Name: Altın Nanopartikülleri ve Cucurbit n uril Agregaları İçinde Hassas Plazmonik Nanokavşakların Oluşumu Yoluyla Ürik Asidin Kantitatif SERS Tespiti (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-10-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 2 s
Description: Öğrenin, ürik asidin hassas SERS tespiti için altın nanopartiküller ve cucurbit[7]uril agregaları kullanarak plazmonik nanokavşaklar oluşturma yöntemini. Bu teknik, biyobelirteçlerin kantitatif analizinde klinik tanı ve çevresel izleme uygulamaları için değerlidir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

TCL, Royal Society Research Grant 2016 R1 (RG150551) ve EPSRC (EP/P511262/1) tarafından Kurumsal Sponsorluk ödülü ile finanse edilen UCL BEAMS Geleceğin Lideri Ödülü'nün desteğine minnettardır. WIKC, TCL ve IPP, EPSRC M3S CDT (EP / L015862 / 1) aracılığıyla A*STAR-UCL Araştırma Ek Programı tarafından finanse edilen Öğrenciliğe minnettardır. GD ve TJ, EPSRC M3S CDT'YE (EP/L015862/1) öğrenciliklerine sponsor oldukları için teşekkür eder. TJ ve TCL, Camtech Innovations'ı TJ'nin öğrenciliğine katkılarından dolayı takdir eder. Tüm yazarlar UCL Açık Erişim Fonu'na minnettardır.

