Name: Renal Arter Darlığında Renin Regülasyonunun Modifiye İki Böbrek Bir Klipsli Fare Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-10-26T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 21 s
Description: Keşfedin farelerde renal arter darlığı oluşturmak için modifiye iki böbrek bir klipsli modeli. Bu yöntem, renal vasküler hipertansiyonda renin regülasyonunun moleküler mekanizmalarını anlamak ve yeni tedavi hedefleri belirlemek için güvenilir bir platform sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Araştırma, JAG'ye NHLBI Research Scientist Development Grant (1K01HL135461-01) tarafından desteklenmiştir. David Carmona-Berrio ve Isabel Adarve-Rengifo'ya teknik yardımları için teşekkür ederiz.

Fareler, Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIH) kılavuzlarını ve ABD Sağlık ve İnsan Hizmetleri Bakanlığı, Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu'nu izleyerek Vanderbilt Üniversitesi Tıp Merkezi (VUMC) Hayvan Bakımı Bölümü'nde barındırıldı ve bakıldı. Tüm hayvan prosedürleri, deneylere başlamadan önce VUMC Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylanmıştır.
1. Hayvan hazırlama ve diseksiyon
<ol><li>Ameliyata başlamadan yaklaşık 30 dakika önce ısıtma yastığının çimlendiricisini ve su pompasını açın.</li>
	<li>0,5 mm uzunluğunda poliüretan boruları keskin bir neşterle kesin. Bir manşet yapmak için uzunlamasına bir kesim yaparak çevrenin 0,2 mm'sini çıkarın. NOT: Bu, renal arter darlığı prosedürünün aşırı hassasiyet, detaylara dikkat ve sabır gerektiren kritik bir parçasıdır. Bir seferde birkaç parça poliüretan boru kesmeye çalışın. Tüm bu prosedürü mikroskop altında gerçekleştirin.</li>
	<li>Daha fazla ilerlemeden önce, cerrahi steril eldivenler ve cerrahi maske takın.</li>
	<li>6-8 haftalık C57BL/6 vahşi tip (WT) fareler kullanın. Herhangi bir cinsiyet önyargısından kaçınmak için eşit sayıda erkek ve dişi fare kullanın.</li>
	<li>Ameliyat yapmadan önce farelerin ağırlığını kaydedin. Poliüretan tüp ile renal arter darlığı yapmak için ideal ağırlık 18-22 g'dır. Fareleri nazikçe tutun ve anesteziyi enjekte ederken ajitasyon yapmayın. Ameliyat öncesi analjezi uygulayın (Ketofgen, 5 mg/kg vücut genişliği). NOT: Fareleri barınma odalarından ameliyat odasına aktarırken, ajitasyonu önlemek için onları büyük bir nezaket ve özenle taşıyın. Fare kafeslerinin bir araba yerine ellerde taşınması şiddetle tavsiye edilir.</li>
	<li>Fareleri intraperitoneal (I.P.) enjeksiyonlar yoluyla ketamin (100 mg / kg BW) ve ksilazin (10 mg / kg BW) karışımı ile anestezi altına alın.</li>
	<li>Tamamen anestezi uygulanana kadar fareyi kafesin içine geri yerleştirin. Farenin tamamen bilinçsiz hale gelmesi yaklaşık 4-5 dakika sürer. Farenin tamamen bilinçsiz ve ameliyat için hazır olup olmadığını kontrol etmek için kuyruğu veya ayak parmağını forseps ile sıkıştırın.</li>
	<li>Fareyi sırt üstü bir kağıt havlunun üzerine koyun. Saç büyümesinin ters yönünü takip eden elektrikli bir saç kesme makinesi kullanarak lateral karın kıllarını çıkarın. Cerrahi bölgeyi tıraş ettikten sonra, bölgeyi iyot (veya klorheksidin) içeren cerrahi bir ovma ile temizleyin ve ardından% 70 etanol (veya steril salin) ile durulayın.  3 kez tekrarlayın. NOT: Epilasyon prosedürü, ameliyat prosedürü sırasında herhangi bir saç parazitini ve saç kontaminasyonunu önlemek için belirli bir mesafede veya tercihen cerrahi prosedür tezgahından farklı bir tezgahta yapılmalıdır.</li>
	<li>Isıtma yastığını steril bir tabaka ile örtün. Fareyi cerrahi tezgaha getirin ve farenin sağ yan tarafına mikroskopa doğru bakacak şekilde steril tabakaya yerleştirin. Dolaşımdaki su ile 37 °C'lik sabit bir ped sıcaklığını koruyun.</li>
	<li>Tüm cerrahi ekipmanı içeren sterilize edilmiş torbayı açın. Diseksiyon yapan bir mikroskop ve steril keskin makas kullanarak, küçük bir yan kesi (13. torasik kaburgaya yakın, faredeki son kaburga) ve omurlardan yaklaşık 0,5 cm uzakta yapın. Bel omurları boyunca ilerleyin ve 1 inçlik bir kesi yapın.</li>
	<li>Böbreği açığa çıkarmak için cildi ve kası geri çekin.</li>
