Name: Murin Kalp Nakli için Manşet Tekniğinin Optimizasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-06-26T13:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 1 s
Description: Öğrenin, fare servikal heterotopik kalp naklinde manşet tekniğini iç tüp yaklaşımıyla optimize etme yöntemini. Bu teknik, damar evrasyonunu kolaylaştırarak ameliyat süresini kısaltır ve cerrahi verimliliği artırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma Fujian İl Sağlık Eğitimi Ortak Araştırma Projesi (WKJ2016-2-20), Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81771271 ve 81800664), Çin Ulusal Temel Ar-Ge Programı (2018YFA0108) tarafından desteklendi. 304) ve Fujian Eyaleti Genç ve Orta Yaşlı Öğretmenler için Eğitim ve Bilimsel Araştırma Projesi (JAT170714), Çin Hunan Eyaleti Doğa Bilimleri Vakfı (2019JJ50842) ve Hunan Eyaleti Huxiang Genç Yetenekler (2019RS2013).

Hayvanlar (BALB/c, C57BL/6, erkek, 8-12 hafta) Xiamen Üniversitesi Laboratuvar Hayvan Merkezi'nde özel bir patojensiz tesiste bulunmaktadır. C57BL/6 alıcı olarak, BALB/c donör olarak kullanılır. Tüm işlemler Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) yönergelerine göre gerçekleştirilir.
NOT: Operasyon için mikro makas, mikro düz forseps, mikro kavisli forseps ve mikro iğne tutucular gibi bir dizi mikrocerrahi alet gereklidir(Tablo ve Malzemeler, Şekil 1B, C, D, E). Tek kullanımlık bulldog kelepçeler bir çift(Şekil 1F)gereklidir. Dış juguler ven ve karotis arter için iki manşet bir mikroskop altında no. 10 neşter ile özelleştirilmiş poliamid tüpler kesilerek hazırlanır. Ven ve arter manşetinin çapı sırasıyla 0.9 mm ve 0.55 mm'dir. Buna ek olarak, ilgili ven manşet için iç tüpün çapı 0.6 mm, ve bu ilgili arter manşet için iç tüp 0.28 mm(Şekil 1G).
1. Alıcı nın hazırlanması
<ol><li>Pentobarbital (60 mg/kg, i.p) ile alıcı fareyi anestezi edin. Sağ lateral servikal bölgede saç kaldırmak için atravmatik mekanik makası kullanın.</li>
	<li>İyot antiseptik ve ardından %70 etanol ile cerrahi alanı silmek için steril bir pamuk ucu aplikatör kullanın.</li>
	<li>Fareyi işlem platformunda supine pozisyonunda yerleştirin. Fareyi steril gazlı bezle örtün.</li>
	<li>Sağ omuz köprücük kemiği eklem alt üçte bir boyun orta hat bir enine kesi yapmak için bir oftalmik makas kullanın.</li>
	<li>Mikro kavisli forceps ile doğru dış juguler ven yeterli uzunlukta ortaya çıkarmak için izole, elektrokoagülasyon yoluyla dalları kesmek, ve 6-0 ipek sütür kullanarak distal ucunda damar ligate.</li>
	<li>Bir bulldog kelepçe kullanarak proksimally harici juguler ven kelepçe ve daha sonra bir mikro makas kullanarak ligatür için proksimal ven transect.</li>
	<li>Damar lülesini 100 U/mL 0-4 °C heparinize salin ile yıkayın ve artık kanı temizler.</li>
	<li>Mikro düz forceps kullanarak damar manşet içip harici juguler ven çekin; bir stent olarak lümen içine damar iç tüp yerleştirin ve mikro düz forceps ile manşet üzerinde damar duvarı evert(Şekil 2A).</li>
	<li>Bir circumferential 8-0 kullanarak manşet proksimal ucunda everted damar endotel düzeltmek ipek sütür (Şekil 2B).</li>
	<li>Damar damarından damar iç tüpünü çekmek için mikro düz forceps kullanın.</li>
	<li>Sternokleidomastoid iç kenarına bitişik sağ karotis arter izole etmek için mikro kavisli forceps ile künt diseksiyon gerçekleştirin.</li>
	<li>Bir bulldog kelepçe kullanarak sağ karotis arter proksimally kelepçe, 6-0 ipek sütür kullanarak distal karotis arter ligate, ve ligatür yakın karotis arter transect için bir mikro makas kullanın.</li>
	<li>Karotis arteri 100 U/mL 0-4 °C heparinize salin ile yıkayın ve artık kanı temizler.</li>
	<li>Arter manşet yoluyla karotis arter geçirin ve mikro düz forceps kullanarak arter damar içine arter iç tüp eklemek (Şekil 2C).</li>
	<li>Mikro düz forceps kullanarak manşet üzerinde gemi Evert; bir çevre 8-0 kullanarak everted damar endotel düzeltmek ipek sütür (Şekil 2D).</li>
	<li>Mikro düz forceps ile arter damarından arter iç tüp çekin. NOT: Alıcının submandibular bezini koruyun.</li>
</ol>2. Donör hazırlanması
<ol><li>Pentobarbital (60 mg/kg, i.p) ile donör fareanestezik. Karın bölgesindeki saçı çıkarmak için travmatik mekanik makaslar kullanın.</li>
	<li>Fareyi işlem platformunda supine pozisyonunda yerleştirin. Fareyi steril gazlı bezle örtün.</li>
	<li>İyot antiseptik ve ardından %70 etanol ile cerrahi alanı silmek için steril bir pamuk ucu aplikatör kullanın.</li>
	<li>Bir oftalmik makas ile bir karın orta hat insizyonu yapmak ve karın boşluğu maruz.</li>
	<li>Inferior vena kavasını ortaya çıkarmak için mikro kavisli forceps kullanın ve daha sonra intravenöz olarak 200 μL 100 U/mL 0-4 °C heparinize salin iline inferior vena kava yoluyla 20 g vücut ağırlığı.</li>
	<li>Oftalmik makas ile torakotomi yapın, iki taraflı midaxillary line kesiler aracılığıyla kaburga kesmek, torasik boşluğu ortaya çıkarmak için ön göğüs duvarı dışa doğru çevirin.</li>
	<li>Timusu mikro kavisli forceplarla boşaltın.</li>
	<li>Aort maruz, ve sonra aort kemer imal koroner arter e-koroner arter e-100 U/mL 0-4 °C heparinize salin 200 μL perfuse. NOT: Donör kalbine gaz kabarcıkları sokmaktan kaçının.</li>
	<li>Aort kemerbaşında artan aort transect için bir mikro makas kullanın.</li>
	<li>Pulmoner arteri iki ana dalı mikro makasla geçirin.</li>
	<li>6-0 ipek sütür kullanarak superior vena kava ve inferior vena cava proximally ligate ve ligature distal ven transect ven için bir mikro makas kullanın.</li>
	<li>Pulmoner damarları birlikte, çevresel olarak, tek bir 6-0 ipek sütür kullanarak ligate ve bir mikro makas kullanarak ligatür distal ven dalları kesti.</li>
	<li>Çevredeki yumuşak dokulardan kalp greftini çıkarın; 0-4 °C heparinize tuzlu olarak muhafaza edin.</li>
</ol>3. Kalp implantasyonu
<ol><li>Donör kalbini alıcının sağ boyun bölgesine ters çevirin.</li>
	<li>Donör kalbin pulmoner arterini mikro düz forcep'lerle 6-0'lık bir ipek halkasına sok.</li>
	<li>Damar manşetetrafında damar lümen sarın ve sonra damar eklem bant manşet etrafında 6-0 ipek dikiş döngüleri sıkın.</li>
	<li>3.2 adımda açıklanan adımları izleyerek greft ve arter manşetinin aort anastomozisini gerçekleştirin.</li>
	<li>Kenetlenmiş juguler ven ve ardından kenetlenmiş juguler arteri bırakın. Damar eklemini bükülmemiş tutun ve kan akışının engellenmediğinden emin olun. NOT: 1 dk içinde 200'den fazla kez dönen sinüs ritmi normal kabul edilir.</li>
	<li>Sıcak (37 °C) tuzlu su yla donör kalbini nemlendirin ve greftin kanama olup olmadığını kontrol edin. Pulsing kalp greftini deri altı uzaya ayarlayın ve sonra kesiyi dikin.</li>
</ol>4. Postoperatif Bakım ve Greft Değerlendirmesi
<ol><li>Postoperatif greft fonksiyonunu izlemek için kelepçe salımdan sonra en az 5 dakika normal sinüs ritmine ve normal sinüs ritminin korunmasına kadar süreyi kaydedin.</li>
	<li>Alıcı anesteziden uyanana kadar alıcıyı sıcak bir battaniyenin üzerine tek başına yerleştirin. Ameliyat sonunda ve ameliyat sonrası 72 saat boyunca her 12 saatte bir buprenorfin analjezisi, 0.05 mg/kg, s.c uygulayın.</li>
	<li>Alıcının ağırlığını ve ameliyat sonrası iyileşme durumunu günlük olarak kaydedin. Ameliyat tarihinde buna göre %>%15 kilo kaybı, hemiplejik felç veya enfeksiyon durumunda, terminal isofluran inhalasyonu21ile alıcıyı ötenazi yedirin.</li>
	<li>Her gün palpasyon ile greft sağkalımlarını izleyin. Mürin allograft >72 saat hayatta ise ameliyat başarılı olarak kabul edilir. Daha önce bildirilen greft fonksiyonu,22: Ölçek 3 - şiddetle zonklama ve sıklığı; Ölçek 2 - daha az pulsate; Ölçek 1- fibrilasyon ve yakın ret; veya Ölçek - 0, kalp atışı kaybı ve tam reddi.</li>
</ol>