1. Au NP'lerin Sentezi
<ol><li>Au tohumlarının geleneksel Turkevich yöntemi ile sentezi26<ol>
<li>98.5 mg HAuCl 4· çözerek 10 mL 25 mM HAuCl4 çözeltisi hazırlayın 3H2O bir cam şişede 10 mL deiyonize su içeren öncül. NOT: Az miktarda HAuCl 4 öncüsünü bir tartım teknesine aktarın ve kristalleri tartmak için metalik spatula yerine plastik bir spatula kullanın, çünkü HAuCl4 öncüsü metal laboratuvar gereçlerini aşındıracaktır. HAuCl4 higroskopik olduğundan ve bu nedenle atmosferden su emerek zamanla ağırlığını artıracağından tartım adımı mümkün olduğunca hızlı bir şekilde gerçekleştirilmelidir. HAuCl4 oldukça aşındırıcıdır ve ciddi cilt yanıklarına ve göz hasarına neden olabilir. Kullanırken ekstra özen gösterin.</li>
		<li>Bir cam şişede 0.5 mL deiyonize su ile 64.5 mg sodyum sitrat tozunu çözerek 0.5 mL 500 mM sodyum sitrat çözeltisi hazırlayın.</li>
		<li>100 mL 0,25 mM HAuCl 4 çözeltisi vermek için 25 mM HAuCl4 çözeltisinin 1 mL'sini 250 mL mavi kapaklı bir şişede 99 mL su ile seyreltin.</li>
		<li>0,25 mM HAuCl 4 çözeltisinin 99,5 mL'sini, bir kondenserle donatılmış 250 mL'lik üç boyunlu yuvarlak tabanlı bir şişeye ekleyin. Çözeltiyi kuvvetli bir şekilde karıştırarak 90 ° C'ye ısıtın ve sıcaklığı 15 dakika boyunca koruyun.</li>
		<li>500 mM sodyum sitrat çözeltisinin 0,5 mL'sini reaksiyon karışımına enjekte edin ve çözeltinin rengi yakut kırmızısına dönene kadar sıcaklığı ve karıştırmayı koruyun. NOT: Reaksiyon yaklaşık 30 dakika sürer.</li>
	</ol></li>
	<li>Kinetik olarak kontrol edilen yöntemle Au NP'lerin tohumlanmış büyümesi13
	<ol>
<li>Sentezlenmiş Au tohumu çözeltisini 70 °C'ye soğutun.</li>
		<li>Bir cam şişede 10 mL deiyonize su ile 154.8 mg sodyum sitrat tozu çözerek 10 mL 60 mM sodyum sitrat çözeltisi hazırlayın.</li>
		<li>25 mM HAuCl4 çözeltisinin 0,67 mL'sini ve 60 mM sodyum sitrat çözeltisinin 0,67 mL'sini 2 dakikalık bir zaman aralığıyla Au tohumlarına enjekte edin.</li>
		<li>Au NP'lerin boyutunu kademeli olarak 40 nm'ye çıkarmak için adım 1.2.3'ü tekrarlayın. NOT: 40 nm'ye ulaşmak için yaklaşık 10 büyüme adımı gerekir. Gerekli gerçek adım sayısı, kesin kuruluma bağlı olabilir.</li>
	</ol></li>
	<li>Otomatik sentezleyici kullanılarak Au NP'lerin tohumlanmış büyümesi (Şekil 2)
	<ol>
<li>Bölüm 1'de hazırlanan Au tohumu çözeltisinin 25 mL'sini 50 mL'lik bir konik santrifüj tüpüne aktarın ve bir termomikserde 70 °C'ye soğutun. NOT: 25 mL su içeren 50 mL'lik bir santrifüj tüpüne yerleştirilmiş bir termokupl termometre kullanarak termomikserin içindeki sıcaklığı izleyin.</li>
		<li>3 mL Luer kilitli tek kullanımlık şırıngayı 2,5 mL 25 mM HAuCl4 çözeltisi ile doldurun. Başka bir 3 mL Luer kilit tek kullanımlık şırıngayı 2,5 mL 60 mM sodyum sitrat çözeltisi ile doldurun.</li>
		<li>Şırıngaları şırınga pompalarına yerleştirin ve PEEK borusunu (150 μm iç çap) şırıngalara bağlamak için Luer-to-MicroTight adaptörlerini kullanın. Boruyu, termomikserdeki Au tohumu çözeltisini içeren santrifüj tüpüne yerleştirin.</li>
		<li>Her iki şırınga pompasını da 20 dakika boyunca (dakikada 8,357 μL) 0,1675 mL çözelti dağıtacak şekilde ayarlayın.</li>
		<li>Termomikser dönüş hızını 700 rpm'ye ayarlayın ve 25 mM HAuCl 4 çözeltisini içeren şırınga pompasındaBaşlat'a basın.</li>
		<li>2 dakika sonra, 60 mM sodyum sitrat çözeltisini içeren şırınga pompasında Başlat'a basın.</li>
		<li>HAuCl4 çözeltisi enjeksiyonuna başladıktan 30 dakika sonra, analiz için Au NP çözeltisinin bir aliquot'unu çıkarın.</li>
		<li>Au NP'lerin çapını kademeli olarak 40 nm'ye çıkarmak için 1.3.5 – 1.3.7 arasındaki adımları tekrarlayın. NOT: Bu kurulum, adım 1.3.4'te eklenen reaktanların hacmini artırarak Au NP'leri bir adımda 40 nm'ye kadar büyütmek için kullanılabilir. Bu, aynı enjeksiyon oranını korurken dağıtım süresini artırarak elde edilir.</li>
	</ol></li>
</ol>2. Au NP'lerin Karakterizasyonu
<ol><li>UV-Vis spektroskopisi<ol>
<li>Yarı mikro kuvars küvete 1 mL Au NP çözeltisi ekleyin.</li>
		<li>Spektrometreyi açın.</li>
		<li>Dalga boyu aralığını 400 - 800 nm olarak ayarlayın.</li>
		<li>Her numune için UV-Vis spektrumunu edinin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Dinamik ışık saçılımı (DLS)<ol>
<li>Numune çözeltisini 0,22 μm filtreli plastik bir yarı mikro küvete filtreleyin.</li>
		<li>DLS cihazını açın.</li>
		<li>Sıcaklığı 25 ° C'ye ayarlayın ve 60 s için dengeleyin.</li>
		<li>Her numunenin hidrodinamik boyutunu ölçün.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Transmisyon elektron mikroskobu (TEM)<ol>
<li>Numune çözeltisinin 5 μL'lik bir damlacığını C kaplı 300 mesh Cu ızgaraya damlatın ve havada kurutun. NOT: Bir TEM ızgarasında iyi dağılmış Au NP'ler elde etmek üzere daha konsantre Au NP çözelti numuneleri için seyreltme gereklidir.</li>
		<li>200 kV hızlanma voltajında bir TEM kullanarak her numune için birden fazla TEM görüntüsü elde edin.</li>
		<li>Ortalama boyutu ve standart sapmayı hesaplamak için ImageJ kullanarak her numune için 200 Au NP çapını ölçün.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. CB7-UA komplekslerinin oluşumu
<ol><li>0,4 mM CB7 çözeltisinin hazırlanması<ol>
<li>15 mL'lik bir cam şişeye 4.65 mg CB7 ekleyin. NOT: CB7 miktarı, literatürdeki çoğu raporda kullanılan CB7'nin (= 1163 Da) formül ağırlığına göre hesaplanır. Bununla birlikte, CB7 katı numuneleri tipik olarak sentez ve saflaştırma adımlarından kalan su, HCl, metanol ve diğer tuzları içerir ve numunede ~% 10 – 20 ölü ağırlığa katkıda bulunur. Sıkışmış çözücüler ve tuzlar, vakumlu fırında veya başka yollarla ısıtılarak uzaklaştırılamadı. Miktarları farklı numune partileri arasında değişir, ancak element analizi kullanılarak ölçülebilir. Bununla birlikte, sunulan protokol, CB7 numunelerinde ölçülmemiş miktarda çözücü ve tuz varlığına duyarlı değildir.</li>
		<li>Şişeye 10 mL su ekleyin ve kapağı sıkın.</li>
		<li>CB7 katı tamamen çözünene kadar numuneyi oda sıcaklığında sonikleştirin. NOT: CB7, literatür27'ye göre sentezlenmiştir, ancak ticari olarak da temin edilebilir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>0,4 mM UA çözeltisinin hazırlanması<ol>
<li>50 mL'lik bir santrifüj tüpüne 2.69 mg UA ekleyin.</li>
		<li>Tüpe 40 mL su ekleyin ve kapağı sıkın.</li>
		<li>Sıcaklığı 70 °C'ye, hızı 800 rpm'ye ve zamanı 2 saate ayarlayarak numune çözeltisini döndürmek için bir termomikser kullanın. Çözeltinin oda sıcaklığına soğumasını bekleyin. NOT: UA suda düşük çözünürlüğe sahiptir (0,40 mM)5. UA tozu tamamen çözülmemişse daha uzun süre girdap. Alternatif olarak, ultrasonication çözünmeyi kolaylaştırmak için kullanılabilir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>0,4 mM UA çözeltisinin sıralı seyreltmeleri<ol>
<li>10 mL 0,2 mM UA çözeltisi vermek için 0,4 mM UA çözeltisinin 5 mL'sini 15 mL'lik bir cam şişede 5 mL su ile seyreltin. Kapağı sıkın ve 30 s boyunca sonikasyon yapın.</li>
		<li>Tablo 1'de açıklandığı gibi uygun miktarda UA ve su kullanarak adım 3.3.1'i yineleyin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>CB7-UA komplekslerinin hazırlanması<ol>
<li>1,5 mL'lik bir tüpe 0,4 mM CB7 çözeltisinin 0,75 mL'sini ve 0,75 mL'lik 0,4 mM UA çözeltisinin 0,75 mL'sini ekleyin. Kapağı sabitleyin ve 30 s boyunca sonikat yapın.</li>
		<li>Ev sahibi-misafir komplekslerinin oluşumunu sağlamak için 30 dakika bekleyin.</li>
		<li>Farklı konsantrasyonlarda UA çözeltisi kullanarak adım 3.4.1 - 3.4.2'yi tekrarlayın.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. UA'nın SERS algılaması
<ol><li>Raman sisteminin deneysel kurulumu (Şekil 3)<ol>
<li>633 nm He-Ne lazeri (22,5 mW) açın.</li>
		<li>Modüler Raman spektrometresini açın.</li>
		<li>Bilgisayarı açın ve yazılımı başlatın.</li>
		<li>Spektroskopi Uygulama Sihirbazı Simgesi'ne tıklayın ve ardından Raman'ı seçin.</li>
		<li>Yeni bir satın alma işlemi başlatın. Entegrasyon süresini 30 sn'ye, taramaları ortalama 5 sn'ye ve boxcar'ı 0'a ayarlayın.</li>
		<li>Arka plan spektrumunu saklayın ve lazer dalga boyunu girin (yani, 633 nm). NOT: Entegrasyon süresi her taramanın süresidir, ortalamaya göre taramalar her spektrumu oluşturmak için ortalama tarama sayısıdır ve boxcar ortalama28 komşu piksel sayısıdır.</li>
	</ol>
</li>
	<li>SERS substratlarının oluşumu<ol>
<li>1,5 mL'lik bir tüpe 40 nm Au NP çözeltisinin 0,9 mL'sini ve önceden oluşturulmuş CB7-UA kompleks çözeltisinin 0,1 mL'sini ekleyin. Kapağı sabitleyin ve çözelti yakut kırmızısından mora değişene kadar sonikat yapın. NOT: Ticari sitrat stabilize 40 nm Au NP çözelti numuneleri de kullanılabilir. Tipik olarak, lokalize yüzey plazmon rezonans (LSPR) zirvesinin optik yoğunluğu, konsantre stok çözeltisi numunelerinden seyreltme yoluyla 1'e ayarlanır. Numunedeki sitrat konsantrasyonu tipik olarak 2 mM olarak tutulur.</li>
		<li>Numune çözeltisini yarı mikro bir küvete aktarın. Küveti Raman numune tutucusuna yerleştirin ve kapağı kapatın.</li>
		<li>Ölçümü başlatın.</li>
		<li>Beş ardışık SERS spektrumunu kaydetmek için otomatik kaydetmeyi ayarlayın.</li>
		<li>Ölçümü durdurun ve numuneyi değiştirin.</li>
		<li>Farklı konsantrasyonlarda CB7-UA çözeltisi kullanarak adım 4.2.1 - 4.2.5'i tekrarlayın. NOT: Toplama süresinin, Au NP'lerin toplanmasına aracılık etmeye büyük katkısı olan boş CB7 konsantrasyonundaki fark nedeniyle, 0.1 μM UA için 30 s ile 20 μM UA için 30 dakika arasında değişen nanoagregalardaki UA konsantrasyonuna bağlı olduğu bulunmuştur. CB7-UA kompleksi için, bir portal hacimli UA molekülü tarafından bloke edilir, bu da onu Au NP yüzeyine bağlanmak için kullanılamaz hale getirir ve bu nedenle NP agregasyonu21'e aracılık edemez. Çözeltinin rengi yakut kırmızısından mora değiştiğinde numune ölçüm için hazırdır.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. Veri analizi
<ol><li>Bilgi işlem<ol>
<li>Asimetrik en küçük kareler (ALS) eklentisine sahip taban çizgisini indirin ve Origin'e yükleyin. NOT: ALS eklentisi OriginPro gerektirir.</li>
		<li>Ham verileri Origin'e ekleyin.</li>
		<li>Her numunenin beş SERS spektrumundan ortalama bir değer hesaplayın. Değeri lazerin gücüne (yani 22,5 mW) ve entegrasyon süresine (yani 30 sn) bölün.</li>
		<li>İletişim kutusunu açmak için ALS simgesine tıklayın. Her ortalama spektrumun taban çizgisini düzeltmek için asimetrik faktörü 0,001'e, eşiği %0,03'e, yumuşatma faktörünü 2'ye ve yineleme sayısını 20'ye ayarlayın.</li>
		<li>Farklı UA konsantrasyonlarının SERS spektrumlarını, y ofsetleri ile istiflenmiş çizgiler kullanarak çizin. Çıkış, Raman kaymasına (cm-1) karşı yoğunluk (s-1 mW-1 s-1 sayılır) olmalıdır.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Villa, J. E. L., Poppi, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+portable+SERS+method+for+the+determination+of+uric+acid+using+a+paper-based+substrate+and+multivariate+curve+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Analyst%22%5BJournal%5D)">A portable SERS method for the determination of uric acid using a paper-based substrate and multivariate curve resolution.</a> Analyst. 141 (6), 1966-1972 (2016).</li>
<li>Westley, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Absolute+Quantification+of+Uric+Acid+in+Human+Urine+Using+Surface+Enhanced+Raman+Scattering+with+the+Standard+Addition+Method%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Absolute Quantification of Uric Acid in Human Urine Using Surface Enhanced Raman Scattering with the Standard Addition Method.</a> Analytical Chemistry. 89 (4), 2472-2477 (2017).</li>
<li>Zhao, L., Blackburn, J., Brosseau, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+Detection+of+Uric+Acid+by+Electrochemical-Surface+Enhanced+Raman+Spectroscopy+Using+a+Multilayered+Au%2FAg+Substrate%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Quantitative Detection of Uric Acid by Electrochemical-Surface Enhanced Raman Spectroscopy Using a Multilayered Au/Ag Substrate.</a> Analytical Chemistry. 87 (1), 441-447 (2015).</li>
<li>Goodall, B. L., Robinson, A. M., Brosseau, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrochemical-surface+enhanced+Raman+spectroscopy+%28E-SERS%29+of+uric+acid%3A+a+potential+rapid+diagnostic+method+for+early+preeclampsia+detection%5BTitle%5D)+AND+%22Physical+Chemistry+Chemical+Physics%22%5BJournal%5D)">Electrochemical-surface enhanced Raman spectroscopy (E-SERS) of uric acid: a potential rapid diagnostic method for early preeclampsia detection.</a> Physical Chemistry Chemical Physics. 15 (5), 1382-1388 (2013).</li>
<li>Lytvyn, Y., Perkins, B. A., Cherney, D. Z. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uric+Acid+as+a+Biomarker+and+a+Therapeutic+Target+in+Diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Diabetes%22%5BJournal%5D)">Uric Acid as a Biomarker and a Therapeutic Target in Diabetes.</a> Canadian Journal of Diabetes. 39 (3), 239-246 (2015).</li>