	<li>Renal arteri izole etmek için steril pamuklu çubuklar kullanarak çevredeki yağları temizleyin ve çıkarın. Kavisli forseps kullanarak renal siniri renal arterden izole edin.</li>
	<li>Sahte ameliyatı gerçekleştirirken, cildi kapatmak için dikişler uygulayın ve kapalı yaraya antibiyotik uygulayın, ardından ameliyat sonrası bakıma devam edin. Değilse, arteri stenose etmek için aşağıdaki bölüme devam edin. NOT: Her deney, cerrahi prosedürün kontrolleri olarak sahte hayvanlara sahip olmalıdır. Şam hayvanları, üzerine bir manşet yerleştirmeden renal arteri açığa çıkarmanın cerrahi prosedüründen geçen farelerden oluşur.</li>
</ol>2. Sağ renal arter darlığı
<ol><li>Sağ renal arterin altına iki naylon sütür yerleştirin, gevşek düğümler yapın ve ardından manşeti ana renal arterin etrafına böbrek ve aort bifurkasyonu arasında yaklaşık olarak eşit mesafeye yerleştirin.</li>
	<li>Naylon dikişleri kullanarak manşeti kapatın. Ameliyattan sonra dikişleri kaybetme olasılığını önlemek için her dikiş için dört düğüm yapın.</li>
	<li>Basit bir sürekli dikiş uygulayarak kastaki kesiyi kapatın.</li>
	<li>Cildi kapatmak için basit kesilmiş dikişler yapın.</li>
	<li>IACUC onaylı analjezikleri uygulayın. NOT: Her kullanımdan önce otoklav cerrahi aletleri. Aynı anda birden fazla ameliyat yapılıyorsa, kullanılan tüm aletleri steril bir alkol göstergesi ile silin ve her ameliyattan sonra 15-30 sn boyunca sıcak çimlendiriciye yerleştirin. Her fare için steril eldivenleri de değiştirin.</li>
</ol>3. Ameliyat sonrası bakım
<ol><li>Fareleri kafeslerine geri döndürün ve kafesi yarı açık, yarı kapalı, 2-3 saat boyunca dolaşımdaki bir su ısıtma yastığı olarak bırakın. Kafesin içine jel diyet kurtarma yiyecekleri ekleyin.</li>
	<li>Ağrı kesici (ketoprofen) ertesi gün intraperitoneal olarak (doz: 5 mg / kg BW) uygulayın.</li>
	<li>Fareleri önümüzdeki iki gün boyunca tartın; Bazı fareler ağırlıklarının% 20'sinden fazlasını kaybederse veterinere danışın ve uygun IACUC yetkili prosedürünü takiben hayvanın ötenazi yapılması gerekip gerekmediğine karar verin.</li>
	<li>Kızarıklık, şişlik, ağrı veya enfeksiyon açısından değerlendirmek için fareleri günlük olarak izleyin.</li>
	<li>Kurumsal IACUC politikalarına uygun olarak postoperatif komplikasyonlar için veteriner konsültasyonu isteyin.</li>
</ol>4. Doku hasadı
<ol><li>Cerrahi işlemden 3 hafta sonra doku hasadı. Her farenin ağırlığını kaydedin.</li>
	<li>IACUC onaylı bir prosedürle fareyi ötenazileştirin.</li>
	<li>Fareyi steril bir platforma diseksiyon yapmak için sırtüstü pozisyonda yerleştirin.</li>
	<li>Hareketi sınırlamak için uzuvları sabitleyin ve uzatın.</li>
	<li>Farelere% 70 etanol ile iyice püskürtün.</li>
	<li>Keskin makas kullanarak karın ve göğüs bölgesini açmak için orta hat kesisi yapın.</li>
	<li>Cildi ve periton duvarını geri çekin.</li>
	<li>Kalbi dikkatlice ortaya çıkarın ve sağ ventrikülü delin ve fareyi exsanguinate edin.</li>
	<li>Forseps kullanarak her iki böbreği de çıkarın. Böbrekler farelerin arkasında bulunur. NOT: Her iki böbreği de karıştırmayın. Stelsezli, sahte ve kontralateral böbreklerin farkında olun.</li>
	<li>Böbrek kapsülünü çıkarın, herhangi bir yağdan temizleyin ve her böbreğin ağırlığını ayrı ayrı kaydedin.</li>
	<li>Her iki böbreğin uzunlamasına bir bölümünü kesin ve daha sonra parafin gömme için işlenmek, in situ hibridizasyon (ISH) ve immünohistokimya (IHC) gerçekleştirmek için 4 ° C'de bir gecede% 4 PFA'ya sabitlenir. ISH ve IHC protokollerini rapor edildiği gibi takip edin23,24.</li>
	<li>Kalan böbreğin korteksini izole edin ve batı lekesini gerçekleştirmek için sıvı azotta dondurun. Numuneleri analize kadar -80 °C'de saklayın.</li>
	<li>Renin ve N-GAL ifadelerini literatür23,24'te tanımlandığı gibi Batı lekesi ile sayısallaştırın.</li>
</ol>5. İstatistik
<ol><li>Üç veya daha fazla koşullu deneyler için tek yönlü veya iki yönlü ANOVA'yı kullanın, ardından bireysel gruplar arasındaki karşılaştırmalar için Bonferroni post-hoc testleri yapın. 0,05'e eşit veya daha küçük bir p değerinin önemli olduğunu düşünün. Tüm istatistiksel analizleri yapmak için yazılım kullanın (örneğin, GraphPad Prism 8.2).</li>
</ol>

