Name: Sıçanlarda Kronik İmplantasyon için Periferik Sinir Stimülasyon Elektrotlarının Hazırlanması (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-07-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 39 s
Description: Keşfedin sıçanlarda kronik periferik sinir stimülasyonu için düşük maliyetli manşet elektrot yapımını. Bu yöntem vagus sinir stimülasyonu ile inme sonrası iyileşme çalışmalarına olanak tanır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma Dallas'taki Texas Üniversitesi ve UT Vekiller Kurulu tarafından finanse edilmiştir. Teknik yardım için Solomon Golding, Bilaal Hassan, Marghi Jani ve Ching-Tzu Tseng'e teşekkür ederiz.

Bu protokolde açıklanan tüm prosedürler, NIH Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu'na uygun olarak yürütülmektedir ve Dallas'taki Texas Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanmıştır.
1. Uyarıcı manşet elektrot imalatı
<ol><li>Manşet borularını hazırlayın.<ol>
<li>Bir jilet kullanarak, 2,5 mm uzunluğunda polimer boru bir parça kesti. Borunun içine bir ataş veya forceps yerleştirin ve bir tarafta manşet boru duvarından uzunlamasına bir yarık yapmak için bıçağı kullanın.</li>
		<li>Büşeleri borudan çıkarın ve uzun eksene dik olan manşetin orta çizgisinden büyük bir dikiş iğnesi yerleştirin. İğneyi yarıktan (üstten) ve karşıdaki tüpün ortasına (alt) yerleştirin. Kalan montaj adımları sırasında yerine manşet pin için köpük tahta içine iğne yerleştirin.</li>
	</ol></li>
	<li>İmplantasyon sırasında manşet kapatmayı güvence altına almak için dikiş yerleştirin.<ol>
<li>Küçük dikiş iğnesini manşet duvarından, orta hatta, bir tarafta üst yarıktan yaklaşık 0,5 mm'ye yerleştirin. Manşet borularına zarar vermemek için iğneyi içten dışa yerleştirin. İğnegözüne 2 cm uzunluğunda 6/0 dikiş yerleştirin ve sütün ucunu manşete sokmak için iğneyi boru duvarından çekin.</li>
		<li>İpliği yerinde bırakarak, iğneyi çıkarın ve manşetin orta hattı boyunca ilk deliğin yaklaşık 0,5 mm altında, boru duvarından ikinci bir delik sapla. Sütürü iğnenin gözüne yerleştirin ve iğneyi boru duvarından geçirerek sütü manşetten tekrar geçirin.</li>
		<li>Dikiş ipliği her iki ucu şimdi manşet dış tarafında olmalıdır. Sütürü üst delikten ~1,5 cm, alt delikten ~0,5 mm uzatır.</li>
		<li>Alt delikten uzanan dikişkısa ucuna UV kürü yapıştırıcı küçük bir miktar uygulayın ve alt kuyruk neredeyse boru dış duvar ile floş kadar uzun dikiş ucunu çekin. Yapıştırıcıyı tedavi etmek için UV değnekkullanın ve sütürü sıkıca yerinde tutun.</li>
		<li>Manşetin karşı tarafında 1.2.1 ile 1.2.3 adımlarını tekrarlayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Platin:İridyum (Pt:Ir) tel kablolarını yerleştirin.<ol>
<li>Manşet duvarında 4 delik yapmak için küçük dikiş iğnesi kullanın. Her bir delik, manşetin her iki tarafındaki üst yarıktan yaklaşık 0,5-0,8 mm uzaklıkta, dik orta hattan yaklaşık 0,5-0,8 mm uzaklıkta olmalıdır. DİkKAT: İpuçlarının en tutarlı ve doğru yerleştirilmesi için, dikiş yerleşimini kılavuz olarak kullanarak, tüm delikleri açmak için iğneyi içten dışa yerleştirin.</li>
		<li>Dikiş iğnesini tekrar takın, bu kez dıştan içe, kurşun deliğinden 1. İğnenin gözüne 7,5 cm uzunluğunda pt:Ir telinin yaklaşık 0,5 cm'sini yerleştirin ve borunun içinden geçirerek tel inip manşet duvarından geçirin. Teli manşetin dış tarafına ~4,5 cm kadar uzamış olacak şekilde ayarlayın(Şekil 1A).</li>
		<li>İğneyi tekrar kurşun deliğinden geçirin, yine dıştan içe çalışır ve ayrıca iğneyi kurşun deliğinden doğrudan kurşun deliğinden 2'ye yerleştirin 1. Pt:Ir telinin kısa (iç) ucunun ~0,5 cm'sini iğnenin gözüne takın ve borudan geçirerek tel kurşunu manşet duvarlarından geçirin. NOT: Pt:Ir telinin her iki ucu artık manşetin dış tarafında olmalı ve yarık kenarının etrafında ve kurşun deliğinden 1(Şekil 1B)bir tel halkası oluşur.</li>
		<li>Pt:Ir kablosunun 3 ve 4'ün kurşun deliklerinden geçmesi için 1.3.1'den 1.3.3'e kadar adımları tekrarlayın.</li>
		<li>Bir bütan çakmak kullanarak, pt:Ir tellerin ucundaki 5-6 mm uzunluktaki yalıtımı kurşun deliği 2 ve kurşun deliği 4'ten dikkatlice çıkarın. DİkKAT: Manşetin ters kalanına zarar vermemek için uçları manşet in geri kalanından dikkatlice izole edin. Yaralanmayı önlemek için kabloları tutmak için araçları kullanın.</li>
		<li>Kabloları son konumlarına yerleştirmek için çıplak kabloyu manşetin içine hizala. Bunu yapmak için, pt:Ir telinin ucunu, 1 no'lu delikten, telin yalıtımsız kısmı delik 1 ile temize çıkana kadar uzanan ucunu yavaşça çekin. 3 ve 4 kurşun delikleri ile dişli tel inyalıtımsız ucunu hizalamak için diğer kurşun ile tekrarlayın.</li>
		<li>Kurşun delikleri 1 ve 3 manşetin dış tarafındaki tel halkalara az miktarda UV kürü yapıştırıcısı uygulayın. Yapışkanı tedavi etmek ve müşteri adaylarını yerinde sabitlemek için UV değnekini kullanın.</li>
		<li>Yalıtımsız Pt:Ir tel ibarelerini manşetin iç duvarına itmek için küçük bir pipet ucu kullanın. İpuçları yerleştirildikten sonra, 2 ve 4 arasındaki kurşun deliklerinden uzanan tellerin uçlarını keserek yaklaşık 1 mm'lik telin manşet duvarının dışına uzanıp uzandığını belirtin.</li>
		<li>Telin 1 mm kuyruklarını manşetin dış yüzeyine doğru katlayın ve onları birbirine kısaltmamaya özen inin. Sadece iki kuyrukları kapsayacak şekilde UV kürü yapıştırıcı küçük bir miktar uygulayın ve kurşun yerleşimi güvenli ve elektrik yalıtımı sağlamak için yapıştırıcı tedavi. DİkKAT: Kabloları izole etmek ve hedef dışı uyarılmayı önlemek için dışa maruz kalan Pt:Ir yüzeylerini yapıştırıcı ile tam olarak kapsaymak önemlidir.</li>
	</ol></li>
	<li>Pt:Ir tel ilerlüne dikiş emniyeti ile sabit.<ol>
<li>Köpük tahtadan manşet montaj ile büyük iğne çıkarın. İğnegözüne 3 cm uzunluğunda 6/0 dikiş takın ve orta noktada manşetin alt kısmından dikiş çıkarmak için iğneyi borudan çekin.</li>
		<li>Pt:Ir kurşun emniyeti için dikiş ipliğini tamamlamak için küçük dikiş iğnesine geçin. İğneyi aynı orta hat deliğinden geçirin, borunun ve telin deformasyonundan kaçınmak için içten dışa doğru tekrar çalışın. Sütürün dış kuyruğunu iğnegözüne yerleştirin ve manşetin kenarına dikiş halkası oluşturmak için iğneyi manşet duvarından çekin(Şekil 1C). NOT: Dikişin manşetin uzun ekseni boyunca yöneltilmesini ve boruya karşı düz yatmasını sağlamak için pratisyen hekimler kullanın ve mikroskop altında çalışın. Bu adım, kurşunların manşetin iç tarafında ayrı kalmasını ve manşet orta hattına yanal olarak yerleştirilmesini sağlar.</li>
		<li>Manşetin dış tarafında, sütür uçları yarım düğüm halinde bağlayarak manşetin diğer ucu etrafında ikinci bir döngü oluşturun. Dikişin manşetin uzun ekseni boyunca çalıştığından ve boruya karşı düz olduğundan emin olun. Düğüm sıkı tutarken bu boru karşı düz yatıyor, uv kürü yapıştırıcı küçük bir miktar uygulayın yarım düğüm ve yerinde tutmak için tedavi.</li>
		<li>Dikiş ipliğin uçlarını mümkün olduğunca düğüme yakın dikkatlice kesin. Gerekirse, dikişkısa uçları yapıştırmak için ek UV kürü yapıştırıcı sıyrık küçük bir miktar kullanın, böylece tüp karşı düz yatıyordu(Şekil 1D).</li>
	</ol></li>
	<li>Lehim konektörü pt:Ir tel kablolarına bağlanır.<ol>
<li>Bir bütan çakmak kullanarak, Pt:Ir tel kablolarının her birinin sonundaki ~3 mm'lik yalıtımı çıkarın. Bir altın iğnenin fincan tarafını lehimle (Bkz. Malzemeler Tablosu)her kurşunun yalıtımsız ucuna kadar.</li>
	</ol></li>
	<li>Monte edilen cihazın empedansını test edin.<ol>
<li>Altın pimleri bir LCR metre veya elektrot empedans kontrol modülü girişlerine bağlayın ve test frekansını 1 kHz'e ayarlayın. Altın kurşun pimleri ve prob konektörleri kuru tutmaya özen, tuzlu dolu küçük bir kabın içinde manşet boru (ve Pt:Ir stimülasyon temasları iç manşet) batırın. Monte edilmiş manşetin implantasyona geçmeden önce 1 kHz'de 2 kΩ'den daha az bir empedansa sahip olduğunu doğrulayın. NOT: Yüksek empedans genellikle yetersiz Pt:Ir yüzey alanı maruz gösterir, yalıtım yetersiz kaldırma gibi faktörler nedeniyle ortaya çıkabilir, manşet iç yapıştırıcı kazara uygulama, kırık tel iplikçikleri, vb. Manşetler ayrıca, uzun süreli kullanımda kısa temaslara neden olabilecek kırık veya kötü yerleştirilmiş tel iplikçikler için de kontrol edilmelidir.</li>
	</ol></li>
</ol>2. Baş-kapak yapımı
NOT: Headcap montaj prosedürleri daha önce yayınlananlara benzer (Childs ve ark.17), ve burada kolaylık sağlamak için özetlenmiştir.
<ol><li>
Başlık17 montajı
	<ol>