<li>Ali, S. M. U., Ibupoto, Z. H., Kashif, M., Hashim, U., Willander, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Potentiometric+Indirect+Uric+Acid+Sensor+Based+on+ZnO+Nanoflakes+and+Immobilized+Uricase%5BTitle%5D)+AND+%22Sensors%22%5BJournal%5D)">A Potentiometric Indirect Uric Acid Sensor Based on ZnO Nanoflakes and Immobilized Uricase.</a> Sensors. 12 (3), 2787-2797 (2012).</li>
<li>Yu, J., Wang, S., Ge, L., Ge, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+chemiluminescence+paper+microfluidic+biosensor+based+on+enzymatic+reaction+for+uric+acid+determination%5BTitle%5D)+AND+%22Biosensors+and+Bioelectronics%22%5BJournal%5D)">A novel chemiluminescence paper microfluidic biosensor based on enzymatic reaction for uric acid determination.</a> Biosensors and Bioelectronics. 26 (7), 3284-3289 (2011).</li>
<li>Yang, Y. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+determination+of+creatine%2C+uric+acid%2C+creatinine+and+hippuric+acid+in+urine+by+high+performance+liquid+chromatography%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedical+Chromatography%22%5BJournal%5D)">Simultaneous determination of creatine, uric acid, creatinine and hippuric acid in urine by high performance liquid chromatography.</a> Biomedical Chromatography. 12 (2), 47-49 (1999).</li>
<li>Zhao, S., Wang, J., Ye, F., Liu, Y. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+uric+acid+in+human+urine+and+serum+by+capillary+electrophoresis+with+chemiluminescence+detection%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Determination of uric acid in human urine and serum by capillary electrophoresis with chemiluminescence detection.</a> Analytical Biochemistry. 378 (2), 127-131 (2008).</li>
<li>Fang, Y., Seong, N. H., Dlott, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+the+Distribution+of+Site+Enhancements+in+Surface-Enhanced+Raman+Scattering%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Measurement of the Distribution of Site Enhancements in Surface-Enhanced Raman Scattering.</a> Science. 321 (5887), 388-392 (2008).</li>
<li>Jeong, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dispersion+and+shape+engineered+plasmonic+nanosensors%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Dispersion and shape engineered plasmonic nanosensors.</a> Nature Communications. 7, 11331(2016).</li>
<li>Alula, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+silver+nanoparticles+coated+ZnO%2FFe3O4+composites+using+chemical+reduction+method+for+sensitive+detection+of+uric+acid+via+surface-enhanced+Raman+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Analytica+Chimica+Acta%22%5BJournal%5D)">Preparation of silver nanoparticles coated ZnO/Fe3O4 composites using chemical reduction method for sensitive detection of uric acid via surface-enhanced Raman spectroscopy.</a> Analytica Chimica Acta. 1073, 62-71 (2019).</li>
<li>Bastús, N. G., Comenge, J., Puntes, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinetically+Controlled+Seeded+Growth+Synthesis+of+Citrate-Stabilized+Gold+Nanoparticles+of+up+to+200+nm%3A+Size+Focusing+versus+Ostwald+Ripening%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Kinetically Controlled Seeded Growth Synthesis of Citrate-Stabilized Gold Nanoparticles of up to 200 nm: Size Focusing versus Ostwald Ripening.</a> Langmuir. 27 (17), 11098-11105 (2011).</li>
<li>Jeong, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selectable+Nanopattern+Arrays+for+Nanolithographic+Imprint+and+Etch-Mask+Applications%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Science%22%5BJournal%5D)">Selectable Nanopattern Arrays for Nanolithographic Imprint and Etch-Mask Applications.</a> Advanced Science. 2 (7), 1500016(2016).</li>
<li>Loh, X. J., Lee, T. C., Dou, Q., Deen, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Utilising+inorganic+nanocarriers+for+gene+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials+Science%22%5BJournal%5D)">Utilising inorganic nanocarriers for gene delivery.</a> Biomaterials Science. 4 (1), 70-86 (2016).</li>
<li>Celiz, A. D., Lee, T. C., Scherman, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polymer-Mediated+Dispersion+of+Gold+Nanoparticles%3A+Using+Supramolecular+Moieties+on+the+Periphery%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Materials%22%5BJournal%5D)">Polymer-Mediated Dispersion of Gold Nanoparticles: Using Supramolecular Moieties on the Periphery.</a> Advanced Materials. 21 (38), 3937-3940 (2009).</li>
<li>Lee, T. C., Scherman, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Formation+of+Dynamic+Aggregates+in+Water+by+Cucurbit%5B5%5Duril+Capped+with+Gold+Nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22ChemComm%22%5BJournal%5D)">Formation of Dynamic Aggregates in Water by Cucurbit[5]uril Capped with Gold Nanoparticles.</a> ChemComm. 46 (14), 2438-2440 (2010).</li>
<li>Lee, T. C., Scherman, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Facile+Synthesis+of+Dynamic+Supramolecular+Aggregates+of+Cucurbit%5Bn%5Duril+%28n+%3D+5-8%29+Capped+with+Gold+Nanoparticles+in+Aqueous+Media%5BTitle%5D)+AND+%22Chemistry-A+European+Journal%22%5BJournal%5D)">A Facile Synthesis of Dynamic Supramolecular Aggregates of Cucurbit[n]uril (n = 5-8) Capped with Gold Nanoparticles in Aqueous Media.</a> Chemistry-A European Journal. 18 (6), 1628-1633 (2012).</li>
<li>Taylor, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Precise+Subnanometer+Plasmonic+Junctions+for+SERS+within+Gold+Nano-+particle+Assemblies+Using+Cucurbit%5Bn%5Duril+%22Glue%22%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Precise Subnanometer Plasmonic Junctions for SERS within Gold Nano- particle Assemblies Using Cucurbit[n]uril "Glue".</a> ACS Nano. 5 (5), 3878-3887 (2011).</li>
<li>Peveler, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cucurbituril-mediated+quantum+dot+aggregates+formed+by+aqueous+self-assembly+for+sensing+applications%5BTitle%5D)+AND+%22ChemComm%22%5BJournal%5D)">Cucurbituril-mediated quantum dot aggregates formed by aqueous self-assembly for sensing applications.</a> ChemComm. 55 (38), 5495-5498 (2019).</li>
<li>Chio, W. I. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+Detection+of+Nitroexplosives+Using+Molecular+Recognition+within+Self-Assembled+Plasmonic+Nanojunctions%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physical+Chemistry+C%22%5BJournal%5D)">Selective Detection of Nitroexplosives Using Molecular Recognition within Self-Assembled Plasmonic Nanojunctions.</a> The Journal of Physical Chemistry C. 123 (25), 15769-15776 (2019).</li>
<li>Kasera, S., Biedermann, F., Baumberg, J. J., Scherman, O. A., Mahajan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+SERS+Using+the+Sequestration+of+Small+Molecules+Inside+Precise+Plasmonic+Nanoconstructs%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Letters%22%5BJournal%5D)">Quantitative SERS Using the Sequestration of Small Molecules Inside Precise Plasmonic Nanoconstructs.</a> Nano Letters. 12 (11), 5924-5928 (2012).</li>
<li>Taylor, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+Situ+SERS+Monitoring+of+Photochemistry+within+a+Nanojunction+Reactor%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Letters%22%5BJournal%5D)">In Situ SERS Monitoring of Photochemistry within a Nanojunction Reactor.</a> Nano Letters. 13 (12), 5985-5990 (2013).</li>
<li>Kasera, S., Herrmann, L. O., Barrio, J. d, Baumberg, J. J., Scherman, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+Multiplexing+with+Nano-Self-Assemblies+in+SERS%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Quantitative Multiplexing with Nano-Self-Assemblies in SERS.</a> Scientific Reports. 4, 6785(2014).</li>
<li>Chio, W. I. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dual-triggered+nanoaggregates+of+cucurbit%5B7%5Duril+and+gold+nanoparticles+for+multi-spectroscopic+quantification+of+creatinine+in+urinalysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Materials+Chemistry+C%22%5BJournal%5D)">Dual-triggered nanoaggregates of cucurbit[7]uril and gold nanoparticles for multi-spectroscopic quantification of creatinine in urinalysis.</a> Journal of Materials Chemistry C. 8, 7051-7058 (2020).</li>
<li>Turkevich, J., Stevenson, P. C., Hillier, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+study+of+the+nucleation+and+growth+processes+in+the+synthesis+of+colloidal+gold%5BTitle%5D)+AND+%22Discussions+of+the+Faraday+Society%22%5BJournal%5D)">A study of the nucleation and growth processes in the synthesis of colloidal gold.</a> Discussions of the Faraday Society. 11, 55-75 (1951).</li>
<li>Lagona, J., Mukhopadhyay, P., Chakrabarti, S., Issacs, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cucurbit%5Bn%5Duril+family%5BTitle%5D)+AND+%22Angewandte+Chemie+International+Edition%22%5BJournal%5D)">The cucurbit[n]uril family.</a> Angewandte Chemie International Edition. 44 (31), 4844-4870 (2005).</li>
<li>OceanView Installation and Operation Manual. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.oceaninsight.com/globalassets/catalog-blocks-and-images/manuals--instruction-old-logo/software/oceanviewio.pdf">https://www.oceaninsight.com/globalassets/catalog-blocks-and-images/manuals--instruction-old-logo/software/oceanviewio.pdf</a> (2013).</li>
<li>Mahajan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raman+and+SERS+spectroscopy+of+cucurbit%5Bn%5Durils%5BTitle%5D)+AND+%22Physical+Chemistry+Chemical+Physics%22%5BJournal%5D)">Raman and SERS spectroscopy of cucurbit[n]urils.</a> Physical Chemistry Chemical Physics. 12 (35), 10429-10433 (2010).</li>
<li>Langer, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Present+and+Future+of+Surface-Enhanced+Raman+Scattering%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Present and Future of Surface-Enhanced Raman Scattering.</a> ACS Nano. 14 (1), 28-117 (2020).</li>
<li>Pilot, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Review+on+Surface-Enhanced+Raman+Scattering%5BTitle%5D)+AND+%22Biosensors%22%5BJournal%5D)">A Review on Surface-Enhanced Raman Scattering.</a> Biosensors. 9 (2), 57(2019).</li>
<li>Bantz, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+progress+in+SERS+biosensing%5BTitle%5D)+AND+%22Physical+Chemistry+Chemical+Physics%22%5BJournal%5D)">Recent progress in SERS biosensing.</a> Physical Chemistry Chemical Physics. 13 (24), 11551-11567 (2011).</li>
<li>Moore, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+Vitro+and+In+Vivo+SERS+Biosensing+for+Disease+Diagnosis%5BTitle%5D)+AND+%22Biosensors%22%5BJournal%5D)">In Vitro and In Vivo SERS Biosensing for Disease Diagnosis.</a> Biosensors. 8 (2), 46(2018).</li>
<li>Bonifacio, A., Cervo, S., Sergo, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-free+surface-enhanced+Raman+spectroscopy+of+biofluids%3A+fundamental+aspects+and+diagnostic+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+and+Bioanalytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Label-free surface-enhanced Raman spectroscopy of biofluids: fundamental aspects and diagnostic applications.</a> Analytical and Bioanalytical Chemistry. 407 (27), 8265-8277 (2015).</li>
<li>Jeong, H. H., Choi, E., Ellis, E., Lee, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+gold+nanoparticles+for+biomedical+applications%3A+from+hybrid+structures+to+multi-functionality%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Materials+Chemistry+B%22%5BJournal%5D)">Recent advances in gold nanoparticles for biomedical applications: from hybrid structures to multi-functionality.</a> Journal of Materials Chemistry B. 7 (22), 3480-3496 (2019).</li>
<li>Premasiri, W. R., Clarke, R. H., Womble, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Urine+Analysis+by+Laser+Raman+Spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Lasers+in+Surgery+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">Urine Analysis by Laser Raman Spectroscopy.</a> Lasers in Surgery and Medicine. 28 (4), 330-334 (2001).</li>
<li>Lu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Superhydrophobic+silver+film+as+a+SERS+substrate+for+the+detection+of+uric+acid+and+creatinine%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedical+Optics+Express%22%5BJournal%5D)">Superhydrophobic silver film as a SERS substrate for the detection of uric acid and creatinine.</a> Biomedical Optics Express. 9 (10), 4988-4997 (2018).</li>
<li>Feig, D. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serum+Uric+Acid%3A+A+Risk+Factor+and+a+Target+for+Treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Serum Uric Acid: A Risk Factor and a Target for Treatment.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 17 (4), 69-73 (2006).</li>
<li>Maiuolo, J., Oppedisano, F., Gratteri, S., Muscoli, C., Mollace, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+uric+acid+metabolism+and+excretion%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Regulation of uric acid metabolism and excretion.</a> International Journal of Cardiology. 213, 8-14 (2016).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyleri yoktur.

