Name: İskemik Böbrek Hasarı Fare Modelinin Böbrekteki MikroRNAları için Kantitatif Bir Tespit Yöntemi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-09-11T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 1 s
Description: Öğrenin, fare modelinde iskemik böbrek hasarı sonrası mikroRNA ekspresyonunu kantitatif gerçek zamanlı PCR ile nasıl tespit edeceğinizi. Bu yöntem akut böbrek hasarı biyobelirteçleri için güvenilir sonuçlar sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Kelly, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+renal+failure%3A+much+more+than+a+kidney+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Seminas+in+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Acute renal failure: much more than a kidney disease.</a> Seminas in Nephrology. 26 (2), 105-113 (2006).</li>
<li>Saikumar, J., Ramachandran, K., Vaidya, V. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+micromarkers%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Noninvasive micromarkers.</a> Clinical Chemistry. 60 (9), 1158-1173 (2014).</li>
<li>Beermann, J., Piccoli, M. T., Viereck, J., Thum, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-coding+RNAs+in+Development+and+Disease%3A+Background%2C+Mechanisms%2C+and+Therapeutic+Approaches%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Reviews%22%5BJournal%5D)">Non-coding RNAs in Development and Disease: Background, Mechanisms, and Therapeutic Approaches.</a> Physiological Reviews. 96 (4), 1297-1325 (2016).</li>
<li>Yang, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discovery+and+validation+of+extracellular%2Fcirculating+microRNAs+during+idiopathic+pulmonary+fibrosis+disease+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Gene%22%5BJournal%5D)">Discovery and validation of extracellular/circulating microRNAs during idiopathic pulmonary fibrosis disease progression.</a> Gene. 562 (1), 138-144 (2015).</li>
<li>Zhang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circulating+miR-126+is+a+potential+biomarker+to+predict+the+onset+of+type+2+diabetes+mellitus+in+susceptible+individuals%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+and+Biophysical+Research+Communications%22%5BJournal%5D)">Circulating miR-126 is a potential biomarker to predict the onset of type 2 diabetes mellitus in susceptible individuals.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 463 (1-2), 60-63 (2015).</li>
<li>Zhong, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((miR-21+is+a+key+therapeutic+target+for+renal+injury+in+a+mouse+model+of+type+2+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">miR-21 is a key therapeutic target for renal injury in a mouse model of type 2 diabetes.</a> Diabetologia. 56 (3), 663-674 (2013).</li>
<li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Downregulation+of+urinary+cell-free+microRNA-214+as+a+diagnostic+and+prognostic+biomarker+in+bladder+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Downregulation of urinary cell-free microRNA-214 as a diagnostic and prognostic biomarker in bladder cancer.</a> Journal of Surgical Oncology. 111 (8), 992-999 (2015).</li>
<li>Morishita, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA+expression+profiling+in+peritoneal+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Research%3A+The+Journal+of+Laboratory+and+Clinial+Medicine%22%5BJournal%5D)">MicroRNA expression profiling in peritoneal fibrosis.</a> Translational Research: The Journal of Laboratory and Clinial Medicine. 169, 47-66 (2016).</li>
<li>Morse, S. M., Shaw, G., Larner, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Concurrent+mRNA+and+protein+extraction+from+the+same+experimental+sample+using+a+commercially+available+column-based+RNA+preparation+kit%5BTitle%5D)+AND+%22BioTechniques%22%5BJournal%5D)">Concurrent mRNA and protein extraction from the same experimental sample using a commercially available column-based RNA preparation kit.</a> BioTechniques. 40 (1), 54-58 (2006).</li>
