Name: Optik Koherens Tomografi Kullanılarak Kemirgen Modellerinde Oküler Hastalığın İn vivo Yapısal Değerlendirmeleri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-07-24T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 44 s
Description: Öğrenin, spektral alan optik koherens tomografi ile kemirgenlerde retinal kalınlık ve göz hastalıklarının in vivo yapısal değerlendirmesini. Bu yöntem, glokom ve diyabetik retinopati modellerinde oküler değişiklikleri izlemeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Gazi İşleri Bakanlığı Rehabilitasyon Ar-Ge Hizmeti Kariyer Geliştirme Ödülleri (CDA-1, RX002111; CDA-2; RSA'ya RX002928), MTP'ye Liyakat Ödülü (RX002615) ve Araştırma Kariyer Bilim İnsanı Ödülü (RX003134), AJF'ye Kariyer Geliştirme Ödülü (CDA-2, RX002342), MTP'ye EY028859, NEI Core Grant P30EY006360, Körlüğü Önleme Araştırması ve Körlükle Mücadele Vakfı.

Açıklanan tüm prosedürler Atlanta Veterans Affairs Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylanmış ve laboratuvar hayvanlarının bakımı ve kullanımı için Ulusal Sağlık Enstitüleri kılavuzuna uygun hale getirilmiştir (NIH Yayınları, 8. baskı, güncellenmiş 2011).
NOT: Aşağıdaki protokolü geliştirmek için kullanılan SD-OCT sistemi Malzeme Tablosunda açıklanmıştır. Bazı prosedürler bu özel sisteme özgü olsa da, genel yaklaşım diğer OCT cihazları ve hayvan modelleri için uyarlanabilir. Ayrıca, laboratuvarımızda bu protokoller farelerde ve sıçanlarda yaygın olarak kullanılmaktadır; Bununla birlikte, genel yaklaşım, bir bireyin cihazında doğru lens ve yeteneklere sahip olması koşuluyla farklı hayvan modellerine ve SD-OCT cihazlarına uyarlanabilir.
1. Optik koherens tomografi cihazını kurun
<ol><li>SD-OCT yazılımını açın (Malzeme Tablosu).</li>
	<li>OCT'yi, çalışmayı ve tedavi kolunu (eğer ilgiliyse) kimin aldığını tanımlayın. Bu kategorileri, araştırmacıların daha sonra veri analizi sırasında istenen taramaları aramalarına yardımcı olacak şekilde adlandırın.<ol><li>Hasta/Sınav sekmesinde, Test Examiner'ı tıklatın. Sınav görevlisinin adını seçin. Yeni denetçiler eklemek için Sınav Görevlileri ve Doktorları Ayarla düğmesini kullanın.</li>
		<li>Etüdü tanımlamak için Etüt Adı'nı tıklatın. Yeni bir etüt eklemek veya mevcut bir etütteki tedavileri değiştirmek için Etüt sekmesine tıklayın. Bir tedavi kolu seçmek için Tedavi Kolunu Seç'in sağına tıklayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Tüm grup için yeni bir zaman noktası eklemek üzere kullanılan Hasta Ekle düğmesini tıklatın. Pencere göründüğünde kimlik numarası, Ad ve Soyadı girin. Erkek veya Kadın'ı seçin. Doğum Tarihi'ni girin.</li>
	<li>Tek tek fareleri eklemek için Sınav Ekle düğmesini tıklatın. Sıçanları tanımlamak için bir sınava tıklayın. Edit Exam'ı (Sınavı Düzenle) tıklayın. Kimlik numarasını Notları Gir kutusuna girin . Değişiklikleri Kaydet düğmesini tıklatın.</li>
	<li>Uygun lensi cihaza takın (Şekil 1B), yazılımda ilgili Yapılandırmayı seçin ve ilişkili referans kolu konumunda çevirin. NOT: Açıklanan SD-OCT sistemi, hayvan türüne ve görüntülenen göz bölgesine (retina veya kornea, fare veya sıçan) özgü özelleştirilmiş lenslere, önceden ayarlanmış tarama desenlerine ve referans kolu ayarlarına sahiptir. Bu detaylardan bazıları açıklanan SD-OCT sistemine özgüdür (bkz. malzeme tablosu). Örneğin, tüm cihazlar referans kolu yol uzunluğunun manuel olarak ayarlanmasını sağlamaz.</li>
	<li>Hasta/Sınav sekmesinde, Görüntüleme sekmesine devam etmek ve görüntülemeye başlamak için vurgulanan sınavı çift tıklatın veya Görüntüleme sekmesini tıklatın. Varsayılan bir tarama varsa, silmek için sağ tıklayın.</li>
	<li>Listeden bir protokol seçin düğmesini tıklatarak önceden ayarlanmış bir Tarama Protokolü yükleyin. Alternatif olarak, tek tek taramalar ekleyin.</li>
	<li>Glokom ve diyabetik retinopatinin sıçan modelleri ve retinal dejenerasyonun fare modelleri için, dört görüntüden oluşan bir ön ayar seçin: 2 OD ve 2 OS taraması. Fare miyopisi için, 8 görüntüden oluşan bir ön ayar seçin: 4 OD ve 4 işletim sistemi taraması. NOT: Önceden ayarlanmış görüntüleme, Bölüm 3'te daha ayrıntılı olarak açıklanacaktır. Bu, her laboratuvarın yerinde kurulum sırasında kendileri için veya üreticiyle yaptığı bir şeydir.</li>
</ol>2. Hayvanı anestezi altına alın
<ol><li>Anestezi uygulayın.<ol><li>Sıçanları intraperitoneal enjeksiyon yoluyla ketamin (60 mg / kg) ve ksilazin (7.5 mg / kg) ile uyuşturun.</li>
		<li>İntraperitoneal enjeksiyon yoluyla fareleri ketamin (80 mg / kg) ve ksilazin (16 mg / kg) ile anestezi altına alın.</li>
		<li>Hayvanlar tamamen uyuşturulana kadar bekleyin ve ayak parmağı sıkışmasına cevap vermeyin.</li>
	</ol></li>
	<li>Öğrenci dilatasyon damlalarını uygulayın (% 1 tropikamid). Görüntülemeden önce öğrencilerin genişlemesini bekleyin. NOT: Öğrencilerin genişlemesi görüş alanını arttırır, ancak bir gereklilik değildir. Gözü uyuşturmak için lokal (kornea) anestezik damlalar (% 0.5 tetrakain), göze dokunacak bir şey varsa da kullanılmalıdır (örneğin, kontakt lens kullanıyorsanız veya bir kılavuz kullanıyorsanız). Kılavuz, tarama kafasının üzerine yerleştirilen ve yeni başlayanların gözü ve tarama kafasını hizalamasına yardımcı olan bir cihazdır.</li>
	<li>Kemirgenleri anestezi altına aldıktan sonra, kemirgeni hayvanı 3 boyutlu uzayda döndürebilen bir kemirgen hizalama sistemine yerleştirin (Şekil 1A, 1C ve 1D). Termal destek sağlayın. NOT: Şu anda, SD-OCT cihazı ile tasarlanan ve satılan fareler ve sıçanlar için kemirgen hizalama sistemleri kullanıyoruz.</li>
	<li>Gözleri yağlanmış tutmak için sıvı (örneğin, tuzlu su veya yapay gözyaşları) uygulayın. Görüntüleme sırasında gözün kurumadığından emin olun, böylece taramalar arasında gözün optik özellikleri korunur (kornea ıslandığında, retina net bir şekilde görülebilir).<ol><li>İlk gözü tararken karşı gözdeki nemi koruduğunuzdan emin olun, böylece kurumaz.</li>
	</ol></li>
	<li>Görüntülemeden hemen önce fazla salini uzaklaştırmak için hassas bir görev mendili kullanın, çünkü gözdeki çok fazla veya çok az kayganlaştırıcı görüntü kalitesini etkileyecektir. NOT: OCT sırasında steril yağlayıcı jel kullanılması önerilmez, çünkü görüntülemeye müdahale edebilir. Gerekirse, işlemden sonra steril yağlayıcı jel kullanılabilir. Test boyunca gözde yeterli nemi sağlamak için bir kontakt lens de uygulanabilir. Deneyimlerimize göre, bir kontakt lens görüntü kalitesinde belirgin bir iyileşme sağlamamıştır, ancak kontakt lensler görüntüleme seansı sırasında kornea kuruma riskini azaltmaya yardımcı olmaktadır.</li>
</ol>3. Kemirgen OCT görüntüleme
<ol><li>Bir gözle başlayın (OS veya OD) ve ardından kontralateral gözü görüntüleyin.<ol><li>Kemirgen hizalama sisteminin iki dönme hareketini kullanarak hayvanı, bakışlar yatay olacak ve OCT Lensin ekseninden aşağıya bakacak şekilde konumlandırın (Şekil 1D).</li>
		<li>Veri toplama amacıyla retinayı yönlendirmek için OCT'yi Serbest Çalışma modunda kullanın. Hem yatay hem de dikey B taramalarının gerçek zamanlı olarak sürekli görüntülenmesi için başlangıçta Nişan Alma modunu (Nişan Al düğmesine tıklayarak) kullanın.</li>
		<li>Retina görünene kadar tarama kafasını göze yaklaştırın (fare ve sıçan retina lensleri sabit odaklı olduğundan, lensi göze doğru hareket ettirmek retinanın derinliklerine odaklanır). Ardından, hayvan pozisyonunu yukarı/aşağı ayarlamak için kemirgen hizalama sistemini kullanın ve optik sinir kafasını merkeze konumlandırmak, yatay taramayı yatay yapmak ve dikey taramayı dikey yapmak için döndürmek / bükmek (Şekil 1A).</li>
		<li>Çalışma mesafesini, retinal görüntü düz olacak ve kavisli olmayacak şekilde ayarlayın.</li>
		<li>Görüntüyü ekran penceresinin üst kısmına yakın tutmak için referans kolu konumunu ayarlayın. Çok fazla zorlamamaya dikkat edin, aksi takdirde göz görüntüsü kendi kendine geri döner.</li>
	</ol></li>
	<li>Retinal görüntüleme<ol><li>Glokom, retina dejenerasyonu ve diyabetik retinopati modelleri için: Ortalama almak için 1000 x 100 x 1'den (A taramaları x B taramaları x tekrarlanan B taramaları) oluşan bir hacim taraması tanımlayın. Sıçanlarda, 3 x 3 mm boyutunda bir hacim taraması yapın. Farelerde, 1,5 x 1,5 mm hacimli bir tarama yapın.</li>
		<li>Optik siniri yatay ve dikey erişimde ortalayın, böylece hacim taraması merkezde olur. Optik sinir kafasının taramanın merkezinde ve nazal-temporal ve üst-inferior eksenler boyunca düz olduğundan emin olmak için zaman ayırın (Şekil 2). Gerekirse tam olarak merkezde olduğundan emin olmak için tarayın ve yeniden ortalayın. Optik sinir kafası ortalanana ve her iki eksen boyunca hizalanana kadar bu taramayı gerektiği gibi tekrarlayın. Fotoğraf çekmek için Anlık Görüntü düğmesini tıklatın. NOT: Bazı SD-OCT cihazları, referans kolu ile gözün ışık kaynağından uzaklığını ayarlayarak gözün eğriliğini optik olarak manipüle etme (örneğin, görüntü düzleştirilmiş) seçeneğine sahiptir. Anterior-posterior yön boyunca doğruluğu artırmak için retina katmanları boyunca doğrudan kalınlık ölçümleri alırken görüntüleri düzleştirmenizi ve ortalamanızı öneririz.</li>
		<li>Görüntüyü kaydetmek için Kaydet düğmesini tıklatın.</li>