<ol><li>Kashyap, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blockade+of+CCR2+reduces+macrophage+influx+and+development+of+chronic+renal+damage+in+murine+renovascular+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Blockade of CCR2 reduces macrophage influx and development of chronic renal damage in murine renovascular hypertension.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 310 (5), 372-384 (2016).</li>
<li>Wang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+inflammatory+biomarkers+after+renal+revascularization+in+atherosclerotic+renal+artery+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrology+Dialysis+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Changes in inflammatory biomarkers after renal revascularization in atherosclerotic renal artery stenosis.</a> Nephrology Dialysis Transplantation. 31 (9), 1437-1443 (2016).</li>
<li>Yerram, P., Karuparthi, P. R., Chaudhary, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+and+management+of+renovascular+hypertension+and+ischemic+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Minerva+Urologica+e+Nefrologica%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis and management of renovascular hypertension and ischemic nephropathy.</a> Minerva Urologica e Nefrologica. 64 (1), 63-72 (2012).</li>
<li>Covic, A., Gusbeth-Tatomir, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+the+renin-angiotensin-aldosterone+system+in+renal+artery+stenosis%2C+renovascular+hypertension%2C+and+ischemic+nephropathy%3A+diagnostic+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Cardiovascular+Diseases%22%5BJournal%5D)">The role of the renin-angiotensin-aldosterone system in renal artery stenosis, renovascular hypertension, and ischemic nephropathy: diagnostic implications.</a> Progress in Cardiovascular Diseases. 52 (3), 204-208 (2009).</li>
<li>Barreras, A., Gurk-Turner, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiotensin+II+receptor+blockers%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings%22%5BJournal%5D)">Angiotensin II receptor blockers.</a> Proceedings. 16 (1), Baylor University. Medical Center. 123-126 (2003).</li>
<li>Sica, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiotensin-converting+enzyme+inhibitors+side+effects--physiologic+and+non-physiologic+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Hypertension%22%5BJournal%5D)">Angiotensin-converting enzyme inhibitors side effects--physiologic and non-physiologic considerations.</a> Journal of Clinical Hypertension. 6 (7), 410-416 (2004).</li>
<li>Hill, R. D., Vaidya, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiotensin+II+Receptor+Blockers+%28ARB%2C+ARb%29%5BTitle%5D)+AND+%22StatPearls%22%5BJournal%5D)">Angiotensin II Receptor Blockers (ARB, ARb).</a> StatPearls. , (2019).</li>
<li>Durante, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+the+renin-angiotensin-aldosterone+system+in+the+pathogenesis+of+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Pharmaceutical+Design%22%5BJournal%5D)">Role of the renin-angiotensin-aldosterone system in the pathogenesis of atherosclerosis.</a> Current Pharmaceutical Design. 18 (7), 981-1004 (2012).</li>
<li>Chen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+reactive+carbonyl+species%3A+Potential+risk+factor+for+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Free+Radical+Research%22%5BJournal%5D)">Plasma reactive carbonyl species: Potential risk factor for hypertension.</a> Free Radical Research. 45 (5), 568-574 (2011).</li>
<li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiotensin+receptor+blockade+has+protective+effects+on+the+poststenotic+porcine+kidney%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">Angiotensin receptor blockade has protective effects on the poststenotic porcine kidney.</a> Kidney International. 84 (4), 767-775 (2013).</li>
<li>Zou, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+scattered+tubular-like+cells+confer+protective+effects+in+the+stenotic+murine+kidney+mediated+by+release+of+extracellular+vesicles%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Renal scattered tubular-like cells confer protective effects in the stenotic murine kidney mediated by release of extracellular vesicles.</a> Scientific Reports. 8 (1), 1263(2018).</li>
<li>Kinra, M., Mudgal, J., Arora, D., Nampoothiri, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+insight+into+the+role+of+cyclooxygenase+and+lipooxygenase+pathway+in+renal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22European+Review+for+Medical+and+Pharmacological+Sciences%22%5BJournal%5D)">An insight into the role of cyclooxygenase and lipooxygenase pathway in renal ischemia.</a> European Review for Medical and Pharmacological Sciences. 21 (21), 5017-5020 (2017).</li>
<li>Cavalcanti, C. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+PDE5+Restores+Depressed+Baroreflex+Sensitivity+in+Renovascular+Hypertensive+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Inhibition of PDE5 Restores Depressed Baroreflex Sensitivity in Renovascular Hypertensive Rats.</a> Frontiers in Physiology. 7, 15(2016).</li>
<li>Dias, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sildenafil+ameliorates+oxidative+stress+and+DNA+damage+in+the+stenotic+kidneys+in+mice+with+renovascular+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Sildenafil ameliorates oxidative stress and DNA damage in the stenotic kidneys in mice with renovascular hypertension.</a> Journal of Translational Medicine. 12, 35(2014).</li>
<li>Lerman, L. O., Chade, A. R., Sica, V., Napoli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+hypertension%3A+an+overview%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Laboratory+and+Clinical+Medicine%22%5BJournal%5D)">Animal models of hypertension: an overview.</a> Journal of Laboratory and Clinical Medicine. 146 (3), 160-173 (2005).</li>
<li>Reckelhoff, J. F., Romero, D. G., Yanes Cardozo, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex%2C+Oxidative+Stress%2C+and+Hypertension%3A+Insights+From+Animal+Models%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+%28Bethesda%29%22%5BJournal%5D)">Sex, Oxidative Stress, and Hypertension: Insights From Animal Models.</a> Physiology (Bethesda). 34 (3), 178-188 (2019).</li>
<li>Goldblatt, H., Lynch, J., Hanzal, R. F., Summerville, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+Experimental+Hypertension+%3A+I.+The+Production+of+Persistent+Elevation+of+Systolic+Blood+Pressure+by+Means+of+Renal+Ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">Studies on Experimental Hypertension : I. The Production of Persistent Elevation of Systolic Blood Pressure by Means of Renal Ischemia.</a> Journal of Experimental Medicine. 59 (3), 347-379 (1934).</li>
<li>Gollan, F., Richardson, E., Goldblatt, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertension+in+the+systemic+blood+of+animals+with+experimental+renal+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">Hypertension in the systemic blood of animals with experimental renal hypertension.</a> Journal of Experimental Medicine. 88 (4), 389-400 (1948).</li>
<li>Lewis, H. A., Goldblatt, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+Experimental+Hypertension%3A+XVIII.+Experimental+Observations+on+the+Humoral+Mechanism+of+Hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Bulletin+of+the+New+York+Academy+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Studies on Experimental Hypertension: XVIII. Experimental Observations on the Humoral Mechanism of Hypertension.</a> Bulletin of the New York Academy of Medicine. 18 (7), 459-487 (1942).</li>