<ol><li>Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+transplantation+in+congenic+strains+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">Heart transplantation in congenic strains of mice.</a> Transplantation Proceedings. 5 (1), 733-735 (1973).</li>
<li>Que, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolonged+cold+ischemia+time+in+mouse+heart+transplantation+using+supercooling+preservation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Prolonged cold ischemia time in mouse heart transplantation using supercooling preservation.</a> Transplantation. , (2019).</li>
<li>Wang, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suppression+of+murine+cardiac+allograft+arteriopathy+by+long-term+blockade+of+CD40-CD154+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Suppression of murine cardiac allograft arteriopathy by long-term blockade of CD40-CD154 interactions.</a> Circulation. 105 (13), 1609-1614 (2002).</li>
<li>Hasegawa, T., Visovatti, S. H., Hyman, M. C., Hayasaki, T., Pinsky, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterotopic+vascularized+murine+cardiac+transplantation+to+study+graft+arteriopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Heterotopic vascularized murine cardiac transplantation to study graft arteriopathy.</a> Nature Protocols. 2 (3), 471-480 (2007).</li>
<li>Chen, Z. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+of+cervical+heterotopic+heart+transplantation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">A technique of cervical heterotopic heart transplantation in mice.</a> Transplantation. 52 (6), 1099-1101 (1991).</li>
<li>Matsuura, A., Abe, T., Yasuura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplified+mouse+cervical+heart+transplantation+using+a+cuff+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Simplified mouse cervical heart transplantation using a cuff technique.</a> Transplantation. 51 (4), 896-898 (1991).</li>
<li>Wang, Q., Liu, Y., Li, X. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplified+technique+for+heterotopic+vascularized+cervical+heart+transplantation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Simplified technique for heterotopic vascularized cervical heart transplantation in mice.</a> Microsurgery. 25 (1), 76-79 (2005).</li>
<li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+technique+for+lung+retransplantation+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+Disease%22%5BJournal%5D)">Surgical technique for lung retransplantation in the mouse.</a> Journal of Thoracic Disease. 5 (3), 321-325 (2013).</li>
<li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+surgical+experience+with+five+hundred+thirty+liver+transplants+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">A surgical experience with five hundred thirty liver transplants in the rat.</a> Surgery. 93 (1), Pt 1 64-69 (1983).</li>
<li>Chen, H., Zhang, Y., Zheng, D., Praseedom, R. K., Dong, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+kidney+transplantation+in+mice%3A+technique+using+cuff+for+renal+vein+anastomosis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Orthotopic kidney transplantation in mice: technique using cuff for renal vein anastomosis.</a> PLoS One. 8 (10), 77278(2013).</li>
<li>Miller, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+restoration+of+transplantation+tolerance+after+acute+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Spontaneous restoration of transplantation tolerance after acute rejection.</a> Nature Communications. 6, 7566(2015).</li>
<li>Lin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overexpression+of+Jagged-1+combined+with+blockade+of+CD40+pathway+prolongs+allograft+survival%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology+and+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Overexpression of Jagged-1 combined with blockade of CD40 pathway prolongs allograft survival.</a> Immunology and Cell Biology. 93 (2), 213-217 (2015).</li>
<li>Xie, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combined+costimulation+blockade+inhibits+accelerated+rejection+mediated+by+alloantigen-primed+memory+T+cells+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Immunological+Investigations%22%5BJournal%5D)">Combined costimulation blockade inhibits accelerated rejection mediated by alloantigen-primed memory T cells in mice.</a> Immunological Investigations. 38 (7), 639-651 (2009).</li>
<li>Shao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combination+of+monoclonal+antibodies+with+DST+inhibits+accelerated+rejection+mediated+by+memory+T+cells+to+induce+long-lived+heart+allograft+acceptance+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology+Letters%22%5BJournal%5D)">Combination of monoclonal antibodies with DST inhibits accelerated rejection mediated by memory T cells to induce long-lived heart allograft acceptance in mice.</a> Immunology Letters. 138 (2), 122-128 (2011).</li>
<li>Dai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blockade+of+CD27%2FCD70+pathway+to+reduce+the+generation+of+memory+T+cells+and+markedly+prolong+the+survival+of+heart+allografts+in+presensitized+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Immunology%22%5BJournal%5D)">Blockade of CD27/CD70 pathway to reduce the generation of memory T cells and markedly prolong the survival of heart allografts in presensitized mice.</a> Transplant Immunology. 24 (4), 195-202 (2011).</li>
<li>Yan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+accelerated+rejection+mediated+by+alloreactive+CD4%28%2B%29+memory+T+cells+and+prolonged+allograft+survival+by+arsenic+trioxide%5BTitle%5D)+AND+%22Immunological+Investigations%22%5BJournal%5D)">Inhibition of accelerated rejection mediated by alloreactive CD4(+) memory T cells and prolonged allograft survival by arsenic trioxide.</a> Immunological Investigations. 42 (5), 438-454 (2013).</li>
