Name: Bir Murine Kuyruk Lenfödem Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-02-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 38 s
Description: Öğrenin, fare kuyruk lenfödem modelinde doku nanotransfeksiyon teknolojisi kullanarak genetik kargo teslimatını ve lenfatik disfonksiyon mekanizmalarını inceleyin. Bu yöntem yenilikçi tedavi stratejileri geliştirmeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Amerikan Plastik Cerrahlar Birliği Akademik Bursu ve Savunma Bakanlığı W81XWH2110135 tarafından AHH'ye sağlanan hibe finansmanı   ile desteklendi. Estetik Cerrahi Eğitim ve Araştırma Vakfı'nın MS. NIH U01DK119099, R01NS042617 ve R01DK125835'e CKS'ye hibesi.

Protokol, kurumun hayvan araştırma etik komitesinin yönergelerine uyar. Tüm hayvan deneyleri Indiana Üniversitesi Tıp Fakültesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylandı. Hayvanlar, yiyecek ve su reklam libitum ile 12 saatlik açık-karanlık bir döngü altında barındırıldı.
1. Fare Kuyruğu Lenfatiklerinin Cerrahi Bozulması
<ol><li>Eşit cinsiyet dağılımında sekiz haftalık C57BL/6 fare kullanın.</li>
	<li>İşlem sırasında %100 oksijende %3-4 izofluran ve ardından %1-3 oranında bakım sedasyonu olan bir indüksiyon odasına genel anestezi altında bir fare yerleştirin.</li>
	<li>Ağrı kontrolü için 0,5 mg/kg sürekli salınım (SR) buprenorfin subkutan olarak uygulanır. NOT: Ameliyat sonrası uygulanan ek analjezik ilaçlar: Carprofen her 24 saat en az 48 saat boyunca ve Bupivacaine bir kez ya kesi yapıldıktan sonra ya da kesiyi kapatmadan önce, cilt kenarlarına damlatılarak uygulanır (4 – 6 saate kadar sürer).</li>
	<li>Fareyi dorsally yerleştirin ve kuyruğu% 70 izopropil alkolle hazırlayın.</li>
	<li>İşlemden önce kuyruk çapını bir kaliper kullanarak kuyruğun tabanından 20 mm'den başlayan 5 mm'lik artışlarla ölçün. Bu ölçümler, kesilen koni denklemi37kullanılarak hacmi hesaplamak için kullanılacaktır.</li>
	<li>Kuyrukta tabandan 20 mm uzaklıkta 3 mm'lik bir çevresel eksizyon işaretleyin.</li>
	<li>Steril bir cerrahi bıçak (15 beden) ile titiz bir 3 mm tam kalınlıklı cilt eksizyonu gerçekleştirin ve alttaki tüm vaskülatları cerrahi mikroskobik büyütme altında sağlam bırakın. Önce dermisten geçen üstün çevresel işareti (kuyruk tabanından 20 mm) ve ardından ilk kesiye 3 mm distlal olan çevresel tam kalınlıklı bir kesiyi inkünleyin.<ol>
<li>İki kesiyi bağlamak için dik tam kalınlıklı dikey kesi yapın. Önde gelen bir kenarı kavramak için dişli ince bir pikap kullanın ve avasküler düzlemin derinliklerinde dermis ve damar adventitiasına yüzeysel olarak dikkatlice parçalamak için mikros makas kullanın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Kuyruğun ucuna 0,1 mL izosulfan mavisi (%1) deri altı proksimal enjekte edin.</li>
	<li>Cerrahi mikroskop altında lateral kuyruk damarlarına bitişik iki lenfatik kanalı tanımlayın. Lenfatikler izosülfan enjeksiyonu nedeniyle mavi görünecektir. Lenfatikleri düz mikrocerrahi makas kullanarak transekte edin. Makası, yan damar ve lenfatik arasındaki bir düzlemi dikkatlice parçalamak için kullanın. Daha sonra bir makas bıçağının ucunu lenfatik damar ve lateral damar arasına geçirin ve lenfatik damarı transekte etmek için bıçakları kapatın.</li>
	<li>Kuyruk yarasını steril bir yapışan açık pansumanla giydirin. Enfekte veya kanama olmadığından emin olmak için ameliyat sonrası kesileri günlük olarak kontrol edin ve 2 hafta boyunca yara bakımı sağlayın.</li>
	<li>Kuyruktan daha fazla yaralanmayı önlemek ve hayvanların birbirlerini ısırmasını önlemek için hayvanları tek tek barındırın, bu da cerrahi komplikasyonlara yol açar.</li>
</ol>2. Lazer benek kontrast görüntüleme ile kuyruk vasküler değerlendirme
<ol><li>Fareyi adım 1.2'deki gibi uyuşturun.</li>
	<li>Kuyruk vasküleritesini görselleştirmek için lazer benek kontrastı görüntülemeyi kullanmak için genişliği 0,8 cm, yüksekliği 1,8 cm, nokta yoğunluğunu yüksek, kare hızını 44 görüntü/saniye, süreyi 30 saniye ve renkli fotoğrafı 10 saniyede 1 olarak ayarlayın.</li>
	<li>Açıklık için venöz ve arteriyel perfüzyonu değerlendirin. Nitel olarak akışın sürekliliği görselleştirilmelidir.</li>
</ol>3. Yakın kızılötesi lazer anjiyografi ile fonksiyonel lenfatik değerlendirme
<ol><li>Hayvanı adım 1.2'deki gibi uyuşturun</li>
	<li>İndocyanine green (ICG) (25 mg/10 mL) yeniden inşa edin ve ucun yakınındaki distal fare kuyruğuna deri altından 0,1 mL verin.</li>
	<li>Odanın ışıklarını kısın. Kızılötesi lazer anjiyografisini tamponlama ayarına ve ardından canlı yakalamaya yerleştirin.</li>
</ol>4. TNT kullanarak fare kuyruğuna nükleik asit kargonun odaksal teslimatı
<ol><li>Hayvanı adım 1.2'deki gibi uyuşturun.</li>
	<li>Topikal cilt eksfoliasyon kremi kullanarak fare kuyruğunu pul pul dökülür.</li>
	<li>Fare kuyruğunu 5 dakika boyunca 37 °C'de kollajenaz çözeltiye (10 mg/mL) daldırin.</li>
	<li>DNA'ları TNT2.0 çip haznesine yükleyin35.</li>
	<li>TNT2.0 silikon çip cihazını, kuyrukla temas eden nanoneedles ile kuyruk üzerinde istenen odak yeri üzerine yerleştirin.</li>
	<li>Rezervuara pozitif bir elektrik probu yerleştirin. Negatif probu 30 G'lık bir iğneye takın ve iğneyi kuyruk içine teslimat bölgesine deri altından yerleştirin.</li>
	<li>Kare dalga darbeli elektrik stimülasyonu uygulayın (10 x 10 ms darbe, 250 V, 10 mA).</li>
</ol>