		<li>Optik sinir kafasında ortalanmış 1000 x 4 x 20 (A-tarama x B-tarama x tekrarlanan B-taramaları) olan radyal bir tarama yapın. Veri analizi sırasında gözün bölgelerini veya retina katmanlarını yorumlamaya yardımcı olacak gözün veya retinanın görüntü netliğini artırmak için tekrarlanan B taramaları kullanın. NOT: Yine, sıçanlarda bu radyal tarama 3 mm, farelerde ise radyal tarama 1,5 mm'dir.</li>
		<li>Resmi kaydedin.</li>
		<li>Kontralateral gözde 3.1 ile 3.2.5 arasındaki adımları tekrarlayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Eksenel uzunluk ölçümleri<ol><li>Fare miyopisi gibi tüm gözün görüntülenmesini içeren projeler için, tüm gözün üç taramasını ve her göz için bir retina taraması yapın. 500 x 20 x 1 boyutunda ve gözün tam çapını kapsayan radyal taramadan oluşan bir ön ayar seçin. NOT: Bu ayar, korneadan koroide kadar fare gözünün tüm uzunluğunun bir görüntüsünü sağlar.</li>
		<li>Gözün ve retinanın ortasını görüş alanında ortalayın. Üç radyal tarama yapın (tüm göz taramaları): 1000 x 5 x 2 boyutunda doğrusal bir B taraması ve aynı konumda 1000 x 5 x 2'lik iki ek doğrusal B taraması. Görüntüleri kaydedin.</li>
		<li>Daha sonra, istenirse, yakınlaştırın ve 1000 x 20 A taramaları x B taramalarından oluşan 3.2'deki açıklamaya benzer bir hacim veya dikdörtgen tarama (retina taraması) yapın. Birim taramasını kaydedin.</li>
		<li>Kontralateral gözde 3.3 ile 3.3.3 arasındaki adımları tekrarlayın. NOT: Eksenel uzunluk ölçümleri yalnızca küçük gözlerde (fare veya daha küçük) mümkündür, çünkü mevcut sistemlerin görüntüleme penceresi daha büyük bir gözü yakalamak için yeterince büyük değildir.</li>
	</ol></li>
</ol>4. Görüntüleme sonrası adımlar
<ol><li>Kayıtlı verileri, veri yönetimi için iyi bir uygulama olan ve daha sonra analiz için kolay erişim sağlayan bir bulutta depolayın. Bir matematiksel modelleme programında (Malzeme Tablosu) geliştirilen özel bir yazılımla veri analizi yapın.</li>
	<li>Kemirgenleri kemirgen hizalama sisteminden çıkarın ve ksilazinin etkilerini tersine çevirmek için intraperitoneal bir atipamezol enjeksiyonu (sıçanlar ve fareler için 1 mg / kg) verin, böylece kemirgen daha çabuk uyanır.</li>
	<li>Kemirgenlerin düşük ateşte bir ısıtma yastığı üzerinde iyileşmesine izin verin. Gerektiğinde ek tuzlu su damlaları verin. Kemirgenleri, tam ambulasyonu geri kazandıklarında ev kafeslerine geri döndürün.</li>
	<li>Programı kapatın ve OCT'yi kapatın.</li>
</ol>5. OCT görüntülerinin sonradan işlenmesi
<ol><li>Belirli OCT ihtiyaçlarına uyacak şekilde matematiksel bir modelleme programında geliştirilen özel yazılımı kullanarak görüntüleri işleyin (örneğin; görüntüleri manuel olarak işaretleyerek ilgi alanlarının kalınlığını ölçün).</li>
	<li>Görüntünün amacına bağlı olarak (fare retinası, sıçan retinası veya miyopi/eksenel uzunluk), üç farklı programdan birini kullanın:<ol><li>Retinayı işlemek için, yüklenecek OCT taramalarını seçin. İlk olarak, optik sinir kafasının merkezini basit bir tıklama ile tanımlayın.</li>
		<li>Program, optik sinir kafasının her iki tarafındaki mesafeleri tanımlayan dikey çizgiler oluştururken izleyin. Sıçan retinasında, bu çizgilerin optik sinir başının merkezinden 0,5 mm ve 1,2 mm uzakta olduğunu, şu anda analiz edilen radyal B taramasına bağlı olarak gözün nazal-temporal ve inferior-superior eksenlerini temsil eden toplam 4 dikey çizgi olduğunu unutmayın. NOT: Fare retinasında, bu dikey çizgiler optik sinir başı merkezinden 0,25 mm ve 0,5 mm uzaklıktadır.</li>
		<li>Her satır boyunca aşağıdaki katmanları tanımlayın: Retinal sinir lifi tabakası (RNFL), iç pleksiform tabaka (IPL), iç nükleer tabaka (INL), dış pleksiform tabaka (OPL), dış nükleer tabaka (ONL), dış sınırlayıcı membran (ELM), iç segmentler/dış segmentler (IS/OS), retinal pigment epiteli (RPE) ve toplam retina kalınlığı. NOT: Radyal tarama, açıldığında tipik olarak nazal/temporal ve üst/alt etiketlere sahip değildir. Taramalar, n / t ve s / I yönüne sahip olacak şekilde oluşturulabilir ve özellikle bu taramalar daha sonra analiz edilir.</li>
		<li>Bir görüntü tanımlandıktan ve program kapatıldıktan sonra, bu ölçümleri veri analizi için bir elektronik tablo yazılımına aktarın.</li>
	</ol></li>
	<li>Gruplar arasında karşılaştırmalar yapmak için adım 5'teki bu uzunluk ve kalınlık değerlerini kullanın, örneğin bölgesel farklılıklar (n/t/s/i) veya uzunlamasına değişiklikler olup olmadığını belirleyin.</li>
	<li>Retinal ölçümler için öncelikle 0,5 mm ve 1,2 mm mesafelerde nazal-temporal ve inferior-superior eksende herhangi bir fark olup olmadığını belirleyin. NOT: Kadranlardaki farklılıklar gözlenmezse, 0,5 mm ve 1,2 mm ölçülerinin ortalaması birlikte alınabilir. Bu, yalnızca 0,25 mm ve 0,5 mm'de fare retinal taramaları için benzer bir yaklaşımdır.</li>
	<li>Miyopi çalışmaları için, gözün optik ekseni boyunca oküler parametreleri değerlendirmek için bu programı kullanın. Matematiksel modelleme programını açın. İlk olarak, yüklenecek bir görüntü seçin.<ol><li>Görüntüyü yükledikten sonra, her taramayı manuel olarak işaretleyin (radyal ve B taramaları). Korneanın ön ve arka kenarlarını, lensini, vitreus odacığını ve retinasını işaretleyin, böylece program kornea kalınlığını, lens kalınlığını, ön ve vitreus odası derinliğini, toplam retina kalınlığını, toplam eksenel uzunluğu hesaplayacaktır.</li>
		<li>İşaretledikten sonra, bir kaydet menüsü isteyen programdan çıkın. Açıklanan değerleri bir elektronik tablo yazılımına kaydedin ve üç ayrı taramanın ortalamasını birlikte alın.</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Wojtkowski, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrahigh-resolution%2C+high-speed%2C+Fourier+domain+optical+coherence+tomography+and+methods+for+dispersion+compensation%5BTitle%5D)+AND+%22Optics+Express%22%5BJournal%5D)">Ultrahigh-resolution, high-speed, Fourier domain optical coherence tomography and methods for dispersion compensation.</a> Optics Express. 12 (11), 2404-2422 (2004).</li>
<li>Nassif, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+high-resolution+video-rate+spectral-domain+optical+coherence+tomography+of+the+human+retina+and+optic+nerve%5BTitle%5D)+AND+%22Optics+Express%22%5BJournal%5D)">In vivo high-resolution video-rate spectral-domain optical coherence tomography of the human retina and optic nerve.</a> Optics Express. 12 (3), 367-376 (2004).</li>
<li>Theelen, T., Teussink, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inspection+of+the+Human+Retina+by+Optical+Coherence+Tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Inspection of the Human Retina by Optical Coherence Tomography.</a> Methods in Molecular Biology. 1715, 351-358 (2018).</li>
<li>Nakazawa, M., Hara, A., Ishiguro, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+Coherence+Tomography+of+Animal+Models+of+Retinitis+Pigmentosa%3A+From+Animal+Studies+to+Clinical+Applications%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Research+International%22%5BJournal%5D)">Optical Coherence Tomography of Animal Models of Retinitis Pigmentosa: From Animal Studies to Clinical Applications.</a> Biomed Research International. 2019, 8276140(2019).</li>
<li>Drexler, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrahigh-resolution+ophthalmic+optical+coherence+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Ultrahigh-resolution ophthalmic optical coherence tomography.</a> Nature Medicine. 7 (4), 502-507 (2001).</li>
<li>VanLeeuwen, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+AMPA+receptor+expression+with+treadmill+exercise+in+the+1-methyl-4-phenyl-1%2C2%2C3%2C6-tetrahydropyridine-lesioned+mouse+model+of+basal+ganglia+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Research%22%5BJournal%5D)">Altered AMPA receptor expression with treadmill exercise in the 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine-lesioned mouse model of basal ganglia injury.</a> Journal of Neuroscience Research. 88 (3), 650-668 (2010).</li>
<li>Tian, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performance+evaluation+of+automated+segmentation+software+on+optical+coherence+tomography+volume+data%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biophotonics%22%5BJournal%5D)">Performance evaluation of automated segmentation software on optical coherence tomography volume data.</a> Journal of Biophotonics. 9 (5), 478-489 (2016).</li>
<li>Kraus, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motion+correction+in+optical+coherence+tomography+volumes+on+a+per+A-scan+basis+using+orthogonal+scan+patterns%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedical+Optics+Express%22%5BJournal%5D)">Motion correction in optical coherence tomography volumes on a per A-scan basis using orthogonal scan patterns.</a> Biomedical Optics Express. 3 (6), 1182-1199 (2012).</li>
<li>Boatright, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tool+from+ancient+pharmacopoeia+prevents+vision+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Vision%22%5BJournal%5D)">Tool from ancient pharmacopoeia prevents vision loss.</a> Molecular Vision. 12, 1706-1714 (2006).</li>
<li>Morrison, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rat+model+of+chronic+pressure-induced+optic+nerve+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">A rat model of chronic pressure-induced optic nerve damage.</a> Experimental Eye Research. 64 (1), 85-96 (1997).</li>
