Name: Zebra Balıklarında Yüzme Sırasında Posterior Lateral Line Afferent Neuronsun Aktivitesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-02-10T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 34 s
Description: Öğrenin, zebrafish larvalarında patch elektrofizyolojisi kullanarak motor komutları sırasında afferent nöron aktivitesini nasıl kaydedeceğinizi. Bu yöntem, insan işitme bozukluklarına uygulanabilir saç hücresi devrelerini anlamak için değerli bilgiler sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ulusal Sağlık Enstitüsü (DC010809), Ulusal Bilim Vakfı (IOS1257150, 1856237) ve Whitney Deniz Biyobilimleri Laboratuvarı'ndan J.C.L.'ye desteklerini minnetle kabul ediyoruz. Liao Lab'ın geçmiş ve şimdiki üyelerine tartışmaları teşvik eden için teşekkür ederiz.

<ol><li>Trapani, J. G., Nicolson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+of+spontaneous+activity+in+afferent+neurons+of+the+zebrafish+lateral-line+organ%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Mechanism of spontaneous activity in afferent neurons of the zebrafish lateral-line organ.</a> The Journal of Neuroscience. 31 (5), 1614-1623 (2011).</li>
<li>Haehnel-Taguchi, M., Akanyeti, O., Liao, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Afferent+and+motorneuron+activity+in+response+to+single+neuromast+stimulation+in+the+posterior+lateral+line+of+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Afferent and motorneuron activity in response to single neuromast stimulation in the posterior lateral line of larval zebrafish.</a> Journal of Neurophysiology. 112 (6), 1329-1339 (2014).</li>
<li>Levi, R., Akanyeti, O., Ballo, A., Liao, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Frequency+response+properties+of+primary+afferent+neurons+in+the+posterior+lateral+line+system+of+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Frequency response properties of primary afferent neurons in the posterior lateral line system of larval zebrafish.</a> Journal of Neurophysiology. 113 (2), 657-668 (2015).</li>
<li>Harris, G. G., Fishkopf, L. S., Flock, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Receptor+potentials+from+hair+cells+of+the+lateral+line%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Receptor potentials from hair cells of the lateral line.</a> Science. 167 (3914), 76-79 (1970).</li>
<li>Dow, E., Jacobo, A., Hossain, S., Siletti, K., Hudspeth, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Connectomics+of+the+zebrafish%27s+lateral+line+neuromast+reveals+wiring+and+miswiring+in+a+simple+microcircuit%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Connectomics of the zebrafish's lateral line neuromast reveals wiring and miswiring in a simple microcircuit.</a> eLife. 7, 33988(2018).</li>
<li>Obholzer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vesicular+glutamate+transporter+3+is+required+for+synaptic+transmission+in+zebrafish+hair+cells%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Vesicular glutamate transporter 3 is required for synaptic transmission in zebrafish hair cells.</a> The Journal of Neuroscience. 28 (9), 2110-2118 (2008).</li>
<li>Keen, E. C., Hudspeth, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transfer+characteristics+of+the+hair+cell%27s+afferent+synapse%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Transfer characteristics of the hair cell's afferent synapse.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 103 (14), 5537-5542 (2006).</li>
<li>Li, G., Keen, E., Andor-Ardó, D., Hudspeth, A. J., von Gersdorff, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+unitary+event+underlying+multiquantal+EPSCs+at+a+hair+cell%27s+ribbon+synapse%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The unitary event underlying multiquantal EPSCs at a hair cell's ribbon synapse.</a> The Journal of Neuroscience. 29 (23), 7558-7568 (2009).</li>
<li>Manley, G. A., Robertson, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+spontaneous+activity+of+auditory+neurons+in+the+spiral+ganglion+of+the+guinea-pig+cochlea%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Analysis of spontaneous activity of auditory neurons in the spiral ganglion of the guinea-pig cochlea.</a> The Journal of Physiology. 258 (2), 323-336 (1976).</li>
<li>Kiang, N. Y. S., Watanabe, T., Thomas, E., Clark, L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKiang%2C+NYS+%22Discharge+patterns+of+single+fibers+in+the+cat%27s+auditory+nerve%22">Discharge patterns of single fibers in the cat's auditory nerve</a>. , MIT Press. Cambridge MA. (1965).</li>
<li>Corey, D. P., Hudspeth, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ionic+basis+of+the+receptor+potential+in+a+vertebrate+hair+cell%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Ionic basis of the receptor potential in a vertebrate hair cell.</a> Nature. 281 (5733), 675-677 (1979).</li>
<li>Trapani, J. G., Nicolson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiological+recordings+from+zebrafish+lateral-line+hair+cells+and+afferent+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Physiological recordings from zebrafish lateral-line hair cells and afferent neurons.</a> Methods in Cell Biology. 100, 219-231 (2010).</li>
<li>Reinig, S., Driever, W., Arrenberg, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+descending+diencephalic+dopamine+system+is+tuned+to+sensory+stimuli%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">The descending diencephalic dopamine system is tuned to sensory stimuli.</a> Current Biology. 27 (3), 318-333 (2017).</li>
<li>Zhang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptically+silent+sensory+hair+cells+in+zebrafish+are+recruited+after+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Synaptically silent sensory hair cells in zebrafish are recruited after damage.</a> Nature Communications. 9 (1), 1388(2018).</li>
<li>Pichler, P., Lagnado, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+behavior+selectively+inhibits+hair+cells+activated+forward+motion+in+the+lateral+line+of+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">Motor behavior selectively inhibits hair cells activated forward motion in the lateral line of zebrafish.</a> Current Biology. 30 (1), 150-157 (2020).</li>
<li>Olszewski, J., Haehnel, M., Taguchi, M., Liao, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+larvae+exhibit+rheotaxis+and+can+escape+a+continuous+suction+source+using+their+lateral+line%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Zebrafish larvae exhibit rheotaxis and can escape a continuous suction source using their lateral line.</a> PloS One. 7 (5), 36661(2012).</li>
<li>Suli, A., Watson, G. M., Rubel, E. W., Raible, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rheotaxis+in+larval+zebrafish+is+mediated+by+lateral+line+mechanosensory+hair+cells%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Rheotaxis in larval zebrafish is mediated by lateral line mechanosensory hair cells.</a> PLoS One. 7 (2), 29727(2012).</li>
<li>Oteiza, P., Odstcil, I., Lauder, G., Portugues, R., Engert, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+mechanism+for+mechanosensory-based+rheotaxis+in+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A novel mechanism for mechanosensory-based rheotaxis in larval zebrafish.</a> Nature. 547 (7664), 445-448 (2017).</li>
<li>McHenry, M. J., Feitl, K. E., Strother, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Larval+zebrafish+rapidly+sense+the+water+flow+of+a+predator%27s+strike%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+Letters%22%5BJournal%5D)">Larval zebrafish rapidly sense the water flow of a predator's strike.</a> Biology Letters. 5 (4), 477-479 (2009).</li>
<li>Stewart, W. J., Cardenas, G. S., McHenry, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+larvae+evade+predators+by+sensing+water+flow%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Zebrafish larvae evade predators by sensing water flow.</a> The Journal of Experimental Biology. 216, Pt 3 388-398 (2013).</li>
<li>Mekdara, P. J., Schwalbe, M. A. B., Coughlin, L. L., Tytell, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+lateral+line+ablation+and+regeneration+in+schooling+giant+danios%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">The effects of lateral line ablation and regeneration in schooling giant danios.</a> The Journal of Experimental Biology. 221, Pt 8 175166(2018).</li>
<li>Palmer, L. M., Giuffrida, B. A., Mensinger, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+recordings+from+the+lateral+line+in+free-swimming+toadfish%2C+Opsanus+tau%5BTitle%5D)+AND+%22The+Biological+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Neural recordings from the lateral line in free-swimming toadfish, Opsanus tau.</a> The Biological Bulletin. 205 (2), 216-218 (2003).</li>