<li>Yan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibiting+accelerated+rejection+mediated+by+alloreactive+CD4%28%2B%29+memory+T+cells+and+prolonging+allograft+survival+by+1alpha%2C25-dihydroxyvitamin+D%283%29+in+nude+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology+Letters%22%5BJournal%5D)">Inhibiting accelerated rejection mediated by alloreactive CD4(+) memory T cells and prolonging allograft survival by 1alpha,25-dihydroxyvitamin D(3) in nude mice.</a> Immunology Letters. 149 (1-2), 54-61 (2013).</li>
<li>Lin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arsenic+trioxide+is+a+novel+agent+for+combination+therapy+to+prolong+heart+allograft+survival+in+allo-primed+T+cells+transferred+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Immunology%22%5BJournal%5D)">Arsenic trioxide is a novel agent for combination therapy to prolong heart allograft survival in allo-primed T cells transferred mice.</a> Transplant Immunology. 25 (4), 194-201 (2011).</li>
<li>Shao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD44%2FCD70+blockade+and+anti-CD154%2FLFA-1+treatment+synergistically+suppress+accelerated+rejection+and+prolong+cardiac+allograft+survival+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scandinavian+Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">CD44/CD70 blockade and anti-CD154/LFA-1 treatment synergistically suppress accelerated rejection and prolong cardiac allograft survival in mice.</a> Scandinavian Journal of Immunology. 74 (5), 430-437 (2011).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+highly+reproducible+cervical+cuff+technique+for+rat-to-mouse+heterotopic+heart+xenotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Xenotransplantation%22%5BJournal%5D)">A highly reproducible cervical cuff technique for rat-to-mouse heterotopic heart xenotransplantation.</a> Xenotransplantation. , (2017).</li>
<li>Oberhuber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+cervical+heart+transplantation+model+using+a+modified+cuff+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (92), e50753(2014).</li>
<li>Blanchard, J. M., Pollak, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Techniques+for+perfusion+and+storage+of+heterotopic+heart+transplants+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Techniques for perfusion and storage of heterotopic heart transplants in mice.</a> Microsurgery. 6 (3), 169-174 (1985).</li>
<li>Felix, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((H2-DMalpha%28-%2F-%29+mice+show+the+importance+of+major+histocompatibility+complex-bound+peptide+in+cardiac+allograft+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">H2-DMalpha(-/-) mice show the importance of major histocompatibility complex-bound peptide in cardiac allograft rejection.</a> Journal of Experimental Medicine. 192 (1), 31-40 (2000).</li>
<li>Tomita, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+technique+of+heterotopic+cervical+heart+transplantation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Improved technique of heterotopic cervical heart transplantation in mice.</a> Transplantation. 64 (11), 1598-1601 (1997).</li>
<li>Niimi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+technique+for+heterotopic+cardiac+transplantation+in+mice%3A+experience+of+3000+operations+by+one+surgeon%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The technique for heterotopic cardiac transplantation in mice: experience of 3000 operations by one surgeon.</a> Journal of Heart and Lung Transplantation. 20 (10), 1123-1128 (2001).</li>
<li>Wang, K., Zhang, N., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+technique+of+mouse+heterotopic+heart+graft+retransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Improved technique of mouse heterotopic heart graft retransplantation.</a> Microsurgery. 26 (3), 200-202 (2006).</li>
<li>Plenter, R. J., Grazia, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+heterotopic+heart+transplant+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Murine heterotopic heart transplant technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (89), (2014).</li>
<li>Ratschiller, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterotopic+Cervical+Heart+Transplantation+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (102), e52907(2015).</li>
<li>Zhou, Y., Gu, X., Xiang, J., Qian, S., Chen, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparative+study+on+suture+versus+cuff+anastomosis+in+mouse+cervical+cardiac+transplant%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+and+Clinical+Transplantation%22%5BJournal%5D)">A comparative study on suture versus cuff anastomosis in mouse cervical cardiac transplant.</a> Experimental and Clinical Transplantation. 8 (3), 245-249 (2010).</li>
<li>Fukunaga, N., Bissoondath, V., Rao, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Submandibular+Gland-preserving+Technique+for+Heterotopic+Cervical+Heart+Transplantation+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Submandibular Gland-preserving Technique for Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice.</a> Transplantation. 102 (11), 464-465 (2018).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Fare kalp nakli modelleri nakil immünoloji araştırmaları için önemli araçlardır, çünkü bu modelin bağışıklık mekanizmalarını değerlendirmek için gerekli araç ve gereçler ve çok sayıda gen modifiye edilmiş fare mevcuttur. Ancak, damar sütür ve eversiyon gibi mikrocerrahi teknik zorluklar, yaygın kullanımını sınırlandırmış. Bu çalışmada, mindik kalp naklinin bazı temel teknik zorluklarını araştırdık ve iyi sonuçlar elde ettik. Protokolün kritik bir adım manşet üzerinde damar duvarı evert için bir stent olarak lümen içine b...