<li>Feola, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Menopause+exacerbates+visual+dysfunction+in+experimental+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Menopause exacerbates visual dysfunction in experimental glaucoma.</a> Experimental Eye Research. 186, 107706(2019).</li>
<li>Goto, Y., Kakizaki, M., Masaki, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+spontaneous+diabetic+rats+by+repetition+of+selective+breeding%5BTitle%5D)+AND+%22The+Tohoku+Journal+of+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">Production of spontaneous diabetic rats by repetition of selective breeding.</a> The Tohoku Journal of Experimental Medicine. 119 (1), 85-90 (1976).</li>
<li>Allen, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+Deficits+Precede+Cognitive+and+Motor+Deficits+in+a+Rat+Model+of+Type+II+Diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmolology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Retinal Deficits Precede Cognitive and Motor Deficits in a Rat Model of Type II Diabetes.</a> Investigative Ophthalmolology & Visual Science. 60 (1), 123-133 (2019).</li>
<li>Stone, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+ocular+parameters+from+circadian+clock+gene+disruptions%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Altered ocular parameters from circadian clock gene disruptions.</a> PLoS One. 14 (6), 0217111(2019).</li>
<li>Chakraborty, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+rhythms%2C+refractive+development%2C+and+myopia%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmic+%26+Physiological+Optics%22%5BJournal%5D)">Circadian rhythms, refractive development, and myopia.</a> Ophthalmic & Physiological Optics. 38 (3), 217-245 (2018).</li>
<li>Davies, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+ganglion+cell+layer+volumetric+assessment+by+spectral-domain+optical+coherence+tomography+in+multiple+sclerosis%3A+application+of+a+high-precision+manual+estimation+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuro-ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Retinal ganglion cell layer volumetric assessment by spectral-domain optical coherence tomography in multiple sclerosis: application of a high-precision manual estimation technique.</a> Journal of Neuro-ophthalmology. 31 (3), 260-264 (2011).</li>
<li>Carnevali, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+coherence+tomography+angiography+analysis+of+retinal+vascular+plexuses+and+choriocapillaris+in+patients+with+type+1+diabetes+without+diabetic+retinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Diabetologica%22%5BJournal%5D)">Optical coherence tomography angiography analysis of retinal vascular plexuses and choriocapillaris in patients with type 1 diabetes without diabetic retinopathy.</a> Acta Diabetologica. 54 (7), 695-702 (2017).</li>
<li>Springelkamp, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Population-based+evaluation+of+retinal+nerve+fiber+layer%2C+retinal+ganglion+cell+layer%2C+and+inner+plexiform+layer+as+a+diagnostic+tool+for+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Population-based evaluation of retinal nerve fiber layer, retinal ganglion cell layer, and inner plexiform layer as a diagnostic tool for glaucoma.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 55 (12), 8428-8438 (2014).</li>
<li>Allen, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-Term+Functional+and+Structural+Consequences+of+Primary+Blast+Overpressure+to+the+Eye%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Long-Term Functional and Structural Consequences of Primary Blast Overpressure to the Eye.</a> Journal of Neurotrauma. 35 (17), 2104-2116 (2018).</li>
<li>Zhao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+changes+in+the+response+of+retinal+structure%2C+function+and+blood+flow+to+pressure+modification+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Age-related changes in the response of retinal structure, function and blood flow to pressure modification in rats.</a> Scientific Reports. 8 (1), 2947(2018).</li>
<li>Schmucker, C., Schaeffel, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+paraxial+schematic+eye+model+for+the+growing+C57BL%2F6+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Research%22%5BJournal%5D)">A paraxial schematic eye model for the growing C57BL/6 mouse.</a> Vision Research. 44 (16), 1857-1867 (2004).</li>
<li>Aung, M. H., Kim, M. K., Olson, D. E., Thule, P. M., Pardue, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+visual+deficits+in+streptozotocin-induced+diabetic+long+evans+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Early visual deficits in streptozotocin-induced diabetic long evans rats.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 54 (2), 1370-1377 (2013).</li>
<li>Puzyeyeva, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-Resolution+Optical+Coherence+Tomography+Retinal+Imaging%3A+A+Case+Series+Illustrating+Potential+and+Limitations%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">High-Resolution Optical Coherence Tomography Retinal Imaging: A Case Series Illustrating Potential and Limitations.</a> Journal of Ophthalmology. 2011, 764183(2011).</li>
<li>Liu, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topography+and+pachymetry+maps+for+mouse+corneas+using+optical+coherence+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Topography and pachymetry maps for mouse corneas using optical coherence tomography.</a> Experimental Eye Research. 190, 107868(2020).</li>
<li>Mohan, K., Kecova, H., Hernandez-Merino, E., Kardon, R. H., Harper, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+ganglion+cell+damage+in+an+experimental+rodent+model+of+blast-mediated+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Retinal ganglion cell damage in an experimental rodent model of blast-mediated traumatic brain injury.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 54 (5), 3440-3450 (2013).</li>
<li>Harper, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blast-Mediated+Traumatic+Brain+Injury+Exacerbates+Retinal+Damage+and+Amyloidosis+in+the+APPswePSENd19e+Mouse+Model+of+Alzheimer%27s+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Blast-Mediated Traumatic Brain Injury Exacerbates Retinal Damage and Amyloidosis in the APPswePSENd19e Mouse Model of Alzheimer's Disease.</a> Investigative Ophthalmology Visual Science. 60 (7), 2716-2725 (2019).</li>
<li>Zhang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+image+processing+for+optical+coherence+tomographic+angiography+of+macular+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedical+Optics+Express%22%5BJournal%5D)">Advanced image processing for optical coherence tomographic angiography of macular diseases.</a> Biomedical Optics Express. 6 (12), 4661-4675 (2015).</li>
<li>Muhlfriedel, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimized+Subretinal+Injection+Technique+for+Gene+Therapy+Approaches%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Optimized Subretinal Injection Technique for Gene Therapy Approaches.</a> Methods in Molecular Biology. 1834, 405-412 (2019).</li>
<li>Adekunle, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integration+of+Perforated+Subretinal+Prostheses+With+Retinal+Tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Vision+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">Integration of Perforated Subretinal Prostheses With Retinal Tissue.</a> Translational Vision Science & Technology. 4 (4), 5(2015).</li>
<li>Sajdak, B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+imaging+of+the+tree+shrew+eye%3A+Wavefront+analysis+and+retinal+imaging+with+correlative+histology%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Noninvasive imaging of the tree shrew eye: Wavefront analysis and retinal imaging with correlative histology.</a> Experimental Eye Research. 185, 107683(2019).</li>
<li>Dominik Fischer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detailed+functional+and+structural+characterization+of+a+macular+lesion+in+a+rhesus+macaque%5BTitle%5D)+AND+%22Documenta+Ophthalmologica%22%5BJournal%5D)">Detailed functional and structural characterization of a macular lesion in a rhesus macaque.</a> Documenta Ophthalmologica. 125 (3), 179-194 (2012).</li>
<li>Hagag, A. M., Gao, S. S., Jia, Y., Huang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+coherence+tomography+angiography%3A+Technical+principles+and+clinical+applications+in+ophthalmology%5BTitle%5D)+AND+%22Taiwan+Journal+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Optical coherence tomography angiography: Technical principles and clinical applications in ophthalmology.</a> Taiwan Journal of Ophthalmology. 7 (3), 115-129 (2017).</li>
<li>Treister, A. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+Subclinical+CNV+and+Choriocapillaris+Nonperfusion+in+Fellow+Eyes+of+Unilateral+Exudative+AMD+on+OCT+Angiography%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Vision+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">Prevalence of Subclinical CNV and Choriocapillaris Nonperfusion in Fellow Eyes of Unilateral Exudative AMD on OCT Angiography.</a> Translational Vision Science & Technology. 7 (5), 19(2018).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyleri yoktur.

