Name: Özel Yapım Bir Dağıtım Sistemi Kullanarak Manyetik Nanopartikül Hipertermisinin In Vitro ve In Vivo Teslimatı (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-07-02T14:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 45 s
Description: Keşfedin, manyetik nanopartikül hipertermi tedavisinin in vitro ve in vivo modellerde güvenli ve tekrarlanabilir teslimatı için özel bir dağıtım sistemi kullanmayı. Bu yöntem, hedef dokuya ısıtma sınırlama ve termometri ile doğru izleme sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Çalışma hibe numaraları ile finanse edildi: NCI P30 CA023108 ve NCI U54 CA151662.

Dartmouth College Hayvan Bakımı ve Kullanımı Programı, Amerikan Laboratuvar Hayvanları Bakımı Akreditasyon Birliği (iAAALAC) tarafından akredite edilmiştir ve tüm UDSA ve NIH (Laboratuvar Hayvanları Refahı Ofisi) yönergelerine ve düzenlemelerine uyar. Tüm in vivo çalışmalar Dartmouth College Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmıştır. Ötenazi prosedürü, Hayvanların Ötenazisi için 2020 AVMA Kılavuzlarına uygundur.
1. Sistemin enstrümantasyonu/tasarımı
<ol><li>İstenilen manyetik alanı oluşturmak için şekilleri seçerek kapalı bir döngü olacak şekilde özel AMF anteni (bobin) tasarlayın. İstenilen alanı oluşturmak üzere uyumlu bobinler tasarlamak için güç jeneratörü seçiminden endüktans formüllerini ve özelliklerini kullanın. İn vitro ve in vivo deneyler için farklı tasarımlar kullanın.</li>
	<li>AMF anten endüktansının güç jeneratörünün kabul edilebilir aralığına girdiğinden emin olun. Anteni güç jeneratörüyle eşleştirmek (ayarlamak) için kapasitörler ekleyin veya çıkarın.</li>
	<li>In vitro deneyler için, aynı anda birden fazla numunenin işlenmesine izin veren 1,5 mL tüp içerebilen 14 dönüşlü bir sarmal bobin, iç çapı 2 cm ve uzunluğu 14 cm olan bir bobin tasarlayın. Bobini bir vinil polimerle yalıtın ve bobini tüplerden ayırmak için bir polistiren ara parça kullanın. Tasarım spesifikasyonunun ayrıntıları ve dikkat edilmesi gereken noktalar Ek Dosya 1'de mevcuttur.</li>
	<li>İn vivo deneyler için, tescilli tasarım bilgilerine sahip bir üreticiden özel olarak üretilmiş tüm vücut sarmal bobini edinin. 8 mm kare boru (bobinin deliği içinde daha düzgün bir alan yarattığından) ve hedeflenen tedavi alanında bir yoğunlaştırıcı kullanın. Konsantratörü 5,0 cm uzunluğunda, toplam 5 dönüşle 3,6 cm iç çap, 5,2 cm dış çap ile sonuçlandırın ve hedeflenen tedavi alanında yerini alın. Bobini bir polikarbonat kabukla çevreleyin.</li>
	<li>Güç kaynağı olarak 10 kW veya daha yüksek olarak derecelendirilmiş, ayarlanabilir güç ve frekansa sahip bir AMF jeneratörü kullanın. Endüktans, güç kaynağını ve antenleri/bobinleri 0,62 ila 1,18 μHenries (μH) aralığıyla eşleştirerek 30-300 kHz arasında değişen frekanslara izin verir. Jeneratörü, basıncı 50 psi'ye ayarlanmış bir santrifüj takviye pompası aracılığıyla geri dönüştürülmüş su kullanarak soğutun.</li>
	<li>Bobinleri, AMF anteni aracılığıyla su ile seyreltilmiş %25 etilen glikol bazlı ısı transfer sıvısı pompalayan 5,6 tonluk soğutma kapasiteli bir soğutucu ile soğutun. Soğutucunun sıcaklığını, anten numuneyi ısıtmayacak veya soğutmayacak şekilde ayarlayın.</li>
	<li>Hayvan muhafazası için, tutucu ile bobin yüzeyi arasında 0,5 cm'lik bir hava boşluğu ile bobinin ortasına asılabilen boru şeklinde bir tutucu oluşturun. Havayı bobinin etrafındaki kabuktan dolaştıran ayarlanabilir bir klimalı hava pompası bağlayın ve normal bir hayvan çekirdeği sıcaklığını koruyacak şekilde ayarlayın. Anestezinin uygun şekilde verilmesini sağlamak için anestezi makinesini hayvanın başının yakınındaki boru şeklindeki hayvan tutucusuna bağlayın.</li>
	<li>Hücre muhafazası için, bir su banyosundan gelen suyu, tüplerin yerleştirildiği ara parçadan geçiren bir aparat oluşturun. Bu su banyosunun sıcaklığını, tüpler 37 ° C'de suyla çevrili olacak şekilde ayarlayın.</li>
	<li>Tümör, hayvanın çekirdeği ve hayvan ortamı içindeki sıcaklıkları izlemek için veya in vitro çalışmalar için, hücre peletinin sıcaklığını ve tüpleri çevreleyen suyu izlemek için fiber optik problar kullanın.</li>
	<li>Tüm deneyler için 100 nm büyüklüğünde manyetik demir oksit nanopartikülleri kullanın. NOT: Konsantrasyon ve spesifik absorpsiyon oranı (SAR), nanopartikülleri seçerken göz önünde bulundurulması gereken iki özelliktir, çünkü bunlar olası ısıtma ve termal doz18'i doğrudan etkiler.</li>
</ol>2. İn vitro hipertermi
<ol><li>Kültür B16F10 RPMI ortamındaki murin melanom hücreleri% 10 FBS ve% 1 Pen / strep ile. Plaka 150.000 hücre/kuyu 6 delikli plakalarda, 2 mL tam ortam ile.</li>
	<li>Her kuyucuk için uygun tedaviyi belirleyin, yani mNP'siz ve AMF'siz hücreler, mNP'li ve AMF'siz hücreler, mNP'siz ve AMF'siz hücreler, mNP'li ve AMF'li hücreler. NOT: Ek olarak, hipertermiyi başka bir tedavi ile birleştirirseniz uygun kontroller olduğundan emin olun. AMF, gerekli güç ve soğutma yetenekleriyle güçlendirilmiş standart bir araştırma tezgahı laboratuvarında gerçekleştirilir.</li>
	<li>Kaplamayı 24 saat sonra, önceki adımda belirtildiği gibi uygun kuyucuklara mNP'ler ekleyin. 3 mg demir / mL konsantrasyonuna mNP'ler ekleyin. Bir stok ortam/mNP çözümü oluşturarak (eski ortamları çıkararak, bu çözümü ekleyerek) veya homojen dağılım için mNP'leri doğrudan ve nazikçe dönen plakalar ekleyerek mNP'lerin kuyu boyunca dağıtıldığından emin olun.</li>
	<li>Tedaviye, mNP'lerin eklenmesinden 48 saat sonra, kuyular ~% 80 birleştiğinde, ortamı çıkararak ve kuyuları taze ortamla yıkayarak başlayın. Medyayı kaldırın.</li>
	<li>Tedavi edilen her kuyuya 0,5 mL tripsin ekleyin ve yavaşça girdap yapın. Hücrelerin ayrıldığını kontrol etmek için mikroskop kullanın.</li>
	<li>Hücreleri 1,5 mL tüplere toplamak için her bir kuyucuğa 1 mL ortam ekleyin. Tüm hücreleri kuyudan toplayın (~ 1 x 106 hücre). Her kuyucuk için açıkça etiketlenmiş ayrı bir tüp kullanın.</li>
	<li>Hücrelerin pelet yapmasına izin vermek için tüpleri 2-3 dakika boyunca 60 x g'da döndürün. Peleti ortamda tutun.</li>
	<li>Tüpleri bobin içindeki suyla dolu ara parçaya yerleştirin. Su banyosunun sıcaklığını, ortam ve hücre peleti 37 ° C'de tutulacak şekilde ayarlayın. Ayrı fiber optik sıcaklık probları kullanarak tüp ve su banyosu içindeki sıcaklığı izleyin.</li>
	<li>Soğutucuyu açın, soğutma sıvısının bobinden akıp akmadığını kontrol edin. Güç kaynağını açın ve maksimum yüzdesini istenen alana ayarlayın. 10 kW jeneratörle çalışan 14 dönüşlü solenoid bobini 165 kHz ve 23,87 kA/m'de (300 Oe) çalıştırın.</li>
	<li>Tüplerden birine ayrı bir fiber optik sıcaklık probu yerleştirin. Hücreleri daha önce belirlenen protokol termal dozuna kadar tedavi edin. Bir örnek, 43 ° C'de 30 dakikadır (CEM43 / 30).</li>
	<li>Tüplerindeki ortamdaki hücreleri yeniden askıya alın ve yeni 6 kuyu plakasına yeniden plakalayın. Yeni plakaları açıkça etiketleyin. Amaç, toplanan tüm hücreleri (~ 1 x 106 hücre) yeniden plakalamaktır. NOT: Kültüre alınan hücrelerin tedavi görmesini sağlamak için yeni 6 kuyucuk plakası kullanılmalıdır. Eski plakalar kullanılırsa, plakalarda hala başarılı bir şekilde tripsinize edilmemiş hücreler kalabilir.</li>