1973 yılında karın içinde uçtan uca anastomoz yoluyla fare heterotopik kalp nakli kurulması temel transplantasyon immünoloji araştırma1önemli bir kilometre taşı oldu. Bu model iskemi reperfüzyon yaralanma mekanizmaları analiz etmek için önemli ve geçerli bir araç sağlanan2, immünolojik ret, ve tolerans3,4. Ancak, cerrahinin karmaşık ve zaman alıcı doğası nın yanı sıra enfeksiyon potansiyeli ciddi perioperatif abdominal yapışıklıklara ve inflamatuar reaksiyonlara neden olabilir ve heterotopik kalp transplantasyonu modelinde düşük verimlilik sağlar.
Servikal heterotopik kalp nakli tekniği ilk olarak Chen tarafından 19915yılında tanımlanmıştır. Bu modelde, alıcının dış juguler ven greft pulmoner arter ekadar ve karotis arter artan aort anastomosed. Bu yöntemin başlıca avantajları izleme kolaylığı ve alıcıya travma azaltılması vardır. Aynı yıl, Matsuura geliştirilmiş bir teknik tarif, hangi dış juguler ven ve karotis arter sonunda bir Teflon manşet üzerinde everted ve bir çevresel ipek ligature ile sabit6. Bazı araştırmacılar da alıcının dış juguler ven içine manşet eklemeden önce donör kalp sağ pulmoner arter manşet sabit7. Şimdiye kadar, manşet tekniği yaygın akciğer8,karaciğer9,ve renal10 transplantasyonu için olanlar da dahil olmak üzere çeşitli vasküler pedikül nakli modelleri, uygulanmıştır.
Bugüne kadar, manşet tekniği ile ilgili çeşitli zorluklar vardır. Örneğin, karotis arter ek elastikiyet nedeniyle manşet üzerinde evert zordur, doku geriye doğru takla ile sonuçlanan. Bu nedenle bu adımı tamamlamak için ek uygulama ve mikrocerrahi dilatör gerekebilir. Buna ek olarak, servikal damar hazırlanması 25 dakika kadar sürebilir.
Bu sorunları çözmek için, biz manşet tekniğine dayalı ve damar duvarının eversion yardımcı olmak için bir iç tüp kullanarak dış juguler ven ve karotis arter üzerinde manşet sabitleme içeren iç tüp tekniği, tanıtmak. Buna ek olarak, basit eğitim ile, alıcı hazırlık 15,5 dakika ya da azalır. Bu teknik operasyonun karmaşıklığını azaltır ve ek uygulama veya vasküler dilatör kullanımını gerektirmez. Tüm transplantasyon immün araştırmalarda uygulanabilir, özellikle alıcı iki kardiyak allografts alır sırasında üçüncü taraf bağışıklık toleransı doğrulamak için, karın içinde ve boyun diğer11. Ayrıca bu modeli oluşturmak için iki yetenekli cerrah arasında işbirliği yapmanızı öneriyoruz, bir cerrah alıcı hayvanı hazırlarken diğeri donör kalbi hasat edip implante eder. Bu tür işbirliği çalışma süresini 25 dakikaya kısaltabilir. Bu optimize prosedürü kullanarak, biz syngeneic kurduk, allojenik12,13,14,15,16,17,18,19, ve ksenojenik fare kalp nakli modelleri20.
İç tüp tekniğinin geliştirilmesinin mantığı, yüksek başarı oranına sahip bir fare kalp nakli modelinin kurulması için çalışma süresini kısaltmaktı. Servikal kalp nakli modelinin optimizasyonu, geleneksel dikiş ve manşet tekniğine göre kısa bir süre içinde yüksek başarı oranlarının elde edilmesine yardımcı olur21. Ayrıca, işbirliği modeli daha da tek bir operatör ile yapılan ameliyatlar ile karşılaştırıldığında donör kalbin sıcak iskemik süresini azaltabilir.

