Name: Sıçanlarda Kompleks Bölgesel Ağrı Sendromu Tip-I kronik Post-Iskemi Ağrı Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-01-21T14:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 12 s
Description: Öğrenin, sıçanlarda kronik post-iskemi ağrı modeli kurarak kompleks bölgesel ağrı sendromu tip-I mekanizmalarını inceleyin. Bu yöntem mekanik ve termal aşırı duyarlılık yanıtlarını değerlendirmeye olanak tanır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu proje Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81873365 ve 81603676), Zhejiang İl Doğa Bilimleri Fonları Seçkin Genç Akademisyenler (LR17H270001) ve Zhejiang Çin Tıp Üniversitesi araştırma fonları ( Q2019J01, 2018ZY37, 2018ZY19).

Hayvan protokolleri Zhejiang Çin Tıp Üniversitesi Hayvan Etik Komitesi tarafından onaylandı.
1. Hayvanlar
<ol><li>Şangay Laboratuvar Hayvan Merkezi'nden erkek Sprague-Dawley (SD) sıçan (280-320 g, 8-10 hafta) alın. Ev Zhejiang Çin Tıp Üniversitesi Laboratuvar Hayvan Merkezi'nde hayvanlar. Üreme koşullarının 12 saat/ 2h açık/koyu çevrimiçermesi ve sıcaklığı 24 °C'de sabit tutması gerektiğini unutmayın. Su ve gıda reklam libitumsağlayın. Bu çalışmada toplam 48 sıçan kullanıldığını unutmayın. Bir not, bu modelde, biz tüm süreç boyunca ağrı yanıtı gözlemlemek gerekir. Ağrı kesici uygulanırsa, o zaman başarıyla ağrı modeli kurmak değildir. Deneylerden sonra fareler kurban edilir.</li>
</ol>2. CPIP model kurulumu
<ol><li>Sodyum fenobarbital (50 mg/kg, intraperitoneal enjeksiyon [i.p.]) ile tüm sıçanları (sahte ve CPIP model grupları dahil) anestezik. Gerekirse 20 mg/kg/h fenobarbital [i.p.] ile anesteziyi koruyun. Her hayvanın reflekslerini, arka patisini veya kuyruk ucunu forceps kullanarak çimdikleyerek kontrol edin. Farelerin model kurulmadan önce tepki vermediğinden emin olun. İşlem sırasında kuruluk önlemek için gözlere veteriner merhem yerleştirin. Aşağıdaki işlem için 37 °C'de tutulan ısıtılmış bir ped üzerine anestezili sıçanları yerleştirin.</li>
	<li>
Arka patinin iskemi ve reperfüzyonu
	<ol>
<li>Sıçan anestezi sonra gliserol ile sağ arka pençe ve ayak bileği yağlamak.</li>
		<li>7/32" (5,5 mm) dahili çapı 1,5 mL Eppendorf borunun daha büyük tarafına (kullanmadan önce kopan kapakla) bir Nitril 70 Durometre O-halkası kaydırın. Dikkatle alt ulaşana kadar içi boş Eppendorf tüp içine arka pençe takın.</li>
		<li>Yavaş yavaş 3 saat için ayak bileği eklemi ve yer yakın sağ arka ekstremite için tüp O-halka kaydırın.</li>
		<li>Iskemi adımından sonra O-ring3 saat kesin. Sert recumbency korumak için yeterli bilinç iyileşene kadar dikkatle sıçan izleyin. Anestezi alan sıçan, tamamen iyileşene kadar diğer sıçanların şirketine geri yerleştirilmemelidir.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. Nosifesif davranış testleri
<ol><li>Bir örgü katta oturan şeffaf bir Pleksiglas odasına sıçan yerleştirin. Herhangi bir davranış testi nden önce fareyi 0,5 saat eve alışın.</li>
	<li>
Mekanik allodynia
	<ol>
<li>Test için von Frey filamentlerini (0.4, 0.6, 1.0, 2.0, 4.0, 6.0, 8.0, 15.0 ve 26.0 g filamentleri) kullanın. Testi orta filamentten (4.0 g) başlatın. Filamentleri arka patinin orta plantar yüzeyine dikey olarak uygulayın. Filamenti 5 s'ye kadar bükmek için uygun kuvveti hafifçe uygulayın. Uyaranlara yanıt olarak arka pençe ani bir geri çekilme bir nosfensive davranış olarak kabul edilir. Mekanik allodynia testini -3, -2, -1 günlerinde ve 13.</li>
		<li>Eşiği test etmek için yukarı-aşağı test yöntemini uygulayın. % 50 pençe çekilme eşiği (PWT)13,14,15hesaplamak için Dixon yöntemiuygulayın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Termal hiperaljezi
	<ol>
<li>Termal hiperaljeziyi incelemek için Hargreaves'in yöntemini kullanın. Doğrudan pençe çekilmesi gecikme (PWL) ölçmek için arka pençe bir ampul (50 W) yayılan ışık Demeti hedefliyoruz. Isıtma aşırı yaralanmayı önlemek için kesme eşik olarak 20 s ayarlayın.</li>
		<li>Her arka pençe için 5 dakika aralıklarla her test 3x tekrarlayın. Her sıçan16PWL olarak bu üç testlerin ortalama alın. Termal hiperaljezi testini -3, -2, -1 günlerinde ve 13.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Kapsaisin kaynaklı akut nositif davranış
	<ol>
<li>Dimethyl sulfoxide (DMSO) kullanarak kapsaisin stok çözeltisi (200 mM) hazırlayın ve arka pençe enjeksiyonu için steril fosfat tamponlu salin (PBS) içinde 1:1000'e kadar seyreltin. PBS'de son DMSO konsantrasyonu %0.1'dir (araç sadece PBS'de %0.1 DMSO içerir). 1 mL şırıngaya bağlı 30 G iğne kullanarak 50°L'lik bir hacimle arka patiye (intraplantar enjeksiyon) kapsaisin veya araç enjekte edin.</li>
		<li>Kayıt nocifensive davranış (yani, yalama, ısırma, yalama, yalama, yalama, yalama, yalama, yalama, yalama, yalama, ya da enjekte pençe flinching) enjeksiyon dan hemen sonra 10 dakika için bir video kamera kullanarak ve daha önce açıklandığı gibi bundan sonra ölçülen17,18,19.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Hind pençe ödemi değerlendirmesi: Pati çapındaki artışı ölçerek arka pati ödemini değerlendirin. Dijital kaliper ile ölçün ve bazal değer ile farklı zaman noktalarında gözlenen test değeri arasındaki farkı hesaplayın. Model inå aatÄ±ndan sonra 15 dk, 24 h, 48 h ve 72 h olarak pati kÄ±sÄ±ndaki deÄ iÅ iklikleri deÄ erlendirin.</li>
</ol>