<li>30 AWG tel sargı, bir ~13 mm uzunluğunda ve bir ~10 mm uzunluğunda iki küçük parça kesin. Her iki kablonun her iki ucundaki ~1,5 mm'lik yalıtımı sökün. Her telin bir ucuna altın bir iğnenin pim tarafını, bardağa mümkün olduğunca yakın şekilde lehimle. Lehim eklemi ötesinde pin fazla uzunlukta kesmek için tel kesiciler kullanın.</li>
		<li>4 iğneli mikro şerit konektörün iki merkezi lehim kaplarına AWG kablolarının diğer uçlarını lehimleme.</li>
		<li>Tel başlığı bükmek konektöre doğru yol açar ve şekil 2A'dagösterildiği gibi altın pimleri birbirine paralel olarak konektöre karşı düz bir yere yerleştirin. Kısa kabloya bağlı pim, uzun kabloya bağlı pimin altına yerleştirilmelidir. Yerine headcap yol güvenliğini sağlamak için tırnak akrilik, diş çimentosu veya UV kür yapıştırıcı kullanın.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. Cihaz kullanımı
<ol><li>Kronik vagus sinir stimülasyonu için manşet elektrotlarını yerleştirin. NOT: Tüm cerrahi işlemler steril veya aseptik teknik kullanılarak uygun anestezi altında, NIH Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Rehberine uygun olarak ve lokal IACUC onayı ile yapılmalıdır. Aşağıdaki yordamlar aygıtın temsili kullanımını göstermek içindir ve kapsamlı olması amaçlanmamıştır.<ol>
<li>Bir stereotaksik çerçeve içinde sıçan yerleştirin ve headcap / konektör implantasyonu için kafatası yüzeyini ortaya çıkarmak için parietal ve oksipital kemikler üzerinde sagital kesi yapmak. Dikkatle kafatası 4 delik matkap ve kuyumcu vidaları yerleştirin. Kafatası ve vidalar için headcap güvenli diş akrilik kullanın.</li>
		<li>Stereotaksik çerçeve den sıçan çıkarın ve sağ tarafında yatıyordu. Boynun sol tarafında deride dikey bir kesi yapın ve sterilomastoid ve sternohyoid kaslar arasında ve omohyoid kas altında bulunan karotis arter, sol vagus sinirini dikkatlice inceleyin.</li>
		<li>Manşetin tüneli deri altında kafatasına doğru gidiyor. Altın pimleri kullanarak müşteri adaylarını başlık başına bağlayın.</li>
		<li>Vagus sinirini manşetin içine yerleştirin ve kelepçe dikişlerine çift düğüm atarak cihazı kapatın. Künt, iletken olmayan kancalar ile sinir manipüle ederek veya sinir çevreleyen bağ dokusu kavrayarak implantasyon sırasında sinir zarar önlemek için dikkatli olun.</li>
		<li>Cihaza stimülasyon uygulayarak implantı test edin (10 s tren 0.8 mA, 30 Hz, 100 μs bifhasic darbeler). Uygun implantasyon nefes kesilmesi ve SpO2%5 veya daha fazla bir düşüş ile sonuçlanacaktır.</li>
		<li>Kapak altın iğneler ve diş akrilik ile maruz yol açar, dikiş ile yakın yaralar, ve tuzlu kesi siteleri temizlemek, alkol, ve povidon iyot çözeltisi.</li>
		<li>NIH yönergeleri ve IACUC onayı doğrultusunda replasman sıvıları, analjezikler ve postoperatif bakım sağlayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Uyanık davranış sırasında vagus siniri uyarmak. NOT: Hayvanlar belirli motor görevleri yerine getirirken VNS'nin teslimi daha önce görevle ilgili kasların motor haritası gösterimini genişletmek için gösterilmiştir. Bu doğrulanmış paradigmayı cihaz kullanımının temsili bir örneğini sağlamak için kullanırız, ancak diğer birçok davranışsal paradigma ve/veya stimülasyon parametreleri alternatif uygulamalarla ilgili olabilir. Sıçanlar cihaz implantasyonu ndan önce burada kullanılan kol pres görevi üzerinde yeterlilik için eğitildi. Ameliyat sonrası, iyi performans vns doğum dan önce tekrar doğrulandı: sıçanlar günde iki 30 dakika eğitim seanslarında en az 100 başarılı deneme yaptı. VNS, 5 gün boyunca sonraki 10 eğitim seansında doğru kol presleri ile eşleştirilmişti.<ol>
<li>Sıçanı implante edilmiş baş kapağı aracılığıyla bir uyarıcı jeneratöre bağlayın ve uygun stimülasyon ayarlarına ayarlayın. Motor kortikal haritanın VNS kaynaklı yeniden düzenlenmesi için, her doğru kol presini, her biri 100 μ'lik genişliğe ve 800°A genliğe sahip 15 biphasik darbeden oluşan tek bir trenle eşleştirin.</li>
		<li>Bir stimülasyon treni, on 30 dk eğitim seansları boyunca her başarılı kolu prestespit hemen sonra teslim edilir. VNS-teslimat sırasında, akım stimülasyonunun başarılı bir şekilde teslimini izlemek için bir osiloskop kullanın.</li>
	</ol></li>
	<li>Kronik implante manşet fonksiyonunu doğrulayın.<ol>
<li>Son VNS eşleştirilmiş eğitim oturumu24 saat içinde, motor korteks19fonksiyonel somatotopik harita ölçmek için intrakranial mikrostimülasyon (ICMS) kullanın,20,21,22.</li>
		<li>Motor korteksin ICMS haritalaması için anestezi indüksiyonundan sonra, Hering-Breuer refleksi ile uyumlu, SpO2 seviyelerinde nefes alma ve azaltmanın kesilmesine neden olacak 30 Hz, 0.8 mA akım stimülasyon (100 μs biphasic darbeler) 10 s tren uygulayarak manşet fonksiyonunu tekrar doğrulayın. NOT: Uygulamaya bağlı olarak, güvenilir bir SpO2 damlası %5'ten az gözlenirse veya daha yüksek akım genlikleri (1,6 mA'ye kadar) güvenilir bir şekilde SpO2'deen az %5 azalma üretirse, manşet işlevi kabul edilebilir. SpO2'de solunumun kesilmesi ve/veya güvenilir bir düşüşün gözlemlenmemesi implant yetmezliğinin göstergesidir.</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Koopman, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vagus+nerve+stimulation+inhibits+cytokine+production+and+attenuates+disease+severity+in+rheumatoid+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Vagus nerve stimulation inhibits cytokine production and attenuates disease severity in rheumatoid arthritis.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. , (2016).</li>
<li>Levine, Y. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurostimulation+of+the+cholinergic+anti-inflammatory+pathway+ameliorates+disease+in+rat+collagen-induced+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Neurostimulation of the cholinergic anti-inflammatory pathway ameliorates disease in rat collagen-induced arthritis.</a> PLoS One. , (2014).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+vagus+nerve+stimulation+improves+autonomic+control+and+attenuates+systemic+inflammation+and+heart+failure+progression+in+a+canine+high-rate+pacing+model%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Chronic vagus nerve stimulation improves autonomic control and attenuates systemic inflammation and heart failure progression in a canine high-rate pacing model.</a> Circulation: Heart Failure. , (2009).</li>
<li>Ganzer, P. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Closed-loop+neuromodulation+restores+network+connectivity+and+motor+control+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Closed-loop neuromodulation restores network connectivity and motor control after spinal cord injury.</a> Elife. , (2018).</li>
<li>Hays, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vagus+nerve+stimulation+during+rehabilitative+training+enhances+recovery+of+forelimb+function+after+ischemic+stroke+in+aged+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiology+of+Aging%22%5BJournal%5D)">Vagus nerve stimulation during rehabilitative training enhances recovery of forelimb function after ischemic stroke in aged rats.</a> Neurobiology of Aging. , (2016).</li>
<li>Khodaparast, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vagus+nerve+stimulation+delivered+during+motor+rehabilitation+improves+recovery+in+a+rat+model+of+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Neurorehabilitation+and+Neural+Repair%22%5BJournal%5D)">Vagus nerve stimulation delivered during motor rehabilitation improves recovery in a rat model of stroke.</a> Neurorehabilitation and Neural Repair. , (2014).</li>
<li>Meyers, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vagus+nerve+stimulation+enhances+stable+plasticity+and+generalization+of+stroke+recovery%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Vagus nerve stimulation enhances stable plasticity and generalization of stroke recovery.</a> Stroke. , (2018).</li>
<li>Hays, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vagus+nerve+stimulation+during+rehabilitative+training+improves+functional+recovery+after+intracerebral+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Vagus nerve stimulation during rehabilitative training improves functional recovery after intracerebral hemorrhage.</a> Stroke. , (2014).</li>
<li>Farrand, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vagus+nerve+stimulation+improves+locomotion+and+neuronal+populations+in+a+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Stimulationation%22%5BJournal%5D)">Vagus nerve stimulation improves locomotion and neuronal populations in a model of Parkinson's disease.</a> Brain Stimulationation. , (2017).</li>