<li>Ayali, A., Gelman, S., Tytell, E. D., Cohen, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lateral+line+activity+during+undulatory+body+motions+suggests+a+feedback+link+in+closed-loop+control+of+sea+lamprey+swimming%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Zoology%22%5BJournal%5D)">Lateral line activity during undulatory body motions suggests a feedback link in closed-loop control of sea lamprey swimming.</a> Canadian Journal of Zoology. 87 (8), 671-683 (2009).</li>
<li>Mensinger, A. F., Van Wert, J. C., Rogers, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lateral+line+sensitivity+in+free-swimming+toad+fish+Opsanus+tau%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Lateral line sensitivity in free-swimming toad fish Opsanus tau.</a> The Journal of Experimental Biology. 222, Pt 2 190587(2019).</li>
<li>Montgomery, J., Bodznick, D., Halstead, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hindbrain+signal+processing+in+the+lateral+line+system+of+the+dwarf+scorpionfish+Scopeana+papillosus%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Hindbrain signal processing in the lateral line system of the dwarf scorpionfish Scopeana papillosus.</a> The Journal of Experimental Biology. 199, Pt 4 893-899 (1996).</li>
<li>Montgomery, J. C., Bodznick, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+adaptive+filter+that+cancels+self-induced+noise+in+the+electrosensory+and+lateral+line+mechanosensory+systems+of+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">An adaptive filter that cancels self-induced noise in the electrosensory and lateral line mechanosensory systems of fish.</a> Neuroscience Letters. 174 (2), 145-148 (1994).</li>
<li>Palmer, L. M., Deffenbaugh, M., Mensinger, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitivity+of+the+anterior+lateral+line+to+natural+stimuli+in+the+oyster+toadfish%2C+Opsanus+tau+%28Linnaeus%29%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Sensitivity of the anterior lateral line to natural stimuli in the oyster toadfish, Opsanus tau (Linnaeus).</a> The Journal of Experimental Biology. 208, Pt 18 3441-3450 (2005).</li>
<li>Russell, I. J., Roberts, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+spontaneous+lateral-line+activity+of+efferent+nerve+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Inhibition of spontaneous lateral-line activity of efferent nerve stimulation.</a> The Journal of Experimental Biology. 57, 77-82 (1972).</li>
<li>Lunsford, E. T., Skandalis, D. A., Liao, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efferent+modulation+of+spontaneous+lateral+line+activity+during+and+after+zebrafish+motor+commands%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Efferent modulation of spontaneous lateral line activity during and after zebrafish motor commands.</a> Journal of Neurophysiology. 122 (6), 2438-2448 (2019).</li>
<li>Russell, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pharmacology+of+efferent+synapses+in+the+lateral-line+system+of+Xenopus+laevis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">The pharmacology of efferent synapses in the lateral-line system of Xenopus laevis.</a> The Journal of Experimental Biology. 54 (3), 643-659 (1971).</li>
<li>Roberts, B. L., Russell, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+activity+of+lateral-line+efferent+neurons+in+stationary+and+swimming+dogfish%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">The activity of lateral-line efferent neurons in stationary and swimming dogfish.</a> The Journal of Experimental Biology. 57 (2), 435-448 (1972).</li>
<li>Flock, A., Russell, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+post-synaptic+action+of+efferent+fibres+in+the+lateral+line+organ+of+the+burbot+Lota+lota%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">The post-synaptic action of efferent fibres in the lateral line organ of the burbot Lota lota.</a> The Journal of Physiology. 235 (3), 591-605 (1973).</li>
<li>Montgomery, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noise+cancellation+in+the+electrosensory+system+of+the+thornback+ray%3B+common+mode+rejection+of+input+produced+by+the+animal%27s+own+ventilatory+movement%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Physiology%22%5BJournal%5D)">Noise cancellation in the electrosensory system of the thornback ray; common mode rejection of input produced by the animal's own ventilatory movement.</a> Journal of Comparative Physiology. 155, 103-111 (1984).</li>
<li>Tricas, T. C., Highstein, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Action+of+the+octavolateralis+efferent+system+upon+the+lateral+line+of+free-swimming+toadfish%2C+Opsanus+tau%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Physiology%22%5BJournal%5D)">Action of the octavolateralis efferent system upon the lateral line of free-swimming toadfish, Opsanus tau.</a> Journal of Comparative Physiology. 169 (1), 25-37 (1991).</li>
<li>Weeg, M. S., Land, B. R., Bass, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vocal+pathways+modulate+efferent+neurons+to+the+inner+ear+and+lateral+line%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Vocal pathways modulate efferent neurons to the inner ear and lateral line.</a> The Journal of Neuroscience. 25 (25), 5967-5974 (2005).</li>
<li>Elgoyhen, A. B., Johnson, D. S., Boulter, J., Vetter, D. E., Heinemann, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B19%3A+an+acetylcholine+receptor+with+novel+pharmacological+properties+expressed+in+rat+cochlear+hair+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">α9: an acetylcholine receptor with novel pharmacological properties expressed in rat cochlear hair cells.</a> Cell. 79 (4), 705-715 (1994).</li>
<li>Masino, M. A., Fetcho, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fictive+swimming+motor+patterns+in+wild+type+and+mutant+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Fictive swimming motor patterns in wild type and mutant larval zebrafish.</a> Journal of Neurophysiology. 93 (6), 3177-3188 (2005).</li>
<li>Hentschke, H. abfload. 1.4.0.0. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHentschke%2C+H+%22MATLAB+Central+File+Exchange%22">MATLAB Central File Exchange</a>. , (2020).</li>
<li>Harris, G. G., Milne, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Input-output+characteristics+of+the+lateral-line+sense+organs+of+Xenopus+laevis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+the+Acoustical+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Input-output characteristics of the lateral-line sense organs of Xenopus laevis.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 40 (1), 32-42 (1966).</li>
<li>Liao, J. C., Haehnel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiology+of+afferent+neurons+in+larval+zebrafish+provides+a+functional+framework+for+lateral+line+somatotopy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Physiology of afferent neurons in larval zebrafish provides a functional framework for lateral line somatotopy.</a> Journal of Neurophysiology. 107 (10), 2615-2623 (2012).</li>
<li>Song, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mathematical+modeling+and+analyses+of+interspike-intervals+of+spontaneous+activity+in+afferent+neurons+of+the+zebrafish+lateral+line%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Science+Reports%22%5BJournal%5D)">Mathematical modeling and analyses of interspike-intervals of spontaneous activity in afferent neurons of the zebrafish lateral line.</a> Nature Science Reports. 8, 14851(2018).</li>
<li>Liao, J. C., Fetcho, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shared+versus+specialized+glycinergic+spinal+interneurons+in+axial+motor+circuits+of+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Shared versus specialized glycinergic spinal interneurons in axial motor circuits of larval zebrafish.</a> The Journal of Neuroscience. 28 (48), 12982-12992 (2008).</li>
<li>von Holst, E., Mittelstaedt, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+principle+of+reafference%3A+interactions+between+the+central+nervous+system+and+the+peripheral+organs%5BTitle%5D)+AND+%22Die+Naturwissenschften%22%5BJournal%5D)">The principle of reafference: interactions between the central nervous system and the peripheral organs.</a> Die Naturwissenschften. 37, 463(1950).</li>
<li>Crapse, T. B., Sommer, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corollary+discharge+across+the+animal+kingdom%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Corollary discharge across the animal kingdom.</a> Nature Reviews. Neuroscience. 9 (8), 587-600 (2008).</li>
<li>Brichta, A. M., Goldberg, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Responses+to+efferent+activation+and+excitatory+response-intensity+relations+of+turtle+posterior-crista+afferents%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Responses to efferent activation and excitatory response-intensity relations of turtle posterior-crista afferents.</a> Journal of Neurophysiology. 83 (3), 1224-1242 (2000).</li>
</ol>