<li>Mestdagh, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+quantitative+miRNA+expression+platforms+in+the+microRNA+quality+control+%28miRQC%29+study%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Evaluation of quantitative miRNA expression platforms in the microRNA quality control (miRQC) study.</a> Nature Methods. 11 (8), 809-815 (2014).</li>
<li>Bustin, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+MIQE+guidelines%3A+minimum+information+for+publication+of+quantitative+real-time+PCR+experiments%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">The MIQE guidelines: minimum information for publication of quantitative real-time PCR experiments.</a> Clinical Chemistry. 55 (4), 611-622 (2009).</li>
<li>Jonas, S., Izaurralde, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Towards+a+molecular+understanding+of+microRNA-mediated+gene+silencing%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Genetics%22%5BJournal%5D)">Towards a molecular understanding of microRNA-mediated gene silencing.</a> Nature Reviews. Genetics. 16 (7), 421-433 (2015).</li>
<li>Ichii, O., Horino, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNAs+associated+with+the+development+of+kidney+diseases+in+humans+and+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Toxicologic+Pathology%22%5BJournal%5D)">MicroRNAs associated with the development of kidney diseases in humans and animals.</a> Journal of Toxicologic Pathology. 31 (1), 23-34 (2018).</li>
<li>Ma, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+of+miRNA-17-5p%2C+miRNA-21+and+miRNA-106a+level+during+rat+kidney+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Zhonghua+Yi+Xue+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">Changes of miRNA-17-5p, miRNA-21 and miRNA-106a level during rat kidney ischemia-reperfusion injury.</a> Zhonghua Yi Xue Za Zhi. 95 (19), 1488-1492 (2015).</li>
<li>Saikumar, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression%2C+circulation%2C+and+excretion+profile+of+microRNA-21%2C+-155%2C+and+-18a+following+acute+kidney+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicological+Sciences%3A+an+Official+Journal+of+the+Society+of+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Expression, circulation, and excretion profile of microRNA-21, -155, and -18a following acute kidney injury.</a> Toxicological Sciences: an Official Journal of the Society of Toxicology. 129 (2), 256-267 (2012).</li>
<li>Li, Y. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA-21+in+the+pathogenesis+of+acute+kidney+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Protein+%26+Cell%22%5BJournal%5D)">MicroRNA-21 in the pathogenesis of acute kidney injury.</a> Protein & Cell. 4 (11), 813-819 (2013).</li>
<li>Zhou, J., Chen, H., Fan, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+analysis+of+the+expression+profile+of+non-coding+RNAs+involved+in+ischemia%2Freperfusion-induced+acute+kidney+injury+in+mice+using+RNA+sequencing%5BTitle%5D)+AND+%22Oncotarget%22%5BJournal%5D)">Systematic analysis of the expression profile of non-coding RNAs involved in ischemia/reperfusion-induced acute kidney injury in mice using RNA sequencing.</a> Oncotarget. 8 (59), 100196-100215 (2017).</li>
<li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA+expression+profile+by+next-generation+sequencing+in+a+novel+rat+model+of+contrast-induced+acute+kidney+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">MicroRNA expression profile by next-generation sequencing in a novel rat model of contrast-induced acute kidney injury.</a> Annals of Translational Medicine. 7 (8), 178(2019).</li>
<li>Colbert, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model-specific+role+of+microRNA-223+as+a+mediator+of+kidney+injury+during+experimental+sepsis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">A model-specific role of microRNA-223 as a mediator of kidney injury during experimental sepsis.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 313 (2), 553-559 (2017).</li>