<li>Souza, R. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vagus+nerve+stimulation+reverses+the+extinction+impairments+in+a+model+of+PTSD+with+prolonged+and+repeated+trauma%5BTitle%5D)+AND+%22Stress%22%5BJournal%5D)">Vagus nerve stimulation reverses the extinction impairments in a model of PTSD with prolonged and repeated trauma.</a> Stress. , (2019).</li>
<li>Noble, L. J., Souza, R. R., McIntyre, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vagus+nerve+stimulation+as+a+tool+for+enhancing+extinction+in+exposure-based+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Vagus nerve stimulation as a tool for enhancing extinction in exposure-based therapies.</a> Psychopharmacology. , (2019).</li>
<li>Childs, J. E., Kim, S., Driskill, C. M., Hsiu, E., Kroener, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vagus+nerve+stimulation+during+extinction+learning+reduces+conditioned+place+preference+and+context-induced+reinstatement+of+cocaine+seeking%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Stimulationation%22%5BJournal%5D)">Vagus nerve stimulation during extinction learning reduces conditioned place preference and context-induced reinstatement of cocaine seeking.</a> Brain Stimulationation. , (2019).</li>
<li>Peña, D. F., Engineer, N. D., McIntyre, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+remission+of+conditioned+fear+expression+with+extinction+training+paired+with+vagus+nerve+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Rapid remission of conditioned fear expression with extinction training paired with vagus nerve stimulation.</a> Biological Psychiatry. , (2013).</li>
<li>Childs, J. E., DeLeon, J., Nickel, E., Kroener, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vagus+nerve+stimulation+reduces+cocaine+seeking+and+alters+plasticity+in+the+extinction+network%5BTitle%5D)+AND+%22Learning+%26+Memory%22%5BJournal%5D)">Vagus nerve stimulation reduces cocaine seeking and alters plasticity in the extinction network.</a> Learning & Memory. , (2017).</li>
<li>Engineer, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+plasticity+in+auditory+cortex+improves+neural+discrimination+of+speech+sounds%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Stimulationation%22%5BJournal%5D)">Temporal plasticity in auditory cortex improves neural discrimination of speech sounds.</a> Brain Stimulationation. , (2017).</li>
<li>Rios, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+Construction+of+Rat+Nerve+Stimulation+Cuff+Electrodes%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for Construction of Rat Nerve Stimulation Cuff Electrodes.</a> Methods Protoc. , (2019).</li>
<li>Childs, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vagus+nerve+stimulation+as+a+tool+to+induce+plasticity+in+pathways+relevant+for+extinction+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Vagus nerve stimulation as a tool to induce plasticity in pathways relevant for extinction learning.</a> Journal of Visualized Experiments. , (2015).</li>
<li>Paintal, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vagal+sensory+receptors+and+their+reflex+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+reviews%22%5BJournal%5D)">Vagal sensory receptors and their reflex effects.</a> Physiological reviews. , (1973).</li>
<li>Porter, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repeatedly+Pairing+Vagus+Nerve+Stimulation+with+a+Movement+Reorganizes+Primary+Motor+Cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Cerebral+Cortex%22%5BJournal%5D)">Repeatedly Pairing Vagus Nerve Stimulation with a Movement Reorganizes Primary Motor Cortex.</a> Cerebral Cortex. 22, 2365-2374 (2011).</li>
<li>Morrison, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vagus+nerve+stimulation+intensity+influences+motor+cortex+plasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Stimulationation%22%5BJournal%5D)">Vagus nerve stimulation intensity influences motor cortex plasticity.</a> Brain Stimulationation. , (2018).</li>
<li>Hulsey, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Norepinephrine+and+serotonin+are+required+for+vagus+nerve+stimulation+directed+cortical+plasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Norepinephrine and serotonin are required for vagus nerve stimulation directed cortical plasticity.</a> Exp. Neurol. , (2019).</li>
<li>Hulsey, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reorganization+of+Motor+Cortex+by+Vagus+Nerve+Stimulation+Requires+Cholinergic+Innervation%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Stimulation%22%5BJournal%5D)">Reorganization of Motor Cortex by Vagus Nerve Stimulation Requires Cholinergic Innervation.</a> Brain Stimulation. 9, 174-181 (2016).</li>
<li>Bouverot, P., Crance, J. P., Dejours, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+influencing+the+intensity+of+the+breuer-hering+inspiration-inhibiting+reflex%5BTitle%5D)+AND+%22Respiration+Physiology%22%5BJournal%5D)">Factors influencing the intensity of the breuer-hering inspiration-inhibiting reflex.</a> Respiration Physiology. , (1970).</li>
<li>Fialova, E., Vizek, M., Palecek, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflation+reflex+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Physiologia+Bohemoslov%22%5BJournal%5D)">Inflation reflex in the rat.</a> Physiologia Bohemoslov. , (1975).</li>
<li>Hays, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+bradykinesia+assessment+task%3A+An+automated+method+to+measure+forelimb+speed+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">The bradykinesia assessment task: An automated method to measure forelimb speed in rodents.</a> Journal of Neuroscience Methods. , (2013).</li>
<li>Kim, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cuff+and+sieve+electrode+%28CASE%29%3A+The+combination+of+neural+electrodes+for+bi-directional+peripheral+nerve+interfacing%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Cuff and sieve electrode (CASE): The combination of neural electrodes for bi-directional peripheral nerve interfacing.</a> Journal of Neuroscience Methods. , (2020).</li>
<li>González-González, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thin+Film+Multi-Electrode+Softening+Cuffs+for+Selective+Neuromodulation%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Thin Film Multi-Electrode Softening Cuffs for Selective Neuromodulation.</a> Scientific Reports. , (2018).</li>
<li>Thakur, R., Nair, A. R., Jin, A., Fridman, G. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fabrication+of+a+Self-Curling+Cuff+with+a+Soft%2C+Ionically+Conducting+Neural+Interface%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+Annual+International+Conference+of+the+IEEE+Engineering+in+Medicine+and+Biology+Society%2C+EMBS%22%5BJournal%5D)">Fabrication of a Self-Curling Cuff with a Soft, Ionically Conducting Neural Interface.</a> Proceedings of the Annual International Conference of the IEEE Engineering in Medicine and Biology Society, EMBS. , (2019).</li>
<li>Bucksot, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flat+electrode+contacts+for+vagus+nerve+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Flat electrode contacts for vagus nerve stimulation.</a> PLoS One. 14, (2019).</li>
<li>El Tahry, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repeated+assessment+of+larynx+compound+muscle+action+potentials+using+a+self-sizing+cuff+electrode+around+the+vagus+nerve+in+experimental+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Repeated assessment of larynx compound muscle action potentials using a self-sizing cuff electrode around the vagus nerve in experimental rats.</a> Journal of Neuroscience Methods. , (2011).</li>
<li>Bonaz, B., Sinniger, V., Pellissier, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-inflammatory+properties+of+the+vagus+nerve%3A+potential+therapeutic+implications+of+vagus+nerve+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Anti-inflammatory properties of the vagus nerve: potential therapeutic implications of vagus nerve stimulation.</a> Journal of Physiology. , (2016).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Burada kemirgenlerde kullanılmak üzere kronik olarak implante edilebilen uyarıcı manşet elektrotlarının montajı için basit, düşük maliyetli bir yaklaşım tanımlıyoruz ve bu yeni ortaya çıkan tedavinin klinik öncesi araştırmalarını kolaylaştırıyoruz. Bu basitleştirilmiş yöntem hiçbir özel eğitim veya ekipman gerektirir ve diğer yaklaşımlar16,26,,27,28ile karşılaştırıldığında cihaz üretiminin hem ...

