamen kısa bir süre içinde dondurulmuş GelMA eritmek kolay olmaz.Eritme işlemini hızlandırmak için bir girdap karıştırıcı kullanılabilir. Her biyomalzeme GelMA'nın özel özelliklerini kullanacaktır. Ben yeni bir chemer düzgün baskı yaparken kritik klima ne bir dolaşmak gerektiğini önerdi.İşlem ayrıntıları yazdırma yordamlarının başarısını belirler. Bu nedenle diğer araştırmacılarla paylaşmak için görsel bir gösteri seçiyoruz. Mikroküreler imal etmek için zemin ve pozitif kutuplar ile iki metal halka elektrotlar bağlayarak başlar.Halka elektrotun altına yüksek voltajla bağlanan metal plakayı ve damlacık alıcısı olarak metal plakaüzerine silikon yağı içeren bir Petri kabı yerleştirin. Dondurulmuş kurutulmuş GelMA ve LAP ve DPBS sterilite için 0,22 mikrometre filtre ile filtre eriterek biyo-mürekkep hazırlayın sonra 15 dakika boyunca 37 derece santigrat su banyosunda ısıtın. MDA-MB-231 hücrelerini üç mililitre yüzde 0,25 tripsin ve yüzde 0,02 EDTA çözeltisi ile 37 santigrat derecede üç dakika ayırın.Hücreleri 15 mililitrelik bir tüpe aktarın ve 100 kez G'de beş dakika santrifüj edin. Supernatant çıkarın ve yavaş yavaş yukarı ve aşağı hava kabarcıkları önlemek için emin borulama tarafından hazırlanan biyo-mürekkep bir mililitre ile hücreleri karıştırın. Üç mililitre steril şırınga içine biyo-mürekkep ve hücre karışımı bir mililitre aspire.Biyo-mürekçeyi basınçlı hava nın kuvveti ile besleyin ve şırıngayı fikstüre koyun. Yüksek voltaj gücünü açın ve voltajı sıfırdan dört kilovolta ayarlayın. Aynı anda silikon yağı beş mililitre GelMA damlacıkları çapraz bağlantı için 405 nanometre dalga boyu ışığı açın.Silikon yağı nın çoğundan kurtulmak için Petri kabını decant ve kalan yağ ve mikrosferleri 15 mililitrelik bir santrifüj tüpüne aktarmak için bir kaşık kullanın. DPBS beş mililitre ekleyin ve karışımı santrifüj tüp sallamak 100 kez G ve supernatant kaldırın. Mikroküreleri DMEM ile petri kabına aktarın ve üç gün boyunca 37 santigrat derecede ve yüzde beş karbondioksitle kültürleyin.Üç gün sonra orta atın ve DPBS ile mikroküreler yıkayın. Oda sıcaklığında 30 dakika boyunca %4 PFA'nın iki mililitresi ile düzeltin ve PFA'yı atın ve yıkamayı tekrarlayın. Oda sıcaklığında beş dakika boyunca yüzde 0.5 non-iyonik yüzey aktif iki mililitre ile hücreleri permeabilize yüzey aktif atmak ve DPBS ile mikroküreler yıkayın.Sonraki leke TRITC-phalloidin ile hücreleri 30 dakika sonra DAPI karanlıkta 10 dakika boyaları atarak ve dpbs ile her boyama sonra küreler yıkama. Mikroküreleri konfokal floresan mikroskobuyla görüntüleyin. Sterilsodyum aljinat tozunu deiyonize suda yüzde iki ağırlıkta hacim oranına göre çözün.Daha önce açıklandığı gibi steril biyo-mürekkep çözeltisi hazırlayın sonra 15 dakika boyunca 37 derece santigrat su banyosunda biyo-mürekkep ve sodyum aljinat ısı. MDA-MB 231 hücreleri için daha önce açıklanan prosedüre göre trypsinize ve santrifüj bMSC'ler supernatant sıvıyı çıkarır ve hücre peletini GelMA biyo-mürekvinin 2 mililitresi ile yeniden askıya alın. 10 mililitreşile biyo-mürekkep hücre karışımının iki mililitresini aspire edin ve sodyum aljinat karışımından iki mililitrebaşka bir şırınga içine yerleştirin.