<ol><li>Goh, E. L., Chidambaram, S., Ma, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complex+regional+pain+syndrome%3A+a+recent+update%5BTitle%5D)+AND+%22Burns%2C+Trauma%22%5BJournal%5D)">Complex regional pain syndrome: a recent update.</a> Burns, Trauma. 5 (1), 2(2017).</li>
<li>Birklein, F., Ajit, S. K., Goebel, A., Rsgm, P., Sommer, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complex+regional+pain+syndrome+-+phenotypic+characteristics+and+potential+biomarkers%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Neurology%22%5BJournal%5D)">Complex regional pain syndrome - phenotypic characteristics and potential biomarkers.</a> Nature Reviews Neurology. 14 (5), (2018).</li>
<li>Shim, H., Rose, J., Halle, S., Shekane, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complex+regional+pain+syndrome%3A+a+narrative+review+for+the+practising+clinician%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Anaesthesia%22%5BJournal%5D)">Complex regional pain syndrome: a narrative review for the practising clinician.</a> British Journal of Anaesthesia. , (2019).</li>
<li>Urits, I., Shen, A. H., Jones, M. R., Viswanath, O., Kaye, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complex+Regional+Pain+Syndrome%2C+Current+Concepts+and+Treatment+Options%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Pain%2C+Headache+Reports%22%5BJournal%5D)">Complex Regional Pain Syndrome, Current Concepts and Treatment Options.</a> Current Pain, Headache Reports. 22 (2), 10(2018).</li>
<li>Helyes, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transfer+of+complex+regional+pain+syndrome+to+mice+via+human+autoantibodies+is+mediated+by+interleukin-1-induced+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+National+Academy+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Transfer of complex regional pain syndrome to mice via human autoantibodies is mediated by interleukin-1-induced mechanisms.</a> Proceedings of National Academy Sciences of the United States of America. 116 (26), 13067-13076 (2019).</li>
<li>Coderre, T. J., Xanthos, D. N., Francis, L., Bennett, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+post-ischemia+pain+%28CPIP%29%3A+a+novel+animal+model+of+complex+regional+pain+syndrome-Type+I+%28CRPS-I%3B+reflex+sympathetic+dystrophy%29+produced+by+prolonged+hindpaw+ischemia+and+reperfusion+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Chronic post-ischemia pain (CPIP): a novel animal model of complex regional pain syndrome-Type I (CRPS-I; reflex sympathetic dystrophy) produced by prolonged hindpaw ischemia and reperfusion in the rat.</a> Pain. 112 (1), 94-105 (2004).</li>
<li>Coderre, T. J., Bennett, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+hypothesis+for+the+cause+of+complex+regional+pain+syndrome-type+I+%28reflex+sympathetic+dystrophy%29%3A+pain+due+to+deep-tissue+microvascular+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22Pain+Medicine%22%5BJournal%5D)">A hypothesis for the cause of complex regional pain syndrome-type I (reflex sympathetic dystrophy): pain due to deep-tissue microvascular pathology.</a> Pain Medicine. 11 (8), 1224-1238 (2010).</li>
<li>Klafke, J. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+and+chronic+nociceptive+phases+observed+in+a+rat+hind+paw+ischemia%2Freperfusion+model+depend+on+different+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Pflugers+Archiv+European+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Acute and chronic nociceptive phases observed in a rat hind paw ischemia/reperfusion model depend on different mechanisms.</a> Pflugers Archiv European Journal of Physiology. 468 (2), 229-241 (2015).</li>
<li>Tang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interaction+between+astrocytic+colony+stimulating+factor+and+its+receptor+on+microglia+mediates+central+sensitization+and+behavioral+hypersensitivity+in+chronic+post+ischemic+pain+model%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Behavioral+Immunology%22%5BJournal%5D)">Interaction between astrocytic colony stimulating factor and its receptor on microglia mediates central sensitization and behavioral hypersensitivity in chronic post ischemic pain model.</a> Brain Behavioral Immunology. 68, 248-260 (2018).</li>
<li>Kim, J. H., Kim, Y. C., Nahm, F. S., Lee, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Therapeutic+Effect+of+Vitamin+C+in+an+Animal+Model+of+Complex+Regional+Pain+Syndrome+Produced+by+Prolonged+Hindpaw+Ischemia-Reperfusion+in+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Medical+Sciences%22%5BJournal%5D)">The Therapeutic Effect of Vitamin C in an Animal Model of Complex Regional Pain Syndrome Produced by Prolonged Hindpaw Ischemia-Reperfusion in Rats.</a> International Journal of Medical Sciences. 14 (1), 97-101 (2017).</li>
<li>Yin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptome+profiling+of+dorsal+root+ganglia+in+a+rat+model+of+complex+regional+pain+syndrome+type-I+reveals+potential+mechanisms+involved+in+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pain+Research%22%5BJournal%5D)">Transcriptome profiling of dorsal root ganglia in a rat model of complex regional pain syndrome type-I reveals potential mechanisms involved in pain.</a> Journal of Pain Research. 12, 1201-1216 (2019).</li>
<li>Hu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TRPV1+Channel+Contributes+to+the+Behavioral+Hypersensitivity+in+a+Rat+Model+of+Complex+Regional+Pain+Syndrome+Type+1%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">TRPV1 Channel Contributes to the Behavioral Hypersensitivity in a Rat Model of Complex Regional Pain Syndrome Type 1.</a> Frontiers in Pharmacology. 10, 453(2019).</li>
<li>Dixon, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+analysis+of+experimental+observations%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Pharmacology+and+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Efficient analysis of experimental observations.</a> Annual Review of Pharmacology and Toxicology. 20, 441-462 (1980).</li>