Oküler yapıların in vivo yüksek çözünürlüklü görüntülenmesi, zaman içinde retina ve oküler değişikliklerin değerlendirilmesine olanak sağlar. Bu protokolde SD-OCT'nin retinal dejenerasyon, glokom, diyabetik retinopati ve miyopi modellerinde in vivo oküler yapılardaki farklılıkları yakaladığı gösterilmiştir.
SD-OCT yaparken en kritik husus, retinanın veya ilgilenilen diğer oküler yapının net bir görüntüsünü elde etmektir. Retinanın mükemmel bir şekilde ortalandığından ve mükemmel netliğe sahip ...

Spektral-alan optik koherens tomografi (SD-OCT), klinisyenlerin ve araştırmacıların oküler yapıları noninvaziv olarak incelemelerini sağlayan hassas, yüksek çözünürlüklü bir görüntüleme yöntemidir. Bu görüntüleme tekniği, mikrometre ölçeğinde 1,2 inç vivo üç boyutlu retinal görüntüler yakalamak için interferometriye dayanmaktadır. Yapısal defektler ve/veya retina tabakaları ve subretinal sıvının incelmesi gibi patolojik özelliklerin kolay saptanması ve doğruluğu nedeniyle görme araştırmalarında ve klinikte en sık kullanılan görüntüleme yöntemlerinden biri haline gelmiştir3. SD-OCT, görme ile ilişkili bozuklukların hayvan modellerini kullanan araştırmalarda, yapı ve fonksiyon arasındaki ilişkilerin ve histopatolojik kökenlerinin temel noninvaziv analizlerini sağlamıştır4. SD-OCT, çözünürlüğü nedeniyle (gözün derinliğine bağlı olarak 2-3 mikrona kadar5), retina tabakası kalınlığındaki küçük değişiklikleri bile tespit etme yeteneğine sahiptir. Bu tür bir analiz, hastalığın ilerlemesi için gerekli bilgileri sağlayabilir ve görme ile ilgili bozukluklar için nöroprotektif yöntemlerin ve tedavilerin etkinliğini değerlendirebilir.
SD-OCT, yapının histolojik olarak incelenmesine noninvaziv bir alternatiftir ve ikisinin korelasyon gösterdiği gösterilmiştir6. SD-OCT hücresel çözünürlüğe ulaşmazken, hayvanlarda uzunlamasına çalışmalara izin verir. Bu avantajlıdır, çünkü belirli zaman noktalarında hayvanları ötenazi yapmak zorunda kalmanın aksine, zaman içinde bireysel hayvanlarda hastalık ilerlemesi izlenebilir. Görüntüleme teknikleri gelişmeye devam ettikçe, SD-OCT teknolojisi de ilerleyecek ve gelişmiş görüntü kalitesinin yanı sıra retinal kan damarı fonksiyonu gibi biyolojik süreçleri ince ayrıntılarla değerlendirme yeteneği sağlayacaktır. SD-OCT teknolojisi, 1991 yılında ortaya çıkışından bu yana bile çözünürlük, hız ve hassasiyette büyük ilerlemelerkaydetmiştir 7.
Bu çalışmada, retinal dejenerasyon, glokom ve diyabetik retinopatinin kemirgen modellerinde retina tabakalarındaki değişiklikleri ölçmek için bir SD-OCT sistemi kullanılmaktadır. Burada kullanılan SD-OCT sistemi, derinliği çözümlenmiş görüntüleri gerçek zamanlı olarak elde etmek, işlemek ve depolamak için düşük güçlü, yakın kızılötesi ışık kullanan bir Fourier etki alanı OCT sistemidir. SD-OCT sistemi, 800 nm dalga boyu bandında genişletilmiş derinlik görüntüleme kapasitesine sahiptir ve 8 mm derinlik ve 4 μm çözünürlük sağlar. Fourier etki alanı tespitinde, dokudan gelen dağınık ışık ile bir referans yolu arasındaki girişim sinyali, Fourier'in eksenel taramalar ve/veya dağınık yoğunlukta eksenel derinlik profilleri oluşturmak üzere dönüştürülmesi8. Buradaki çalışmalar için OCT ışını istenilen retinal yapı üzerinden taranırken, seri olarak eksenel taramalar elde edilir. Tipik olarak, bir tarama deseni, iki boyutlu ızgarayı (B-Taramalar), bir raster tarama deseni kullanarak 2B kesitsel görüntülere karşılık gelen doğrusal tek boyutlu tarama çizgilerinin (A-Taramalar) bir koleksiyonu olarak alır. Farelerde miyopiye odaklanan çalışmalar için, bu sistem aynı zamanda oküler yapıların boyutlarını ölçmek için de kullanılır (örneğin, kornea kalınlığı, lens kalınlığı, vitreus odası derinliği ve eksenel uzunluk).
Mevcut sistem, kullanıcıların kendi protokollerini tasarlamalarına, ilgilendikleri oküler yapılara göre uyarlanabilen ve seçilebilen taramalar oluşturmalarına olanak tanır. Bu kullanıcı tanımlı protokollerde yer alan temel taramalar, bu görüntüleme tekniğini kullanıcı dostu hale getirir. Görüntü analizleri için, matematiksel modelleme programında özelleştirilmiş programlama geliştirdik. SD-OCT, oküler yapılardaki patomorfolojik değişiklikleri non-invaziv olarak tanımlamak ve ölçmek ve görme ile ilişkili hastalık progresyonunu izlemek için güçlü bir araçtır.