Çözümleri dakikada 50 mikrometre, dakikada 350 mikrometre de sodyum aljinat ile iki şırınga pompası biyo-mürekkeple besleyin. Şeffaf tüpü ışınlamak ve GelMA liflerini çapraz bağlamak için 405 nanometre dalga boyu ışığını açın. Lifleri almak ve bir kaşıkla toplamak için bir Petri çanak kullanın.Lifleri DMEM/F12 ile bir tabağa aktarın ve üç gün boyunca 37 santigrat derece ve yüzde beş karbondioksit le kültürleyin. Hücreler bir konfokal floresan mikroskobu altında lifleri gözlemlemek için daha önce açıklanan yönergeleri izleyin. Dondurulmuş kurutulmuş GelMA ve LAP ve DPBS çözün ve baskı doğruluğunu artırmak için çözüm içine macenta yenilebilir pigment ekleyin.Çözeltiyi sterilite için 0,22 mikrometrefiltreden geçirin ve 37 derece lik su banyosunda 15 dakika ısıtın. CAD yazılımı ile 3B modelleri oluşturun ve model belgelerini uygulanan DLP biyoyazıcının üst yazılımına aktarın. Biyoyazıcının çukuruna hazırlanan biyo-mürekkep ten mililitre ekleyin.Yazdırma parametrelerini makale yönergelerine göre ayarlayın ve yazdırmaya başlayın. Tamamlandığında biyoyazıcıdan yazdırılan yapıyı çıkarın ve bir Petri kabına DPBS'ye batırın. Daha önce açıklandığı gibi MDA-MB 231 hücrelerini ayırın ve pelet.İki mililitre DMEM ile yeniden askıya alın ve süspansiyonu yazdırılan yapıya ekleyin. Kültür üç gün boyunca 37 santigrat derece ve yüzde beş karbondioksit hücreleri daha sonra açıklandığı gibi bir konfokal floresan mikroskop ile gözlem için yapıları hazırlamak. GelMA'yı hacimlikine yüzde 10, hacim LAP çözümüne yüzde 0,5 ağırlık hazırlayın ve ardından 0,22 mikrometre filtreden filtreleyin.JElatin tozunu UV ışığı altında 30 dakika sterilize edin ve %5 ağırlıkta JelMA LAP çözeltisine hacim oranına ekleyin. Karışımı 37 derece lik su banyosunda 15 dakika ısıtın. Hazırlanan biyo-mürekkep ile kalıpları doldurun ve 30 dakika boyunca dört derece santigrat buzdolabında yerleştirin.Kalıplardan kısmen çapraz bağlanmış hidrojel levhaları çıkarmak için bir bıçak kullanın. 2D kalıplı hidrojel levhaları birleştirin ve 405 nanometrede bir dakika Boyunca ışınlayarak GelMA ile bağlayın. Detach ve pelet HUVECs DMEM iki mililitre ile hücreleri karıştırın ve meme ve şırınga ile mikrokanal içine süspansiyon enjekte.Önümüzdeki üç saat boyunca her 15 dakikada bir çipi ters çevirerek düzgün ve tam hücre oturması elde edin. Kültür 37 santigrat derece ve yüzde beş karbondioksit dmem üç gün boyunca bir Petri çanak cips sonra morfolojik gözlem için hazırlamak. GelMA damlacıkları alıcı silikon yağı içine düştüğünde kuyrukları olmadan standart bir küresel şekil tuttu.Yüksek voltajlı elektrik alan kuvvetini yaşayan kapsüllü hücreler, elektro destekli üretim yönteminin biyouyumluluğunu doğrulayan yayılma yeteneklerini korumuştur. Bir DLP biyo yazıcı burun kulağı ve çok oda gibi daha karmaşık şekiller ile GelMA yapıları imal etmek için seçildi. Tohumlu HUVECs GelMA malzemelere bağlı ve çapraz bağlı GelMA yapıların yüzeyinde bu uygulama doku mühendisliği için potansiyel olduğunu gösteren yayıldı.GelMA tabanlı mikroakışkan çipler imal etmek için iki kez çapraz bağlama stratejisi kullanılmıştır. Çeşitli mikrokanallı yongalar isteğe bağlı olarak farklı kalıplar tasarılarak inşa edilmiş ve HUVEC'ler kanallarda tohumlanmış ve makroskopik damar şeklini oluşturan kanal duvarına eklenmiştir. Mikroküreler imal edilirken yüksek gerilim kaynağı uygulanır.Araştırmacılar devreyi önce incelemeli ve açığa çıkan milibarlara dokunup operatörleri korumalı veya hücreleri kısa devre hasarından uzaklaştırmalıdır. Ultrasonik su tabanı hak hızı hızlandırmak için başka bir seçim olabilir. Kesinlikle bu katkı bizim laboratuvarda GelMA 3D biyobaskı yöntemleri özetlenmiştir.Araştırmacılar video ya da geliştirmek veya daha fazla biyomedikal gereksinimleri hizmet için baskı stratejileri genişletmek bakın olabilir.