<ol><li>Kataru, R. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibrosis+and+secondary+lymphedema%3A+chicken+or+egg%5BTitle%5D)+AND+%22Translation+Research%22%5BJournal%5D)">Fibrosis and secondary lymphedema: chicken or egg.</a> Translation Research. 209, 68-76 (2019).</li>
<li>Brayton, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphedema+prevalence+and+treatment+benefits+in+cancer%3A+impact+of+a+therapeutic+intervention+on+health+outcomes+and+costs%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Lymphedema prevalence and treatment benefits in cancer: impact of a therapeutic intervention on health outcomes and costs.</a> PLoS One. 9 (12), 114597(2014).</li>
<li>Mendoza, N., Li, A., Gill, A., Tyring, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Filariasis%3A+diagnosis+and+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Dermatology+and+Therapy%22%5BJournal%5D)">Filariasis: diagnosis and treatment.</a> Dermatology and Therapy. 22 (6), 475-490 (2009).</li>
<li>Rockson, S. G., Rivera, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estimating+the+population+burden+of+lymphedema%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+the+New+York+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Estimating the population burden of lymphedema.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 1131, 147-154 (2008).</li>
<li>Soran, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breast+cancer-related+lymphedema--what+are+the+significant+predictors+and+how+they+affect+the+severity+of+lymphedema%5BTitle%5D)+AND+%22Breast+Journal%22%5BJournal%5D)">Breast cancer-related lymphedema--what are the significant predictors and how they affect the severity of lymphedema.</a> Breast Journal. 12 (6), 536-543 (2006).</li>
<li>Hayes, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Upper-body+morbidity+after+breast+cancer%3A+incidence+and+evidence+for+evaluation%2C+prevention%2C+and+management+within+a+prospective+surveillance+model+of+care%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Upper-body morbidity after breast cancer: incidence and evidence for evaluation, prevention, and management within a prospective surveillance model of care.</a> Cancer. 118, 8 Suppl 2237-2249 (2012).</li>
<li>Carl, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+Review+of+the+Surgical+Treatment+of+Extremity+Lymphedema%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Reconstructive+Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Systematic Review of the Surgical Treatment of Extremity Lymphedema.</a> Journal of Reconstructive Microsurgery. 33 (6), 412-425 (2017).</li>
<li>Garza, R., Skoracki, R., Hock, K., Povoski, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comprehensive+overview+on+the+surgical+management+of+secondary+lymphedema+of+the+upper+and+lower+extremities+related+to+prior+oncologic+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">A comprehensive overview on the surgical management of secondary lymphedema of the upper and lower extremities related to prior oncologic therapies.</a> BMC Cancer. 17 (1), 468(2017).</li>
<li>Hassanein, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deep+Inferior+Epigastric+Artery+Vascularized+Lymph+Node+Transfer%3A+A+Simple+and+Safe+Option+for+Lymphedema%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Plastic%2C+Reconstructive%2C+Aesthetic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Deep Inferior Epigastric Artery Vascularized Lymph Node Transfer: A Simple and Safe Option for Lymphedema.</a> Journal of Plastic, Reconstructive, Aesthetic Surgery. 73 (10), 1897-1916 (2020).</li>
<li>Hassanein, A. H., Sacks, J. M., Cooney, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimizing+perioperative+lymphatic-venous+anastomosis+localization+using+transcutaneous+vein+illumination%2C+isosulfan+blue%2C+and+indocyanine+green+lymphangiography%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Optimizing perioperative lymphatic-venous anastomosis localization using transcutaneous vein illumination, isosulfan blue, and indocyanine green lymphangiography.</a> Microsurgery. 37 (8), 956-957 (2017).</li>
<li>Chang, D. W., Masia, J., Garza, R., Skoracki, R., Neligan, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphedema%3A+Surgical+and+Medical+Therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery%22%5BJournal%5D)">Lymphedema: Surgical and Medical Therapy.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 138, 3 Suppl 209-218 (2016).</li>
<li>Gould, D. J., Mehrara, B. J., Neligan, P., Cheng, M. H., Patel, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymph+node+transplantation+for+the+treatment+of+lymphedema%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Lymph node transplantation for the treatment of lymphedema.</a> Journal of Surgical Oncology. 118 (5), 736-742 (2018).</li>
<li>Cook, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immediate+Lymphatic+Reconstruction+after+Axillary+Lymphadenectomy%3A+A+Single-Institution+Early+Experience%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Immediate Lymphatic Reconstruction after Axillary Lymphadenectomy: A Single-Institution Early Experience.</a> Annals of Surgical Oncology. , (2020).</li>
