Subaraknoid Kanama Modeli olarak Cisterna Magna içine Kan Çift Doğrudan Enjeksiyon

Bu mevcut videonun genel amacı subaraknoid kanama bir model olarak sarnıç magna içine kan bir çift doğrudan enjeksiyon protokolü açıklamaktır. Subaraknoid kanamanın fizyolojisi genellikle anevrizma rüptüründen kaynaklanmaktadır. Ve önce beyin ile beyni kaplayan doku arasındaki bölmeye kan ekstravazasyonunu yapıyoruz.

Bu bölme subaraknoid alandır. Subaraknoid kanama tüm grev vakalarının %7'sini oluşturuyor. Mortalite arasında değişir 30-50% nüfus tabanlı çalışmalarda ve subaraknoid kanama kurtulanların genellikle hafıza açıkları olarak bilişsel sekel deneyim, asteni, veya duygudurum bozuklukları.

Kötü sonuç yüksek yaygınlık önde gelen nedeni serebral iskemi ne olduğunu. Çalışmalar büyük serebral arterlerin vazokonstriksiyon iskemi oluşumu arasında bir bağlantı yaptı, ilk şişkinlik olaydan sonra dördüncü ve on beşinci gün arasında hastaların çoğunda tespit edilebilir mikroskobik vazospazm adlı. Mevcut terapötik seçeneklerin verimsizliği nedeniyle, patolojik olayların daha iyi anlaşılması için bariz bir tıbbi ihtiyaç vardır.

Eşlik eden subaraknoid kanama ve yeni terapötik hedefler test edilmelidir, ancak bu çeşitli ve standart hayvan modelleri gerektirir. İnmükranial anevrizmanın daha çok insanlarda subaraknoid kanamadan sorumlu olması preklinik ve insan modelleri yapmak zordur. Hayvanlarda, başlıca zorluklar kanama ve kan dağılımı nın kontrol insidansında yer alırken, son çalışmalar subaraknoid kanama modellerinin daha redicive modellerinin geliştirilmesine odaklanmaktadır.

Burada sarnıç magna içine bizim iki gün otolog arteriyel kan iki ardışık enjeksiyonları standart bir fare modeli temsil eder. Bu modelin başlıca avantajları, invaziv olmayan bir cerrahi işlemde tekrartekrar ustalaşmak, enjekte edilen kanın kalitesini ve miktarını uyarlamak ve intrakraniyal basıncı önemli ölçüde artırmadan kanama olayını güçlendirmektir. Ameliyat başlamadan önce, bir micropipeette puller kullanarak cam kılcal başka bir çok sayıda koymak zorunda.

Enjekte pipet0.86 milimetre iç çapı ve 0.5 milimetre dış çapı göstermelidir. Yazılı protokolde belirtildiği gibi, sahte durum için yapay beyin omurilik sıvısı hazırlayın. 0.22 mikron filtre cihazı ile bu oksijenli yapay beyin omurilik sıvısı fark etmelisiniz.

Subaraknoid kanama modelimizin ilk adımı, trakea boyunca karotis arterin izolasyonu ve karotis arter delinmesinden maksimum kan toplanmasıdır. Isoflurane ile anestezi sonra, deneysel prosedürün ayarını sağlamak için bir veya iki arka ekstremite kenetleyerek reflekslerin eksikliği ni kontrol edin. 26 kalibrelik bir iğne kullanarak Eprin ile bir milimetrelik şırınga kodlayın.

Bu sonraki adımlar sırasında kan pıhtılaşmasını önleyecektir. Her fareyi tam olarak elektronik bir denge kullanarak tartın. Mevcut çalışmada, fareler ameliyattan hemen önce 20 ila 25 gram aralığında vücut ağırlığı olurdu.

Daha önce açıklandığı gibi, işletilen farenin anestezi ve daha sonra uygun bir elektrik makası ile her kulak arasındaki boynu ve boşluk tıraş. Kontrol fare uyuyor ve fare kafası iyi bloke edilir. Uyanıştan sonra ağrıyı önlemek için deri altı 100 mikrolitre buprenorfinin kilosu 0,1 miligramı alt sırttaki 26 ölçü iğnesi ile enjekte edin.

Koruyucu bir sıvı jel kullanarak kuru gözleri önlemek ve oto regüle elektrikli battaniye kullanarak 37 derece intradüktif sıcaklığı korumak. Bir antiseptik solüsyon ile tıraş alanı tedavi edilmeden önce, doku dokunmadan tüm aletleri sterilize edilmiş ve aseptik ele alınmıştır. İlk gün, posterior boyun bir santimetre uzunluğunda kesi kesti, orta hat boyunca kasların ayrılması takip, sarnıç magna erişmek için.

Boş cam pipetin ucunu ince makasla kesin. Daha sonra esnek silikon konektöre bağlı bir şırıngaya uyum sağlar. Daha sonra cam pipete hassas bir mikropipet Suck kullanarak 0.5 mililitrelik bir tüp kan veya yapay serebral spinal sıvı 60 mikrolitre transfer, subaraknoid kanama durumu için kan 60 mikrolitre veya sahte durum için yapay serebral spinal sıvı 60 mikrolitre.

