Name: Mekanik Değerlendirme için İnsan Musculus Tibialis Anterior Üstün Bölmesi İskelet Kas Biyopsileri Toplama (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-09-27T14:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 18 s
Description: Öğrenin, modifiye Bergström tekniğiyle insan tibialis anterior kasından biyopsi almayı. Bu yöntem lif hasarını sınırlayarak mekanik değerlendirme için daha uzun ve sağlıklı kas lifleri elde edilmesini sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Michaela Rau, Lea-Fedia Rissmann, Michael Marsh, Janina-Sophie Tennler, Kilian Kimmeskamp ve Wolfgang Linke'e projeye yardımcı olduklarından dolayı teşekkür ederiz. Bu projenin finansmanı MERCUR Vakfı (ID: An-2016-0050) tarafından DH'ye sağlanmıştır.

NOT: Aşağıda, devam eden ayrı bir çalışmaya kaydolan gönüllülerin TA mekanik olarak hasarsız liflerin hasat için bir protokol anahat. Bu protokol, vastus lateralis'te modifiye edilmiş Bergström tekniğini tanımlayan Shanely ve ark.3tarafından tanımlanan protokole benzer. Burada sunulan bilgiler araştırma grubumuz tarafından geliştirildi, ancak tüm laboratuvar grupları veya organizasyonel kurulumlar için ideal olmayabilir. Sadece yönergeler veriyoruz ve biyopsi toplamaya yeni gelen laboratuvarların herhangi bir insan deneyi denemeden önce deneyimli laboratuvar gruplarına danışmalarını öneriyoruz.
Bu yazıda yapılan tüm çalışmalar Ruhr Üniversitesi Bochum Spor Bilimleri Fakültesi Etik Komitesi tarafından onaylanmıştır. Katılımcılar çalışmaya katılmadan önce ücretsiz yazılı bilgilendirilmiş onay verdiler.
1. Deneysel hazırlık
<ol><li>Katılımcı konsültasyonu sırasında katılımcının ayrıntılı tıbbi geçmişini alırken dışlama kriterlerini değerlendirin (aşağıya bakın).<ol>
<li>Biyopsiye kadar geçen 6 hafta boyunca hedef kasta bir sakatlık geçiren katılımcıları hariç tinler. Katılımcıların genellikle sağlıklı olduğundan, kas veya pıhtılaşma bozukluğu olmadığını ve şu anda kan incelmesine (örneğin aspirin) neden olan ilaçlardan haberdar olmalarını sağlayın. NOT: Burada orta derecede aktif olan ve biyopsiden en az 3 gün önce yoğun veya alışık olmayan bacak egzersizlerinden kaçınmaları talimatı nı veren katılımcıları seçtik. Ancak, diğer araştırma soruları için, bu kriterler değişebilir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Alman yasaları ve yaygın uygulama tarafından düzenlenen ve takım hekimi tarafından denetlenen22,23,sterilizasyon ve aseptik teknikler, uymak . Bu işlem genellikle bir "başucu" prosedürü olarak veya ayakta tedavi cerrahi paketi yapılabilir. Rehberlik için yerel düzenleyici kuruma danışın.</li>
	<li>Biyopsi ekibini oluşturun. Biyopsi ekibinde 4 kişiden oluşan bir biyopsi çalışması öneriyoruz. Bir hekim (veya biyopsi toplama eğitimli birey), hekim ile çalışan bir tıbbi asistan, izleyen ve katılımcı ile etkileşim bir asistan, ve ekstraksiyon hemen sonra kas biyopsisi kolları bir asistan. Bu sayılarla, işlem sırasında tıbbi bir acil durum oluşursa hızlı hasta bakımı uygulanabilir. Prosedür ile rahat ise, o zaman takım sadece iki kişiden yapılmış olabilir: hekim ve tıbbi asistan, birlikte hasta bakımı ve doku işleme aynı anda alacak.</li>
	<li>Katılımcının kullanıcı onay formunu gözden geçirmek, tartışmak ve imzalamak için proje lideri/hekimle görüşmesini sağlamak. Ayrıntılı bir tıbbi geçmişi (alerji, yaralanma veya alt ekstremite ve TA ameliyatları) alın ve herhangi bir dışlama kriterlerini karşılıyorsa katılımcıhariç. İyileşme ve kesi hijyenini iyice tartışın.<ol>
<li>Katılımcıya, ameliyattan hemen sonra yanacaklarını ancak yürüyebileceklerini açıklayın; yamaçlarda veya merdivenlerden aşağı yürümek genellikle ilk 48 saat boyunca rahatsız edicidir ve genellikle 72 saat sonra tam aktivite geri döner. Son olarak, enfeksiyon ve mekanik aşınmaları sınırlamak için, kesi bölgesinin en az 1 hafta bandajlı kalması ve temiz tutulması gerektiğini açıklayın.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. B-mode Ultrason ile Anterior Tibialis Görselleştirin
<ol><li>Katılımcıya rahat bir supine pozisyonunda uzanmasını ve bacak kaslarını mümkün olduğunca gevşetmesini öğretin. Özel yapım bir cihaz kullanın (aşağıya bakın) veya asistanın biyopsi sırasında yapılacak ları taklit etmek için ayak bileğini hafif çesitli bir pozisyonda tutmasını bekleyin. NOT: Katılımcının işlem sırasında kas özelliklerini taklit edebilmeleri için rahat bir TA'ya sahip olması önemlidir. Sınav sırasında, kas mimarisindeki değişikliklerin not edilebilsin diye katılımcıdan kas sözleşmesini yapmasını ve kaslarını gevşetmesini isteyin.</li>
	<li>TA'nın yüzeysel ve derin bölmelerini görselleştirmek, kas mimarisini incelemek ve saldırının derinliğine ve iğne açısına karar vermek için ultrason sondası kullanın(Şekil 2A-B). Ciltteki simgeleri belirtin.<ol>
<li>Majör damarlar, arterler veya sinirler önler bir hedef alanı seçimiözellikle dikkat verin.</li>
		<li>TA kas göbeği içinde merkezi aponeurosis belirlemek amacıyla kas kesitini değerlendirmek (yaklaşık 1/3 bacak, diz distal, ve tibial arması 2 cm lateral) (Şekil 2B). Merkezi aponeurosis'in (genellikle 1,5-3 cm) yerini ve derinliğini kaydedin, böylece toplama (Bergström) iğnesini bu noktadan geçmemeye özen gösterebilir.</li>
		<li>Ultrason probu hedef konuma proksimal-distal oryantasyonda yerleştirin ve fasikül pennation ve kas kalınlığıgörselleştirmek(Şekil 2A). Başarılı bir şekilde (körü körüne) kas karnına toplama iğne sürücü yardımcı olmak için bu bilgileri kullanın. Cerrahi işlem sırasında ileride referans için her iki düzlemde de hedef sitenin görüntülerini kaydedin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Bu bilgilerle, hedef alana doğru iğne hareketi için bir plan oluşturun.<ol>
<li>Kesiyi hedef biyopsi bölgesinden 1-3 cm distal yapmayı planlayın. İğne kas içine geçtikten sonra, ekstremite uzun ekseni boyunca cilde ~ 45% açı iğne döndürün, ve daha sonra biyopsi alanına doğru proksimal tahrik. Bu strateji, iğne çok sert itilirse, iğneyi merkezi aponeurosis içine sürme şansını sınırlar. Ayrıca, iğne operatörünün el inebağlı olarak, iğne distal veya proksimal olarak sürülebilir.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. Biyopsi prosedürü
<ol><li>Katılımcıya ameliyat masasına supine bırakmasını ve bacak kaslarını gevşetmesini öğretin. Katılımcının biyopsi bölgesine görüş alanının bir perde tarafından kapatıldıklarından emin olun.<ol>
<li>Katılımcının uzvunu hafif dorsifle edilmiş bir pozisyona (nötrden 0-5°) sabitleyen bir cihaza yerleştirerek kas karnındaki pasif gerilimi ortadan kaldırın; Şekil 3). Hastaya hala kaslarını gevşetip gevşetemeyeceklerini sorun, çünkü çok fazla dorsifleksiyon rahatlamayı zorlaştırabilir. NOT: Dorsiflexed ayaktan biyopsi toplamanın, en fazla 5° nötr (yani, ayağın sapına dik taban) daha plantar esnemiş ayak bileği açılarından daha tutarlı ve daha büyük biyopsiler ürettiğini bulduk. Ayak bileği dorsiflexed tutan cihaz özel yapım bir cihazdır. Ancak, (ucuz) cihazların herhangi bir sayı hala istenilen sonucu üretmek imal edilebilir.</li>
	</ol></li>