<table><tbody><tr><td>% 1 tropikamid</td><td>Sandoz</td><td>Sandoz #6131403550; NDC- 24208-585-59</td><td></td></tr><tr><td>%0.5 tetrakain</td><td>Alcon</td><td>NDC 0065-0741-12</td><td></td></tr><tr><td>AIM-RAS G3 120 V</td><td>Leica Bioptigen</td><td>90-AIMRAS-G3-120</td><td>Fareler için OCT Tarayıcı Kafasını tutmak için özel platform</td></tr><tr><td>Celluvisc jel</td><td>REFRESH CELLUVISC</td> <td># 4554; NDC-0023-4554-30</td><td></td></tr><tr><td>G3 18 mm Telesentrik Lens</td><td>Leica Bioptigen</td><td>90-BORE-G3-18</td><td></td></tr><tr><td>G3 Fare Lensi</td><td>Leica Bioptigen</td><td>90-BORE-G3-M</td><td></td></tr><tr><td>G3 Sıçan Lensi</td><td>Leica Bioptigen</td><td>90-BORE-G3-R</td><td></td></tr><tr><td>ısıtma yastığı</td><td>İmalatı</td><td>11-1130</td><td></td></tr><tr><td>InVivoVue yazılımı</td><td>Leica Bioptigen</td><td></td><td>Leica Bioptigen SD-OCT sistemi ile eşleşen özel yazılım</td></tr><tr><td>MATLAB</td><td>Mathworks</td><td></td><td>matematiksel modelleme programı</td></tr><tr><td>Fare/Sıçan Kiti</td><td>Leica Bioptigen</td><td>90-KIT-M/R</td><td>Fare/sıçan kemirgen hizalama sistemi</td></tr><tr><td>salin</td><td>ADDIPAK</td><td>200-39</td><td></td></tr><tr><td>sistemi Envisu R4300 VHR 120 V</td><td>Leica Bioptigen</td><td>90-R4300-V1-120</td><td>SD-OCT sistemi</td></tr></tbody></table>