Yazarlar rakip finansal çıkarlar beyan etmemektedir.

Açıklanan deneysel protokol, sağlam ve neşeli bir omurgalıda motor davranışlar arasında duyusal girişteki endojen değişiklikleri izleme potansiyeli sağlar. Özellikle, larva zebra balıklarında yanal çizgi afferent nöronların ve ventral motor köklerinin eşzamanlı hücre dışı kayıtlarını gerçekleştirmeye yönelik in vivo bir yaklaşımı detaylandırıyor. Spontan afferent aktivite daha önce zebra balıklarında potansiyel eşzamanlı motoraktivitesi 1,2 ,39,<sup cl...

Mekanosensory sistemlerinin afferent nöronları işitme ve denge sırasında saç hücrelerinden beyne bilgi aktarır. Elektrofizyoloji, afferent nöronların hassasiyetini doğrudan kayıtlarla ortaya alabilir. Saç hücrelerinden tüm hücre yamalama zor olsa da, aşağı akış afferent nöronlardan kayıt yapmak daha kolaydır ve kontrollü stimülasyonlara yanıt olarak eylem potansiyellerinin değerlendirilmesine izin verir1,2,3. Saç hücrelerini uyarmak, mekanosensör yapıları değiştiren sapmalarına yol açar, böylece afferent nöronlarda eylem potansiyellerinde (sivri) bir artışı tetikler4,5,6. Dış uyaranların yokluğunda, afferent nöronlar da saç hücrelerinden7,8sonrası afferent post-sinaptik terminallere glutamat sızıntısı nedeniyle kendiliğinden yükselir ve duyarlılığın korunmasına katkıda bulunduğu gösterilmiştir9,10. Afferent aktivitenin yama kelepçesi kaydı, mikrofonikler 11 , 12 veya fonksiyonelkalsiyum görüntüleme13, 14,15 gibi daha düşük zamansal çözünürlüğe sahip teknikler kullanılarak mümkün olmayan saç hücresi hassasiyetinin ve sinyal dinamiklerinin gözlemlenmesine olanak tanır. Aşağıdaki protokol, saç hücresi duyarlılığındaki anlık değişiklikleri ortaya çıkarmak için motor komutlarla eşzamanlı afferent aktivitenin kaydedilmasına izin verecektir.
Zebra balığı (Danio rerio) vücutlarına göre su hareketini tespit etmek için yanal çizgi sistemini oluşturan nöromistiklerde bulunan saç hücrelerini kullanır, bu da navigasyon için gerekli sinir sinyallerine çevrilir16,17,18, avcı kaçınma, av yakalama19,20ve okul21. Su akışı ayrıca yüzme hareketleri ile kendi kendine üretilebilir22 , 23,24, solunum22,25,26ve besleme27. Bu davranışlar saç hücrelerini yorabilen ve algılamayı bozabilen tekrarlayan hareketlerden oluşur. Bu nedenle, yanal çizgi sisteminin dış (exafferent) ve kendi kendine oluşturulan (reafferent) akış uyaranları arasında ayrım yaptığı kritik öneme sahiptir. Bir corollary deşarjı, zebra balıklarında hareket sırasında kendi kendine oluşturulan akış sinyallerini hafifletir. Bu inhibitör tahmine dayalı motor sinyal, girişi değiştirmek veya reafferent geri bildirimin işlenmesini kesmek için azalan nöronlar aracılığıyla duyu reseptörlerine aktarılır28,29. Bu besleme sistemini erken anlamamıza katkıda bulunan ufuk açıcı çalışma, nöral devrenin bağlantı ve endojen aktivitesinin korunmadığı in vitro preparatlara dayanıyordu28, 30,31,32,33,34,35. Bu protokol, endojen geri bildirim dinamiklerinin korunduğu bozulmamış bir sinir devresini korumaya yönelik bir yaklaşımı açıklar, böylece corollary deşarj in vivo'nun daha iyi anlaşılmasını sağlar.
Burada özetlenen protokol, larva zebra balıklarında posterior lateral çizgi afferent nöron ve motor nöron aktivitesinin aynı anda nasıl izleneceğini açıklar. Motor komutlarından önce, sırasında ve sonrasında farklı sinyal dinamiklerini karakterize etmek, merkezi sinir sisteminden gelen ve hareket sırasında saç hücresi hassasiyetini modüle eden gerçek zamanlı, endojen geri bildirimler hakkında içgörüler sağlar. Bu protokol, deneylerden önce hangi malzemelerin hazırlanması gerektiğini özetler ve daha sonra zebra balığı larvalarının nasıl felç edileceğini ve hazırlanacağını açıklar. Protokol, afferent nöronların ve motor nöronların hücre dışı ventral kök (VR) kayıtlarının istikrarlı bir gevşek yama kaydının nasıl oluşturulacağını açıklayacaktır. Bu protokol kullanılarak elde edilebilen temsili veriler örnek bir bireyden sunulur ve deneysel protokolün birden fazla çoğaltması üzerinde analiz yapılır. Verilerin önceden işlenmesi MATLAB'da özel yazılı komut dosyaları kullanılarak gerçekleştirilir. Genel olarak, bu in vivo deneysel paradigma, model omurgalı saç hücresi sistemindeki hareket sırasında duyusal geri bildirimlerin daha iyi anlaşılmasını sağlamaya hazırdır.