Protokolde açıklanan otomatik sentez yöntemi, artan boyutlardaki Au NP'lerin tekrarlanabilir şekilde sentezlenmesini sağlar. Tohum sentezi sırasında hızlı bir şekilde sodyum sitrat ilavesi ve PEEK borusunun güvenli olduğundan emin olmak için periyodik olarak kontrol edilmesi gibi hala manuel olarak yapılması gereken bazı elementler olmasına rağmen, bu yöntem genellikle HAuCl4 ve sodyum sitratın birden fazla manuel enjeksiyonunu gerektiren büyük boyutlarda (40 nm'ye kadar) Au NP'lere izin verir. uzun bir süre ...

Pürin nükleotidlerin metabolizmasının son ürünü olan ürik asit, gut, preeklampsi, böbrek hastalıkları, hipertansiyon, kardiyovasküler hastalıklar ve diyabet gibi hastalıkların tanısında kan serumu ve idrarda önemli bir biyobelirteçtir 1,2,3,4,5. Ürik asit tespiti için mevcut yöntemler arasında kolorimetrik enzimatik testler, yüksek performanslı sıvı kromatografisi ve kılcal elektroforez bulunmaktadır ve bunlar zaman alıcı, pahalı ve sofistike numune hazırlamagerektirir 6,7,8,9.
Yüzey ile geliştirilmiş Raman spektroskopisi, titreşim parmak izleri aracılığıyla biyomoleküllerin seçici tespitine izin verdiği ve yüksek hassasiyet, hızlı tepki, kullanım kolaylığı ve hiç veya minimum numune hazırlama gibi sayısız avantaj sunduğu için rutin bakım noktası teşhisi için umut verici bir tekniktir. Asil metal nanopartiküllere (örneğin, Au NP'ler) dayanan SERS substratları, yüzey plazmon rezonansı 11'in neden olduğu güçlü elektromanyetik iyileştirme yoluyla analit moleküllerinin Raman sinyallerini 4 ila10 büyüklük10 sırasına kadar artırabilir. Özel boyutlardaki Au NP'ler, karmaşık metal nanokompozitlerin zaman alıcı üretiminin aksine kolayca sentezlenebilir12 ve bu nedenle üstün özellikleri nedeniyle biyomedikal uygulamalarda yaygın olarak kullanılır13,14,15,16. Makrosiklik moleküllerin, cucurbit[n]urillerin (CB n, burada n = 5-8 , 10), Au NP'lerin yüzeyine bağlanması, yüksek simetrik ve sert CB molekülleri Au NP'ler arasındaki hassas aralığı kontrol edebildiğinden ve ana konakçı-misafir komplekslerinin oluşumu yoluyla merkezde veya plazmonik sıcak noktalara yakın yerlerde analize edebildiğinden, analit moleküllerinin SERS sinyallerini daha da artırabilir (Şekil 1)17, 18,19,20. Au NP: CBn nanoagregaları kullanan SERS çalışmalarının önceki örnekleri arasında nitropatlayıcılar, polisiklik aromatikler, diaminostilben, nörotransmiterler ve kreatinin21,22,23,24,25 bulunur ve SERS ölçümleri ya bir küvette ya da özel yapım bir numune tutucuya küçük bir damlacık yüklenerek gerçekleştirilir. Bu algılama şeması, yüksek tekrarlanabilirliğe sahip karmaşık bir matristeki biyobelirteçleri hızlı bir şekilde ölçmek için özellikle yararlıdır.
Burada, CB7'nin konakçı-misafir komplekslerini ve önemli bir biyobelirteç UA'yı oluşturmak ve sulu ortamda CB7 aracılı Au NP agregasyonları yoluyla 0.2 μM'lik bir tespit limiti ile UA'yı ölçmek için kolay bir yöntem, tanısal ve klinik uygulamalar için umut verici olan modüler bir spektrometre kullanılarak gösterilmiştir.