<li>Delbridge, M. S., Shrestha, B. M., Raftery, A. T., El Nahas, A. M., Haylor, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+body+temperature+in+a+rat+model+of+renal+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">The effect of body temperature in a rat model of renal ischemia-reperfusion injury.</a> Transplantation Proceedings. 39 (10), 2983-2985 (2007).</li>
<li>Dallas, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+expression+levels+assessed+by+oligonucleotide+microarray+analysis+and+quantitative+real-time+RT-PCR+--+how+well+do+they+correlate%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Genomics%22%5BJournal%5D)">Gene expression levels assessed by oligonucleotide microarray analysis and quantitative real-time RT-PCR -- how well do they correlate.</a> BMC Genomics. 6, 59(2005).</li>
<li>Rockett, J. C., Hellmann, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Confirming+microarray+data--is+it+really+necessary%5BTitle%5D)+AND+%22Genomics%22%5BJournal%5D)">Confirming microarray data--is it really necessary.</a> Genomics. 83 (4), 541-549 (2004).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Kancasız Bükülmüş Uçlu Konik Cımbız</td><td>Natsume Seisakusho</td><td>MA-47</td><td></td></tr><tr><td>Tampon RLT</td><td>Qiagen</td><td>79216</td><td>yıkama tamponu 1</td></tr><tr><td>Tampon RWT</td><td>Qiagen</td><td>1067933</td><td>yıkama tamponu 2</td></tr><tr><td>C57B6 fare</td><td>SLC</td><td></td> Dişli forsep atamıyor <td></td></tr><tr><td></td><td>Natsume Seisakusho</td><td>MA-49</td><td></td></tr><tr><td>Dişsiz forsep</td><td>Natsume Seisakusho</td><td>MA-48-1</td><td></td></tr><tr><td>Hemostatik klipsler</td><td>Natsume Seisakusho</td><td>KN & eksi; </td> qRT-PCR Thermo Fisher Scientific 4316813 için 353 <td></td></tr><tr><td>MicroAmp Optik 96 kuyulu reaksiyon plakası</td><td></td><td></td><td>96 kuyulu reaksiyon plakası</td></tr><tr><td>MicroAmp Optik Yapışkan Film</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4311971</td><td>96 kuyulu reaksiyon plakası için yapışkan film</td></tr><tr><td>miRNA-132-3p astar</td><td>Qiagen</td><td>MS00003458</td><td>5'UAACAGUCUACAGCCAUGGUCG</td></tr><tr><td>miRNA-17-5p astar</td><td>Qiagen</td><td>MS00029274</td><td>5'CAAAGUGCUUACAGUGCAGGUAG</td></tr><tr><td>miRNA-18a-5p primer</td><td>Qiagen</td><td>MS00031514</td><td>5'UAAGGUGCAUCUAGUGCAGAUAG</td></tr><tr><td>miRNA-212-3p primer</td><td>Qiagen</td><td>MS00003815</td><td>5'UAACAGUCUCCACACGGCC</td></tr><tr><td>miRNA-21a-5p primer</td><td>Qiagen</td><td>MS00009079</td><td>5'UAGCUUAUCAGACUGAUGUUGA</td></tr><tr><td>miRNA-223-3p primer</td><td>Qiagen</td><td>MS00003871</td><td>5'UGUCAGUUUGUCAAAUACCCA</td></tr><tr><td>miRNA-574-5p astar</td><td>Qiagen</td><td>MS00043617</td><td>5'UGAGUGUGUGUGUGUGUGUGU</td></tr><tr><td>miRNeasy Mini kit</td><td>Qiagen</td><td>217004</td><td>silika membran tabanlı döndürme sütunu</td></tr><tr><td>miScript II RT kiti</td><td>Qiagen</td><td>218161</td><td></td></tr><tr><td>miScript SYBR Yeşil PCR kiti</td><td>Qiagen</td><td>218073</td><td></td></tr><tr><td>QIA parçalayıcı</td><td>Qiagen</td><td>79654</td> mikro <td>santrifüj spin-kolon</td></tr><tr><td>QIAzol Lizis Reaktifinde</td> biyopolimer parçalama sistemi <td>Qiagen</td><td>79306</td><td>fenol/guanidin bazlı lizis reaktifi</td></tr><tr><td>QuantStudio 12K Flex Flex Gerçek Zamanlı PCR sistemi</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4472380</td><td>gerçek zamanlı PCR cihazı</td></tr><tr><td>QuantStudio 12K Flex Yazılımı sürüm 1.2.1.</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4472380</td><td>gerçek zamanlı PCR cihaz yazılımı</td></tr><tr><td>RNU6-2 primer</td><td>Qiagen</td><td>MS00033740</td><td>açıklanmayan</td></tr><tr><td>cerrahi makas</td><td>Natsume Seisakusho</td><td>B-2</td><td></td></tr><tr><td>Vasküler klips uygulayıcısı</td><td>VITALITEC</td><td>1621420</td><td></td></tr></tbody></table>

