Çin Hamster Yumurtalık Hücre Yetiştiriciliğinde Yüksek İş-İş BulaMetli Otomatik Mikro-Biyoreaktörler Kullanılarak Proses Optimizasyonu

Bu videoda, kullanıcılar planlama ve deneyler veya DOE tasarımı yürütülmesi ile mikro biyoreaktör yazılımı içine tanıttı. Analizörler yardımcı vanalar da proses durumunu optimize etmek için gösterilmiştir. Otomatik mikro biyoreaktör yazılımıiçine modet dahil veri analizi için resmi olmuştur.

Çok sayıda deneme küçük ölçekte aynı anda planlanabilir ve yürütülebilir. Prosedürü gösteren Tamanna Nagraik, benim laboratuvar bir doktora öğrencisi olacaktır. Metin protokolünde açıklandığı gibi ana tarımda kültür öncesi prosedür ile başlayın.

Yeni bir deneme oluşturmak için Amber öz kültür yazılımını açın ve giriş sekmesinde yeni bir deneme oluşturun' seçeneğini tıklayın. Yeni deneme sekmesinde, denemenin yapılacağı tarihle birlikte denemenin adını girin. Ekim sırasında kullanılacak gemilerdeki kültür istasyonu için kontrol noktasını etkinleştirin.

Otomatik doe etiketleri de DOE denemeprogramlama sırasında kolay bir geçiş için etkinleştirilir. Sonraki sekmeye geçmek için sonraki"ne tıklayın. Damariçine ortam eklenmesi hakkında bilgi ayarlamak için, anti-köpük ile birlikte, inoculum, yem, ve glikoz, medya plaka eklemek etkinleştirmek"kontrol noktası.

Ortamı içeren plaka türünü, adını ve konumunu tanımlayın. Gemilere ortam ekleme'ye tıklayın. Gemilere eklenecek ortamın hacmini girin.

Plakadan damarlara medya transferinin haritalamasını tanımlayın. Sonraki sekmeye geçmek için sonraki"ne tıklayın. Medya bilgileri yazılıma aktarıldıktan sonra, yetiştirme koşullarını atayın.

Koşul ortamına tıklayın ve sıcaklığı, hedef DO'yu, üst PH limitini ve karıştırma RPM'sini doldurun. Sonra yukarı veya aşağı karıştırma tıklayın. Damarlara inoculum eklenmesini ayarlamak için hücre plakasını etkinleştirin.

Ortamı içeren plaka türünü, adını ve konumunu tanımlayın. Damarlara hücre ekleme'yi tıklatın. Aşılama zamanını ve damarlara eklenecek ortamın hacmini girin.

Hücreyi plakadan damarlara aktarmak için sıvı işleyicitarafından giden yolu tanımlayın. Sonraki sekmeye geçmek için sonraki"ne tıklayın. Yem, glikoz ve köpük önleyici eklemeyi ayarlamak için, besleme plakası eklemeyi etkinleştirin ve plaka türünü, adını ve konumunu tanımlayın.

Damarlara yem ekle'ye tıklayın ve damarlara eklenecek yem hacmini girin. Ekime bağlı olarak, yem ek sayısını ekleyin. Bu ekim için, reaktör her 24 saatte bir 72 saat sonra beslenir.

Eklenen hücrelerden gecikmeye veri girerek besleme arasındaki zaman gecikmesini el ile ekleyin. Beslenmenin ilk günü 72 saatlik aşılamadan sonra, bir sonraki gün 96 saat sonra, vesaire. Yemin plakadan damarlara transferinin haritasını tanımlayın.

Ekim sırasında örnekleme ayarlamak için, örnek plaka ekle"yi etkinleştirin ve plaka türünü, adını ve konumunu tanımlayın. Gemilerden numune alın" kontrol edin ve damarlardan çıkarılacak numunenin hacmini girin. Ekim boyunca hacmin 10 mililitrenin altına düşmemesini sağlayın.

Ekim sırasında alınacak numune sayısını ekleyin. Beslemeye benzer şekilde, her giriş numune noktası için numunenin damardan çıkarıldığı süreyi ekleyin. İşlemi kaydedin.

Şimdi idam için hazır. Son olarak, numunenin damarlardan plakaya transferinin haritalamasını tanımlayın. Amber 15 DOE Yazılımını açın.