<table><tbody><tr><td>40 nm altın nanopartiküller</td><td>NanoComposix</td><td>AUCN40-100M</td><td>NanoXact, 0.05 mg/ mL, çıplak (sitrat)</td></tr><tr><td>Santrifüj tüpü</td><td>Corning Falcon</td><td>14-432-22</td><td>50 mL hacim</td></tr><tr><td>Kabakgil[7]uril</td><td>Laboratuvar yapımı</td><td></td><td>bakınız ref. 19</td></tr><tr><td>Altın(III) klorür trihidrat</td><td>Sigma aldrich</td><td>520918</td><td>&ge; % 99,9 eser metal bazlı</td></tr><tr><td>Luer kilit tek kullanımlık şırınga</td><td>Cole-Parmer</td><td>WZ-07945-15</td><td>3 mL hacim</td></tr><tr><td>Luer-MicroTight adaptör</td><td>LuerTight</td><td>P-662</td><td>360 & mu; m dış çap Luer Şırınga için Boru</td></tr><tr><td>PEEK boru</td><td>IDEX</td><td>1572</td><td>360 & mu; m dış çap, 150 &mu; m iç çap</td></tr><tr><td>PEEK boru kesici</td><td>IDEX</td><td>WZ-02013-30</td><td>360 ve mikro için Kılcal Polimer Kromatografi Boru Kesici; m ila 1/32 "OD boru</td></tr><tr><td>Raman spektrometresi</td><td>Okyanus Optiği</td><td>QE pro</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum sitrat tribazik dihidrat</td><td>Sigma aldrich</td><td>S4641</td><td>ACS reaktifi, > % 99,0</td></tr> <tr><td>Sonikatör</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Standart Prob</td><td>Digi-Sense</td><td>WZ-08516-55</td><td>Type-K</td></tr><tr><td>Şırınga pompası</td><td>Aladdin</td><td>ALADDIN2-220</td><td>2 şırınga, maksimum şırınga hacmi 60 mL</td></tr><tr><td>Termokupl termometre</td><td>Digi-Sense</td><td>WZ-20250-91</td><td>NIST-İzlenebilir Kalibrasyon ThermoMixer ile Tek Girişli Termokupl Termometre</td></tr><tr><td></td><td>Eppendorf</td><td>5382000031</td><td>50 mL tüpler için Eppendorf SmartBlock ile</td></tr><tr><td>Ürik asit</td><td>Sigma aldrich</td><td>U2625</td><td>&ge; %99, kristal</td></tr></tbody></table>