<table><tbody><tr><td>Arter manşeti</td><td>Kendi kendine yapılan</td><td></td><td>Poliamid tüp. Çap: 0.55 mm, Uzunluk: 1.0 mm</td></tr><tr><td>Arter iç tüpü</td><td>Kendi kendine yapılan</td><td></td><td>Poliamid tüp. Çap: 0,28</td></tr> mm <tr><td>mikro kavisli forseps</td><td>Şangay Tıbbi Aletler (Grup) Ltd., Corp. Cerrahi Aletler Fabrikası</td><td>WA3050</td><td>1/8 ark, kancasız 0,3 mm uç</td></tr><tr><td>Mikro iğne tutucular</td><td>Şangay Tıbbi Aletler (Grup) Ltd., Corp. Cerrahi Aletler Fabrikası</td><td>WA2050</td><td>0,2 mm uç</td></tr><tr><td>Mikro makas</td><td>Şangay Tıbbi Aletler (Grup) Ltd., Corp. Cerrahi Aletler Fabrikası</td><td>WA1050</td><td>Düz, bıçak uzunluğu: 10 mm</td></tr><tr><td>Mikro düz forseps</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Cerrahi Aletler Fabrikası</td><td>WA3060</td><td>0,15 mm kancasız uç</td></tr><tr><td>Scanlan Vascu-Statt Bulldog Kelepçeleri</td><td>Scanlan International Inc</td><td>1001-531</td><td>Sıkıştırma basıncı 20&ndash; 25 gram</td></tr><tr><td>Damar manşeti</td><td>Kendi kendine yapılan</td><td></td><td>Poliamid tüp. Çap: 0,9 mm, Uzunluk: 1,2 mm</td></tr><tr><td>Damar iç tüpü</td><td>Kendi kendine yapılan</td><td></td><td>Poliamid tüp. Çapı: 0,6 mm</td></tr></tbody></table>