	<li>Gerekirse, bir sonraki deneysel prosedür için, RNA veya protein ekspresyon analizi için hücreleri lize edin.</li>
</ol>3. İn vivo hipertermi
<ol><li>Hücre kültürü ve aşılama<ol><li>Kültür B16F10 RPMI ortamındaki murin melanom hücreleri% 10 FBS ve% 1 Pen / strep ile. İstenilen sayıda hayvanın aşılanması için yeterli hücre sağlayacak tabaklar / tabaklar kullanın. Örneğin, 100.000 hücrede kaplanmış 10.100 mm'lik tabaklar, 48 saat içinde 20 fare enjeksiyonu için yeterli hücrelerle birleştirilecektir.</li>
		<li>Hücreleri tripsinize edin ve saf RPMI ortamı kullanarak toplayın (FBS veya kalem / strep yok).</li>
		<li>Hücreleri sayın ve aşılama hacmine ve fare sayılarına bağlı olarak istenen hücre konsantrasyonu için bir çözüm oluşturun.</li>
		<li>6 haftalık dişi C57Bl / 6 fareleri buharlaştırılmış izofluran ve oksijen kullanarak anestezi uygulayın. Hayvanları, indükleninceye kadar% 5 izofluran ve% 95 oksijen içeren pleksiglas bir kutuya yerleştirin. İndüklendikten sonra, hayvanı çıkarın ve 3.1.5-3.1.7 ve 3.3.3-3.3.6 adımlarını tamamlamak için% 2 izofluranda bir yüz konisi kullanın. NOT: Tedavi sırasında anestezi için dahili anestezi muhafazası kullanın. Fare anestezisi için standart kurumsal protokolleri takip edin. Hayvan deneylerinden önce uygun IACUC onayını sağlayın. Anesteziden sonra, hayvanı kafese geri koyun ve komplikasyon olmadığından emin olmak için iyileşmeyi izleyin.</li>
		<li>Doğru reflekslere yanıt verilip verilmediğini kontrol edin.</li>
		<li>Elektrikli tıraş makinesi kullanarak sağ kanadı tıraş edin.</li>
		<li>Enjeksiyon bölgesini alkollü bir mendille temizleyin. 1-2 x 106 hücreyi, 28 G'lik bir iğne ile 100 μL'lik bir cam şırınga kullanarak, anestezi yapılan tıraşlı sağ kanadın üzerinde 50 μL medya içinde intradermal olarak dağılmış olarak enjekte edin.</li>
	</ol></li>
	<li>Tümör büyümesi / Nanopartikül enjeksiyonu<ol><li>Kaliperleri (uzunluk, genişlik ve derinlik) kullanarak tümörleri 3 boyutta ölçün ve hacimleri (uzunluk x genişlik x derinlik x π)/6 ile hesaplayın.</li>
		<li>Tümör hacimleri 120 mm3'e (+/- 20mm3) ulaştığında, hayvanları çalışmaya yerleştirin. Kombinasyonu tedavi kohortları (yani kontrol, mNPH, radyasyon ve kombinasyon) dahil olmak üzere uygun kontrol ve tedavi gruplarının olmasını sağlayarak çalışmayı tasarlayın.</li>
		<li>3.1.4'te açıklandığı gibi mNP alacak fareleri anestezi altına alın.</li>
		<li>Alanı alkollü bir mendille temizleyin. AMF tedavisinden 3 saat önce mNP'leri tümöre enjekte edin. Doz 7.5 mg demir /cm3 tümör olacak şekilde bir hacim enjekte edin. NOT: Laboratuvardan yayınlanmamış veriler, maksimum mNP alımının 3-6 saatte gerçekleştiğini göstermektedir.</li>
	</ol></li>
	<li>AMF tedavisi<ol><li>Fareyi anestezi altına alın ve çekirdek sıcaklığını korumak için bir ısıtma yastığına yerleştirin.</li>
		<li>Doğru reflekslere yanıt verilip verilmediğini kontrol edin. Kulak etiketini veya faredeki diğer metal nesneleri çıkarın.</li>
		<li>Yağlanmış bir fiber optik sıcaklık probunu farenin rektumuna yavaşça yerleştirin.</li>
		<li>İğneyi çıkararak tümöre bir kateter yerleştirin. Kateteri, tümörden çok fazla yapışmayacak şekilde kesin. NOT: Fiberoptik sıcaklık kateterleri, fareler genel anestezi altındayken yerleştirilir ve çıkarılır, yani kateterler sadece tümör ısıtma prosedürü sırasında yerinde bulunur. Farelere, prosedür sırasında bir NSAID analjezi ilacı, ketoprofen (5 mg / kg) 'nin tek bir deri altı dozu verilir. Kateterlerin yerleştirilmesiyle ilişkili kısa veya uzun süreli rahatsızlık veya morbidite gözlemlemedik.</li>
		<li>Kateterin içine 3 sensörlü fiber optik sıcaklık probu yerleştirin. Kateter, fiber optik sıcaklık probu sensörlerini korur.</li>
		<li>Rektal ve intratümöral probu, yerinde kalmalarını sağlamak için hayvanın kuyruğuna bantlayın.</li>
		<li>Fareyi 50 mL'lik bir tüpe yerleştirin, aşağıya doğru ilerleyin. Tüpün başın yanında anestezinin bağlanacağı ve teslim edileceği bir delik bulunmalıdır.</li>
		<li>Tüpü bobin kurulumuna yerleştirin ve anesteziyi yeniden bağlayın.</li>
		<li>Ortam sıcaklığını ölçmek için tüpün içine gevşek bir şekilde fiber optik sıcaklık probu yerleştirin.</li>
		<li>Soğutucuyu açın ve soğutma sıvısının sirküle edildiğinden emin olun.</li>
		<li>Bilgisayar yazılımının çeşitli sıcaklıkları görüntülediğinden emin olun ve CEM43 hesaplamasının gerçek zamanlı olarak görüntülenmesini sağlamak için kayda başlayın. Gerekli CEM43 daha önce belirlenen dozdur. NOT: Mıknatıs açılmadan önce, hayvana metal eşyaların takılmadığından emin olun, çünkü bunlar hızla ısınır. Ek olarak, odadaki herkesin kalp pili olmadığından ve orada bulunmalarının güvenli olduğundan emin olun.</li>
		<li>Mıknatısı düşük güç yüzdesiyle açın.</li>
		<li>Fiber optik sıcaklık problarının sıcaklık değişimlerini kaydettiğinden emin olun. AMF etkinleştirildikten sonra alan arttıkça sıcaklıklar artacaktır. Hayvanın çekirdek sıcaklığının 38 ° C'de kalmasını sağlayın. Klimalı hava ceketini kullanarak çekirdek sıcaklığını düzenleyin.</li>
		<li>Jeneratör üzerindeki gücü değiştirerek, tümördeki sıcaklık seviyesini kontrol eden dahili kontrol kadranını kullanarak manyetik alanın gücünü ayarlayın.</li>
		<li>AMF'yi, kullanıcı tarafından daha önce belirlendiği gibi (örneğin CEM43 40) tümör içinde istenen doz elde edildikten sonra kapatın.</li>
		<li>AMF kapatıldıktan sonra, tüpü bobinden çıkarın.</li>
		<li>Fareyi tüpten çıkarın, çeşitli probları ve kateteri çıkarın. Gerekirse, hayvanı yeni bir metal kulak etiketi ile etiketleyin.</li>
		<li>Tedaviler tamamlandıktan sonra, soğutucuyu kapatın.</li>
		<li>Hayvanları anesteziden kurtarın ve komplikasyon oluşmamasını sağlayın. Normale dönmeyi sağlamak için davranışlarını izleyin.</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Chen, X., Tan, L., Liu, T., Meng, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micro-Nanomaterials+for+Tumor+Microwave+Hyperthermia%3A+Design%2C+Preparation%2C+and+Application%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Drug+Delivery%22%5BJournal%5D)">Micro-Nanomaterials for Tumor Microwave Hyperthermia: Design, Preparation, and Application.</a> Current Drug Delivery. 14 (3), 307-322 (2016).</li>
<li>Luo, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+radiofrequency+ablation+versus+other+ablating+techniques+on+hepatocellular+carcinomas%3A+A+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Surgical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Effects of radiofrequency ablation versus other ablating techniques on hepatocellular carcinomas: A systematic review and meta-analysis.</a> World Journal of Surgical Oncology. 15 (1), 126(2017).</li>
<li>Ter Haar, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heat+and+sound%3A+Focused+ultrasound+in+the+clinic%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">Heat and sound: Focused ultrasound in the clinic.</a> International Journal of Hyperthermia. 31 (3), 223-224 (2015).</li>
<li>Salunkhe, A. B., Khot, V. M., Pawar, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+Hyperthermia+with+Magnetic+Nanoparticles%3A+A+Status+Review%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Topics+in+Medicinal+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Magnetic Hyperthermia with Magnetic Nanoparticles: A Status Review.</a> Current Topics in Medicinal Chemistry. 14 (5), 572-594 (2014).</li>