<li>Cook, J. A., Hassanein, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ASO+Author+Reflections%3A+Immediate+Lymphatic+Reconstruction%3A+A+Proactive+Approach+to+Breast+Cancer-Related+Lymphedema%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgical+Oncology%22%5BJournal%5D)">ASO Author Reflections: Immediate Lymphatic Reconstruction: A Proactive Approach to Breast Cancer-Related Lymphedema.</a> Annals of Surgical Oncology. , (2020).</li>
<li>Johansson, K., Branje, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arm+lymphoedema+in+a+cohort+of+breast+cancer+survivors+10+years+after+diagnosis%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Oncologica%22%5BJournal%5D)">Arm lymphoedema in a cohort of breast cancer survivors 10 years after diagnosis.</a> Acta Oncologica. 49 (2), 166-173 (2010).</li>
<li>Johnson, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphedema+Incidence+After+Axillary+Lymph+Node+Dissection%3A+Quantifying+the+Impact+of+Radiation+and+the+Lymphatic+Microsurgical+Preventive+Healing+Approach%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Plastic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Lymphedema Incidence After Axillary Lymph Node Dissection: Quantifying the Impact of Radiation and the Lymphatic Microsurgical Preventive Healing Approach.</a> Annals of Plastic Surgery. 82, 4S Suppl 3 234-241 (2019).</li>
<li>Gartner, R., Mejdahl, M. K., Andersen, K. G., Ewertz, M., Kroman, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+in+self-reported+arm-lymphedema+in+Danish+women+treated+for+early-stage+breast+cancer+in+2005+and+2006--a+nationwide+follow-up+study%5BTitle%5D)+AND+%22Breast%22%5BJournal%5D)">Development in self-reported arm-lymphedema in Danish women treated for early-stage breast cancer in 2005 and 2006--a nationwide follow-up study.</a> Breast. 23 (4), 445-452 (2014).</li>
<li>Shin, W. S., Rockson, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+the+molecular+and+mechanistic+study+of+lymphatic+biology+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+the+New+York+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Animal models for the molecular and mechanistic study of lymphatic biology and disease.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 1131, 50-74 (2008).</li>
<li>Tobbia, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphedema+development+and+lymphatic+function+following+lymph+node+excision+in+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+Research%22%5BJournal%5D)">Lymphedema development and lymphatic function following lymph node excision in sheep.</a> Journal of Vascular Research. 46 (5), 426-434 (2009).</li>
<li>Olszewski, W., Machowski, Z., Sokolowski, J., Nielubowicz, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+lymphedema+in+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Experimental lymphedema in dogs.</a> Journal of Cardiovascular Surgery. 9 (2), 178-183 (1968).</li>
<li>Rutkowski, J. M., Moya, M., Johannes, J., Goldman, J., Swartz, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Secondary+lymphedema+in+the+mouse+tail%3A+Lymphatic+hyperplasia%2C+VEGF-C+upregulation%2C+and+the+protective+role+of+MMP-9%5BTitle%5D)+AND+%22Microvascular+Research%22%5BJournal%5D)">Secondary lymphedema in the mouse tail: Lymphatic hyperplasia, VEGF-C upregulation, and the protective role of MMP-9.</a> Microvascular Research. 72 (3), 161-171 (2006).</li>
<li>Tabibiazar, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammatory+manifestations+of+experimental+lymphatic+insufficiency%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Medicine%22%5BJournal%5D)">Inflammatory manifestations of experimental lymphatic insufficiency.</a> PLoS Medicine. 3 (7), 254(2006).</li>
<li>Slavin, S. A., Van den Abbeele, A. D., Losken, A., Swartz, M. A., Jain, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Return+of+lymphatic+function+after+flap+transfer+for+acute+lymphedema%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Return of lymphatic function after flap transfer for acute lymphedema.</a> Annals of Surgery. 229 (3), 421-427 (1999).</li>
<li>Zampell, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toll-like+receptor+deficiency+worsens+inflammation+and+lymphedema+after+lymphatic+injury%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Cell+Physiology%22%5BJournal%5D)">Toll-like receptor deficiency worsens inflammation and lymphedema after lymphatic injury.</a> American Journal of Physiology-Cell Physiology. 302 (4), 709-719 (2012).</li>
<li>Gardenier, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diphtheria+toxin-mediated+ablation+of+lymphatic+endothelial+cells+results+in+progressive+lymphedema%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Diphtheria toxin-mediated ablation of lymphatic endothelial cells results in progressive lymphedema.</a> JCI Insight. 1 (15), 84095(2016).</li>
<li>Weiler, M. J., Cribb, M. T., Nepiyushchikh, Z., Nelson, T. S., Dixon, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+mouse+tail+lymphedema+model+for+observing+lymphatic+pump+failure+during+lymphedema+development%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">A novel mouse tail lymphedema model for observing lymphatic pump failure during lymphedema development.</a> Scientific Reports. 9 (1), 10405(2019).</li>
