Göttingen Minipigs ve Landrace Domuzlarında Kapalı Göğüs Koroner Oklüzyon/Reperfüzyon Modelinde Miyokard Sonrası Enfarktüs Kalp Yetmezliği

Mevcut çalışmanın genel amacı, kapalı göğüs erişkin Gottingen minipigs miyokard infarktüsü ve miyokard sonrası infarktüs kaynaklı kalp yetmezliği indüksiyon tekniklerini sunmaktır. Ayrıca minipigs ve Landrace domuzlarında miyokard sonrası enfarktüs kaynaklı kalp yetmezliği modelini karakterize etmeyi amaçlıyoruz. Çalışmanın başında miyokard fonksiyonu ve morfolojiyi değerlendirmek için miyokard infarktüsünden bir gün önce temel kardiyak manyetik rezonans görüntülemesi yapılır.

Daha sonra miyokard infarktüsü sol ön alçalan koroner arterin intralüminal tıkanıklığı ile indüklendi. Balon deflasyonundan sonra miyokard reperfüzyonu indüklanır ve interkoroner ilaç tedavisi, bu durumda, tekal, mikrokreter kullanılarak uygulanır. Miyokard enfarktüsünün bir sonucu olarak, domuzlarda kalp yetmezliği gelişecektir.

Akut miyokard infarktüsünün kronik morfo-fonksiyonel sonuçları Gottingen minipigs'te üç ve altı ayda ve Landrace domuzlarında iki ayda kardiyak manyetik rezonans görüntüleme ile değerlendirilir. Landrace domuzları iki ay sonra, Gottingen minipigs ise sekiz aylık reperfüzyondan sonra sonlandırılır. Miyokard sonrası enfarktüse bağlı kalp yetmezliğinin klinik sonucu, yeni kardiyoprotektif tedavilerin gelişmesiyle daha da iyileştirilebilir.

Preklinik hayvan modellerinde etkili olan bu tür kardiyoprotektif tedaviler, klinik çeviride şimdiye kadar çeşitli nedenlerden dolayı başarısız oldu. Eski bir Macaristan grubu, akademik ve diğer ortaklarla birlikte, miyokard enfarktüsü ve kalp yetmezliği gibi kardiyovasküler hastalıklar için yeni ilaçlara ve tıbbi cihazlara odaklanan, ancak bunlarla sınırlı olmamak üzere çok çeşitli yenilikçi klinik öncesi araştırma ve geliştirme hizmetleri sunmaktadır. Ayrıca, şirket içinde çeşitli kardiyoprotektif teknolojiler geliştiriyoruz.

Bu nedenle kardiyo koruyucu tedavilerin klinik gelişiminin başarısızlığı, en azından kısmen küçük hayvanlarda miyokard enfarktüs modellerinin düşük çevirisel değeri nedeniyle atfedilebilir. Kardiyo koruyucu tedavilerin başarılı gelişimi için iyi çeviri değerine sahip büyük hayvan modelleri gereklidir. Büyük hayvan modeli olarak en değerli olan kemirgenlerde ve Landrace domuzlarında kardiyo koruyucu tedavilerin klinik denemelerinin aksine, kardiyak fonksiyonel sonuç bu hayvanlarda sadece bir ila iki aya kadar değerlendirilebilir.

Diğer minipiglerin kullanımı, klinik durumu daha iyi yansıtan birkaç aya kadar daha uzun, daha dolu süreler uygulamamızı sağlar. Anestezi ve vücut ağırlığı ölçümünden sonra, oda ve duvar boyutları ve ejeksiyon fraksiyonu ve kardiyak çıkış gibi kardiyak fonksiyon gibi temel kardiyak morfolojinin değerlendirilmesi için kardiyak manyetik rezonans görüntüleme yapılır. Boyun bölgesine intramüsküler enjeksiyon olarak ketamin hidroklorür ksilazin ile hayvanların anestezisini indükleyin.

Ventrikül aritmilerini önlemek veya tedavi etmek için gıda değişimi ve ilaç uygulaması için E-ven kanülünü kullanın. Ameliyat odası hazırlandığında, hayvanı ameliyat masasına yerleştirin. Uzuvları sabitleyin ve hayvanı supine pozisyonunda hareketsiz hale getirmek için kamalar uygulayın.

Cerrahi bölgeyi povidone iyot ile dezenfekte edin. Bu durumda cerrahi bölge gracilis ve sartorius kası arasındaki cilt bağı etrafındadır. Ameliyat yerindeki saçları jiletle çıkarın.