altın nanopartikülleri ve cucurbit [n]uril agregaları İçinde hassas plazmonik nanokavşakların oluşumu yoluyla Ürik asidin kantitatif sers tespiti

Quantitative SERS Detection of Uric Acid via Formation of Precise Plasmonic Nanojunctions within Aggregates of Gold Nanoparticles and Cucurbit[n]uril

Bu çalışma, modüler bir spektrometre kullanarak, parmak izi bölgesindeki çoklu karakteristik zirveler için ~ 0,2 μM'lik düşük algılama sınırına sahip yüzeyle geliştirilmiş Raman spektroskopisi (SERS) yoluyla önemli bir biyobelirteç olan ürik asidin (UA) kantitatif tespiti için hızlı ve oldukça hassas bir yöntemi açıklamaktadır. Bu biyosensing şemasına, bir makro döngü, cucurbit [7] uril (CB7) ve UA arasındaki konakçı-konuk kompleksi ve daha sonra kendi kendine monte edilmiş Au NP: CB7 nanoagregaları içinde hassas plazmonik nanokavşakların oluşumu aracılık eder. SERS substratları için arzu edilen boyutların basit bir Au NP sentezi, klasik sitrat indirgeme yaklaşımına dayanarak, laboratuar yapımı otomatik bir sentezleyici kullanılarak kolaylaştırılma seçeneği ile gerçekleştirilmiştir. Bu protokol, klinik uygulamalar için vücut sıvılarındaki biyobelirteçlerin çoklanmış tespitine kolayca genişletilebilir.

Sunulan Au NP sentezinde, UV-Vis spektrumları, 10 büyüme adımından sonra LSPR zirvelerinin 521 nm'den 529 nm'ye kaydığını gösterirken (Şekil 4 A, B), DLS verileri, Au NP'lerin boyutu 25.9 nm'den 42.8 nm'ye yükseldikçe dar bir boyut dağılımı göstermektedir (Şekil 4C, D). TEM görüntülerinden ölçülen G0, G5 ve G10'un ortalama boyutları (Şekil 4E) sırasıyla 20.1 ± 2.1 nm, 32.5 ± 2.3 nm ve 40.0 ± 2.2 nm'...

Modüler bir spektrometre kullanarak kantitatif yüzey ile geliştirilmiş Raman spektroskopisi (SERS) algılaması için Au NP çözeltisine az miktarda eklenmeden önce sulu bir çözeltide cucurbit[7]uril ve ürik asitten oluşan bir konakçı-konuk kompleksi oluşturulmuştur.

Altın Nanopartikülleri ve Cucurbit [n]uril Agregaları İçinde Hassas Plazmonik Nanokavşakların Oluşumu Yoluyla Ürik Asidin Kantitatif SERS Tespiti

This work describes a rapid and highly sensitive method for the quantitative detection of an important biomarker, uric acid (UA), via surface-enhanced ...