<li>Warner, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+deficiency+of+Smad3+protects+the+kidneys+from+atrophy+and+interstitial+fibrosis+in+2K1C+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Genetic deficiency of Smad3 protects the kidneys from atrophy and interstitial fibrosis in 2K1C hypertension.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 302 (11), 1455-1464 (2012).</li>
<li>Lorenz, J. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renovascular+hypertension+using+a+modified+two-kidney%2C+one-clip+approach+in+mice+is+not+dependent+on+the+alpha1+or+alpha2+Na-K-ATPase+ouabain-binding+site%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Renovascular hypertension using a modified two-kidney, one-clip approach in mice is not dependent on the alpha1 or alpha2 Na-K-ATPase ouabain-binding site.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 301 (3), 615-621 (2011).</li>
<li>Ebina, K., Iwabuchi, T., Suzuki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histological+change+in+permanently+clipped+or+ligated+cerebral+arterial+wall.+Part+II%3A+Autopsy+cases+of+aneurysmal+neck+clipping%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neurochirurgica%22%5BJournal%5D)">Histological change in permanently clipped or ligated cerebral arterial wall. Part II: Autopsy cases of aneurysmal neck clipping.</a> Acta Neurochirurgica. 66 (1-2), 23-42 (1982).</li>
<li>Saleem, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sox6%3A+A+new+modulator+of+renin+expression+during+physiological+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Sox6: A new modulator of renin expression during physiological conditions.</a> bioRxiv. , (2019).</li>
<li>Saleem, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sox6+as+a+new+modulator+of+renin+expression+in+the+kidney%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Sox6 as a new modulator of renin expression in the kidney.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. , (2019).</li>
<li>Chade, A. R., Williams, M. L., Engel, J., Guise, E., Harvey, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+translational+model+of+chronic+kidney+disease+in+swine%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">A translational model of chronic kidney disease in swine.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 315 (2), 364-373 (2018).</li>
<li>Xue, Y., Xu, Z., Chen, H., Gan, W., Chong, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-energy+shock+wave+preconditioning+reduces+renal+ischemic+reperfusion+injury+caused+by+renal+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Cir%C3%BArgica+Brasileira%22%5BJournal%5D)">Low-energy shock wave preconditioning reduces renal ischemic reperfusion injury caused by renal artery occlusion.</a> Acta Cirúrgica Brasileira. 32 (7), 550-558 (2017).</li>
<li>Lalanne, A., Beaudeux, J. L., Bernard, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NGAL%3A+a+biomarker+of+acute+and+chronic+renal+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Annales+de+Biologie+Clinique%22%5BJournal%5D)">NGAL: a biomarker of acute and chronic renal dysfunction.</a> Annales de Biologie Clinique. 69 (6), 629-636 (2011).</li>
<li>Bolignano, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+gelatinase-associated+lipocalin+%28NGAL%29+as+a+marker+of+kidney+damage%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Kidney+Diseases%22%5BJournal%5D)">Neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) as a marker of kidney damage.</a> American Journal of Kidney Diseases. 52 (3), 595-605 (2008).</li>
<li>Kashyap, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+renal+atrophy+in+murine+2+kidney+1+clip+hypertension+is+strain+independent%5BTitle%5D)+AND+%22Research+in+Veterinary+Science%22%5BJournal%5D)">Development of renal atrophy in murine 2 kidney 1 clip hypertension is strain independent.</a> Research in Veterinary Science. 107, 171-177 (2016).</li>
<li>Anderson, W. P., Woods, R. L., Kline, R. L., Korner, P. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+haemodynamic+responses+to+unilateral+renal+artery+stenosis+in+conscious+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+and+Experimental+Pharmacology+and+Physiology%22%5BJournal%5D)">Acute haemodynamic responses to unilateral renal artery stenosis in conscious dogs.</a> Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology. 12 (3), 305-309 (1985).</li>
<li>Imanishi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+degree+of+renal+arterial+stenosis+that+causes+hypertension+in+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Angiology%22%5BJournal%5D)">Critical degree of renal arterial stenosis that causes hypertension in dogs.</a> Angiology. 43 (10), 833-842 (1992).</li>
<li>Ziecina, R., Abramczyk, P., Lisiecka, A., Papierski, K., Przybylski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adrenal-renal+portal+circulation+contributes+to+decrease+in+renal+blood+flow+after+renal+artery+stenosis+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physiology+and+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Adrenal-renal portal circulation contributes to decrease in renal blood flow after renal artery stenosis in rats.</a> Journal of Physiology and Pharmacology. 49 (4), 553-560 (1998).</li>
<li>Johnson, J. A., Ichikawa, S., Kurz, K. D., Fowler, W. L., Payne, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pressor+responses+to+vasopressin+in+rabbits+with+3-day+renal+artery+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Pressor responses to vasopressin in rabbits with 3-day renal artery stenosis.</a> American Journal of Physiology. 240 (6), 862-867 (1981).</li>
<li>Eirin, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+glomerular+filtration+rate+after+renal+revascularization+correlate+with+microvascular+hemodynamics+and+inflammation+in+Swine+renal+artery+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Cardiovascular+Interventions%22%5BJournal%5D)">Changes in glomerular filtration rate after renal revascularization correlate with microvascular hemodynamics and inflammation in Swine renal artery stenosis.</a> Circulation: Cardiovascular Interventions. 5 (5), 720-728 (2012).</li>
<li>Ma, Z., Jin, X., He, L., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CXCL16+regulates+renal+injury+and+fibrosis+in+experimental+renal+artery+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+and+Circulatory%22%5BJournal%5D)">CXCL16 regulates renal injury and fibrosis in experimental renal artery stenosis.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory. 311 (3), 815-821 (2016).</li>
<li>Cheng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+analysis+of+signaling+pathways+activated+in+a+murine+model+of+two-kidney%2C+one-clip+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Temporal analysis of signaling pathways activated in a murine model of two-kidney, one-clip hypertension.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 297 (4), 1055-1068 (2009).</li>
<li>Wiesel, P., Mazzolai, L., Nussberger, J., Pedrazzini, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-kidney%2C+one+clip+and+one-kidney%2C+one+clip+hypertension+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Two-kidney, one clip and one-kidney, one clip hypertension in mice.</a> Hypertension. 29 (4), 1025-1030 (1997).</li>
<li>Johns, C., Gavras, I., Handy, D. E., Salomao, A., Gavras, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+of+experimental+hypertension+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Models of experimental hypertension in mice.</a> Hypertension. 28 (6), 1064-1069 (1996).</li>
</ol>