murin kalp nakli için manşet tekniğinin optimizasyonu

Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation

40 yılı aşkın bir süredir rüren kalp nakli yapılmaktadır. Mikrocerrahideki gelişmelerle birlikte cerrahi verimliliği artırmak için bazı yeni teknikler kullanılmıştır. Laboratuvarımızda manşet tekniğini iki ana adımla optimize ettik. İlk olarak, iç tüp tekniğini kullanarak dış juguler vene ve karotis arter kan damarına geçici bir iç tüp yerleştirerek kabın manşet üzerinde eversiyonını kolaylaştırdık. İkinci olarak, iki deneyimli cerrahın işbirliği ile tam heterotopik kalp nakli gerçekleştirdik. Bu modifikasyonlar çalışma süresini %95'lik bir başarı oranıyla 25 dakikaya indirdi. Bu raporda, bu yordamları ayrıntılı olarak açıklar ve ek bir video sağlarız. Geliştirilmiş manşet tekniği ile ilgili bu raporun, murine heterotopik kalp nakli için pratik rehberlik sunacağına ve temel araştırmalar için bu fare modelinin yararını artıracağına inanıyoruz.

Cerrahi Operasyon Süresi
Eğitimden sonra, yetenekli bir cerrah ameliyatı iç tüp tekniğini kullanarak 35 dakika içinde başarıyla gerçekleştirebilir, alıcının hazırlanması için yaklaşık 15,5 dakika, donör hazırlanması için 10,9 dakika, donör kalp anastomozları için ise 4,4 dakika gereklidir. Soğuk ve sıcak iskemi süresi (donör preparatından kalp implantasyonuna kadar) iç tüp tekniği ve dikiş tekniği olmadan manşet tekniği kullanılarak yapılan operasyona göre 15,3 dakikaya düşürü...

Biz manşet üzerinde evert yardımcı olmak için fare servikal heterotopik kalp nakli için manşet tekniği bir iç tüp yaklaşım tanıtmak. İki deneyimli cerrah arasındaki işbirliğinin ameliyat süresini belirgin bir şekilde kısalttAdığını gördük.

Murin Kalp Nakli için Manşet Tekniğinin Optimizasyonu

Murine cardiac transplantation has been performed for more than 40 years. With advancements in microsurgery, certain new techniques have been used to ...