<li>Dewhirst, M. W., Viglianti, B. L., Lora-Michiels, M., Hanson, M., Hoopes, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Basic+principles+of+thermal+dosimetry+and+thermal+thresholds+for+tissue+damage+from+hyperthermia%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">Basic principles of thermal dosimetry and thermal thresholds for tissue damage from hyperthermia.</a> International Journal of Hyperthermia. 19 (3), 267-294 (2003).</li>
<li>Roizin-Towle, L., Pirro, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+response+of+human+and+rodent+cells+to+hyperthermia%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Radiation+Oncology%2C+Biology%2C+Physics%22%5BJournal%5D)">The response of human and rodent cells to hyperthermia.</a> International Journal of Radiation Oncology, Biology, Physics. 20 (4), 751-756 (1991).</li>
<li>Hergt, R., Dutz, S., Müller, R., Zeisberger, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+particle+hyperthermia%3A+Nanoparticle+magnetism+and+materials+development+for+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physics+Condensed+Matter%22%5BJournal%5D)">Magnetic particle hyperthermia: Nanoparticle magnetism and materials development for cancer therapy.</a> Journal of Physics Condensed Matter. 18 (38), (2006).</li>
<li>Kumar, C. S. S. R., Mohammad, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+nanomaterials+for+hyperthermia-based+therapy+and+controlled+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Drug+Delivery+Reviews%22%5BJournal%5D)">Magnetic nanomaterials for hyperthermia-based therapy and controlled drug delivery.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 63 (9), 789-808 (2011).</li>
<li>Stigliano, R. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitigation+of+eddy+current+heating+during+magnetic+nanoparticle+hyperthermia+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">Mitigation of eddy current heating during magnetic nanoparticle hyperthermia therapy.</a> International Journal of Hyperthermia. 32 (7), 735-748 (2016).</li>
<li>Johannsen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+hyperthermia+of+prostate+cancer+using+magnetic+nanoparticles%3A+Presentation+of+a+new+interstitial+technique%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">Clinical hyperthermia of prostate cancer using magnetic nanoparticles: Presentation of a new interstitial technique.</a> International Journal of Hyperthermia. 21 (7), 637-647 (2005).</li>
<li>Horsman, M. R., Overgaard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperthermia%3A+a+Potent+Enhancer+of+Radiotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Hyperthermia: a Potent Enhancer of Radiotherapy.</a> Clinical Oncology. 19 (6), 418-426 (2007).</li>
<li>Petryk, A. A., Giustini, A. J., Gottesman, R. E., Kaufman, P. A., Hoopes, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+nanoparticle+hyperthermia+enhancement+of+cisplatin+chemotherapy+cancer+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">Magnetic nanoparticle hyperthermia enhancement of cisplatin chemotherapy cancer treatment.</a> International Journal of Hyperthermia. 29 (8), 845-851 (2013).</li>
<li>Peeken, J. C., Vaupel, P., Combs, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrating+hyperthermia+into+modern+radiation+oncology%3A+What+evidence+is+necessary%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Oncology%22%5BJournal%5D)">Integrating hyperthermia into modern radiation oncology: What evidence is necessary.</a> Frontiers in Oncology. 7, 132(2017).</li>
<li>Petryk, A. A., Giustini, A. J., Gottesman, R. E., Trembly, B. S., Hoopes, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+magnetic+nanoparticle+and+microwave+hyperthermia+cancer+treatment+methodology+and+treatment+effect+in+a+rodent+breast+cancer+model%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">Comparison of magnetic nanoparticle and microwave hyperthermia cancer treatment methodology and treatment effect in a rodent breast cancer model.</a> International Journal of Hyperthermia. 29 (8), 819-827 (2013).</li>
<li>Stigliano, R. V., Shubitidze, F., Petryk, A. A., Tate, J. A., Hoopes, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+nanoparticle+hyperthermia%3A+predictive+model+for+temperature+distribution%5BTitle%5D)+AND+%22Energy-based+Treatment+of+Tissue+and+Assessment+VII%22%5BJournal%5D)">Magnetic nanoparticle hyperthermia: predictive model for temperature distribution.</a> Energy-based Treatment of Tissue and Assessment VII. 8584, 858410(2013).</li>
<li>Dewhirst, M., Viglianti, B. L., Lora-Michiels, M., Hoopes, P. J., Hanson, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thermal+dose+requirement+for+tissue+effect%3A+experimental+and+clinical+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Thermal+Treatment+of+Tissue%3A+Energy+Delivery+and+Assessment+II%22%5BJournal%5D)">Thermal dose requirement for tissue effect: experimental and clinical findings.</a> Thermal Treatment of Tissue: Energy Delivery and Assessment II. 4954, 37(2003).</li>
<li>Duval, K. E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunogenetic+effects+of+low+dose+%28CEM43+30%29+magnetic+nanoparticle+hyperthermia+and+radiation+in+melanoma+cells%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Hyperthermia%22%5BJournal%5D)">Immunogenetic effects of low dose (CEM43 30) magnetic nanoparticle hyperthermia and radiation in melanoma cells.</a> International Journal of Hyperthermia. 36, 37-46 (2019).</li>
<li>Giustini, A. J., Petryk, A. A., Cassim, S. M., Tate, J. A., Baker, I., Hoopes, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+Nanoparticle+Hyperthermia+in+Cancer+Treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+LIFE%22%5BJournal%5D)">Magnetic Nanoparticle Hyperthermia in Cancer Treatment.</a> Nano LIFE. 01, 17-32 (2010).</li>
<li>Hoopes, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intratumoral+iron+oxide+nanoparticle+hyperthermia+and+radiation+cancer+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Thermal+Treatment+of+Tissue%3A+Energy+Delivery+and+Assessment+IV%22%5BJournal%5D)">Intratumoral iron oxide nanoparticle hyperthermia and radiation cancer treatment.</a> Thermal Treatment of Tissue: Energy Delivery and Assessment IV. 6440, (2007).</li>
<li>Semiatin, S. L., Zinn, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coil+design+and+fabrication+basic+design+and+modifications%5BTitle%5D)+AND+%22Heat+Treating%22%5BJournal%5D)">Coil design and fabrication basic design and modifications.</a> Heat Treating. , 32-41 (1988).</li>
<li>Maxwell, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+physical+lines+of+force%5BTitle%5D)+AND+%22The+London%2C+Edinburgh%2C+and+Dublin+Philosophical+Magazine+and+Journal+of+Science%22%5BJournal%5D)">On physical lines of force.</a> The London, Edinburgh, and Dublin Philosophical Magazine and Journal of Science. 21 (139), 161-175 (1861).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyleri yoktur.

