Sıçanlarda Kronik İmplantasyon için Periferik Sinir Stimülasyon Elektrotlarının Hazırlanması

Periferik sinir stimülasyonu, inflamatuar hastalıklar ve nöral hastalıklar da dahil olmak üzere çeşitli hastalıkların tedavisi olarak giderek daha fazla araştırılmaktadır. Küçük laboratuvar hayvanları için kronik implante edilebilir periferik sinir manşet elektrotlarının yapımı zaman alıcı ve pahalı olabilir. Bu protokol, sıçanlarda kullanılmak üzere kronik implante edilebilir periferik sinir uyarıcı elektrotlar oluşturmak için basit, düşük maliyetli bir yaklaşım açıklar.

Bu yöntem, çok az ve kolay erişilebilir malzeme ve malzeme ve daha az sayıda tehlikeli veya teknik olarak talep edilen adımların, hem cihazın maliyetini hem de personel ve cihaz montajını eğitmek için gereken süreyi azaltan benzer tekniklere kıyasla daha az sayıda tehlikeli veya teknik olarak talep edilen adımlar gerektirir. Bu teknik inme kurtarma veya Metro disfonksiyon diğer türleri sırasında kronik Vegas sinir stimülasyonu etkinliğini test preklinik çalışmalar sağlamak için tasarlanmıştır. Manşet boruhazırlayarak başlayın.

Polimer boru 2,5 milimetrelik bir parça kesmek için bir jilet kullanın. Daha sonra bir ataş takın veya uçları borudan geçirin ve manşetin bir tarafındaki boru duvarından uzunlamasına kaymayapın. Bürlaşı borudan çıkarın ve manşetin orta hattından büyük bir dikiş iğnesi yerleştirin.

Kalan montaj adımları sırasında yerine manşet pin için köpük tahta içine iğne yerleştirin. İmplantasyon sırasında manşet inmasını sağlamak için bir dikiş yerleştirmek için bir tarafta üst yarıktan yaklaşık beş milimetre lik bir nokta nın ortasına manşet duvarından küçük bir dikiş iğnesi yerleştirin. Sonra iğne gözünden altı sıfır dikiş iki santimetre yerleştirin ve manşet içine dikiş iplik için boru duvarından iğne çekin.

Boru duvarından ikinci bir delik delin, manşetin orta hattı boyunca ilk deliğin yaklaşık 5 milimetre altında. Sütürü iğnenin gözüne yerleştirin ve iğneyi boru duvarından çekin. Alt delikten uzanan dikişkısa ucuna UV kürü yapıştırıcı küçük bir miktar uygulayın ve alt kuyruk neredeyse boru dış duvar ile floş kadar uzun dikiş ucunu çekin.

Sonra bir UV değnek ile yapıştırıcı tedavi. Manşetin karşı tarafına başka bir dikiş yerleştirmek için bu işlemi tekrarlayın. Bir sonraki yer Platin Iridyum tel iridyum kablo yol açar.

Manşet duvarında dört delik yapmak için küçük dikiş iğnesi kullanın. Sonra tekrar dikiş iğnesi takın, bu kez ilk kurşun deliğinden dıştan iç e doğru çalışıyor. İğnegözüne yaklaşık 5 santimetrelik 7,5 santimetrelik Platin Iridyum tel yerleştirin ve borunun içinden geçirerek tel kurşunu manşet duvarından geçirin.

Teli, manşetin dış tarafında yaklaşık 4,5 santimetre uzayana ayarlayın. İğneyi ilk kurşun deliğinden sonra ikinci kurşun deliğinden tekrar takın. İğnegözüne telin kısa ucunun beş santimetrelik noktasını yerleştirin ve borunun içinden geçirerek tel inip manşet duvarlarından geçirin.

Üçüncü ve dördüncü kurşun delikleri ile tel iplik işlemi tekrarlayın. Bütan çakmağı kullanarak, ikinci ve dördüncü kurşun deliklerinden uzanan tellerin beş ila altı milimetrelik yalıtımını dikkatlice çıkarın Sonra telin yalıtımsız kısmı delik ile temize çıkana kadar ilk delikten uzanan telin ucunu yavaşça çekin. Üçüncü ve dördüncü kurşun delikleri ile dişli tel inyalıtımsız ucunu hizalamak için diğer kurşun ile tekrarlayın.

Birinci ve üçüncü kurşun deliklerinde manşetin dış tarafındaki tel halkalara az miktarda UV kürü yapıştırıcısı uygulayın. Sonra yapıştırıcı tedavisi için UV değnek kullanın ve yerinde yol güvenli. Manşetin iç duvarına yalıtımsız tel kabloları itmek için küçük bir pipet ucu kullanın.

Telin bir milimetrelik kuyruklarını manşetin dış yüzeyine doğru düz bir şekilde çekin ve onları birbirine kısaltmamaya özen inin. Sonra sadece iki kuyrukları kapsayacak ve tedavi UV yapıştırıcı küçük bir miktar uygulayın. Köpük tahtadan manşet montaj ile büyük iğne çıkarın.

