Elektrikstimülasyon ile Sıçanlarda Akut Pontin Enfarktüsü Kurulması

Burada sunulan tek bir darbe ile elektrikstimülasyon yoluyla bir sıçan modelinde akut pontin enfarktüsü kurmak için bir protokoldür.

Fare pons infarktüsü kurmak için bir protokol sağlıyoruz. Bu pontin enfarktüs sıçan modeli kolayca yapıldı, kolayca çoğaltıldı ve son derece başarılı bir model. Elektriksel stimülasyon talamus gibi başka bir beyin bölgesinde enfarktüs yapmak için kullanılabilir.

Bu modeli gerçekleştirmek isteyen insanlar deneyden önce pontin özerkliğini öğrenmelidir. Ameliyattan önce, fareleri tartın ve eşlik eden metinde açıklandığı gibi davranış testlerine göre nörolojik performanslarını değerlendirin. Isıtma yastığını anesteziden hemen önce 37 dereceye ısıtın ve kafatası matkabını stereotaksik çerçeve nin üzerindeki tutucuya takın.

İlk anestezili sıçanda pedal refleksine yanıt eksikliğini onaylayın ve fareyi ısıtma yastığındaki eğilimli pozisyonda stereotaksik çerçeveye monte edin. Kafanın sabitlemesi için kulak çubuklarını kulak kanalının üzerine yerleştirin ve enjeksiyonun herhangi bir eğriliğini önlemek için kafatasının yatay tutulmasına dikkat edin. Hayvanın gözlerine merhem uygulayın ve kafatasından saç kaldırmak için bir mikro tıraş makinesi kullanın.

Çift taraflı kanthus çizgisinden posterior fontanelle arkasında 0,5 santimetre kafatasının orta hattı boyunca üç santimetrelik bir çizgi çizmek için bir işaretleyici kullanın ve işaretli çizgi boyunca bir orta çizgi kesi yapmak için bir neşter kullanın. Herhangi bir kan kaldırmak ve kafatası ortaya çıkarmak için deri flep her iki tarafında cerrahi bant bir parça yerleştirmek için bir pamuklu bez kullanın. Kafatasından herhangi bir bağ dokusunu nazikçe çıkarmak ve bregma'yı bulmak için %0,9 sodyum klorür ile ıslatılmış yeni bir bez kullanın.

Başlangıç noktası olarak bregma merkezi noktasını belirtmek için ince bir ipucu marker kalem kullanın, altı milimetre anterior posterior, iki milimetre medial lateral matkap yerleştirin. Dikkatle bir milimetre çapında kraniotomi gerçekleştirmek için matkap kullanın. Daha sonra, bir 22 gauge prob ile ucu kılıfıproksimal ucundan iki milimetre daha yerleştirilir ile bir 22 gauge prob ile değiştirildi.

Tabakaları beyne yedi milimetre yerleştirin ve sondanın üstü beyin yüzeyinin dokuz milimetre altında olana kadar sondayı kılıf boyunca ilerletin. Elektrotları bir elektrik uyarıcısına bağlayın ve anomu sondaya bağlayın. Sonra sıçan ın kulağına katot bağlayın.

Daha sonra, elektrik uyarıcı açın ve 4, 050 milisaniye, 50 volt voltaj ve dört miliamper için akım tek darbe genişliği ayarlayın. Cihazı beyinden çıkarmadan önce uyarılmadan sonra sondayı beş dakika pozisyonda bırakın. Kemik çimentosu ile kraniyotomi kapak ve yara kapatmak için 4.0 poliamid dikiş filamentler kullanmadan önce çimento kurumasını bekleyin.

Üç veya dört dikiş sonra, kravat 2-1-1 standart cerrahi düğüm. Sonra intraperitoneally penisilin 250 mikrolitre ile sıçan enjekte ve tamamen uyanık olana kadar her 15 dakikada bir sıçan izlemek onun kafese hayvan dönmeden önce. Bu analizde altı hayvan gösterildiği gibi ameliyata tabi tutuldu ve altı hayvan kontrol olarak tedavi edildi.

Bu görüntülerdeki beyin dilimleri grup başına bir sıçandan elde edildi. MRG taraması, enfarktüsün insan hastalarda anterolateral enfarktüsleri taklit eden pons temelinde yer olduğunu ortaya koymuştur. Yalıtımlı kılıf kullanıldığından kortekste, beyincikte veya orta beyinde enfarktüs gözlenmedi.

Difüzyon ağırlıklı görüntüler de akut pontin enfarktüsü ortaya. Ameliyat sonrası 24 saat enfarktüs doğrulamak için TTC boyama kullanıldı. Beklendiği gibi, enfarktüs hacmi kontrol grubuna göre cerrahi grupta anlamlı olarak daha yüksekti.

Davranış skorları ameliyat öncesi ve sonrası ölçüldü. Kontrol grubuyla karşılaştırıldığında, pontin enfarktüsü olan fareler sola doğru daireler çizdiler. Longa, Berderson, ekstremite yerleşimi, ışın dengesi ve yapışkan kaldırma somatosensoriyel test puanları arasında pontin enfarktüsü ve kontrol grubu sıçanlarda önemli farklılıklar gözlendi.

Herhangi bir beyin bölgesi elektriksel uyarılma yla yok edilecek.