Bu sistemin tasarımı ve uygulanması, in vitro ve in vivo manyetik nanopartikül hipertermi deneylerini doğru ve tekrarlanabilir bir şekilde yürütme yeteneği sağlar. Sistemin, AMF frekansı ve alan kuvvetinin manyetik nanopartikül tipine, konsantrasyonuna ve istenen doku konumuna ve sıcaklığına yeterince uyacak şekilde tasarlanması çok önemlidir. Ek olarak, sıcaklığın gerçek zamanlı olarak doğru bir şekilde izlenmesi, güvenlik ve doğru bir termal dozun hesaplanması için çok önemlidir (43 ° C / CEM'de kümülatif eşdeğer dakik...

Hipertermi tarihsel olarak kanser tedavisinde, tek başına veya diğer tedavilerle kombinasyon halinde kullanılmıştır. Uzun bir kullanım geçmişine sahip olmasına rağmen, bu tedaviyi sağlamak için en avantajlı yöntem hala tartışılmaktadır ve hastalığın bulunduğu yere ve konumuna bağlıdır. Hipertermi dağıtım yöntemleri arasında mikrodalga, radyofrekans, odaklanmış ultrason, lazer ve metalik nanopartiküller (altın veya demir oksit gibi)1,2,3,4 bulunur. Bu doğum yöntemleri, ateş seviyesinden yüzlerce derece C'ye kadar bir dizi tedavi sıcaklığına yol açabilir. Hiperterminin biyolojik etkisi öncelikle kullanılan sıcaklıklara ve tedavinin süresine bağlıdır5. Bu makale ve amaç için, manyetik nanopartikül hipertermisi (mNPH) üzerinde duruluyor. Bu yöntem, toksik olmayan, FDA onaylı, demir oksit nanopartikülleri kullanarak odaklanmış, lokalize, iyi izlenen ve kontrol edilen sıcaklık değişimlerine izin verir.
Diğer hipertermi modalitelerinin bir tuzağı, kesin hücresel hedefleme eksikliğidir; hipertermi doğası gereği yüksek bir terapötik orana sahip değildir, bu nedenle dikkatli termometri ve hedefleme gereklidir6. mNPH, mNP'lerin sistemik veya intratümöral enjeksiyonuna izin verir, ısı sadece mNP'lerin bulunduğu yerde üretilir, böylece tedaviyi doğrudan tümöre hedefler. mNPH, manyetik nanopartiküller hücrenin içine veya dışına yerleştirildiğinde etkili olabilir. Kanser tedavisi için, mNPH'ye genel bakış, manyetik nanopartiküllerin enjekte edilmesidir (intratümöral veya intravenöz olarak), daha sonra nanopartikül manyetik kutuplarının sürekli olarak yeniden hizalanmasına neden olan alternatif bir manyetik alan uygulanır ve nanopartiküllerle ilişkili hücrelerin ve dokunun lokalize bir şekilde ısınmasına neden olur 7,8 . Nanopartiküllerin hacmini ve alternatif manyetik alanın (AMF) frekansını / gücünü ayarlayarak, doku içinde üretilen sıcaklığı dikkatlice kontrol etmek mümkündür.
Bu tedavi, vücut yüzeyine yakın tümörlerde iyi çalışır, çünkü daha derin tümörler daha güçlü AMF gerektirir, bu nedenle girdap akımı ısınma riski9 artar. Hiperterminin klinik olarak monoterapi olarak kullanıldığına dair kanıtlar vardır, ancak çoğu zaman hipertermi radyasyon tedavisi veya kemoterapi ile birleştirilir ve daha hedefli bir anti-kanser etkisine yol açar10,11,12. Radyasyon tedavisi ile kombinasyon halinde çalışan hiperterminin klinik kanıtları önceki bir yayında gözden geçirilmiştir13. Laboratuvarımız mNPH yöntemi12,14,15'i kullanarak farelerden domuzlara ve spontan köpek kanserlerine kadar çeşitli hayvanları başarıyla tedavi etmiştir. Bu protokol, lokalize hipertermi tedavisinin etkilerini tek başına veya diğer tedavilerle kombinasyon halinde araştırmak isteyenler için tasarlanmıştır.
Hipertermideki en önemli faktörlerden biri, hedef / tümör dokusuna verilen termal dozu gerçek zamanlı olarak ölçebilmek ve anlayabilmektir. Dozu hesaplamanın ve karşılaştırmanın standart bir yolu, 43 ° C'de kümülatif eşdeğer ısıtma dakikalarının gösterilmesidir; Bu algoritma, dağıtım sisteminden bağımsız dozların, maksimum ve minimum sıcaklıkların (belirli bir aralıkta) ve ısıtma / soğuma parametrelerininkarşılaştırılmasına izin verir 5,16. CEM hesaplaması en iyi 39-57 °C5 arasındaki sıcaklıklar için çalışır. Örneğin, yaptığımız bazı çalışmalarda, CEM43 30'luk bir termal doz seçtik (yani, 43 ° C'de 30 dakika). Bu dozu seçmek, hem tek başına hem de tek bir radyasyon dozu17 ile kombinasyon halinde in vitro olarak güvenli, etkili, immünogenetik etkilere bakmamızı sağladı.
Manyetik nanopartikül hipertermisi ile, uygun bir dağıtım sistemi oluştururken göz önünde bulundurulması gereken birkaç faktör vardır. Enstrümantasyon tasarımı, manyetik alan dağıtım ekipmanının yüksek güçte çalıştırıldığında bile serin kalmasını sağlamak için bir soğutucunun kullanılması ve tüm sıcaklık, güç değerlendirmesi ve kontrol sistemleri etkinleştirilmediğinde sistemin açılmasını önleyen arıza emniyetli prosedürler gibi önemli güvenlik faktörlerini içerir. Ek olarak, hem in vivo hem de in vitro durumlar için dikkate alınması gereken önemli biyolojik faktörler vardır. Kültürlenmiş hücreleri kullanırken, sonuçları etkileyebilecek fizyolojik değişikliklerden kaçınmak için büyüme ortamlarında tedavi etmek ve tutarlı bir canlı sıcaklıkta tutmak gerekir. Bireysel nanopartikül tipleri için, AMF tabanlı ısıtma parametrelerini hesaplarken spesifik absorpsiyon oranını (SAR) bilmek önemlidir. Benzer şekilde, istenen ısıtmayı elde etmek için gerekli olan hücrelerdeki ve dokulardaki mNP / Fe konsantrasyonunu bilmek önemlidir. In vivo yöntemler, hayvanın tedavi sırasında anestezi altında tutulması ve hayvanın çekirdek vücut ısısının tedavi boyunca normal bir seviyede tutulması gerektiğinden, detaylara daha fazla dikkat edilmesini gerektirir. Hayvanın vücut ısısının düşmesine izin vermek, anestezi altında olduğu gibi, tedavi edilen dokunun termal dozu ile ilgili genel sonuçları etkileyebilir.
Bu yazıda, çok yönlü bir manyetik nanopartikül hipertermi sistemi tasarlamak ve inşa etmek için kullanılan yöntemlerin yanı sıra dikkate alınması gereken önemli kullanım faktörlerini tartışıyoruz. Açıklanan sistem, manyetik nanopartikül hipertermisinin sağlam, tutarlı, biyolojik olarak uygun, güvenli ve iyi kontrol edilen bir şekilde verilmesini sağlar. Son olarak, yürüttüğümüz mNPH çalışmalarının genellikle radyasyon, kemoterapi ve immünoterapi gibi diğer tedavileri içerdiği belirtilmelidir. Bu sonuçların anlamlı olması için, verilen ısının diğer modalitelerin etkinliğini ve / veya güvenlik-toksisitesini (veya tam tersi) ve hayvanın refahını nasıl etkileyebileceğini belirlemek önemlidir. Bu nedenle ve daha önce bahsedilen dozimetri ve terapötik durumlar için, manyetik nanopartikül hipertermi dozajlama doğruluğuna ve sürekli çekirdek ve hedef sıcaklık ölçümlerine çok dikkat etmek önemlidir. Bu protokolün amacı, güvenli ve etkili manyetik nanopartikül hipertermisinin verilmesi için basit, tutarlı bir yöntem ve açıklama sağlamaktır.