Herkese merhaba. Benim adım Dr.Zhongquan Qi.It yaygın manşet tekniği 1991 yılından bu yana kalp nakli olarak kullanılmıştır bilinmektedir. Tıbbi cerrahi ve yeni cerrahi teknikte büyük ilerlemeler olmasına rağmen, manşet tekniğine dayalı bazı zorluklar hala vardır.Bu, size cerrahi verime önemli ölçüde eşit olabilecek bir optimotik yarı tekniği gösterecekleri bir açıklama şeklidir. Ana prosedürler vizör içine bu tüp geçici olarak ekleyerek. Kanıt ISO neredeyse yarısı okuyun.Tüp tekniğini ekleme. Yetenekli bir cerrah % 95 başarı oranı ile 35 dakika içinde operasyon gerçekleştirebilirsiniz. Daha sonra termal cerrah operasyon modülü istihdam edebilirsiniz, hangi daha fazla skeptimic gösteren operasyonun verimliliğini artırır ve operasyon süresi yaklaşık 35 dakika kısaltılır.Teşekkürler. Ve bu tarifi ve kilometrelerciyi pentobarbital ile bağlar. Sağ geç servikal bölgede saç kaldırmak için atravmatik mekanik makası kullanın.İyot antiseptik ve ardından %70 etanol ile cerrahi alanı silmek için steril bir pamuk ucu aplikatör kullanın. Fareyi işlem platformunda supine pozisyonunda yerleştirin. Fareyi steril gazlı bezle örtün.Sağ omuz köprücük eklemi alt bir üçüncü NACMEC hattından bir enine kesi yapmak için bir oftalmik makas kullanın. Yeterli uzunlukta ortaya çıkarmak için mikro kavisli forceps ile sağ dış junguler ven izole. Elektro pıhtılaşma yoluyla brunch'ları kesin.Ve geminin yerini disto'da ve 6 20 6 dikişkullanarak bulun. Bir toz kelepçe kullanarak proksimally dış junglar ven kelepçe. Ve sonra bir mikro makas kullanarak bağ yakın ven çevirmek.Herhangi bir artık kan kaldırmak için milimetre 02 dört santigrat derece heparin salient başına 100 adet ile damar lümenyı yıkayın. Mikro düz forceps kullanarak vena kava ile dış junglar ven çekin. Bir stent olarak lümen içine ve mikro düz forceps ile eğri üzerinde damar duvarı üzerinde damar iç tüp yerleştirin.Bir çevresel sekiz ila 06 sütür kullanarak eğrinin proksimal ucunda tahriş edici Faso endotel düzeltin. Damar damarından damar iç tüpünü çekmek için mikro düz forceps kullanın. Sağ karotis arter izole etmek için mikro forceps ile künt diseksiyon gerçekleştirin, sternokleidomastoid iç kenarına bitişik.Bir babcock kelepçe kullanarak sağ karotis Arter proksimally kelepçe. 6-06 dikiş kullanarak karotis arteri distal olarak bulun. Ve karotis arteri ligatüre yakın bir şekilde nakletmek için mikro makas kullanın.Karotis arteri mililitre başına 100 ünite ile yıkayın 02 dört santigrat heparin herhangi bir kan kalıntısı kaldırmak için göze çarpıyor. Arter eğrisi ile karotis arter pass ve mikro düz forceps kullanarak arter damar içine arter iç tüp eklemek. Mikro düz forsepskullanarak eğri üzerinde gemi için amaç.Ters facile endotel bir çevresel sekiz ila 06 sütür kullanarak düzeltin. Mikro düz forceps ile arter damarından arter iç ucu çekin. Anestezi ve enfeksiyonu alıcı ile aynıdır.Bir oftalmik makas ile bir karın orta hat kesi yapmak ve karın boşluğu maruz. Inferior vena kava ortaya çıkarmak için mikro eğri forceps kullanın. Ve sonra intravenöz olarak mililitre başına 100 birim 200 mikrolitre enjekte 02 dört santigrat derece heparin inferior vena kava ile vücut ağırlığının 20 gram başına belirgin.Oftalmik makas ile torakotomi yapın. Romita aksiller ışık kesilerini paletle kaburgaları kesin. Flav anterior göğüs duvarı dışa doğru torasik kavite ortaya çıkarmak için.Timusu mikro forceps ile özelleştirin. Aort maruz ve daha sonra mililitre başına 100 birim 200 mikrolitre bol 02 dört santigrat derece heparin aort kemeri ile koroner arter için belirgin. Aort kemerbaşında artan aort transect için bir mikro makas kullanın.Pulmoner arteri iki ana dalı mikro makasla geçirin. Üstün vena kava ve inferior vena kava yaklaşık bir altı-02 sütür kullanarak bulun ve bağ ven damıtmak transect için bir mikro makas kullanın. Pulmoner damarları tek bir altı kullanarak çevreyle birlikte bulun, 06 sütür ve mikro makas kullanarak ligatür distal ven dalları kesti.Çevredeki yumuşak dokulardan kalp greftini çıkarın. Donör kalbini alıcının sağ boyun bölgesine ters çevirin. Donör kalbin pulmoner arterini mikro düz forceps ile 6-06 halkasına sok.Vena kava etrafında damar lümen sarın ve sonra damar eklem viraj buzağı etrafında altı ila 06 dikiş döngü sıkın. Greft ve arter eğrisinin aort anastomozisini gerçekleştirin. Kümelenmiş juguler ven ve ardından kümelenmiş juguler arteri bırakın.Damarı birleştirilmiş ve bükülmüş tutun ve kan akışının engellenmediğinden emin olun. Geçen kalp greftini deri altı uzaya ayarlayın ve sonra kesiyi dikin. Post operatif greft fonksiyonunu izlemek için kelepçe salımdan sonra en az beş dakika boyunca normal sinüs ritmine ve normal sinüs ritminin korunmasına kadar süreyi kaydedin.Alıcı anesteziden uyanana kadar alıcıyı tek battaniyenin üzerine yerleştirin. Birlikte ele alındığında, bizim cerrahi bildirilmiştir manşet teknikleri kullanır rağmen, biz buna dayalı iç çekirdek tekniği ni kurduk. Ameliyattaki zorluğu azaltın ve optimizasyon tekniği ile anastomoz süresini kısaltın.Şematikte gösterilen operasyonun verimliliğini daha da artırmak için çift cerrahi kuruluş sloganını önerdik. Ve ameliyat süresi yaklaşık 25 dakikaya kısaltılacak. Tam MHC uyumsuz BALBC allograft kalp C57BL6 alıcı fareleriçine transplantasyon sekiz gün sonra reddedilebilir.Araştırmamızda kullanılan sinjenenik kalp nakli, ameliyat öncesi normal kiloya göre %15'lik bir kilo kaybı nedeniyle nadir görülen bir olgu dışında 100 günden fazla sürdü. Yedinci gün allograft histopatoloji sallallia akut ret tipik özellikleri ortaya, doku nekrozu ile ağır bir hücresel infiltrasyon dahil. Singenik greftler miyosit nekroz veya inflamatuar hücre infiltrasyonu bulgusu olmadan normale yakındır.Syngenetik kalp naklinden 100 gün sonra, anastomoz bölgesinin vasküler endoteli immünofloresan ile toplanabilir ve boyanabilir. Bu analizde damar duvarında ters kapma, tromboz veya intimanın kalınlaşması gözlenmemiştir. Elektro mikroskobik görüntüleme, pürüzsüz bir endotel ve düzenli boylamsal kabuk oluşumu nun endotel hücreleri ile düzgün ve yakından düzenlenmiş ve yüzeyde belirgin bir tortu bulunmadığını ortaya koymuştur.

