Laboratuvar Farelerde Olgunlaşmamış Sert Kene Aşamaları Enfestasyon için Kapsül Tabanlı Model

Tekniğimiz çeşitli deneyler için uygundur ancak fare modelimiz keneleri beslemek için gereklidir ve keneleri kolay toplama ve izleme için kapalı alanda tutmak için gereklidir. Bu basit yöntemin yararı, verimlilik, kısa süreli ve bir deneyin farklı zaman noktalarında keneleri izleme veya toplama yeteneğidir. Sistemimiz kene biyolojisi, konak-vektör patojen etkileşimleri veya tıbbi açıdan önemli eklembacaklıların farklı kontrol ölçülerini incelemek için uygundur.

Bu yöntem, olgunlaşmamış kene aşamaları küçük olduğundan ve fareler üzerinde beslenmek için doğruluk ve detaylara dikkat gerektirir kapalı kapsülün birkaç gün boyunca fareye sıkıca bağlanmasını gerektirir. Birlikte iki milimetre EVA köpük, yapışkan çift yapışkan köpük yapıştırarak başlayın. Köpük parçaları bir daire kesmek için 20 milimetre çapında deri delik yumruk kullanın.

Sonra, iç kesmek için 12 milimetrelik delik yumruk kullanın. Yapışkan çift yapışkan köpük koruyucu kağıt şerit soyma ve köpük için 20 milimetre şeffaf plastik daire takın. Larvaları besliyorsanız, koruyucu kağıt şeridini yapışkan köpükten çıkarmayın ve doğrudan kapsül takarak devam edin.

Şeffaf plastik bir santimetre yarık yapmak sonra deney sırasında nem buharlaşma için en az 10 küçük delik oluşturmak için bir entomolojik pin kullanın. Fare anestezi edildikten sonra manipülasyon pedi üzerine yerleştirin ve sürekli isofluran kaynağı için bir burun konisi takın. Isofluran seviyesini ayarlayarak solunum hızının dakikada 80'den az olduğundan emin olun.

Farenin ön kısmını kürek kemiklerinin arkasından kulakların hemen arkasındaki alana kadar traş edin ve kapsül yüzeyinden daha büyük bir tıraş alanı oluşturarak tıraş edin. Kapsülün tüm EVA köpük sitesine tahriş edici olmayan lateks tutkal uygulayın ve bir dakika bekleyin. Kapsülü farenin sırtına yerleştirin ve kapsülün özellikle sol ve sağ tarafına üç dakika boyunca sabit basınç uygulayın.

Biraz görsel cilde bağlılığını kontrol etmek için kapsül kaldırın. Kapsülfirma eki özellikle kapsülün sol ve sağ tarafında parmakları ile hafif bir üç dakikalık sabit basınç uygulamak sağlamak için. Bağlı olmayan bölgeler bulunursa, bir spatula ile daha fazla tutkal uygulayın ve üç dakika daha basın.

Deneme sırasında ek olmayan bir bölge oluşursa, aynı şekilde düzeltin. Kapsüliçine tek tek perileri bir santimetre yarık ile tanıtın. Şeffaf plastiğin bükülmesine izin vermek için kapsülü iki taraftan hafifçe sıkın ve sonra perisi kapsülün içine itin.

Forcep'leri 90 derece çevirin ve dışarı çekin. Larva istilası için, bağlı kapsülden kağıt fişini çıkarın ve şırıngayı larvalarla doğrudan içine yerleştirin. Şırınga pistoniterek keneler mevduat sonra yavaşça kalan bağlı larvaları kaldırmak için cilde doğru piston açın.

Larvalar cilde birikdikten sonra şeffaf plastik daire takarak kapsülü kapatın. Koruyucu plastik bant 3,5 milimetrelik şerit kesin ve kapsül etrafında koruyucu plastik bant uygulayın sonra kafese fare dönmek. Keneler toplamak için, bir neşter ile plastik bir çapraz şeklinde kesim oluşturmak ve keneler toplamak için keteri kullanın.

Gerekirse, şeffaf plastik üzerine yapışkan plastik bir yama yapıştırarak kapsülü yeniden kapatın. birden çok zaman noktalarında kene lerin toplanması gerekiyorsa aynı plastik yama kullanılabilir. Alternatif olarak, fare ötenazi olabilir ve keneler kapsül çıkarıldıktan sonra toplanabilir veya el ile ayrılır.

Farelerin başarılı bir şekilde geri kazanımı için, bir hafta daha kafeste saklayın ve kapsüllerin doğal olarak ayrılmasına izin verin. Kapsül kapatıldıktan sonra, deride anormal reaksiyonlar olup olmadığını kontrol edin. Herhangi bir tahriş varsa herhangi bir yumuşatıcı losyon uygulayın.

Bu protokol, farenin sırtına uygulanan EVA köpük kapsüllerinde olgunlaşmamış sert kenelerin beslenmesini mümkün kılar. Hızlı kuruma ve tahriş etmeyen lateks tutkal kullanımı kapsülün üç dakika içinde sıkıca bağlı olmasını ve en az yedi gün boyunca bağlı kalmasını sağlar. İki kapsül takılması, aynı hayvanÜzerinde iki farklı kene grubu beslemeyi mümkün kılar.

Ayrıca, deneylerden sonra farelerin tamamen iyileşmesi, hayvanların yeniden kullanılmasını ve ötenaziden kaçınmasını mümkün kılar. Bu sistem Ixodes ricinus perileri beslemek için başarıyla kullanılmıştır. Orta ve yüksek engorgement başarı oranı iki farklı fare suşları elde edildi.

Her iki suşta da, tüm periler beslenmeyi dört ila beş gün içinde bitirirken, çoğunluk dördüncü günde düştü. Bu protokolü denerken, farenin cildinin yeterli alanını tıraş etmek ve deney sırasında kazara ayrılmasını önlemek için kapsülü etkili bir şekilde takmak önemlidir. Temel kene biyolojisi çalışmasının yanı sıra, bu yöntem keneden kenelere veya ev sahibine kadar patojen iletimini araştırmak için kullanılabilir.

Ayrıca, fareyi yeniden kullanma seçeneği, immünolojik çalışmalar veya farklı kene kaynaklı patojen iletimleri araştırmak için yararlı olabilecek birden fazla yeniden istila için bir olasılık sunar.