<table><tbody><tr><td>100 mL beher</td><td>PYREX</td><td>1000</td><td>aşındırıcı</td></tr><tr><td>10x suya daldırma objektifi</td><td>için hazne Olympus</td><td>UMPLFLN10xW</td><td>larvaları konumlandırmak ve elektrot kaydetmek için düşük büyütme</td></tr><tr><td>40x suya daldırma objektifi</td><td>Olympus</td><td>,</td><td>konum elektrot ucu ve yama kelepçesi abfload oluşturmak için daha yüksek büyütme</td>LUMPLFLN40XW</tr><tr><td>.</td><td></td><td>Ek kodlama dosyası</td><td>Ham elektrofizyoloji kayıtlarını .mat dosyalarına dönüştürmek için özel yazılmış MATLAB komut dosyası</td></tr><tr><td>AffVR_preprocess.m</td><td></td><td>ek kodlama dosyası</td><td>Kayıt verilerinin ön işlenmesi için özel yazılmış MATLAB komut dosyası</td></tr><tr><td>BNC koaksiyel kablolar</td><td>ThorLabs</td><td>2249-C-12</td><td>amplifikatör ve sayısallaştırıcı kanallarını bağlama; filamentli 4</td></tr><tr><td>borosilikat cam kılcal damar</td> gerektirir <td>Warner Enstrümanlar</td><td>G150F-3</td><td>iç çap: 0.86, dış çap: 1.50; Kayıt elektrotları oluşturmak için kullanılan kılcal cam</td></tr><tr><td>burst_detect</td><td></td><td>ek kodlama dosyası</td><td>Özel yazılı MATLAB işlevi AffVR_preprocess.m bilgisayarı çalıştırmak için gereklidir</td></tr><tr><td></td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>herhangi bir bilgisayar çalışmalı</td></tr><tr><td>DC Güç Kaynağı</td><td>Tenma</td><td>72-420</td><td>elektriksel olarak aşındırma diseksiyon pimleri için kullanılır</td></tr><tr><td>elektrofizyoloji sayısallaştırıcı</td><td>Axon Instruments, Molecular Devices</td><td>Axon DigiData 1440A</td>, <td>yama kelepçesi veri filamentinin elde edilmesini sağlar</td></tr><tr><td></td><td>Sutter Instrument Company</td><td>FB255B</td><td>Mikropipet çektirmede kullanılan 2,5 mm kutu filament</td></tr><tr><td>ince forseps</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>Dumont #5 (0,05 x 0,02 mm) Ürün No. 11295-10</td><td>larvaları manipüle etmek ve sabit kademeli DIC pimleri yerleştirmek için kullanılır</td></tr><tr><td> mikroskop</td><td>Olympus</td><td>BX51WI</td><td>mikroskobu, yama-kelepçe kayıtlarını görselleştirmek ve oluşturmak için kullanılır</td></tr>, <tr><td>esnek, konik pipet ucu</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-707-169</td><td>esnek uçlar, uçta hücre dışı çözeltiyi dağıtmak için kayıt elektroduna yerleştirilmesini sağlar</td></tr><tr><td>FluoroDish</td><td>World Precision Instruments Inc.</td><td>FD3510-100</td><td>kapaklı cam tabanlı çanak kayıt kabı</td></tr><tr><td>KimWipe</td><td>KimTech</td><td>34155</td><td>larvalardaki fazla sıvıyı uzaklaştırmak için kullanılan görev mendili</td></tr><tr><td>Kwik-Gard</td><td>World Precision Instruments Inc.</td><td>710172</td><td>kendiliğinden karışan sylgard elastomer</td></tr><tr><td>MATLAB</td><td>MathWorks</td><td>R2020b</td><td>veri mikroelektrot amplifikatörü için komut satırı yazılımı</td></tr><tr><td></td><td>Axon Instruments, Molecular Devices</td><td>MultiClamp 700B</td><td>çift kanallı kayıtlar için yama kelepçesi amplifikatörü</td></tr><tr><td>microforge</td><td>Narishige</td><td>MF-830 microforge</td><td>kayıt elektrot</td></tr><tr><td>mikromanipülatörünü parlatmak için kontrol ünitesi</td><td>Siskiyou</td><td>MC1000-eR/T</td><td>Mikromanipülatörü kontrol etmek için 4 eksenli kadran koordinatörü</td></tr><tr><td>mikropipet çektirme</td><td>Sutter Instrument Company</td><td>Flaming/Brown Kılcal</td><td>camı kayıt elektrotlarına çekmek için</td>P-97</tr><tr><td>mikroskop kontrol ünitesi</td><td>Siskiyou</td><td>MC1000e</td><td>, mikroskobu sabit aşama ve hazırlık</td></tr><tr><td>motorlu mikromanipülatör</td> <td>etrafında konumlandırırSiskiyou</td><td>MX7600</td>, <td>yama-kelepçe kaydı için headstage ve bağlı kayıt elektrodunu konumlandırır</td></tr><tr><td>MultiClamp Commander</td><td>Molecular Devices</td><td>2.2.2</td>, <td>Axon MultiClamp 700B Commander indirme sayfasından indirilebilir</td></tr>, <tr><td>optik hava tablası</td>, <td>Newport Corporation, mikroskobu</td><td>yüzdürmek ve kayıtlar sırasında titreşimleri en aza indirmek için VH3036W-OPT breadboard izolasyon tablası</td><td></td></tr><tr><td>pCLAMP</td><td>Moleküler Cihazlar</td><td>10.7.0</td><td>Axon pCLAMP 10'dan indirilebilir Elektrofizyoloji Veri Toplama & Analiz Yazılımı İndirme sayfası</td></tr><tr><td>kalıcı mürekkep işaretleyici</td> Pipet <td>tutucuya yerleştirirken doğru yönlendirmeyi sağlamak için VR elektrodunun ön kenar tarafını işaretlemek için</td><td>amazon.com'dan</td><td>Sharpie</td> siparişi</tr><tr><td>Falcon</td><td></td><td>35-3001</td>, <td>larvaları paralitik pipet tutucuya daldırmak için kullanılır</td></tr><tr><td></td><td>Moleküler Cihazlar</td><td>1-HL-U</td><td>, kayıt elektrodunu tutar ve ana bölüme bağlanır.tage</td></tr><tr><td>pnömatik dönüştürücü</td><td>Fluke Biyomedikal Aletler</td><td>DPM1B</td><td>kayıt elektrodu iç basıncını kontrol etmek için</td></tr> potasyum <tr><td>hidroksit</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>221473-25G</td><td>aşındırma için dağ, diseksiyon pimleri,</td></tr><tr><td>silikon boru</td><td>Tygon</td><td>14-169-1A</td><td>boru, pnömatik dönüştürücüyü pipet tutucuya bağlamak için</td></tr><tr><td>spike_detect</td><td></td><td>ek kodlama dosyası</td><td>AffVR_preprocess.m stereomikroskobu çalıştırmak için gerekli özel yazılı MATLAB fonksiyonu</td></tr><tr><td></td><td>Carl Zeiss</td><td>Stemi 2000-C</td>, <td>pim uçlarını görselleştirmek için kullanılır ve larvaların hazırlanması sırasında</td></tr><tr><td>düz kenarlı tıraş bıçağı</td><td>Canopus</td><td>siparişi amazon.com</td>, <td>diseksiyon pimleri</td></tr><tr><td>swimbout_detect</td><td></td><td>ek kodlama dosyası</td> <td>yaparken tungsten telini keserAffVR_preprocess.m şırıngayı çalıştırmak için gerekli özel yazılı MATLAB işlevi</td></tr><tr><td></td><td>Becton Dickinson Compoany 309602</td><td></td><td>kayıt elektrotlarına enjekte etmek için hücre dışı çözelti ile doldurulmuş</td></tr><tr><td>transfer pipeti Sigma-Aldrich</td><td></td><td>Z135003-500EA</td><td>larvaları aktarmak için tek kullanımlık, steril olmayan pipet</td></tr><tr><td>trika metansülfonat</td><td>Syndel</td><td>12854</td><td>Larvaları yüksek dozda ötenazi yapmak için kullanılan farmasötik aneasthetic.</td></tr><tr><td>tungsten tel</td><td>Dünya Hassas Aletler A.Ş.</td><td>715500</td><td>0,002 inç, 50,8 & m çapı; diseksiyon pimleri yapmak için kullanılır</td></tr><tr><td>vakum filtrasyon ünitesi</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>SCGVU11RE</td><td>tek kullanımlık, steril, vakum filtrasyon üniteleri hücre dışı çözeltiyi sterilize etmek için kullanılır elektrofizyoloji elektrot zil</td></tr> sesi <tr><td>için kullanılır voltaj-kelepçe akım-kelepçe headstage</td><td>Moleküler Cihazlar</td><td>CV-7B</td>, <td>sol ve sağ headstage olarak kullanılan MultiClamp 700B amplifikatör ile birlikte verilir</td></tr> ve <tr><td>alfa;-bungarotoksin</td><td>Kayıttan</td><td>önce larvaları hareketsiz hale getirmek için</td> ThermoFisher <td>B1601</td></tr></tbody></table>

zebra balıklarında yüzme sırasında posterior lateral line afferent neurons'un aktivitesi