optimization-of-the-cuff-technique-for-murine-heart-transplantation

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Sıçangil modeli servikal kalp nakli immünolojik hem de iskemi reperfüzyon yaralanması çalışmasından için uygundur. Biz olmayan bir dikiş manşet tekniği kullanılarak prosedür değiştirilmiş ve bu yaklaşım ile 1.000 'den fazla başarılı nakli gerçekleştirildi.  Burada, videoyu tamamlamak için bu tekniğin ek ayrıntıları.

Modifiye Manşet Tekniği Sıçangiller Servikal Kalp Nakli Modeli

El yazması fare heterotopik kalp nakli gerçekleştirmek için gereken adımları açıklar.

Mürin Heterotopik Kalp Nakli Tekniği

Manşet tekniği, küçük damarların teknik olarak zorlayıcı sütür anastomozlarından kaçınarak farelerde heterotopik servikal kalp nakli modelini kısaltır ve kolaylaştırır. Bu video makalesinde gösterilen teknik ayrıntılar, araştırmacıların bu modeli laboratuvarlarında kurmalarına izin vermelidir.

Farelerde Heterotopik Servikal Kalp Nakli

Burada servikal mürin modelinde sütür olmayan manşet tekniği ni kullanarak farelerde heterotopik aort transplantasyonu protokolünü salıyoruz. Bu model kronik allogreft vaskülopatinin (CAV) altta yatan patolojisini incelemek için kullanılabilir ve oluşumunu önlemek için yeni terapötik ajanların değerlendirilmesine yardımcı olabilir.

Modifiye Dikişsiz Manşet Tekniği Kullanılarak Murine Servikal Aort Transplantasyon Modeli

Bu protokolde, kardiyak allogreft rejeksiyon mekanizmasını araştırmak için bir fare kalp nakli modeli kullanılmıştır. Bu heterotopik kalp nakli modelinde, modifiye Manşet tekniği kullanılarak kalp implantasyonunun servikal uçtan uca anastomozu ile operasyon etkinliği artırılır ve kalp greftlerinin sağkalımı sağlanır.

Fare Servikal Heterotopik Kalp Transplantasyon Modeli için Modifiye Manşet Tekniği

Fare kardiyak transplantasyon modelleri, transplantasyon immünolojisini incelemek için değerli araştırma araçlarını temsil etmektedir. Mevcut protokol, laminer kan akışına izin vermek için alıcının ortak karotis arterine ve donörün pulmoner arter gövdesine manşetlerin yerleştirilmesini içeren fare heterotopik servikal kardiyak transplantasyonunu detaylandırmaktadır.

Vasküler Manşetler Kullanılarak Fare Heterotopik Servikal Kardiyak Transplantasyonu

Bu protokol, fare ortotopik karaciğer transplantasyonunda manşet tekniği kullanılarak damar rekonstrüksiyonu için teknik bilgi sağlar.

Fare Ortotopik Karaciğer Transplantasyonunda Cuff Tekniği ile Vasküler Rekonstrüksiyon

Bu protokol, farelerde manşetsiz, dikiş bazlı servikal heterotopik kalp nakli tekniği sunar; bu teknik, donör-spesifik bağışıklık toleransını fizyolojik koşullarda minimum yabancı madde müdahalesiyle değerlendirmek için ikinci heterotopik kalp greftinin güvenilir şekilde yerleştirilmesini sağlamaktadır.

Farelerde Donör-Spesifik Bağışıklık Toleransını Değerlendirmek İçin İkincil Heterotopik Kalp Nakli için Manşetsiz Dikiş Tabanlı Servikal Model

Bu protokol, sare servikal kalp nakli için basitleştirilmiş ve uçtan yana dikiş anastomozu tekniği sunarak nakil immünolojisini incelemek için sağlam ve tekrarlanabilir bir model sunar.

Nakil İmmünolojisini Çalışmak İçin Uçtan Yana Anastomoz Tekniği Kullanılarak Servikal Heterotopik Fare Kalp Nakli

Bu video, CD40 aktivasyonu ve dokunulmazlık indüksiyonu eğitim için bir model antijen sunan hücre (APC) olarak da kullanılabilir C57BL / 6 farelerin dalak, fare B hücreleri genişleme prosedürü göstermektedir.

Murin Model B hücreleri CD40 aktivasyonu

Öğrenin, fare servikal heterotopik kalp naklinde manşet tekniğini iç tüp yaklaşımıyla optimize etme yöntemini. Bu teknik, damar evrasyonunu kolaylaştırarak ameliyat süresini kısaltır ve cerrahi verimliliği artırır.

Murin Kalp Nakli için Manşet Tekniğinin Optimizasyonu

Daha fazla video keşfet