<table><tbody><tr><td>% .25 Tripsin</td><td>Corning</td><td>45000-664</td><td>birçok şirketten temin edilebilir</td></tr><tr><td>1.5 mL tüpler</td><td>Eppendorf</td><td>Eppendorf 22363204</td><td>birçok şirketten temin edilebilir</td></tr><tr><td>B16F10 murin melanom hücreleri</td><td>Amerikan Tipi Kültür Koleksiyonu</td><td>CRL-6475</td><td></td></tr><tr><td>C57 / Bl6 fareler</td><td>Charles nehri</td><td>027C57BL / 6</td><td>6 haftalık dişi fareler</td></tr><tr><td>Chiller</td><td>Bobini soğutan Thermal Care</td><td>NQ 5 serisi</td><td>chiller</td></tr><tr><td>Soğutma sıvısı</td><td>Dow Chemical Company</td><td>Dowtherm SR-1</td><td>anten soğutma sıvısı</td></tr><tr><td>Fetal Sığır serumu</td><td>Hyclone</td><td>SH30071</td><td>birçok şirketten temin edilebilir</td></tr><tr><td>fiber optik problar, yazılım ve şasi FISO Sıcaklıkları</td><td>okumak için kullanılan FISO</td><td></td><td></td> evrim yazılımı</tr><tr><td>IR kamera</td><td>Flir</td><td></td><td>kasıtsız ısıtmayı izlemek için kızılötesi kamera</td></tr><tr><td>demir oksit nanopartiküller</td><td>micromod Partikeltechnologie GmbH</td><td>Biyonize NanoFerrit</td><td>dekstran kaplı demir oksit nanopartiküller</td></tr><tr><td>fare bobini, solenoid</td><td>Fluxtrol</td><td>özel yapım</td><td></td></tr><tr><td>penisilin / streptomisin</td><td>Corning</td><td>45000-652</td><td>birçok şirketten temin edilebilir</td></tr><tr><td>RF jeneratörü</td><td>Huttinger</td><td>TIG 10/300</td><td>güç kaynağı</td></tr><tr><td>RPMI ortamı</td><td>Corning</td><td>45000-396</td><td>birçok şirketten temin edilebilir</td></tr></tbody></table>