<li>Avraham, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Th2+differentiation+is+necessary+for+soft+tissue+fibrosis+and+lymphatic+dysfunction+resulting+from+lymphedema%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Th2 differentiation is necessary for soft tissue fibrosis and lymphatic dysfunction resulting from lymphedema.</a> FASEB J. 27 (3), 1114-1126 (2013).</li>
<li>Zampell, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD4%28%2B%29+cells+regulate+fibrosis+and+lymphangiogenesis+in+response+to+lymphatic+fluid+stasis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">CD4(+) cells regulate fibrosis and lymphangiogenesis in response to lymphatic fluid stasis.</a> PLoS One. 7 (11), 49940(2012).</li>
<li>Arruda, G., Ariga, S., de Lima, T. M., Souza, H. P., Andrade, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+mouse-tail+lymphedema+model%5BTitle%5D)+AND+%22Lymphology%22%5BJournal%5D)">A modified mouse-tail lymphedema model.</a> Lymphology. 53 (1), 29-37 (2020).</li>
<li>Jun, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modified+Mouse+Models+of+Chronic+Secondary+Lymphedema%3A+Tail+and+Hind+Limb+Models%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Vascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Modified Mouse Models of Chronic Secondary Lymphedema: Tail and Hind Limb Models.</a> Annals of Vascular Surgery. 43, 288-295 (2017).</li>
<li>Karkkainen, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+for+gene+therapy+of+human+hereditary+lymphedema%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">A model for gene therapy of human hereditary lymphedema.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 98 (22), 12677-12682 (2001).</li>
<li>Yoon, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VEGF-C+gene+therapy+augments+postnatal+lymphangiogenesis+and+ameliorates+secondary+lymphedema%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">VEGF-C gene therapy augments postnatal lymphangiogenesis and ameliorates secondary lymphedema.</a> Journal of Clinical Investigation. 111 (5), 717-725 (2003).</li>
<li>Gallego-Perez, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topical+tissue+nano-transfection+mediates+non-viral+stroma+reprogramming+and+rescue%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Nanotechnology%22%5BJournal%5D)">Topical tissue nano-transfection mediates non-viral stroma reprogramming and rescue.</a> Nature Nanotechnology. 12 (10), 974-979 (2017).</li>
<li>Moore, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanochannel-Based+Poration+Drives+Benign+and+Effective+Nonviral+Gene+Delivery+to+Peripheral+Nerve+Tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Biosystems%22%5BJournal%5D)">Nanochannel-Based Poration Drives Benign and Effective Nonviral Gene Delivery to Peripheral Nerve Tissue.</a> Advanced Biosystems. , 2000157(2020).</li>
<li>Zhou, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exosome-Mediated+Crosstalk+between+Keratinocytes+and+Macrophages+in+Cutaneous+Wound+Healing%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Exosome-Mediated Crosstalk between Keratinocytes and Macrophages in Cutaneous Wound Healing.</a> ACS Nano. 14 (10), 12732-12748 (2020).</li>
<li>Roy, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurogenic+tissue+nanotransfection+in+the+management+of+cutaneous+diabetic+polyneuropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">Neurogenic tissue nanotransfection in the management of cutaneous diabetic polyneuropathy.</a> Nanomedicine. 28, 102220(2020).</li>
<li>Sitzia, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Volume+measurement+in+lymphoedema+treatment%3A+examination+of+formulae%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Cancer+Care%22%5BJournal%5D)">Volume measurement in lymphoedema treatment: examination of formulae.</a> European Journal of Cancer Care. 4 (1), 11-16 (1995).</li>
<li>Smeltzer, D. M., Stickler, G. B., Schirger, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primary+lymphedema+in+children+and+adolescents%3A+a+follow-up+study+and+review%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Primary lymphedema in children and adolescents: a follow-up study and review.</a> Pediatrics. 76 (2), 206-218 (1985).</li>
<li>Maclellan, R. A., Greene, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphedema%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Pediatric+Surgery%22%5BJournal%5D)">Lymphedema.</a> Seminars in Pediatric Surgery. 23 (4), 191-197 (2014).</li>
<li>Clavin, N. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TGF-beta1+is+a+negative+regulator+of+lymphatic+regeneration+during+wound+repair%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%3A+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">TGF-beta1 is a negative regulator of lymphatic regeneration during wound repair.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 295 (5), 2113-2127 (2008).</li>
<li>Gnyawali, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retooling+Laser+Speckle+Contrast+Analysis+Algorithm+to+Enhance+Non-Invasive+High+Resolution+Laser+Speckle+Functional+Imaging+of+Cutaneous+Microcirculation%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Retooling Laser Speckle Contrast Analysis Algorithm to Enhance Non-Invasive High Resolution Laser Speckle Functional Imaging of Cutaneous Microcirculation.</a> Scientific Reports. 7, 41048(2017).</li>
</ol>