Yüzey EKG elektrotlarını Einthoven üçgenine yerleştirin. Anestezi makinesini ayarlayın ve pozitif basınçlı havalandırmaya başlayın. Dezenfekte edilmiş cerrahi bölgeyi cerrahi bir örtü ile izole edin.

Femoral bölgeye yaklaşın ve gracilis ve sartorius kasları arasında cilde uzunlamasına bir kesi yapın. Deri altı dokusunu ve fasyayı parçalara bölün. Uyluk atardamarını izole et.

Kanamayı kontrol etmek için uyluk atardamarın altına iki cerrahi dikiş koyun. Uyluk atardamarını delin. Seldinger tekniğini kullanarak femoral arteri kanüle edin.

Kılıtı cilde sabitle. Daha fazla biyokimyasal analiz için kan örneklemesi için arteri kullanın. Yeterli antikoagülasyonu güvence altına almak ve cerrahi müdahale sırasında trombozu önlemek için femoral kılıf yoluyla 5.000 IU heparin sürün.

Cerrahi müdahale boyunca arteriyel kan basıncını izlemek için femoral damara basınç sensörü takın. Basıncın kalibrasyonu için, basınç kayıt sistemini her hayvanın kalbi seviyesine yerleştirin. Hava kabarcıklarını çıkardıktan sonra, üç yönlü stopcock serbest hava yönüne açık olduğunda sıfır basınç kalibrasyonu gerçekleştirilir.

Hayvanın onarılmasından sonra, miyokard enfarktüsü sol ön alçalan koroner arterin intralüminal tıkanıklığı ile indüklendi Femoral kılıf yoluyla, kılavuz teli aort kemerine tanıtın ve ilerletin ve kılavuz tel üzerinde kılavuz kateteri tanıtın. Floroskopu anteroposterior pozisyonda konumlandırdıktan sonra, kateter içinde en az beş mililitre kan aspirasyonu, kateterin hacmi, katetere bağlı şırıng ile trombüs veya hava kabarcığı olmadığından emin olun. Kateterin diğer kısmını radyokontrast maddesi ile dolu şırınmaya bağlayın.

Hava kabarcıklarının koroner artere infüzyonunu önlemek için şırıngın yüksek tutulmasına dikkat edin. Sağ ve sol koroner arterlerin kontrast madde ile seçici olarak doldurulması ile taban çizgisi anjiyografisi gerçekleştirin. Bari skorunu temel anjiyografiden sonra gerçekleştirin, bu da sonunda risk altındaki miyokard kasının yüzdesinin tahmin edilmesine izin eder.

Perkütan translüminal koroner anjiyoplasti kılavuz telini kılavuz kateterden geçirin. Tıkanıklık planlı bölgeye distally yerleştirin. Anjiyografi ile PTCA kılavuz telinin konumunu kontrol edin.

Koroner arter çapına göre en uygun balon boyutunu görsel tahmine göre belirleyin. Balon kateterini PTCA kılavuz telinin üzerine yerleştirin ve planlanan konuma getirin. Balon kateterin konumunu anjiyografi ile kontrol edin.

Balonu şişirin ve kontrast akışının durmasını görselleştirerek toplam tıkanıklığı onaylayın. intrakoroner balonun yerinden çıkmasın diye cerrahi perdeye bant aletleri. EKG tıkanıklık belirtisini ST yüksekliği ile kaydedin ve belgele.

Çekirdek sıcaklığını korumak için hayvanı bir ısıtma cihazı ile örtün. Ventrikül aritmileri durumunda, metinde açıklandığı gibi protokolü izleyin. İki saatlik koroner tıkanıklık sırasında balon basıncını her 30 dakikada bir kontrol edin.

Balon basıncında 0,5 bar'dan fazla bir azalma varsa, başlangıç değerlerine geri ayarlayın. Koroner tıkanıklığın bitiminden hemen önce kontrol anjiyografisi yaparak oklüzyon bölgesine sürekli balon yerleşimini ve akış yokluğunu doğrulayın. Tromboz ve aritmileri önlemek için 2.500 IU heparin ve bir gram magnezyum sülfat intrakoronari olarak yavaş bir bolus olarak uygulanır.

Balon deflasyonu ile reperfüzyonu başlatın. Sönmüş balonu çıkarın. Koroner damarın distal kısmındaki kan akışını göstermek için koroner anjiyografi ile tam reperfüzyonun başarısını onaylayın.