optik koherens tomografi kullanılarak kemirgen modellerinde oküler hastalığın İn vivo yapısal değerlendirmeleri

In vivo Structural Assessments of Ocular Disease in Rodent Models using Optical Coherence Tomography

Spektral-alan optik koherens tomografi (SD-OCT), retinal ve oküler yapıları in vivo olarak görselleştirmek için yararlıdır. Araştırmada, SD-OCT, çeşitli retinal ve oküler hastalık ve yaralanma modellerindeki değişiklikleri değerlendirmek ve karakterize etmek için değerli bir araçtır. Işık kaynaklı retinal dejenerasyon modellerinde, SD-OCT, fotoreseptör tabakasının zamanla incelmesini izlemek için kullanılabilir. Glokom modellerinde SD-OCT, azalmış retina sinir lifi tabakasını ve toplam retina kalınlığını izlemek ve oküler hipertansiyonu indükledikten sonra optik sinir kapanmasını gözlemlemek için kullanılabilir. Diyabetik kemirgenlerde, SD-OCT, araştırmacıların toplam retina kalınlığının azalmasının yanı sıra spesifik retina tabakalarının, özellikle de hastalık progresyonu ile retinal sinir lifi tabakasının kalınlığının azaldığını gözlemlemelerine yardımcı olmuştur. Miyopinin fare modellerinde, SD-OCT, eksenel uzunluk değişiklikleri gibi eksenel parametreleri değerlendirmek için kullanılabilir. SD-OCT'nin avantajları arasında oküler yapıların in vivo görüntülenmesi, zaman içinde oküler boyutlardaki değişiklikleri kantitatif olarak izleme yeteneği ve hızlı tarama hızı ve yüksek çözünürlüğü sayılabilir. Burada, SD-OCT yöntemlerini detaylandırdık ve retinal dejenerasyon, glokom, diyabetik retinopati ve miyopi modellerinde laboratuvarımızda kullanım örneklerini gösterdik. Yöntemler anestezi, SD-OCT görüntüleme ve kalınlık ölçümleri için görüntülerin işlenmesini içerir.

SD-OCT, oküler boyutların güvenilir bir şekilde ölçülebileceği şekilde yüksek kaliteli görüntüler elde edilirse başarılı kabul edilir. Burada, SD-OCT'nin çeşitli kullanımları retinal dejenerasyon, glokom, diyabetik retinopati ve miyopi modelleri kullanılarak gösterilmiştir.
Işığa bağlı retinal dejenerasyon (LIRD) modelinde, parlak ışığa (10.000 lüks) maruz kalmak, retinadaki fotoreseptör hücrelerin dejenerasyonunu indükler9. Temsili SD-OCT görüntüleri, LIRD BALB / c far...