Son zamanlarda, periferik sinirlerin uyarılması için kronik implante edilebilir manşet elektrotlar için talep büyüdü, çalışmalar giderek çok sayıda inflamatuar hastalıkların tedavisinde bu tekniğin preklinik yararlılığını göstermek gibi1,2,3 ve nörolojik bozukluklar4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15. Kronik VNS, örneğin, öğrenme bağlamları çeşitli neokortikal plastisite geliştirmek için gösterilmiştir, motor rehabilitasyon iyileştirilmesi4,5,6,7,8, yok olma öğrenme 10,1111,12,13,14, ve duyusal ayrımcılık15. Ticari olarak mevcut periferik sinir manşet elektrotlar genellikle sipariş yerine getirilmesi ve nispeten yüksek maliyetler için uzun süre ile ilişkilidir, hangi erişilebilirlik sınırlayabilir. Alternatif olarak, kronik implante edilebilir manşet elektrotların "şirket içi" imalatı için protokoller sınırlı kalır ve kemirgen anatomisi küçük boyutları nedeniyle belirli zorluklar sunar. Kronik kemirgen deneyleri için manşet elektrotlar oluşturmak için mevcut protokoller genellikle karmaşık ekipman ve tekniklerin yanı sıra kapsamlı eğitimli personel kullanımını gerektirir. Bu protokolde, daha önce yayınlanmış ve yaygın olarak kullanılan yöntemlere dayalı manşet elektrot imalatı için basitleştirilmiş bir yaklaşım göstermek16,17. Kronik implante edilmiş elektrotlarımızın farelerdeki işlevselliğini, sol servikal vagus sinirinin etrafına manşet implantasyonu sırasında, manşet elektrotlarına uygulanan stimülasyonun SpO2'de nefes alma ve düşmenin başarılı bir şekilde kesilmesine neden olduğunu göstererek doğrulmaktayız. Afferent pulmoner reseptör vagal liflerin stimülasyonu Hering-Breuer refleks meşgul bilinmektedir, hangi beyin sapında çeşitli solunum çekirdeğiin inhibisyonu bastırma ilhamsonuçları 18. Böylece, Hering-Breuer refleksi ile tutarlı nefes kesilmesi, ve SpO2 ortaya çıkan düşüş, anestezili sıçanlarda uygun elektrot implantasyonu ve manşet fonksiyonu için basit bir test sağlar. Kronik implante edilmiş manşet elektrotların uzun süreli işlevselliğini doğrulamak için, implantasyon sırasında refleks yanıtları ölçüldü ve implantasyondan altı hafta sonra aynı hayvanlarda elde edilen yanıtlarla karşılaştırıldı. İkinci bir grup sıçana, bir kol presleme görevinde davranış eğitimi nden sonra VNS manşet elektrotları yerleştirildi. Bu sıçanlarda, VNS doğru görev performansı ile eşleştirilmiş kortikal motor harita yeniden düzenlenmesi üretilen, daha önce yayınlanan çalışmalar ile tutarlı19,20,21,22. Cihaz implantasyonundan 5-10 hafta sonra meydana gelen anestezi altında motor kortikal haritalama sırasında, VNS'nin nefes almanın kesilmesini ve SpO2'de%5'ten fazla düşüşe yol açtığını doğrulayarak VNS ile tedavi edilen hayvanlarda manşet fonksiyonunu daha da doğruladık.
Childs et al.17 ve Rios et al.16'dan yakın zamanda yayınlanan protokoller, basitleştirilmiş manşet elektrot üretim yaklaşımı için iyi onaylanmış bir başlangıç noktası sağlar, çünkü bu popüler yöntem kemirgenlerde kronik VNS çalışmaları yürüten birden fazla laboratuvar tarafından kullanılmıştır1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11. Orijinal yöntem, manşet elektrot imalatının tamamlanması bir saatten fazla sürer ve güvenilir bir şekilde gerçekleştirmek için kapsamlı bir eğitim gerektiren ince mikrotelleri manipüle etmek için birkaç yüksek hassasiyetli adım içerir. Burada açıklanan basitleştirilmiş yaklaşım önemli ölçüde daha az malzeme ve araç gerektirir ve en az eğitimli personel tarafından bir saatten az bir sürede tamamlanabilir.