	<li>Standart uygulamalara göre seçilen kesi alanını tıraş edin, temizleyin24ve dezenfekte edin. NOT: Katılımcının "temiz" alanı önerilen kesi bölgesinin yaklaşık 20 cm proksimal-distal ve 10 cm medial-lateral dir. Ancak, bu konuda her zaman kurumun ve/veya ulusal yönetmeliklere (varsa) danışın. Dezenfeksiyon protokolü, cildin temizlenmesini ve daha sonra tıbbi dereceli dezenfeksiyon spreyinin liberal kullanımıyla dört kez dezenfekte edilip dezenfekte edilebiyi içerir. Katılımcı herhangi bir nedenle masadan ayrılırsa, dezenfeksiyon protokolü yeniden başlatılmalıdır.</li>
	<li>Lokal anestezik ve vazokonstriktör işlevi gören biyopsi yerinde Epinefrin ile %2 Xylocitin olmak üzere 1.5 cc suprafassiyal enjeksiyon uygulayın. ~20-30 dk'lık ayrılan etki süresini bekleyin. NOT: Bu ilaçlar miyotoksiktir ve bu nedenle asla kas içine enjekte edilmemelidir, sadece deri altı doku. Vazokonstriksiyona bir tepki olarak, enjeksiyon bölgesinin alanı beyaz (açık ten tonları) veya gri (koyu cilt tonları) açabilirsiniz.</li>
	<li>Steril bir neşter ile deri perdeleri ve nazik dürtme ler ile ilaç etkisini doğrulayın.</li>
	<li>Daha önce işaretlenmiş biyopsi yerinde, deri ve fasya ile keser steril bir neşter ile 1 cm proksimal-distal kesi yapmak, kas karın açığa. İğne künt ve fasya geçmeyecek çünkü tam fasya kesmek için özen.</li>
	<li>Biyopsi iğnesini cilde dik bir oryantasyonla kas içine 0,5-1,0 cm itin(Şekil 2C, 2E). NOT: Operatör farklı doku tipleri ile iğne götürmek için gerekli gerginlik bir değişiklik hissedeceksiniz. Yağ dokusu kolaydır, fasya en zor, ve kas arasında (ama değişken olabilir, katılımcıya göre).</li>
	<li>İğneyi bacağın uzun ekseni boyunca cilde ~45° açı konumuna getirin(Şekil 2D, 2F). İğne ucu kas içinde hedef konumda olana kadar kas içine başka bir 1-2 cm iğne itin. NOT: Hekim kas boyutlarıbireysel varyasyon uhesaba kaydedilen ultrason görüntüleri kullanmalıdır. Kesi sadece iğneyi sokacak kadar büyük olduğundan, doktor iğneyi körü körüne deriye doğru sürüklüyor. Biyopsi operatörünün deneyimle kazandığı bir "his" vardır. Bir acemi eğitimli bir biyopsi operatörü (tartışma bu konuda daha fazla) beceri öğrenmek gerekir.</li>
	<li>Biyopsi iğnesine 100 mL şırınga ve hortum takın(Şekil 1G). İğnede negatif bir basınç oluşturmak ve kas dokusunu iğne penceresine emerek şırınganın pistonunu yaklaşık 15-20 mL çekerek Bergström iğnesine emme uygulayın. Daha sonra, iğne penceresi üzerinde trocar hızlı bir itme (es) ile kas çıkarmak. NOT: Emmeden önce ve sırasında, kasın iğneye girmesine yardımcı olmak için iğne penceresinin hemen üzerinde cilde hafif basınç yerleştirmek bazen yararlıdır.</li>
	<li>İğneyi yavaşça bacaktan çıkarın, yavaşça döndürün. İğne çıkarılırken sadece ışık direnci olmalıdır. Daha fazla direnç varsa, bu kısmi biyopsi kesilmesine işaret edebilir. Bu oluşur, hedef konuma ihtiyacı dönmek ve doku toplama yeniden girişimi.</li>
	<li>İç ramrod kullanarak iğne penceresine doğru excised doku itin.</li>
	<li>Numuneyi dikkatlice iğneden çıkarın. NOT: İğnenin toplama çözeltisine batırış (lif hazırlama bölümüne bakınız) genellikle biyopsiyi iğneden çıkarır. Ayrıca, şırınga iğne ile hava sürücü ve örnek dışarı itmek için kullanılabilir. Bu teknikler biyopsiye cımbızla fiziksel olarak dokunma ihtiyacını ortadan kaldırır ve hasar olasılığını azaltır. İğneile temas eden aletler, eller (eldivenli veya değil) veya steril olmayan çözeltiler iğneyle temas ederse, işlem sırasında iğne ileri doğru kullanılamaz. Bu nedenle, ikinci bir acil biyopsi gerekiyorsa, o zaman yeni bir steril iğne kullanılmalıdır. Bu genellikle oluşur, bu yüzden rezerv birkaç steril iğneler korumak için en iyi uygulamadır.</li>
	<li>Kas olarak doku tanımlayın ve yağ veya bağ dokusu değil. Kas dokusu, koyu kırmızı rengi nedeniyle diğer dokulardan kolayca tanımlanır (Şekil 4A). Bazen, toplanan doku kas değil, yağ veya bağ dokusu.<ol>
<li>Yeterli miktarda kas dokusu toplanırsa, protokole devam edin. Yeterli kas yoksa, biyopsiyi tekrar deneyin.</li>
		<li>İkinci bir biyopsi gerekirse, katılımcıyı dikkatlice izleyin, çünkü ikinci bir iğne itme zaman zaman katılımcıyı ilkinden daha rahatsız eder.</li>
	</ol></li>
	<li>Kas örneklerini hemen bir toplama çözümünde yıkayın ve tek lif deneyleri için hazırlanın (bkz. kas biyopsisi işleme ve depolama).<ol>
<li>Deneyimli bir asistan örnek kalitesini kontrol (aşağıya bakın) ve ikinci bir biyopsi yapmak için ihtiyaç değerlendirmek var. Ayrı bir asistan biyopsiyi işleme için alır, takımın geri kalanı ise katılımcıyla devam eder.</li>
	</ol></li>
	<li>Kesi alanını kapatın.<ol>
<li>Kesi yarasını steril Lökostrip bandı ile kapatın. Kesi bölgesinin kenarlarını kesinin uzun eksenine dik tutarak birleştirmek için bir veya daha fazla parça kullanın ve daha sonra çok yönlü yüklemeye karşı korumak için yıldız şeklinde bir desen daha fazla şeritler yatıyordu. NOT: Bu adımın doğru şekilde işlenmesi yara izini azaltacaktır. Yaranın dikilmesi yapılabilir, ancak gerekli değildir. Diğer seçenekler yara tutkal içerir.</li>
		<li>Enfeksiyona karşı korumak için insizyon bölgesinin üzerine steril yara pansumanı (örn. Leucomed T plus) yerleştirin.</li>
		<li>İlk kanamayı sınırlamak ve dış mekanik darbelere karşı korunmak için bacağı uyumlu elastik bandajlarla (örn. Unihaft) sarın.</li>
		<li>Kanamayı önlemek ve daha derin sargıların gevşemesini veya yok olmasını önlemek için bacağı akrillastik kompresyon bandajlarıyla sarın.</li>
	</ol></li>
</ol>4. Biyopsi sonrası bakım
<ol><li>Katılımcıdan işlemden hemen sonra dolaşmasını isteyin. Lokalize ağrı olacak. Katılımcıya mümkün olduğunca normal yürümesini emredin.</li>
	<li>Katılımcıya bandajları çıkarmamasını veya bandajları suyla ıslatmamasını emretin. En az bir gün devam etmelidir: akrillastik bandaj için bir gün, uyumlu elastik bandaj için üç gün ve yara pansumaniçin yedi gün. Katılımcıya, gerekirse yeniden bandajlanabileceklerini bildirin.<ol>
<li>Bir katılımcının biyopsi sonrası bakımını bireyin ihtiyaçlarına göre uyar. Eğitimli bir asistan veya hekim katılımcıyı değerlendirin ve uygun bir biyopsi sonrası bakım planı yapın. Bu işlem için, TA'nın daha fazla in vivo nöromüsküler testinin biyopsiden en az bir hafta ile ayrılmasını öneriyoruz.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. Kas biyopsisi işleme ve depolama
<ol><li>Doku ekstraksiyonundan sonra, dokuyu hemen 5 mL'lik bir sertlik toplama çözeltisine yerleştirin (mM: Tris (50), KCl (2), NaCl (100), MgCl2 (2), EGTA (1), proteaz inhibitörü tableti (1), pH 7.0) ve kanı yıkamak için 4-6 dakika hafifçe çalkalayın.</li>
	<li>Taze sertlik için Rigor çözeltisi değiştirin, hafifçe 4-6 dakika sallayın ve sonra proteaz-inhibitör depolama çözeltisi ve kan değişimi sağlamak için 4 ° C 4 -6 h saklayın.</li>
	<li>Gecerigor için Exchange Rigor çözeltisi (mM: Tris (50), KCl (2), NaCl (100), MgCl2 (2), EGTA (1), proteaz inhibitörü tablet (1), 50:50 gliserol, pH 7.0) ve 12-18 saat boyunca 4 °C'de saklayın.</li>
	<li>50:50 toplama katır için bir gecede rigor değişimi: gliserol ve -20 °C'de 3 aya kadar veya bir yıl -80 °C dondurucuda saklayın. NOT: Bu işlem, hücreiçine ve dışına manuel kalsiyum eklenmesine olanak sağlayan lif zarını permeabilize eder. Bu süreç zaman alır ve farklı kaslar ve türler arasında farklı olabilir.</li>
</ol>