protocols-3d-bioprinting-gelatin-methacryloyl-hydrogel-based

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biyomühendislik

Video, bir biyomürekkep çözeltisinde süspanse edilmiş astrositleri kullanarak 3D biyo-baskılı bir yapı oluşturma sürecini göstermektedir. Biyobaskılı yapı, çapraz bağlandıktan sonra, astrosit yapışmasını ve yayılmasını kolaylaştırarak nöral benzeri doku oluşturur.

Murin Kortikal Astrositlerin 3D Biyobaskısı İçin Bir Yöntem

Birlikte işlevsel ve uygun bir 3-D doku yapıları in vitro tarama uygulamalarında kullanılmak üzere bioprinted edilebildiği bir doku taklit hidrojel bioink sağlayan bir protokol kümesi tarif eder.

Bioprinting cellularized dokuya özel Hidrojel Bioink kullanılarak dahil edilmesi

Biz bir bioprintable aljinat/jelatin bioink gömülü ölümsüzleştirdi tümör ve fibroblast hücreleri içeren türdeş olmayan meme kanseri modeli geliştirilmiştir. Model vivo içinde tümör microenvironment recapitulates ve çok hücreli tümör pulcuklarının, kavrama tumorigenesis sürüş mekanizmaları içine verimli oluşumunu kolaylaştırır.

Bioprintable aljinat/jelatin hidrojel 3D Vitro Model sistemleri hücre küresel oluşumu teşvik

Burada, kapsüllü hücrelerin sedimantasyonunu önlemek için sıvı benzeri biyoinkler (düşük viskoziteli jelatin metakrilopil) için çok katmanlı modifiye edilmiş yeni bir strateji geliştirdik.

Homojen Hücre Dağılımı için Üç Boyutlu Biyobaskıda Çok Katmanlı Hidrojel Bioink'in Kullanılması

Burada, merkezi sinir sistemindeki astrositlerin işlevselliğini ve nörolojik hastalık ve tedavilerde glial hücreleri içeren mekanizmaları incelemek için nöral benzeri dokuların biyofabrik olarak tanımlanması için 3D biyobaskı murine kortikal astrositlerin bir yöntemini rapor ediyoruz.

Mühendislik Nöral Benzeri Dokular için Murine Kortikal Astrositlerin 3D Biyobaskı

Bu protokol, jelatin bazlı granüler bir destekte bir kalsiyum fosfat mürekkebi biriktirerek kemik benzeri yapılar üretmek için bir 3D baskı tekniğini açıklar. Baskılı kemik analogları, baskının doğrudan toplanması veya multifazik yapılar için canlı bir hücre matrisi içinde çapraz bağlanma esnekliği ile serbest formda biriktirilir.

Kemik Analoglarının Üretimi için Hücre Yüklü Süspansiyonlarda Seramik Çok Yönlü Biyobaskı

Hidrojel oluşumu sırasında kesme işlemi, kesme kuvvetlerinin giderilmesini takiben kesme inceliğinde ancak hızla yeniden yapılandırılan mikrojel süspansiyonlarının üretilmesiyle sonuçlanır. Bu tür malzemeler, biyobaskı kompleksi, hücre yüklü yapılar için destekleyici bir matris olarak kullanılmıştır. Burada, destekleyici yatağın ve uyumlu biyomürekkeplerin üretiminde kullanılan yöntemler açıklanmaktadır.

Askıda 3D biyobaskı için jelasyon sırasında kesme işlemi ile oluşturulan agaroz sıvı jelleri

Bu makalede, mikroakışkan cihazlar kullanılarak yüksek verimli jelatin metakriloil mikrojel üretimi, mikrojellerin yeniden askıya alınabilir toza (mikro-aerojeller) dönüştürülmesi, granüler hidrojel iskeleleri oluşturmak için mikrojellerin kimyasal montajı ve 3D biyobaskı için korunmuş mikroporoziteye sahip granüler hidrojel biyomürekkeplerinin geliştirilmesi için protokoller açıklanmaktadır.

Jelatin Metakriloil Granül Hidrojel İskeleleri: Yüksek Verimli Mikrojel İmalatı, Liyofilizasyon, Kimyasal Montaj ve 3D Biyobaskı

Bu makale, hücre dışı matris sertleşmesini ve fibroblast aktivasyonunu incelemek için fototize edilebilir hidrojellerin 3D biyo-baskısının nasıl yapılacağını açıklamaktadır.

Fibroblast Aktivasyonunu İncelemek için 3D Biyobaskı Fototable Hidrojeller

Bu çalışma, dikkate değer geri dönüşümlü sıkışma-sıkışma giderme geçiş özellikleri sergileyen yeni bir κ-İrlanda yosunu alt mikrojel süspansiyon banyosunu tanıtmaktadır. Bu özellikler, gömülü 3D biyobaskıda biyomimetik doku ve organların inşasına katkıda bulunur. Kalp/özofagus benzeri dokuların yüksek çözünürlüklü ve hücre büyümesi ile başarılı bir şekilde basılması, yüksek kaliteli biyobaskı ve doku mühendisliği uygulamalarını göstermektedir.

κ-Carrageenan Sub-Microjel Ortamı Kullanılarak Doku Benzeri Yapıların Gömülü Biyobaskısı

Öğrenin, GelMA hidrojel bazlı bioinklerle 3D biyobaskı stratejilerini. Bu yöntem, doku mühendisliği ve organ hasarı tedavisi için biyomedikal uygulamalara katkı sağlar.

Jelatin Metacryloyl Hidrojel Bazlı Bioinks 3D Biyobaskı Protokolleri

Daha fazla video keşfet