İskemik böbrek hasarı fare modelinin böbrekteki mikrorna'ları için kantitatif bir tespit yöntemi

A Quantitative Detection Method for MicroRNAs in the Kidney of an Ischemic Kidney Injury Mouse Model

Burada, ABI farelerinde miRNA ekspresyon profili araştırıldı. MiRNA ekspresyon profili, farelerde çeşitli organ ve dokularda araştırılmıştır. MiRNA'lar önemli transkripsiyon sonrası düzenleyicilerdir ve şu anda AKI dahil olmak üzere çeşitli hastalıkların karakterizasyonunda kapsamlı bir şekilde incelenmektedir. MiRNA'lar, patolojik durumları aydınlatmaya yardımcı olma ve ABI12'nin tedavisine uygulanma potansiyeline sahiptir. ABH'nin başlıca nedenleri IRI, nefrotoksik hakaret ve sepsistir. Böbreğin...

İskemik Böbrek Hasarı Fare Modelinin Böbrekteki MikroRNA'ları için Kantitatif Bir Tespit Yöntemi

MicroRNAs (miRNAs) are involved in various disease states and are effective biomarkers for the early diagnosis of diseases and treatment in mice. However, ...

ABH'de mikroRNA'nın değişmiş ekspresyonu biyobelirteç ve tedavi için yararlı olabilir. Bu protokol basittir ve laboratuvarlar arasında sürekli sonuçlar elde edilmesini sağlar. Böbreğin IRI'si, ABH için en önemli risk faktörlerinden birini temsil eder. IRI tarafından değiştirilen mikroRNA'ların ölçülmesi tanıya yol açar. Böbrek örneğinden saflaştırılan mikroRNA'lar başka bir sisteme uygulanır. İşlem boyunca hipotermi, bağırsak nemlendirmesi ve anestezi derinliğini dikkatlice izleyin. Bunun nedeni, alışmak için birçok manuel teknik olmasıdır.[Ekran Okuyucusu] Ayak parmağını sıkıştırmaya yanıt verilmediğini onayladıktan sonra, anestezi uygulanmış fareyi sırtüstü pozisyonda ısıtılmış bir cerrahi ped üzerine yerleştirin. Orta hatta abdominal bir kesi yaptıktan sonra, sağ böbrek ve üreteri ortaya çıkarmak için bağırsağı ekstra karın boşluğunun sol tarafına nazikçe itmek için PBS ile nemlendirilmiş bir pamuklu çubuk kullanın ve sağ üreteri kaldırmak için açılı forseps kullanın. 4-0 ipek örgülü dikişlerle üreteri iki yerden bağlayın, böbreğe daha yakın olan dikiş için daha uzun bağlar bırakın ve dikişler arasından kesin. Kalan dikişi dikkatlice tutarak, böbrek boyunca bağ dokusunu ve yağı kör bir şekilde inceleyin ve sağ böbreğe kan sağlayan renal arterler veya damarlar olmayan bir kan damarı belirleyin. Damarı bağlayın ve sağ böbrek yeterince ayrıldığında, böbrek damarını ve arteri bağlayın. PBS ile nemlendirilmiş bir pamuklu çubuk kullanarak, sol böbreği açığa çıkarmak ve bağırsağı nemli bir örtü ile kaplamak için bağırsağı ekstra karın boşluğunun sağ tarafına doğru hafifçe itin. Sol böbreği gösterildiği gibi hazırladıktan sonra, sol böbrek iskemisini indüklemek için böbrek arterini ve damarını böbrekten bir santimetre uzakta klempleyin. Başarılı bir iskemi, böbrek dokusunun kademeli olarak homojen bir şekilde kararması ile görsel olarak doğrulanabilir. İskemi doğrulandığında, bağırsak dokusunu karın boşluğuna geri koyun, bağırsak bükülmesini önlemeye dikkat edin ve karın derisini geçici olarak kapatın ve örtün. 