Activity of Posterior Lateral Line Afferent Neurons during Swimming in Zebrafish

Duyusal sistemler davranışları yönlendirmek için gerekli ipuçlarını toplar, ancak hayvanlar hangi bilgilerin biyolojik olarak ilgili olduğunu deşifre etmelidir. Locomotion, hayvanların çevredeki çevrenin ilgili duyusal ipuçlarından ayrılmaları gereken farklı ipuçları üretir. Örneğin, bir balık yüzdüğünde, vücut dalgalanmalarından oluşan akış, yanal çizgi sistemini oluşturan saç hücrelerinden oluşan mekanoresptif nöromstlar tarafından tespit edilir. Saç hücreleri daha sonra duyusal afferent nöronlar aracılığıyla sensörden beyne sıvı hareket bilgilerini iletir. Eş zamanlı olarak, sensörlü aşırı yüklemeyi önlemek için motor komutunun corollary deşarjı saç hücrelerine aktarılır. Bu nedenle, yanal hat sisteminin hassasiyetini değerlendirirken, locomotion sırasında tahmine dayalı motor sinyallerinin inhibitör etkisinin muhasebesi kritik öneme sahiptir. Zebra balığı larvalarında (döllenme sonrası 4-7 gün) posterior lateral çizgi afferent nöron ve ventral motor kök aktivitesini aynı anda izlemek için birkaç saat sürebilen in vivo elektrofizyolojik bir yaklaşım geliştirdik. Afferent nöronların hücre dışı kayıtları, tek veya birden fazla nörondan aktiviteyi algılayabilen gevşek yama kelepçe tekniği kullanılarak elde edilir. Motor nöron aktivitesini tespit etmek için cam elektrotlarla deriden ventral kök kayıtları yapılır. Deneysel protokolümüz, sağlam ve neşeli bir omurgalıda motor davranışlarda duyusal girişteki endojen veya çağrıştırılan değişiklikleri izleme potansiyeli sağlar.

Zebra balığı larvaları düzgün bir şekilde hareketsiz hale getirildikten ve arka lateral çizgi afferent ganglion ve VR kaydı elde edildikten sonra, hem afferent hem de motor nöronlardaki aktivite aynı anda ölçülebilir. Kayıt kanalları, kayıtsız ve VR etkinliğinin sürekli izlenmesi için boşluksuz kayıt protokolleri (adım 1.4) kullanılarak görüntülenir. Gerçek zamanlı olarak, spontan afferent ani artış oranındaki düşüşler, fiktif yüzme nöbetlerinin göstergesi olan VR aktivitesi ile eş zamanlı olarak gözlenebilir (<strong cl...

Model omurgalı saç hücresi sisteminde motor komutlar sırasında afferent nöron aktiviteslerindeki değişiklikleri izlemek için bir protokol açıklıyoruz.

Zebra Balıklarında Yüzme Sırasında Posterior Lateral Line Afferent Neurons'un Aktivitesi

Sensory systems gather cues essential for directing behavior, but animals must decipher what information is biologically relevant. Locomotion generates ...