Bu protokol, ürik asidi yüksek hassasiyetle tespit etmek ve miktarını belirlemek için çok yönlü bir yöntem sunar. Bu nedenle, tanısal ve klinik uygulamalar için bir protokoldür. Bu protokol, vücut sıvıları gibi karmaşık bir matristeki biyobelirteçleri hızlı bir şekilde ölçebilir.Bu teknik, gut, hipertansiyon ve kardiyovasküler hastalıklar gibi ürik asidi biyobelirteç olarak kullanan hastalıkları teşhis etmek için potansiyel olarak genişletilebilir. Çevresel izleme için diğer tehlikeli maddeleri tespit etmek ve ölçmek için de kullanılabilir. Protokolü ilk kez denerken, araştırmacılar CB7 ve altın nanopartiküllerin kararlı agregalarını oluşturmak için mücadele edebilirler.Altın nanopartiküllerin CB7 çözeltilerinde sonikasyon kullanılarak karıştırılması, diğer tekniklerin agregasyon kinetiğini etkileyebileceği için önerilir. CB7 karışımı eklemenin kritik adımlarını gösteren bir video, sisteme yeni giren araştırmacılar için başarı ve tekrarlanabilirlik şansını artırabilir. Altın tohum sentezi için, bir cam şişede 25 milimolar aurik klorür çözeltisi ve 500 mikrolitre deiyonize su içinde 64.5 miligram sodyum sitrat tozu elde etmek için bir cam şişede 10 mililitre deiyonize su içinde 98.5 miligram aurik çözün.Daha sonra, 0.25 milimolar aurik klorür çözeltisi elde etmek için bir mililitre aurik klorür çözeltisini 250 mililitrelik mavi kapaklı bir şişede 99 mililitre su ile seyreltin ve 99.5 mililitre 0.25 milimolar aurik klorür çözeltisi ekleyin 250 mililitrelik üç boyunlu yuvarlak tabanlı bir şişeye bir kondansatör ile donatılmıştır. Daha sonra, çözeltiyi 90 santigrat derecede ısıtın, 15 dakika boyunca kuvvetlice karıştırarak, 500 mikrolitre sodyum sitrat çözeltisini şişeye enjekte etmeden önce, çözelti yakut kırmızısına dönene kadar karıştırmaya devam edin. Altın nanopartiküllerin tohumlanmış büyümesini başlatmak için, 25 mililitre altın tohumu çözeltisini 50 mililitrelik bir tüpe aktarın ve çözeltiyi bir ThermoMixer'da 70 dereceye kadar soğutun.Çözelti soğurken, üç mililitre Luer kilitli tek kullanımlık şırıngayı 2.5 mililitre 25 milimolar aurik klorür çözeltisi ile doldurun ve başka bir üç milimetre Luer kilitli tek kullanımlık şırıngayı 2.5 mililitre 60 milimolar sodyum sitrat çözeltisi ile doldurun. Şırıngaları şırınga pompalarına yerleştirin ve 150 mikromolar iç çaplı PEEK borusunu şırıngalara bağlamak için Luer-MicroTight Adaptörleri kullanın. Hortumu ThermoMixer'da soğutulmuş altın tohum çözeltisini içeren santrifüj tüpüne yerleştirin ve her iki şırınga pompasını da 20 dakika boyunca 167,5 mikrolitre çözelti dağıtacak şekilde ayarlayın.ThermoMixer dönüş hızını dakikada 600 dönüşe ayarlayın ve 25 milimolar aurik klorür çözeltisi içeren şırınga pompasında Başlat'a basın. İki dakika sonra, 60 milimolar sodyum sitrat çözeltisi içeren şırınga pompasında Başlat'a basın. 30 dakika sonra, analiz için altın nanopartikül çözeltisinin bir kısmını çıkarın.0.4 milimolar CB7 çözeltisi hazırlamak için, 15 mililitrelik bir cam şişeye 4.65 miligram CB7 ve şişeye 10 mililitre su ekleyin. Sıkıca kapattıktan sonra, CB7 katı tamamen çözülene kadar şişeyi oda sıcaklığında sonikasyona tabi tutun. 0.4 milimolar ürik asit çözeltisi hazırlamak için, 50 mililitrelik bir santrifüj tüpüne 2.69 miligram ürik asit ekleyin ve tüpe 40 mililitre su ekleyin.Sıkıca kapattıktan sonra, karışımı iki saat boyunca 70 santigrat dereceye ve dakikada 800 devire ayarlanmış bir ThermoMixer'da döndürün. Çözelti oda sıcaklığına soğuduğunda, 0.04 milimolar ürik asit çözeltisi elde etmek için 0.04 milimolar ürik asit çözeltisinin bir mililitresini 15 mililitrelik bir cam şişede dokuz mililitre su ile seyreltin. Sıkıca kapattıktan sonra, şişeyi 30 saniye boyunca sonikasyona tabi tutun.CB7-ürik asit komplekslerini hazırlamak için, 1.5 mililitrelik bir tüpe 750 mikrolitre 0.4 milimolar CB7 çözeltisi ve 750 mikrolitre 0.4 milimolar ürik asit çözeltisi ekleyin ve karışımı 30 saniye boyunca sonikleştirin. Daha sonra ev sahibi-misafir komplekslerinin oluşumunu sağlamak için tüpü oda sıcaklığında 30 dakika tutun. Raman sistem yazılımındaki spektroskopi uygulama sihirbazları simgesine tıklayın ve Raman'ı seçin.Yeni bir satın alma başlatın ve entegrasyon süresini 30 saniyeye, taramaları ortalamaya beşe ve yük vagonunu sıfıra ayarlayın. Ardından arka plan spektrumunu saklayın ve lazer dalga boyunu girin. SERS substrat oluşumu için, 1.5 mililitrelik bir tüpe 900 mikrolitre 40 nanometre altın nanopartikül çözeltisi ve 100 mikrolitre önceden oluşturulmuş CB7-ürik asit kompleksi çözeltisi ekleyin ve çözelti yakut kırmızısından mora dönene kadar sonikat ekleyin.Numune çözeltisini yarı mikro bir küvete aktarın ve küveti Raman numune tutucusuna yerleştirin. Kapağı kapatın ve ölçümü başlatın. Ardından, otomatik kaydetmeyi art arda beş SERS spektrumu kaydedecek şekilde ayarlayın.Sentezlenen altın nanopartiküller için ultraviyole görünür spektrumlar, 10 büyüme adımından sonra lokalize yüzey plazmon rezonans zirvelerinin 521'den 529 nanometreye kaydığını gösterirken, dinamik ışık saçılma verileri, nanopartiküllerin boyutu 25.9'dan 42.8 nanometreye yükseldikçe dar bir boyut dağılımı göstermektedir. Transmisyon elektron görüntülerinden ölçülen ortalama G0, G5 ve G10 boyutları sırasıyla yaklaşık 20, 33 ve 40 nanometredir. Bu temsili analizlerde, SERS spektrumundaki karakteristik ürik asit sinyalleri tarafından desteklendiği gibi, altın nanopartikül CB7 nanoagregatları içinde hassas plazmonik nanoeklemlerin oluşumuna aracılık eden boş CB7 ile CB7 ve ürik asidin konak-konuk kompleksleri oluşturuldu.Tersine, CB7'nin yokluğunda ürik asidin hiçbir SERS sinyali gözlenemez, bu da CB7'nin altın nanopartikül agregasyonunu tetiklemedeki kilit rolünü gösterir. Bu protokolde sunulan tespit şemasının yüksek hassasiyeti, 640 ve 1130 karşılıklı santimetredeki ürik asit piklerinden 0.2 mikromolar tespit sınırına kadar net SERS sinyallerinin gözlemlenmesiyle gösterilmiştir. Ek olarak, ürik asidin SERS yoğunluğu ve log konsantrasyonları arasında çok güçlü korelasyonlar, 0.2 ila 2 mikromolar aralığında bulunan doğrusal bölgelere sahip her iki tepe için güç yasası ile elde edildi.Ürik asit suda düşük çözünürlüğe sahiptir, bu nedenle ürik asit tozunun bir sonraki adımdan önce yumuşak olduğundan emin olmak gerekir. Gelişmiş veri analizi gerçekleştirilebilir, bu da matriste bulunan birden fazla biyobelirteçin miktarını belirlemeyi mümkün kılar.