<ol><li>Franchi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Architectural%2C+functional+and+molecular+responses+to+concentric+and+eccentric+loading+in+human+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiologica%22%5BJournal%5D)">Architectural, functional and molecular responses to concentric and eccentric loading in human skeletal muscle.</a> Acta Physiologica. 210 (3), 642-654 (2014).</li>
<li>Duchene, G. B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((De+la+paralysie+musculaire+pseudo-hypertrophique%2C+ou+paralysie+myo-scl%C3%A9rosique+%2F+par+le+Dr+Duchenne+%28de+Boulogne%29%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+General+Internal+Medicine%22%5BJournal%5D)">De la paralysie musculaire pseudo-hypertrophique, ou paralysie myo-sclérosique / par le Dr Duchenne (de Boulogne).</a> Archives of General Internal Medicine. 11 (30), (1868).</li>
<li>Shanely, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+skeletal+muscle+biopsy+procedures+using+the+modified+Bergstr%C3%B6m+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Human skeletal muscle biopsy procedures using the modified Bergström technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (91), e51812(2014).</li>
<li>Evans, W. J., Phinney, S. D., Young, V. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suction+applied+to+a+muscle+biopsy+maximizes+sample+size%5BTitle%5D)+AND+%22Medicine+and+Science+in+Sports+and+Exercise%22%5BJournal%5D)">Suction applied to a muscle biopsy maximizes sample size.</a> Medicine and Science in Sports and Exercise. 14 (1), 101-102 (1982).</li>
<li>Bergstrom, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Percutaneous+needle+biopsy+of+skeletal+muscle+in+physiological+and+clinical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Scandinavian+Journal+of+Clinical+and+Laboratory+Investigation%22%5BJournal%5D)">Percutaneous needle biopsy of skeletal muscle in physiological and clinical research.</a> Scandinavian Journal of Clinical and Laboratory Investigation. 35 (7), 609-616 (1975).</li>
<li>Baczynska, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+Vastus+Lateralis+Skeletal+Muscle+Biopsy+Using+the+Weil-Blakesley+Conchotome%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Human Vastus Lateralis Skeletal Muscle Biopsy Using the Weil-Blakesley Conchotome.</a> Journal of Visualized Experiments. (109), e53075(2016).</li>
<li>Pesta, D., Gnaiger, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+respirometry%3A+OXPHOS+protocols+for+human+cells+and+permeabilized+fibers+from+small+biopsies+of+human+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">High-resolution respirometry: OXPHOS protocols for human cells and permeabilized fibers from small biopsies of human muscle.</a> Methods in Molecular Biology. 810, 25-58 (2012).</li>
<li>Buck, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+respirometry+of+fine-needle+muscle+biopsies+in+pre-manifest+Huntington%27s+disease+expansion+mutation+carriers+shows+normal+mitochondrial+respiratory+function%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+One%22%5BJournal%5D)">High-resolution respirometry of fine-needle muscle biopsies in pre-manifest Huntington's disease expansion mutation carriers shows normal mitochondrial respiratory function.</a> Plos One. 12 (4), 01175248(2017).</li>
<li>Murgia, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+Muscle+Fiber+Proteomics+Reveals+Fiber-Type-Specific+Features+of+Human+Muscle+Aging%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Single Muscle Fiber Proteomics Reveals Fiber-Type-Specific Features of Human Muscle Aging.</a> Cell Reports. 19 (11), 2396-2409 (2017).</li>
<li>Friedmann-Bette, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+strength+training+with+eccentric+overload+on+muscle+adaptation+in+male+athletes%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Effects of strength training with eccentric overload on muscle adaptation in male athletes.</a> European Journal of Applied Physiology. 108 (4), 821-836 (2010).</li>
<li>McPhee, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+contributions+of+fibre+atrophy%2C+fibre+loss%2C+in+situ+specific+force+and+voluntary+activation+to+weakness+in+sarcopenia%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journals+of+Gerontology.+Series+A%2C+Biological+Sciences+and+Medical+Sciences%22%5BJournal%5D)">The contributions of fibre atrophy, fibre loss, in situ specific force and voluntary activation to weakness in sarcopenia.</a> The Journals of Gerontology. Series A, Biological Sciences and Medical Sciences. 73 (10), 1287-1294 (2018).</li>
<li>Nocella, M., Cecchi, G., Bagni, M. A., Colombini, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Force+enhancement+after+stretch+in+mammalian+muscle+fiber%3A+no+evidence+of+cross-bridge+involvement%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Cell+Physiology%22%5BJournal%5D)">Force enhancement after stretch in mammalian muscle fiber: no evidence of cross-bridge involvement.</a> American Journal of Physiology. Cell Physiology. 307 (12), 1123-1129 (2014).</li>
<li>Patel, J. R., McDonald, K. S., Wolff, M. R., Moss, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ca2%2B+binding+to+troponin+C+in+skinned+skeletal+muscle+fibers+assessed+with+caged+Ca2%2B+and+a+Ca2%2B+fluorophore.+Invariance+of+Ca2%2B+binding+as+a+function+of+sarcomere+length%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Ca2+ binding to troponin C in skinned skeletal muscle fibers assessed with caged Ca2+ and a Ca2+ fluorophore. Invariance of Ca2+ binding as a function of sarcomere length.</a> The Journal of Biological Chemistry. 272 (9), 6018-6027 (1997).</li>
<li>Hessel, A. L., Joumaa, V., Eck, S., Herzog, W., Nishikawa, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimal+length%2C+calcium+sensitivity+and+twitch+characteristics+of+skeletal+muscles+from+mdm+mice+with+a+deletion+in+N2A+titin%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Optimal length, calcium sensitivity and twitch characteristics of skeletal muscles from mdm mice with a deletion in N2A titin.</a> The Journal of Experimental Biology. 222, Pt 12 (2019).</li>
<li>Joumaa, V., Herzog, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calcium+sensitivity+of+residual+force+enhancement+in+rabbit+skinned+fibers%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Cell+Physiology%22%5BJournal%5D)">Calcium sensitivity of residual force enhancement in rabbit skinned fibers.</a> American Journal of Physiology. Cell Physiology. 307 (4), 395-401 (2014).</li>
<li>Joumaa, V., Rassier, D. E., Leonard, T. R., Herzog, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+origin+of+passive+force+enhancement+in+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Cell+Physiology%22%5BJournal%5D)">The origin of passive force enhancement in skeletal muscle.</a> American Journal of Physiology. Cell Physiology. 294 (1), 74-78 (2008).</li>
<li>Hilber, K., Galler, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+properties+and+myosin+heavy+chain+isoform+composition+of+skinned+skeletal+muscle+fibres+from+a+human+biopsy+sample%5BTitle%5D)+AND+%22Pflugers+Archiv%3A+European+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Mechanical properties and myosin heavy chain isoform composition of skinned skeletal muscle fibres from a human biopsy sample.</a> Pflugers Archiv: European Journal of Physiology. 434 (5), 551-558 (1997).</li>
<li>Miller, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+heart+failure+decreases+cross-bridge+kinetics+in+single+skeletal+muscle+fibres+from+humans%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Chronic heart failure decreases cross-bridge kinetics in single skeletal muscle fibres from humans.</a> The Journal of Physiology. 588, Pt 20 4039-4053 (2010).</li>
<li>Pinnell, R. A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Residual+force+enhancement+and+force+depression+in+human+single+muscle+fibres%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomechanics%22%5BJournal%5D)">Residual force enhancement and force depression in human single muscle fibres.</a> Journal of Biomechanics. 91, 164-169 (2019).</li>
<li>Einarsson, F., Runesson, E., Fridén, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Passive+mechanical+features+of+single+fibers+from+human+muscle+biopsies--effects+of+storage%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Surgery+and+Research%22%5BJournal%5D)">Passive mechanical features of single fibers from human muscle biopsies--effects of storage.</a> Journal of Orthopaedic Surgery and Research. 3, 22(2008).</li>