Yazarlar tarafından finansal veya başka türlü hiçbir çıkar çatışması beyan edilmez.

Renal arter darlığı, sekonder veya dirençli hipertansiyonun ve böbrek hasarının 1,29'unun önemli bir nedenidir. İki böbrek bir klip (2K1C) Goldblatt modeli, RAStenozise bağlı renovasküler hipertansiyonu1,17,18,19 incelemek için kullanılmıştır. Çeşitli hayvan modellerini kullanan bir dizi önceki çalışma, renal arterdeki darlığın, renin a...

Renal arter darlığı (RAStenosis), 65 yaş üstü kişilerin yaklaşık% 6'sını ve koroner veya periferik vasküler hastalığı olan kişilerin% 40'ına kadarını etkileyen inatçı bir sorundur 1,2. Hastalık için mevcut tedaviler sınırlıdır; Bu nedenle, renovasküler hipertansiyonu veya RAStenosis'in neden olduğu dirençli hipertansiyonu tedavi etmek için yeni tedavilerin geliştirilmesine kritik bir ihtiyaç vardır. Renin anjiyotensin aldosteron sistemi (RAAS), RAStenozise bağlı hipertansiyon veya renovasküler hipertansiyonun patogenezinde rol oynayan anahtar yoldur 3,4. ACE inhibitörleri veya anjiyotensin reseptör blokerleri gibi RAAS'ı hedef alan bilinen tedaviler hipertansiyonu hafifletir, ancak böbrek yetmezliği ve hiperkalemiiçin yakından incelenmelidir 5,6,7. Renin, RAAS'taki hız sınırlama adımını katalize eder; anjiyotensinojeni anjiyotensin I'e dönüştürür. Aterosklerozda plak oluşumu, renin sekresyonunu yönlendiren renal arterin daralmasına neden olarak renovasküler hipertansiyon ve böbrek hasarı ile sonuçlanır8. Bir dizi çalışma, insanlarda renovasküler hipertansiyon sırasında oksidatif stres düzeylerinin arttığını bildirmiştir; bunlar, iki böbrek bir klip (2K1C) fare modelinin yanı sıra diğer hipertansif hayvan modelleri 2,9,10,11,12,13,14,15,16 ile doğrulanmıştır. . RAStenozise bağlı renovasküler hipertansiyon sırasında renin ekspresyon kontrolünün moleküler mekanizması iyi anlaşılmamıştır ve daha fazla araştırma gerektirmektedir.
RAStenosis'i güvenilir ve tekrarlanabilir bir şekilde özetleyen deneysel hayvan modelleri, yeni tedavilerin geliştirilmesi için renin ekspresyon kontrolünün hücresel ve moleküler mekanizmalarının aydınlatılmasında önemlidir. 2K1C fare modeli, renovasküler hipertansiyonun patogenezini incelemek için iyi kurulmuş bir deneysel modeldir17,18,19,20. Bu model, 17,20,21 numaralı bir klips kullanılarak renal arterin daralmasıyla üretilir, bu nedenle renin ekspresyonunda ve hipertansiyonda 17,19,20,21'de bir artışa neden olan renal arter tıkanıklığı üretir. Bununla birlikte, hayvan modellerinde renal arter darlığı oluşturmak için adım adım bir prosedürü tanımlayan teknik raporlar mevcut değildir.
Geleneksel U-şekilli gümüş klipsler, poliüretan tüpler ve diğer klipsler, renal arter darlığını indüklemek için renal arteri daraltmak için kullanılmıştır. Bazı çalışmalar, klibin tasarımının ve malzemesinin, 2K1C hayvan modeli ile güvenilir ve tekrarlanabilir veriler elde etmek için kritik öneme sahip olduğunu göstermiştir. Lorenz ve ark.'ya göre, geleneksel U-tasarımlı gümüş klipslerin kullanımı, düşük bir hipertansiyon başarı oranına neden olur (%40-60)21. Klips tasarımı nedeniyle, renal arter lateral olarak bastırılır, birkaç daralmayı tetikler ve renal arterden çıkma olasılığı daha yüksektir. Gümüş dövülebilirliği ve sünekliği, klips genişliklerinde değişikliklere izin verebilir; bu nedenle, fareler arasında farklı hipertansiyon seviyelerine neden olur. Klips üzerindeki gümüş dioksitler perivasküler inflamasyona, intimal proliferasyona ve doku granülasyonuna neden olarak renal arter çapı22'yi değiştirebilir. Geleneksel U-design gümüş klips ile elde edilen hipertansiyon seviyelerindeki değişkenlik nedeniyle, Warner ve ark. ve Lorenz ve ark., farelerde renal arter darlığını başlatmak için yuvarlak tasarımlı bir poliüretan tüpü başarıyla kullanmış ve iki böbrek bir klips hayvan modeli 20,21'in daha güvenilir ve tutarlı bir indüksiyonunu sağlamıştır.
Bu yazıda, renal arteri daraltmak için poliüretan tüpü kullanarak, farelerde deneysel RAStenoz oluşturmak için cerrahi bir protokol tanımlanmıştır. Poliüretan yuvarlak tasarımlı manşet, farede darlık oluşturmak için daha tekrarlanabilir, güvenilir ve düşük maliyetli bir klipstir. Bu deneysel modelin amacı, renal arter darlığı sırasında renin ekspresyon kontrolünün moleküler ve hücresel mekanizmasını incelemek ve tanımlamaktır. RAStenosis fareleri modelinin başarısını, renin ekspresyonu ve böbrek hasarı belirteci nötrofil jelatinaz ile ilişkili lipokalini (N-GAL) ölçerek doğruladık.