Enjeksiyon için, pipeti stereotaktik çerçeveye, örneğin, bir halkamızı veya bir halkamızı kullanarak takın ve pipet ucunu sarnıç magna ile arayüzdeki membrana yavaşça yaklaşın. Pipet ucunu stereotaktik çerçevenin mikromanipülatörü kullanarak atlanto-oksipital membrandan sarnıc magna'ya yavaşça yerleştirin. Pipeti daha önce doldurulmuş, basınç indüksiyonuna hazır şırıngaya bağlayın.

Akut intrakraniyal hipertansiyonu önlemek için dakikada 10 mikrolitre civarında düşük bir oranda basınç ile enjekte. Enjeksiyon sırasında solunum hızını ve rektal sıcaklığı yakından izleyin. Enjeksiyonun sonunda, mikromanipülörü kullanarak pipeti dikkatlice çıkarın ve geri çekilme sırasında sızıntı olmamasına dikkat edin.

Homeostaz elde ve örgülü olmayan emdirilebilir dikiş iplik ile iki dikiş yürütmek. Ameliyattan hemen sonra fareyi reddet dekübitine yerleştirin ve iyileşme süresince açık bir kutuda bir sağkalım battaniyesi ile örtün. 24 saat sonra, tekrar anestezi indüklemek, bir gün önce olduğu gibi stereotaktik çerçeve üzerinde fare yüklemek ve mikro makas ile dikişleri özenle kaldırın.

Bir pamuk çubuk ile tıraş alanı ve aseptik çözelti üzerine uygulayarak, atlanto-oksipital membran aseptik önce olduğu gibi hazırlayın. Enjekte, bir gün önce olduğu gibi, düşük oranda kan veya yapay beyin omurilik sıvısı 30 mikrolitre. Daha önce de belirtildiği gibi, solunum hızı ve rektal sıcaklık izlemek.

Enjeksiyon sonunda, dikkatle pipet çıkarmak ve çekilme sırasında kan sızıntısı yokluğunu kontrol edin. Homeostaz elde ve örgülü emilebilir dikiş iplik ile iki dikiş yürütmek. Ameliyat sonrası ilk günden kurban gününe kadar vücut ağırlığı günlük olarak genel refah için hassas bir gösterge olarak değerlendirilmelidir.

Bu subaraknoid kanama önemli bir azalma vücut ağırlığı artışı gösterdi, sahte hayvanlar ile karşılaştırıldığında, uzun süreli aktivite kurtarma süreci ve uzun süreli patolojik olaylar düşündüren, subaraknoid kanama sonrası. Neden ölümlülük sahte durumda değil? Subaraknoid kanama durumunda yedinci günde mortalite %30'a yakındır ve çoğu hayvan ameliyattan sonra bir veya dördüncü günde ölür.

İnsancıl uç noktalar arasında, ilk ağırlığın %15'inin üzerinde önemli bir kilo kaybı olduğu belirtilmiştir. Kambur sırt duruşu, yavaş hareketler, yaralar, anormal vokalizasyonlar veya önemli saldırganlık da hayvanın acı çektiğinin işaretleridir. Bu işaretlerden herhangi biri veya bir dizi işaret ortaya çıkarsa, hayvanın takibi görünüşünü izleyen saatler içinde pekiştirilir.

Eğer hayvanın durumu 48 saat içinde kötüleşirse ya da 48 saat içinde düzelmezse, dayanılmaz bir acı seviyesine ulaşıldığı ve öldürmenin gerçekleştirildiği düşünülecektir. Ameliyatın ilk gününde bu örnekte, subaraknoid kanama konusuwillis poligonun büyük arterler boyunca bir örnek beyin, kan pıhtıları görülebilir. Ameliyattan sonra beşinci günde ve kurban kesmeden önce, intervasküler Hint mürekkep enjeksiyonu büyük serebellar arterlerin vazokonstriksiyonuna karşılık gelen makroskopik vazospazmın saptanmasını sağlar, hematoksilin ve eozin ile beyin dilimlerinin renklendirilmesi serebral vazospazmın ölçülmesine izin verir.

Burada, bu fotoğraf mikrografide gösterildiği gibi, baziler arter vazospazm olarak gözlemleyebilirsiniz. Sarnıç magna içine kan divert doğrudan enjeksiyon bu modelde, son zamanlarda büyük serebral arterlerin serebral vazospazm göstermiştir, serebral vasküler fibril birikimi, ve hücre apoptoz, farelerde değişmiş duyusal eşlik, motor, ve bilişsel fonksiyonlar. Böylece, bu model doğrulanmış ve kısa vadeli ve uzun süreli olaylar için karakterize yapar, subaraknoid kanama sonrası.

Yeni hedeflerin prospektif belirlenmesi ve subaraknoid kanamaya bağlı komplikasyonlara karşı etkili tedavi stratejileri üzerine çalışmalar için ideal olmalıdır.