<li>Flann, K. L., LaStayo, P. C., McClain, D. A., Hazel, M., Lindstedt, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+damage+and+muscle+remodeling%3A+no+pain%2C+no+gain%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Muscle damage and muscle remodeling: no pain, no gain.</a> The Journal of Experimental Biology. 214, Pt 4 674-679 (2011).</li>
<li>Commission for Hospital Hygiene and Infection Prevention (KRINKO), Federal Institute for Drugs and Medical Devices (BfArM). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anforderungen+an+die+Hygiene+bei+der+Aufbereitung+von+Medizinprodukten+%5BHygiene+requirements+for+the+reprocessing+of+medical+devices%5D%5BTitle%5D)+AND+%22Bundesgesundheitsblatt%2C+Gesundheitsforschung%2C+Gesundheitsschutz%22%5BJournal%5D)">Anforderungen an die Hygiene bei der Aufbereitung von Medizinprodukten [Hygiene requirements for the reprocessing of medical devices].</a> Bundesgesundheitsblatt, Gesundheitsforschung, Gesundheitsschutz. 55 (10), 1244-1310 (2012).</li>
<li>Koch-Institut, R. Ergänzung zur Empfehlung Anforderungen an die Hygiene bei der Aufbereitung von Medizinprodukten. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKoch-Institut%2C+R+%22RKI-Bib1%22">RKI-Bib1</a>. , Robert Koch-Institut. (2018).</li>
<li>Rutala, W. A., Weber, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disinfection+and+sterilization+in+healthcare+facilities%5BTitle%5D)+AND+%22Practical+Healthcare+Epidemiology%22%5BJournal%5D)">Disinfection and sterilization in healthcare facilities.</a> Practical Healthcare Epidemiology. , 58-81 (2018).</li>
<li>Rassier, D. E., MacIntosh, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sarcomere+length-dependence+of+activity-dependent+twitch+potentiation+in+mouse+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Physiology%22%5BJournal%5D)">Sarcomere length-dependence of activity-dependent twitch potentiation in mouse skeletal muscle.</a> BMC Physiology. 2, 19(2002).</li>
<li>Mounier, Y., Holy, X., Stevens, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compared+properties+of+the+contractile+system+of+skinned+slow+and+fast+rat+muscle+fibres%5BTitle%5D)+AND+%22Pflugers+Archiv%3A+European+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Compared properties of the contractile system of skinned slow and fast rat muscle fibres.</a> Pflugers Archiv: European Journal of Physiology. 415 (2), 136-141 (1989).</li>
<li>Henriksson, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Semi-open+muscle+biopsy+technique.+A+simple+outpatient+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neurologica+Scandinavica%22%5BJournal%5D)">Semi-open muscle biopsy technique. A simple outpatient procedure.</a> Acta Neurologica Scandinavica. 59 (6), 317-323 (1979).</li>
<li>Dietrichson, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conchotome+and+needle+percutaneous+biopsy+of+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurology%2C+Neurosurgery%2C+and+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Conchotome and needle percutaneous biopsy of skeletal muscle.</a> Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 50 (11), 1461-1467 (1987).</li>
<li>Iachettini, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tibialis+anterior+muscle+needle+biopsy+and+sensitive+biomolecular+methods%3A+a+useful+tool+in+myotonic+dystrophy+type+1%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Histochemistry%22%5BJournal%5D)">Tibialis anterior muscle needle biopsy and sensitive biomolecular methods: a useful tool in myotonic dystrophy type 1.</a> European Journal of Histochemistry. 59 (4), 2562(2015).</li>
<li>Cotter, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suction-modified+needle+biopsy+technique+for+the+human+soleus+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Aviation%2C+Space%2C+and+Environmental+Medicine%22%5BJournal%5D)">Suction-modified needle biopsy technique for the human soleus muscle.</a> Aviation, Space, and Environmental Medicine. 84 (10), 1066-1073 (2013).</li>
<li>Edwards, R. H., Round, J. M., Jones, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Needle+biopsy+of+skeletal+muscle%3A+a+review+of+10+years+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+%26+Nerve%22%5BJournal%5D)">Needle biopsy of skeletal muscle: a review of 10 years experience.</a> Muscle & Nerve. 6 (9), 676-683 (1983).</li>
<li>Gibreel, W. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+and+yield+of+muscle+biopsy+in+pediatric+patients+in+the+modern+era%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pediatric+Surgery%22%5BJournal%5D)">Safety and yield of muscle biopsy in pediatric patients in the modern era.</a> Journal of Pediatric Surgery. 49 (9), 1429-1432 (2014).</li>
<li>Cuisset, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+biopsy+in+children%3A+Usefulness+in+2012%5BTitle%5D)+AND+%22Revue+Neurologique%22%5BJournal%5D)">Muscle biopsy in children: Usefulness in 2012.</a> Revue Neurologique. 169 (8-9), 632-639 (2013).</li>
<li>Nilipor, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+one+hundred+pediatric+muscle+biopsies+during+a+2-year+period+in+mofid+children+and+toos+hospitals%5BTitle%5D)+AND+%22Iranian+Journal+of+Child+Neurology%22%5BJournal%5D)">Evaluation of one hundred pediatric muscle biopsies during a 2-year period in mofid children and toos hospitals.</a> Iranian Journal of Child Neurology. 7 (2), 17-21 (2013).</li>
<li>Schiaffino, S., Reggiani, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fiber+types+in+mammalian+skeletal+muscles%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Reviews%22%5BJournal%5D)">Fiber types in mammalian skeletal muscles.</a> Physiological Reviews. 91 (4), 1447-1531 (2011).</li>
<li>Wang, K., Wright, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Architecture+of+the+sarcomere+matrix+of+skeletal+muscle%3A+immunoelectron+microscopic+evidence+that+suggests+a+set+of+parallel+inextensible+nebulin+filaments+anchored+at+the+Z+line%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Architecture of the sarcomere matrix of skeletal muscle: immunoelectron microscopic evidence that suggests a set of parallel inextensible nebulin filaments anchored at the Z line.</a> The Journal of Cell Biology. 107 (6), 2199-2212 (1988).</li>
<li>Ma, W., Gong, H., Irving, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myosin+head+configurations+in+resting+and+contracting+murine+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Myosin head configurations in resting and contracting murine skeletal muscle.</a> International Journal of Molecular Sciences. 19 (9), (2018).</li>
<li>Ma, W., Gong, H., Kiss, B., Lee, E. J., Granzier, H., Irving, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thick-Filament+Extensibility+in+Intact+Skeletal+Muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Biophysical+Journal%22%5BJournal%5D)">Thick-Filament Extensibility in Intact Skeletal Muscle.</a> Biophysical Journal. 115 (8), 1580-1588 (2018).</li>
<li>Bonafiglia, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+pain+responses%2C+hemodynamic+reactivity+and+fibre+type+composition+between+Bergstr%C3%B6m+and+microbiopsy+skeletal+muscle+biopsies%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Research+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">A comparison of pain responses, hemodynamic reactivity and fibre type composition between Bergström and microbiopsy skeletal muscle biopsies.</a> Current Research in Physiology. 3, 1-10 (2020).</li>
<li>Wickiewicz, T. L., Roy, R. R., Powell, P. L., Edgerton, V. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+architecture+of+the+human+lower+limb%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Orthopaedics+and+Related+Research%22%5BJournal%5D)">Muscle architecture of the human lower limb.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. (179), 275-283 (1983).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Bu raporda, TA'dan yapısal olarak hasar görmemiş kas dokusubiyopsisi için bir teknik tanımlanmıştır. Biz bu prosedür kullanılabilir kas lifleri kabul edilebilir bir içerik verimleri bulundu (5-10 lif demeti preparatları başına 50 toplanan doku mg) mekanik testler için. Ayrıca mekanik, genetik ve proteomik deneylerin takibi için yeterli dokuya sahiptik.
Genellikle kas biyopsileri 3,,4,3,6,<s...

