Yetişkin Sıçanda Kompozit Rejeneratif Periferik Sinir Arabiriminin (C-RPNI) Imalatı

Protokolümüz, biyolojik periferik sinir arabiriminin kullanımı yoluyla afferent duyusal sinir stimülasyonu sağlanması nın yanı sıra eşzamanlı motor sinir sinyali amplifikasyonuna olanak sağlaması açısından önemlidir. C-RPNI aynı periferik sinir arayüzü içinde eşzamanlı motor kontrol ve duyusal geribildirim sağlar gibi bu teknik amputasyonları olanlar için bir yaşam benzeri protez cihazı sağlayabilir. Amputasyonlarla yaşayanların çoğu gelişmiş nöroprotezik cihazları terk eder çünkü cihazlar sezgisel kontrol den ve anlamlı duyusal geri bildirimden yoksundır.

Bu teknik hem sağlar hem de protez cihazının terkinini önleyebilir. Bu teknik, zayıf veya eksik uzuvları veya duyusal açıkları hassas ve sezgisel ekstremite kontrolü sağlayan geri bildirim sistemleri hakkında daha fazla bilgi sağlayan bireylere uygulanabilir. Hata payı çok az olduğu için periferik sinirlerüzerinde ameliyat yapmak zordur.

Yüksek kaliteli aletler kullanmak ve genellikle pratik yapmak başarıyı sağlamanın en iyi yollarıdır. Cerrahi teknikleri iletmek ve edebi bir biçimde öğrenmek inanılmaz derecede zordur. Yapı imalatında yer alan her bir adımı gözlemlemek, yöntemde ustalaşmanın anahtarıdır.

Bir deri grefti hazırlamak için, ayak çimdik yanıt eksikliği doğruladıktan sonra, anestezi sıçan gözlerine merhem uygulayın. Makas kullanarak, tüm alt arka bacak tıraş, ayak bileği bölgesi ve pençe yanları. Sıralı bir alkol-iodopovion çözeltisi ve alkol temizlemek ile pençe plantar yüzeyinde seçilen hindlimb dezenfekte.

Çıkarılabilir yuvarlak ince kum parlatma taş ile bir el mikro motor yüksek hızlı matkap kullanarak, böylece cilt yakmak için değil tuzlu su damlaları uygulayarak dakikada 4, 000 devir hızında epidermis kaldırmak için pençe plantar yüzey çapak. Altta yatan dermis kesin kanama ile parlak bir görünüme sahip olacaktır. Kan akışını yavaşlatmak için alt ekstremite bir turnike uygulayın ve keskin plantar cilt kaldırmak için bir numara 15 neşter kullanın.

Kurumasını önlemek için cildi tuzlu nemlendirilmiş gazlı bezin içinde yerleştirin ve kanamayı yavaşlatmak için kanayan ayak için gazlı bez sargısı uygulayın. Bir diseksiyon mikroskop altında deri yerleştirin ve deri greft derin tabakasıherhangi bir tendinöz ve bağ dokusu kaldırmak için mikroskalorkullanın. İnceltilmiş dermal greft biraz opak olmalı, sadece dermis içermeli ve yaklaşık 0,5 santimetre ölçülmelidir.

Sonra üretim inşa kadar tuzlu nemlendirilmiş gazlı bez yeni bir parça içine doku yerleştirin. Bir kas grefti hazırlamak için, diz hemen altında ayak bileği nin hemen üstünden alt arka bacak ön yönü boyunca uzunlamasına kesi yapmak için bir sayı 15 neşter kullanın. Altta yatan kasları ortaya çıkarmak için deri altı dokuyu inceleyin.

Kesinin distal kısmında, alt ekstremite kaslarının yatkın eklemelerini ortaya çıkarır. Tibialis anterior genellikle kasların en büyük ve en ön. Sadece altında ve bu kas posterior ekstansör digitorum longus yatıyor.

Bölgedeki diğer tendonları distal ekstansör digitorum longus tendon izole etmek için, tendon altında bir forseps her iki çatal eklemek ve tendon gezi neden yukarı basınç çıkarmak için forseps açın. Tendonun manipülasyonu tüm tonların aynı anda uzamasını neden olmalıdır. Bir distal tenotomi gerçekleştirmek için keskin iris makas kullanın ve tendinous kökeni bulmak için proksimal çalışan çevreleyen dokudan kas ayırmak için tenomoties kullanın.

Proksimal tendonu görselleştirilebildiği zaman, ikinci bir tenotomi yapmak ve bir tuzlu nemlendirilmiş gazlı bez kas grefti yerleştirmek için iris makas kullanın. Izolasyon ve ortak peroneal sinir hazırlanması için, bir uyluk tıraş ve sıralı alkol-Betadine-alkol temizlemek ile maruz kalan cilt dezenfekte. Anestezili sıçanı cerrahi bir mikroskop altında bir ısıtma yastığına yerleştirin ve kesiyi sadece distalden siyatik çentiklere, diz inferior kısmına kadar işaretleyin ve uyluk kemiğinden uzağa açılı.