<table><tbody><tr><td>Biyouyumlu poliüretan bazlı polimer boru, 0.080" OD x 0.040" ID</td><td>Braintree Scientific</td><td>MRE080 36 FT</td><td></td></tr><tr><td>Diseksiyon mikroskobu</td><td>Scopes</td><td>#SM-6T-FRL</td><td></td></tr><tr><td>İnce Tırtıklı Makas, düz, 22mm kesme kenarı</td><td>Güzel Bilim Araçları</td> <td># 14058-09</td><td>Pt / Ir tel ve dikiş ipliği</td></tr><tr><td>Forsepslerini kesmek için, # 5 Dumont forseps, düz, 11 cm, 0,1 x 0,06 mm uç</td><td>Güzel Bilim Araçları</td> <td># 11626-11</td><td></td></tr><tr><td>Forseps, seramik uçlu forseps, 0,3 mm x 30 mm uçlar</td><td>Elektron Mikroskobu Bilimleri</td> <td># 78127-71</td><td></td></tr><tr><td>Altın Pimler, PCB Pres Fit Soket</td><td>Mill-Max</td> <td># 1001-0-15-15-30-27-04-0</td><td>veya benzeri manşet uçlarını başlığa bağlamak için küçük pimler</td></tr><tr><td>İzobütan çakmak</td><td>Pt</td> <td>/ Ir telinin</td><td></td></tr> <tr><td>yalıtımını kaldırmak için BIC#LCP21-ASTMandallı mikro şerit konektörü, 4 pinli</td><td>Omnetics</td><td>A24002-004 / PS1-04-SS-LT</td><td></td></tr><tr><td>Pipet ucu, 10 uL</td><td>VWR</td><td>89079-464</td><td></td></tr><tr><td>Platin-İridyum (%90/10) Tel, 0,001" (çap) x 9 tel, PTFE yalıtımlı</td><td>Sigmund Cohn</td><td>10IR9/49T</td><td></td></tr><tr><td>Tıraş Bıçağı, Tek Kenarlı,</td><td>MicroRenathane borularını</td><td></td><td></td> kesmek için Cerrahi Karbon Çelik No.9 VWR # 55411-050</tr><tr><td>Dikiş iğnesi, yaklaşık 4,0 cm uzunluk x 0,7 mm çap (boyut 6-7)</td><td>Singer</td><td>00276</td><td>Pt/Ir tel geçirmek için daha küçük iğne</td></tr><tr><td>Dikiş iğnesi, yaklaşık 4,5 cm uzunluk x 0,8 mm çap (boyut 2-3)</td><td>Singer</td><td>00276</td><td>Montaj sırasında manşeti sabitlemek ve sütür geçirmek için daha büyük iğne</td></tr><tr><td>Küçük köpük levha</td><td>Juvo+/Amazon</td><td>B07C9637SJ</td><td>imalat platformu için; Boyutlarımız yaklaşık 2,5 "x 3,5" x 1 "(U x G x Y)</td></tr> <tr><td>Lehim, çok çekirdekli kurşunsuz, 0,38 mm çap</td><td>Loctite/Multicore</td><td>#796037</td><td></td></tr><tr><td>Lehimleme istasyonu</td><td>Weller</td><td>WES51</td><td>veya benzeri uzun konik uçlarla uyumlu havya (bu kısım durdurulmuştur)</td></tr><tr><td>Lehim ucu, uzun konik, 0,01" / 0,4 mm</td><td>Weller</td><td>1UNF8</td><td></td></tr><tr><td>Sütür, emilmeyen örgülü ipek, boyut 6/0</td><td>Güzel Bilim aletleri</td><td>#18020-60</td><td></td></tr><tr><td>UV (405 nm) spot ışık</td><td>Henkel/Loctite</td><td>#2182207</td><td></td></tr><tr><td>UV Işıkla Sertleşen Yapıştırıcı 25 ml</td><td>Henkel/Loctite</td><td>AA 3106</td><td>veya benzeri biyouyumlu UV kürleme yapıştırıcısı</td></tr><tr><td>Tel sarma teli, 30 AWG</td><td>Digikey</td><td>K396-ND</td><td></td></tr></tbody></table>