Klinik veya araştırma amaçlı insan kas fizyolojisi çalışma genellikle kas biyopsisi gerektirir. Örneğin, insan kas fizyolojisi ve biyomekanik önemli bir sorun arasında ayrım yapmak ve egzersiz kas performansı çeşitli adaptasyonları anlamaktır. Performans adaptasyonları sadece yapısal adaptasyonları içermez (örneğin, kontraktil proteinlerdeki değişiklikler, kas mimarisi) ama aynı zamanda insan kaslarında sağlam test yaparken ayrı ayrı değerlendirmek için çok zor, imkansız olmayan sinirsel adaptasyonlar1'ide içerir. Lif düzeyindedeneyler bu yüksek seviye bileşenleri kaldırmak ve kas kasılması daha doğrudan değerlendirilmesi için izin ve biyopsi teknikleri ile toplanabilir. Kas biyopsileri en az 18682yılından beri toplanmıştır. Bugün, kas biyopsileri toplamak için baskın teknik modifiye Bergström tekniği3,4,5, diğer teknikler bir Weil-Blakesley conchotome kullanımı da dahil olmak üzere kullanılabilir olmasına rağmen6 veya sözde ince iğne7,8. Tüm bu teknikler kas içine geçmek ve doku bir parça kesmek için tasarlanmış özel iğne benzeri aletler kullanın. Özellikle, modifiye Bergström tekniği büyük bir modifiye iğne kullanır (5 mm iğne boyutu burada; Şekil 1) bu iğne ucuna yakın bir pencere ve iğne pencereden geçerken kas kesme, aşağı ve aşağı iğne hareket eden daha küçük bir iç trocar vardır. Bu hallow trocar içinde yukarı ve aşağı trocar şaft hareket eder ve iğne penceresine doğru biyopsi iter bir ramrod olduğunu. İğne penceresiiçine kas çekmek için, bir emme hortumu, hangi iğne hava emer ve negatif basınç ile iğne penceresiiçine kas çeker eklenir.
Kas biyopsileri genellikle protein içeriği değişiklikleri incelemek için elde edilir, gen ekspresyonu, ya da morfoloji hastalığın neden olduğu ya da bir egzersiz programına yanıtolarak 1,9,10,11. Kas biyopsileri için bir diğer kritik kullanım, lif kontraktil kuvvetinin ölçülmesi, kas lifsertliği ve geçmişe bağlı kas özellikleri12,,13,,14,15,16gibi mekanik deneylerdir. Tek elyaf veya lif demeti mekaniği aynı anda kuvvet ölçerken lif uzunluğunu kontrol özel teçhizatları üzerinde bir uzunluk motoru ve kuvvet transdüser arasında lifler takArak ölçülür. Geçirimsizleştirici (örn. deri yüzme) lifleri ile sarkolemma membran, banyo çözeltisindeki kimyasallara geçirilebilir hale gelir ve kalsiyum konsantrasyonunu değiştirerek aktivasyon kontrolü sağlar. Ayrıca, kontraktil özelliklerinin kimyasallar/farmasötikler/diğer proteinler üzerindeki etkisi, söz konusu reaktifin banyo çözeltisine eklenmesiyle kolayca değerlendirilebilir. Ancak, bu teknik son derece diğer hayvan modellerinde kullanılırken, belirgin daha az çalışma insan kas biyopsileri17,18,,19derili lifler üzerinde mekanik testler yaptı. Bunun nedenlerinden biri, biyopsi araçları nın ve protokollerinin doku çıkarma sırasında oluşan yapısal hasar seviyesine daha az göz önünde bulundurularak mümkün olduğunca çok kas dokusunu çıkarmak üzere tasarlanmış olmasıdır. Nitekim, yeni bir biyopsi protokolü kas içine biyopsi iğne sürücü vekas3 2-4 parçaları toplamak öneriyor. Sürecin kendisi DNA veya protein materyaline çok az zarar verir, ancak genellikle lif ve sarkoerik yapıları kas liflerinin aktivasyonu kararsız veya imkansız hale gelir şekilde yok eder. Ayrıca biyopsi deki liflerin göreceli uzunluğu genellikle kısadır (<2 mm) ve mekanik testler için kolayca işlenmez. Mekanik testler için ideal lifler uzundur (3-5 mm) ve yapısal olarak hasar görmemişlerdir.
Daha gelişmiş doku çıkarma teknikleri lif hasarı sınırlamak için kullanılabilir. Örneğin,20 kişilik bir grup, kasların tam olarak maruz kaldığı ve bir cerrahın kas yapısını görselleştirebildiği ve nispeten büyük ve yapısal olarak hasar görmemiş kas dokusu (15 mm x 5mm x 5 mm) örneklerini dikkatlice inceleyebildiği ön kolların önceden planlanmış "açık ameliyatlarından" (örn. kemik kırığı onarımı) yararlandı. Bu "açık biyopsi" tekniği, katılımcılar daha önce planlanmış bir prosedürden geçerken tercih edilir ve bu nedenle, özellikle sağlıklı yetişkinler için, aksi takdirde hiçbir ameliyat ların gerçekleşeceği potansiyel katılımcıların havuzunu sınırlar. Böylece, araştırma amaçlı yapılan birçok biyopsi ayakta tedavi işlemi olarak yapılırken, enfeksiyon, yara izi ve iyileşme süresini sınırlamak için kesi bölgesi mümkün olduğunca küçük tutulmaktadır. Bu nedenle, en biyopsiler körü körüne toplanır (yani, operatör kas içine fasya geçer gibi toplama iğne görmek mümkün değildir). Bu biyopsi kalitesi neredeyse tamamen operatör beceri ve deneyime dayalı olduğu anlamına gelir. Her kas doku toplarken kendi zorlukları vardır, sinirler ve kan damarları ihlal riskleri gibi, ideal bir toplama derinliği ve yer seçimi, ve mümkün olduğunca gevşek kas tutmak için uygun bir vücut pozisyonu karar. Ne yazık ki, kas özgü skillsets çoğu yazılı değildir ve bu yüzden her hekim onlara yeni kaslar üzerinde biyopsi yaparken "tekerleği yeniden icat" gerekir. Hekim bu kas biyopsiler için en iyi uygulamaları tanımlayana kadar deneyim Bu eksikliği genellikle düşük kaliteli çeşitli koleksiyonlara yol açar. Acemi hekimler genellikle daha deneyimli meslektaşları ile konuşmaları yoluyla beceri öğrenmek, ancak nispeten az bilgilendirici ve hakemli metinler bu konuda var, geleneksel biyopsi toplama için kullanılmayan kaslar için özellikle. Yukarıdaki bilgileri göz önünde bulundurursak, biyopsiler için insan gönüllüleri işe almanın zorluğu ile birlikte, her katılımcı için başarı şansını en üst düzeye çıkaran daha fazla öğretim bilgisine ihtiyaç duyulduğu açıktır.
Bu yazının amacı, mekanik testler için uzun, hasarsız lif parçaları ile kas biyopsilerinin başarılı bir şekilde toplanması için protokoller sağlayan bir kas biyopsisi tekniği sunmaktır. İnsan kas biyopsileri genellikle yapılır, ve biyopsi eğitim materyalinin toplu, musculus vastus lateralis. Onun nispeten büyük kas boyutu ve cilde göre yüzeysel konumu yeterli kas dokusunun toplanması için izin verir, hasta rahatsızlık ve fiziksel travma en aza indirirken1,21. Ancak, uzunlamasına eğitim çalışmaları için vastus lateralis kullanarak bazı sınırlamalar vardır. Örneğin, bir eğitim programı içeren deneysel protokoller sırasında, katılımcılar genellikle 2-6 ay aşan bir süre için çalışma dışında ek eğitim kaçınmalısınız. Sporcular için bu genellikle mümkün değildir, çünkü vastus lateralis genellikle tipik egzersizler sırasında (örneğin, çömelmeler, atlar) veya genellikle spor için kullanılır (örn. koşu, bisiklet) için kullanılır. Çalışmanın amacından uzak bu ayrı eğitim deneyimleri kas mekaniği, mimari ve fizyolojiyi kas özellikleri üzerinde çalışmanın deneysel protokolünün gerçek etkisini bilmek zor ya da imkansız bir şekilde değiştiren kas adaptasyonlarına neden olabilir. Çalışmaların bu tür için, genellikle eğitim alayları odak noktası olmayan bir hedef kas seçmek için ideal olacaktır. Musculus tibialis anterior (TA) yukarıdaki gereksinimleri karşılayan ideal bir hedef kastır. Buna ek olarak, eğitim müdahaleleri bir dinamometre kullanımı gibi kontrol edilebilir yaklaşımlar kullanılarak TA'ya yönelik olarak hedeflenebilir. TA kas biyopsisi ile ilgili neredeyse hiçbir eğitim materyali yoktur. Bu nedenle, ta nispeten hasarsız kas biyopsileri toplamak için değiştirilmiş bir protokol geliştirdi.