<li>Chai, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electroacupuncture+Alleviates+Pain+Responses+and+Inflammation+in+a+Rat+Model+of+Acute+Gout+Arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-Based+Complementary+and+Alternative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Electroacupuncture Alleviates Pain Responses and Inflammation in a Rat Model of Acute Gout Arthritis.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2018, 2598975(2018).</li>
<li>Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+assessment+of+tactile+allodynia+in+the+rat+paw%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw.</a> Journal of Neuroscience Methods. 53 (1), 55-63 (1994).</li>
<li>Fang, J. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parameter-specific+analgesic+effects+of+electroacupuncture+mediated+by+degree+of+regulation+TRPV1+and+P2X3+in+inflammatory+pain+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sciences%22%5BJournal%5D)">Parameter-specific analgesic effects of electroacupuncture mediated by degree of regulation TRPV1 and P2X3 in inflammatory pain in rats.</a> Life Sciences. 200, 69-80 (2018).</li>
<li>Tai, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Involvement+of+Transient+Receptor+Potential+Cation+Channel+Member+A1+activation+in+the+irritation+and+pain+response+elicited+by+skin-lightening+reagent+hydroquinone%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Involvement of Transient Receptor Potential Cation Channel Member A1 activation in the irritation and pain response elicited by skin-lightening reagent hydroquinone.</a> Scientific Reports. 7 (1), 7532(2017).</li>
<li>Liu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TRPM8+is+the+principal+mediator+of+menthol-induced+analgesia+of+acute+and+inflammatory+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">TRPM8 is the principal mediator of menthol-induced analgesia of acute and inflammatory pain.</a> Pain. 154 (10), 2169-2177 (2013).</li>
<li>Liu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxidized+Phospholipid+OxPAPC+Activates+TRPA1+and+Contributes+to+Chronic+Inflammatory+Pain+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Oxidized Phospholipid OxPAPC Activates TRPA1 and Contributes to Chronic Inflammatory Pain in Mice.</a> PLoS One. 11 (11), 0165200(2016).</li>
<li>Terkelsen, A. J., Gierthmuhlen, J., Finnerup, N. B., Hojlund, A. P., Jensen, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bilateral+hypersensitivity+to+capsaicin%2C+thermal%2C+and+mechanical+stimuli+in+unilateral+complex+regional+pain+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Bilateral hypersensitivity to capsaicin, thermal, and mechanical stimuli in unilateral complex regional pain syndrome.</a> Anesthesiology. 120 (5), 1225-1236 (2014).</li>
<li>Drummond, P. D., Morellini, N., Finch, P. M., Birklein, F., Knudsen, L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complex+regional+pain+syndrome%3A+intradermal+injection+of+phenylephrine+evokes+pain+and+hyperalgesia+in+a+subgroup+of+patients+with+upregulated+alpha1-adrenoceptors+on+dermal+nerves%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Complex regional pain syndrome: intradermal injection of phenylephrine evokes pain and hyperalgesia in a subgroup of patients with upregulated alpha1-adrenoceptors on dermal nerves.</a> Pain. 159 (11), 2296-2305 (2018).</li>
<li>Minert, A., Gabay, E., Dominguez, C., Wiesenfeld-Hallin, Z., Devor, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+pain+following+spinal+nerve+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">Spontaneous pain following spinal nerve injury in mice.</a> Experimental Neurology. 206 (2), 220-230 (2007).</li>
<li>Kingery, W. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Capsaicin+sensitive+afferents+mediate+the+development+of+heat+hyperalgesia+and+hindpaw+edema+after+sciatic+section+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Capsaicin sensitive afferents mediate the development of heat hyperalgesia and hindpaw edema after sciatic section in rats.</a> Neuroscience Letters. 318 (1), 39-43 (2002).</li>
<li>Xu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+cannabinoid+receptor+2+attenuates+mechanical+allodynia+and+neuroinflammatory+responses+in+a+chronic+post-ischemic+pain+model+of+complex+regional+pain+syndrome+type+I+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Activation of cannabinoid receptor 2 attenuates mechanical allodynia and neuroinflammatory responses in a chronic post-ischemic pain model of complex regional pain syndrome type I in rats.</a> European Journal of Neuroscience. 44 (12), 3046-3055 (2016).</li>
<li>Coderre, T. J., Xanthos, D. N., Francis, L., Bennett, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+post-ischemia+pain+%28CPIP%29%3A+a+novel+animal+model+of+complex+regional+pain+syndrome-type+I+%28CRPS-I%3B+reflex+sympathetic+dystrophy%29+produced+by+prolonged+hindpaw+ischemia+and+reperfusion+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Chronic post-ischemia pain (CPIP): a novel animal model of complex regional pain syndrome-type I (CRPS-I; reflex sympathetic dystrophy) produced by prolonged hindpaw ischemia and reperfusion in the rat.</a> Pain. 112 (1-2), 94-105 (2004).</li>
<li>Weissmann, R., Uziel, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pediatric+complex+regional+pain+syndrome%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatric+Rheumatology+Online+Journal%22%5BJournal%5D)">Pediatric complex regional pain syndrome: a review.</a> Pediatric Rheumatology Online Journal. 14 (1), 29(2016).</li>
<li>Kim, H., Lee, C. H., Kim, S. H., Kim, Y. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+complex+regional+pain+syndrome+in+Korea%3A+An+electronic+population+health+data+study%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of complex regional pain syndrome in Korea: An electronic population health data study.</a> PLoS One. 13 (6), 0198147(2018).</li>
<li>Tang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+differences+in+complex+regional+pain+syndrome+type+I+%28CRPS-I%29+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pain+Research%22%5BJournal%5D)">Sex differences in complex regional pain syndrome type I (CRPS-I) in mice.</a> Journal of Pain Research. 10, 1811-1819 (2017).</li>
</ol>