sıçanlarda kronik İmplantasyon için periferik sinir stimülasyon elektrotlarının hazırlanması

Preparation of Peripheral Nerve Stimulation Electrodes for Chronic Implantation in Rats

Periferik sinir manşet elektrotlar uzun nörolojik ve ilgili alanlarda stimülasyon için kullanılmıştır, örneğin, vagus veya siyatik sinirler. Birkaç yeni çalışmalar motor rehabilitasyon geliştirmek için merkezi sinir sistemi plastisite artırılması kronik VNS etkinliğini göstermiştir, yok olma öğrenme, ve duyusal ayrımcılık. Bu tür çalışmalarda kullanılmak üzere kronik implante edilebilir cihazların inşası farelerin küçük boyutları nedeniyle zordur ve tipik protokoller personel ve zaman alan mikrofabrikasyon yöntemlerinin kapsamlı bir şekilde eğitilmesini gerektirir. Alternatif olarak, ticari olarak kullanılabilir implante edilebilir manşet elektrotlar önemli ölçüde daha yüksek bir maliyetle satın alınabilir. Bu protokolde, sıçanlarda kullanılmak üzere küçük, kronik implante edilebilir periferik sinir manşet elektrotlarının yapımı için basit, düşük maliyetli bir yöntem salıyoruz. Ketamin/ksilazin anestezili sıçanlarda VNS'nin hem implantasyon sırasında hem de cihaz implantasyonundan 10 hafta sonrasına kadar Hering-Breuer refleksinin aktivasyonuile tutarlı solunum hızında düşüşler ürettiğini göstererek manşet elektrotlarımızın kısa ve uzun vadeli güvenilirliğini doğrularız. Ayrıca, vns'yi motor kortikal harita plastisitesini teşvik etmek için yetenekli kol pres performansıyla eşleştirerek manşet elektrotlarının kronik stimülasyon çalışmalarında kullanıma uygunluğunu gösteriyoruz.

Vagus sinir manşet elektrotlar ve headcaps kronik sıçanlarda daha önce yayınlanan cerrahi işlemlere göre implante edildi17,19,20,21,22. İmplantasyondan önce, 1 kHz'de empedans manşet kurşunları arasında ölçüldü ve manşet borusu saline batırıldı (empedans = 1.2 ± 0.17 kΩ [ortalama ± std]; N = 9). Sadece salinde 2 kΩ'den az empedanslı manşetler yerleştirildi; tü...

Küçük kemirgenlerde kullanılmak üzere kronik implante edilebilir periferik sinir manşet elektrotları oluşturmak için mevcut yaklaşımlar genellikle özel ekipman ve / veya yüksek eğitimli personel gerektirir. Bu protokolde kronik olarak implante edilebilen manşet elektrotlar imal etmek için basit, düşük maliyetli bir yaklaşım göstermekte ve sıçanlarda vagus sinir stimülasyonu (VNS) için etkinliğini gösteriyoruz.

Sıçanlarda Kronik İmplantasyon için Periferik Sinir Stimülasyon Elektrotlarının Hazırlanması

Peripheral nerve cuff electrodes have long been used in the neurosciences and related fields for stimulation of, for example, vagus or sciatic nerves. ...