İğnegözüne altı sıfır dikiş üç santimetre uzunluğunda yerleştirin ve orta noktada manşet in altından dikiş iplik için boru ile iğne çekin. Deformasyonu, boruyu ve kabloyu önlemek için içten dışa doğru çalışan aynı orta hat deliğinden küçük dikiş iğnesini yerleştirin. Daha sonra sütürün dış kuyruğunu iğnegözüne yerleştirin ve manşetin kenarına dikiş halkası oluşturmak için iğneyi manşet duvarından çekin.

Sütür uçları ve manşetdış tarafında yarım düğüm bağlayarak manşetin ters ucu etrafında ikinci döngü oluşturun. Düğüm ü düsmani boruya karşı düz tutarken, yarım düğüme az miktarda UV yapıştırıcı uygulayın ve tedavi edin. Dikiş ipliğin uçlarını mümkün olduğunca düğüme yakın dikkatlice kesin.

Daha sonra, Platin İridyum tel kablolarının her birinin sonundaki yalıtımı yaklaşık üç milimetreden çıkarmak için bütan çakmak kullanın. Lehim her kurşun unyalıtımsız sonuna bir altın iğne fincan tarafında. İmplantasyon testi ne olursa olsun monte edilmiş manşetin bir kilohertz'de iki kilodan az bir empedansa sahip olduğunu doğrulamak için monte edilen cihazın empedansını test edin.

Baş kapağını monte ettikten ve manşet elektrotlarını el yazması talimatlara göre yerleştirdikten sonra, sıçan uyanıkken vagus sinirini uyarır. Sıçanı implante edilmiş baş kapağı üzerinden bir uyarıcı jeneratöre bağlayın ve uyarım ayarlarını ayarlayın. Motor kortikal haritavns indüklenen yeniden düzenlenmesi için, 15 bifhasik darbeler, her biri 100 mikrosaniye genişliğinde tek bir tren ve 30 hertz frekansta 800 mikro amper genlik teslim.

10, 30 dakikalık eğitim seansları boyunca her başarılı kol presinin tespit edilmesinden hemen sonra bir uyarım treni verilir. Akım stimülasyonunun başarılı bir şekilde teslimini izlemek için bir osiloskop kullanın. Bu protokol, sıçanlarda vagus sinir manşet elektrotları ve baş kapakları kronik implant için kullanılmıştır.

İmplantasyon sırasında tüm manşetlerin fonksiyonel doğrulaması, kan oksijen doygunluğunda VNS kaynaklı bir düşüş testi ile gerçekleştirildi. Bu yanıtı uyandırmak için, her biri 100 mikrosaniye genişliğinde 30 hertz darbeden oluşan 10 saniyelik bir tren ve manşet kurşunları arasında 800 mikro amper genliği teslim edildi. Tüm manşetlerde, 10 saniye boyunca vns kaynaklı solunumun kesilmesini gözlemledik, bu da en az %5 oranında kan oksijen doygunluğunda bir düşüş ekibe eşlik etti.

Cihazların uzun süreli işlevselliğini test etmek için sıçanlar implantasyondan altı hafta sonra anestezi uygulandı ve vns tekrar uygulandı. Dokuz cihazdan yedisi için, uyarım ın büyüklüğü kan oksijen doygunluğunda değişimi çağrıştıran, ilk implantasyonda gözlenenden farklı değildi, bu da mükemmel performansın devam ettiğini düşündürmektedir. Geri kalan iki cihaz, stimülasyon genliğini 1.6 miliamper'e çıkarmak, kandaki oksijen doygunluğunda en az %5'lik güvenilir bir azalma uyandırmak için yeterliydi ve bu cihazların çalışmaya devam ettiğini düşündürdü.

Ama empedans değişiklikleri, sinir hasarı, veya manşet oryantasyon düşük performans neden olabilir. Kronik implante cihazların uzun süreli işlevselliğini daha fazla test etmek için, ikinci bir fare grubu yetenekli bir erişim kolu pres görevinin basitleştirilmiş bir versiyonu üzerinde eğitildi. Farelerin, kolu tamamen bastırmak ve iki saniye içinde serbest bırakmak için eğitim kabininin dışında iki santimetreye ulaşması gerekiyordu.

Vagus sinir stimülasyonunun görevle ilgili motor harita gösterimlerinin genişlemesini tetiklediğini gösteren önceki çalışmalarla tutarlı olarak, VNS tedavi edilen sıçanlar Sham tedavi edilen sıçanlara göre önemli ölçüde daha büyük proksimal forelimb temsilleri sergilemiştir. Bu protokol kolayca diğer laboratuvar türlerinde veya diğer periferik sinir sitelerinde kronik stimülasyon deneyleri karşılamak için adapte edilebilir, siyatik veya sakral sinirler de dahil olmak üzere. Mesela.