quantitative-sers-detection-uric-acid-via-formation-precise-plasmonic

Research

JoVE Journal

Chemistry

Kimya

Ayarlanabilir sıkılık manyetik boncuk seçim yöntemine dayalı olarak küçük moleküllü hedefler için yapı anahtarlamalı aptamerleri seçmek için bir protokol sağlanır. Yapı değiştirme özelliklerine sahip olarak seçilen aptamerler, tarif edilen altın nanopartikül tahlili gibi bir hedefin varlığını işaret etmek için konformasyonel bir değişiklik gerektiren tahliller için faydalıdır.

Bir Kolorimetrik Altın Nanopartikül Testi Uygulanan Yapı-anahtarlama aptamers seçilmesi için bir yöntem

Nanoparçacık tabanlı optik problar, Raman ve UV-Vis spektroskopisi kullanarak antijenleri tespit etmek için bir araç olarak tasarlanmıştır. Burada, gelecekteki çoğullama yeteneklerini içerecek şekilde bir UV-Vis/Raman spektroskopisi immünolojik testi için bu tür probların hazırlanması için bir protokol açıklanmaktadır.

Bir UV-Vis ve Raman Spektroskopisi İmmunoassay Platformu imalatı

Biz kolloidal tekniğinde teknikleri kullanarak periyodik altın nanocup dizilerin imalatı göstermek ve nanoplasmonic Filmler önemini tartışıyorlar.

Kolloidal litografi kullanarak periyodik altın Nanocup dizilerin imalatı

Bu çalışmada, sinyal enhancement-in nanoprobe tabanlı biosensing için bir protokol sunulmuştur. Protokol chloroauric asit, altın, gümüş, Silis veya demir-oksit nano tanecikleri oluşan mevcut nano-sondalar yüzeyinin azaltılması temel alır.

Hızlı Nanoprobe sinyal geliştirme içinde in Situ altın nanoparçacık sentezi tarafından

Bu çalışmanın amacı, nanopartikül izleme analizinin (NTA) sağlıklı yetişkinlerden gelen nanokristal içeren üriner kalsiyumu tespit edip ölçemediğini belirlemekti. Mevcut çalışmadan elde edilen bulgular, NTA'nın böbrek taşı hastalığı sırasında idrar nanokristallerini tahmin etmek için potansiyel bir araç olabileceğini göstermektedir.

Kalsiyum Florofor Etiketleme ve Nanopartikül Takip Analizi Kullanılarak İnsanlarda Üriner Nanokristallerin Tahmini

Mevcut protokol, hassas moleküler algılama için plazmonik nanopartikülleri manipüle etmek üzere optik yakalama ve yüzey ile geliştirilmiş Raman spektroskopisini (SERS) entegre etmek için uygun bir yaklaşımı açıklamaktadır. Ajanları toplamadan, yakalama lazeri, in situ spektroskopik ölçümler için hedef analitlerin SERS sinyallerini geliştirmek üzere plazmonik nanopartikülleri bir araya getirir.

In Situ Yüzey Geliştirilmiş Raman Spektroskopisi Karakterizasyonları için Plazmonik Nanopartiküllerin Optik Yakalanması

Protokol, yüzeyi geliştirilmiş Raman saçılma spektroskopisi ve görüntüleme kullanarak tek nanopartiküller üzerindeki elektrokimyasal olayların nasıl izleneceğini açıklar.

Yüzeyle Geliştirilmiş Raman Saçılma Spektroskopisi ve Mikroskobu ile Tek Nanopartiküller Üzerinde Elektrokimyanın İzlenmesi

Bu protokol, yüzeyde geliştirilmiş Raman saçılımı için esnek bir alt tabaka için bir üretim yöntemini açıklar. Bu yöntem, düşük konsantrasyonlarda R6G ve Thiram'ın başarılı bir şekilde tespit edilmesinde kullanılmıştır.

Ultra Hassas Algılama için Polidimetilsiloksan (PDMS) Bazlı Esnek Yüzeyle Geliştirilmiş Raman Saçılımı (SERS) Alt Tabakasının İmalatı

Burada, altın (Au) tohumlarının sentezi Turkevich yöntemi kullanılarak açıklanmaktadır. Bu tohumlar daha sonra ayarlanabilir plazmonik özelliklere sahip altın-kalay alaşımı (Au-Sn) nanopartiküllerini sentezlemek için kullanılır.

Plazmonik Altın-Kalay Alaşımı Nanopartiküllerinin Sulu Sentezi

Burada, etiketsiz yüzey takviyeli Raman spektroskopisi (SERS) kullanılarak bireysel küçük ekstrasellüler veziküllerini (sEV) analiz etmek için bir protokol sunuyoruz; bu protokol, minimal invaziv hastalık teşhisi ve sEV'lerin terapötik teslimat araçları olarak değerlendirilmesini mümkün kılmaktadır.

Hastalık Tanısı ve Tedavilerde Bireysel SEV'lerin Yüzeye Güçlendirilmiş Raman Saçılmasına Dayalı Biyosensörleme'nin Uygulanmasını Araştırmak

Öğrenin, ürik asidin hassas SERS tespiti için altın nanopartiküller ve cucurbit[7]uril agregaları kullanarak plazmonik nanokavşaklar oluşturma yöntemini. Bu teknik, biyobelirteçlerin kantitatif analizinde klinik tanı ve çevresel izleme uygulamaları için değerlidir.

Altın Nanopartikülleri ve Cucurbit n uril Agregaları İçinde Hassas Plazmonik Nanokavşakların Oluşumu Yoluyla Ürik Asidin Kantitatif SERS Tespiti (Video) | JoVE Journal

Altın Nanopartikülleri ve Cucurbit [n]uril Agregaları İçinde Hassas Plazmonik Nanokavşakların Oluşumu Yoluyla Ürik Asidin Kantitatif SERS Tespiti

Daha fazla video keşfet