Burada, retinal dejenerasyon, glokom, diyabetik retinopati ve miyopi modellerinde retinal ve oküler yapıları in vivo olarak görselleştirmek için spektral-alan optik koherens tomografinin (SD-OCT) kullanımını açıklamaktayız.

Optik Koherens Tomografi Kullanılarak Kemirgen Modellerinde Oküler Hastalığın İn vivo Yapısal Değerlendirmeleri

Spectral-domain optical coherence tomography (SD-OCT) is useful for visualizing retinal and ocular structures in vivo. In research, SD-OCT is a valuable ...

Spektral alan optik koherens tomografi, oküler yapıların in vivo olarak görüntülenmesi ve çeşitli göz hastalığı modellerinde zaman içinde oküler boyutlardaki değişikliklerin izlenmesi için değerli bir araçtır. Diyabetik retinopatide retina dejenerasyonu modellerinde retina kalınlığını, glokom modelinde retina kalınlığı ve çukurluğunu, miyopi modelinde ise aksiyel uzunluğu ölçmek için SDOCT kullanıyoruz. SDOCT tekniği basittir, ancak iyi görüntüler elde etmek için pratik yapmak çok önemlidir.Ve farklı protokollerle denemeler yapmak, hangi protokolün her bir araştırma ihtiyacına en uygun olduğunu belirlemek için önemlidir. Prosedürü göstermek, Görsel ve Nörobilişsel Rehabilitasyon Merkezi'nden baş araştırmacı Andrew Feola olacak. Spektral alan optik koherens tomografi yazılımını açarak ve edinim çalışması ve tedavi kolu bilgilerini girerek başlayın.Hasta Muayenesi sekmesi altında, test denetçisine tıklayın ve sınav görevlisinin adını seçin. Etüdü tanımlamak için Etüt Adı'na tıklayın ve yeni bir etüt eklemek veya mevcut bir etütteki tedavileri değiştirmek için Etüt sekmesini açın. Bir tedavi kolu seçmek için Tedavi Kolu Seç'in sağına tıklayın.Tüm grup için yeni bir zaman noktası eklemek üzere Hasta Ekle'yi tıklatın. Pencerede kimlik numarasını, adı ve soyadı girin. Hastanın cinsiyetini ve doğum tarihini seçin.Fareleri tek tek eklemek için Sınav Ekle'ye tıklayın. Fareleri tanımlamak için bir sınava tıklayın ve Sınavı Düzenle'ye tıklayın. Kimlik numarasını Not Gir kutusuna girin ve Değişiklikleri Kaydet'e tıklayın.Ardından, uygun lensi cihaza takın. Yazılımda ilgili konfigürasyonu seçin ve ilgili referans kolu konumunu çevirin. Hasta Muayenesi sekmesi altında, Görüntüleme sekmesine ilerlemek ve görüntülemeye başlamak için vurgulanan muayeneye çift tıklayın.Önceden ayarlanmış bir tarama protokolü yüklemek için, listeden bir protokol seç'i tıklatın. Glokom ve diyabetik retinopatinin sıçan modelleri için, sağ ve sol göz taramaları için sırasıyla iki OD ve iki işletim sisteminden oluşan bir ön ayar seçin. Anestezi uygulanmış fareyi bir kemirgen hizalama sistemine yerleştirdikten sonra, hayvanın gözlerine kayganlaştırıcı sürün.Görüntülemeden hemen önce, fazla salini uzaklaştırmak için hassas bir görev mendili kullanın ve fareyi bakış yatay olacak şekilde konumlandırmak ve optik koherens tomografi merceğinin eksenine bakmak için kemirgen hizalama sisteminin iki dönme hareketini kullanın. Veri toplama için retinayı yönlendirmek için Serbest Çalışma modunu kullanın. Ardından, hem yatay hem de dikey B taramalarının gerçek zamanlı olarak sürekli görüntülenmesi için Aim modunu kullanın.Retina görünene kadar tarama kafasını göze yaklaştırın ve optik sinir başı merkezde görünene kadar hayvan konumunu ayarlamak için kemirgen hizalama sistemini kullanın. Yatay taramayı yatay ve dikey taramayı dikey yapın. Çalışma mesafesini, retina görüntüsü düz ve kavisli olmayacak şekilde ayarlayın ve görüntüyü ekran penceresinin üst kısmına yakın tutmak için referans kolu konumunu ayarlayın.Glokom, retina dejenerasyonu ve diyabetik retinopati modellerinin retinal görüntülemesi için, ortalama almak için 1.000 A tarama ile 100 B taraması ile 1 tekrarlanan B taramasından oluşan üç ila üç milimetre hacimli bir tarama tanımlayın. Optik siniri yatay ve dikey eksende ortalayın, böylece hacim taraması merkezde nazal, geçici ve üst, alt eksenler boyunca düz bir şekilde olur. Fotoğraf çekmek için Anlık Görüntü'ye tıklayın ve görüntüyü kaydetmek için Kaydet'e tıklayın.Optik sinir başında merkezlenmiş bir radyal tarama elde edin, bu da 1.000 A tarama, 4 B taraması ile 20 tekrarlanan B taraması ile taranır. Ayrıca, veri analizi sırasında göz bölgelerinin veya retina katmanlarının yorumlanmasını kolaylaştırmak için gözün veya retinanın görüntü netliğini artırmak için tekrarlanan B taramalarını kullanın. Ardından görüntüyü kaydedin ve karşı göz taramasını tekrarlayın.Görüntülerin sonradan işlenmesi için uygun matematiksel modelleme yazılım programını açın. Retinayı işlemek için, yüklenecek optik koherens tomografi taramalarını seçin ve optik sinir başının merkezini tanımlamak için tıklayın. Program, optik sinir başının her iki tarafındaki mesafeleri tanımlayan dikey çizgiler oluşturacaktır.Sıçan retinasında, bu çizgiler optik sinir başının merkezinden 0.5 ve 1.2 milimetre uzaklıktadır ve şu anda analiz edilen radyal B taramasına bağlı olarak gözün burun, temporal ve aşağı, üst eksenlerini temsil eden toplam dört dikey çizgi vardır. Her çizgi boyunca, retina sinir lifi tabakasını, iç pleksiform tabakayı, iç nükleer tabakayı, dış pleksiform tabakayı, dış nükleer tabakayı, dış sınırlayıcı membranı, iç ve dış segmentleri, retina pigment epitelini ve toplam retina kalınlığını tanımlayın. Tüm katmanlar tanımlandığında, veri analizi için ölçümleri bir elektronik tabloya aktarın.Temsili spektral alan optik koherens tomografi görüntüleri, hasarsız kontrol farelerine kıyasla ışığa bağlı retina dejenerasyonu BALB/c farelerinden retinalarda fotoreseptör hücre gövdelerini içeren daha ince bir dış nükleer tabakayı ortaya çıkarır. Retina tabakası kalınlığı ölçüldükten sonra, toplam retina kalınlığı, dış nükleer tabaka kalınlığı ve iç ve dış segment kalınlığı için hasarsız ve ışığa bağlı retina dejenerasyonu fareleri arasında önemli bir fark gözlenir. Oküler hipertansiyon modelinde, sekiz hafta sonra optik sinir çukurluğu da dahil olmak üzere optik sinir başında belirgin bir yeniden şekillenme gözlenir.Sekiz haftalık oküler hipertansiyondan sonra retina sinir lifi tabakası kalınlığının ölçülmesi, temel ölçümlere kıyasla önemli bir incelme olduğunu ortaya koymaktadır. Diyabetik sıçan modelinden ve Wistar kontrol hayvanlarından retinaların görüntülenmesi, altı haftalıkken, periferik retinadaki Wistar sıçanlarına kıyasla diyabetik sıçanlarda retina sinir lifi tabakasının ve toplam retina kalınlığının azaldığını ve en büyük farklılıkların retinanın alt ve temporal kadranlarında gözlendiğini ortaya koymaktadır. Miyopi olan bir fare modelinde gözün eksenel uzunluğu, 84 günlükken vahşi tip gözlerde gözlenenden gözle görülür şekilde daha uzundur.Bu miyop göz verileri, saat geni olmayan bir fareden alınmıştır ve bu da saat genlerinin miyopi gelişimine katkıda bulunduğunu düşündürmektedir. SDOCT ile oküler yapıların ölçümü, birçok göz hastalığı modelinde zaman içindeki ince değişiklikleri tespit etmek için elektroretinogram ve optomotor yanıt gibi diğer testlerle birlikte kullanılabilir.