<table><tbody><tr><td>2 ml cam şırınga ile 26 ayar deri altı iğne</td><td>B. Braun Melsungen AG Carl-Braun-Stra&szlig; e 1 34212 Melsungen, Hessen Almanya &nbsp;</td><td>4606027V</td><td>İlaç uygulaması</td></tr><tr><td>5mm Berst&ouml; m iğne</td><td>ev yapımı</td><td>N / A</td><td>Doku koleksiyonu. Diğer Berst&ouml'a benzer; m iğneler</td></tr><tr><td>Akrilastik</td><td>BSN medical GmbH 22771 Hamburg</td><td>269700</td><td>elastik kompresyon bandajı</td></tr><tr><td>Komple proteaz inhibitörü kokteyli</td><td>Roche Diagnostics, Mannheim, Almanya</td><td>11836145001</td><td>Proteaz inhibitörü tabetleri kas dokusunu tutan tüm solüsyonlara eklendi.</td></tr><tr><td>Cutasept</td><td>PAUL HARTMANN AG Paul-Hartmann-Stra&szlig; e 12 89522 Heidenheim Almanya</td><td>9805630</td><td>Cilt için dezenfektan sprey</td></tr><tr><td>Leucomed T plus</td><td>BSN medical GmbH 22771 Hamburg</td><td>7238201</td><td>Yarayı kapatmak ve enfeksiyona karşı korumak için yara pedi ile şeffaf yara örtüsü</td></tr><tr><td>Leukostrip</td><td>Smith ve Yeğeni tıbbi Limitied 101 Hessle road, Hull Büyük Britanya</td><td>66002876</td><td>yara kapatma</td></tr><tr><td>Cerrahi tek kullanımlık neşterler</td><td>Aesculap AG Aesculap-Platz 78532 Tuttlingen Almanya</td><td>BA200 serisi</td><td>İnsizyon</td></tr><tr><td>Unihaft yapışkan elastik bandaj</td><td>BSN medical GmbH 22771 Hamburg</td><td>4589600</td><td>mekanik darbelere karşı koruyan yapışkan elastik bandaj</td></tr><tr><td>Epinefrin</td> <td>ile Ksilositin %2Milbe GmbH M&uuml; nchner Stra&szlig; e 15 06796 Brehna Almanya</td><td>N/A</td><td>Kontrollü madde anestezisi, vazokonstriksiyon</td></tr></tbody></table>