Yazarlar bu çalışmada çıkar çatışması beyan etmezler.

Bu protokol, sıçanların arka ekstremitelerine iskemi/reperfüzyon uygulayarak bir sıçan CPIP modeli oluşturmak için ayrıntılı yöntemleri açıklamaktadır. Kapsaisin enjeksiyonuna yanıt olarak arka ekstremite görünümü, ödem, mekanik/termal hipersensitiviteler ve akut nosifensif davranışların değerlendirilmesini içerir.
Ekstremite iskemi/reperfüzyonu insan hastalarında CRPS-I'ye katkıda bulunan yaygın bir faktördür12. Bu protokol, insan CRPS-I6özetlem...

Kompleks bölgesel ağrı sendromu (CRPS) kırıklar, travma, cerrahi, iskemi veya sinir yaralanması1,2,3kaynaklanan kompleks ve kronik ağrı belirtileri reprents . CRPS 2 alt kategoriye ayrılır: CRPS tip-I ve tip-II (CRPS-I ve CRPS-II)4. Epidemiyolojik çalışmalar CRPS prevalansının yaklaşık 1:20005olduğunu ortaya koymuştur. CrPS-I, belirgin bir sinir hasarı gösterir, kronik ağrıya neden olabilir ve önemli ölçüde hastaların yaşam kalitesini etkiler. Mevcut tedaviler yetersiz terapötik etkileri göstermektedir. Bu nedenle, CRPS-I hala ele alınması gereken önemli ve zorlu bir klinik sorun olmaya devam etmektedir.
CRPS-I'ı taklit eden klinik öncesi bir hayvan modelinin oluşturulması, CRPS-I'in altında yatan mekanizmaların araştırılması için çok önemlidir. Bu sorunu gidermek için, Coderre ve ark. CRPS-I6özetlemek için arka ekstremite için uzun süreli iskemi ve reperfüzyon uygulayarak bir sıçan modeli tasarladı. İskemi/reperfüzyon yaralanmasının CRPS-I7'ninbaşlıca nedenlerinden biri olduğu bilinmektedir. Sıçan CPIP modeli birçok CRPS-I-benzeri belirtiler sergiler, hangi model kurulması ndan sonra erken aşamada arka ekstremite ödemi ve hiperemi dahil, kalıcı termal ve mekanik hipersensitiviteler ile takip6. Bu modelin yardımıyla, merkezi ağrı sensitizasyonu, periferik TRPA1 kanal aktivasyonu ve reaktif oksijen türleri üretimi, vb CRPS-I8katkıdaönerilmektedir ,9,10. Biz son zamanlarda başarıyla CPIP sıçan modeli kurulan ve dorsal kök gangliyonu RNA-sıralama yapıldı (DRGs) etkilenen arka pençe innerve11. CRPS-I11'inağrı hipersensitivitelerine aracılık eden bazı potansiyel mekanizmalar keşfettik. Ayrıca DRG nöronlarında geçici reseptör potansiyeli vanilloid 1 (TRPV1) kanalını CRPS-I12'ninmekanik ve termal hipersensitivitelerine önemli bir katkıda bulunan olarak belirledik.
Bu çalışmada CPIP fare modelinin oluşturulmasında yer alan ayrıntılı prosedürler açıklanmıştır. Ayrıca, sıçan CPIP modelini mekanik ve termal hipersensitivitelerin yanı sıra akut kapsaisin sorununa karşı duyarlılığını ölçerek değerlendirdik. Biz sıçan CPIP modeli CRPS-I dahil mekanizmaların daha fazla soruşturma için güvenilir bir hayvan modeli olabileceğini öneriyoruz.

<table><tbody><tr><td>1.5 ml Eppendorf tüpü</td><td>Eppendorf</td><td>22431021</td><td></td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D1435</td><td></td></tr><tr><td>Kapsaisin</td><td>APEXBIO</td><td>A3278</td><td></td></tr><tr><td>Dijital kumpas</td><td>Meinaite</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>O-ring</td><td>O-Halkalar Batı</td><td>Nitril 70 Durometre</td><td>7/32 inç iç çap</td></tr><tr><td>Plantar Test Cihazı</td><td>UGO Basile, İtalya</td><td>37370</td><td></td></tr><tr><td>von Frey filamentleri</td><td>UGO Basile, İtalya</td><td>NC12775</td><td></td></tr></tbody></table>

sıçanlarda kompleks bölgesel ağrı sendromu tip-i kronik post-iskemi ağrı modeli

Chronic Post-Ischemia Pain Model for Complex Regional Pain Syndrome Type-I in Rats