Yazarların rakip çıkar çatışmaları yoktur.

Lenfödem primer (konjenital) veya sekonder (iyatrojenik lenfatik) yaralanma olarak kategorize edilir38,39. sekonder lenfödem olguların %99'unu oluşturur39. sekonder lenfödem en sık lenfadenektomi veya radyasyon ile enfeksiyon (filariasis) veya onkolojik sonrası tedaviden kaynaklanır4,39. Lenfadektomi ve radyasyonla tedavi edilen hayvanların% 70'i lenfödem elde etmediği için çeviris...

Lenfödem, lenfatik disfonksiyondan kaynaklanan ekstremite şişmesidir. Etkilenen uzuv sıvı, yağ ve fibrozis birikimi nedeniyle büyür1. Lenfödem dünya çapında 250 milyon kişiyi etkiler2,3,4. Meme kanseri, melanom, jinekolojik/ürolojik tümörler veya sarkomlar gibi katı maligniteler için tedavi gören hastaların %20-40'ında lenfödemgeliştiğitahmin edilmektedir 2,4,5. Lenfödem morbidite tekrarlayan enfeksiyonlar, ağrı ve deformite içerir6. Bu ilerleyici, yaşam boyu süren hastalığın tedavisi yoktur. Mevcut tedaviler variaby etkili7'dir ve kompresyon, fizyoterapistler tarafından komple dekonjestif tedavi, eksizyonel prosedürler ve damarlı lenf nodu transferi ve lenfovenöz bypass 7 , 8 , 9,10,11,12,13,14dahil olmak üzere mikrocerrahi operasyonları içerir. Lenfödem için ideal tedavi henüz keşfedilmedi.
Lenfödem mekanizmasının ve tedavisinin incelenmesi sınırlı olmuştur. Lenfatik yaralanmadan sonra ortalama bir yıl gecikmeli başlangıç vardır15,16 ve radyasyon ve cerrahi ile iyatrojenik hakaret yaşayan çoğu birey lenfödemgeliştirmez 4,6,17. Köpek, koyun ve domuz da dahil olmak üzere büyük hayvan modelleri tanımlanmış olmasına rağmen18,19,20, fare kuyruk modeli kolaylık, maliyet ve çoğaltma nedeniyle en yaygın olarak uygulanmıştır. Lenfödemi araştırmak için fare modelleri bir kuyruk modeli, difteri-toksin aracılı lenfatik ablasyon ve aksiller veya popliteal lenf nodu diseksiyonu21,22,23,24,25,26içerir. Çoğu kuyruk modeli, kuyruğun tabanına yakın gerçekleştirilen lenfatik kanal kırpmalı bir odak, tam kalınlıkta cilt eksizyonu kullanır22, kuyruk şişmesi ve insan lenfödemi benzeri histolojik özelliklerle sonuçlanır24,27,28,29. Bununla birlikte, standart murine kuyruk modeli tipik olarak 20 gün gibi kısa bir sürede kendiliğinden çözülür ve periyodik kuyruk nekrozu30eşlik eder. Lenfödem fare kuyruk modeli, sürekli bir lenfödemi 15 haftanın ötesine uzatır, doğrulanmış arteriyel ve venöz açıklığı gösterir ve fonksiyonel lenfatik disfonksiyon değerlendirmesine izin verir.
Lenfödemin bir murine kuyruk modeli, lenfödemi tedavi etmek için yeni terapötiklerin değerlendirilmesini sağlar. Viral vektörlerin aracılık ettiği fare modelinde gen bazlı stratejiler kullanılmıştır31,32. Lenfömatöz fare kuyruğuna genetik kargo teslimatı için yeni bir doku nanotransfeksiyon teknolojisi (TNT) de kullanıyoruz. TNT, hızlı odaklanmış bir elektrik alanında nanokanelli bir çip kullanarakdoğrudan,transkütan gen iletimini kolaylaştırır33,34,35,36. Model, potansiyel gen bazlı terapötiklerin fare kuyruğunun lenfatik yaralanma bölgesine odak gen teslimatına izin vermek için TNT2.0'ın kullanılmasını içerir35.