mekanik değerlendirme için İnsan musculus tibialis anterior Üstün bölmesi İskelet kas biyopsileri toplama

Collection of Skeletal Muscle Biopsies from the Superior Compartment of Human Musculus Tibialis Anterior for Mechanical Evaluation

İskelet liflerinin mekanik özellikleri genel kas sağlığı, fonksiyon ve performansın önemli göstergeleridir. İnsan iskelet kas biyopsileri genellikle bu çabalar için toplanır. Ancak, biyopsi prosedürleri nispeten az teknik açıklamalar, yaygın olarak kullanılan musculus vastus lateralis dışında, mevcuttur. Biyopsi teknikleri genellikle çalışma altında her kas özelliklerini karşılamak için ayarlanmış olsa da, birkaç teknik raporlar büyük topluluk için bu değişiklikleri paylaşmak. Böylece, insan katılımcıların kas dokusu genellikle operatör tekerleği yeniden icat olarak israf edilir. Çeşitli kaslardan biyopsiler üzerinde mevcut malzeme genişletilmesi başarısız biyopsiler olayını azaltabilir. Bu teknik rapor, musculus tibialis anterior üzerindeki modifiye Bergström tekniğinin lif hasarını sınırlayan ve mekanik değerlendirme için yeterli lif uzunluklarını sağlayan bir varyasyonu açıklamaktadır. Ameliyat bir saat içinde tamamlanabilecek bir ayakta tedavi prosedürüdür. Bu işlem için iyileşme süresi hafif aktivite için hemen (yani, yürüyüş), normal fiziksel aktivitenin devamı için üç güne kadar, ve yara bakımı için yaklaşık bir hafta. Çıkarılan doku mekanik kuvvet deneyleri için kullanılabilir ve burada temsili aktivasyon verileri salıyoruz. Bu protokol çoğu toplama amacıyla uygundur, potansiyel olarak diğer iskelet kaslarına uyarlanabilir ve toplama iğnesindeki değişikliklerle geliştirilebilir.

Bir katılımcı için tüm zaman taahhüdü yaklaşık bir saat (10 dk danışma, 10 dk ultrason, 20 dk cerrahi hazırlık ve anestezik uygulama, 10 dk cerrahi ve 10 dk kurtarma) idi. Çoğu zaman, katılımcılar bilinçsizce kendi TA aktive ve mümkün olduğunca rahat kas tutmak için tutarlı hatırlatmalar gerekli. Biyopsi iğnesi kasın içinde yken, katılımcılar genellikle biyopsi iğnesinin çevresindeki bölgede, ara sıra orta ve yoğun rahatsızlık dönemleri olan benzersiz bir "basınç" hissi bildirmiştir. Bir kez, bir katılımcının tonlarında ...

Bu teknik rapor, lif hasarını sınırlayan musculus tibialis anterior biyopsisi için modifiye Bergström tekniğinin bir varyasyonu açıklanmaktadır.

Mekanik Değerlendirme için İnsan Musculus Tibialis Anterior Üstün Bölmesi İskelet Kas Biyopsileri Toplama

The mechanical properties of contracting skeletal fibers are crucial indicators of overall muscle health, function, and performance. Human skeletal muscle ...

Ruhr-Üniversitesi Bochum Spor Bilimleri Fakültesi'ne hoş geldiniz. Bugün, insan musculus tibialis anterior üstün bölmesi iskelet kas biyopsileri toplama gösterecektir. Biyopsi teknikleri kas dokusunun toplanmasında etkili olmakla birlikte, lifler genellikle yapısal olarak lif mekaniğinin değerlendirilmesi zor olacak şekilde zarar görür.Biz insan lifleri mekanik değerlendirme yapılabilir, böylece lif hasarı sınırlar ve lif uzunluğu maksimize değiştirilmiş bir Bergstrom tekniğinin bir varyasyonu salıyoruz. Gösteri ekip doktoru Dr.Markus de Marees ve araştırma bilim adamları, Dr Daniel Hahn ve Anthony Hessel tarafından yapılacaktır. Katılımcı ve hekim ilk olarak prosedürü gözden geçirmek ve tartışmak için toplanır.Eğer memnun olursa, katılımcı gönüllü bilgilendirilmiş onay sözleşmesini imzalar. Konuya supine uzanmasını ve uzvlarını mümkün olduğunca rahat tutmasını öğretin. Dorsiflex katılımcının ayağı böylece tibialis anterior gevşek.Tibialis anterior kas göbek içinde yüzeysel bölmesi enine düzlemgörselleştirmek için bir ultrason prob kullanın, hiçbir ana arterler veya sinirler ile bir biyopsi alanı belirlemek. Son olarak, toplama iğnesi bu noktadan geçmiş tahrik asla böylece merkezi aponeurosis derinliğini kaydedin. Belirlenen hedef alanın sagital düzlemine erişmek için ultrason sondasını döndürün.Görünür fasiküller ile kas hacminin bir görüntü kaydedin. Ameliyat aletleri sterilize edilir ve işlemden önce hazırlanır ve yazılı protokol dahilinde tam olarak tanımlanır. Bergstrom iğnesinin ucuna yakın bir penceresi var.Bu iğne içinde daha küçük bir içi boş trocar, hangi yukarı ve aşağı mil hareket eder ve iğne penceresi üzerinden geçerken kas keser. Trokar içinde trokar dışında biyopsi itmek için kullanılan daha küçük bir ramrod olduğunu. İğne penceresiiçine kas çekmek için, bir emme hortumu iğne hava emer ve negatif basınç ile iğne penceresinden kas çeker iğnenin üst eklenir.Katılımcıya prosedür masasına supine bırakmasını ve bacak kaslarını gevşetmesini öğretin. Ultrason görüntüleme sırasında kullanılan hafif ayak bileği dorsiflexion çoğaltmak, ve daha sonra işlem sırasında rotasyon en aza indirmek için ayak bileği eklemdüzeltmek. Hedef kesi bölgesini tıraş edin ve dezenfekte edin.Daha sonra epinefrin ile% 2 xylocitin 1.5 CCs yüzeysel enjeksiyon uyguluyoruz. Bu yerel anestezik ve damar yılanı olarak işlev görür. Etki süresi 20-30 dakikadır.Hastanın görüş hattını bir ekranla biyopsi yerine çıkarın. Daha önce işaretlenmiş biyopsi yerinde deri ve fasya ile keser steril bir neşter ile distal insizyon için bir santimetre proksimal yapmak, altta yatan kas dokusu açığa. Biyopsi iğnesini kesi üzerine yerleştirin ve cilde dik olarak yönlendirin.Biyopsi iğnesini kasın içine yarım ila bir santimetre itin. İğne hareketine karşı bazı ışık direnci olabilir, ancak herhangi bir ekstra direnç anormal dir ve genellikle bir inapt kesi gösterir. Daha sonra iğneyi proksimal pozisyona kadar bir distal'a yönlendirin, iğneyi kasın içine iki santimetre daha itin.İğnenin tam yönü ve seyahat derinliği katılımcıya özgü olacaktır. Ve böylece ultrason muayenesi kapalı dayalı. Şırınga hortumunu biyopsi iğnesine takın ve iğnede negatif basınç oluşturun.Bu iğne penceresinden kas dokusu çizecektir. Zorla kas çıkarmak için iğne penceresi üzerinde trocar itin. İğneyi bacaktan çıkarın ve doku işleme için bir teknisyene geçirin.Yarayı kapatma bandı veya yapıştırıcı kullanın ve yarayı enfeksiyondan veya mekanik aşınmadan korumak için pansuman uygulayın. Katılımcıya ayağa kalkmasını ve dolaşmasını emredin. Onlar, ama hemen dolaşmak mümkün olacak.Biyopsi penceresinden doku kaldırmak için, ilk doku maruz, sonra fizyolojik tampon dolu bir aşağılık içine iğne ucu batırılmış ve kuvvetle kas çözelti içine iğne dışarı yüzen kadar iğne hareket ettirin. Standart yöntemlerle mekanik değerlendirme için kas dokusunu işle. Yakın zamanda bu protokolü kullanan katılımcılardan 22 biyopsi topladık.Ortalama toplama verimi kullanılabilir kas dokusunun 100 ila 200 miligram oldu. Her biyopsi de 3 ila 5 milimetre uzunluğunda 150 ila 300 hasarsız lif verdi. Lif demetleri kimyasal gliserol ile derili ve daha sonra 2.7 mikron ortalama sarcomere uzunluğu yüksek kalsiyum çözeltisi aktive edildi.Düzgün depolanan biyopsiler birkaç ay mekanik test için uygundur. Bu biyopsi işlemi bir saat sürer. Biyopsilerden kaynaklanan komplikasyonlar çok nadirdir, ancak büyük olasılıkla kesi bölgesinin enfeksiyonudur.Insan kas fizyolojisi ve biyomekanik önemli bir sorun egzersiz ve hastalık kas performansı çeşitli adaptasyonları arasında ayrım yapmaktır. Uygun egzersiz veya hastalık için lif düzeyi adaptasyonları belirlemek için, biyopsiler uygun bir tekniktir. Ancak doku çekimi sırasında kas hasarına karşı korunmaya özen verilmelidir.Burada gösterilen protokol bu amaçlar için kas dokusunun yüksek verim sağlar.