Periferik sinir stimülasyonu, inflamatuar hastalıklar ve nöral hastalıklar da dahil olmak üzere çeşitli hastalıkların tedavisi olarak giderek daha fazla araştırılmaktadır. Küçük laboratuvar hayvanları için kronik implante edilebilir periferik sinir manşet elektrotlarının yapımı zaman alıcı ve pahalı olabilir. Bu protokol, sıçanlarda kullanılmak üzere kronik implante edilebilir periferik sinir uyarıcı elektrotlar oluşturmak için basit, düşük maliyetli bir yaklaşım açıklar.Bu yöntem, çok az ve kolay erişilebilir malzeme ve malzeme ve daha az sayıda tehlikeli veya teknik olarak talep edilen adımların, hem cihazın maliyetini hem de personel ve cihaz montajını eğitmek için gereken süreyi azaltan benzer tekniklere kıyasla daha az sayıda tehlikeli veya teknik olarak talep edilen adımlar gerektirir. Bu teknik inme kurtarma veya Metro disfonksiyon diğer türleri sırasında kronik Vegas sinir stimülasyonu etkinliğini test preklinik çalışmalar sağlamak için tasarlanmıştır. Manşet boruhazırlayarak başlayın.Polimer boru 2,5 milimetrelik bir parça kesmek için bir jilet kullanın. Daha sonra bir ataş takın veya uçları borudan geçirin ve manşetin bir tarafındaki boru duvarından uzunlamasına kaymayapın. Bürlaşı borudan çıkarın ve manşetin orta hattından büyük bir dikiş iğnesi yerleştirin.Kalan montaj adımları sırasında yerine manşet pin için köpük tahta içine iğne yerleştirin. İmplantasyon sırasında manşet inmasını sağlamak için bir dikiş yerleştirmek için bir tarafta üst yarıktan yaklaşık beş milimetre lik bir nokta nın ortasına manşet duvarından küçük bir dikiş iğnesi yerleştirin. Sonra iğne gözünden altı sıfır dikiş iki santimetre yerleştirin ve manşet içine dikiş iplik için boru duvarından iğne çekin.Boru duvarından ikinci bir delik delin, manşetin orta hattı boyunca ilk deliğin yaklaşık 5 milimetre altında. Sütürü iğnenin gözüne yerleştirin ve iğneyi boru duvarından çekin. Alt delikten uzanan dikişkısa ucuna UV kürü yapıştırıcı küçük bir miktar uygulayın ve alt kuyruk neredeyse boru dış duvar ile floş kadar uzun dikiş ucunu çekin.Sonra bir UV değnek ile yapıştırıcı tedavi. Manşetin karşı tarafına başka bir dikiş yerleştirmek için bu işlemi tekrarlayın. Bir sonraki yer Platin Iridyum tel iridyum kablo yol açar.Manşet duvarında dört delik yapmak için küçük dikiş iğnesi kullanın. Sonra tekrar dikiş iğnesi takın, bu kez ilk kurşun deliğinden dıştan iç e doğru çalışıyor. İğnegözüne yaklaşık 5 santimetrelik 7,5 santimetrelik Platin Iridyum tel yerleştirin ve borunun içinden geçirerek tel kurşunu manşet duvarından geçirin.Teli, manşetin dış tarafında yaklaşık 4,5 santimetre uzayana ayarlayın. İğneyi ilk kurşun deliğinden sonra ikinci kurşun deliğinden tekrar takın. İğnegözüne telin kısa ucunun beş santimetrelik noktasını yerleştirin ve borunun içinden geçirerek tel inip manşet duvarlarından geçirin.Üçüncü ve dördüncü kurşun delikleri ile tel iplik işlemi tekrarlayın. Bütan çakmağı kullanarak, ikinci ve dördüncü kurşun deliklerinden uzanan tellerin beş ila altı milimetrelik yalıtımını dikkatlice çıkarın Sonra telin yalıtımsız kısmı delik ile temize çıkana kadar ilk delikten uzanan telin ucunu yavaşça çekin. Üçüncü ve dördüncü kurşun delikleri ile dişli tel inyalıtımsız ucunu hizalamak için diğer kurşun ile tekrarlayın.Birinci ve üçüncü kurşun deliklerinde manşetin dış tarafındaki tel halkalara az miktarda UV kürü yapıştırıcısı uygulayın. Sonra yapıştırıcı tedavisi için UV değnek kullanın ve yerinde yol güvenli. Manşetin iç duvarına yalıtımsız tel kabloları itmek için küçük bir pipet ucu kullanın.Telin bir milimetrelik kuyruklarını manşetin dış yüzeyine doğru düz bir şekilde çekin ve onları birbirine kısaltmamaya özen inin. Sonra sadece iki kuyrukları kapsayacak ve tedavi UV yapıştırıcı küçük bir miktar uygulayın. Köpük tahtadan manşet montaj ile büyük iğne çıkarın.İğnegözüne altı sıfır dikiş üç santimetre uzunluğunda yerleştirin ve orta noktada manşet in altından dikiş iplik için boru ile iğne çekin. Deformasyonu, boruyu ve kabloyu önlemek için içten dışa doğru çalışan aynı orta hat deliğinden küçük dikiş iğnesini yerleştirin. Daha sonra sütürün dış kuyruğunu iğnegözüne yerleştirin ve manşetin kenarına dikiş halkası oluşturmak için iğneyi manşet duvarından çekin.Sütür uçları ve manşetdış tarafında yarım düğüm bağlayarak manşetin ters ucu etrafında ikinci döngü oluşturun. Düğüm ü düsmani boruya karşı düz tutarken, yarım düğüme az miktarda UV yapıştırıcı uygulayın ve tedavi edin. Dikiş ipliğin uçlarını mümkün olduğunca düğüme yakın dikkatlice kesin.Daha sonra, Platin İridyum tel kablolarının her birinin sonundaki yalıtımı yaklaşık üç milimetreden çıkarmak için bütan çakmak kullanın. Lehim her kurşun unyalıtımsız sonuna bir altın iğne fincan tarafında. İmplantasyon testi ne olursa olsun monte edilmiş manşetin bir kilohertz'de iki kilodan az bir empedansa sahip olduğunu doğrulamak için monte edilen cihazın empedansını test edin.Baş kapağını monte ettikten ve manşet elektrotlarını el yazması talimatlara göre yerleştirdikten sonra, sıçan uyanıkken vagus sinirini uyarır. Sıçanı implante edilmiş baş kapağı üzerinden bir uyarıcı jeneratöre bağlayın ve uyarım ayarlarını ayarlayın. Motor kortikal haritavns indüklenen yeniden düzenlenmesi için, 15 bifhasik darbeler, her biri 100 mikrosaniye genişliğinde tek bir tren ve 30 hertz frekansta 800 mikro amper genlik teslim.10, 30 dakikalık eğitim seansları boyunca her başarılı kol presinin tespit edilmesinden hemen sonra bir uyarım treni verilir. Akım stimülasyonunun başarılı bir şekilde teslimini izlemek için bir osiloskop kullanın. Bu protokol, sıçanlarda vagus sinir manşet elektrotları ve baş kapakları kronik implant için kullanılmıştır.İmplantasyon sırasında tüm manşetlerin fonksiyonel doğrulaması, kan oksijen doygunluğunda VNS kaynaklı bir düşüş testi ile gerçekleştirildi. Bu yanıtı uyandırmak için, her biri 100 mikrosaniye genişliğinde 30 hertz darbeden oluşan 10 saniyelik bir tren ve manşet kurşunları arasında 800 mikro amper genliği teslim edildi. Tüm manşetlerde, 10 saniye boyunca vns kaynaklı solunumun kesilmesini gözlemledik, bu da en az %5 oranında kan oksijen doygunluğunda bir düşüş ekibe eşlik etti.Cihazların uzun süreli işlevselliğini test etmek için sıçanlar implantasyondan altı hafta sonra anestezi uygulandı ve vns tekrar uygulandı. Dokuz cihazdan yedisi için, uyarım ın büyüklüğü kan oksijen doygunluğunda değişimi çağrıştıran, ilk implantasyonda gözlenenden farklı değildi, bu da mükemmel performansın devam ettiğini düşündürmektedir. Geri kalan iki cihaz, stimülasyon genliğini 1.6 miliamper'e çıkarmak, kandaki oksijen doygunluğunda en az %5'lik güvenilir bir azalma uyandırmak için yeterliydi ve bu cihazların çalışmaya devam ettiğini düşündürdü.Ama empedans değişiklikleri, sinir hasarı, veya manşet oryantasyon düşük performans neden olabilir. Kronik implante cihazların uzun süreli işlevselliğini daha fazla test etmek için, ikinci bir fare grubu yetenekli bir erişim kolu pres görevinin basitleştirilmiş bir versiyonu üzerinde eğitildi. Farelerin, kolu tamamen bastırmak ve iki saniye içinde serbest bırakmak için eğitim kabininin dışında iki santimetreye ulaşması gerekiyordu.Vagus sinir stimülasyonunun görevle ilgili motor harita gösterimlerinin genişlemesini tetiklediğini gösteren önceki çalışmalarla tutarlı olarak, VNS tedavi edilen sıçanlar Sham tedavi edilen sıçanlara göre önemli ölçüde daha büyük proksimal forelimb temsilleri sergilemiştir. Bu protokol kolayca diğer laboratuvar türlerinde veya diğer periferik sinir sitelerinde kronik stimülasyon deneyleri karşılamak için adapte edilebilir, siyatik veya sakral sinirler de dahil olmak üzere. Mesela.