Bu protokol, araştırmacının tek duyusal nöronların bozulmamış bir omurda kontrollü bir stimülasyona aktivitesini ve tepkisini izlemesini sağlar. Bu yama elektrofizyolojisi, bireysel nöronların artan aktivitesinden gerçek zamanlı olarak kayıt yapmanın hızlı ve doğrudan bir yoludur. Ve bu, çoğu optik görüntüleme tekniğinden daha düşük maliyetle daha iyi zaman çözünürlüğü ve hassasiyet sağlar.Yanal çizgi saç hücreleri insan iç kulağınınkine homologdur. Yani bu teknik, insan sağırlığı ve işitme bozuklukları için geçerli olan saç hücresi devrelerinin özelliklerini ortaya çıkarmak için hazırlanmıştır. Elektrofizyoloji, görülmesi ve fiziksel olarak taklit edilmesi gereken ince motor becerileri kullanan bir zanaattır.Metin yalnızca talimatlar yanlış yorumlama için çok fazla yer bırakır. Başlamak için, silikon elastomer alt kayıt kabı yapmak için Sylgard gibi kendi kendini karıştıran silikon elastomer ince bir tabaka bir kapak cam tabanlı doku kültürü çanak içine dağıtın. Diseksiyon pimleri yapmak için, bir DC güç kaynağı kullanarak 100 mililitrelik bir Etchant kabına beş volt negatif şarj sağlayın ve pozitif yüklü çıkışa bir tungsten teli takın.Ucu keskin bir noktaya daralıp gidene kadar telin ucunu tekrar tekrar Etchant banyosuna batırın. Stereo mikroskop altında, düz kenarlı bir jiletle teli ucundan yaklaşık bir milimetre kesin. Bunu üç kez tekrarlayın, ardından ince forseps kullanarak kürlenmiş kayıt kabına pimler yerleştirin.Kayıt elektrotları hazırlamak için, kutu filamentli bir mikropipette puller kullanarak borosilikat cam kılcal tüpleri çekin. Elektrot, arka lateral çizgiden afferent nöronları kaydetmek için kullanılacak bir konik ile 30 mikrometre çapında bir uluğa sahip olmalıdır. Ek bir borosilikat cam kılcal boru, daha küçük bir ila beş mikrometre uç çapına sahip bir çift elektrot içine çekin.Her elinde bir elektrot tutarak, uçları kırmak için uçları yavaşça birbirine doğru çalıştırın. Bir mikroforge kullanarak, eğimli ucu pürüzsüz olana kadar parlatın. Son uç çapı 30 ila 50 mikrometre arasında olmalıdır.Zebra balığı larvalarını hareketsiz hale getirmek ve pipet aktarmak için büyük bir uç kullanarak 35 milimetrelik bir petri kabına aktarın. Çevredeki çözeltinin mümkün olduğunca çoğunu çıkarın. Larvaları yaklaşık beş dakika boyunca% 0.1 alfa-Bungarotoxin'in 10 mikrolitresinde daldırin.Felçli larvaları hücre dışı çözelti ile 10 dakika yıkayın. Daha sonra, larvayı hücre dışı çözelti banyosundan silikon tabanlı kayıt kabına taşımak için bir transfer pipet kullanın. Stereo mikroskop altında, larvaları ince uçlu ön uçlarla bu silikon paspasın merkezinin üzerine, yanal tarafı vücudun ön ve arka uçları sola sağa doğru çalışırken hafifçe yerleştirin.İnce uçlu tokalar kullanarak, kenar pimini, larvaların dorsal notochord'u aracılığıyla silikona doğrudan anüse ortogonal olarak yerleştirin. İkinci pimi kuyruğun ucuna yakın notochord'dan yerleştirin ve üçüncü pimi gaz mesanesinin notochord dorsalına yerleştirin. Pim kapsüle takarken hafif bir dönüş sağlarken dördüncü pimi otik veziklikten takın.Hafif bir dönüş uygulandığında, afferent somata kümesini ortaya çıkarmak için klatrorum ve otik vezikül arasındaki dokuyu izleyin. Pim larvalarını DIC mikroskopunun sabit bir aşamasına 10 kat hedefin altına yerleştirin ve sol baş evre vektörüne paralel olarak kas bloklarının miyoseptal yarıklarını yönlendirin. Zemin telini banyo çözeltisine yerleştirin ve sol baş aşamasına bağlı olduğundan emin olun.VR kayıt elektrodunu esnek bir jel yükleme pipet ucu kullanarak 30 mikrolitre hücre dışı çözelti ile doldurun ve sol baş sahne pipet tutucusuna yerleştirin. Büyütmeyi 40 kata çıkarın ve bir pnömatik dönüştürücü tarafından üretilen pozitif basıncı uygularken kayıt pipetini bulaşık çözeltisine küçümseyin. Yarık VR elektrot ucu diyaframında ortalanana kadar elektrot ucunu iki miyomer ventral arasındaki bir mioseptum üzerinden yanal çizgiye getirin Uç diyaframının gecikme kenarı epitelle hafifçe temas edene kadar pipeti kütüğe diriltin.