Sonra altta yatan pazı femoris fasya ile işareti boyunca bir kesi yapmak için bir sayı 15 neşter kullanın. Dikkatle pazı femoris altında yatan alana pazı femoris kas ile incelemek. Ortak peroneal sinir belirlenmesini takiben, dikkatle diğer siyatik dallardan ortak peroneal sinir izole etmek için mikro ince uçlu çerseps ve mikrosikül kullanın.

Distal ve sinir diz yüzeyini haçlar noktada herhangi bir kalan bağ dokusu çıkarın, keskin mikrosseptif bir çift ile sinir transect. Sonra dikkatle ortak peroneal sinir kalan bağ dokusu serbest ve yaklaşık iki santimetre uzunluğunda sinir serbest etmek için proksial çalışır. Sinirler hassas ve küçük yanlış adımlar kalıcı fonksiyonel açıkları neden olabilir.

Sık uygulama, hassas cerrahi aletler ve ideal el konumlandırma ve destek bu tekniğin ustalaşmaanahtarıdır. C-RPNI yapı sını imal etmek için, kas greftini diseksiyon mikroskobunun altına yerleştirin ve tüm merkezi tendinöz dokunun yanı sıra epimiyumun küçük bir merkezi bölümünü nisbeten uçları bozulmadan bırakarak çıkarın. 8-0 kullanma naylon dikiş ve iki kesilen dikiş, sinirin her iki tarafında epimiyyum yoksun kas grefti alanına ortak peroneal sinirin transekted ucunun epineurium güvenli.

Tek bir 6-0 naylon femur uzak bakan sinir kas kavşak ile hem proksimal ve distal dikiş kesildi ile femur periost için kas grefti güvenli. 8-0 yerleştirin kas grefti epimysium inferior merkezi marjı nda naylon dikiş böylece kas grefti içinde sinir gevşeklik oluşturmak için ortak peroneal sinir epineüryum için güvence. Tamamen kas üzerinde istirahat dermis derin marjı ile sinir ve kas çoğunluğu kapsar böylece kas grefti üzerinde deri greft ilerler.

Kas sınırının ötesine uzanan herhangi bir dermis trim ve 8-0 kullanın naylon, kas greftine deri greftini çevresel olarak sabitlemek için sütürleri kesti. 5-0 kromik dikiş ile çalışan bir şekilde yapı üzerinde pazı femoris fasya kapatın ve çalışan moda 4-0 kromik dikiş ile üstteki cilt kapatın. Daha sonra bir alkol yastığı ile cerrahi alanı takas ve tam recumbency kadar izleme ile kafes arkadaşları ayrı gıda ve su kaynakları ile kurtarmak için izin vermeden önce antibiyotik merhem uygulayın.

Başarılı olursa, üç ay sonra yapılar cerrahi maruz kalma re-vaskülarize kas ve cilt ortaya çıkaracak ve konstrüktörler proksimal ile ortak peroneal sinir nazik sıkma görünür kas kasılması neden olacaktır. Histolojik analizler uygun cilt, sinir ve kas göstermelidir. İmmünoboyama da sırasıyla nöromüsküler kavşaklar ve duyusal son organlara motor ve duyusal sinir yeniden innervasyon ortaya çıkaracaktır.

Elektrofizyolojik testler, örneğin C-RPNI imalatından sonraki üç ve dokuz ay içinde, in vivo in vivo bu yapılar üzerinde yapılabilir. Burada, elektrofizyolojik testler sırasında elde edilen tek ve toplam bileşik kas etki potansiyelleri ve bileşik duyusal sinir eylem potansiyelleri grafiksel formatta gösterilmiştir. Kas greftinde suboptimal sonuçlar karakteristik bileşik kas eylem potansiyel dalga formu eksikliği zayıflatılmış sinyaller ile gösterilir.

Dermal bileşen düzeyinde suboptimal sonuçlar genellikle önemli arka plan gürültüsü ile dalga formunun sönümleme içerir. Kaliteli aletler hayati önem taşımaktadır. Makas keskin olmalı ve çerkesler zarar vermeden dermal greftler ve sinir son derece hassas bir işleme kolaylaştırmak için ince uçlu olmalıdır.

Bu yöntem, üretimden sonra elektrofizyolojik araştırmalarda, efferent ve afferent geri bildirim döngüleri hakkında daha fazla bilgi sağlayan sinyal izasyon yeteneklerini daha da karakterize etmek için kullanılabilir. C-RPNI duyusal geribildirim için izin vermesine rağmen, propriosepsiyon için kapalı döngü geribildirim sistemi kurulup kurulamayacağı belirsizdir. Şu anda bu soruyu laboratuarda ele alıyoruz.