Soruşturma"ya tıklayın ve yeni yi seçin. Create investigation"diyalog kutusuna yeni DOE soruşturmasının adını girin. DOE araştırmasına bir deneme atamak için, farklı parametreleri incelemek için oluşturulan tarifi açın.

Gözat'a tıklayın ve ilgili denemeyi seçin. Gemi etiketleri sütunda zaten kayıtlıdır. İstenilen DOE faktörünü tanımlamak için parametreyi seçin ve etiketlenmiş, DOE faktörü olarak etiketlenen sütuna tıklayın.

Yeni"yi seçin ve birimlerini, kısaltmayı ve etkenlerin alt ve üst sınırını ekleyin. Yanıtlar sekmesinde, verilerin analizi için dikkate alınacak değerleri tanımlayın. DOE yanıtlarını edit'i tıklatın ve yanıtın adını, kısaltmayı, birimleri ve minimum ve maksimum sınırları tanımlayın.

Yanıtlar tanımlandıktan sonra, her yanıt için kehribar değişkenini seçin ve tanımlayın. Bir yanıt otomatik olarak bir mikrop biyoreaktör değişkeni ile ilişkili olabilir. Açılan listeden gerekli değişkeni seçin.

Gereksinime bağlı olarak her yanıt için denklemi değiştirin. Minimum, maksimum, ilk, son ve ortalama veriler arasındaki seçimler. Tasarım oluşturmak için, deneme tasarım türünü seçmek ve çoğaltma ve merkez noktalarının sayısını eklemek veya kaldırmak için Tasarım Sihirbazı'nı kullanın.

Tasarım ve model seçimini belirleyen hedefi seçin. Metin protokolünde açıklandığı gibi Amber öz kültür Yazılımına aktarılabilen iş paketlerini bitirin ve oluşturun. Deneme sekmesinde, DOE denemesini oluştur'a tıklayın ve DOE yazılımı kullanılarak oluşturulan iş paketine göz atın.

Başlat'ı tıklatarak işlemi başlatın. Deneme yürütüldükten sonra, dışa aktarma DOE sonuçlarını kullanarak verileri dışa aktarın. Dışa aktarma DOE sonuçları"penceresi açılır ve kültür gemisi ve istasyonunu gösteren satırlar tabloda listelenir.

İstenilen satırları seçin ve tüm sonuçları depolamak ve daha fazla analiz için dosyayı kaydetmek için seçili satırları dışa aktarın veya deneysel verileri dışa aktarın. Sonuçlar sekmesine geçerek ve alma sonuçlarını seçerek verileri Amber DOE Modülüne aktarın. İstenilen veri dosyasına göz atın ve sonuçları analiz et'i tıklatın.

Otomatik mikrop biyoreaktörlerindeki hücre büyümesi çok amaçlı biyoreaktörlerle karşılaştırılabilir. Üç farklı ölçekten hücre konsantrasyonu karşılaştırırken, bu 15 mililitre otomatik mikrop biyoreaktör iki litrecam biyoreaktör taklit gözlenmiştir. Sallamak şişesi sonuçları da Amber yararı sergilemek için karşılaştırılır.

Farklı karıştırma hızı ve PH etkisi otomatik mikrop biyoreaktörler incelenir. Burada gösterilen canlı hücre konsantrasyonu bir karşılaştırma, veya VCC, ve farklı mikrop biyoreaktörler monoklonal antikor konsantrasyonu. PH 6.9'un VCC üzerindeki olumsuz etkisi görülebilir.

Ayrıca, PH 7.3'te PH 7.1 ile karşılaştırıldığında, hücrelerin büyümesi kültür altında önemli ölçüde düzeldi. Burada VCC ve monoklonal antikor konsantrasyonunun tepki kontur çizimleri gösterilmiştir. Değerler aynı PH ve farklı karıştırıcı hızına sahip kaplarda karşılaştırılabilir olup, bu işlem için toplanan karıştırıcı hızının proses çıkışı üzerinde önemli bir etkisi olmadığını gösterir.

Makineye verilen her talimat, denemenin yürütülmesi sırasında hata dan kaçınmak için dikkatle yazılmalıdır. Yazılım esnektir ve aynı anda bir dizi deney çalıştırabilir, böylece bir işlemi optimize etmek için gereken süreyi azaltır. Deney tasarımı biyoproses alanında yararlıdır, çünkü sonuçlar bilgiye dayalı süreç anlayışı verir ve bu da diğer organizmalara belirli bir ölçüde genişletilebilir.