Miyokard reperfüzyonunun başlatılmasından sonra intrakoroner ilaç kullanımına hazırlanın. Koroner arter embolizasyonunu önlemek için terapötik perfüzyon mikrokreterini salin ile doldurun. Mikrokateteri PTCA kılavuz telinin üzerine yerleştirin.

Mikrokateterin konumunu ilerletin ve onaylayın. Mikrokreterin ucu tıkanma seviyesine yerleştirilmelidir. PTCA kılavuz telini çıkarın.

Mikrokreteri perfüzyon pompasına bağlayın. Paralararası yönetimi başlatın. İlaç uygulamadan sonra, mikrokreteri çıkarın ve hava emboli veya koroner diseksiyona yol açan müdahaleyi dışlamak için kontrol anjiyografisi gerçekleştirin.

Arteriyal kılıfı çıkarın ve femoral arter proksimalini delinme bölgesine bağlayın. Sürekli dikişler kullanarak yarayı kapatın. Antiseptik kaplama uygulayın.

Izofluran çekilmesi yoluyla anesteziyi sonlandırın. Akut miyokard infarktüsünün kronik morfo-fonksiyonel sonuçları Gottingen minipigs'te üç ve altı ayda ve Landrace domuzlarında iki ayda kardiyak MR ile değerlendirilir. Ölüm oranı iki cins arasında önemli ölçüde farklılık görmedi.

Kardiyak skar boyutları ve BARI skorları iki cins arasında karşılaştırılabilirdi. Taban çizgisi ve takip süresi boyunca sol ventrikül ucu diyastolik kütleleri iki cins arasında farklılık gösterir. Gottingen minipigs'teki LVED kütlesi altı ayda sadece orta derecede arttı.

Buna karşılık, Landrace domuzlarında, LVED kütlesi iki ayda neredeyse% 100 arttı. Miyokard enfarktüsü, minipiglerde üç ay ve altı ayda ejeksiyon fraksiyonunda önemli bir azalmaya neden oldu. Bununla birlikte, Landrace domuzlarında, fırlatma fraksiyonu iki ay sonra değişmedi.

İki ırk arasındaki fırlatma fraksiyonu ile ilgili farklılıklar Landrace domuzlarında yoğun bir kardiyak büyüme hızına ve dolayısıyla değiştirilmiş kardiyak yeniden şekillendirmeye bağlanabilir. Artan kalp ağırlığına landrace domuzlarında vücut ağırlığında iki ayda yaklaşık% 100 artış eşlik etti. Gottingen minipigs'te vücut ağırlığı üç ay sonra sadece% 8 ve altı ay sonra% 30 idi.

Kalp yetmezliği belirtilerini daha fazla incelemek için vücut yüzey alanına endeksli sol atriyal hacmin ölçümlerini yaptık. LAVi, altı ay sonra Gottingen minipigs'te% 34 arttı, ancak iki ay sonra Landrace domuzlarında önemli ölçüde değişmedi. Pulmoner ödem varlığı veya yokluğu lokalizatör görüntülerinde kardiyak MR ile değerlendirildi.

Pulmoner ödem her iki ırkta da kardiyak dekomsasyon sonucu gözlendi. Gottingen minipigs'te, kardiyak indeks ölçülen zaman noktalarında önemli değişiklikler göstermedi. Landrace domuzlarında ise kardiyak indeks neredeyse önemli ölçüde arttı.

Miyokard infarktüsü sadece sol ventrikül fonksiyonunu etkilemekle kalmadı, aynı zamanda her iki suşta da sağ ventrikül ejeksiyon fraksiyonunda önemli bir artışa neden oldu. İdeal Gottingen minipig modelinin, insanlara kıyasla fonksiyonel ve morfolojik miyokard sonrası enfarktüs kalp yetmezliği parametrelerini taklit ettiğini gösterdik. Bu, hem akut hem de kronik miyokard enfarktüslerinin tedavisinin etkinliğini ve sonuçlarını değerlendirmek için uygulanabilir, üretilebilir ve çevirisel bir modeldir.

Ayrıca mikrokreter kullanarak koronerlere lokal ilaç teslimatı için yöntem gösterdik. Landrace ve minipigs'teki kapalı göğüs enfarktüs modellerinin kapsamlı karakterizasyonu, enfarktüs sonrası kalp yetmezliği için yeni tedaviler geliştirmek için en uygun büyük hayvan modellerini seçmek için yararlı olacaktır.