<table><tbody><tr><td>Diyet Jeli</td><td>Şeffaf H2O</td><td>Diyet-Jel 76A</td><td>Cerrahi iyileşme diyeti</td></tr><tr><td>EMC Isıtmalı Sert ped</td><td>Hallowell</td><td>000A2788B</td><td>Fareleri sıcak tutmak için ısıtma pedleri kullanıldı</td></tr><tr><td>Ethilon Naylon Sütür Ethicon</td><td></td><td>662G</td><td>4-0 (1.5 metrik), Bu sütür karın zarını ve cildi kapatmak için kullanıldı</td></tr><tr><td>Ethilon Naylon Sütür Ethicon</td><td></td><td>2815 G</td><td>8-0 (0.4 metrik), Bu sütür, arteri bağlamak ve daraltmak için manşeti kapatmak için kullanıldı</td></tr><tr><td>Germinator 500</td><td>Braintree Scientific Inc.</td><td>GER 5287</td><td>Ameliyatlar arasında cerrahi aletleri sterilize edin</td></tr>: <tr><td>Ketoprofen</td><td>, Zoetis,</td><td>Ketofen</td>, <td>Ağrı Kesici,</td></tr><tr><td>Poliüretan</td><td>, Braintree Scientific Inc.</td><td>MRE-025</td><td>Bu tüp darlığı başlatmak için kullanıldı</td></tr><tr><td>Povidon-iyot antiseptik çubukları</td><td>Medline</td><td>MDS093901</td><td>Ciltte epilasyon ve ameliyat sonrası uygulandı</td></tr><tr><td>Reflex 7 Klips Uygulayıcı</td><td>Roboz Cerrahi Alet Co</td><td>204-1000</td><td>Bu klips uygulayıcı, bir veya daha fazla dikişin çıkması durumunda klips uygulamak için kullanıldı</td></tr><tr><td>Steril havlu örtüleri</td><td>Dynarex</td><td>4410</td><td>Ameliyat sırasında fareler için çarşaf olarak kullanıldı</td></tr><tr><td>Üçlü antibiyotikli merhem</td><td>Medi-First</td><td>22312</td><td></td></tr><tr><td>Su pompası</td><td>Stryker</td><td>T/pompa Profesyoneller</td><td>Ameliyat sırasında ve sonrasında fareleri sıcak tutmak için ısıtma sert pedindeki suyu ısıtmak ve dolaştırmak için kullanılır</td></tr></tbody></table>

renal arter darlığında renin regülasyonunun modifiye İki böbrek bir klipsli fare modeli

A Modified Two Kidney One Clip Mouse Model of Renin Regulation in Renal Artery Stenosis

Renal arter darlığı, renin anjiyotensin aldosteron sisteminin (RAAS) aşırı aktive olduğu koroner veya periferik vasküler hastalığı olan hastalarda sık görülen bir durumdur. Bu bağlamda, RAAS'ta hız sınırlayıcı proteaz olan renin ekspresyonunda ve salınımında bir artışı uyaran renal arterlerde daralma vardır. Renin ekspresyonunda ortaya çıkan artış, sıklıkla böbrek hasarı ve son organ hasarı ile ilişkili olan renovasküler hipertansiyonun bilinen bir sürücüsüdür. Bu nedenle, bu durum için yeni tedaviler geliştirmeye büyük ilgi vardır. Renal arter darlığında renin kontrolünün moleküler ve hücresel mekanizması tam olarak anlaşılamamıştır ve daha fazla araştırmayı gerektirmektedir. Farelerde renal arter darlığını indüklemek için, modifiye edilmiş 2 böbrek 1 klip (2K1C) Goldblatt fare modeli geliştirilmiştir. Sağ böbrek vahşi tip farelerde stenozlandı ve sahte ameliyat edilen fareler kontrol olarak kullanıldı. Renal arter darlığı sonrası renin ekspresyonu ve böbrek hasarı saptandı. Böbrekler toplandı ve reninin protein ve mRNA ekspresyonunu belirlemek için taze korteksler kullanıldı. Bu hayvan modeli tekrarlanabilir ve renovasküler hipertansiyon ve böbrek hasarında rol oynayan patofizyolojik yanıtları, moleküler ve hücresel yolları incelemek için kullanılabilir.

Renal arter daralması, stenozlu böbrekte renin ekspresyonunu arttırırken, kontralateral böbrekte ekspresyonu baskılar. İki böbrek bir klip (2K1C) veya Goldblatt stenoz modeli, artmış renin ekspresyonuna ve böbrek hasarına neden olur. Bu, insanlarda tek taraflı renal arter darlığının en iyi temsili modeli olarak kabul edilmektedir.
Renin ve prorenin ekspresyonu (renin öncüsü) immünoblotlama kullanılarak ölçüldü. Veriler, renin ve prorenin ekspresyonunun stenozlu böbrekte kontralateral ve sahte ...

Renal arter darlığını başlatmak için poliüretan tüp kullanılarak modifiye edilmiş 2 böbrek 1 klips (2K1C) Goldblatt fare modeli geliştirildi ve renin ekspresyonunda ve böbrek hasarında artışa neden oldu. Burada, tekrarlanabilir ve tutarlı bir 2K1C fare modeli oluşturmak için manşetin renal arter üzerine hazırlanması ve yerleştirilmesi için ayrıntılı bir prosedür açıklıyoruz.

Renal Arter Darlığında Renin Regülasyonunun Modifiye İki Böbrek Bir Klipsli Fare Modeli

Renal artery stenosis is a common condition in patients with coronary or peripheral vascular disease where the renin angiotensin aldosterone system (RAAS) ...