collection-skeletal-muscle-biopsies-from-superior-compartment-human

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

İzole İskelet Kası Myo-mekanik Analizi

Ekstremite kas kasılma ve pasif mekanik özelliklerinde değişimler kas hastalıkları için önemli belirteçler vardır. Bu yazıda murin ekstansör digitorum longus ve tibialis anterior kaslar bu özellikleri ölçmek için fizyolojik testler anlatılmaktadır.

Ekstansör digitorum longus kas ve kas Fonksiyonunun Değerlendirilmesi<em&gt; Ex vivo</em&gt; Ve tibialis anterior kas<em&gt; Yerinde</em&gt; Farelerde

Bu videonun amacı, modifiye edilmiş Bergström iskelet kası biyopsi tekniğini insan denekler üzerinde sunmaktır.

Modifiye Bergström Tekniği İnsan İskelet Kası Biyopsi Prosedürleri

İnsan kasından türetilen ana yapışık hücre tipleri miyojenik hücreler ve fibroblastlardır. Burada, hücre popülasyonları, CD56 antijenine dayalı olarak manyetik olarak aktive edilen hücre sıralaması kullanılarak zenginleştirilir. Spesifik antikorlarla müteakip immüno-etiketleme ve görüntü analiz tekniklerinin kullanılması, tek tek hücrelerde sitoplazmik ve nükleer özelliklerin miktar tayinine izin verir.

İnsan İskelet Kası İlköğretim andMyogenic Hücreleri ve Fibroblast İzolasyon ve Kantitatif İmmünositokimyasal Karakterizasyonu

Bu video, Weil-Blakesley konkotomu kullanılarak insan vastus lateralisinin perkütan kas biyopsisi tekniğini göstermektedir.

İnsan<em&gt; Vastus lateralis</em&gt; Weil-Blakesley Conchotome kullanılması İskelet Kası Biyopsi

İmmunohistokimyasal myosin ağır zincir izoformlarının boyama iskelet kas lif tipi state-of--art ayrıştırıcı çıkmıştır (Yani, tip ı, IIA yazın, yazın IIX, IIB yazın). Burada, bir boyama protokol hızlı fiber türü ve lif morfolojisi değerlendirilmesi kolaylaştırır bir roman yarı otomatik algoritması ile birlikte mevcut.

Fare kas iskelet morfoloji ve Fiber türü kompozisyon yarı otomatik analizi

Corticomotor yanıt tibialis anterior ve soleus aynı anda, iki taraflı değerlendirilmesi bir tek darbe Transkraniyal Manyetik stimülasyon ve neuronavigation kullanarak dinlenme ve tonik gönüllü etkinleştirme sırasında mevcut protokolünü açıklar sistem.

Transkraniyal Manyetik stimülasyon ikili Corticospinal yolları kullanarak ayak bileği kas değerlendirilmesi navigasyon

İskelet kas biyopsi sözünde nizolating, culturing, karakterizasyonu ve insan primer kas atası hücreleri (hMPCs) ayırt etme teknikleri salıyoruz.  bu yöntemlerle elde edilen ve karakterize edilen hMPC'ler daha sonra insan miyogenezi ve iskelet kası rejenerasyonu ile ilgili araştırma sorularını ele almak için kullanılabilir.

İskelet Kas Biyopsisi Prosedüründen İnsan Kas Atası Hücrelerinin İzolasyon, Kültür, Karakterizasyonu ve Farklılaşması

Burada açıklanan kas kriyokesitlerinde nekrotik miyofiberlerin doğrudan immünolabelling için bir protokoldür. Nekrotik hücreler immünglobulin G (IgG) dahil olmak üzere serum proteinlerine geçirilebilir. Miyofiberler tarafından IgG alımının ortaya çıkması, kas durumuna bakılmaksızın nekroz geçiren miyoliflerin tanımlanmasını ve ölçülmesine olanak sağlar.

Kas Biyopsilerinde İmmünlabelling Miyofiber Dejenerasyon

Protokol, özel uyumlu 3D baskılı armatürleri kullanarak rürinten tülonlar için etkili ve tekrarlanabilir gerilebilir biyomekanik test yöntemlerini tanımlar.

Murine Tendonunun Biyomekanik Testi

Bu protokol, mekanik dekolman, enzimatik ayrışma, filtrasyon ve diferansiyel ultrasantrifüjleme yoluyla iskelet kası interstisyel hücre dışı veziküllerini (SkM-EV'ler) kemirgen kas dokularından izole etmeyi ve saflaştırmayı amaçlar. Tutarlılık ve güvenilirlik gösterir. İzole edilmiş SkM-EV'ler, tanısal biyobelirteçler veya terapötik araçlar olarak potansiyel uygulamalarla birlikte kas homeostazı ve hastalıkları hakkında bilgi sağlar.

İskelet Kası İnterstisyel Hücre Dışı Veziküllerin Enzimatik İzolasyonu

Öğrenin, modifiye Bergström tekniğiyle insan tibialis anterior kasından biyopsi almayı. Bu yöntem lif hasarını sınırlayarak mekanik değerlendirme için daha uzun ve sağlıklı kas lifleri elde edilmesini sağlar.

Mekanik Değerlendirme için İnsan Musculus Tibialis Anterior Üstün Bölmesi İskelet Kas Biyopsileri Toplama

Daha fazla video keşfet