Kompleks bölgesel ağrı sendromu tip-I (CRPS-I) hastalar arasında şiddetli ağrıya neden olan ve çözülmemiş bir tıbbi durum olmaya devam eden nörolojik bir hastalıktır. Ancak, CRPS-I'ın altında yatan mekanizmalar henüz açıklanmadı. İskemi/reperfüzyonun CRPS-I'a neden olan önde gelen faktörlerden biri olduğu bilinmektedir. Uzun süreli iskemi ve arka ekstremitenin reperfüzyonu ile CRPS-I'ı taklit etmek için sıçan kronik iskemi sonrası ağrı (CPIP) modeli oluşturulmuştur. CPIP modeli CRPS-I mekanizmaları incelemek için iyi tanınan bir hayvan modeli haline gelmiştir. Bu protokol, anestezi de dahil olmak üzere CPIP sıçan modelinin kurulmasında yer alan ayrıntılı prosedürleri açıklar, ardından arka ekstremitenin iskemi/reperfüzyonu. Sıçan CPIP modelinin özellikleri, arka ekstremitenin mekanik ve termal hipersensitivitelerinin yanı sıra akut kapsaisin enjeksiyonuna verilen nosifensive yanıtları ölçülerek daha da değerlendirilir. Sıçan CPIP modeli, arka ekstremite ödemi ve hiperemi de dahil olmak üzere, kuruluşundan sonra erken evrede, kalıcı termal ve mekanik hipersensitiviteler ve akut kapsaisin enjeksiyonuna karşı artan nosifensive yanıtları da dahil olmak üzere çeşitli CRPS-I benzeri belirtiler sergiler. Bu özellikler crps-I'de yer alan mekanizmaların daha fazla araştırılması için uygun bir hayvan modeli haline getirmelidir.

Ayak bileği üzerine O-halka yerleştirdikten sonra, ipsilateral arka pençe deri siyanoz gösterdi, doku hipoksi bir göstergesi (Şekil 1A). O-halkakestikten sonra, ipsilateral arka pençe kan ile doldurmaya başladı ve hiperemi yoğun bir işareti gösterdi sağlam şişlik gösterdi (Şekil 1A). Pati şişmesi yavaş yavaş azaldı ve iskemik / reperfüzyon prosedürü (Sidak post-hoc testi ile iki yönlü ANOVA, Şekil 1...

Burada verilen kronik post-iskemi ağrı (CPIP) bir hayvan modeli kurmak için adımları ayrıntıları bir protokoldür. Bu insan kompleks bölgesel ağrı sendromu tip-I taklit iyi tanınan bir modeldir. Mekanik ve termal hipersensitiviteler daha da değerlendirilir, ayrıca CPIP sıçan modelinde gözlenen kapsaisin kaynaklı nosifensif davranışlar.

Sıçanlarda Kompleks Bölgesel Ağrı Sendromu Tip-I kronik Post-Iskemi Ağrı Modeli

Complex regional pain syndrome type-I (CRPS-I) is a neurological disease that causes severe pain among patients and remains an unresolved medical ...