İlk temastan sonra, öndeki kenarın temas etmesini ve bir conta oluşturabilmesini sağlamak için pipeti çapraz olarak manevra yap. Pnömatik dönüştürücü ile negatif basınç uygulayın ve tutun. Yama kelepçe yazılımında, VR sinyalini izlemek için araç çubuğundaki Oynat düğmesine tıklayın.Wells stereotipli patlama sinyali dinamikleri ile motor nöron aktivitesi gözlendikten sonra VR kaydının sağlandığından emin olun. Farklı kayıt elektrotunun içini 30 mikrolitre hücre dışı çözelti ile doldurun ve sağ baş sahne pipet tutucusuna yerleştirin. Daha sonra pnömatik dönüştürücü tarafından üretilen pozitif basıncı uygularken bulaşık çözeltisine küçümser.Elektrot'u bulun ve elektrot ucunu numunenin üzerine getirin. Bir mikromanipülatör kullanarak, afferent elektrot ucunu klatronun üzerinde pozisyon tutana kadar küçümseyin. Büyütmeyi 40 kat daldırma için artırın ve arka lateral çizgi siniri ve klatromunun kesişimini bulun.Elektrot ucunu afferent ganglionun üzerine getirin ve uç epitelle temas edene kadar pipetleri küçümseyin. Yavaşça, elektrot manevrası yaparak tüm uç çevresinin afferent ganglionla temas ettiğini belirtin. Pnömatik dönüştürücü ile negatif basınç uygulayın ve tutun.Yama kelepçe yazılımında Oynat'a tıkladıktan sonra, ani artışlar kabaca her 100 ila 200 milisaniyede bir meydana geldiğinde, afferent nöronların tüm hücre gevşek yama kaydının elde edildiğinden emin olun. Afferent nöron ve motor nöron aktivitesi tespit edildikten sonra, her iki kanalda da eşzamanlı boşluksuz kayıtları yakalamak için tepe kelepçesi 10'daki araç çubuğundaki Kaydet düğmesine tıklayın. Metin taslağında açıklandığı gibi veri ön işleme gerçekleştirin.Bu boşluksuz kayıt protokolü kullanılarak, afferent ve VR nöronlarının gerçek zamanlı etkinliği aynı anda ölçülebilir. Özel yazılı, ön işleme komut dosyaları, eşik, minimum süre ve minimum ara aralık gibi parametreleri kullanarak ani algılamanın görselleştirilmesine yardımcı olacak çizimler oluşturur. İzole sinyaller, ön işleme komut dosyasındaki alt ve üst sınır algılama değişkenleri ayarlanarak elde edildi.Ventral kökler başak algılama ek girişler ile özdeş parametreleri izler. Bir motor komutundaki patlamalar, en az beş milisaniye süren 0,1 milisaniye içindeki en az iki ani artışla tanımlanır ve 200 milisaniyeden daha az patlama aralıklarıyla en az üç patlama ile tanımlanır Ön işleme komut dosyaları, iyi tanımlanmış bir ilgi süresine girilen farklı etkinliğin bölümlerini kaplar. Bu durumda, ortalama spontan aktivite, X ekseninde sıfıra eşit zaman olarak gösterilen motor aktivitenin başlangıcına yanıt olarak çarpıcı değişiklikler gösterir.Yüzme öncesi ani artış oranları ile hem yüzme hem de yüzme sonrası dönemlerin ani artış oranları arasında belirgin ani artış oranlarında anlamlı farklılıklar saptandı. Afferent ani artış oranları yüzme süresi ile negatif korelasyona uğramıştır. Göreceli yükselme hızı ve yüzme sıklığı arasında korelasyon saptanmamıştır.Bu prosedürü denerken hayvan sağlığı en önemli şeydir. Sadece hayvan refahını sağlamak için değil, aynı zamanda sinirsel kayıt başarısının olasılığını artırmak için hızlı kan akışını izlemek çok önemlidir. Zebra balığında bulunan genetik araçlardan yararlanarak, bu elektrofizyoloji protokolü, saç hücresi sistemlerinde ve ötesinde anatomik ve fonksiyonel devre bağlantısını güçlü bir şekilde araştırmak için transgenik çizgiler tarafından tamamlanabilir.Yama kelepçe tekniğinin bu basitleştirilmiş modifikasyonu, duyusal sistemlerin in vivo olarak nasıl çalıştığını izlememizi sağlar.

activity-posterior-lateral-line-afferent-neurons-during-swimming

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Bu videoda zebra balıklarında reotaksi testi anlatılmaktadır. Yöntem, farklı manyetik alanların etkisi altında farklı su akış hızlarına tepki olarak zebra balıklarının oryantasyon davranışının ölçülmesini içerir.