<table><tbody><tr><td>Tegaderm Film</td><td></td><td>1626W</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi Mikroskop</td><td>Leica, Wetzlar, Almanya</td><td>MSV266</td><td></td></tr><tr><td>Yapışık Pansuman (Tegaderm)</td><td>3M, St. Paul, Minn.</td><td>1626W</td><td></td></tr><tr><td>Lazer benek (Pericam PSI Sistemi)</td> <td>Perimed AB, Stockholm, İsveç)</td> <td>PSIZ</td><td></td></tr><tr><td>Yakın kızılötesi lazer (LUNA)</td> <td>Stryker (Eski adıyla Novadaq Technologies, Toronto, Kanada)</td> <td>LU3000</td><td></td></tr><tr><td>C57BL / 6 fare</td><td>Jackson Laboratories</td><td>000664</td><td></td></tr><tr><td>Micro-Adson Forseps - 1x2 Teeth</td><td>Fine Science Tools (USA) Inc.</td><td>11019-12</td><td></td></tr><tr><td>V-Hook</td><td>Güzel Bilim Araçları (ABD) Inc.</td><td>18052-12</td><td></td></tr><tr><td>Neşter SS NO15</td><td>Fischer Scientific</td><td>29556</td><td></td></tr><tr><td>Tek Kullanımlık İğne 30GX1</td><td>Fischer Scientific</td><td>305128</td><td></td></tr><tr><td>Ameliyat Makası</td><td>Fischer Scientific</td><td>12-460-796</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi veya Kuyumcu Forsepsleri, Sklar 4-1 / 2</td><td>Fischer Scientific</td><td>50-118-4255</td><td></td></tr><tr><td>Yaylı Makas - Düz/Keskin-Keskin/ 8mm Kesme</td><td>Kenarı İnce Bilim Araçları (ABD) Inc.</td><td>15024-10</td><td></td></tr><tr><td>Cardiogreen</td><td>Sigma</td><td>I2633-25MG</td><td></td></tr><tr><td>IsosulfanBlue (Lenfazorin)&nbsp; 50 mg / 5ml</td><td>Mylan</td><td>67457-220-05</td><td></td></tr></tbody></table>

bir murine kuyruk lenfödem modeli

A Murine Tail Lymphedema Model

Lenfödem, lenfatik disfonksiyondan kaynaklanan ekstremite şişmesidir. Etkilenen uzuv sıvı, yağ ve fibrozis birikimi nedeniyle büyür. Bu hastalığın tedavisi yoktur. Lenfödem çalışması için kuyruğun tabanına yakın bir odak tam kalınlıkta cilt eksizyonu kullanan ve kuyruk şişmesine neden olan bir fare kuyruk modeli kullanılmıştır. Bununla birlikte, bu model vasküler oluşur ve sonuç olarak kuyruk nekrozu ve erken kuyruk şişmesi çözünürlüğü ile klinik çevrilebilirliğini sınırlayabilir. Kronik murin kuyruk lenfödem modeli, 15 hafta boyunca sürekli lenfödemi ve kuyruğa güvenilir bir perfüzyonu indükler. Geleneksel murine kuyruk lenfödem modelinin geliştirmeleri arasında 1) cerrahi bir mikroskop kullanılarak hassas tam kalınlıkta eksizyon ve lenfatik kupür, 2) yüksek çözünürlüklü lazer benek kullanılarak ameliyat sonrası arteriyel ve venöz perfüzyonun onaylanması ve 3) kızılötesi lazer limphangiografisi yakın indocyanine yeşili kullanılarak fonksiyonel değerlendirme. Ayrıca genetik kargonun fare kuyruğu vaskülatına yeni viral olmayan, transkütan, odaksal teslimatı için doku nanotransfeksiyon teknolojisini (TNT) kullanıyoruz.

Sürekli lenfödem için fare kuyruk modeli tekniği Şekil 1'de gösterilmiştir. Şekil, fare kuyruk modelinin ilgili anatomisini sergiler. Şekil 2 lenfödem indüksiyonu sonrası fare kuyruğunda ilerleyici şişlik ve sürekli dirençli lenfödem göstermektedir. Kesilen koni denklemi tarafından hesaplanan fare kuyruk hacmi, 4. haftada zirveler ve 6. haftaya platolar ve ardından 15. haftaya kadar sürdürülen kademeli iyileşme. Kuyruk hacmi, mod...