CRPS I'in altında yatan mekanizma hala belirsizliğini koruyor. CRPS'yi taklit eden bir preklinik hayvan modelinin oluşturulması CRPS I.The rat CPIP modelinin altında yatan mekanizmaları keşfetmek için çok önemli olacaktır. Model ininden sonra kalıcı termal ve mekanik hipersensitiviteler takip eder.Sodyum fenobarbital ile tüm sıçanlar anestezi ile başlayın. Fareler düzgün kendi arka pençe veya kuyruk forceps ile pinching tarafından anestezi olduğundan emin olun. Ve veteriner merhemini gözlere yerleştirin.İşlem sırasında fareyi 37 derece ısıtılmış ped üzerinde tutun. Gliserol ile sağ arka pençe ve ayak bileği yağlamak. Daha sonra bir nitril 70 durometre O halkasını bir nokta beş mililitrelik tüpün daha büyük tarafına kaydırın ve snap kapağı kesilmiş.Dikkatle alt ulaşana kadar içi boş tüp içine arka pençe ekleyin. Yavaş yavaş ayak bileği eklemi yakın sağ arka bacak için tüp O halkaslayt. Ve üç saat orada bırak.Iskemi neden olmamalıdır kırık bir O halkası dışında, sıçanların sahte gruba aynı tedavi uygulayın. Üç saat sonra, O halkasını kesin ve kıç recumbency korumak için yeterli bilinç yeniden kazanAna kadar sıçan izlemek. Anesteziden tamamen iyileşene kadar fareyi diğer farelerin yerine yerleştirmeyin.Bir örgü zemin üzerinde şeffaf bir pleksiglas odasına sıçan yerleştirin ve herhangi bir davranış testi önce 30 dakika boyunca çevreye sıçan alışkanlık. Mekanik allodynia için sıçan test etmek için von frey filamentler kullanın. Arka patinin orta plantar yüzeyine dikey olarak uygulayarak orta filamentten teste başlayın.Filamenti beş saniyeye kadar bükmek için uygun kuvvet uygulayın. Pençean ani bir geri çekilme, nosifif bir davranış olarak kabul edilir. Mekanik allodynia testini üçüncü, iki, bir ve her gün 13.Eşik ve yüzde 50 pençe çekilme eşiği hesaplamak için dickson yöntemi test etmek için aşağı test yöntemi uygulayın. Termal hiperaljezi için test etmek için, doğrudan arka pençe 50 watt ampul yayılan ışık ışını nişan layarak hargreaves yöntemini kullanın. Aşırı yaralanmaları önlemek için kesme eşiği olarak 20 saniye ayarlayarak pençe çekilmesi gecikmesini ölçün.Her arka pençe için beş dakikalık aralıklarla her testi üç kez tekrarlayın ve pençe çekilmesi gecikmesi olarak ortalamayı alın. Termal hiperaljezi testini üçüncü, iki, bir ve her gün 13. Kapsaisin indüklenen akut nositif davranışı test etmek için, DMSO ile 200 milimolar kapsaisin stok çözeltisini hazırlayın ve enjeksiyon için PBS'de 1'den 100'e kadar seyreltin.Kapsaisin cilt, gözler ve solunum eklem tahrişine neden olabilir bir reaktif, . Kapsaisin solüsyonu hazırlarken maske ve gözlük takmak önemlidir. Sonra bir mililitre şırınga bağlı bir 30 gauge iğne kullanarak arka pençe içine kapsaisin veya bir araç 50 