Özel yapım bir dağıtım sistemi kullanarak manyetik nanopartikül hipertermisinin in vitro ve in vivo teslimatı

In Vitro and In Vivo Delivery of Magnetic Nanoparticle Hyperthermia Using a Custom-Built Delivery System

Hipertermi uzun zamandır kanser tedavisinde kullanılmaktadır. Teknikler, sıcak demir çubukların tümöral içe yerleştirilmesinden, 39 ° C (ateş seviyesi) ila 1.000 ° C (elektrokoter) arasındaki sıcaklıklarda ve saniyelerden saatlere kadar tedavi sürelerinde sistemik olarak verilen tümör antikor hedefli manyetik nanopartiküllere kadar değişmiştir. Sıcaklık-zaman ilişkisi (termal doz), doku ablasyonu ile sonuçlanan yüksek termal dozlar ve daha düşük termal dozlarla etkiyi belirler ve artan kan akışı, ilaç birikimi ve immün stimülasyon gibi subölümcül etkilere neden olur. En umut verici güncel tıbbi tedavilerden biri manyetik nanopartikül hipertermisidir (mNPH). Bu teknik, invaziv olmayan, toksik olmayan alternatif bir manyetik alanla sistemik veya intratümöral olarak verilebilen manyetik nanopartiküllerin aktive edilmesini içerir. Manyetik nanopartiküllerin boyutu, yapısı ve ilişkisi ve manyetik alanın frekansı ve alan kuvveti başlıca ısıtma belirleyicileridir. Büyük ve küçük hayvan modellerinde ve kültürlü hücrelerde tekrarlanabilir manyetik nanopartikül hipertermisi sağlamak için sofistike enstrümantasyon ve teknikler geliştirdik. Birden fazla yerde sürekli, gerçek zamanlı sıcaklık izlemeyi kullanan bu yaklaşım, hedef olmayan doku ısıtmasını sınırlarken, hedef dokuya (tümör) veya hücrelere iyi tanımlanmış termal dozların verilmesine izin verir. Birden fazla sahada sıcaklığın hassas kontrolü ve izlenmesi ve endüstri standardı algoritmanın (43 °C / CEM43'te kümülatif eşdeğer dakikalar) kullanılması, termal dozun doğru bir şekilde belirlenmesini ve miktarını sağlar. Çok çeşitli sıcaklıklara, termal dozlara ve biyolojik etkilere izin veren sistemimiz, ticari satın almalar ve kurum içi mühendislik ve biyoloji gelişmelerinin bir kombinasyonu ile geliştirilmiştir. Bu sistem, ex vivo, in vitro ve in vivo teknikler arasında hızlı dönüşüm sağlayacak şekilde optimize edilmiştir. Bu protokolün amacı, tekrarlanabilir ve doğru manyetik nanopartikül terapisi (mNP) hipertermisi sağlamak için etkili bir teknik ve sistemin nasıl tasarlanacağını, geliştirileceğini ve uygulanacağını göstermektir.

İn vitro çalışmalar Hücreler sadece manyetik nanopartiküllerin / demirin ve AMF'nin miktarı ve konsantrasyonu uygun şekilde eşleştirilirse istenen sıcaklık ve termal dozu elde eder ve korur. Hücreleri in vitro (ve in vivo) ısıtmak için manyetik nanopartiküller kullanırken, içselleştirilmiş manyetik nanopartiküllere sahip hücrelerde hipertermi elde etmek için, belirli bir hücre içi mNP / Fe seviyesinin gerekli olacağı ve mNP yüklü hücrelerin birbirine sayısı ve yakınlığının gerekli olacağı belirtilmeli...

Bu protokol, sofistike bir dağıtım ve izleme sistemi kullanarak manyetik nanopartikül hipertermisinin doğru bir şekilde verilmesi için gerekli teknikleri ve metodolojiyi sunar.