preparation-peripheral-nerve-stimulation-electrodes-for-chronic

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Biz kronik sinir kayıt elektrot implante süreci öğrenen cerrahlar için yararlı bilgiler sağlar. Delici ve yüzey iki elektrot sistemleri için teknikler, bir kemirgen hayvan modeli olarak açıklanmaktadır.

Tek Birim Faaliyet ve elektrokortikografik Sinyalleri Kayıt için Kronik Sinir Elektrotların Cerrahi İmplantasyonu

Kaynak: Sanchez, C. A., et al. Sıçanlarda kronik implantasyon için periferik sinir stimülasyon elektrotlarının hazırlanması. J. Vis. Uzm. (2020).Bu video, uyanık bir sıçanda vagus sinir stimülasyonunu göstermektedir. İmplante edilmiş bir kronik periferik sinir manşet elektroduna sahip ve bir kol presleme görevinde eğitilmiş bir sıçan, implante edilmiş bir kafa başlığı aracılığıyla bir uyaran üretecine bağlanır. Vagus siniri, her başarılı kol basışından hemen sonra uyarılır ve bu da motor...

Sıçanlarda Kronik İmplante Edilmiş Periferik Sinir Manşet Elektrotları ile Vagus Sinir Stimülasyonu

Video, çok kanallı sinir ağlarını kaydetmek ve uyarmak için bir sıçan beynine kablosuz çift yönlü çok kanallı bir elektrot ünitesi implante etme prosedürünü göstermektedir.

Bir Sıçan Beynine Kablosuz Çift Yönlü Mikroelektrot Sistemi Yerleştirilmesi

Bir kablosuz fareler serbestçe davranışlar içinde stimülasyon ve çok kanallı sinirsel kayıtları için çift yönlü sistemi tanıttı. Hafif ve küçük, böylece animal´s davranış repertuar üzerinde en az etkiye sistemidir. Ayrıca, bu çift yönlü sistem beyin harekete geçirmek desen ve davranışı arasındaki nedensel ilişkileri değerlendirmek için gelişmiş bir araç sağlar.

Kablosuz, Vivo içinde kayıt ve fareler serbestçe davranışlar içinde sinirsel aktivite uyarılması için çift yönlü arayüzü

Bu ayrıntılı protokolünü transkranyal uyarım elektrot yerleştirme temporal kemik üzerinde kısa ve uzun vadeli etkileri Transkraniyal elektriksel stimülasyon fareler serbestçe hareket araştırmak için açıklar.

Kronik Transkraniyal elektriksel stimülasyon ve Sıçanlarda Intracortical kayıt

Aşağıda açıklanan serbest çetretli sıçanlarda kronik elektrofizyolojik kayıt için anatomik olarak uzak beyin bölgeleri arasında birden fazla polimer elektrot dizilerinin implantasyonu için bir yöntemdir. Hazırlık ve cerrahi implantasyon, diğer türlerde kullanılmak üzere bu yöntemlerin adaptasyonunu yönlendirecek tasarım prensipleri üzerinde durularak ayrıntılı olarak açıklanmıştır.

Çoklu Esnek Polimer Elektrot Dizilerinin Kronik İmplantasyonu

Bu, periferik sinirler için kablosuz olarak çalışan bir arayüzün cerrahi implantasyonu ve çalışması için bir protokoldür. Bu yaklaşımın faydasını, sıçan siyatik veya frenik sinire yerleştirilen sinir stimülatörlerinden örneklerle gösteriyoruz.

Periferik Sinir Arayüzü için Kablosuz, Pilsiz Sistemlerin İmplantasyonu ve Kontrolü

Bu protokol, sıçan tüm siyatik sinir dokusunun ex vivo elektrofizyolojik stimülasyon için hazırlanmasını ve çevresel olarak düzenlenmiş, iki bölmeli, perfüze edilmiş bir salin banyosunda kaydedilmesini açıklar.

Ex Vivo Nörofizyoloji için Sıçan Siyatik Sinirinin Hazırlanması

Amacımız, epimisyal elektromiyografi elektrotlarının üretimi ve test edilmesi hakkında güncellenmiş, takip etmesi kolay bir kılavuz sağlamaktı. Bu amaçla, malzeme tedariki için talimatlar ve üretim ve test sürecinin ayrıntılı bir incelemesini sağlıyoruz.

Düşük Maliyetli Bir Epimisyal Elektromiyografi Elektrodunun Geliştirilmesi: Üretim ve Test için Basitleştirilmiş Bir İş Akışı

Elektrot üretimi için basitleştirilmiş ve uygun maliyetli bir yaklaşım geliştirdik ve serbestçe hareket eden farelerde birden fazla bölgede sinyallerin kayıtlarını gerçekleştirdik. Çok bölgeli elektrofizyoloji ve kalsiyum sinyal kaydının yanı sıra optogenetiğin kullanılması, nöbet tutuşturma modelinde bölgeler arasında nöronal aktivitelerin ortaya çıkarılmasını sağladı.

Çok Bölgeli İn Vivo Kayıt için Esnek ve Kullanışlı Elektrofizyolojik Seçenekler Hazırlamak için Entegre Bir Yöntem

Keşfedin sıçanlarda kronik periferik sinir stimülasyonu için düşük maliyetli manşet elektrot yapımını. Bu yöntem vagus sinir stimülasyonu ile inme sonrası iyileşme çalışmalarına olanak tanır.

Sıçanlarda Kronik İmplantasyon için Periferik Sinir Stimülasyon Elektrotlarının Hazırlanması

Daha fazla video keşfet