mikrolitre enjekte.Enjeksiyondan sonra 10 dakika boyunca bir video kamera kullanarak enjekte edilen pençeyi yalama, ısırma veya fırlatma gibi nosfensive davranışı kaydedin. Modelin kurulmasından sonra 15 dakika, 24 saat, 48 saat ve 72 saat pençe çapındaki artışı ölçerek arka pati ödemini değerlendirin. Ayak bileğiüzerinde O halka yerleştirdikten sonra, ipsilateral arka pençe deri siyanoz gösterdi, doku hipoksi bir göstergesidir.O halkası kestikten sonra, pençe kan ile doldurmaya başladı ve güçlü şişlik gösterdi, yoğun hiperemi gösteren. Şişlik yavaş yavaş azaldı ve işlemden 48 saat sonra normale döndü. Modelin kurulmasından bir gün sonra, CPIP grubunun ipsilateral arka pençesi gözlem süresinin 13 gün boyunca devam eden bariz mekanik allodynia sergiledi.CPIP grubunun kontralateral arka pençede de 13 gün boyunca mekanik hiperaljezi sergilendi. Termal hiperaljezi ölçüldüğünde, CPIP sıçanlarının çift taraflı arka pençeleri, sahte grup sıçanlara kıyasla zararlı termal uyaranlara yanıt olarak çekilme gecikmesüresini önemli ölçüde azaltmıştır. İpsilateral arka patinin termal hiperaljezisi gözlem süresinin sonuna kadar devam ederken, kontralateral arka patinin termal hiperaljezisi yedi gün sürdü.Sham ve CPIP grupları kapsaisin enjeksiyonu ile nosifif davranış açısından test edildi. Bir araca enjekte edildiğinde, sahte grup hafif bir nosfensive yanıt gösterdi ve CPIP grubu önemli ölçüde daha yüksek bir yanıt gösterdi. Daha da önemlisi, CPIP sıçanlar sham grubuna göre kapsaisin enjeksiyonu için önemli ölçüde daha yüksek tepkiler gösterdi, Hangi CPIP sıçanlar crps ile insan hastalara benzer bir fenomen sergilemek düşündürmektedir I.By bu işlem, sıçanlar önce ve model kurulması sırasında anestezi edilir.Iskemi ve Human CRPS I tarafından kurulan bu protokolde tanımlanan CPIP sıçan modeli simitance gibi. Bu modellerin aileleri, CRPS i hakkında daha fazla mekanizma araştırılabilir.

chronic-post-ischemia-pain-model-for-complex-regional-pain-syndrome

Research

JoVE Journal

Behavior

Davranış

Ayrılan Sinir Sakatlık hayvan modeli kalan sural sinir zedelemeden, siyatik sinirin kısmi denervasyon aşağıdaki tibial ve peroneal sinir dallarının lezyon periferik nöropatik ağrı bir fare modeli olarak burada açıklanmıştır. Mekanik allodini kaynaklanan davranış değişikliği von Frey filamentler miktarı.

Fare İndüklenmiş Mekanik allodini ayrılan sinir hasarı (SNI) Model

Cerrahi basitlik ve sağlam davranışsal sonuçları nedeniyle, siyatik sinirin kronik daralma nöropatik ağrı seçkin hayvan modelleri biridir. Ameliyat sonrası 24 saat içinde, ağrı aşırı duyarlılık kurulan ve kantitatif bir von Frey aesthesiometer (mekanik test) ve plantar analjezi metre (termal testi) kullanılarak ölçülebilir.