Özel Yapım Bir Dağıtım Sistemi Kullanarak Manyetik Nanopartikül Hipertermisinin In Vitro ve In Vivo Teslimatı

Hyperthermia has long been used in the treatment of cancer. Techniques have varied from the intra-tumoral insertion of hot iron rods, to systemically ...

Bu yöntem önemlidir çünkü klinik öncesi modellerde manyetik nanopartikül hipertermi tedavisi sağlamak için en sağlam ve tekrarlanabilir yolu sağlar. Bu teknik, yerel ortamı, hayvan fizyolojisini ve termal dozu doğru bir şekilde izleyerek ve kontrol ederek nanopartikül hiperterminin kesin ve tutarlı bir şekilde uygulanmasını sağlar. Bu protokolü denerken, nanopartikül ısıtmanın hedef doku ile sınırlı kalması gerektiğini unutmayın.Tekrarlanabilirliği ve güvenliği sağlamak için bol ve uygun termometri kullanmak esastır. Kaplamadan 24 saat sonra, B16 F10 murin melanom hücreleri, mililitre başına üç miligram iyonun nihai konsantrasyonuna manyetik nanopartiküller ekler. Önceden bir ortam ve manyetik nanoparçacık stok çözeltisi oluşturarak nanopartiküllerin kuyu boyunca eşit olarak dağıldığından emin olun.Nanopartikülleri ekledikten 48 saat sonra, tedavi edilen her kuyucuğa 0.5 mililitre tripsin ekleyin ve plakayı hafifçe döndürün. Hücrelerin ayrılıp ayrılmadığını kontrol etmek için bir mikroskop kullanın. Daha sonra, her bir oyuğa bir mililitre ortam ekleyin ve tüm hücreleri, her kuyucuk için açıkça etiketlenmiş ayrı bir tüp kullanarak 1,5 mililitrelik tüplere toplayın.Hücreleri peletlemek için tüpleri 60G'de iki ila üç dakika döndürün. Ardından tüpleri, bobinin içindeki suyla dolu ara parçaya yerleştirin. Ortamı ve hücre paletini 37 santigrat derecede tutmak için su banyosunun sıcaklığını ayarlayın.Tüp ve su banyosu içindeki sıcaklığı izlemek için ayrı fiber optik sıcaklık probları kurun. Soğutucuyu açın ve soğutucunun bobinden akıp akmadığını kontrol edin. Ardından güç kaynağını açın ve maksimum yüzdeyi istenen alana ayarlayın.10 kilovatlık bir jeneratörle çalışan 14 dönüşlü solenoid bobini 165 kilohertz ve metre başına 23.87 kiloamperde çalıştırın. Önceden belirlenmiş bir protokol termal dozuna ulaşılana kadar hücreleri tedavi edin. İşlemden sonra, peletlenmiş hücreleri tüplerin içindeki ortamdan yeniden süspanse edin ve bunları yeni, açıkça etiketlenmiş altı oyuklu plakalara yeniden plakalayın.Fareyi uyuşturduktan sonra, tümörü alkollü bir mendille temizleyin. Manyetik nanopartikülleri AMF tedavisinden üç saat önce tümöre enjekte edin. Üç saat sonra, fareyi tekrar uyuşturun ve doğru reflekslere yanıt verilmediğini kontrol edin.Farenin üzerindeki kulak küpesini veya diğer metal nesneleri çıkarın ve yağlanmış bir fiber optik sıcaklık probunu yavaşça rektumuna yerleştirin. Kateteri tümörün içine yerleştirin. İğneyi çıkarın.Daha sonra kateteri tümörden çok fazla çıkmayacak şekilde kesin. Sensörleri koruyacak olan katetere üç sensörlü bir fiber optik sıcaklık probu yerleştirin. Rektal ve intratümöral probu hayvanın kuyruğuna bantlayın.Fareyi, anestezinin bağlanabileceği ve verilebileceği başın yanında bir delik olması gereken 50 mililitrelik bir tüpe yerleştirin. Tüpü bobin kurulumunun içine yerleştirin ve anesteziyi yeniden bağlayın. Ortamın sıcaklığını ölçmek için tüpe gevşek bir şekilde bir fiber optik sıcaklık probu yerleştirin.Ardından soğutucuyu açın ve soğutucunun sirküle edildiğinden emin olun. Bilgisayar yazılımının çeşitli sıcaklıkları gösterdiğini doğrulayın ve gerekli CEM43 dozunun daha önce belirlenmiş olması gereken bir CEM43 hesaplamasının gerçek zamanlı olarak görüntülenmesine izin vermek için kayda başlayın. Mıknatısı düşük bir güç yüzdesinde açıntage ve fiber optik sıcaklık problarının sıcaklık değişikliklerini kaydettiğinden emin olun.Kısacası, hayvanın çekirdek sıcaklığının 38 santigrat derecede kalması ve onu şartlandırılmış hava ceketi ile düzenlemesi. Tümördeki sıcaklık seviyesini kontrol eden gücü değiştirerek manyetik alanın gücünü ayarlayın. İstenilen doza ulaşıldığında AMF'yi kapatın.Tüpü bobinden çıkarın ve fareyi tüpten çıkarın. Ardından, soğutucuyu kapatın. Probları ve kateterleri çıkarın ve gerekirse hayvanı yeni bir metal kulak küpesi ile etiketleyin.Anesteziden iyileşme sırasında fareyi izleyin, normal davranışına devam ettiğinden ve herhangi bir komplikasyon olmadığından emin olun. In vivo hipotermi için, gerçek zamanlı etkinlik ve güvenlik değerlendirmesi için stratejik bölgelere mümkün olduğunca çok sayıda fiber optik sıcaklık probu yerleştirmek çok önemlidir. Bu problar, deney boyunca sıcaklığın kaydedilmesini mümkün kılarak doğru dozimetri ve termal geçmişe izin verir.Bir in vivo deney sırasında oluşturulan eğriler burada gösterilmekte olup, sıcaklığı yakından izleme ve tümör sıcaklıklarını istenen aralıkta tutmak için sistemi ayarlama yeteneği vurgulanmaktadır. Volkan grafikleri, in vitro ve in vivo manyetik nanopartikül hipertermi tedavisini takiben diferansiyel eksprese edilen genleri göstererek, hipertermi etkilerini izlemek için moleküler tekniklerin nasıl kullanılabileceğini göstermektedir. Tedavinin tutarlı bir şekilde uygulanması için tümör sıcaklıklarının, hayvanların çekirdek sıcaklığının ve termal dozun doğru bir şekilde izlenmesi gereklidir.Hipertermiyi takiben, tedavinin etkisini ve mekanizmasını anlamak için farklı analizler yapılabilir. Ve daha büyük bir terapötik etki için diğer tedaviler uygulanabilir.