25 ila 45 dakika sonra, kelepçeyi çıkarın ve kan akışı reperfüzyonunun ve böbrek renginin iyileştiğini onaylayın. Bağırsağın bükülmediğini doğruladıktan sonra, intraperitoneal PBS'yi aşılayın ve karın kasını ve cildi 4-0 naylon dikişler kullanarak iki kat halinde kapatın. İskemik yaralanma indüksiyonundan 24 saat sonra, orta hat insizyonunu tekrar açın ve inferior vena kavadan kanı almak için 27 gauge bir iğne kullanın. Göğüs duvarında orta hat insizyonu yapın ve sol ventriküle 23 gauge iğne sokun. İğneye geri akışı onayladıktan sonra, karaciğerin sağ lobunda bir kesi yapın ve 20 mililitre PBS enjekte edin. Karaciğer kırmızıdan pembeye dönecek ve yeterli kanın boşaltıldığını onaylayacaktır. Sol böbreği çıkarmak için forseps ve makas kullanın ve eksize edilen dokuyu bir PBS kabında yıkayın. Daha sonra böbreği kurutmadan böbrek fasyasını çıkarmak için forseps kullanın ve böbreği dikey orta hat boyunca ikiye bölün. MikroRNA saflaştırması için, 30 miligram donmuş böbrek örneğini buz üzerinde 700 mikrolitre fenilguanidin bazlı lizis reaktifi içeren bir cam homojenizatöre koyun ve numuneyi tamamen homojenize etmek için havaneli yavaşça ve tekrar tekrar çevirin. Doku tamamen ayrıştığında, homojenize lizatı iki mililitrelik bir toplama tüpünde bir mikro santrifüj döndürme kolonunda biyopolimer parçalama sistemine aktarın ve numuneyi santrifüjleme ile tüpün dibine toplayın. Lizatı 140 mikrolitre kloroform içeren yeni bir mikro santrifüj tüpüne aktarın ve tüpü, kapak sıkıca sıkılmış olarak 15 saniye boyunca ters çevirerek karıştırın. Oda sıcaklığında iki ila üç dakikalık bir inkübasyondan sonra, numuneyi santrifüjleme ile çökeltin ve süpernatanı, peleti bozmadan hacmin 1,5 katı %100 etanol içeren yeni bir mikro santrifüj tüpüne aktarın. Numunenin 700 mikrolitresini iki mililitrelik bir toplama tüpünde silika membran bazlı bir spin kolonuna aktarmadan önce numuneyi girdaplayarak beş saniye karıştırın. Kısa bir santrifüjlemeden sonra, akışı atın ve tuz izlerini gidermek için numuneyi yıkama başına 500 mikrolitre yıkama tamponu 2 ile yeni bir silika membran bazlı döndürme kolonunda iki kez yıkayın. İkinci yıkamadan sonra, silika membran bazlı spin kolonunu tekrar santrifüjleyin ve akışı attıktan sonra kolonu yeni bir 1,5 mililitrelik toplama tüpüne aktarın. Kolona 25 mikrolitre RNaz içermeyen su ekleyin ve numuneyi tekrar santrifüjlemeden önce oda sıcaklığında beş dakika inkübe edin. Daha sonra 25 mikrolitrelik mikroRNA içeren eluiti yeni bir mikro santrifüj tüpüne aktarın. Bu çalışmada, akut böbrek hasarı olan farelerin böbreklerinde yukarı regüle edilen insanlarda eksprese edilen yedi mikroRNA araştırıldı. MikroRNA'ların altısının seviyelerinin, iskemi reperfüzyon hasarı olan farelerin böbreklerinde, gösterildiği gibi kantitatif gerçek zamanlı PCR kullanan sahte farelerdekilere kıyasla önemli ölçüde arttığı bulundu. Serum kan üre azotu ve kreatinin seviyeleri ve akut tübüler nekroz da önemli ölçüde yukarı regüle edildi.İri tanısı ve ABH'nin spesifik tedavisi için biyobelirteçler belirsizliğini korumaktadır. MikroRNA araştırmalarının ilerleyeceğini ve ABH tanı ve tedavisine katkıda bulunacağını umuyorum.