Lenfödem, lenfatik disfonksiyondan kaynaklanan ekstremite şişmesidir. Lenfödemin kronik bir murine kuyruk modelini ve kuyruğa genetik kargo teslimatı için doku nanotransfeksiyon teknolojisinin (TNT) yeni kullanımını anlatıyoruz.

Bir Murine Kuyruk Lenfödem Modeli

Lymphedema is extremity swelling caused by lymphatic dysfunction. The affected limb enlarges because of accumulation of fluid, adipose, and fibrosis. ...

Lenfödem tedavisi olmayan kronik bir durumdur. Meme kanseri tedavisinde aksiller lenf nodu ameliyatı ve radyasyon geçirmiş hastaların üçte birini etkiler. Geçerli bir hayvan modeline sahip olmak, yeni tedavi stratejilerinin mekanizmasını ve gelişimini anlamayı kolaylaştırır.Lenfödemin fare kuyruğu modeli hızlı başlangıçlı güvenilir ve tekrarlanabilir. İnsan lenfödemi ile uyumlu histolojik değişiklikler sergiler. Prosedürü gösteren dr. Ganesh Mohan olacak, laboratuvarımdan doktora sonrası.Başlamak için, sekiz haftalık sakinleştirilmiş fareyi sert bir şekilde yerleştirin ve kuyruğu% 70 izopropil alkolle hazırlayın. Kuyruk çapını kuyruğun tabanından 20 milimetreden başlayan beş milimetrelik artışlarla ölçmek için bir kaliper kullanın. Tabandan 20 milimetrelik kuyrukta üç milimetrelik bir çevresel eksizyon işaretleyin.Cerrahi mikroskobik büyütme altında, alttaki tüm vaskülatları sağlam bırakarak titiz bir üç milimetre tam kalınlıklı cilt eksizyonu gerçekleştirin. Önce dermisten geçen üstün çevresel işareti, ardından ilk kesiye üç milimetre distal olan çevresel tam kalınlıkta bir kesiyi inkübize edin. İki kesiyi bağlamak için dik tam kalınlıklı dikey kesi yapın, ardından önde gelen bir kenarı kavramak için dişli ince bir pikap kullanın ve avasküler düzlemin derinliklerinde dermis ve mikro makasla damar adventitiasına yüzeysel olarak parçalanın.Kuyruğun ucuna% 1 izosülfan mavisi deri altı proksimal 0.1 mililitre enjekte edin. Yanal kuyruk damarlarına bitişik enjeksiyon nedeniyle mavi görünen iki lenfatik kanalı tanımlayın. Lenfatikleri dikkatlice transekte edin, düz mikrocerrahi makasla lateral damar ile lenfatik arasındaki bir düzlemi parçalara ayırt edin.Bir makas bıçağının ucunu lenfatik damar ile lateral damar arasına geçirin ve lenfatik damarı transekte etmek için bıçakları kapatın. Bittiğinde, kuyruk yarasını steril bir yapışan net adresleme ile giydirin. Ucun yakınındaki distal fare kuyruğuna indocyanine yeşil 0.1 mililitre deri altından verin.Oda ışıklarını karartın, daha sonra tamponlama ayarında kızılötesi lazer anjiyografinin yakınına yerleştirin ve canlı görüntüleme gerçekleştirin. İsosulfan mavisinin kuyruk ucuna verilmesinden sonra, lenfatikler mavi renk sergiledi. Bitişik lateral damarlar korunurken lenfatikler bozuldu.Lenfödem indüksiyonu sonrası fare kuyruğunda ilerleyici şişlik ve sürekli kalıcı lenfödem burada gösterilmiştir. Kesilmiş bir koni denklemi ile hesaplanan fare kuyruk hacmi, dördüncü haftada zirve yaptı ve altıncı haftaya kadar platolandı ve ardından 15. Lenfödem kuyruk modelinde fare kuyruğu perfüzyonunu doğrulamak için yüksek çözünürlüklü lazer benek kontrast görüntülemesi, kuyruk vaskülat açıklığının değerlendirilmesi için yaralı lateral damarları ve bozulmamış lateral damarları gösteren yapıldı.Yakın kızılötesi lazer lenfanjiografi preoperatif sağlam lenfatikler gösterdi ve ameliyat sonrası cerrahi bölgenin ötesinde ICG geçişi göstermedi, böylece şişmenin lenfatik disfüzyondan kaynaklandığını doğruladı. Doku nanotransfeksiyon teknolojisi kullanılarak genetik kargo teslimatının verimliliği, floresan amidit etiketli DNA'nın murin kuyruğuna verilmesiyle gösterilmiştir. Fare kuyruğu lenfödem modeli ve kızılötesi lazer anjiyografiye yakın ICG için uyarlamalar kullanmak, tedavi etkileri olan klinik olarak çevrilebilir ve heyecan verici bir hayvan modelidir.