2K1C fare modeli, renal arter darlığını indüklemek için güvenilir ve tekrarlanabilir bir yöntemdir. Bu protokol, renal vasküler hipertansiyon sırasında renin ekspresyon kontrolünde rol oynayan moleküler mekanizmaların aydınlatılmasında değerlidir. Bu hayvan modeli, insanlarda tek taraflı renal arter darlığını taklit eder.Güvenilirliği ve tekrarlanabilirliği, renal vasküler hipertansiyonu tedavi etmek için yeni terapötik hedefleri ayırt etmek için iyi bir model haline getirir. Bu teknik, farelerde ameliyat yapma konusunda temel bir bilgi gerektirir. İki kritik kısım vardır: tüp hazırlığı ve tüpün renal artere yerleştirilmesi.Her ikisi de ayrıntılı olarak açıklanmıştır. Sağ renal arterin hassas bir şekilde kesilmiş borular kullanılarak daraltılması anahtardır. Prosedürün bu videosu, öğrencilere tüpü nasıl keseceklerini, ardından artere nasıl erişeceklerini ve daraltacaklarını gösterecektir.Stenoz prosedürü için boruyu keserek başlayın. Keskin bir neşter ile 0,5 milimetre uzunluğunda bir poliüretan boru parçası kesin. Ardından, uzunlamasına bir kesimle çevrenin 0,2 milimetresini çıkararak bir manşet yapın.Poliüretan tüp ile renal arter darlığı gerçekleştirmek için farelerin 18 ila 22 gram arasında olması gereken ağırlığını kaydedin. Farelerin ağırlığı ameliyatı gerçekleştirmek için kritik öneme sahiptir. Ağrı kesiciyi fareye anestezi uyguladıktan ve uyguladıktan sonra, tamamen bilincini kaybedene kadar kafesin içine geri koyun.Farenin tamamen uyuşturulup uyuşturulmadığını ve ameliyata hazır olup olmadığını kontrol etmek için ayak parmağını forseps ile sıkıştırın. Fareyi ameliyat alanından uzakta bir kağıt havlunun üzerine sırt üstü yatırın ve kılların büyüme yönünün tersini takip ederek yan karın bölgesindeki kılları elektrikli bir saç kesme makinesi ile alın. Traş edilen alanı steril bir alkollü gazlı bezle temizleyin ve topikal povidon-iyot solüsyonu uygulayın.Tüm cerrahi ekipmanı içeren sterilize edilmiş torbayı açın. Diseksiyon mikroskobu altında çalışarak, omurlardan yaklaşık 0,5 santimetre uzakta küçük bir yan kesi yapmak için steril keskin makas kullanın. Bel omurları boyunca ilerleyin ve bir inçlik bir kesi yapın.Böbreği ortaya çıkarmak için cildi ve kası geri çekin. Ardından, renal arteri izole etmek için çevredeki yağı pamuklu çubuklarla temizleyin ve çıkarın. Kavisli forsepsleri kullanarak renal siniri renal arterden izole edin.Renal arterin yakınındaki sızan sıvıyı pamuklu çubukla temizleyin. Sağ renal arterin altına iki naylon sütür yerleştirin, gevşek düğümler yapın ve manşeti ana renal arterin etrafına böbrek ile aort bifurkasyonu arasında yaklaşık olarak eşit uzaklıkta yerleştirin. Ameliyattan sonra dikişlerin kaybolma olasılığını önlemek için naylon dikişleri kullanarak manşeti kapatın ve her dikiş için üç düğüm atın.Kas içindeki kesiyi basit bir sürekli dikiş uygulayarak kapatın ve cildi kapatmak için basit kesintili dikişler atın. Fareleri kafeslerine geri koyun ve hayvanların ameliyattan sonra iyileşmesi için yarım kafesi iki ila üç saat boyunca dolaşan bir su ısıtma yastığı üzerinde bırakın. Hayvanlara jel diyet kurtarma yemi sağlayın.Ertesi gün ağrı kesici uygulayın. Önümüzdeki iki gün boyunca fareleri tartın ve bir fare ağırlığının% 20'sinden fazlasını kaybederse veterinere danışın. Kızarıklık, şişme, ağrı veya enfeksiyon açısından değerlendirmek için fareleri günlük olarak inceleyin.Her farenin ağırlığını kaydedin. Hayvanı ötenazi yaptıktan sonra, sırtüstü pozisyonda steril bir platforma yerleştirin. Hareketi sınırlamak için uzuvları sabitleyin ve uzatın ve fareye% 70 etanol iyice püskürtün.Orta hat kesisi yapmak ve karın ve göğüs bölgesini açmak için makas kullanın. Cildi ve periton duvarını geri çekin, ardından kalbi dikkatlice ortaya çıkarın ve sağ ventrikülü delin. Hangi böbreğin stenoz edildiğini takip ederek forseps kullanarak her iki böbreği de çıkarın.Böbrek kapsüllerini çıkarın, herhangi bir yağdan temizleyin ve her böbreğin ağırlığını ayrı ayrı kaydedin. Her iki böbreğin uzunlamasına bir bölümünü kesin ve in situ hibridizasyon ve immünohistokimya için gece boyunca dört santigrat derecede %4 PFA'da sabitleyin. Kalan böbreğin korteksini izole edin ve bir Western blot yapmak için sıvı nitrojen içinde dondurun.Numuneleri daha fazla analize kadar eksi 80 santigrat derecede saklayın. Renal arter daralması, stenozlu böbrekte renin ekspresyonunu arttırırken, kontralateral böbrekte ekspresyonu baskılar. İki böbrekli tek klipsli stenoz modeli, renin ekspresyonunu ve artmış böbrek hasarını indükledi.Renin ve prorenin ekspresyonu immünoblotlama kullanılarak ölçüldü. Veriler, stenozlu böbrekte renin ve prorenin ekspresyonunun kontralateral ve sahte böbreklere kıyasla arttığını göstermektedir, bu da manşetin renal arteri daralttığını ve renal perfüzyonda değişikliklere neden olduğunu düşündürmektedir. Renin ekspresyonunun lokalizasyonunu görselleştirmek için immünohistokimya yapıldı.Görüntüler, kırpılmış böbrekte renin ekspresyonunun arttığını doğruladı. Ayrıca, stenozlu böbrekte afferent arteriyel boyunca jukstaglomerüler hücre kalımı görüldü. Renin mRNA ekspresyon seviyeleri üzerindeki etkisini araştırmak için in situ hibridizasyon yapıldı.Veriler, stenozlu böbrekte renin mRNA ve JG hücresi alımının arttığını göstermektedir. Renal arter stenozunun bir başka özelliği, böbrek perfüzyonu, süperoksit üretimi ve hipertansiyondaki değişikliklere bağlı olarak böbrek hasarı belirteçlerinin yukarı regülasyonudur. Bu nedenle, N-GAL immünoblotlama ile ölçüldü ve akut böbrek hasarı belirtecinin stenozlu böbrekte yüksek oranda yukarı regüle edildiğini gösterdi.Bu protokolü denerken, manşeti yerleştirmeden önce naylon dikişleri renal arterin etrafına yerleştirmeyi unutmayın. Prosedürü hızlandırmaya yardımcı olur.

a-modified-two-kidney-one-clip-mouse-model-renin-regulation-renal

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu video, anjiyotensin II ile indüklenen hipertansif bir fare modelinde, sempatik sinir fonksiyonunu bozmak ve kan basıncını azaltmak için fenol kullanan renal arter sempatik denervasyonu için bir prosedürü göstermektedir.