a-quantitative-detection-method-for-micrornas-kidney-an-ischemic

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu makalede, formalin içerisinde tespit edilmiş böbrek bölümlerinde microRNA ifade Renkölçer tespiti için optimize edilmiş bir in situ hibridizasyon protokolü tarif eder.

MicroRNA<em&gt; In situ</em&gt; Formalin Sabit Böbrek Dokular Hibridizasyon

Burada açıklanan renal iskemi reperfüzyon yaralanmasının fare modeli, akut böbrek hasarı ile sonuçlanan iskemiyi indüklemek için kontrol dokusu ve sol renal pedikülün klemplenmesini sağlayan bir sağ nefrektomiden oluşur. Bu model, tüm adımların tek bir kesi ile gerçekleştirildiği bir orta hat laparotomi yaklaşımı kullanır.

Renal İskemi Reperfüzyon Hasarı: Yaralanma Fare Modeli ve Rejenerasyon

Bu iletişim kuralı bir tam böbrek iş-up glomerular hastalığı fare modellerinde yürütülmesi gereken açıklar. Yöntemler glomerular hastalığı tüm fare modelleri uygulanabilir glomerular işlevinin ayrıntılı işlevsel, yapısal ve mekanik analiz için olanak sağlar.

Fare modelleri Glomerular hastalığı böbrek fonksiyonlarının değerlendirilmesi

Tek taraflı üreteral obstrüksiyonu (UUO) olan farelerin böbreklerinde mikroRNA ekspresyonunu kantitatif ters transkripsiyon polimeraz zincir reaksiyonu ile değerlendirmek için bir yöntem tanımladık. Bu protokol UUO ile farelerde ve diğer patolojik durumlar bağlamında böbrek mikroRNA ekspresyon profillerinin incelenmesi için uygundur.

Fare Böbreğinde Tek Taraflı Üreteral Obstrüksiyonile MikroRNA Ekspresyonlarının Kantitatif Gerçek Zamanlı PCR Değerlendirilmesi

mikroRNA'lar IgA nefropatisinin patogenezinde rol oynarlar. Bir IgA nefropati fare modelinin (HIGA fareleri) böbreklerindeki mikroRNA ekspresyon seviyelerini tespit etmek için güvenilir bir yöntem geliştirdik. Bu yeni yöntem, IgA nefropatisinde miRNA tutulumunu kontrol etmeyi kolaylaştıracaktır.

İmmünoglobulin A Nefropatik Farelerin Böbreklerinde MikroRNA Ekspresyonunun Tespiti

Bu çalışmada, yaşa bağlı böbrek yetmezliği olan farelerin böbrek ve serumundaki mikroRNA ekspresyonunu kantitatif ters transkripsiyon polimeraz zincir reaksiyonu ile değerlendirmek için bir yöntem sunuyoruz.

Kantitatif Gerçek Zamanlı Polimeraz Zincir Reaksiyonunun Böbrekte ve Serumda Yaşa Bağlı Böbrek Yetmezliği Olan Farelerin Serumunda Değerlendirilmesi

Burada, çeşitli böbrek hastalığı fare modellerinde viral olmayan bir vektörün kuyruk damarı enjeksiyonu ve polietilenimin nanopartikülleri yoluyla böbreğe yapay olarak sentezlenmiş dışsal miRNA taklitleri veriyoruz. Bu, böbrekte hedef miRNA'nın önemli ölçüde aşırı ekspresyonuna yol açtı ve birkaç fare modelinde böbrek hastalığının ilerlemesini engelledi.

Çeşitli Böbrek Hastalığı Fare Modellerinde Polietilenimin Nanopartikülleri Kullanılarak Ekzojen Yapay Olarak Sentezlenmiş MiRNA Mimiklerinin Böbreğe Verilmesi

Bu makale, örnek toplamadan bir gün önce yapılan kontralateral nefrektomi ile tek taraflı böbrek IRI kullanan iskemik CKD modelini sunmaktadır; bu protokol, serum tabanlı fonksiyonel değerlendirme, yüksek sağkalma ve tekrarlanabilir KBD patolojisini 28 ve 42 gün içinde mümkün kılarak mekanik ve girişimsel çalışmalar için çok yönlü bir platform sağlar.

Böbrek Iskemisi/Reperfüzyon Yaralanması Nedeniyle Akut Böbrek Hastalığına Geçişin Fare Modeli

Farelerde sağ böbreğin rezeksiyonundan sonra tek taraflı böbrek iskemi-reperfüzyon sırasında böbrek mikrovasküler kan akışındaki değişiklikleri izlemek için lazer lek kontrast görüntüleme sistemi kullanıldı.

Farelerde Renal Iskemi-Reperfüzyon Yaralanması sırasında Lazer Lek Kontrast Görüntüleme ile Mikrovasküler Perfüzyon İzlenen

Izole adacık transplantasyonu tip 1 şeker hastalığı için potansiyel bir tedavi olarak öne sürülmüştür. Burada, fare pancreata adacıkları izole, ve böbrek subkapsüler alan nakli için bir yöntem açıklanmaktadır.

Murin Islet İzolasyon ve subkapsüler Böbrek Nakli Bir Yöntem

Öğrenin, fare modelinde iskemik böbrek hasarı sonrası mikroRNA ekspresyonunu kantitatif gerçek zamanlı PCR ile nasıl tespit edeceğinizi. Bu yöntem akut böbrek hasarı biyobelirteçleri için güvenilir sonuçlar sağlar.

İskemik Böbrek Hasarı Fare Modelinin Böbrekteki MikroRNA'ları için Kantitatif Bir Tespit Yöntemi

Daha fazla video keşfet