in-vivo-structural-assessments-ocular-disease-rodent-models-using

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biyomühendislik

Bu video, bir fare enfeksiyöz üveit fare modelinde göz iltihabını tespit etmek ve ölçmek için in vivo bir görüntüleme tekniğini göstermektedir. Optik koherens tomografi (OCT) olarak bilinen teknik, hastalığın ilerlemesini değerlendirmek için gözün yüksek çözünürlüklü kesitsel görüntülerini üretir.

Bir Fare Modelinde Üveiti Değerlendirmek için Optik Koherens Tomografi Görüntüleme

Source: Jagodzinska, J., et. al., Optik Koherens Tomografi: Fare Retinal Ganglion Hücrelerini Görüntüleme In Vivo. J. Vis. Exp. (2017)  Bu videoda, optik nöropatili genetik olarak değiştirilmiş bir fare modelinde retina katmanlarını görüntülemek ve yapısal değişiklikleri değerlendirmek için spektral alan optik koherens tomografinin (SD-OCT) kullanımını gösteriyoruz.

Optik Koherens Tomografi Kullanılarak Fare Retinasının İn Vivo Görüntülenmesi

Bu el yazması ile yüksek çözünürlüklü spektral etki alanı optik Koherens tomografi (SD-Ekim) fare retinanın vivo içinde görüntüleme için bir protokol açıklar. Retina ganglion hücrelerinin (RGC) peripapillary bölgede çeşitli tarama ve açıklanan yaklaşımlar miktarının üzerinde duruluyor.

Optik Koherens tomografi: Fare retina Ganglion hücreleri Vivo içinde görüntüleme

Bu protokolü nasıl yüksek çözünürlüklü spektral etki alanı optik Koherens tomografi gibi görüntüleme teknikleri açıklar ve lazer ophthalmoscopy tarama bir oftalmik görüntüleme platformu üzerinde bilgi edinme sistemiyle küçük Rodents yararlı olabilir dağıtım, hücre sırasıyla retina kalınlığı ve mikroglial.

Vivo Tayf alanlı optik Koherens tomografi ve lazer Ophthalmoscopy tarama Cx3cr1gfp/gfp muhabir farelerin görüntüleme

Yapısal ve görsel dökümanları Rodents optik koherens tomografi ve optokinetic yanıt tarafından değerlendirilmesi için detaylı bir protokol sunulmuştur. Sonuçları Oftalmolojik gibi nörolojik araştırma için değerli bilgiler sağlar.

Optik koherens tomografi ve Optokinetic yanıt yapısal ve işlevsel görsel sistemin çıktıları fareler ve sıçanlar olarak kullanma

Burada, gül bengal kullanarak retinal ven tıkanıklığı için optimize edilmiş bir protokol ve genetiği değiştirilmiş suşlarda tekrarlanabilirliğini en üst düzeye çıkarmak için önerilerle lazer rehberliğinde retinal görüntüleme mikroskop sistemi açıklanmaktadır.

Değişkenliği Sınırlamak için Retinal Ven Tıkanıklığı Fare Modelinin Optimizasyonu

Burada, farelerde retinopatinin tanısını ve kantitatif ölçümünü kolaylaştırmak için optik koherens tomografi kullanan bir in vivo görüntüleme tekniğini tanımladık.

Optik Koherens Tomografinin Retinopatinin Bir Fare Modeline Uygulanması

Mevcut protokol, in vivo görüntülerde gözlenen retinal ganglion hücre akson demeti morfolojisini doğrulamak amacıyla in vivo görünür ışık optik koherens tomografi fibergrafi (vis-OCTF) görüntülerini aynı fare retinasının ex vivo konfokal görüntüleriyle hizalama adımlarını özetlemektedir.

Görünür Işık Optik Koherens Tomografi Fibergramlarının Aynı Fare Retinasının Konfokal Görüntüleri ile Hizalanması

Optik çözünürlüklü foto akustik mikroskobu (OR-PAM), görüntüleme optik soğurma yeteneğine sahip gelişmekte olan bir teknoloji...

Üç boyutlu optik çözünürlük foto akustik Mikroskopi

Bu makale, panoramik görüntüleme sistemi kullanılarak Langendorff perfüze tavşan kalbinde, optik haritalama deneylerini için temel prosedürleri ve ikili (voltaj ve kalsiyum) görüntüleme yöntemidir.

Çok parametreli Langendorff perfüze Tavşan Kalp Optik Haritalama

Öğrenin, spektral alan optik koherens tomografi ile kemirgenlerde retinal kalınlık ve göz hastalıklarının in vivo yapısal değerlendirmesini. Bu yöntem, glokom ve diyabetik retinopati modellerinde oküler değişiklikleri izlemeye yardımcı olur.

Optik Koherens Tomografi Kullanılarak Kemirgen Modellerinde Oküler Hastalığın İn vivo Yapısal Değerlendirmeleri

Daha fazla video keşfet