Zebra Balığı Reotaksi Deneyi: Farklı Su Akış Hızlarına Yanıt Olarak Oryantasyon Davranışını Ölçmek İçin Bir Yöntem

Bu videoda, genetik olarak modifiye edilmiş somatosensoriyel nöronları aktive ederek ve ortaya çıkan davranışsal yanıtı yüksek hızlı bir video kamera ile kaydederek optogenetik teknikler açıklanmaktadır.

Zebra Balığı Optogenetiği: Larva Davranışsal Tepkilerini İncelemek için Genetik Olarak Değiştirilmiş Somatosensoriyel Nöronun Aktive Edilmesi

Bu video, felçli bir zebra balığı larvasındaki afferent nöronlardan gelen elektrik sinyallerinin, lateral hat ganglionunun yakınına bir mikropipet yerleştirerek ve sinyal yakalama için gevşek bir conta oluşturarak kaydedilmesini göstermektedir. Hücre dışı çözelti, bu işlem sırasında nöronal canlılığı korur.

İmmobilize Bir Zebra Balığı Larvasında Afferent Nöronlardan Gelen Elektrik Sinyallerinin İzlenmesi

Nörolojik ve non-nörolojik hastalıkların çok zebra balığı model yetişkin balık ziyade embriyo / larva incelenir için, erişkin zebrabalıkları hastalık modellerinde uygulanabilen bir nicel yan hat rejeneratif deneyi geliştirilmiştir. Deney 1) neuromast ve 2) tek tek saç hücre düzeyde çözünürlüğü dahil.

Yetişkin Zebra balığı Lateral Hat Rejenerasyon için bir Deneyi

Zebra balığı, kas fonksiyonlarını ve hastalıklarını incelemek için mükemmel bir modeldir. Erken embriyogenez sırasında zebra balığı düzenli kas kasılmalarına başlar ve ritmik yüzme davranışı üretir ve bu da kas bozulduğunda değişir. Burada, yüzme performansını kas fonksiyonunun bir ölçüsü olarak incelemek için dokunma ile uyarılmış bir tepki ve hareket testini açıklıyoruz.

Dokunmatik uyarılmış Yanıt ve Hareket Deneyleri kullanarak Zebra balığı kas Performans ve fonksiyonunu değerlendirmek için

Bu yazıda zebra balığı embriyolarının ve larva spinal nöronların elektrofizyolojik kayıtları için yöntemleri tarif eder. Hazırlık yerinde nöronları korur ve genellikle asgari diseksiyonu kapsar. Bu yöntemler, erken larva aşamalarında ilk elektrik uyarılma alımından spinal nöronların çeşitli elektrofizyolojik çalışmaları için izin verir.

Zebra balığı<em&gt; Situ</em&gt; Omurilik Omurilik duyusal ve motor nöronlar gelen Elektrofizyolojik Recordings Hazırlık

Zebra balığı optik netlik, hızlı harici diller, dahil olmak üzere birçok değerli özellikleri ve işitme ve denge için belirli önemini, dışarıdan duyu saç hücreleri bulunan bir modeli sistemidir. Bu makalede nasıl transgenik zebra balığı özetlenmektedir saç hücreli mechanosensation ve presynaptic fonksiyonu toto tahlil için kullanılabilir.

Larva zebra balığı sonradan içini kaplamak saç hücrelerinin vivo kalsiyum görüntüleme

Lazer ablasyon biyolojik sistemlerde rejenerasyon eğitimi için yaygın olarak uygulanan bir teknolojidir. Sunulan protokol, lazer ablasyon için standart bir lazer tarama konfokal mikroskobu ve zebrabalığı lateral hattında ki internöromast hücrelerinin yenilenmesinin daha sonra zaman atlamalı görüntülemesini açıklar.

Zebrabalığı İnternöromast Hücrelerinde Konfokal Mikroskop Tabanlı Lazer Ablasyon ve Rejenerasyon Tonu

Omurilik yaralanmasından sonra fonksiyonel iyileşme yeteneğine sahip olan yetişkin zebra balığı, doğuştan gelen nöral rejenerasyon mekanizmalarını aydınlatmak için önde gelen bir model sistemidir. Burada, yüzme dayanıklılığını ve yüzme davranışı testlerini omurilik rejenerasyonunun fonksiyonel okumaları olarak tanımlıyoruz.

Yetişkin Zebra Balıklarında Yüzme Dayanıklılığı ve Yüzme Davranışının Değerlendirilmesi

Burada, yetişkin zebra balıklarının dorsal ön beyninde iki fotonlu kalsiyum görüntüleme yapmak için bir protokol sunuyoruz.

Davranan Yetişkin Zebra Balıklarında Ön Beyin Aktivitesinin İki Fotonlu Kalsiyum Görüntülemesi

Zebra balığı larva nöromüsküler kavşağı, sinaptik fizyolojiyi incelemek için çekici bir modeldir. Elektrofizyoloji ve optik görüntüleme dahil olmak üzere birçok deneysel tekniğe uygundur. Burada, dik bir epifloresan mikroskobu altında pHluorin bazlı bir prob kullanarak sinaptik iletimi görüntülemek için bir protokol açıklıyoruz.

Diseke Larva Zebra Balığının Nöromüsküler Kavşağında Sinaptik Vezikül Geri Dönüşümünün Canlı Görüntülenmesi

Öğrenin, zebrafish larvalarında patch elektrofizyolojisi kullanarak motor komutları sırasında afferent nöron aktivitesini nasıl kaydedeceğinizi. Bu yöntem, insan işitme bozukluklarına uygulanabilir saç hücresi devrelerini anlamak için değerli bilgiler sunar.

Zebra Balıklarında Yüzme Sırasında Posterior Lateral Line Afferent Neurons'un Aktivitesi

Daha fazla video keşfet