Siyatik Sinir Sıçanlarda Ağrı aşırı duyarlılık Test Kronik daraltma

Nöropatik ağrı somatosensory sistemini etkileyen bir yara ya da hastalık, bir sonucudur. Farelerde nöropatik ağrı "ağzı model" siyatik sinirin ana dal etrafında bir polietilen manşetin implantasyon oluşur. Mekanik alodinia von Frey filamentleri kullanılarak test edilir.

Farelerde Nöropatik Ağrı Siyatik Sinir cuffing Modeli

Bu el yazması, trigeminal nöropatik ağrıyı incelemek için bir kemirgen modelini tanımlamaktadır. Açıklanan yöntemler, sıçanın infraorbital sinirinin kronik daralma yaralanmasını gerçekleştirmek için cerrahi prosedürleri ve kalıcı ağrı ve allodinin göstergesi olan spontan ve uyarılmış davranıştaki değişiklikleri ölçmek için cerrahi sonrası davranış testlerini içerir.

Trigeminal Nöropatik Ağrı Eğitim için Rat adlı infraorbital Sinir (ION-CCI) kronik Daralma Yaralanma

Bir kemirgen modelinde [14C]-iyodoantipirin (IAP) alımını ölçmek ve merkezi inme sonrası ağrıda (CPSP) yer alan nöral substratların aktivasyonunu değerlendirmek için bir protokol sunuyoruz.

otoradyografik Ölçümler [<sup&gt; 14</sup&gt; Orta İnme Sonrası Ağrı ardından Rat Beyin C] -Iodoantipyrine

Modifiye cerrahi, hem ortak peroneal hem de sural sinirleri yaralamak için sadece bir ligasyon ve bir kesi gerektiren fare veya sıçan korunmuş sinir yaralanması modeli için basitleştirilmiş bir yöntemdir.

Farelerde Nöropatik Ağrının Modifiye Edilmiş Korunmuş Sinir Yaralanması Cerrahisi Modeli

Mekanik çatışmadan kaçınma testi, farelerde ağrı duyarlılığının refleksif olmayan bir okuması olarak kullanılır ve çeşitli fare ağrısı modellerinde duygusal-motivasyonel tepkileri daha iyi anlamak için kullanılabilir.

Farelerde Ağrı Davranışını Ölçmek için Mekanik Çatışmadan Kaçınma Testi

Farelerde sırt ağrısı modelinin basit, hızlı indüksiyonu için yöntemler burada idrar plazminojen aktivatörünün intraligament enjeksiyonu kullanılarak sağlanmaktadır.

Ürokinaz tipi Plazminojen Aktivatörü ile İndüklenen Fare Sırt Ağrısı Modeli

Parsiyel siyatik sinir ligasyonu, termal ve mekanik uyaranlara abartılı tepkilerle karakterize uzun süreli kronik nöropatik ağrıya neden olur. Nöropatik ağrının bu fare modeli, ağrı yönetimi için yenilikçi terapileri incelemek için yaygın olarak kullanılır. Bu makalede, standardizasyonu ve tekrarlanabilirliği artırmak için cerrahi prosedür ayrıntılı olarak anlatılmaktadır.

Kısmi Siyatik Sinir Ligasyonu: Yeni Tedavilerin Antinosiseptif Etkisini İncelemek için Kronik Nöropatik Ağrının Bir Fare Modeli

Farelerde distal infraorbital sinirin kronik daralma yaralanması, devam eden ağrı ve allodinin belirtileri olan dokunsal stimülasyona (von Frey saç stimülasyonuna aşırı duyarlılık) yanıt olarak spontan davranışta (artmış yüz bakım aktivitesi) ve nosifensif davranışta değişikliklere neden olur ve trigeminal nöropatik ağrı için bir model görevi görür.

Trigeminal Nöropatik Ağrıyı İncelemek İçin Farelerde Distal İnfraorbital Sinirin (DIoN-CCI) Kronik Daralma Hasarı

Bu protokol, insan nöroma ağrısını taklit etmek ve cerrahi tedavileri değerlendirmek için duyu sinirlerini kullanan tekrarlanabilir bir sıçan modeli sunar ve translasyonel nöroma araştırmaları için değerli bir araç sunar.

Safen Sinir Yoluyla Hedeflenen Kas Reinnervasyonunu Kullanarak Nöroma Ağrısı Tedavi Seçeneklerini İncelemek için Yeni Cerrahi Kemirgen Modeli

Öğrenin, sıçanlarda kronik post-iskemi ağrı modeli kurarak kompleks bölgesel ağrı sendromu tip-I mekanizmalarını inceleyin. Bu yöntem mekanik ve termal aşırı duyarlılık yanıtlarını değerlendirmeye olanak tanır.

Sıçanlarda Kompleks Bölgesel Ağrı Sendromu Tip-I kronik Post-Iskemi Ağrı Modeli

Daha fazla video keşfet