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Yakın kızılötesi floresans (NIRF) kullanarak en son geliştirilen görüntüleme teknikleri lenfatik sistem kanseri metastazı oynadığı rol, immün yanıt, yara onarımı ve diğer lenfatik ilişkili hastalıkların ortaya çıkmasına yardımcı olabilir.

Bir Mouse Lenfatik damarları Non-invaziv Optik Görüntüleme

Bu videoda, fare modelinde melanom hücreleri kuyruk damarından intravenöz olarak enjekte edilmektedir. Melanom hücreleri dolaşım sistemi boyunca daha fazla hareket eder, uzak mikro çevreye adapte olur ve akciğerler gibi organlarda metastaza neden olur.

Deneysel Metastatik Melanom Fare Modeli: Akciğerlerdeki Melanom Hücrelerinin Metastatik Potansiyelini İncelemek İçin Bir Platform

Bu videoda, interstisyel doku boşluğunda kuyrukta şişmeye yol açan anormal bir sıvı birikimi olan murin kuyruğu lenfödemi oluşturmak için in vivo bir teknik açıklanmaktadır. Model, lenfödem mekanizmalarını ve tedavisini incelemek için uygulanır.

Murin Tail Lenfödem Modeli: Murin Tail'de Sürekli Lenfödem Oluşturmak İçin İn Vivo Bir Teknik

Bu video, bir fare modelinden kasık boşaltma lenf nodunun cerrahi izolasyon prosedürünü göstermektedir. Karın bölgesinin kesisi, cerrahi olarak alınan kasık lenf bezine erişim sağlar. Hasat edilen yarı saydam kasık lenf nodu immünolojik çalışmalar için kullanılabilir.

Bir Murin Modelinden Kasık Drenaj Lenf Nodunun Çıkarılması

Bu hayvan modeli, araştırmacıların farelerin arka eklerinde en az 8 hafta süren istatistiksel olarak anlamlı sekonder lenfödemi indüklemelerini sağlar. Model lenfödem patofizyolojisi çalışma ve yeni tedavi seçenekleri araştırmak için kullanılabilir.

Farelerin Hindlimb Sekonder Lenfödem Indükleme için Gözden Geçirilmiş Bir Yöntem

Afferent lenfatik damarların cerrahi dikiş ile lenf akışını engellemek için bir protokol sunulmaktadır.

Farelerde Afferent Lenfatik Damarlar Dikerek Lenf Akışını Engelleme

Burada, benzersiz bir şekilde tasarlanmış bir ısıtma / kısıtlama cihazı kullanarak kemirgen kuyruk damarı enjeksiyonları için etkili ve verimli bir yöntem sunuyoruz. Vazodilasyon ve kısıtlama süreçlerinin başlatılmasını kolaylaştırarak, bu protokol, en az sıkıntıya sahip büyük hayvan gruplarının doğru ve zamanında intravenöz enjeksiyonlarına izin verir.

Murine Mantar Sepsis Modelinde Verimli Kuyruk Damarı Enjeksiyonları için Çağdaş Isınma/Kısıtlama Cihazı

Melanom, hızla diğer organlara yayılan çok agresif bir hastalıktır. Bu protokol, metastatik melanomun Braf / Pten fare modelindeki inguinal lenf düğümlerinin hacmini izlemek için 3D render ile birlikte ultra yüksek frekanslı ultrason görüntülemenin uygulanmasını açıklamaktadır.

Braf/Pten Genetiği Mühendisliğiyle Tasarlanmış Melanom Fare Modelinde Ultra Yüksek Frekanslı Ultrason Görüntüleme ile Lenf Düğümü Hacminin Analizi

Burada sunulan deneysel tasarım, lenf nodu (LN) metastazı sırasında antijene özgü CD8+ T hücrelerinin çalışmaları için yararlı bir üreme modeli sağlar, bu da seyirci CD8+ T hücrelerinin bozulmasını dışlar.

Tümör Oluşumu Sırasında Antijene Özgü CD8+ T Hücrelerinin Dinamiğinin Değerlendirilmesi için Drenaj Lenf Nodu Metastazı Modeli

Protokol, indüksiyon kemoterapisine yanıtın dinamiklerine dayalı olarak akut lenfoblastik löseminin nüksetmesine neden olan bir fare modelini tanımlamayı amaçlamaktadır.

Akut Lenfoblastik Lösemi için İndüksiyon Kemoterapisine Nüks Löseminin Murin Modeli

Öğrenin, fare kuyruk lenfödem modelinde doku nanotransfeksiyon teknolojisi kullanarak genetik kargo teslimatını ve lenfatik disfonksiyon mekanizmalarını inceleyin. Bu yöntem yenilikçi tedavi stratejileri geliştirmeye yardımcı olur.

Bir Murine Kuyruk Lenfödem Modeli

Daha fazla video keşfet