in-vitro-vivo-delivery-magnetic-nanoparticle-hyperthermia-using

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Yapışmış murin mikroglial hücrelerini çok kuyulu bir plakaya alın.Test kuyucuğuna poliakrilik asit kaplı manyetik nanopartiküller (MNP'ler) ekleyin ve kontrol olarak işlenmemiş başka bir kuyu bırakın.Endositoz yoluyla MNP alımına izin vermek için hücreleri inkübe edin ve içselleşmelerini sağlayın.Bağlanmamış MNP'leri çıkarmak için tampon ile yıkayın.Hücreleri ayırmak için bir enzim çözeltisi ekleyin.Ayrılan hücreleri tüplere aktarın ve pelet yapmak için santrifüjleyin.Süpernatanı atın, peleti...

Murin Mikroglial Hücrelerde Manyetik Hipertermiye Bağlı Hücre Hasarı

BİR MR-uyumlu özel tasarlanmış lazer tabanlı ısıtma cihazları, özellikle tümör bölgesinde termosensitif lipozomlardan maddelerin salınımını aktive etmek amacıyla deri altı tümörlerin lokal ısıtma sağlamak için geliştirilmiştir.

Manyetik Rezonans Görüntü Rehberlik ile Termosensitif Lipozomlu gelen Sisplatinin Tetikleme Release için özel tasarlanmış Lazer-bazlı ısıtma Aparatı

Bu yazıda bir PEI / MNP vektörü ve mıknatıslanarak endotel hücrelerine miR verimli, viral olmayan iletimi açıklanır. Bu nedenle, genetik modifikasyon ek olarak, bu yaklaşım, manyetik hücre rehberlik ve MR taranabilirlik sağlar. teknik terapötik hücre ürünleri özelliklerini geliştirmek için de kullanılabilir.

Hazırlık ve<em&gt; İn Vitro</em&gt; Mıknatıslanmış karakterizasyonu Endotel Hücreleri miR-modifiye

Bu el yazması, kimyasal reaksiyona girmeden sıcaklık ile indüklenen bir emülsiyonla manyetik ve termal duyarlı mikrojellerin hazırlanmasını açıklamaktadır. Bu hassas mikrogeller poli ( N- izopropilakrilamid) (PNIPAAm), polietilenimin (PEI) ve manyetik ve termal olarak tetiklenen uyuşturucu salınımında potansiyel kullanım için Fe3O4 -NH2 nanopartikülleri karıştırılarak sentezlenmiştir.

Manyetik ve Termal Duyarlı Poli (<em&gt; K</em&gt; -izopropilakrilamid) Esaslı Manyetik Tetiklemeli Kontrollü Salınım İçin Mikrojeller

Burada sunulan, manyetik hipertermi ve fototermal kombinasyon kanser tedavisi için bir nanoterapötik platformda kendi kendine montaj, sinerjik manyetik, akustik ve optik yanıt verme yoluyla demir oksit nanopartikül kabuklu mikrobubbles (NSM) imalatı için bir protokoldür.

Manyetik Hipertermi ve Pothototermal Kombinasyon Kanser Tedavisi için Manyetik, Akustik ve Optik-Üçlü Duyarlı Mikrobubbles

Burada, rabdomiyosarkom fare modelinde sıcaklığa duyarlı lipozomlardan ilaç salınımını tetiklemek için manyetik rezonans rehberliğinde yüksek yoğunluklu odaklanmış ultrason tarafından üretilen kontrollü hipertermiyi kullanmak için bir protokol sunulmaktadır.

Manyetik Rezonans Rehberliğinde Yüksek Yoğunluklu Odaklanmış Ultrason Tarafından Üretilen Hipertermi: Bir Murin Rabdomiyosarkom Modelinde Uygulanabilir Bir Tedavi Yöntemi

Kan-beyin bariyeri, tedavisi olmayan bir hastalık olan glioblastoma için tedavilerin uygulanmasında önemli bir engeldir. Burada, boyut nedeniyle bu fizyolojik bariyeri atlayabilen ve tümör içinde birikebilen in vivo görüntü kılavuzluğunda demir oksit terapötik nano bir platform sunuyoruz.

Bir Glioblastoma Multiforme Hayvan Modelinde Bir Oligonükleotid Yükünün Nanopartikül Teslimi

Bu protokol, katı tümör modellerinde hedefe yönelik hipertermik tedavi için gerekli teknikleri ve metodolojiyi sunar. Yaklaşım, tümör mikroçevresinde lokalize ısınmayı indüklemek için intratümöral olarak enjekte edilen altın nanoçubuklar tarafından yakın kızılötesi ışığın fototermal dönüşümünden yararlanır.

Yakın Kızılötesi Işığın İntratümöral Altın Nanoçubuklar Tarafından Fototermal Dönüşümü Yoluyla Murin Tümör Modellerinde Hedeflenen Hafif Hiperterminin İndüklenmesi

Bu makale, gen teslimat çalışmaları ve IVIS biyoparlaklık görüntüleme kullanarak gen ekspresyonu sonraki analiz için hasta doku dilim kültür açıklar.

Hasta Doku ve Gen Teslimat Sınav Ex Vivo Kültür

Hipertansiyon ya da miyokart enfarktüsü gibi kalp-damar hastalıkları, kemirgen modellerinde intramiyokardiyal hücre dağıtım yaygın rejeneratif çalışmalarda farklı hücre tiplerinin terapötik potansiyelini test etmek için kullanılır. Bu nedenle, ayrıntılı bir açıklama ve bu cerrahi işlemin açık bir görselleştirme küçük kemirgenler kardiyovasküler hücre tedavi analizlerin sınırlarını ve avantajlarını tanımlamak için yardımcı olacaktır.

Intramiyokardiyal Hücre Teslimat: Mürin Hearts Gözlemler

Keşfedin, manyetik nanopartikül hipertermi tedavisinin in vitro ve in vivo modellerde güvenli ve tekrarlanabilir teslimatı için özel bir dağıtım sistemi kullanmayı. Bu yöntem, hedef dokuya ısıtma sınırlama ve termometri ile doğru izleme sağlar.

Özel Yapım Bir Dağıtım Sistemi Kullanarak Manyetik Nanopartikül Hipertermisinin In Vitro ve In Vivo Teslimatı

Daha fazla video keşfet