Anjiyotensin II ile İndüklenen Hipertansiyon Fare Modelinde Renal Arterlerin Sempatik Denervasyonu

Burada açıklanan renal iskemi reperfüzyon yaralanmasının fare modeli, akut böbrek hasarı ile sonuçlanan iskemiyi indüklemek için kontrol dokusu ve sol renal pedikülün klemplenmesini sağlayan bir sağ nefrektomiden oluşur. Bu model, tüm adımların tek bir kesi ile gerçekleştirildiği bir orta hat laparotomi yaklaşımı kullanır.

Renal İskemi Reperfüzyon Hasarı: Yaralanma Fare Modeli ve Rejenerasyon

Fare izole edilmiş perfüze böbrek (MIPK) perfüze edildi ve 1 saat için fonksiyonel ex vivo koşullar altında bir fare böbrek tutmak için kullanılan bir tekniktir. tamponlar ve cerrahi teknik ayrıntılı olarak tarif edilmiştir.

Fare İzole perfüze Böbrek Tekniği

Bu el yazması fare 5/6inci kısmi nefrektomi (PNx) kutup ligasyonu ile gerçekleştirmek için detaylı iki aşamalı cerrahi işlem sağlar. Dört hafta sonra ameliyat, fareler, sham işletilen ile karşılaştırıldığında PNx fareler geliştirilen bozulmuş böbrek fonksiyonu, anemi, kalp hipertrofisi, kardiyak fibrozis ve kalp sistolik ve diyastolik fonksiyonu azalmıştır.

Deneysel üremik kardiyomiyopati indükler bir fare 5/6inci nefrektomi modeli

Renal iskemi-reperfüzyon hasarı hastanede yatan hastalarda yüksek morbidite ve mortalite ile ilişkilidir. Burada, tek taraflı renal iskemi-reperfüzyon hasarının basit ve etkili bir fare modelini sunmakta ve böbrekte gözlenen temsili patolojik değişikliklere sıralı bir genel bakış sunulmaktadır.

Tek Taraflı İskemi-Reperfüzyon Hasarının Etkili Bir Fare Modeli

Burada, Anjiyotensin II infüzyonu ile indüklenen hipertansiyonu olan farelerde renal sempatik denervasyon (RDN) için bir protokol sunuyoruz. Prosedür tekrarlanabilir, kullanışlıdır ve RDN'nin hipertansiyon ve kardiyak hipertrofi üzerindeki düzenleyici mekanizmalarını incelemeye izin verir.

Anjiyotensin II İnfüzyonu ile İndüklenen Geliştirilmiş Renal Denervasyon Azaltılmış Hipertansiyon

Bu protokol, murin ortak iliak arteriyovenöz fistül oluşumunun cerrahi adımlarını detaylandırır. Bu modeli hemodiyaliz erişimi ile ilişkili ekstremite patofizyolojisini incelemek için geliştirdik.

Hemodiyaliz Erişimi ile İlişkili El Disfonksiyonunun Bir Murine Modeli

Bu makale, araştırmacıların, uzun süreli üreter tıkanıklığının tersine çevrilmesinden sonra uzun vadeli yapısal ve fonksiyonel sonuçların analizine izin veren standart bir model kullanarak farelerde geri dönüşümlü tek taraflı üreter tıkanıklığı gerçekleştirmelerini sağlamak için ayrıntılı talimatlar sağlar.

Uzun Süreli Tek Taraflı Üreter Tıkanıklığının Tersine Çevrilmesinden Sonra Uzun Vadeli Yapısal ve Fonksiyonel Sonuçları Değerlendirmek İçin Bir Fare Modeli

Bu makale, örnek toplamadan bir gün önce yapılan kontralateral nefrektomi ile tek taraflı böbrek IRI kullanan iskemik CKD modelini sunmaktadır; bu protokol, serum tabanlı fonksiyonel değerlendirme, yüksek sağkalma ve tekrarlanabilir KBD patolojisini 28 ve 42 gün içinde mümkün kılarak mekanik ve girişimsel çalışmalar için çok yönlü bir platform sağlar.

Böbrek Iskemisi/Reperfüzyon Yaralanması Nedeniyle Akut Böbrek Hastalığına Geçişin Fare Modeli

Iskemi nedeniyle akut böbrek hasarı için kesin bir fare modeli (AKI), akut böbrek hasarı incelemek ve muhtemelen böbrek hasarı tedavi etmek için tedavi araçları bulmak için önemli bir araçtır. Asılı ağırlık sistemi, böbrek tıkanıklığı neden olmadan, hızlı ve güvenilir renal arter oklüzyonu ve reperfüzyon bir araç sunuyor.

İzole Renal Arter Tıkanıklığı Asılı ağırlık Sistemi

Keşfedin farelerde renal arter darlığı oluşturmak için modifiye iki böbrek bir klipsli modeli. Bu yöntem, renal vasküler hipertansiyonda renin regülasyonunun moleküler mekanizmalarını anlamak ve yeni tedavi hedefleri belirlemek için güvenilir bir platform sunar.

Renal Arter Darlığında Renin Regülasyonunun Modifiye İki Böbrek Bir Klipsli Fare Modeli

Daha fazla video keşfet